MEDII DE CULTURA suporturi materiale si nutritive care servesc la cultivarea bacteriilor amestecuri de substante care asigura cultivarea microorganismelor Scopuri Izolarea in cultura pura Identificare Diagnostic, tratament Producerea industriala a unor substante (prepararea vaccinurilor) Controlul sterilitatii sau incarcarcaturii microbiene a unor elemente de mediu (apa, alimente) Clasificarea mediilor de cultura Dupa consistenta: lichide solide semisolide Dupa provenienta: naturale sintetice Dupa compozitie si scop: simple complexe speciale 1
Clasificarea mediilor de cultura Medii complexe de utilitate generala: - uzuale - cu proteine native Medii speciale selective de imbogatire anaerobi teste biochimice Caracterele culturii microbiene pe medii solide Colonia = ansamblu localizat, alcatuit din populatie pura de bacterii provenite dintr-un singur parental. Pe mediu solid se descrie: - forma coloniei - producerea de pigment - marimea coloniei - consistenta coloniei - suprafata coloniei - emulsificabilitatea - marginile coloniei - mirosul culturii Caracterele culturii microbiene pe medii solide Colonia= ansamblu localizat, alcatuit din populatie pura de bacterii provenite dintr-un singur parental. S type Staphylococcus aureus Colonii S (smooth): marea majoritate a bacteriilor Colonii R (rough): 3 genuri importante in patologia umana: Mycobacterium Corynebacterium Bacillus 2
type R: Mediul Lowenstein-Jensen MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS PE MEDIUL LOWENSTEIN type R CORYNEBACTERIUM GENUL CORYNEBACTERIUM CORYNEBACTERIUM FLOARE DE MARGARETA 3
type R Bacillus CARACTERE DE CULTURA BACILLUS- GELOZA SIMPLA BACILLUS GELOZA SANGE CARACTERE DE CULTURA Caracterele culturii microbiene In mediu lichid se descrie: Turbiditatea Formarea de depozite Culoarea Suprafata 4
In functie de necesarul de oxigen: Bacterii Aerobe Anaerobe Aerob facultativ anaerobe Microaerofile Mediu lichid Bacterii anaerobe Medii pentru anaerobi: - Bulion cu acid thioglicolic (mediu lichid; la suprafata se adauga ulei de parafina - Tarozzi (mediu lichid, cu albus de ou; la suprafata se adauga ulei de parafina) - Geloza Veillon (se obtin culturi in profunzimea mediului, realizate prin incorporare) Tehnica Ott (se insamanteaza pe mediu solid, agenti reducatori si se sigileaza cu parafina) Metode de insamantare Insamantare = punerea in contact a unei culturi bacteriene sau a unui produs patologic cu mediile de cultura. Izolare = repicarea unei singure colonii pe alte medii de cultura cu scopul de a obtine cultura pura Cultura bacteriana = totalitatea bacteriilor crescute in/pe suprafata unui mediu de cultura 5
Tehnici de insamantare Tehnica insamantarii prin epuizare: Scop: obtinerea coloniilor izolate Insamantarea prin intepare (pe medii solide aflate in tuburi) Insamantarea in panza Pigment 6
Pigment Clasificare hemoliza pe geloza sange hemoliza β: = streptococi β - hemolitici hemoliza α - incompleta, verzuie streptococi γ - nehemolitici, Medii lichide - bulion simplu Medii simple: Apa peptonata Bulion simplu Geloza simpla Medii complexe: bulion sange geloza sange geloza chocolatie Categoria: Mediu de bază Componente: macerat de carne + peptonă + NaCl 0,5% Utilizare: pentru germeni nepretenţioşi 7
Geloza simpla Categoria: Mediu de bază Componente: bulion simplu + agar-agar Geloza simpla Categoria: Mediu de bază Componente: bulion simplu + agar-agar Geloza sange HEMOLIZA Categoria: Mediu pentru bacterii pretentioase Componente: geloză simplă + sânge Staphilococi Streptococi β α STAFILOCOC -α COMPLETA -β CALD-RECE (se clarifica la 4 C) 4 STREPTOCOC -α INCOMPLETA VERZUIE -β COMPLETA 8
α Hemoliza Geloza socolatie Categoria: Mediu special Componente: geloză simplă la 60-80 C + sânge Utilizare: cultivarea neisseriilor, hemofililor 9
Mediul Chapman Mediul Chapman Categoria: Mediu selectiv şi diferenţial (evidentiaza o proprietate biochimica a tulpinii) Componente: geloză simplă + NaCl 7,5% + manitol + roşu fenol Utilizare: selectiv pentru stafilococ Medii folosite pentru enterobacterii Cele mai importante genuri: Escherichia Proteus Klebsiella Salmonella Shigella medii de cultura utilizate: Drigalski Levine McConkey Bacteriile care degradeaza lactoza din mediu = lactozo pozitive Bacteriile care nu degradeaza lactoza din mediu = lactozo negative Drigalski 10
Mediul Levine Categoria: Mediu selectiv şi diferenţial Componente: geloză simplă + eozină + lactoză + albastru de metilen Utilizare: cultivarea enterobacteriilor (E.coli) E.COLI LEVINE GENUL ESCHERICHIA KLEBSIELLA GELOZA-SANGE COLONII MUCOASE KLEBSIELLA ADCL COLONII MUCOASE 11
PROTEUS- INVAZIE Mediul Muller - Hinton Categoria: Mediu special Utilizare: Efectuarea antibiogramelor Mediul Sabouraud Categoria: Mediu special Componente: geloză simplă + maltoză/glucoză + antibiotice Utilizare: cultivarea fungilor 12