ΠΑΝΔΛΛΑΓΗΚΔ ΔΞΔΣΑΔΗ Γ ΣΑΞΖ ΖΜΔΡΖΗΟΤ ΚΑΗ Γ ΣΑΞΖ ΔΠΔΡΗΝΟΤ ΓΔΝΗΚΟΤ ΛΤΚΔΗΟΤ ΠΑΡΑΚΔΤΖ 24 ΜΑΪΟΤ 2013 - ΔΞΔΣΑΕΟΜΔΝΟ ΜΑΘΖΜΑ: ΒΗΟΛΟΓΗΑ ΘΔΣΗΚΖ ΚΑΣΔΤΘΤΝΖ ΘΔΜΑ Α Α1: γ Α2: β Α3: α Α4: δ Α5: α ΘΔΜΑ B Β1. Η γνληδηαθή ζεξαπεία εθαξµόζηεθε γηα πξώηε θνξά ην Σεπηέµβξην ηνπ 1990 ζε έλα ηεηξάρξνλν θνξίηζη πνπ έπαζρε από αλεπάξθεηα ηνπ αλνζνπνηεηηθνύ ζπζηήµαηνο. Η αζζέλεηα απηή νθείιεηαη ζηελ έιιεηςε ηνπ ελδύµνπ απαµηλάζε ηεο αδελνζίλεο (ADA), πνπ παίξλεη µέξνο ζηνλ µεηαβνιηζµό ησλ πνπξηλώλ ζηα θύηηαξα ηνπ µπεινύ ησλ νζηώλ. Η έιιεηςε νθείιεηαη ζε µεηάιιαμε ηνπ γνληδίνπ πνπ παξάγεη ην έλδπµν απηό. Η αζζέλεηα εµθαλίδεη απηνζσµηθό ππνιεηπόµελν ηύπν θιεξνλνµηθόηεηαο. Η δηαδηθαζία πνπ αθνινπζείηαη ζηε γνληδηαθή ζεξαπεία ηεο παξαπάλσ αζζέλεηαο είλαη ε εμήο: Λεµθνθύηηαξα ηνπ παηδηνύ παξαιαµβάλνληαη θαη πνιιαπιαζηάδνληαη ζε θπηηαξνθαιιηέξγεηεο. Τν θπζηνινγηθό γνλίδην ηεο απαµηλάζεο ηεο αδελνζίλεο ελζσµαηώλεηαη ζε έλαλ ηό-θνξέα (ν νπνίνο έρεη θαηαζηεί αβιαβήο) µε ηηο ηερληθέο ηνπ αλαζπδπαζµέλνπ DNA. Ο γελεηηθά ηξνπνπνηεµέλνο ηόο εηζάγεηαη ζηα ιεµθνθύηηαξα. Τα γελεηηθά ηξνπνπνηεµέλα ιεµθνθύηηαξα εηζάγνληαη µε ελδνθιέβηα έλεζε ζην παηδί θαη παξάγνπλ ην έλδπµν ADA Βέβαηα ηα ηξνπνπνηεµέλα ιεµθνθύηηαξα δε δνπλ γηα πάληα µέζα ζηνλ νξγαληζµό - δειαδή ε ζεξαπεία δελ είλαη µόληµε- θαη ρξεηάδεηαη ζπλερήο έγρπζε ηέηνησλ θπηηάξσλ. Όµσο, όπσο ζηελ πεξίπησζε ησλ δηαβεηηθώλ, ηα άηνµα µπνξνύλ λα δνπλ θπζηνινγηθά, θάλνληαο ζε θαλνληθά ρξνληθά δηαζηήµαηα απηή ηε ζεξαπεία. 1
Ο ηύπνο απηόο ηεο γνληδηαθήο ζεξαπείαο νλνµάδεηαη ex vivo, γηαηί ηα θύηηαξα ηξνπνπνηνύληαη έμσ από ηνλ νξγαληζµό θαη εηζάγνληαη πάιη ζ' απηόλ. Β2. Υπάξρνπλ αξθεηέο µέζνδνη, νη νπνίεο µπνξνύλ λα ρξεζηµνπνηεζνύλ γηα ηελ είζνδν ηνπ «μέλνπ» DNA ζηα θύηηαξα ελόο δώνπ. Η ζεµαληηθόηεξε από απηέο είλαη ε µηθξνέγρπζε. Σηε µέζνδν απηή ρξεζηµνπνηνύληαη σάξηα ηνπ δώνπ πνπ έρνπλ γνληµνπνηεζεί ζην εξγαζηήξην. Σε απηά γίλεηαη εηζαγσγή ηνπ μέλνπ DNA µε εηδηθή µηθξνβειόλα. Τν μέλν γελεηηθό πιηθό ελζσµαηώλεηαη ζπλήζσο ζε θάπνην από ηα ρξσµνζώµαηα ηνπ ππξήλα ηνπ δπγσηνύ. Τν δπγσηό ηνπνζεηείηαη ζηε ζπλέρεηα ζηε µήηξα ηεο «ζεηήο» µεηέξαο, ελόο δώνπ ζην νπνίν ζα αλαπηπρζεί ην έµβξπν. Η µηθξνέγρπζε απνηειεί ηε µνλαδηθή µέζνδν δεµηνπξγίαο δηαγνληδηαθώλ αγειάδσλ, πξνβάησλ, ρνίξσλ θαη αηγώλ. Β3. Τα µηηνρόλδξηα θαη νη ρισξνπιάζηεο έρνπλ DNA. Τν γελεηηθό πιηθό ησλ µηηνρνλδξίσλ πεξηέρεη πιεξνθνξίεο ζρεηηθέο µε ηε ιεηηνπξγία ηνπο, δειαδή ζρεηηθά µε ηελ νμεηδσηηθή θσζθνξπιίσζε, θαη θσδηθνπνηεί µηθξό αξηζµό πξσηετλώλ. Οη πεξηζζόηεξεο όµσο πξσηεΐλεο, πνπ είλαη απαξαίηεηεο γηα ηε ιεηηνπξγία ησλ µηηνρνλδξίσλ, θσδηθνπνηνύληαη από γνλίδηα πνπ βξίζθνληαη ζην DNA ηνπ ππξήλα. Τν γεγνλόο απηό δείρλεη όηη ηα νξγαλίδηα απηά δελ είλαη αλεμάξηεηα από ηνλ ππξήλα ηνπ θπηηάξνπ θαη γηα ην ιόγν απηό ραξαθηεξίδνληαη σο εµηαπηόλνµα. Β4. Ο γελεηηθόο θώδηθαο ραξαθηεξίδεηαη σο εθθπιηζµέλνο. Με εμαίξεζε δύν αµηλνμέα (µεζεηνλίλε θαη ηξππηνθάλε) ηα ππόινηπα 18 θσδηθνπνηνύληαη από δύν µέρξη θαη έμη δηαθνξεηηθά θσδηθόληα. Τα θσδηθόληα πνπ θσδηθνπνηνύλ ην ίδην αµηλνμύ νλνµάδνληαη ζπλώλπµα. 2
ΘΔΜΑ Γ Γ1. Ιδηόηεηα µέγεζνο θηεξώλ Έζησ: Κ: επηθξαηέο αιιειόµνξθν γνλίδην, ππεύζπλν γηα ην θαλνληθό µέγεζνο θηεξώλ θ: ππνιεηπόµελν αιιειόµνξθν γνλίδην, ππεύζπλν γηα ην αηξνθηθό µέγεζνο θηεξώλ Φαηλνηππηθή αλαινγία ζειπθώλ απνγόλσλ: 3 µε θπζηνινγηθά θηεξά : 1 µε αηξνθηθά θηεξά Φαηλνηππηθή αλαινγία αξζεληθώλ απνγόλσλ: 3 µε θπζηνινγηθά θηεξά : 1 µε αηξνθηθά θηεξά Δθόζνλ πξνθύπηνπλ απόγνλνη µε αηξνθηθά θηεξά θαη γνλόηππν θθ δηαπηζηώλνπµε όηη θιεξνλόµεζαλ από έλα θ ππνιεηπόµελν αιιειόµνξθν γνλίδην από ηνπο γνλείο ηνπο. Δπίζεο από ηε θαηλνηππηθή αλαινγία ησλ απνγόλσλ (3:1), δηαπηζηώλνπµε όηη θαη ηα δύν άηνµα ηεο παηξηθήο γεληάο ζα είλαη εηεξόδπγα. ειαδή ζα έρνπλ γνλόηππν Κθ θαη θαηλόηππν θαλνληθέο θηεξά. ηαζηαύξσζε: P: Κθ x Κθ Γ: Κ, θ Κ, θ Κ θ Κ ΚΚ Κθ θ Κθ θθ Φαηλνηππηθή αλαινγία: 3 µε θπζηνινγηθά θηεξά : 1 µε αηξνθηθά θηεξά ΙΣΦΥΔΙ Οη γαµέηεο πξνθύπηνπλ ζύµθσλα µε ηνλ 1 ν θαη ηνλ 2 ν λόµν ηνπ Mendel. Με βάζε ηνλ 1 ν λόµν ηνπ Mendel ν νπνίνο απνηειεί ηελ θαηαλνµή ησλ αιιεινµόξθσλ ζηνπο γαµέηεο θαη ηνλ ηπραίν ζπλδπαζµό ηνπο - θαηά ηε µείσζε όπνπ ζρεµαηίδνληαη νη γαµέηεο, δηαρσξίδνληαη ηα δύν δεπγάξηα νµόινγσλ ρξσµνζσµάησλ θαη ζπλεπώο θαη ηα αιιειόµνξθα γνλίδηα. Οη απόγνλνη πξνθύπηνπλ από ηνλ ηπραίν ζπλδπαζµό ησλ γαµεηώλ. 3
Γ2. Η θαηλνηππηθή αλαινγία γηα ην ρξώκα καηηώλ είλαη 200 κε θόθθηλα κάηηα : 200 κε ιεπθά κάηηα ηόζν γηα ηνπο αξζεληθνύο όζν θαη γηα ηνπο ζειπθνύο απνγόλνπο. Δπεηδή ε αλαινγία 1 : 1 πνπ παξαηεξήζεθε δελ δηαθέξεη αλάκεζα ζε ζειπθά θαη αξζεληθά άηνκα θαη δελ γλσξίδνπκε αλ ην γλώξηζκα θιεξνλνκείηαη κε απηνζσκηθό ή θπινζύλδεην ηύπν θιεξνλνκηθόηεηαο ζα δηαθξίλνπκε πεξηπηώζεηο. Έζησ όηη αθνινπζεί απηνζσκηθό ηύπν θιεξνλνκηθόηεηαο. Τόηε ηζρύεη: Κ: αιιειόκνξθν ππεύζπλν γηα θόθθηλα κάηηα θ : αιιειόκνξθν ππεύζπλν γηα ιεπθά κάηηα Οη πηζαλνί γνλόηππνη ησλ γνλέσλ είλαη: αξζεληθόο κε θόθθηλα κάηηα θαη γνλόηππν Κθ θαη ζειπθόο κε ιεπθά κάηηα κε γνλόηππν θθ ή αξζεληθόο κε θθ θαη ζειπθόο κε Κθ. Η δηαζηαύξσζε είλαη ε εμήο: P: Κθ Φ θθ Γακέηεο: Κ, θ θ F1: Κθ, θθ Γνλ. αλαινγία: 1Κθ : 1θθ Φαηλ. Αλαινγία: 1 κε θόθθηλα κάηηα : 1 ιεπθά κάηηα Οη απόγνλνη κε ιεπθά κάηηα εθθξάδνπλ ηνλ ππνιεηπόκελν θαηλόηππν θαη είλαη νκόδπγνη ζην ππνιεηπόκελν γνλίδην κε γνλόηππν θθ. Τα άηνκα απηά έρνπλ θιεξνλνκήζεη έλα ππνιεηπόκελν αιιειόκνξθν από θάζε γνλέα. Ο γνλέαο κε ιεπθά κάηηα πνπ εθθξάδεη ηνλ ππνιεηπόκελν θαηλόηππν είλαηνκόδπγνο ζην ππνιεηπόκελν θαη κεηαβηβάδεη ζε όινπο ηνπο απνγόλνπο ην ππνιεηπόκελν αιιειόκνξθν θ. Ο εηεξόδπγνο γνλέαο κε πηζαλόηεηα 50% κεηαβηβάδεη ην επηθξαηέο αιιειόκνξθν θαη νη απόγνλνη έρνπλ θόθθηλα κάηηα (Κθ) θαη κε πηζαλόηεηα 50% ην ππνιεηπόκελν θαη νη απόγνλνη έρνπλ ιεπθά κάηηα (θθ). Έηζη ε αλαινγία απνγόλσλ είλαη 1 : 1. Έζησ όηη αθνινπζεί θπινζύλδεην ηύπν θιεξνλνκεθόηεηαο. Τόηε ηζρύεη: Φ Κ : αιιειόκνξθν ππεύζπλν γηα θόθθηλα κάηηα Φ θ : αιιειόκνξθν ππεύζπλν γηα ιεπθά κάηηα Οη γνλόηππνη ησλ γνλέσλ είλαη: Φ Κ Φ θ θαη Φ θ Υ. Η δηαζηαύξσζε πνπ πξαγκαηνπνηήζεθε είλαη ε εμήο: 4
P: Φ Κ Φ θ Φ Φ θ Υ Γακέηεο: Φ Κ Φ θ Φ θ, Υ F1: Φ Κ Φ θ, Φ θ Φ θ, Φ Κ Υ, Φ θ Υ Γνλ. αλαινγία: 1 Φ Κ Φ θ : 1Φ θ Φ θ : 1Φ Κ Υ: 1 Φ θ Υ Φαηλ. Αλαινγία: 1 ζειπθν κε θόθθηλα κάηηα : 1 ζειπθό κειεπθά κάηηα : 1 αξζεληθό κε θόθθηλα κάηηα : 1 αξζεληθό κε ιεπθά κάηηα Σηε θπινζύλδεηε θιεξνλνκηθόηεηα νη αξζεληθνί απόγνλνη θιεξνλνκνύλ ην Υ ρξσκόζσκά ηνπο από ηνλ παηέξα θαη ην Φ από ηε κεηέξα. Δθόζνλ γελληνύληαη απόγνλνη κε θόθθηλα θαη ιεπθά κάηηα ζεκαίλεη όηη ε κεηέξα κεηαβηβάδεη θαη ηα δύν αιιειόκνξθα ζηνπο απνγόλνπο θαη άξα είλαη εηεξόδπγεκε γνλόηππν Φ Κ Φ θ. Τν κνλαδηθό Φ ρξσκόζσκα ηνπ παηέξα κεηαβηβάδεηαη ζε όινπο ηνπο ζειπθνύο απνγόλνπο. Έλα ππνιεηπόκελν θπινζύλδεην εθθξάδεηαη θαηλνηππηθά ζε όια ηα αξζεληθά άηνκα πνπ έρνπλ ην γνλίδην αιιά κόλν ζε εθείλα ηα ζειπθά πνπ είλαη νκόδπγα γηα η ν ππνιεηπόκελν γνλίδην. Οη ζειπθνύ απόγνλνη κε ιεπθά κάηηα είλαη νκόδπγνη ζην ππνιεηπόκελν κε γνλόηππν Φ θ Φ θ. Άξα ν αξζεληθόο γνλέαο κεηαβηβάδεη ην ππνιεηπόκελν αιιειόκνξθν θαη έρεη γνλόηππν Φ θ Υ. Γ3. Οη πεξηπηώζεηο είλαη νη εμήο: 1)Τα γνλίδηα λα βξίζθνληαηζην ίδην δεύγνο νκόινγσλ ρξσκνζσκάησλ 2)Να είλαη αηειώο επηθξαηή γνλίδηα 3)Να είλαη ζπλεπηθξαηή 4)Να ππάξρεη δξάζε ππνιεηπόκελνπ ζλεζηγόλνπ γνληδίνπ 5)Να είλαη πνιιαπιά αιιειόκνξθα 5
ΘΔΜΑ Γ Γ1. Θα πξνθύςνπλ δπν πβξηδνπνηεκέλα κόξηα DNA: Υβξηδνπνηεκέλν κόξην 1: 5 -AATTCGGGGGGC-3 3 -GCCCCCCGTTAA-5 Υβξηδνπνηεκέλν κόξην 2: 5 -AAATGAAACCAGGATAAG-3 Αιπζίδα 1 3 -TTTACTTTGGTCCTATTCTTAA-5 Αιπζίδα 2 Γ2. Τν γνλίδην πεξηέρεηαη ζην Υβξηδνπνηεκέλν κόξην 2 ηνπ ππνεξσηήκαηνο Γ1, θαη ην mrna πνπ πξνθύπηεη έρεη ηελ εμήο αιιεινπρία: 5 -AAAUGAAACCAGGAUAAG-3 Σειίδεο 32-33-34-35-36ζρνιηθνύ βηβιίνπ: Δθόζνλ ε παξαπάλσ αιιεινπρία DNA είλαη γνλίδην πνπ θσδηθνπνηεί πεπηίδην πξέπεη λα πξνθύπηεη από απηήλ mrnaην νπνίν κεηά ηελ 5 ακεηάθξαζηε πεξηνρή ηνπ λα έρεη θσδηθόλην έλαξμεο, θσδηθόληα ζε βήκαηα ηξηπιέηαο, θαη λα έρεη έλα θσδηθόλην ιήμεο από ηα 5-UGA-3, 5-UAG-3 ή 5-UAA-3. Καηά ηε κεηαγξαθή ε RNA πνιπκεξάζε αθνύ πξνζδεζεί ζηνλππνθηλεηή ηνπ γνληδίνπ θαη πξνθαιέζεη ηνπηθό μεηύιηγκα ηεο δηπιήο έιηθαο, ηνπνζεηεί ξηβνλνπθιενηίδηα απέλαληη από ηα δενμπξηβνλνπθιενηίδηα ηεο κηαο αιπζίδαο DNA κε βάζε ηνλ θαλόλα ηεο ζπκπιεξσκαηηθόηεηαο, κε ηε δηαθνξά όηη απέλαληη από ην δενμπξηβνλνπθιενηίδην πνπ πεξηέρεη αδελίλε, ηνπνζεηεί ην ξηβνλνπθιενηίδην πνπ πεξηέρεη νπξαθίιε. Σηε ζπλέρεηα ελώλεη ηα ξηβνλνπθιενηίδηα πνπ πξνζζέηεη ην έλα κεηά ην άιιν κε 3-5 θσζθνδηεζηεξηθό δεζκό. Ο πξαζαλαηνιηζκόο ηεο κεηαγξαθήο όπσο θαη ζηελ αληηγξαθή είλαη 5 3. Τν κόξην mrna πνπ ζπληίζεηαη είλαη ζπκπιεξσκαηηθό πξνο ηε κηα αιπζίδα ηεο δηπιήο έιηθαο ηνπ γνληδίνπ, ε νπνία είλαη ε κεηαγξαθόκελε θαη νλνκάδεηαη κε θσδηθή θαη έρεη αληίζεην πξνζαλαηνιηζκό από απηή. Η ζπκπιεξσκαηηθή ηεο αιπζίδα νλνκάδεηαηθσδηθή. Τν mrna έρεη ηνλ ίδην πξνζαλαηνιηζκό θαη ηελ ίδηα αιιεινπρία κε ηελ θσδηθή κε ηε δηαθνξά όηη αληί γηα Τ έρεη U. Ο όξνο θσδηθόλην δελ αθνξά κόλν ην mrna αιιά θαη ην γνλίδην από ην νπνίν παξάγεηαη. Έηζη γηα παξάδεηγκα ην θσδηθόλην έλαξμεο AUG αληηζηνηρεί ζην θσδηθόλην έλαξμεο ηνπ γνληδίνπ ATG θαζώο θαη ηα θσδηθόληα ιήμεο UAA, UGA 6
θαη UAG ζηα θσδηθόληα ηεο θσδηθήο αιπζίδαο TAA, TGAθαη TAG. Άξα ζην πβξηδνπνηεκέλν κόξην 2 ε αιπζίδα 1 πνπ κε πξνζαλαηνιηζκό 5 3 έρεη θσδηθόλην έλαξμεο ATGθαη κε βήκαηξηπιέηαο λνπθιενηηδίσλ (θσδηθόληα), θσδηθόλην ιήμεο TAAείλαη ε θσδηθή. Γ3. Κάζε κόξην trna έρεη κηα εηδηθή ηξηπιέηα λνπθιενηηδίσλ, ην αληηθσδηθόλην, κε ηελ νπνία πξνζδέλεηαη, ιόγσ ζπκπιεξσκαηηθόηεηα, κε ην αληίζηνηρν θσδηθόλην ηνπ mrna. Καηά ηελ έλαξμε ηεο κεηάθξαζεο ην mrna ζπλδέεηαη κέζσ κηαο αιιεινπρίαο πνπ ππάξρεη ζηε 5 ακεηάθξαζηε πεξηνρή ηνπ κε ην ξηβνζσκηθό RNAηεο κηθξήο ππνκνλάδαο ηνπ ξηβνζώκαηνο, ζύκθσλα κε ηνπο θαλόλεο ηεο ζπκπιεξσκαηηθόηεηαο ησλ βάζεσλ. Τν πξώην θσδηθόλην ηνπ mrna είλαη πάληνηε AUG θαη ζε απηό πξνζδέλεηαη ην trna πνπ κεηαθέξεη ην ακηλνμύ κεζεηνλίλε. Τν ζύκπινθν πνπ δεκηνπξγείηαη κεηά ηελ πξόζδεζε ηνπ mrna ζηε κηθξή ππνκνλάδα ηνπ ξηβνζώκαηνο θαη ηνπ trna πνπ κεηαθέξεη ηε κεζεηνλίλε νλνκάδεηαη ζύκπινθν έλαξμεο ηεο πξσηεηλνζύλζεζεο. Σηε ζπλέρεηα πξνζδέλεηαη θαη ε κεγάιε ππνκνλάδα ηνπ ξηβνζώκαηνο. Καηά ηελ επηκήθπλζε, έλα δεύηεξν κόξην trna κε αληηθσδηθόλην ζπκπιεξσκαηηθό ηνπ δεύηεξνπ θσδηθνλίνπ mrna ηνπνζεηείηαη ζηε δεύηεξε εηζδνρή ηνπ ξηβνζώκαηνο θαη κεηαθέξεη ην δεύηεξν ακηλνμύ, πνπ ζηελ πεξίπησζε καο είλαη ε ιπζίλε. Μεηαμύ ηεο κεζεηνλίλεο θαη ηεο ιπζίλεο δεκηνπξγείηαη πεπηηδηθόο δεζκόο θαη ακέζσο κεηά ην πξώην trna απειεπζεξώλεηαη ζην θπηηαξόπιαζκα όπνπ ζπλδέεηαη πάιη κε κεζεηνλίλε έηνηκν γηα επόκελε ρξήζε. Τν ξηβόζσκα θαη ην mrna έρνπλ ηώξα έλα trna πάλσ ζην νπνίν είλαη πξνζδεδεκέλα δπν ακηλνμέα. Σηε ζπλέρεηα ην ξηβόζσκα κεηαθηλείηαη θαηά έλα θσδηθόλην, θαη έλα ηξίην trna έξρεηαη λα πξνζδεζεί κεηαθέξνληαο ηελ πξνιίλε. Αλάκεζα ζηελ ιπζίλε θαη ηελ πξνιίλε δεκηνπξγείηαη πεπηηδηθόο δεζκόο θαη ην trna πνπ κεηέθεξε ηε ιπζίλε απειεπζεξώλεηαη ζην θπηηαξόπιαζκα. Έηζη ην επόκελν trna πνπ έξρεηαη κεηαθέξεη ηε γιπθίλε θαη έρεη αληηθσδηθόλην 3 -CCU-5 7
Γ4. Η DNA δεζκάζε είλαη έλα από ηα έλδπκα ηεο αληηγξαθήο πνπ θπζηνινγηθά ζπλδέεη θνκκάηηα ηνπ DNA, 3-5 θσζθνδηεζηεξηθό δεζκό (ζει. 14 ζρνιηθνύ βηβιίνπ). Έηζη κεηά ηελ επίδξαζε ηνπ ελδύκνπ πξνθύπηνπλ ηα εμήο κόξηα: 1) 5-AAATGAAACCAGGATAAGAATTGCCCCCCG-3 3-TTTACTTTGGTCCTATTCTTAACGGGGGGCTTAA-5 2)5-AAATGAAACCAGGATAAGAATTCGGGGGGC-3 3-TTTACTTTGGTCCTATTCTTAAGCCCCCCTTAA-5 «Η EcoRI είλαη κηα πεξηνξηζηηθή ελδνλνπθιεάζε... έρνπλ θνπεί κε ην ίδην έλδπκν.» (Σειίδα 57 ζρνιηθνύ βηβιίνπ) Σην δεύηεξν κόξην ε αιιεινπρία αλαγλώξηζεο ηεο EcoRI ππάξρεη κηα θνξά. Έηζη θόβεηαη ζε έλα ζεκείν θαη πξνθύπηνπλ δύν ηκήκαηα ελώ ην πξώην δελ θόβεηαη ζε θαλέλα ζεκείν άξα ην παίξλνπκε σο έλα ηκήκα. Σπλνιηθά ινηπόλ έρνπκε 3 ηκήκαηα. 1)5-AAATGAAACCAGGATAAGAATTGCCCCCCG-3 3-TTTACTTTGGTCCTATTCTTAACGGGGGGCTTAA-5 8