Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie

Transcript

1 Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie

2 INTRODUCERE Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova reprezintă singura instituţie de învăţământ superior medical din regiunea de sud-vest a României, deservind prioritar peste 2,5 milioane de locuitori. Din 2007, a constituit o echipă multidisciplinară care a aplicat la începutul anului 2008 la Autoritatea Naţionala pentru Cercetare Ştiinţifică pentru a obţine asistenţă publică financiară nerambursabilă (cu un proiect evaluat și câștigat prin competiție națională în cadrul axei POSCCE-A Capacităţi - I , dar cu evaluatori exclusiv din străinătate). După câştigarea proiectului şi semnarea contractului cu ANCS, a demarat în septembrie 2008 un proiect de cercetare de excelență revoluţionar nu doar pentru regiunea de sud-vest a României, ci pentru întreaga ţară: TARGET Centru de Cercetare şi Tratament în Gastroenterologie Bazat pe Metode Imagistice şi Studii Moleculare. Valoarea totală a investiţiei pentru proiectul propus a fost de ,13 Mii RON, inclusiv TVA, şi a cuprins costuri pentru construcţia unei clădiri noi, amenajarea unor spaţii existente şi pentru îmbunătăţirea infrastructurii de cercetare-dezvoltare prin dotarea cu echipamente de ultimă generaţie. Prin scopul sau, proiectul TARGET şi-a propus să creeze un centru de excelenţă regional în domeniul diagnosticării precoce şi tratamentului în patologia digestivă malignă. Pentru atingerea scopului se va crea un Centru de Cercetare de Excelenţă suprapus peste infrastructura deja existentă a Centrului de Cercetare în Gastroenterologie și Hepatologie, alcătuit din trei module care vor favoriza elucidarea mecanismelor de control molecular al creşterii şi diferenţierii celulare la nivelul organelor digestive, prin integrarea diagnosticului imagistic precoce (Modul de Imagistică Digestivă), a tehnicilor complexe de patologie şi imunologie (Modul de Patologie şi Imunologie), respectiv a mecanismelor genomice (Modul de Biologie Moleculară). România este printre puţinele ţări din Centrul şi Estul Europei în care NU sunt instalate si NU funcţionează în sistemul public echipamente integrate PET-CT si MRI-3T, pacienţii din ţara noastră fiind privaţi de aportul benefic al detecţiei precoce a diferitelor afecţiuni digestive în faza de debut când tratamentul instituit este eficient. În cadrul proiectului vor fi astfel introduse în premieră în România tehnici imagistice complexe, de tipul tomografiei cu emisie de pozitroni în combinaţie cu tomografia computerizată (PET-CT), respectiv a rezonanţei magnetice (MRI), colonoscopiei virtuale MR şi colangio-pancreatografiei prin rezonanţă magnetică (MRCP). Combinaţia dintre metodele endoscopice state-of-the-art, respectiv PET-CT si MRI-3T va fi unicat in Romania, permiţând realizarea de cercetări interdisciplinare în domeniul cancerelor digestive. Sistemul PET-CT, folosit ca un standard de aur de oncologie

3 gastroenterologică va fi unicat în sistemul public din România România. Mai multe proceduri endoscopice (autofluorescență, endomicroscopie confocală laser, ecoendoscopie cu substanță de contrast, precum și proceduri hibride, etc.) au fost sau vor fi de asemenea efectuate în premieră în România, pe perioada derulării proiectului (3 ani) sau în perioada post-implementare (5 ani). Dintre indicatorii proiectului au fost deja îndepliniţi cei legaţi de realizarea unei construcții noi și de amenajarea spațiilor în construcții existente, prin crearea a 8 laboratoare noi și amenajarea a 25 de laboratoare și spații suport existente, respectiv achiziționarea de 10 echipamente de cercetare-dezvoltare de peste EUR, din totalul de 64 echipamente achiziționate, inclusiv IT. Temele de cercetare abordate pe perioada de implementare a proiectului au condus deja la câștigarea de noi proiecte în competițiile internaţionale sau naționale cu evaluare internațională, lansate de Consiliul Național al Cercetării Științifice în perioada de finalizare a proiectului ( ), incluzând 2 proiecte europene FP7 (în parteneriat), 1 proiect Capacități (European Research Council like, de tip Grant Suport), 2 proiecte Idei (din care unul cu director din străinătate) și respectiv 2 proiecte Parteneriate (ca și conducător de proiect). Proiectul TARGET va permite crearea a 28 de locuri de muncă noi, iar 15 locuri de muncă existente vor fi menținute. Au fost deja atrași în proiectele câștigate în cadrul Centrului de Cercetare în Gastroenterologie și Hepatologie, 2 cercetători din străinătate, de la Harvard University și respectiv University of New Mexico, USA. Nu în ultimul rând, activităţile din cadrul centrului de cercetare vor permite şi efectuarea de servicii medicale de înaltă performanţă şi elaborarea de programe cu acces larg pentru categorii defavorizate ale populaţiei: bătrâni, şomeri, etc.

4 Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova CUPRINS COMPARTIMENT GASTROENTEROLOGIE Laborator de Autofluorescenta Endoscopica (AFI) Laborator de Endoscopie Ultrasonografica (EUS) Laborator de Endomicroscopie Confocala Laser (CLE) Laborator de Tomografie cu Coerenţă Optică (OCT) Laborator de Cromoendoscopie cu Magnificatie (MCE) Laborator de Bronhoscopie şi Ecobronhoscopie Laboratorul de Enteroscopie cu Videocapsulă şi Balon (VCE) COMPARTIMENT HEPATOLOGIE Laborator de Elastografie Ultrasonografică (RSE) Laborator de Sonografie Virtuală în Timp-Real (RVS) Laborator de Ecografie cu Contrast (CEUS) COMPARTIMENT PATOLOGIE MOLECULARĂ Laborator de Anatomie Patologică Laborator de Imunofluorescenţă şi Analiză Computerizată a Imaginii Laborator de Microdisecţie laser, citologie şi imunocitochimie Laborator de Genomică Laborator de Culturi celulare şi Citogenetică COMPARTIMENT IMAGISTICĂ Laborator de Imagistică prin Rezonanţă Magnetică (MRI) Laborator de Imagistică de fuziune (PET-CT) Laborator de Radiologie Digitală şi Endoscopie intervenţională (DRX)

5 Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie a fost înfiinţat în 2005, fiind acreditat de către CONSILIUL NAŢIONAL AL CERCETĂRII ŞTIINŢIFICE DIN ÎNVĂŢĂMÂNTUL SUPERIOR (CNCSIS). Centrul este constituit în cadrul Universităţii de Medicină şi Farmacie Craiova, România, având menirea de a conglomera şi stimula cercetările din cadrul instituţiei, cu scopul final de a îmbunătăţi componenta de cercetare, dezvoltare şi inovare, dar şi de a oferi servicii diagnostice de înaltă performanţă. Scopul Centrului de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie este de a ameliora managementul bolilor digestive (în special al cancerelor digestive) prin cercetări interdisciplinare, diagnostic precoce şi tratament individualizat. Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie este recunoscut la nivel naţional şi internaţional pentru excelenţă ştiinţifică şi publicarea a multiple studii, concentrate în special asupra cancerului digestiv. ORGANIZAREA COMPARTIMENTELOR CENTRULUI DE CERCETARE ÎN GASTROENTEROLOGIE ŞI HEPATOLOGIE Compartiment Gastroenterologie Compartiment Hepatologie Compartiment Patologie Moleculară Compartiment Imagistică 7

6 Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova COMPARTIMENT GASTROENTEROLOGIE LABORATORUL DE AUTOFLUORESCENŢĂ ENDOSCOPICĂ (AFI) La Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie din Craiova a fost instalat în 2008 (în premieră în România) un sistem complex de autofluorescenţă endoscopică. Autofluorescenţa endoscopică a fost introdusă recent ca o metodă de screening pentru leziunile neoplazice ale tractului digestiv (displazie severă, cancer esofagian şi gastric precoce, cancer colorectal precoce etc.). Principiul autofluorescenţei este bazat pe interacţiunea dintre lumina cu o anumită lungime de undă şi fluoroforii din ţesuturi. Detecţia leziunilor prin autofluorescenţă depinde de schimbările în concentraţia diferiţilor fluorofori, modificările arhitecturale tisulare sau ambele, incluzând alterarea grosimii mucoasei sau circulaţiei sangvine care pot afecta intensitatea fluorescenţei. Laboratorul oferă în mod curent proceduri de diagnostic de înaltă performanţă, cum ar fi: Examinări endoscopice eso-gastro-duodenale trimodale: examinare în lumină albă cu magnificaţie, autofluorescenţă endoscopică, mod Narrow Band Imaging. Biopsii prelevate endoscopic din leziunile eso-gastro-duodenale şi colorectale Proceduri terapeutice complexe: polipectomii şi rezecţii endoscopice de mucoasă. Ligaturi de varice esofagiene şi hemostază endoscopică în hemoragiile digestive. 8

7 Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie Toate aceste proceduri sunt completate cu analiza biopsiilor prin examene complexe histologice şi imunohistochimice. Medicii şi cercetătorii Centrului de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie din Craiova au la dispoziţie un sistem instalat în premieră în România: Linie de endoscopie Olympus Lucera încorporează funcţii multiple care folosesc examinări cu spectru de lumină variabil, în plus faţă de examinările convenţionale în lumină albă şi mod de înaltă rezoluţie (HDTV). Cele trei modalităţi de examinare sunt endoscopia cu lumină albă şi magnificaţie (zoom), modul Narrow Band Imaging (NBI) şi Autofluorescenţă Endoscopică. Avantajul major al modului NBI este reprezentat de vizualizarea mai bună a pattern-ului capilar şi texturii mucoasei (pit pattern). În plus, utilizarea autofluorescenţei endoscopice permite vizualizarea în culori diferite a leziunilor precoce (displazie severă, cancer gastric precoce etc.), comparativ cu mucoasa normală. Sistem de coagulare în plasma argon (APC) tip Erbe APC 2 care permite coagularea rapidă şi sigură a unor suprafeţe mari, cu penetrabilitate mică şi implicit risc de perforaţie mic, obţinut printr-o procedură non-contact cu aplicare axială, radială şi laterală. 9

8 Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova 10 LABORATORUL DE ENDOSCOPIE ULTRASONOGRAFICĂ (EUS) Activitatea Laboratorului de Endoscopie Ultrasonografică (EUS) a început în 2001, utilizând un sistem digital linear ecoendoscopic de înaltă rezoluţie. În cadrul Centrului de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie au fost înregistrate multiple premiere, în privinţa diagnosticului şi a tratamentelor folosite. Astfel, au fost utilizate, de-a lungul anilor: elastografia EUS, endoscopia ultrasonografică cu substanţă de contrast de generaţia a II-a, drenajul ghidat ecoendoscopic al pseudochisturilor pancreatice, neuroliza de plex celiac ghidată ecoendoscopic etc. Multe dintre cazurile ilustrative şi procedurile efectuate sunt descrise în Atlasul de Ecoendoscopie Liniară ( găzduit de web-serverele Universităţii de Medicină şi Farmacie din Craiova. Laboratorul oferă în mod curent proceduri de diagnostic de înaltă performanţă, cum ar fi: Examinări cu miniprobe ecoendoscopice de înaltă rezoluţie şi înaltă frecvenţă Examinări de ecoendoscopie liniară, inclusiv în mod Doppler color, examinări cu substanţă de contrast sau elastografie ecoendoscopică Puncţie fină aspirativă sau puncţie biopsie cu ac gros ghidate ecoendoscopic în formaţiunile suspecte (formaţiuni tumorale, ganglioni etc.) Proceduri terapeutice ghidate ecoendoscopic (drenaj de pseudochisturi, neuroliză de plex celiac etc.) Toate aceste proceduri sunt completate cu analiza imediată a eşantioanelor prelevate prin citologie şi imunocitochimie, în prezenţa unui citopatolog.

9 Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie Medicii şi cercetătorii Centrului de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie din Craiova au la dispoziţie sisteme de ultimă generaţie, extrem de performante şi fiabile: Sistemele de ultrasonografi Hitachi EUB 8500 şi Hitachi Preirus Hi Vision, utilizate cu succes in domenii precum medicina internă, oncologie, gastroenterologie şi hepatologie, inclusiv prin examinări 3D, Doppler color şi power Doppler, respectiv de tipul elastografiei. SonoElastografia permite evaluarea durităţii (compresibilităţii) ţesuturilor fiind recent utilizată pentru diagnosticul diferenţial al formaţiunilor benigne şi maligne (tumori pancreatice, ganglioni etc.) Ecograful Hitachi EUB 8500 este dotat cu un modul combinat de ecografie - tomografie computerizată / rezonanţă magnetică (Real-time Virtual Sonography), care permite examinarea în timp real a formaţiunilor tumorale hepatice pentru efectuarea în condiţii de siguranţă a procedurilor intervenţionale. Ambele sisteme de ultrasonografie permit, de asemenea, examinarea cu substanţă de contrast de generaţia a II-a, cu obţinerea unor rezultate comparabile examinărilor computer tomografice. La rândul său, sistemul Hitachi este cuplat la videoendoscopul linear Pentax EG 3870 UTK care furnizează un câmp lărgit de vizualizare, cu o calitate a imaginii mult îmbunătăţită, permiţând şi efectuarea puncţiilor ghidate ecoendoscopic, respectiv a manevrelor terapeutice. Procesorul de miniprobe Fujinon permite vizualizarea structurilor mai mici de 1-2 cm (având rol important în depistarea precoce a cancerului esofagian şi gastric, respectiv în examinări intraductale la nivelul sistemului biliar şi pancreatic). 11

10 Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova LABORATORUL DE ENDOMICROSCOPIE CONFOCALĂ LASER (CLE) Endomicroscopia confocală laser este o tehnică recent introdusă care permite examinarea la nivel celular şi subcelular a structurilor mucoasei tubului digestiv în timpul examinării endoscopice. Principiul endomicroscopiei confocale laser este bazat pe integrarea unui microscop confocal laser în extremitatea distală a unui endoscop convenţional. În timpul examinării endomicroscopice se foloseşte o rază laser care generează o unda de excitaţie de 488 nm, permiţând obţinerea de secţiuni optice tisulare de 7 μm cu o rezoluţie laterală de 0,7 μm şi o penetraţie între 0 si 250 μm. Astfel, se pot obţine imagini histologice in vivo cu posibilitatea aprecierii detaliilor celulare. Agenţii de contrast cel mai des utilizaţi sunt reprezentaţi de fluoresceina sodică cu utilizare intravenoasă şi acriflavina care se aplică topic la nivelul suprafeţei examinate. Impactul clinic major este oferit de posibilitatea diagnosticului in vivo al leziunilor maligne şi, totodată, de posibilitatea prelevării de biopsii ţintite din zonele cele mai semnificative pentru diagnostic pentru o examinare anatomopatologică ulterioară. 12

11 Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie Endomicroscopia confocală laser are aplicaţii clinice multiple: diagnosticul esofagului Barrett, leziunilor premaligne şi maligne esofagiene diagnosticul in situ al H. Pylori, leziunilor premaligne şi maligne gastrice diagnosticul diferenţial al polipilor hiperplazici şi adenomatoşi supravegherea endoscopică a colitei ulcerative şi bolii Crohn depistarea precoce a cancerului colorectal. Studiile recente privind aplicaţiile utilizării anticorpilor marcaţi cu agenţi de contrast au conturat un nou domeniu: imunoendoscopia. Astfel, în curând va fi posibil studiul in vivo al expresiei anumitor markeri cu impact prognostic la nivelul leziunilor depistate prin endomicroscopie [TNFa în bolile inflamatorii intestinale, CD117 (c-kit) ca predictor al răspunsului la imatinib la pacienţii cu tumori stromale gastrointestinale, EGFR la pacienţii cu cancer colorectal pentru aprecierea răspunsului la tratamentul cu cetuximab etc]. Endomicroscopia confocală laser va juca, cu siguranţă, un rol din ce în ce mai mare în cadrul procedurilor endoscopice din centrele de referinţă din lume prin marele avantaj pe care îl oferă - un diagnostic imediat şi de certitudine. Tehnica este disponibilă din 2008 în Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie din Craiova. 13

12 Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova LABORATOR DE TOMOGRAFIE CU COERENŢĂ OPTICĂ (OCT) 14 Tomografia Optică Coerentă (OCT) este o metodă imagistică bazată pe interacția radiației optice provenită de la o sursă optică de coerență redusă cu obiectul investigat, interacție realizată într-un montaj de tip interferențial. Aparent similare unor măsurători ecografice, studiile OCT nu implică însă analiza directă (ca în cazul ecografiei) a intensitații semnalului obținut după reflexia (optică) pe ţesutul studiat; metoda implică analiza figurii de interferență obținute în urma interacției între fascicolul reflectat şi un fascicol de referință provenit de la aceeași sursă. Această diferență în abordare se datorează faptului că propagarea directă a semnalului optic este mult mai rapidă decât în cazul mecanic (ultrasunete). Avantajele metodelor OCT includ o rezoluție de ordinul micronilor, folosirea radiației optice-neinvazive precum şi posibilitatea decuplării rezoluției axiale de cea laterală. Aparatura folosită în masuratori de tip OCT este compusă în general dintr-o sursă de radiație optică parțial coerentă, un montaj interferențial și un sistem de detecție. Acestora le este adăugat un sistem software de analiză, interpretare și reprezentare sub formă de imagini a semnalelor înregistrate. Măsuratorile de tip OCT în domeniul medical sunt în faza de studii (cu excepția domeniului oftalmologic). Laboratorul încearcă stabilirea unei legături între măsurătorile de tip ecoendoscopic și cele de tip OCT în scopul dezvoltării unor tehnici hibride care să permită o mai bună analiză a leziunilor de tip tumoral din tractul gastrointestinal. Aparatul folosit în măsurători este THORLABS OCS1300SS de tip SS-OCT și asigură efectuarea de măsurători de tip OCT și Doppler-OCT (D-OCT) la o lungime de undă medie de 1320nm cu o rezoluție de 10μm oferind posibilitatea achiziţionării de imagini 2D şi 3D în timp real ale unor probe biologice în vivo sau în-situ.

13 Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie LABORATOR DE CROMOENDOSCOPIE CU MAGNIFICAŢIE (MCE) Cromoendoscopia clasică implică utilizarea topică de coloranţi vitali (soluţie Lugol, albastru de metil, etc.) în scopul îmbunătăţirii acurateţii diagnostice a examinărilor endoscopice. Folosită împreună cu endoscopia cu magnificaţie permite vizualizarea detaliată a mucoasei, îmbunătăţind astfel diagnosticul precoce al leziunilor premaligne şi maligne de la nivelul tractului gastrointestinal. În Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie din Craiova dispunem de posibilitatea folosirii endoscopiei cu magnificaţie combinată cu tehnici imagistice moderne ca narrow band imaging şi I-scan care realizează o cromoendoscopie optică, care nu mai necesită folosirea coloranţilor vitali. Narrow band imaging (NBI), endoscopia cu lumină în bandă îngustă, este o tehnică imagistică care permite vizualizarea patternului mucoasei (pit-pattern), precum şi a vaselor din mucoasă şi submucoasă, prin folosirea caracteristicilor spectrului luminos. Performanţele NBI sunt mult îmbunătăţite atunci când este combinată cu examinarea cu magnificaţie (ME-NBI), rezultate similare obţinându-se şi cu examinarea în mod I-scan. Aceaste tehnici permit analiza morfologică a epiteliului mucoasei şi a arhitecturii superficiale anormale (pit-pattern) din leziunile neoplazice, însă cea mai importantă contribuţie este reprezentată de vizualizarea clară a reţelei vasculare din mucoasă, fiind utilă în special în evaluarea procesului de neoangiogeneză anormală din displazia de grad înalt şi cancerul precoce. În practică, folosirea examinării în mod narrowband imaging cu magnificaţie sau I-scan este indicată în special la pacienţii cu factori de risc sau pentru supravegherea leziunilor preneoplazice de la nivelul esofagului, stomacului şi colonului (esofag Barrett, gastrită atrofică, metaplazie intestinală, displazie, polipi, boli inflamatorii intestinale). 15

14 Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova LABORATORUL DE BRONHOSCOPIE ŞI ECOBRONHOSCOPIE (EBUS) 16 Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie are in dotare un videobronhoscop flexibil de ultimă generaţie (Olympus EVIS EXERA II BF-Q180) care permite examinări diagnostice videobronhoscopice : vizualizarea cu un grad ridicat de precizie şi fidelitate crescută a arborelui bronşic, de la trahee până la bronşiile de calibru mic; prelevarea de biopsii de mucoasă bronşică, biopsii tumorale sau transbronşice fără riscuri majore; asocierea cu funcţia NBI (Narrow Band Imaging), putându-se observa astfel structurile vasculare de la nivelul submucoasei arborelui bronşic; asocierea unei game largi de instrumentar la nivelul canalului standard de 2.0 mm diametru pentru efectuarea procedurilor de terapie endobronşică, în asociere şi cu utilizarea unui sistem de coagulare în plasma argon (ERBE). Este de asemenea disponibil, în premieră în România, un sistem complex de ecobronhoscopie (bronhoscopie ultrasonografică), cea mai nouă metoda minim invazivă de diagnosticare şi stadializare a tumorilor mediastinale. Astfel, ecobronhoscopul Olympus EVIS EXERA BF UC160F este un aparat miniaturizat care are următoarele caracteristici: endoscopul de 6 mm diametru prezintă la capătul distal o sondă ultrasonografică liniară care oferă o imagine continuă în mod B şi posibilităţi Doppler color şi power Doppler în vederea identificării structurilor vasculare proximal de sonda ultrasonografică şi la 30 de axul lung al bronhoscopului se află camera video şi canalul de biopsie prin care se poate introduce acul de puncţie fină aspirativă un balon din latex este plasat peste sonda ultrasonografică, în care se introduce ser fiziologic, pentru a realiza o interfaţă între sondă şi peretele traheal.

15 Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie Specialiştii Centrului de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie din Craiova pot realiza astfel, investigaţii ecobronhoscopice pentru : diagnosticarea invaziei tumorale în bronhiile centrale şi periferice evaluarea staţiilor ganglionare paratraheale (staţiile 2 şi 4), subcarinale (staţia 7), hilare şi intrapulmonare (staţia 10 şi 11) Mai mult, metoda poate fi combinată cu ecoendoscopia (endoscopia ultrasonografică), fiind accesibile astfel tumorile şi staţiile ganglionare cu localizare în mediastinul superior şi inferior, cu excepţia localizărilor anterioare de trahee: lateral de trahee (staţia 2 şi 4), fereastra aorto-pulmonară (staţia 5), paraaortic (staţia 6), subcarinal (staţiile 7) şi paraesofagian (staţia 8 şi 9) Combinaţia celor două metode (EUS + EBUS) permite realizarea unei mediastinoscopii complete. Efectuarea ecobronhoscopiei cu puncţie fină aspirativă în combinaţie cu ecoendoscopia cu puncţie fină aspirativă determină creşterea acurateţei evaluării tumorilor mediastinale, cu scăderea proporţiei de rezultate fals negative. Consecinţa directă constă în scăderea numărului de investigaţii invazive şi implicit scăderea morbidităţii şi mortalităţii determinate de intervenţiile chirurgicale inutile. 17

16 Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova LABORATORUL DE ENTEROSCOPIE Enteroscopia şi video capsula endoscopică sunt două proceduri de diagnostic extrem de utile în evaluarea patologiei intestinului subţire. Explorarea intestinului subţire a fost, până la apariţia sistemelor de enteroscopie şi a videocapsulei, foarte greu accesibilă clinicienilor, diagnosticul fiind stabilit adesea prin procedee chirurgicale. Sistemul de videocapsulă endoscopică Explorarea cu videocapsulă este extrem de uşor de efectuat pentru pacient, fiind o metodă neinvazivă. Practic, dispozitivul are forma unei capsule de dimensiuni mici, de unică folosinţă, care este înghiţită şi care preia imagini la fiecare 2 secunde de la nivelul tubului digestiv pe o durată de aproximativ 8 ore. Imaginile sunt preluate de un computer şi sunt ulterior examinate de un clinician, putânduse stabili un diagnostic cu acurateţe ridicată, evitându-se astfel, efectuarea de intervenţii chirurgicale în scop diagnostic. Deoarece are unele avantaje faţă de examinarea endoscopică a intestinului subţire (nu necesită sedare sau insuflare de aer, este nedureroasă şi neinvazivă etc.) este uşor acceptată de pacienţi. Este în prezent metoda de primă intenţie în evaluarea în scop diagnostic a pacienţilor cu patologie a intestinului subţire. Videocapsula endoscopică are şi unele contraindicaţii: stenozele intestinale, intervenţii chirurgicale anterioare majore, tulburări de deglutiţie, pacemaker cardiac sau alt dispozitiv electromedical implantat, fistulele digestive etc. 18

17 Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie Deşi videocapsula endoscopică este o metodă excepţională, ea are însă şi inconvenientul imposibilităţii prelevării de biopsii, dar şi al efectuării unor manevre terapeutice. Prelevarea de probe este absolut necesară stabilirii unui diagnostic histologic care să confirme suspiciunea unei boli. Astfel, s-a dezvoltat o altă explorare deosebit de utilă în diagnosticul şi tratamentul afecţiunilor intestinului subţire: enteroscopia cu balon. Sistemul de videocapsulă disponibil în Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie se numeşte EndoCapsule şi este furnizat de firma Olympus. Videocapsula are 11/26 mm, preia 2 imagini pe secundă şi durata de viaţă a bateriei este de 8 ore. Sistemul de enteroscopie Enteroscopia cu balon a adus beneficii majore în diagnosticul şi tratamentul afecţiunilor intestinului subţire, fiind în prezent disponibilă în marile centre de gastroenterologie din lume. În România, tehnica este la început de drum, Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie din Craiova fiind un deschizător de drumuri în domeniu, odată cu achiziţionarea sistemului de enteroscopie cu balon Olympus în anul Enteroscopia cu balon este o tehnică endoscopică nouă care permite examinarea parţială sau totală a intestinului subţire. Enteroscopul se introduce prin cavitatea bucală şi avansează prin esofag, stomac, duoden şi porţiunile distale ale intestinului subţire. Manevra poate fi dureroasă şi presupune insuflarea de aceea se efectueză în general cu sedare şi analgezie, sub supravegherea unui medic anestezist. Avantajul său faţă de capsula endoscopică este că permite efectuarea de manevre terapeutice şi prelevare de biopsii, evitându-se astfel intervenţiile chirurgicale inutile. Recent a fost introdus la Craiova şi sistemul de enteroscopie spirală, care permite evaluarea completă a intestinului subţire. 19

18 Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova COMPARTIMENT HEPATOLOGIE LABORATOR DE ELASTOGRAFIE ULTRASONOGRAFICĂ (RSE) Elastografia ultrasonografică a fost recent dezvoltată pentru aplicaţii clinice, permiţând analiza în timp real a comportamentului dinamic al ţesuturilor. Metoda dezvăluie proprietăţile fizice ale structurilor interne, caracterizând diferenţa de duritate între ţesuturile patologice şi normale. Aceste informaţii pot fi obţinute în timpul scanării ecografice în timp real, rezultatele fiind relevate prin suprapunerea color peste imaginea alb-negru a ecografiei convenţionale. Aplicaţiile de ultimă oră ale elastografiei ultrasonografice disponibile în Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie Craiova sunt: aprecierea stadiului fibrozei hepatice la pacienţii cu boli hepatice cronice diagnosticul şi caracterizarea formaţiunilor focale localizate la nivelul ficatului. 20

19 Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie MODULUL DE SONOGRAFIE VIRTUALĂ ÎN TIMP REAL Modulul Real-time Virtual Sonography (RVS) permite afişarea simultană, în timp-real, a imaginii ecografice, împreună cu imaginea corespondentă de computer tomografie (CT) sau rezonanţă magnetică (RM), reconstruite dintr-un set multiplanar virtual 3D obţinut pe baza unui volum stocat anterior în format DICOM. Folosind un sensor de poziţie magnetică, plasat pe sonda ecografică, modulul oferă astfel afişarea simultană a secţiunii CT sau RM care corespunde imaginii ultrasonografice reale. Modulul RVS oferă un ghidaj imagistic excepţional pentru procedurile intervenţionale, în special pentru efectuarea ablaţiei cu radiofrecvenţă. Modulul oferă o afişare mai bună a anatomiei ultrasonografice, permiţând plasarea exactă a acelor şi monitorizarea precisă a tratamentului. Compatibilitatea cu modul de examinare cu index mecanic scăzut, cu substanţă de contrast de generaţia a II-a permite o examinare mai bună a morfologiei şi a vascularizaţiei leziunilor focale hepatice, în special cele care sunt mai greu vizibile în timpul ecografiei convenţionale în mod B. Beneficiile modulului de ecografie virtuală în timp real includ, astfel, creşterea încrederii diagnostice, comparaţia directă a leziunilor folosind diferite modalităţi imagistice şi monitorizarea precisă a tratamentelor intervenţionale, cu expunere mai mică la radiaţii. 21

20 Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova LABORATOR DE ECOGRAFIE CU CONTRAST (CEUS) Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie din Craiova este unul dintre primele centre din România unde se efectuează ecografie cu substanță de contrast. Metoda necesită un aparat ecografic foarte performant și constă în administrarea unei substanțe de contrast ce ajunge la nivelul vaselor sangvine și îmbunătățește mult diagnosticul obținut prin ecografia clasică. Substanța de contrast ecografic este un amestec de bule de gaz înglobate într-o capsulă fosfolipidică care se elimină prin respirație, de aceea metoda se poate realiza și la pacienții cu insuficiență hepatică și renală. Substanța de contrast ecografic determină mai puține reacții alergice, deoarece, spre deosebire de contrastul folosit la tomografia computerizată, nu contine iod. Indicațiile ecografiei cu contrast Ecografia cu contrast işi găsește aplicabilitate în patologia pancreatică, hepatică, splenică, de sân, tiroidă, cord sau prostată. Metoda este folosită cu rezultate foarte bune în diagnosticul tumorilor hepatice. Prin ecografie cu contrast se poate face diferențierea între tumorile benigne și cele maligne. Deasemenea, pentru pacienții cu patologie oncologică, metoda este folosită pentru urmărirea eficienței tratamentului și pentru depistarea metastazelor hepatice. Deoarece nu foloseşte raze X, metoda este ideală pentru copii, cu aplicație în special în diagnosticul refluxului vezico-ureteral sau depistarea complicațiilor traumatice. Tot datorită lipsei iradierii, ecografia cu contrast poate fi folosită pentru urmărirea periodică a pacienților cu patologie oncologică, în vederea depistării metastazelor hepatice. Contraindicațiile ecografiei cu contrast Ecografia cu contrast nu se efectuează la pacienții cu insuficiență respiratorie severă, la pacienții cu infarct miocardic recent, la gravide sau femei care alăptează. 22 Principalele avantaje ale ecografiei cu contrast: Rapidă, se efectuează imediat după ecografia standard Neiradiantă, repetabilă Mai ieftină și cu mai puține reacții alergice comparativ cu tomografia și rezonanța magnetică Poate fi efectuată la pacienții cu contraindicație pentru tomografie sau rezonanță magnetică: pacienți cu insuficiență renală, hepatică sau cu implanturi metalice Performanțe asemănătoare tomografiei sau rezonanței magnetice.

21 Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie COMPARTIMENT PATOLOGIE ŞI GENETICĂ MOLECULARĂ LABORATOR DE ANATOMIE PATOLOGICĂ Laboratorul de Histopatologie al Departamentului de Anatomie Patologică al UMF din Craiova, partener al Centrului de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie, este dotat cu tot echipamentul şi consumabilele necesare pentru fixarea, procesarea şi colorarea blocurilor de ţesut în vederea diagnosticului histopatologic. De asemenea, oferă un real suport cercetărilor în domeniu prin detalierea la nivel celular a modificărilor apărute în cursul diverselor boli şi a experimentelor ştiinţifice efectuate. Principalele etape ale acestui proces sunt susţinute de baza materială incluzând mijloacele fixe, după cum urmează: Masa de disecţie dedicată cu sursa de apă şi hotă; Băi de fixare în formalină tamponată 4%; Băi de deshidratare şi clarificare (alcool şi xilen); Termostat de parafinare şi staţie de turnare a blocurilor de parafină; Microtom rotativ Microm; Microtom rotativ complet automatizat Leica RM2255; Băi şi cuve de deparafinare, rehidratare şi colorare; Baie de apă Memmert cu platformă de agitare, etuvă Memmert, shaker Heidolph Titramax 1000, balanţă analitică electronică; ph-metre; pipete şi micropipete auto mate; agitator magnetic, aparat frigorific pentru păstrare piese şi reactivi; Microscoape Nikon ECLIPSE E200, kituri de colorare histochimică: Generale pentru ţesuturile conjunctive: hematoxilină-eozină, tricromice (Masson, Goldner-Szekelly), policrome (Azan), pentru mastocite (albastru de toluidină), pentru ami loid (roşu de Congo), pentru depozitele de fier (Albastru de Prussia) Specifice pentru mucopolizaharide: mucicarmin, PAS, albastru Alcian Specifice pentru lipide (Sudan III, Sudan IV, Acid osmic); Alte coloraţii: impregnaţie argentică, Cresyl violet, Luxol fast blue, May-Grunwald-Giemsa. 23

22 Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova 24 LABORATOR DE IMUNOFLUORESCENŢĂ ŞI ANALIZĂ COMPUTERIZATĂ A IMAGINII Centrul pentru Studii de Morfologie Microscopică şi Imunologie din Craiova, partener al Centrului de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie, este dotat cu tot echipamentul şi consumabilele necesare realizării unor imunomarcări fluorescente, precum şi de un sistem performant de microscopie și analiză imagistică. Detecţia imunofluorescentă a unor anticorpi primari neconjugaţi sau biotinilaţi se poate face cu anticorpi secundari etichetaţi direct cu fluorofori din seria AlexaFluor (Invitrogen), streptavidine fluoresceinate (Invitrogen), sau tiramida fluoresceinată (Perkin Elmer), în funcţie de gradul de amplificare necesară a semnalului pentru o detecţie optimă. Laboratorul de analiză imagistică asistată de calculator se bazează pe: un microscop Nikon Eclipse 55i prevăzut cu obiective plan-acromate, camera digitală color cu răcire Peltier CCD DS-Fi1, 5Mp (Nikon) şi soft de analiză imagistică Nikon NIS Elements BR; un microscop de cercetare Nikon 90i dotat cu obiective plan-fluor; camera digitală cu răcire Rolera XR (Qimaging, Canada), cuburi de filtre pentru fluorescenţă, şi soft de analiză imagistică, deconvoluţie şi reconstrucţie 3D Image ProPlus AMS 7 (Media Cybernetics, USA). Majoritatea funcţiilor microscopului 90i sunt acţionate de servomecanisme comandate de un modul al pachetului IPP AMS, astfel încât achiziţia de imagini se face automatizat pe fiecare canal în parte, cu salvarea în final a imaginilor compozite. Stepper-ul piezoelectric care asigură mişcarea preparatului pe axa Z cu un pas de minimum 0,1µm permite preluarea de imagini în planuri optice (adâncimi) diferite ale preparatului. pachetul Image ProPlus AMS 7, care este unul dintre cele mai avansate softuri de analiză imagistică disponibile la ora actuală, conţine module dedicate pentru măsurători bidimensionale, cel mai performant algoritm de deconvoluţie existent (implementat în modulul Sharp Stack), şi instrumente dedicate de reconstrucţie 3D şi măsuratori volumetrice (3D Constructor).

23 Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie LABORATOR DE MICRODISECŢIE LASER, CITOLOGIE ŞI IMUNOCITOCHIMIE În cadrul examinărilor de ecoendoscopie, se pot obţine prin puncţie fină aspirativă probe din leziuni mici (< 10 mm) situate în diferite segmente ale aparatului digestiv dar şi de la nivelul adenopatiilor regionale. Laboratorul dispune de un sistem de microdisecţie laser şi o linie de citologie în monostrat. Astfel, produsul obţinut prin punctie aspirativă poate fi prelucrat în mai multe moduri: Prin etalarea direct pe lama de sticla obţinându-se frotiuri; Prin prelucrare în mediu lichid în cadrul CCGH există un sistem semiautomat de prelucrare în mediu lichid, intitulat CYTOSCREEN. Metoda CYTOSCREEN are la bază patru etape principale şi anume: prelevarea probei în mediul lichid, citirea automată a densităţii celulare a probei cu ajutorul unui nefelometru, depunerea celulelor în monostrat pe lama de sticlă, citirea şi interpretarea frotiurilor, cu posibilitatea examinării de preparate cvasiidentice obţinute ulterior din acelaşi produs de prelevare (screening morfologic) sau a efectuării de teste complementare. Nefelometrul permite evaluarea automată cu ajutorul laserului a materialului tisular de examinat şi recoltarea ţintită de material tisular pentru tehnicile de patologie moleculară. Prin includere la parafina cu obţinerea blocurilor celulare. De asemenea, în cadrul laoboratorului este posibilă efectuarea a multiple coloraţii imunocitochimice care cresc acurateţea diagnostică. 25

24 Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova LABORATOR DE GENOMICĂ 26 Departamentul de Genetică Moleculară din cadrul Centrului de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie (CCGH) oferă studentilor, medicilor rezidenţi si doctoranzilor posibilitatea instruirii la un inalt nivel academic. Preocuparea permanentă a membrilor departamentului este de a găsi, prin intermediul cercetărilor vizând nivelul molecular, rezolvarea unor probleme cu care se confruntă medicina actuală. De asemenea, pe lângă oferta educaţională şi implicarea în cercetare, Departamentul de Genetică Moleculară, prin laboratoarele sale, efectuează o gamă variată de investigaţii asupra acizilor nucleici. Colaborarea permanentă cu Departamentul de Gastroenterologie din cadrul CCGH şi prin intermediul acestuia cu alte 5 departamente cu aceeaşi specialitate s-a concretizat prin acceptarea spre finanţare a peste 10 proiecte de cercetare axate pe evaluarea patologiei maligne din sfera digestivă. Pe lângă achiziţionarea unor sisteme moderne de analiză a acizilor nucleici aceste proiecte au permis atât specializarea membrilor departamentului în centre de cercetare importante în Europa cât şi demararea unui amplu proces de recoltare de probe biologice în vederea constituirii unei bănci de ADN si ARN. Echipamente utilizate: Sistem automat de secvențiere Beckman Coulter CEQ 8000 Sistemul automat de secvenţiere detectează cu o fotodiodă lungimea de undă indusă de 2 diode laser prin 4 filtre. Sistemul de operare conţine funcţii multiple pentru analiza ADN şi pentru simplificarea analizei şi interpretării datelor. Precizia funcţiei pentru colectarea datelor este de aproximativ 98%.

25 Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie Sistemul Real-Time PCR - RotorGene-Corbett 6200 HRM Unitatea HRM caracterizează ampliconii pe baza parametrilor de disociere (melting) printr-o tehnică similară analizei curbelor de topire dar oferind mult mai multe informaţii şi având numeroase aplicaţii. În cadrul laboratoarelor noastre sistemul este utilizat pentru evaluarea expresiei genice în diferite patologii, genotipare şi detecţia agenţilor patogeni. De asemenea Real-Time PCR termociclerul poate fi folosit pentru detectarea gradului de metilare ADN, scanare genică şi cercetări asupra miarn. Extractor automat - Maxwell 16 & Biofotometru Eppendorf Echipamentul este prevăzut cu afişaj digital pentru prezentarea protocoalelor de lucru şi a desfăşurării parametrilor programaţi. Este posibilă izolarea ADN, ARN şi proteine din orice tip de probă (sânge, ţesut) şi orice tip de specie (animal, vegetal, bacterian). Omogenizatoare de ţesut Mikro-dismembrator (Sartorius) & Heidolph Silent Crusher S Având în vedere că analiza completă a acizilor nucleici implică, în multe cazuri, o etapă iniţială de omogenizare Departamentul de Genetică Moleculară dispune de o moară cu bile Mikro-dismembrator (Sartorius) şi un omogenizator Heidolph Silent Crusher S. Aceste sisteme permit omogenizarea rapidă a probelor în condiţiile reducerii riscului degradării ADN, ARN şi proteinelor. În plus este evitată utilizarea unor enzime, metodă utilizată frecvent în liza celulară. Sistem de fotodocumentare G:Box Chemi HR (Syngene) Caracteristici: Capacitate de evaluare a greutăţii moleculare, a densităţii optice şi a intensităţii proteinelor şi a acizilor nucleici Capacitate de detecţie a probelor fluorescente, chemiluminscente sau cromogenice Transiluminare şi epi-iluminare atât pentru utilizarea luminii albe cât şi ultraviolete (UV) Capacitate de analiză cantitativă a imaginii de la nivel de picomol la femtomol pe geluri şi bloturi cu senzitivitate egală cu autoradiografia. 27

26 Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova LABORATOR DE CULTURI CELULARE ŞI CITOGENETICĂ 28 Laboratorul de culturi celulare conţine echipamente moderne care permit o gamă variată de experimente: iniţierea de culturi celulare primare, cultivarea şi menţinerea unor linii celulare, caracterizarea morfologică şi biochimică a celulelor; studierea mecanismelor senescentei şi apoptozei celulare; caracterizarea răspunsului celular; testarea efectului unor substanţe chimice în culturi de celule. Echipamente: hota microbiologică clasa II de siguranţa (Bio Activa Aquaria), hotă cu flux laminar vertical clasa III Biohazard (Aquaria), centrifugi şi microcentrifugi (Hettich), microscop inversat cu fluorescenţa cu cameră foto conectată la calculator (Olympus CKX41), balanţă (Kern), incubator cu CO2 (Sanyo), termostat (Raypa), microscop optic (Nikon), baie de apă (Raypa), criolocator, frigidere. Laboratorul de citogenetică este dotat cu echipamente de ultima generaţie care permit: identificarea simultană într-un singur test a mai multor modificări cromozomiale (Whole genome scanning), evaluându-se astfel sute de regiuni asociate cu multiple anomalii, rezoluţie extrem de înaltă, identificând anomalii submicroscopice; sistemul microarray împreună cu sistemul de cariotipare standard acoperă ca arie de investigare întregul genom (toţi cromozomii, de la nivelul microscopic până la polimorfisme mononucleotidice), prin combinarea tehnicii array CGH cu cariotiparea standard pot fi identificate inclusiv inversiile şi translocaţiile echilibrate;

27 Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie identificarea rapidă a situsurilor precise de legare a proteinelor caracteristice ADN factori de transcripţie, histone, polimeraze - din genomul ţintă, metilarea ADN, studiul expresiei genice accesarea unor baze de date dedicate prin programe specifice. Principalele echipamente: Linie microarray completa Nimblegen-Roche pentru CGH, CGX, chromatin immune precipitation onchip-chip CGS Descriere generală Scaner cu laser de mare sensibilitate, de achiziţie a datelor de fluorescenţă pe 2 canale de fluorescenţă şi procesare complet automată a imaginilor. Rezoluţia este flexibilă, limita de sensibilitate este de 2 microni. Scaner-ul este însoţit de programe pentru vizualizarea datelor, dar şi un program ce procesează datele în timp real. Sistem de hibridizare cu 4 module destinate realizării condiţiilor reproductibile de hibridizare sub control precis de temperatură şi agitare activă. Mixerele menţin pe poziţie şi agită activ lamele arrays pe durata hibridizării, în vederea creşterii semnalului şi a specificităţii. Uscător de microarrays pentru imagini de mare calitate cu fond rezidual minim, necesare CGH şi analiza expresiei genice. Sistemul este prevăzut cu autoîncărcător automat de 48 de lame, cititor cu cod de bare, autofocalizare şi autoachiziţie, pentru configuraţie complet neasistată. Sistem complet cariotipare standard care cuprinde: microscop optic Axio Imager.A2, cameră video AxioCam, staţie grafică Hp, software achiziţie şi prelucrare imagini. 29

28 Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova LABORATOR DE IMAGISTICĂ PRIN REZONANŢĂ MAGNETICĂ (MRI) Imagistica prin rezonanţă magnetică transformă algoritmul diagnostic prin sensibilitatea sa în studiul ţesuturilor moi normale şi patologice. COMPARTIMENT IMAGISTICĂ Metoda se bazează pe proprietatea protonilor de H+ plasaţi într-un câmp magnetic puternic (0,2-1,5T) şi excitaţi printr-o undă de radiofrecvenţă de a emite un semnal, care este tratat informatic şi convertit în imagine. Formarea imaginii presupune achiziţia de date şi respectiv, reconstrucţia. Preţul unui examen prin rezonanţă magnetică depinde de intensitatea câmpului magnetic al aparatului. Câmpul magnetic de 3T este util în IRM funcţional şi spectroscopie, dar este foarte scump şi rămâne încă de domeniul cercetării. IRM este este util în studiul morfologic dar şi funcţional (analiza funcţiilor cerebrale, difuziei şi perfuziei tisulare). 30

29 Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie Imagistica prin rezonanţă magnetică are şi în patologia organelor abdominale şi pelvine numeroase avantaje în comparaţie cu tomografia computerizată: este cea mai sensibilă metodă de diagnostic în bilanţul leziunilor hepatice difuze caracterizează şi diferenţiază corect între o leziune benignă şi una malignă din sfera abdominală/pelvină, prin utilizarea substanţelor de contrast cu specificitate celulară (hepatocitară sau pentru celulele Kupffer). colangiopancreatografia prin RM permite explorarea de o manieră neinvazivă a căilor biliare şi pancreatice. Examinarea prin rezonanţă magnetică are, însă, şi contraindicaţii absolute, valabile în cazul oricărui corp străin metalic introdus în organism: pacemaker cardiac implante cohleare anumite proteze valvulare cardiace stimulatoare de creştere osoasă clipurile sau coilurile pentru anevrismele arteriale Contraindicaţii relative ale explorării prin rezonanţă magnetică: pacienţi intens febrili cărora investigaţia poate să le crească şi mai mult temperatura corpului pacienţi necooperanţi, pacienţi comatoşi pacienţi cu mişcări necontrolate pacienţi claustrofobi femei gravide în primul trimestru de sarcină. 31

30 Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova 32 LABORATOR DE IMAGISTICĂ DE FUZIUNE (PET-CT) prin studiul distribuţiei spaţiale a radiofarmaceuticului injectat. Principiul metodei: Tomografia computerizata prin emisie de pozitroni (PET/CT) este, la ora actuală, unica tehnică imagistică medicală care furnizează informaţii funcţionale asupra diferitelor procese metabolice ale organismului. Aceste informaţii sunt obţinute Substanţa utilizată este o moleculă de glucoză (FDG) marcată printr-un izotop radioactiv (18F), care, după injectare, se distribuie în tot corpul şi, prin intermediul ei, primim informaţii referitoare la consumul de zahăr din ţesutul uman. Cantitatea moleculelor FDG administrate unui pacient este atât de redusă încât nu produce nici un efect în organism. Tomografia computerizată prin emisie de pozitroni este o tehnică imagistică indicată îndeosebi în domeniul oncologiei medicale, pentru: diagnostic precoce tumoral stadializare (cancer esofagian, gastric, colo-rectal, hepatic, pancreatic, tumori endocrine) identificarea recurenţelor tumorale postterapeutice evaluare posttratament chirurgical, chimioterapie sau/şi radioterapie Ţesutul tumoral este diagnosticat imagistic cu mare sensibilitate şi specificitate; localizat anatomic cu mare precizie şi rezoluţie. Regiuni dificil de evaluat imagistic (regiunea cervicală, mediastinul, abdomenul postchirurgical) pot fi examinate cu mare acurateţe. Examinarea PET/CT face posibilă detectarea unor focare tumorale mici de 2-3mm, în care acumularea FDG este de câteva ori mai mare decât în cazul ţesuturilor sănătoase învecinate. Avantajul cel mai mare al examenelor PET/CT este precizia cu care se stabileşte stadiul bolii, stadializarea cu mare sensibilitate a tumorilor, permiţând identificarea tuturor localizărilor tumorii în aceeaşi examinare. Acest rezultat, fără examenul PET/CT se poate obţine doar prin intermediul a numeroase alte metode de dignostic, unele invazive: US, Rtg, CT, RM, examen endoscopic, biopsie. Examinarea PET/CT este foarte utilă în stabilirea locului de luare a biopsiei, evidenţiind locul unde ţesutul tumoral este viabil şi cu metabolism activ. Acest aspect este deosebit de important în cazul tumorilor cerebrale, limfoamelor, determinărilor secundare pulmonare multiple. Examinarea PET/CT face posibilă evaluarea timpurie a eficienţei tratamentului oncologic, deoarece metabolismul ţesutului tumorii care reacţionează corespunzător la tratament scade considerabil faţă de ţesuturile cu reacţie necorespunzătoare. Prin evaluare timpurie se poate renunţa la terapia inutilă şi se poate alege o schemă alternativă de tratament. De asemenea, se poate depista dacă, ulterior tratamentului, nu au rămas tumori viabile în organism.

31 Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie LABORATOR DE RADIOLOGIE DIGITALĂ ȘI ENDOSCOPIE INTERVENȚIONALĂ (DRX) Laboratorul de Radiologie digitală şi endoscopie intervenţională este dotat cu sisteme moderne de radiologie (Siemens) şi endoscopie (Olympus) care să permită realizarea mai multor tipuri de proceduri. Colangiopancreatografia endoscopică retrogradă (ERCP) este o tehnică ce combină endoscopia şi fluoroscopia în timpul aceleiaşi proceduri. Iniţial ERCP a fost folosită mai mult ca metodă de diagnostic şi mai puţin în scop terapeutic, însă dezvoltarea extensivă a unei varietăţi de accesorii endoscopice a lărgit aplicaţiile sale. ERCP reprezintă o procedură ce necesită antrenament şi experienţă considerabilă pentru a putea fi folosită eficient şi în condiţii de siguranţă. Odată cu efectuarea primei ERCP, iar după implementarea papilosfincterotomiei endoscopice retrograde ca gest terapeutic definitiv, decompresie preoperatorie, manevră înaintea montării de stenturi bilio-pancreatice sau efectuată în scopul extracţiei de calculi biliari s-au conturat noi perspective în diagnosticarea şi tratamentul obstrucţiilor zonei biliopancreatice. Precizia diagnostică la fel ca şi randamentul terapeutic al ERCP au dus la o creştere considerabilă in ultimii ani al numărului acestui tip de intervenţii. Actual ERCP este utilizat în principal pentru a diagnostica şi trata patologia ductelor biliare sau pancreatice, incluzând litiază biliară, stricturi şi stenoze inflamatorii sau maligne, fistule etc. Plasarea endoscopică sub control radiologic de stenturi este utilizată paliativ cu succes pentru a trata obstrucţiile maligne sau benigne la diverse niveluri pe tractul digestiv. Aceste obstrucţii pot fi rezultatul creşterii unei tumori gastro-intestinale primare care să invadeze lumenul sau unei tumori de vecinătate care să producă compresie extrinsecă. Impactul clinic al aplicării de stenturi digestive este major permiţându-i pacientului să ingere alimente în cazul unei tumori stenozante esofagiene sau permit evitarea unei ocluzii intestinale în cazul unei tumori colorectale. 33