Downloaded from ijbd.ir at 11: on Tuesday October 16th و IFN-γ. 1. Carica papaya

Transcript

1 یاحقی و همکاران لیلا یاحقی و همکاران فصلنامه بیماريهاي پستان ایران سال چهارم شمارة سوم پاییز 1390 مقاله پژوهشی بررسی اثر عصارة آبی برگ خربزة درختی papaya) (Carica بر رشد تومور و میزان بیان IFN-γ و IL-4 در موشهاي مبتلا به سرطان پستان لیلا یاحقی: کارشناس ارشد فیزیولوژي دانشکدة علوم پایه دانشگاه آزاد اسلامی واحد قم * الهام صفرپور کپورچال: استادیار فیزیولوژي دانشکدة علوم پایه دانشگاه آزاد اسلامی واحد قم ابوالفضل دادخواه تهرانی: استادیار یوشیمی بالینی دانشکدة علوم پایه دانشگاه آزاد اسلامی واحد قم محمد حسن زهیر: دانشیار ایمونولوژي دانشکدة پزشکی دانشگاه تربیت مدرس مهدیه سادات قیاثی: دانشجوي کارشناسی ارشد میکروبیولوژي مرکز جهاد دانشگاهی قم ازمایشگاه سلولهاي بنیادي چکیده مقدمه: امروزه از آنجاکه شیوع سرطان بهویژه سرطان پستان و مرگومیر ناشی از آن در میان زنان افزایش یافته است تحقیقات زیادي در این زمینه صورت میگیرد. در تحقیق اخیر اثر عصارة آبی برگ خربزة آنتیتوموري فعال بر روي رشد اندازه و وزن تومور و سطح بیان اینترلوکین- 4 و اینترفرون گاما بررسی قرار گرفت. در روش بررسی: در تحقیق حاضر از موشهايbalb/c مادة مبتلا به سرطان پستان(با سلولهاي 4T1) 1 درختی بهدلیل داشتن ترکیبات آنتیاکسیدانی و در موشهاي مبتلا به سرطان پستان مورد استفاده شد. عصارة گیاه توسط روش دم کردن بهدست آمد. براي بهدست آوردن دوز مناسب جهت تزریق تست DPPH برروي دوزهاي مختلف انجام گرفت و دوزي که بیشترین اثر آنتیاکسیدانی را نشان داد (116µg/ml) براي تزریق استفاده شد. یک گروه را همزمان با دریافت سلول سرطانی بهصورت تزریق داخل صفاقی دریافت کردند که به مدت 0 روز ادامه یافت و گروه دیگر را بعد از ظاهر شدن تومور به مدت 1 روز دریافت نمودند. درطول دورة آزمایش اندازة تومور از روز پانزدهم تا بیستم هر روز و نیز بعد از خارج شدن از بدن اندازهگیري و اندازة تومور توسط فرمول استاندارد (اندازة تومور= اندازهگیري شد. براي اندازهگیري بیان IFNγ,IL-4 عرض طول 0/5 )محاسبه گردید. وزن تومور بعد از خارج شدن از بدن برروي پلاسماي خون آزمایش ELISA انجام گردید. نمونهها تا زمان انجام آزمایش 0- درجە سانتیگراد نگهداري شدند و درنهایت سطح (IFNγ,IL-4) درگروههاي مختلف با روشهاي آماري مقایسه شد. یافتهها: اندازة تومور در گروههاي تحت تیمار با بهمدت 1 روز (گروه B) و 0 روز (گروه A) نسبت به گروههاي کنترل هم در روند رشد تومور و هم بعد از خارج کردن تومور از بدن کاهش معنیداري را نشان داد بهطوريکه بر طبق اندازهگیري تومور در روزهاي پانزدهم تا بیستم در گروه A این اختلاف در روز هجدهم در 0/05>P و در روزهاي نوزدهم و بیستم در 0/001>P و در گروه B در روز بیستم در 0/05>P معنیدار بود. همچنین وزن تومور در گروه A نسبت به گروه کنترل آن کاهش معنیداري را در 0/001>P نشان داد. نتایج حاصل از تست ELISA به ترتیب در سطح IL-4 و IFN-γ کاهش و افزایش را نشان داد. نتیجهگیري: براساس نتایج حاصل از این تحقیق عصارة آبی برگ خربزة درختی میتواند باعث کاهش در روند رشد تومور در موشهاي مبتلا به سرطان پستان شود. واژههاي کلیدي: خربزة درختی( papaya Carica اندازة تومور وزن تومور DPPH سرطان پستان IL-4 ELIS INFγ 1. Carica papaya 3 نشانی نویسندة پاسخگو: قم بلوار پانزده خرداد دانشگاه آزاد اسلامی واحد قم گروه فیزیولوژي الهام صفرپور کپورچال تلفن: نشانی الکترونیک: elham.safarpoor@gmail.com

2 بررسی اثر عصارة آبی برگ... فصلنامە بیماريهاي پستان ایران مقدمه امروزه سرطان بعد از بیماريهاي قلبی- عروقی دومین عامل مرگومیر در انسان است[ 1. در این میان سرطان پستان بعد از سرطان پوست رایجترین سرطان در میان زنان است بهطوريکه از هر 3 سرطان تشخیص داده شده در میان زنان است[. 4 آمریکایی یکی از آنها سرطان پستان سرطان یک فرآیند چندمرحلهاي میباشد که شامل تغییرات برگشتناپذیر ژنتیکی در سلول بنیادي و پس از 3 آن تکثیر کلونال سلول بنیاديهاي مذکور و در نهایت 4 ایجاد فنوتایپ مهاجم و متاستاز سلولهاي سرطانی می- باشد. پیشگیري و یا درمان سرطان میبایست در مراحل مختلف فرآیند مذکور با استفاده از مکانیسمهاي مختلفی صورت پذیرد[ 3. امروزه درمانهاي متداول سرطان شامل جراحی شیمیدرمانی و رادیوتراپی میباشد[ 4 شکست درمان با اینکه در اغلب سرطانها اصلی علت متاستاز سلولهاي سرطانی میباشد متا سفانه باید گفت که جراحی و رادیوتراپی تنها در درمان سرطانهاي موضعی کاربرد دارند و در مورد متاستازهاي سرطانی کارآیی ندارند. در چنین مواردي روش درمان اغلب بر پایە شیمیدرمانی استوار است. البته کارآیی این روش هم بهدلیل آثار جانبی سمی که در دوزهاي بالا دارد عملا محدود میباشد. امروزه بهخوبی معلوم شده است که رادیوتراپی و شیمیدرمانی حتی بیشتر از خود سرطان باعث تضعیف و از بین بردن سیستم دفاعی بدن میشوند[ 5 آثار بهدلیل لذا جانبی بالاي داروهاي شیمیایی و کمتر بودن این اثرها در گیاهان دارویی گرایش محققان به سمت گیاهان دارویی و استفاده از ترکیبات فعال آن در درمان سرطانها افزایش یافته است. در طی سالهاي اخیر گیاهان متعددي در درمان سرطان مورد بررسی قرار گرفتند و اثرهاي آنتیاکسیدانی بسیاري از این ترکیبات گیاهی به اثبات رسیده است از جمله فلاونوي یدها کاروتنوي یدها انواع ویتامینها و.... خربزة درختی نیز ازجمله گیاهان دارویی است که داراي ترکیبات آنتیتوموري و Carica papaya آنتیاکسیدانی مختلفی است. متعلق به خانوادة میباشد که چندین عضو از این خانواده بهعنوان دارو در درمان بیماريهاي مختلف استفاده میشدند. این گیاه بومی کشور مکزیک میباشد ولی در حال حاضر در سراسر مناطق حارهاي گسترده شده است. میوة این گیاه هم بهعنوان غذا و هم شبه دارو مصرف میشود. تحقیقات زیادي جهت ارزیابی فعالیتهاي بیولوژیکی بخشهاي مختلف این گیاه از جمله: میوه جوانه برگ پوست دانه ریشه و لاتکس صورت گرفته است. برگهاي این گیاه حاوي ترکیبات فعال زیادي است که قدرت فعالیتهاي آنتیاکسیدانی بدن را افزایش میدهد و باعث کاهش سطح پراکسیداسیون لیپیدها میشود از جملە این ترکیبات میتوان به glucosides, papain, cyanogenic chymopapain,cystatin α tocopherol, flavonoids, glucosinolates, acid ascorbic, lycopen, Benzylisothiocyanate اشاره کرد. همچنین عصارة برگ این گیاه بهعلت دارا بودن خواص ضدسرطانی توسط ساکنین منطقە Gold Coas استرالیا جهت درمان سرطان استفاده میشود و نیز عصارة برگ این گیاه بهمدت طولانی توسط بومیان جهت درمان اختلالاتی چون سرطان و بیماريهاي عفونی استفاده میشده است[ 6. لذا در این بررسی اثر عصارة ابی برگ گیاه خربزة درختی برروي سرطان پستان مورد بررسی قرار گرفت تا مشخص شود ایا استفاده از عصارة برگ این گیاه بهصورت تزریق داخل صفاقی نیز میتواند اثري در کاهش رشد تومور و تغییر در سطح بیان IFN-γ و IL-4 داشته باشد. زیرا از جمله مهمترین پاسخهاي مورد نیاز بدن در مقابله با تومور پاسخهاي مربوط به لنفوسیتهاي TH1 مثل IFN-γ و لنفوسیتهاي نوع Th مثل IL-4 میباشد. لنفوسیتهاي نوع Th که مهمترین آنها IL-4 میباشد ازجمله سایتوکینهایی هستند که افزایش سطح بیان آنها میتواند باعث افزایش تکثیر سلولهاي توموري و گسترش آنها در بدن شود و سایتوکینی مثلIFN-γ سایتوکین ضد تکثیري مهمی در جلوگیري از تکامل سلولهاي توموري محسوب میشود. ازجمله عملکردهاي این سایتوکین عبارتاند از: تقویت عملکرد عرضه توسط ماکروفاژها و همچنین تقویت عملکرد سلولهاي کشندة طبیعی[ 7 القاي اندوسیتوز و فاگوسیتوز رهاسازي واسطههاي اکسیژن و TNF-α که Caricaceae. Initiation phase 3. Promotion phase 4. Progression phase

3 لیلا یاحقی و همکاران پاییز 1390 نهایتا سبب تقویت کشتن سلولهاي توموري توسط ماکروفاژها میشود[ 8. روش بررسی گیري 5 عصارة برگ گیاه مورد نظر بهصورت آبی و از روش دم کردن که منطبق با روش سنتی آن است تهیه گردید. درابتدا برگها کاملا خشک و پودر شدند و به میزان 30 گرم از آن داخل بشر ریخته شد و 500 آب میلیلیتر مقطر به آن اضافه گردید و بعد از مخلوط کردن کامل در ظرف با فویل آلومینیوم پوشش داده شد و داخل بن ماري 70 در دماي درجە سانتیگراد بهمدت 14 ساعت قرار گرفت و در طی این مدت هر یک ساعت مخلوط به هم زده شد سپس مخلوط حاصل از کاغذ صافی و از فیلتر ضدمیکروبی عبور داده شد. سپس این محلول براي ادامە آزمایش در دماي تعیین میزان در محلول 0- درجە سانتیگراد نگهداري گردید. براي پی بردن به اینکه در هنگام تزریق دقیقا چه دوزي از عصارة خالص داخل حلال استفاده شدهاست در محلول بهدست آید. میزان است لازم بدین منظور تنها بخشی از این محلول براي تهیە عصارة پودرمانند و خشک استفاده شد تا محلول بهدست آورد. درنهایت بتوان نسبت را در کل تعیین درصد آنتیاکسیدانی جهت تعیین درصد آنتیاکسیدانی تست DPPH انجام شد. DPPH مخفف,-diphenyl-1-picrylhydrazyl ترکیب شیمیایی ارگانیک به میباشد. میلیلیتر از محلول DPPH ساختهشده مقادیر مختلف اضافه گردید و براي نمونه بلانک به میلیلیتر از محلول فوق همحجم عصارة ترتیب لولههاي 6 آب مقطر اضافه شد. بدین دوز مختلف از انتخاب گردید و در میلیلیتر آزمایش DPPH محلول ریخته و ها به آنها اضافه شد و یک لوله هم بهعنوان بلانک بود که به آن آب مقطر اضافه گردید. سپس لولهها با پارافیلم پوشانده شدند و بعد از 30 دقیقه انکوباسیون در 37 درجە سانتیگراد و تاریکی جذب نمونهها توسط دستگاه اسپکتروفوتومتر در طول موج نانومتر 517 محاسبه شد. سپس با فرمول زیر درصد مهار رادیکالهاي آزاد بهدست آمد: I%= [A blank (A sample/a blank). 100 تهیە ردة سلولی 4T1 سلولهاي سرطان پستان با منشا ردة balb/c موش 4T1 داخل محیط کشت از انستیتو پاستور ایران در تاریخ 1390/3/ تهیه گردید. نور گروهبندي حیوانات جهت انجام آزمایش از موشهاي ماده با وزن 19-3/90 گرم استفاده شد. موشها در دماي 4 درجە سانتیگراد 1) ساعت روشنایی 1 ساعت تاریکی) و رطوبت مناسب با آب و غذاي کافی نگهداري شدند. آنها در 4 گروه آزمایش 6 تایی (A دستهبندي شدند. گروه اول (گروه مورد سلول سرطانی و را بهطور همزمان بهمدت 0 روز دریافت کردند گروه دوم (گروه کنترل A) سلول را بههمراه آب مقطر بهطور همزمان بهمدت 0 روز دریافت کردند گروه سوم (گروه مورد آزمایش B) ابتدا سلول سرطانی را دریافت کردند و بعد از نمایان شدن تومور را بهمدت 1 روز دریافت نمودند و گروه چهارم (گروه کنترل (B ابتدا دریافت سلول و بعد از نمایان شدن تومور آب مقطر را به مدت 1 روز دریافت کردند. القاء سرطان پستان محل تزریق با پنبه و الکل ضد عفونی شد. در روز صفر تزریق سلول سرطانی به تعداد 7Õ10 5 بهصورت زیر جلدي به تمام موشها انجام گرفت. محل تزریق مجاور پایینترین غدة پستانی سمت چپ در نظر گرفته شد. اندازهگیري سایز تومور جهت بررسی تغییرات در روند رشد و اندازة تومور در طول درمان با اندازة آن گرفته شد. بهطوريکه طول و عرض تومور هر روز از روز پانزدهم تا روز بیستم و نیز بعد از خارج کردن از بدن بهوسیلە کولیس اندازهگیري گردید. اندازة تومور با فرمول زیر بهدست آمد: Õ0/5 طول Õ عرض= اندازة تومور اندازهگیري وزن تومور بعد از کشتن موشها تومور از بدن آنها خارج و وزن شد Aqueous extract

4 بررسی اثر عصارة آبی برگ... فصلنامە بیماريهاي پستان ایران اندازهگیري سطح اینترلوکین- 4 و اینترفرون گاما در پلاسما پس از کشتن موشها از پلاسماي گردید. آن جدا آنها نمونە خون تهیه شد میزان تولید اینترلوکین- 4 و و اینترفرون گاما در پلاسما توسط تست الایزا و با کیت موشی (ebioscience) Platinum ELISA اندازهگیري شد. pg/ml حسب آنالیز آماري دادهها نتایج غلظت سایتوکین در پلاسما بر بیان شد. نتایج بهدست آمده در نمونههاي مورد مطالعه با یکدیگر و با گروه کنترل مقایسه شد. آزمایشها جمعآوري شد و آماري دادهها مورد تجزیهوتحلیل نمونه ها بلانک اول دوم سوم چهارم پنجم ششم اطلاعات بهدست با نرمافزار مادة مورد نظر آب مقطر spss آمده از مشاهدة و سطح معنیداري اندازهگیري سایز تومور در روزهاي پانزدهم تا بیستم طول و عرض تومور هر روز از روز پانزدهم تا روز بیستم و همچنین بعد از خارج کردن تومور از بدن بهوسیلە کولیس اندازهگیري شد. سپس مقادیر بهدستآمده در فرمول Õ0/5 عرضÕطول قرار داده شد. میانگین دادههاي بهدستآمده از هر گروه بهدستآمد و براساس آنها نمودار مورد نظر رسم شد. همانطورکه درنمودار 1 مشخص است تفاوت اندازة تومور درگروه B نسبت به دادهها با روش one-way ANOVA مورد بررسی قرار گرفت و 0/05>P معنیدار درنظر گرفته شد. یافتهها تعیین درصد آنتیاکسیدانی هدف از انجام تست آنتیاکسیدانی بهدست DPPH و تعیین درصد آوردن دوزي با بالاترین درصد آنتیاکسیدانی از میان دوزهاي تعیینشده میباشد. برطبق نتایج بهدستآمده و نشان دادهشده در جدول 1 کمترین دوز (116 µ) بالاترین درصد آنتیاکسیدانی را نشان داد و بهترتیب هرچه دوز افزایش مییافت درصد انتی اکسیدانی آن نیز کاهش پیدا میکرد. جدول 1: درصدهاي آنتی اکسیدانی مقادیر 350 µ درصد جذب نمونهها 0/669 درصد مهار رادیکالها - 47/ /1 0/7 1/3 7/ 0/133 0/7 0/360 0/443 0/530 0/ µ 3 µ 348 µ 464 µ 581 µ 698 µ C.B آن کنترل ( P<0/05 )*و همانطورکه درنمودار در روز بیستم معنیدار شد مشخص است تفاوت اندازة تومور در گروه A نسبت به گروه کنترل آن C.A در روزهاي هجدهم نوزدهم( P<0/01 )** گردید. و بیستم( P<0/01 )** *(P<0/05) معنیدار 6

5 یاحقی و همکاران لیلا یاحقی و همکاران اندازة تومور نمودار 1 : اندازة تومور در روزهاي پانزدهم تا بیستم: روزهاي پانزدهم تا بیستم بهترتیب با اعداد 1 تا 6 مشخص شده است. اندازة تومور در گروه B (دریافت بهمدت 1 روز)نسبت به گروه کنترل آن C.B در طول این مدت مقایسه شد. در روز بیستم اختلاف معنیداري بین گروه کنترل و تیمار مشاهده شد( P<0/05 )*. سطح معنیداري 0/05>P درنظر گرفتهشد. نمودار : اندازة تومور در روزهاي پانزدهم تا بیستم: روزهاي پانزدهم تا بیستم بهترتیب با اعداد 1 تا 6 مشخص شده است. اندازة تومور در گروه A (دریافت به مدت 0 روز) نسبت به گروه کنترل آن C.A در طول این مدت مقایسه شد. در روز هجدهم نوزدهم و بیستم اختلاف معنیداري بین گروه کنترل و تیمار مشاهده شد (0/01>P)** و (0/05>P)*. سطح معنیداري 0/05>P درنظر گرفتهشد. اندازة تومور بعد از خارج کردن از بدن تومورها بعد از خارج کردن از بدن توسط کولیس اندازهگیري شدند و مقادیر بهدستآمده در فرمول (Õ0/5 عرض Õطول) قرار داده شد و با بهدست آوردن میانگین در هر گروه گردید. رسم آنها نمودار همانطورکه در نمودار 3 مشخص است اندازة تومور گروه A (دریافت به مدت 0 روز) نسبت به گروه کنترل آن C.A (دریافت آب مقطر بهمدت 0 روز) و گروه B (دریافت بهمدت 1 روز) با گروه کنترل آن C.B (دریافت آب مقطر بهمدت نشان داد.( P<0/01 )** 1 روز) کاهش معنیداري آن پس از خارج کردن تومور از بدن وزن آنها توسط ترازوي دیجیتالی اندازهگیري شد. سپس میانگین دادههاي بهدست آمده از هر گروه بهدست آمد و نمودار آن رسم شد. همانطورکه در نمودار 4 مشخص است وزن تومور در گروه B (دریافت بهمدت 1 روز) با گروه کنترل C.B ** ** اندازة تومور * تفاوت معنیداري نشان نداد. A (دریافت بهمدت 0 روز) گروه اما نسبت به گروه کنترل آن کاهش معنیداري را نشان داد. (0/001>P)*** 7

6 بررسی اثر عصارة آبی برگ... فصلنامە بیماريهاي پستان ایران اندازة size تومور tumor نمودار 3 : اندازة تومور بعد از خارج کردن از بدن: اندازة تومور گروه A (دریافت بهمدت 0 روز)نسبت به گروه کنترل آن C.A (دریافت اب مقطر بهمدت 0 روز) کاهش معنیداري نشان داد.( P<0/01 )** اندازة تومور گروه B (دریافت بهمدت 1 روز)با گروه کنترل آن C.B (دریافت آبمقطر بهمدت 1 روز) اختلاف معنیداري *(P<0/05) داشت. سطح معنیداري 0/05>P در نظر گرفته شد. tumors ** A C.A B C.B وزن weight تومور tumor groups * tumorw *** نمودار 4: اندازة وزن تومور: میانگین وزن تومور در گروه B (دریافت بهمدت 1 روز) با گروه کنترل آن C.B تفاوت معنیداري نشان نداد اما گروه A (دریافت بهمدت 0 روز) سطح معنیداري 0/001>P در نظر گرفته شد. A C.A B C.B groups نسبت به گروه کنترل آن کاهش معنیداري را نشان داد (0/001>P)*** 8

7 یاحقی و همکاران لیلا یاحقی و همکاران نتیجە اندازهگیري سطح اینترلوکین- 4 و اینترفرون گاما در پلاسما نتایج غلظت سایتوکین در پلاسما بر حسب pg/ml بیان شد. پس از کشتن موشها از آنها نمونە خون تهیه شد و پلاسماي آن جدا گردید. میزان تولید اینترلوکین- 4 و اینترفرون گاما در پلاسما توسط تست الایزا و با روش پروتکل ضمیمهشده اندازهگیري شد. نتایج بهدستآمده نشان داد که تزریق داخل صفاقی با دوز 116 µ باعث کاهش سطح بیانIL-4 و افزایش بیان IFN-γ در موشهاي تحت تیمار با شد بهطوريکه سطح IFN-γ در A=1/01±9/1 گروه (دریافتکنندة بهمدت 0 روز) و در گروه کنترل آن C.A=14/58±1/8 در گروه 14/16±1/3= B (دریافت- کنندة بهمدت 1 روز) و در گروه C.B=13/0±/6 گزارش شد. اما کاهش IL-4 و افزایش IFN-γ براساس آنالیزهاي آماري معنیدار شناخته نشد. براساس میانگین دادههاي بهدستآمده نمودار آنها رسم گردید(نمودار 5 و 6 ). میزان IL-4 در پلاسماي گروه A (دریافتکنندة بهمدت 0 روز) نسبت به گروه کنترل آن C.A و گروه B (دریافت کنندة بهمدت 1 روز) نسبت به گروه کنترل آن C.B تفاوت معنیداري را نشان ندادند. سطح معنیداري (0/05 >P) در نظر گرفته شد. IL Interleukin نمودار 5 : سطح اینترلوکین- 4 در پلاسما: میزان IL-4 در پلاسماي گروه A (دریافت کنندة بهمدت 0 روز) نسبت به گروه کنترل آن C.A و گروه B (دریافتکنندة بهمدت 1 روز) نسبت به گروه کنترل آن C.B تفاوت معنیداري را نشان ندادند. سطح معنیداري 0/05>P در نظر گرفته شد. A C.A gruop B C.B 9

8 و 9 بررسی اثر عصارة آبی برگ... فصلنامە بیماريهاي پستان ایران IFN-gamma نمودار 6 : سطح اینترفرون گاما در پلاسما: میزان اینترفرون گاما در پلاسماي گروه A (دریافتکنندة بهمدت 0 روز) نسبت به گروه کنترل آن C.A و گروه B (دریافتکنندة بهمدت 1 روز)نسبت به گروه کنترل آن C.B تفاوت معنیداري را نشان ندادند. سطح معنیداري 0/05>P درنظر گرفتهشد. بحث و نتیجهگیري سرطان شایعترین از یکی پستان بدخیمیها است. بهطوريکه در ایالت متحده از هر 9 زن یک نفر در طول مبتلا آن به خود زندگی میگردد[ 7. همچنین این بیماري بهعنوان دومین علت مرگ ناشی از سرطان (16 درصد مرگومیرها) در خانمها میباشد[ 8 لذا تشخیص زود و بهموقع این بیماري و پیدایش راههاي جدید درمانی میتواند کمک مو ثري در بهبود کیفیت زندگی این افراد 10 باشد[ بسیاري از مطالعات صورتگرفته بر روي بیماران مبتلا به سرطان پستان حاکی از کاهش پاسخهاي ایمنی عملکرد سایتولیتیک کاهش تکثیر در سلولهاي ایمنی و درنتیجه کاهش سایتوکینها در اثر ابتلا به این سرطان حقیقت در که میباشد بیانگر یک وضعیت ایمونوساپرشن میباشد[ 11. بنابراین در چنین شرایطی استفاده از عوامل تقویتکنندة سیستم ایمنی و درمانهاي مکمل میتواند مو ثر باشد. عصارة آبی برگ خربزة درختی ازجمله مکملهاي دارویی است که میتواند با مکانیسمهاي متعدد در درمان سرطان مو ثر باشد. این گیاه داراي اثرهاي ایمنی[ 6 ضدالتهابی[ 1 ضدتکثیري[ 13 آنتیاکسیدانی[ 15 و 14 میباشد. تنظیمکنندة آنتیتوموري سیستم و [6 باتوجه به تحقیقاتی که توسط Otsuki و همکارانش برروي اثرهاي آنتیتوموري و ایمونومودولاتوري عصارة آبی برگ این گیاه برروي لاینهاي سرطانی مختلف از جمله سرطان پستان انسان (MCF-7) بهصورت in vitro صورت گرفت نشان دادند 4 ساعت بعد از افزودن تولید برخی سایتوکینهاي نوع Th ازجمله IL-وIL-4 در کشت کاهش یافت. اما دیگر انواع سایتوکاین Th1 که با ایمنی با آنتیتوموري مرتبط بودند مثل IL-1P40,IL-1P70, IFN-γ, TNF-α بهطور قابل توجهی افزایش یافته بودند. همچنین مشخص شد که فعالیت caspase3/7 (درتحریک اپوپتوزیس سلول نقش دارند) 4 ساعت بعد از درمان سلولهاي سرطانی با خربزة عصارة درختی تحریک شده بودند پاپایا تنظیم افزایشی بیان ژنهاي تنظیمکنندة (ccl,ccl7,ccl8,serpinb) را و نیز عصارة ایمنی نشان داد. با این نتایج اثرهاي آنتیتوموري و ایمونومودولاتوري عصارة برگ خربزة درختی به اثبات رسید[ 6. آبی باتوجه به این مطالعات میتوان گفت سایتوکینهاي القایی توسط این گیاه IFNgamma A C.A B C.B group نقش داراي القاء در عمدهاي خواص تنظیمکنندگی برروي سیستم ایمنی هستند. بر طبق نتایج بهدستآمده از مطالعە حاضر در کاهش رشد تومور و باتوجه به نتایج بهدستآمده توسط Otsuki از 30

9 لیلا یاحقی و همکاران پاییز اثرهاي عصارة آبی برگ این گیاه برروي سیستم ایمنی و با توجه به نوع پاسخ مورد نیاز بدن در مقابله با تومور که Th1 درواقع مثل پاسخهاي مربوط سلولهايT به لنفوسیتهاي سیتوتوکسیک دیگر و IFN-γ مکانیسمهاي سایتولیز سلولهاي توموري از جمله فعالیت سلولهاي NK میباشد و با توجه به اثرهایی که عصارة آبی برگ این گیاه برروي کاهش لنفوسیتهاي نوع Th Th1 مثل IL-4 در و افزایش لنفوسیتهاي نوع مثل IFN-γ دارد میتوان این برداشت را از اثر این گیاه برکارآمدي بیشتر پاسخهاي ایمنی و وضعیت دفاعی بدن in تومور مقابل اثر عصارة داشت. در مطالعاتی که بهصورت vitro برگ این گیاه را برروي سلولهاي توموري بررسی کردند کاهش یا مهار رشد سلولهاي توموري مشاهده شد. در تنها مطالعهاي که برروي این گیاه در مدل موشی انجام گرفت ما کاهش معنیداري را در روند رشد تومور و کاهش در وزن تومور در طول درمان با مشاهده کردیم. بهطوريکه این اثرها در گروهی که را همزمان با سلول سرطانی دریافت نموده بودند (گروهA ) بیشتر و بارزتر از گروهی بود که را بعد از ظاهرشدن تومور دریافت نموده بودند (گروهB ). بنابراین میتوان نتیجه گرفت این اثر مثبتی در بهبود وضعیت موشهاي مبتلا به سرطان پستان و کاهش در اندازه و وزن تومور داشته است. با توجه به این موضوع انجام مطالعات بیشتر و بررسیهاي دیگر در جهت شناخت مکانیسمهاي دقیقتر این اثرها ضروري بهنظر میرسد. References 1. Lane WI, Comac L. Sharks don t get Cancer. Avery publishing Group Inc. New York, USA Breast Cancer Facts & Figures. American Cancer Society, Inc Trosko JE. Chang CC. Mechanism of upregulation gap junctional intercellular communication during chemoprevention and chemotherapy of cancer. Mutat. Res 001; Devita VT. Biologic therapy of cancer. J. B. Lippincott Company, Philadelphia, USA Smith JE, Rowan NJ, Salivan R. Medicinal mushrooms: their therapeutic properties and current medical usage with special emphasis on cancer treatments. Cancer Research UK Otsuki N, Dang NH, Kumagai E, Kondo A, Iwata S, Morimoto C. Aqueous extract of Carica papaya leaves exhibits anti-tumor activity and immunomodulatory effects. Journal of Ethnopharmacology 010; 17: Biron CA, Nguyen KB, Pien GC, Cousens LP, Salazar-Mather TP. Natural killer cells in antiviral defense: function and regulation by innate cytokines. Annu Rev Immunol 1999; 17: Mosmann TR, Cherwinski H, Bond MW, Giedlin MA, Conffman RL. Two types of murine helper T cell clone.i. definition according to profiles of lymphokines activities and secreted proteins J Immunol 1998; 136: Cotran R, Kumar S, Collins V, Robbins T. Pathologic Basis of Disease, 6th ed., W. B. Saunders Company, Philadalphia 1999; Damjanove I, Linder J. Anderson Pathology, 10th ed., Mosby, New York 1996; Harirchi I, Karbaksh M, Kashefi A, Momtahen AJ. Breast cancer in Iran: results of a multi-center study.asian Pac J Cancer Perv 004; 5(1): Yassaee VR, Zeinali S, Harirchi I, Jarvandi S, Mohagheghi MA, Hornby D, Dalton A. Novel motation in the BRCA1 and BRCA genes in Iranian women with early-onset breast cancer. Breast Cancer Res 00; 4: R Marrogi AJ, Munshi A, Merogi AJ. Study of tumor infiltrating lymphocytes and transforming growth factor-beta as prognostic factors in breast carcinoma. Int J Cancer 1997; 74(5): Gupta OP, Sing S, Bani S, Sharma N, Malhotra S, Gupta BD, Banerjee SK, Handa

10 بررسی اثر عصارة آبی برگ... فصلنامە بیماريهاي پستان ایران SS. Anti-Inflammatory and anti-arthritic activities of silymarin acting through inhibition of 5-lipoxygenase. PubMed journal 000; 7(1): Garcia-Solis P, Yahia EM, Morales- Tlalpan V, Diaz-Munoz M. Screening of antiproliferative effect of aqueous extracts of plant foods consumed in Mexico on the breast cancer cell line MCF-7. PubMed journal 009; 6: Aruoma OI, Colognato R, Fontana I, Gartlon J, Migliore L, Koike K, Coecke S, Lamy E, Mersch-Sundermann V, Laurenza I, Benzi L, Yoshino F, Kobayashi K, Lee MC. Molecular effects of fermented papaya preparation on oxidative damage, MAP Kinase activation and modulation of the benzo[apyrene mediated enotoxicity.pubmed journal 006; 6(): Shivananda N, Pereina P. Lexley P, Dale M. Wound healing activity of Carica papaya L. in experimentally induced diabetic rats. Indian journal of experimental biology 007; 45: