BD BBL CHROMagar Salmonella

Ο ΗΓΙΕΣ ΧΡΗΣΗΣ ΕΤΟΙΜΑ ΠΡΟΣ ΧΡΗΣΗ ΥΛΙΚΑ ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΑΣ ΣΕ ΠΛΑΚΕΣ Αναθ.: April 2013 BD BBL CHROMagar Salmonella ίπλωμα ευρεσιτεχνίας ΗΠΑ # 5,098,832, 5,194,374 ΧΡΗΣΗ ΓΙΑ ΤΗΝ ΟΠΟΙΑ ΠΡΟΟΡΙΖΕΤΑΙ Το BBL CHROMagar Salmonella είναι ένα εκλεκτικό και διαφορικό υλικό για την απομόνωση και τη συμπερασματική ταυτοποίηση των ειδών Salmonella από κλινικά δείγματα κοπράνων. Το BBL CHROMagar Salmonella έχει εγκριθεί από το AOAC Research Institute στο πλαίσιο του προγράμματος Performance Tested Methods μόνο για την ανάλυση ωμού βοδινού κρέατος, ωμού κοτόπουλου, ωμού ψαριού, μαρουλιού και αυγών. Για τη συγκριτική δοκιμή της μεθόδου επιλέχτηκαν οι μέθοδοι ISO (International Organization for Standardization), USDA FSIS (United States Department of Agriculture, Food Safety & Inspection Service) και FDA BAM (Food & Drug Administration, Bacteriological Analytical Manual), και βρέθηκε ότι το 1-3 BBL CHROMagar Salmonella έχει ισοδύναμη απόδοση με τα υλικά καλλιέργειας σε πλάκες που συνιστώνται της μεθόδους ISO, FDA και USDA. ΑΡΧΕΣ ΚΑΙ ΑΝΑΛΥΣΗ ΤΗΣ ΙΑ ΙΚΑΣΙΑΣ Μικροβιολογική μέθοδος. Η Salmonella είναι ευρέως διαδεδομένη στα ζώα, και κατά κανόνα απομονώνεται από την πεπτική οδό των ζώων και των ανθρώπων. Είναι της από της κυριότερους οργανισμούς που συνδέονται με τροφικές νόσους, οι οποίες συνήθως οφείλονται σε τροφές ζωικής προέλευσης. 4 Οι νόσοι που οφείλονται στη Salmonella συνδέονται κατά κύριο λόγο με τροφές της τα πουλερικά, το βοδινό κρέας, τη σοκολάτα, τα γαλακτοκομικά και τα κηπευτικά προϊόντα.5 Το BBL CHROMagar Salmonella έχει σχεδιαστεί για την απομόνωση και την ταυτοποίηση των ειδών της Salmonella. Η προσθήκη χρωμογόνων υποστρωμάτων στο υλικό διευκολύνει το διαχωρισμό των διαφόρων ειδών της Salmonella από την υπόλοιπη χλωρίδα. Το BBL CHROMagar Salmonella δημιουργήθηκε αρχικά από τον A. Rambach, CHROMagar, Παρίσι, Γαλλία. Κατόπιν συμφωνητικού δικαιοχρησίας, η BD βελτιστοποίησε το προϊόν κάνοντας χρήση των πνευματικών δικαιωμάτων ιδιοκτησίας του έτοιμου της χρήση υλικού σε πλάκες BBL CHROMagar Salmonella, και χρησιμοποιώντας τον τύπο αφυδατωμένου μέσου καλλιέργειας του Difco CHROMagar Salmonella. Στο BBL CHROMagar Salmonella, τα θρεπτικά στοιχεία παρέχουν ειδικά επιλεγμένες πεπτόνες. Λόγω της επιλεκτικότητας του υλικού, παρατηρείται κατά κανόνα αναστολή των θετικών κατά Gram οργανισμών.. Η προσθήκη αντιμυκητιασικού παράγοντα εμποδίζει την ανάπτυξη ειδών του Candida, ενώ άλλοι αντιμικροβιακοί παράγοντες χρησιμοποιούνται για την αναστολή της ανάπτυξης αρνητικών κατά Gram ζυμωτικών βακτηρίων χωρίς γλυκόζη, καθώς και ειδών του Πρωτέα, τα οποία θα μπορούσαν δυνητικά να αναπτυχθούν υπερβολικά σε βάρος των αποικιών της Salmonella. Στο υλικό περιλαμβάνεται χρωμογόνο μείγμα. Εξαιτίας διαφορών στο μεταβολισμό των επιλεγμένων χρωμογόνων, οι αποικίες των ειδών της Salmonella είναι χρώματος λιλά (από ροζ έως μοβ), ενώ τα ανεπιθύμητα βακτήρια είτε αναστέλλονται είτε σχηματίζουν αποικίες χρώματος μπλε-πράσινου ή άχρωμες. *ΤΑ ΕΙΓΜΑΤΑ ΤΟΥ ΣΥΓΚΕΚΡΙΜΕΝΟΥ ΜΟΝΤΕΛΟΥ ΚΙΤ ΟΚΙΜΗΣ ΤΟΥ ΠΡΟΜΗΘΕΥΤΗ ΥΠΕΒΛΗΘΗΣΑΝ ΣΕ ΑΝΕΞΑΡΤΗΤΟ ΕΛΕΓΧΟ ΤΗΣ ΤΟ ΕΡΕΥΝΗΤΙΚΟ ΚΕΝΤΡΟ AOAC ΚΑΙ ΒΡΕΘΗΚΑΝ ΤΗΣ ΙΚΑΝΟΠΟΙΟΥΝ ΤΗΣ ΠΡΟ ΙΑΓΡΑΦΕΣ ΠΟΥ ΗΛΩΝΟΝΤΑΙ ΤΗΣ ΤΟΝ ΚΑΤΑΣΚΕΥΑΣΤΗ ΣΤΟ ΕΝΗΜΕΡΩΤΙΚΟ ΦΥΛΛΑ ΙΟ ΤΟΥ ΚΙΤ ΟΚΙΜΗΣ. Ο ΚΑΤΑΣΚΕΥΑΣΤΗΣ ΒΕΒΑΙΩΝΕΙ ΤΗΣ ΤΟ ΣΥΓΚΕΚΡΙΜΕΝΟ ΚΙΤ ΙΚΑΝΟΠΟΙΕΙ ΠΛΗΡΩΣ ΤΗΣ ΠΡΟ ΙΑΓΡΑΦΕΣ ΠΟΥ ΑΞΙΟΛΟΓΗΣΕ ΑΡΧΙΚΑ ΤΟ AOAC RESEARCH INSTITUTE ΚΑΙ ΟΙ ΟΠΟΙΕΣ ΑΝΑΦΕΡΟΝΤΑΙ ΛΕΠΤΟΜΕΡΩΣ ΣΤΟ ΠΙΣΤΟΠΟΙΗΤΙΚΟ ΥΠ ΑΡΙΘΜΟΝ 020502 ME ΤΙΤΛΟ Performance Tested Methods SM. 1

ΑΝΤΙ ΡΑΣΤΗΡΙΑ Σύνθεση* ανά λίτρο καθαρού νερού Χρωμοπεπτόνη 22,0 g Χρωμογόνο Μείγμα 0,34 g Ανασταλτικοί παράγοντες 0,02 g Άγαρ 15,0 g ph 7.7 ± 0,3 *Ρυθμισμένη ή/και συμπληρωμένη έτσι ώστε να πληρούνται τα κριτήρια επίδοσης. ΠΡΟΦΥΛΑΞΕΙΣ. Προορίζεται αποκλειστικά για επαγγελματική χρήση. Εάν παρατηρήσετε υπερβολική υγρασία, αναποδογυρίστε την πλάκα και αφήστε να τη στεγνώσει ο αέρας προκειμένου να αποτραπεί τυχόν σχηματισμός στεγανοποίησης μεταξύ του άνω και του κάτω τμήματος της πλάκας κατά τη διάρκεια της επώασης. Κατά τη διάρκεια του στεγνώματος, αποφεύγετε το φως. Βλέπε ΦΥΛΑΞΗ ΚΑΙ ΙΑΡΚΕΙΑ ΖΩΗΣ. Προκειμένου ο χρήστης να εξοικειωθεί με της αναμενόμενες χρωμογενείς αντιδράσεις της Salmonella, συνιστάται ο ενοφθαλμισμός αντιπροσωπευτικών στελεχών τα οποία απαντώνται συχνά στο εργαστήριο στο οποίο εργάζεται ο χρήστης. Προτείνονται τα ακόλουθα στελέχη: Salmonella ser. Typhimurium, ATCC 14028; Salmonella ser. Dublin, ATCC 15480; Salmonella ser. Typhi, ATCC 19430; και Salmonella enterica subsp. Arizonae, ATCC 12323. Στα κλινικά δείγματα ενδέχεται να εμφανίζονται παθογόνοι μικροοργανισμοί, περιλαμβανομένων των ιών της ηπατίτιδας και του ιού της ανθρώπινης ανοσοανεπάρκειας (HIV). Στο χειρισμό όλων των αντικειμένων που είναι μολυσμένα με αίμα και άλλα σωματικά υγρά θα πρέπει να ακολουθούνται οι Τυπικές προφυλάξεις 6-9 και οι κατευθυντήριες οδηγίες των ιδρυμάτων. Συμβουλευτείτε το έγγραφο ΓΕΝΙΚΕΣ Ο ΗΓΙΕΣ ΧΡΗΣΗΣ σχετικά με της ασηπτικές διαδικασίες χειρισμού, της βιολογικούς κινδύνους και την απόρριψη του χρησιμοποιημένου προϊόντος. ΦΥΛΑΞΗ ΚΑΙ ΙΑΡΚΕΙΑ ΖΩΗΣ Κατά την παραλαβή, φυλάσσετε τα τρυβλία στο σκοτάδι στους 2 έως 8 C, στην αρχική συσκευασία τους έως τη στιγμή της χρήσης τους. Αποφεύγετε την κατάψυξη και την υπερβολική θέρμανση. Τα τρυβλία είναι δυνατό να ενοφθαλμιστούν έως την ημερομηνία λήξης (δείτε την ετικέτα της συσκευασίας) και να επωαστούν στους συνιστώμενους χρόνους επώασης. Είναι δυνατό να χρησιμοποιηθούν τρυβλία από ανοιγμένες στοίβες 5 ή 10 τρυβλίων επί μία εβδομάδα, εφόσον φυλάσσονται σε καθαρό χώρο στους 2 έως 8 C. Αλλοίωση των προϊόντων Μη χρησιμοποιείτε της πλάκες που εμφανίζουν ενδείξεις μικροβιακής μόλυνσης, αποχρωματισμό, ξηρότητα, ρωγμές ή άλλα σημάδια αλλοίωσης. ΠΟΙΟΤΙΚΟΣ ΕΛΕΓΧΟΣ ΤΗΣ ΤΟ ΧΡΗΣΤΗ Εξετάστε της πλάκες για τυχόν ενδείξεις αλλοίωσης, ακολουθώντας της οδηγίες της ενότητας Αλλοίωση προϊόντος. Ελέγξτε της επιδόσεις ενοφθαλμίζοντας ένα αντιπροσωπευτικό δείγμα πλακών με καθαρές καλλιέργειες σταθερών μικροοργανισμών-μάρτυρες που προκαλούν γνωστές και επιθυμητές αντιδράσεις. Συνιστώνται τα ακόλουθα στελέχη ελέγχου: Στελέχη Salmonella Typhimurium ATCC 14028 Salmonella Enteritidis ATCC 13076 Citrobacter freundii ATCC 8090 Escherichia coli ATCC 25922 Klebsiella pneumoniae ATCC 33495 Proteus mirabilis ATCC 43071 Αποτελέσματα ανάπτυξης Μέτρια έως έντονη ανάπτυξη αποικιών χρώματος ανοιχτού λιλά έως λιλά (ροζ έως μοβ) Ανάπτυξη αποικιών χρώματος λιλά (ροζ έως μοβ) Μέτρια έως έντονη ανάπτυξη αποικιών χρώματος ανοιχτού μπλε-πράσινου έως μπλε-πράσινου Μερική έως πλήρης αναστολή. Άχρωμες αποικίες Μερική αναστολή. Αποικίες χρώματος μπλεπράσινου Μερική έως πλήρης αναστολή

Enterococcus faecalis ATCC 29212 Staphylococcus aureus ATCC 25923 Εμφάνιση μη ενοφθαλμισμένου υλικού καλλιέργειας: Μερική έως πλήρης αναστολή. Αποικίες μικρές, χρώματος μπλε-πράσινου Αναστολή (μερική έως πλήρης) Άχρωμο έως ανοικτό μπεζ, διάφανο Σημείωση: Πρέπει να τηρούνται οι απαιτήσεις ποιοτικού ελέγχου σύμφωνα με της ισχύοντες τοπικούς, πολιτειακούς ή/και ομοσπονδιακούς κανονισμούς ή της απαιτήσεις πιστοποίησης και της πρότυπες διαδικασίες ποιοτικού ελέγχου του εργαστηρίου της. ΙΑ ΙΚΑΣΙΑ Παρεχόμενα υλικά BBL CHROMagar Salmonella (πλάκες Stacker των 90 mm). Μικροβιολογικά ελεγμένες. Απαιτούμενα αλλά μη παρεχόμενα υλικά Βοηθητικά μέσα καλλιέργειας, αντιδραστήρια, οργανισμοί ποιοτικού ελέγχου και της εργαστηριακός εξοπλισμός που ίσως απαιτείται για τη συγκεκριμένη εργαστηριακή διαδικασία, της αυτή των ISO 7218, USDA FSIS MLG, FDA BAM, ή για την εργαστηριακή διαδικασία που της επιθυμείτε. Συλλογή δείγματος Για λεπτομέρειες σχετικά με της διαδικασίες συλλογής και χειρισμού των δειγμάτων, ανατρέξτε στα σχετικά κείμενα. 1,7-5 Τύποι δειγμάτων Το συγκεκριμένο υλικό μπορεί να χρησιμοποιηθεί σε κλινικά δείγματα κοπράνων καθώς και σε ποικιλία δειγμάτων τροφίμων (ωμό βοδινό κρέας, ωμό κοτόπουλο, ωμό ψάρι, μαρούλι και αυγά). ιαδικασία δοκιμής Εφαρμόστε ασηπτικές τεχνικές. Η επιφάνεια του άγαρ θα πρέπει να είναι λεία και υγρή, αλλά να μην παρουσιάζει υπερβολική υγρασία. Αφήστε το υλικό καλλιέργειας να θερμανθεί σε θερμοκρασία δωματίου πριν από τον ενοφθαλμισμό. Για κλινικά δείγματα: Αμέσως μετά την παραλαβή στο εργαστήριο, ενοφθαλμίστε το δείγμα σε πλάκα του BBL CHROMagar Salmonella και επιστρώστε γραμμωτά για απομόνωση. Εάν καλλιεργείτε υλικό απευθείας από επίχρισμα, κυλήστε απαλά το στυλεό μέχρι το άκρο μιας μικρής επιφάνειας, και στη συνέχεια επιστρώστε γραμμωτά από αυτή την περιοχή με τη χρήση κρίκου. Ο ενοφθαλμισμός των πρόσθετων υλικών για την απομόνωση της Salmonella και τον εντοπισμό άλλων παθογόνων του εντέρου μπορεί να είναι υποχρεωτικός, αναλόγως των κατά τόπους διαδικασιών. Σε αερόβιες συνθήκες, επωάστε της πλάκες αντεστραμμένες (το άγαρ της τα επάνω) της 35 ± 2 C, επί 24 h. Εάν μετά της 24 h το αποτέλεσμα είναι αρνητικό, επαναλάβετε την επώαση για ακόμη 24 h και καταγράψτε τα τελικά αποτελέσματα. Όταν οι αποικίες χρωματιστούν, επιτρέπεται η έκθεση του BBL CHROMagar Salmonella στο φως. Οι κλασικού τύπου αποικίες της Salmonella πρέπει να υπόκεινται σε βιοχημικούς και ορολογικούς ελέγχους επιβεβαίωσης. Το BBL CHROMagar Salmonella μπορεί της να χρησιμοποιηθεί για ανακαλλιέργεια από υλικά προεμπλουτισμού, της ζωμό Selenite ή ζωμό Tetrathionate. Για δείγματα τροφίμων: Ακολουθείστε τη μέθοδο παρασκευής δειγμάτων που περιγράφεται στο Microbiology Laboratory Guidebook της USDA FSIS: Isolation and Identification of Salmonella from Meat, Poultry, and Egg Products (Απομόνωση και ταυτοποίηση της Salmonella από το κρέας, τα πουλερικά, τα αυγά και τα προϊόντα της), στο κεφάλαιο του FDA BAM σχετικά με τη Salmonella,της οδηγίες του ISO ή της οδηγίες που αφορούν στον τύπο δειγμάτων και τη γεωγραφική τοποθεσία της συγκεκριμένης διαδικασίας. Ενοφθαλμίστε το επωασμένο δείγμα ζωμού εμπλουτισμού σε μία πλάκα του BBL CHROMagar Salmonella. Επιστρώστε γραμμικά για απομόνωση, επωάστε σε αερόβιες συνθήκες της πλάκες αντεστραμμένες (το άγαρ της τα επάνω) της 35 ± 2 C, επί 24 h. Εάν μετά της 24 h το αποτέλεσμα είναι αρνητικό, επαναλάβετε την επώαση για ακόμη 24 h και καταγράψτε τα τελικά αποτελέσματα. Οι κλασικού τύπου αποικίες της Salmonella οι οποίες αναπτύσσονται στο BBL CHROMagar Salmonella πρέπει να

υπόκεινται σε ελέγχους επιβεβαίωσης ανάλογους με της που περιγράφονται της διαδικασίες των ISO, USDA FSIS και FDA BAM. 1-3 Αποτελέσματα Μετά την κατάλληλη επώαση, παρατηρείστε της πλάκες σε άσπρο φόντο. Η Salmonella Typhimurium και άλλα είδη της Salmonella θα έχουν τη μορφή αποικιών χρώματος ανοιχτού λιλά έως λιλά, εξαιρουμένων των υποειδών arizonae της Salmonella enterica, καθώς και άλλων ειδών της Salmonella τα οποία είναι θετικά στη λακτόζη και τη β-γλυκοζιδάση. Αυτά τα απομονωμένα στελέχη θα έχουν τη μορφή αποικιών χρώματος μπλε-βιολετί ή μοβ. Τα Citrobacter και τα άλλα κολοβακτηριοειδή θα έχουν τη μορφή αποικιών χρώματος ανοιχτού μπλε-πράσινου έως μπλε-πράσινου. Κάποιοι οργανισμοί οι οποίοι δεν υδρολύουν καμία από της χρωμογόνες χημικές ενώσεις ενδέχεται να έχουν τη μορφή άχρωμων αποικιών. ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΤΙΚΑ ΣΧΕΤΙΚΑ ΜΕ ΤΗΣ ΕΠΙ ΟΣΕΙΣ ΚΑΙ ΠΕΡΙΟΡΙΣΜΟΙ ΤΗΣ ΙΑ ΙΚΑΣΙΑΣ Το BBL CHROMagar Salmonella είναι ένα επιλεκτικό και διαφορικό υλικό για την απομόνωση και το θεωρητικό διαχωρισμό των ειδών της Salmonella από κλινικά δείγματα κοπράνων και δειγμάτων τροφίμων. Αναμενόμενα αποτελέσματα Σε αυτό το υλικό, τα είδη της Salmonella θα έχουν τη μορφή αποικιών χρώματος ανοιχτού λιλά έως λιλά (= ροζ έως μοβ),εξαιρουμένων των ειδών της Salmonella τα οποία είναι θετικά στη λακτόζη και τη β-γλυκοζιδάση. Τα απομονωμένα στελέχη αυτών των τελευταίων ειδών θα έχουν τη μορφή αποικιών χρώματος μπλε-βιολετί ή μοβ. Κατά τη διάρκεια εσωτερικών και εξωτερικών ελέγχων που έγιναν σε κλινικά και βιομηχανικά δείγματα, με το BBL CHROMagar Salmonella απομονώθηκαν οι ακόλουθοι οργανισμοί: Salmonella 8, (20):-:26 Salmonella ser. Javiana Salmonella enterica subsp. arizonae Salmonella ser. Johannesburg Salmonella enterica subsp. diarizonae Salmonella ser. Kentucky Salmonella ser. Abony Salmonella ser. London Salmonella ser. Adelaide Salmonella ser. Mbandaka Salmonella ser. Agona Salmonella ser. Michigan Salmonella ser. Anatum Salmonella ser. Minnesota Salmonella ser. Bareilly Salmonella ser. Montevideo Salmonella ser. Berta Salmonella ser. Muenster Salmonella ser. Brandenburg Salmonella ser. Newport Salmonella ser. California Salmonella ser. Oranienburg Salmonella ser. Cerro Salmonella ser. Panama Salmonella ser. Choleraesuis Salmonella ser. Paratyphi A Salmonella ser. Cubana Salmonella ser. Paratyphi B Salmonella ser. Derby Salmonella ser. Pomona Salmonella ser. DT 104 Salmonella ser. Poona Salmonella ser. Dublin Salmonella ser. Potsdam Salmonella ser. Enteritidis Salmonella ser. Pullorum Salmonella ser. Essen Salmonella ser. Rubislaw Salmonella ser. Gallinarum Salmonella ser. Schwarzengrund Salmonella ser. Gaminara Salmonella ser. Senftenberg Salmonella ser. Hadar Salmonella ser. St. Paul Salmonella ser. Hartford Salmonella ser. Thompson Salmonella ser. Heidelberg Salmonella ser. Typhi Salmonella ser. Illinois Salmonella ser. Typhimurium Salmonella ser. Infantis Salmonella ser. Typhimurium (θετικό στη λακτόζη) Salmonella ser. Iverness Salmonella ser. Weltevreden Χαρακτηριστικά σχετικά με της επιδόσεις 10

Κλινικές δοκιμές: Το BBL CHROMagar Salmonella δοκιμάστηκε σε μεγάλο διαγνωστικό εργαστήριο. Συνολικά υποβλήθηκαν σε δοκιμή με το BBL CHROMagar Salmonella 150 γνωστά αρνητικά δείγματα κοπράνων και 110 γνωστά θετικά δείγματα κοπράνων, και τα αποτελέσματα συγκρίθηκαν με της επιδόσεις των υλικών XLD και Hektoen Enteric. Τα ποσοστά ευαισθησίας και εξειδίκευσης του BBL CHROMagar Salmonella έπειτα από 18-24 h επώασης ήταν 76 % και 99 % αντίστοιχα, ενώ μετά από 48 h επώασης ήταν 90 % και 94 % αντίστοιχα. Τα ποσοστά ευαισθησίας και εξειδίκευσης αυξήθηκαν σε 99 % και 97 % αντίστοιχα μετά από ανακαλλιέργεια από ζωμό Selenite F. Τα συγκριτικά αποτελέσματα ευαισθησίας και εξειδίκευσης για το υλικό XLD ήταν 71 % και 97 % μετά από 18-24 h επώασης και 78 % και 95 % μετά από 48 h επώασης. Τα αποτελέσματα ευαισθησίας και εξειδίκευσης για το υλικό Hektoen Enteric ήταν 71 % και 94 % μετά από 18-24 h επώασης και 79 % και 93 % μετά της 48 h επώασης. Έλεγχος γεωργικών τροφίμων: Οι μέθοδοι των USDA και FDA To BBL CHROMagar Salmonella έχει αξιολογηθεί τόσο σε εσωτερικά όσο και σε εξωτερικά εργαστήρια εγκεκριμένα από το AOAC, ώστε να βρεθεί ο βαθμός ανάκτησης της Salmonella στο ωμό κοτόπουλο, στο ωμό βοδινό κρέας, στο μαρούλι και στα αυγά. Το ωμό κοτόπουλο και το ωμό βοδινό κρέας υποβλήθηκαν σε επεξεργασίες οι οποίες είναι σύμφωνες της της μεθόδους αναφοράς της USDA FSIS. Το ωμό ψάρι, το μαρούλι και τα αυγά υποβλήθηκαν σε επεξεργασίες οι οποίες είναι σύμφωνες της της διαδικασίες της FDA BAM. Πραγματοποιήθηκε σύγκριση του BBL CHROMagar Salmonella με τα υλικά της μεθόδου αναφοράς για την επιλεκτική ανάκτηση της Salmonella. Συνολικά προέκυψαν 16 θετικές καλλιέργειες στο δείγμα ωμού κοτόπουλου, 17 στο ωμό βοδινό κρέας, 18 στο ωμό ψάρι και το μαρούλι και 11 στα αυγά. Τα αποτελέσματα του BBL CHROMagar Salmonella ήταν συγκρίσιμα με της μεθόδους αναφοράς για της της μήτρες, με ποσοστό συμφωνίας της μεθόδου κατά 100 %. Ελέγχθηκαν είκοσι ενοφθαλμισμένα δείγματα ωμού κοτόπουλου σύμφωνα με τη μέθοδο αναφοράς της USDA FSIS. Το κοτόπουλο ενοφθαλμίστηκε με υλικό χαμηλής συγκέντρωσης, ήτοι 8 CFU/25 g και με υλικό υψηλής συγκέντρωσης, ήτοι 50 CFU/25 g δείγματος. Το BBL CHROMagar Salmonella ανέκτησε το 100 % (20/20) της Salmonella τόσο με τη χαμηλή όσο και με την υψηλή συγκέντρωσης ενοφθαλμίσματος. Σε επίπεδα υλικού ενοφθαλμισμού χαμηλότερα του 1 CFU/25 g, σημειώθηκε κλασματική ανάκτηση. Φυσικώς μολυσμένο κοτόπουλο υποβλήθηκε σε δοκιμή. Το ποσοστό ανάκτησης της Salmonella ήταν 100 % και ο πλέον πιθανός αριθμός ήταν ο 0,23. Εκατόν δέκα οχτώ (118) απομονωμένα στελέχη της Salmonella των οποίων η προέλευση συνδέεται με τη διατροφή, περιλαμβανομένων διαφόρων οροτύπων, καλλιεργήθηκαν σε ζωμό λακτόζης επί 24 h, και στη συνέχεια ανακαλλιεργήθηκαν σε ζωμό Tetrathionate επί 24 h. Οι ζωμοί Tetrathionate ανακαλλιεργήθηκαν στο BBL CHROMagar Salmonella και επωάστηκαν στους 35 C. Εάν εντός 24 ωρών δεν γινόταν ανάκτηση των αποικιών χρώματος λιλά, οι πλάκες επωάζονταν για επιπλέον 24 h. Το BBL CHROMagar Salmonella ανέκτησε 111 απομονωμένα στελέχη. Τέσσερα στελέχη αναστάλθηκαν από το ζωμό Tetrathionate και δεν ανακτήθηκαν ούτε στο BBL CHROMagar Salmonella ούτε σε κάποια μη επιλεκτική πλάκα μάρτυρας. Άλλα απομονωμένα στελέχη ιδίων οροτύπων με αυτά των τεσσάρων αρνητικών σχημάτισαν αποικίες κλασικού τύπου, γεγονός που σημαίνει ότι η απουσία θετικής αντίδρασης σχετίζεται με την εξειδίκευση στο στέλεχος και όχι στον ορότυπο. Το συνολικό ποσοστό ευαισθησίας του BBL CHROMagar Salmonella ήταν 94 % (111 από τα 118 απομονωμένα στελέχη). Εξήντα πέντε (65) απομονωμένα στελέχη χωρίς Salmonella καλλιεργήθηκαν επί 24 h σε ζωμό εγκεφάλου και καρδιάς στους 35 C, και στη συνέχεια ανακαλλιεργήθηκαν στο BBL CHROMagar Salmonella στους 35 C, πάλι επί 24 h. Οι αρνητικές πλάκες επωάστηκαν επί 48 h συνολικά. Εξήντα ένα (61) από τα 65 απομονωμένα στοιχεία δεν εμφάνισαν λιλά απόχρωση στο BBL CHROMagar Salmonella, με ποσοστό εξειδίκευσης 94 %. Τα τέσσερα στελέχη χωρίς Salmonella τα οποία εμφάνισαν λιλά απόχρωση ενοφθαλμίστηκαν σε ζωμό

Tetrathionate (προτεινόμενος ζωμός εμπλουτισμού για της μεθόδους των USDA και FDA). Μετά από 24ωρη επώαση, οι ζωμοί Tetrathionate ανακαλλιεργήθηκαν στο BBL CHROMagar Salmonella. Μετά από 48ωρη επώαση, το ένα στέλεχος σχημάτισε αποικίες χρώματος λιλά, ενώ τα τρία στελέχη αναστάλθηκαν. Με τον εμπλουτισμό με ζωμό Tetrathionate, το συνολικό ποσοστό εξειδίκευσης του BBL CHROMagar Salmonella στη συγκεκριμένη μελέτη ήταν 98 %. Μέθοδος ISO Πραγματοποιήθηκε σύγκριση του BBL CHROMagar Salmonella με τα υλικά των μεθόδων αναφοράς για την επιλεκτική ανάκτηση της Salmonella στο ωμό κοτόπουλο, στο ωμό βοδινό κρέας, στο ωμό ψάρι, στο μαρούλι και στα αυγά. Της οι μήτρες υποβλήθηκαν σε επεξεργασίες σύμφωνες της τη μέθοδο καλλιέργειας του ISO. Συνολικά προέκυψαν 16 θετικές καλλιέργειες στο δείγμα ωμού κοτόπουλου, 17 στο ωμό βοδινό κρέας, 9 στο ωμό ψάρι και 19 στο μαρούλι και τα αυγά. Τα αποτελέσματα του BBL CHROMagar Salmonella ήταν συγκρίσιμα με αυτά των μεθόδων αναφοράς για της της μήτρες, με ποσοστό συμφωνίας κατά 100 %. Είκοσι (20) δείγματα ωμού βοδινού κρέατος, ωμού ψαριού, μαρουλιού και αυγών ενοφθαλμίστηκαν με χαμηλή ποσότητα Salmonella και αναλύθηκαν σύμφωνα με τη διαδικασία καλλιέργειας του ISO. Είκοσι (20) δείγματα φυσικώς μολυσμένου ωμού κοτόπουλου αναλύθηκαν σύμφωνα με τη διαδικασία καλλιέργειας του ISO. Σε όλους της ελέγχους των μήτρων τροφίμων, το BBL CHROMagar Salmonella πέτυχε την ένταξή του στη σειρά των υλικών αναφοράς.the method agreement of BBL CHROMagar Salmonella and the other reference media tested was 100 %. Το ποσοστό συμφωνίας του BBL CHROMagar Salmonella της τα άλλα υλικά αναφοράς που δοκιμάστηκαν ήταν 100 %. Τα χαμηλά ποσοστά ενοφθαλμισμού ποίκιλαν από 0,0036 έως 0,23 MPN/g. Εκατόν είκοσι εφτά (127) απομονωμένα στελέχη της Salmonella των οποίων η προέλευση συνδέεται με τη διατροφή καλλιεργήθηκαν σε υδάτινο ρυθμιστικό διάλυμα πεπτόνης επί 18 h και, στη συνέχεια, ανακαλλιεργήθηκαν στο υλικό Rappaport-Vassiliades Soyapepton (RVS) επί 24 h. Οι ζωμοί RVS ανακαλλιεργήθηκαν στο BBL CHROMagar Salmonella και επωάστηκαν στους 35 C επί 24 h. Εάν εντός 24 ωρών δεν γινόταν ανάκτηση αποικιών χρώματος λιλά, οι πλάκες επωάζονταν για επιπλέον 24 h. Το BBL CHROMagar Salmonella ανέκτησε 123 απομονωμένα στελέχη. Η ανάκτηση των τεσσάρων στελεχών που δεν αναπτύχθηκαν στο BBL CHROMagar Salmonella δεν πραγματοποιήθηκε επαρκώς με τα μη επιλεκτικά υλικά-μάρτυρες. Το συνολικό ποσοστό ευαισθησίας του BBL CHROMagar Salmonella ήταν 96,8 % (123 από τα 127 απομονωμένα στελέχη). Περιορισμοί της διαδικασίας Ενδέχεται περιστασιακά τα στελέχη των ειδών Aeromonas hydrophila, Hafnia alvei, Pseudomonas aeruginosa, P. putida, Stenotrophomonas maltophilia, Acinobacter ή των ειδών του Candida να μην ανασταλούν πλήρως και οι αποικίες να εμφανίσουν απόχρωση ανοιχτή λιλά έως λιλά. Της δοκιμές επιβεβαίωσης όπου χρησιμοποιείται το λιλά ή το μοβ ως δείκτης της χρωματικής αντίδρασης, ενδέχεται να παρουσιάζονται δυσκολίες στην ερμηνεία των αποτελεσμάτων εξαιτίας του πραγματικού χρώματος των αποικιών. Τα σπάνια στελέχη των εξής οργανισμών: S. Typhi, S. Paratyphi A, S. Typhimurium, S. Choleraesuis, S. Minnesota, S. enterica subsp. Arizonae, και S. Pullorum ενδέχεται είτε να μην αναπτυχθούν στο συγκεκριμένο υλικό είτε να αναπτυχθούν ανεπαρκώς. Αυτό εξαρτάται από το στέλεχος, ενώ η πλειοψηφία των στελεχών των παραπάνω οροποικιλιών τα οποία εξετάστηκαν ανακτήθηκαν. Το BBL CHROMagar Salmonella δεν σχεδιάστηκε για την απομόνωση άλλων παθογόνων του εντέρου πέραν της Salmonella.

Κατά τη διάρκεια ελέγχου κάποιων δειγμάτων, ενδέχεται να εμφανιστεί μοβ αποχρωματισμός του υλικού χωρίς της ανιχνεύσιμη ανάπτυξη αποικιών. Αυτό θα πρέπει να θεωρείται ως αρνητικό αποτέλεσμα. Ελαχιστοποιήστε την έκθεση του BBL CHROMagar Salmonella στο φως τόσο πριν όσο και κατά τη διάρκεια της επώασης, καθώς το φως ενδέχεται να καταστρέψει τα χρωμογόνα. ιατηρείτε της πλάκες στην αρχική της συσκευασία καθ όλη τη διάρκεια της φύλαξης. Η επώαση σε CO 2 δεν συνιστάται. ΒΙΒΛΙΟΓΡΑΦΙΑ 1. Rose, Bonnie E. 2001. Isolation and identification of Salmonella from meat, poultry and egg products. In: Microbiology laboratory guidebook, 3 rd ed., Food Safety and Inspection Service, U.S. Department of Agriculture, Washington, D.C. 2. U.S. Food and Drug Administration. 2003. Bacteriological analytical manual (online), AOAC International, Gaithersburg, MD. 3. International Organization for Standards (ISO). Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the detection of Salmonella spp., 4 th Edition, ISO 6579:2002. 4. Bopp, Brenner, Fields, Wells and Strockbine. 2003. Escherichia, Shigella, and Salmonella. In Murray, Baron, Jorgensen, Pfaller, and Yolken (ed.), Manual of clinical microbiology, 8 th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 5. D Aoust, Mauer and Bailey. 2001. Salmonella species. In: Doyle, Beuchat and Montville (ed.), Food microbiology: fundamentals and frontiers, 2 nd ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 6. National Committee for Clinical Laboratory Standards. 2001. Approved Guideline M29-A2. Protection of laboratory workers from occupationally acquired infections, 2 nd ed. NCCLS, Wayne, Pa. 7. Garner, J.S. 1996. Hospital Infection Control Practices Advisory Committee, U.S. Department of Health and Human Services, Centers for Disease Control and Prevention. Guideline for isolation precautions in hospitals. Infect. Control Hospital Epidemiol. 17:53-80. 8. U.S. Department of Health and Human Services. 1999. Biosafety in microbiological and biomedical laboratories, HHS Publication (CDC), 4 th ed. U.S. Government Printing Office, Washington, D.C. 9. Directive 2000/54/EC of the European Parliament and of the Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work (seventh individual directive within the meaning of Article 16(1) of Directive 89/391/EEC). Official Journal L262, 17/10/2000, p. 0021-0045. 10. Αρχειοθετημένα στοιχεία, BD Diagnostic Systems. ΣΥΣΚΕΥΑΣΙΑ/ ΙΑΘΕΣΙΜΟΤΗΤΑ BBL CHROMagar Salmonella REF 254104 Έτοιμα προς χρήση υλικά καλλιέργειας σε πλάκες, 20 πλάκες ΣΥΜΠΛΗΡΩΜΑΤΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ Για περισσότερες πληροφορίες, παρακαλούμε επικοινωνήστε με τον τοπικό αντιπρόσωπο της BD. Becton Dickinson GmbH Tullastrasse 8 12 D-69126 Heidelberg/Germany Phone: +49-62 21-30 50 Fax: +49-62 21-30 52 16 Reception_Germany@europe.bd.com http://www.bd.com http://www.bd.com/europe/regulatory/ AOAC is a trademark and Performance Tested is a service mark of AOAC International. CHROMagar is a trademark of Dr. A. Rambach. Difco is a trademark of Difco Laboratories, subsidiary of Becton, Dickinson and Company. ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection BD, BD Logo and all other trademarks are property of Becton, Dickinson and Company. 2013 BD