Iranian Journal of Medical Microbiology

Original Article Iranian Journal of Medical Microbiology Iran J Med Microbiol: Volume 8, Number 4 (12-2014) Journal homepage: www.ijmm.ir Prevalence and VEB beta-lactamase Genes among Acinetobacter baumannii Isolated from Patients in Tehran by PCR Abbas Nazari Monazam 1, Seyyed Reza Hosseini Doust 1, Reza Mirnejad 2 1. Department of Microbiology, Faculty of Biological Sciences, Pharmaceutical Sciences Branch, Islamic Azad University. Tehran, Iran. 2. Molecular Biology Research Center, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran. Article Information Article history: Received:2014/03/18 Accepted:2014/05/20 Available online:2014/12/08 Article Subject: Molecular Microbiology IJMM 1393; 8(4): P 28-35 Corresponding author at: Dr. Reza Mirnejad Molecular Biology Research Center, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran. Email: rmirnejad@yahoo.com Abstract Background and Aim: According to numerous reports of infections caused by spectrum beta lactamases (ESBLs) producing Acinetobacter baumannii in our country in recent years, this study was performed to define the antibiotic susceptibility patterns and detect the prevalence and VEB beta-lactamase genes among A.baumannii isolated from patients in Tehran by PCR. Materials and Methods: 100 A.baumannii clinical isolates collected from various hospitals in Tehran during a year, using special culture media and biochemical tests were identified. The antibiograms of the isolates against 11 antibiotics by disk diffusion method (Disk diffusion) according to Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) guidelines was performed. Then minimum inhibitory concentrations (MIC) was determined for cefepime and ceftazidime and for the identification of ESBL-producing strains was used in combination disk method, and finally to assess the prevalence of and VEB beta-lactamase genes using specific primers PCR was performed. Results: Antibiograms results showed that the greatest resistance to the antibiotics amikacin, cefepime, and less resistance to polymyxin B were obtained. Rates of multidrug resistant strains of about 70% was achieved. Of the isolates studied, the MIC of ceftazidime in 84% and for cefepime in 91% were 128 μg/ml. The results of the combined-disk test demonstrated that 20% of samples were ESBL positive. The PCR results showed that 47% and 32% of our isolates had and VEB genes respectively. Conclusions: Regarding to existence of and VEB genes in this bacterium and possibility of transformation of these genes to the other bacteria, reconsideration in antibiotics consumption patterns and more attention to nosocomial infections control criteria are inevitable. Keywords: Acinetobacter baumannii, Polymerase Chain Reaction, VEB beta-lactamase, beta-lactamase Copyright 2014 Iranian Journal of Medical Microbiology. All rights reserved. How to cite this article: Nazari Monazam A, Hosseini Doust S, Mirnejad R. Prevalence and VEB beta-lactamase Genes among Acinetobacter baumannii Isolated from Patients in Tehran by PCR. Iran J Med Microbiol. 2014; 8 (4) :28-35 Īrān. Majallah-i mīkrub/shināsī-i pizishkī-i مجله میکرب شناسی پزشکی ایران

مجله میکربشناسی پزشکی ایران سال 2 شماره 2 زمستان 9313 مقاله پژهشی Journal homepage: www.ijmm.ir بررسی فراانی ه یا بتاالکتاماز VEB بيماران شهر تهران به رش ملکلی در اسينتباکتر بمانی ایزله شده از PCR.1.8 8 1 عباس نظری مقدم 1 سيد رضا حسيني دست رضا ميرنژاد گره ميکربيلژی دانشکده علم زیستي دانشگاه آزاد اسالمي احد علم داریي تهران ایران. مرکز تحقيقات بيلژی ملکلي دانشگاه علم پزشکي بقيه ا... )عج( تهران ایران. اطالعات مقاله تاریخچه مقاله دریافت: 9313/06/82 پذیرش: 9313/07/98 انتشار مضع: آنالین: 9313/01/90 ميکربشناسي ملکلي IJMM 1393; 8(4): P 28-35 نیسنده مسئل: دکتر رضا میرنژاد مرکز تحقیقات بیلژی ملکلی دانشگاه علم پزشکی بقیه ا... )عج( تهران ایران. چکیده زمينه اهداف: بتاالکتامازهای سیع الطیف در ساله یا با تجه به اهمیت گزارشهای فراان از عفنتهای ناشی از اسینتباکتر بمانی ملد تعیین فراانی های کد کننده ی بتاالکتامازهای VEB بیمارستانهای تهران با رش PCR انجام شد. ماد رش کار: 011 اخیر در کشرمان مطالعه باهدف تعیین مقامت پادزیستی در ایزله ی اسینتباکتر بمانی از بیماران ایزله ی بالینی اسینتباکتر بمانی جمع آری شده از بیمارستان های مختلف شهر تهران طی یک سال با استفاده از محیط های کشت اختصاصی تست های بیشیمیایی شناسایی شدند. آنتی بیگرام با 00 پادزیست مختلف با رش انتشار دیسک diffusion( )Disk بر اساس دسترالعمل CLIS انجام شد. در مرحله ی بعد MIC پادزیست های سفی پیم سفتازیدیم انجام جهت شناسایی سیه های ملد ESBL رش دیسک ترکیبی مرد استفاده قرار گرفت. در نهایت برای بررسی شیع های بتاالکتاماز VEB با استفاده از پرایمرهای اختصاصی PCR انجام گردید. یافتهها: نتایج آنتی بیگرام نشان داد که بیشترین مقامت به ترتیب مربط به پادزیست های آمیکاسین سفی پیم کمترین مقامت مربط به پادزیست پلی میکسین B بد. میزان مقامت چند داریی در سیه ها حدد %01 از مجمع ایزله های مرد مطالعه حداقل غلظت بازدارنده نسبت به سفتازیدیم در %48 از نمنه ها MIC 024 μg/ml نسبت به سفی پیم در %90 از نمنه ها MIC 024μg/ml بد. برطبق نتایج آزمن دیسک ترکیبی نیز %21 سیه ها ملد آنزیم بتاالکتاماز سیع الطیف بدند. نتایج PCR جهت شناسایی سیه های حای های مقامت نشان داد که های است. %22 نتيجهگيری: با تجه به که های VEB به ترتیب %80 VEB در باکتری شناسائی شده امکان انتقال آنها تلفن: 089-28228552 پست الکترنیک: rmirnejad@yahoo.com به دیگر باکتریها جد دارد لذا تصیه می گردد در الگ مصرف آنتی بیتیک ها تجدید نظر گردد به معیارهای کنترل عفنتهای بیمارستانی تجه کلمات ک یپ بیشتر شد. کليدی: اسینتباکتر بمانی PCR بتاالکتاماز VEB بتاالکتاماز رایت : حق چاپ نشر استفاده علمی از مقاله برای مجله میکربشناسی پزشکی ایران محفظ است. 82 مقدمه یکي از چهار جنس خاناده نایسریا که ککباسيل های کتاه تقریبا گرد گرم منفي اکسيداز منفي بدن تحرک هازی اجباری فرصت طلب در حال گسترش اسينتباکترها هستند. باکتری ها انتشار سيعي در طبيعت داشته مي تانند از منابع گناگني جدا شند ليکن بيمارستان ها منشا سیه های بيماری زا مقام به چند دار آن مي باشند )9(. گنه اسينتباکتر بماني که شایع ترین در جنس مي باشد سبب عفنت ادراری پنمني مننژیت عفنت گردش

مجله ميکرب شناسي پزشکي ایران سال 2 شماره 4 زمستان 1131 خن باکتریری مرتبط با کاتتر ارتریت دیاليز مدام صفاقي مرتبط با پریتنيت زخم شده همچنين عامل اصلي عفنت بيمارستاني مخصصا در بيماران بستری در بخش مراقبت های یژه مي باشد.)8( اسينتباکتر بماني آنها که درمان پادزیستي در سال های اخير در افراد بستری سيع کرده اند در حال افزایش است )3(. شده یا ميزان در بيمارستان کلنيزاسين بیژه ضد سرطان دریافت تانایي غيرعادی اسينتباکتر بماني در بقای طالني مدت در تمام محيط بيمارستان مي باشد )2(. اسينتباکتر بماني مي تاند در سطح مختلف در بيمارستانها از جمله کاتتر دیگر تجهيزات پزشکي زنده بماند که همين امر عامل گسترش بيمارستاني باکتری مي باشد )5(. ميزان داریي باالی سيع مقامت چند داریي همچنين Pandrug-resistant (PDR( Multidrug-resistant (MDR) ) در اسينتباکتر بماني مقامت مساله را به مضعي فرامنطقه ای جهاني تبدیل کرده است )6(. ایزله های MDR اسينتباکتر در طي دهه گذشته مشکالت فرااني را در امر درمان عفنت ها پدید آرده اند. امرزه ایزله های با طيف مقامت بيشتری نيز مشاهده شده است که آنها را اصطالحا PDR مي نامند. ایزله ها باکتری هایي هستند که به تمام دارهای ضد ميکربي در دسترس بجز کليستين پلي ميکسين 2(. اخيرا سازگاری )7, مقامند B ایزله های کلينيکي اسينتباکتر با پادزیستها منتهي به ایجاد ایزله های )Extreme drug resistance( XDR نيز شده است )1(. ایزله ها عمال نسبت به تمامي پادزیستها مقامت نشان مي دهند. جد ایزلهها با طالني شدن مدت بستری شدن افزایش هزینه ها معني داری دارد )90(. مکانيسم های مقامت آنتي بيتيکي هميشه بخشي از سير تکاملي باکتری در نهایت مرگ مير بيماران رابطه در اسينتباکتر بماني به عنان ابزار رقابت بقای آنها در بين باکتری های تليد کننده پادزیست تلقي شده است 98(. بطری,99( اسينتباکتر بماني که مهمترین سيله ی مقامت در برابر پادزیستهای بتاالکتام تليد آزادسازی اناع آنزیم های بتاالکتاماز ميباشد به طریکه تاکنن بيش از 077 نع آنزیم شناسایي تعيين هیت شده اند )93(. بنابر استفاده از عامل ضد ميکربي بخصص پادزیستها عليه باکتریها باعث اتخاذ رشهای ماهرانه مناسب در راستای حفظ بقای آنها گردیده است. از رش ها ميتان به کسب ظهر های جدید مثل دیگر بنام VEB VEB VEB-1 اشاره نمد )92, 95(. الين بار در اشریشياکلي یک آنزیم همراه یک در بيماری از یتنام گزارش شده بد پس از آن در تایلند در سیه های سدمناس نيز یافت شده است تاکنن سه تيپ از آنزیم شناخته شده است )96(. بتاالکتاماز نع شده نيز فقط در حدد 80-82 با بتاالکتامازهای شناخته SHV TEM سفالسپرینها را شباهت دارند بطر مثری پني سيلين ها هيدرليز مهار مي شد. بتاالکتامازهای تيپ 1 - نمده تسط اسيد الين کالالنيک بار در سیه های سدمناس آئرژینزا در بيماران ترکيه گزارش شده است در % 07 سیه گزارش شده است های مقام به سفتازیدیم اسينتباکتر بماني نيز الين )97(. آنزیم شناخته شده در اسنيتباکتر بماني است که مي تاند سفالسپرین های نسل 4 بجز سفتازیدیم سفتاکسيم را هيدرليز کند ابسته بدان یعني ميان سیه تيپ تاکنن 1 درحدد %20 با از مریم اشریشيا ک ي ل اند -2 که % 20 هملژی با یک - 1 آنزیم دارد در های سالمنال انتریکا در آرژانتين یافت شده است شناسایي شده است -2.)97( - 1 شباهت دارد از سرار سالمنال تيفي کلبسيال پنمنيه پرتئس ميرابيليس یبری کلرا بدست آمد که فقط در آمریکای جنبي یافت گردید )92(. جالب تجه آن است که در حاليکه VEBمعمال به عنان طبقه 8 بتاالکتاماز در انترباکتریاسه ها در نظر گرفته شده مطالعه مختلف از حضر آنها در اسينتباکتر بماني به عنان یک عامل شایع عفنت بيمارستاني حکایت دارد )91(. اسينتباکتر بماني مقامت آن به افزایش مارد عفنت چندین عامل ضد ميکربي )مانند بتاالکتام های سيع الطيف کارباپنم ها آمينگليکزیدها فلرکينلن ها( که ایجاد در عفنت هایي سيستم عصبي مرکزی پست بافتهای نرم استخان مي کند تمایل به شناسایي اسينتباکتر بماني در د بعد علمي عممي شدیدا افزایش داده است. مکانيسم های دقيقي که نشان دهنده آغاز پيشرفت شيع عفنت های اسينتباکتر بماني باشد هنز مشخص نشده است. اساسي در انجام دالیل فق از جمله علل مطالعه شناسایي اسينتباکتر بماني بررسي الگ مقامت پادزیستي بررسي فرااني ملکلي بتاالکتاماز VEB 83

نظری مقدم همکاران فرااني ملکلي بتاالکتاماز VEB در اسينتباکتر بماني PCR در ایزله های باليني اسينتباکتر بماني به رش ملکلي بد. ماد رشها جمع آری نمنه ها مطالعه ی به صرت تصيفي- آزمایشگاهي بر ری 277 نمنه خن ادرار پست زخم تراشه نمنه های جداشده از دستگاه تنفسي بيماران که مختلف بيمارستان های 42 بيش از ساعت در بخش های شهر تهران )بيمارستانهای بقيه ا...)عج( ميالد امام خميني...( بستری بده دچار عفنت شده بدند در طي سالهای 1131-1138 انجام پذیرفت. نمنه ها در محيط BHI براث به آزمایشگاه انتقال داده شدند. جداسازی باکتری ها پس از ارسال نمنه ها به آزمایشگاه آگار بالد آگار )مرک-آلمان( %2 حای مک کانکي از محيط خن گسفند برای جداسازی اليه باکتری استفاده گردید. هم چنين برای شناسائي ایزله ها تا حد گنه از تست های بيشيميایي شامل اره آز اکسيداسين TSI MRVP SIM تخمير )OF( همچنين تست های کاتاالز اکسيداز سيمن سيترات باکتری ها جدا تعيين هیت گردیدند. رشد در 10 48 درجه سلسيس نيز از جمله تست هایي بد که جهت تشخيص گنه های مختلف اسينتباکتر انجام شد. تعیین حساسیت پادزیستی به رش انتشار از دیسک )Disk Diffusion( گردید سلباکتام تست مطابق استاندارد [M100-S22 CLSI 2012].)80( ایمي پنم در مطالعه از 87( سفتریاکسن پادزیست های 17( آميکاسين انجام آمپي سيلين- )17 )17 پيپراسيلين )117 - تازباکتام تبرامایسين) μg 17( سفي پيم) μg 17( جنتامایسين 18( مرپنم )17 تتراسایکلين 17( پلي ميکسين )177 B تهيه شده از شرکت MAST )Mast DiagnosticsMast group Ltd., Merseyside, UK( استفاده گردید. بعد از آنتي بيگرام استاندارد CLSI مطابق با هاله ی اندازه تعيين شده به صرت حساس نيمه حساس )متسط( مقام گزارش شد. جهت کنترل کيفي آزمایشات باال از سیه ی استاندارد اشریشيا کلي به عنان ATCC 25922 کنترل منفي سیه استاندارد اسينتباکتر بماني 19606 ATCC به عنان کنترل مثبت مرد استفاده قرار گرفتند. حداقل غلظت بازدارندگی )MIC( مطابق با دسترالعمل پادزیستي که CLSI به منظرتعيين حداقل غلظت مانع رشد باکتری مي شد آزمن برای MIC پادزیست های سفي پيم سفتازیدیم به رش رقت سازی متالي Dilution( )Serial انجام شد) 87 (. رش دیسک ترکیبی جهت سنجش تلید ESBLs تشخيص برای تليد آنزیم های بتاالکتاماز سيع الطيف )ESBL( از رش غربالگری دیسک ترکيبي استفاده گردید. بدین صرت که بعد از کشت باکتری ری محيط ملر هينتن آگار چهار اسيد جدل 1: تالي پرایمرهای مرد استفاده جهت تعي ني دیسک سفتازیدیم سفتاکسيم سفتازیدیم کالالنيک سفتاکسيم-کالالنيک دیسک اسيد ی با فاصله 12 ميلي متر از یکدیگر ری آن قرار داده شدند. بعد از 84 ساعت انکبه کردن در دمای 10 درجه سلسيس پليت ها مرد بررسي قرار گرفته افزایش بيش از 2 ميليمتر در قطرهاله هرکدام از پادزیست پادزیست تنها های فق در ترکيب با کالالنيک اسيد نسبت به ارگانيسم تليد کننده در ESBL صرت ارگانيسم ESBL منفي گزارش مي شدند) 80 (. شناسائی ملکلی بتاالکتامازهای رش ملکلی PCR غير VEB در تحقيق جهت بررسي ملکلي حضر در نمنه ها از پرایمرهای زیر استفاده شدند)جدل 1()89(. حضر ه یا به VEB )81( VEB -F -R VEB-F VEB-R 5 - ATGAATGTCATTATAAAAGC-3 5 - TTAATTTGGGCTTAGGGCAGAA-3 5 - GGAACAACTTTGACGATTGA-3 5 - CCCTGTTTTATGAGCAACAA-3 17

مجله ميکرب شناسي پزشکي ایران سال 2 شماره 4 زمستان 1131 جدل 8: شرایط اکنش PCR اسرشت الیه اسرشت اتصال ساخت ساخت پایانی 08 08 22/ دما C) ( 34 2 34 زمان 17 دقيقه 11 دقيقه 1 دقيقه 1 دقيقه 2 دقيقه VEB اسرشت اليه اسرشت اتصال ساخت ساخت پایانی 08 08 21/ دما C) ( 34 2 34 زمان پس از استخراج م نمنه های باليني به رش 17 دقيقه 11 دقيقه 1 دقيقه 1 دقيقه 2 دقيقه اکنش Boiling PCR در حجم نهائي 82μL در نظر گرفته شد. هر نمنه شامل: 2X Master mix 3 μl )ساخته کمپاني Ampliqon III 87mM dntp( کشر دانمارک( ) 1.5mM MgCl2 μl حای 1 1 از پرایمر های VEB μl الگ DNA ) 12-87 ng/μl( شامل 17pmol از هر پرایمر R F مقطر دبار تقطير استریل تا حجمμL آزمایش گرفته شد. 82 )جدل 1( آب بد. با هر سری PCR یک کنترل مثبت یک کنترل منفي در نظر برنامه دمایي برای هر د نيز در جدل 8 آمده است. برنامه دمایي 17 چرخه ادامه پيدا کرد. محصالت PCR پس از انجام اکنش بر ری ژل آگارز %1/2 الکترفرز برای تائيد نهائي سکانس گردیدند. یافته ها در مطالعه حاضر 117 نمنه اسينتباکتر ایزله شده از 277 نمنه بيماران بستری بدست آمد. 177 نمنه )%00/3( به عنان اسينتباکتر بماني تعيين هیت شدند 88 نمنه ( %10/3( اسينتباکتر لفي 2 نمنه )%0/8( سایر گنه های اسينتباکتر بد که در نمدار 1 آرده شده است. 47 نمنه از بخش مراقبت های یژه 17 نمنه از بخش عفني 87 نمنه از ارژانس 17 نمنه از سایر بخش ها ایزله شد که بيشترین ميزان مربط به بخش مراقبت های یژه بد. در ميان سیه ها از 47 نمنه ی خن )%47( 80 نمنه تراشه )%80( 18 نمنه زخم )%18( 2 نمنه ادرار )%2( 11 نمنه )%11( مجهل ایزله شدند. سفپ نمدار 1: فرااني گنه های اسينتباکتر جدا شده از نمنه های کلينيکي مرد بررسي تست حساسیت پادزیستی همانطرکه در نمدار 8 نشان داده شده است اغلب ایزله به یم سفتریاکسن مقامت به پادزیست آميکاسين مقام بدند کمترین پلي ميکسين B نشان دادند. از تعداد 177 نمنه باليني اسينتباکتر بمانيبدست آمده بمانيها تنها به یک تنها به پادزیست پادزیست مقام بدند. %87 اسينتباکتر %17 پادزیست 8 مقامت داشتند اما %07 یا بيشتر مقامت کامل نشان دادند. بر نمنه ها به نمنه به طبق 1 نتایج آزمن دیسک ترکيبي %87 سیه ها ملد آنزیم بتاالکتاماز سيع الطيف بدند. از مجمع ایزله های مرد مطالعه حداقل غلظت بازدارنده نسبت به سفتازیدیم در %24 MIC 128 μg/ml MIC 128 μg/ml از نمنه ها نسبت به سفي پيم در %31 از نمنه ها گزارش گردید. 11

نظری مقدم همکاران فرااني ملکلي بتاالکتاماز VEB در اسينتباکتر بماني نتایج بدست آمده در بررسی نمدار 8: درصد مقامت مشاهده شده در بين ایزله های جدا شده از بيماران VEB تکنیک PCR به سیله با استفاده از پرایمر های اختصاصيVEB جد یا عدم جد در ایزله ها با استفاده از PCR بررسي شد. نتایج به دست آمده به صرت بد : 18 مرد از ایزله ها یا به عبارت دیگر %18 از نمنه های مرد بررسي دارای بدند )شکل 1(. بررسی نتایج بدست آمده در تکنیک PCR با استفاده از د جفت پرایمر -R -F PCR جد یا عدم جد بررسي قرار گرفت. نتایج PCR به سیله انجام در نمنه های جدا شده مرد جهت شناسایي سیه های حای نشان داد که 40 مرد )%40( از ایزله ها دارای بدند )شکل 8(. شکل 1: الکترفرز محصل تکثير شده ی VEB در سیه های اسينتباکتر بماني با.PCR ردیف یک مارکر )177 bp DNA )ladder ردیف 8: محصل تکثير شده VEB با اندازه 107 جفت باز در سیه استاندارد 18

مجله ميکرب شناسي پزشکي ایران سال 2 شماره 4 زمستان 1131 اسينتباکتر بماني حائز اهميت هستند لذا مطالعه با هدف تعيين مقامت پادزیستي فرااني سیه های ملد بتاالکتامازهای سيع الطيف بررسي شيع آنزیم بتاالکتامازی VEB باند 311 جفت بازی در سیه های باليني به رش تيپي انجام گردید. های اسينتباکتر بماني جدا شده از نمنه شکل : 1 الکترفرز محصل تکثير شده ی در سیه های اسينتباکتر بماني با.PCR ردیف 1-8: محصل تکثير شده با اندازه 311 جفت باز در سیه استاندارد نمنه باليني.ردیف 1 : کنترل منفي ردیف 4: مارکر ( DNA 100 bp.ladder بحث اسينتباکتر بماني پات فرصت طلب با قدرت یبماری زائي باال یکي از عامل عفنت های بيمارستاني در طي سه دهه گذشته است. درمان باکتری به خصص سیه های مقام به چند دار از بيمارستان ملدین بتاالکتامازهای سيع الطيف آن به علت مقامت گسترده شان نسبت به دارهای ضد ميکربي با مشکل ماجه است. طي 17 سال قبل پادزیست های بتاالکتام جدید بسياری تهيه شدند که در برابر فعاليت های هيدرليزی بتاالکتامازها مقام بدند اما با بکارگيری هر گره جدید جهت درمان بيماران بتاالکتامازهای جدید بجد مي آیند که نسبت به آن گره جدید دارها مقامت نشان مي دهند. احتماال مصرف بيش از اندازه پادزیست های جدید جهت درمان بيماران فشار انتخابي بر باکتریها بر تليد بتاالکتامازهای جدید تسط باکتری- ها مثر است. امرزه نع از مقامت داریي رشد زیادی داشته به علت غير فعال سازى طيف سيعي از آنتي بيتيکهای بتاالکتام به یژه سفالسپرین هاى نسل سم منباکتام ها مشکالت فرااني را در درمان عفنت هاى ميکربي ایجاد کرده اند. با تجه به که فاکترهای محيطي الگهای مختلف استفاده از عامل ضد ميکربي در ایجاد گسترش سیه ها در نقاط مختلف دنيا نقش دارند با تجه به که داشتن اطالعات در زمينه ميزان شيع نع آنزیم ها الگی پادزیستي در کنترل پيشگيری درمان عفنت های ناشي از 117 از مطالعه در %00/3 نمنه شناسایي شده اسينتباکتر ایزله ها اسينتباکتر بماني %81/1 اسينتباکتر لفي سایر اسينتباکترها بدند که تقریبا مشابه مطالعه Constantiniu همکارانش در طي سالهای 8771 تا 8774 بد که گزارش نمدند از 84 ایزله های کلينيکي جدا شده %01 اسينتباکتر بماني همچنين مشابه مطالعه ی %83 اسينتباکتر لفي )88( بدند Rit همکارانش در سال 8718 بد که نشان دادند از ميان 4127 ایزله ی کلينيکي % 04/78 به عنان اسينتباکتر بماني مابقي به عنان اسينتباکتر لفي سایر گنه های اسينتباکتر شناخته شده اند مختلفي چنين مانند مطالعات )83(. مطالعات Perez همکارانش در سال )82( هم 8770 Begum همکارانش در سال )85( 8714 Hasan همکارانش در سال دهنده نشان 8714 مطلب مي باشند که سیه های مختلف اسينتباکتر بماني نسبت به اکثر پادزیست های مصرفي مقام شده اند )86( از طرفي نيز نتایج مطالعه ی حاضر هم نشان داد که سیه های اسينتباکتر بماني مقامت بسيار باالیي نسبت به پادزیست های مرد مطالعه همچنين دارند. MIC بسيار باالیي نسبت به سفي پيم سفتازیدیم در مطالعه همانند مطالعات Dally )87( 8711 Kamalbeik همکارانش در سال همکارانش در سال 8714 مشخص گردید که اغلب سیه ها به سفتازیدیم سفي پيم مقام )82(. بدند برخالف مطالعه ای که در سال 1122 Shahcheraghi تسط همکارانش صرت گرفت که حداقل غلظت بازدارنده نسبت به سفتازیدیم در )%21/1( ایزله 03 MIC 64 μg/ml نسبت به سفتازیدیم در بد. در مطالعه حداقل غلظت بازدارنده %24 MIC 128 μg/ml از نمنه ها بد )81(. عدم تطابق نتایج بررسي با مطالعه ذکر شده مي تاند بدليل نع نمنه های مرد بررسي نع دیسک پادزیستي مصرفي اجرای رش باشد. نتایج بررسي ميزان حداقل غلظت بازدارنده نسبت به سفتازیدیم در سیه های 11

نظری مقدم همکاران فرااني ملکلي بتاالکتاماز VEB در اسينتباکتر بماني اسينتباکتر بماني در مطالعه با نتایج مطالعات انجام گرفته Kim در کشر کره در کشر تایان تقریبا همخاني داشت.)30( برطبق نتایج آزمن دیسک ترکيبي جهت غربالگری سیه های ملد بتاالکتاماز های سيع الطيف در مطالعه %87 سیه ها ملد آنزیم بتاالکتاماز سيع الطيف بدندکه با مطالعه Shahcheraghi مطالعه همکارانش در سال )81( در تهران 1122 Sinha )39( که بر ری ملدین دارد در حالي که با مطالعه همکارانش که در سال 8770 ESBL Maleki در هندستان صرت گرفته بد هم خاني همکارانش )38( که در سال 8714 در شيراز انجام دادند ميزان فراانيESBL را %44 اعالم کردند متفات مي باشد. یافته های مطالعه حاضر نشان داد که مقامت پادزیستي در اسينتباکتر بمانيهای مرد مطالعه باال بده است که با مطالعه را Joshi %02 مطالعه ی گزارش داده بد همخاني داشت حاضر که ميزان اسينتباکتر بمانيMDR )33( Bahador همکارانش برخالف اما ميزان اسينتباکتر بماني مقام به چند دار را %42 گزارش داده است که احتماال دليل آن مقعيت مختلف جغرافيایي استفاده غير یکسان از پادزیست ها بده است )32(. نتایج مطالعه تا حددی همانند بررسي Aubert همکاران در تایلند در فاصله 1332-8771 بد که ميزان فرااني VEB را %11 گزارش نمدند )35(. همچنين ميزان فرااني بدست آمده در مطالعه حاضر همانند نتایج مطالعه مي باشد که در کشر کره در سال 8772 انجام شده است) 36 (. افزایش مقامت به سفالسپرین های سيع الطيف خطر بسيار بزرگي مخصصا برای بيماران بستری شده محسب مي گردد امکان درمان با آن ها را از بين برده است لذا شناسایي ایزالسين بيماران ناقل باکتری های ملدESBL انتخاب صحيح پادزیست ها شناسایي سیه های ملد اناع آنزیم های بتاالکتامازی از سایر مارد مهم کنترل ممانعت از انتشار سیه های مقام در بيمارستان ها مي باشند. هم چنين با تجه به که در مطالعه حاضر تنها %87 از ایزله ها ملد ESBL بدند مي تان گفت در باکتری مکانيسم های دیگری غير از بتاالکتامازهای سيع الطيف سبب مقامت مي گردند که شناسایي سریع ردیابي سیه ها نقش مهمي در جلگيری از گسترش آنها دارد. تشکر قدردانی از همه عزیزاني که ما را در انجام پژهش یاری نمده اند کمال تشکر قدرداني را مي نمایيم. تعارض منافع: بين نیسندگان هيچ تعارضي جد ندارد. References 1. Howard A, O'Donoghue M, Feeney A, Sleator RD. Acinetobacter baumannii: an emerging opportunistic pathogen. Virulence. 2012;3(3):243-50. 2. McConnell MJ, Actis L, Pachon J. Acinetobacter baumannii: human infections, factors contributing to pathogenesis and animal models. FEMS Microbiol Rev. 2013;37(2):130-55. 3. Al-Hassan L, El Mehallawy H, Amyes SG. Diversity in Acinetobacter baumannii isolates from paediatric cancer patients in Egypt. Clin Microbiol Infect. 2013;19(11):1082-8. 4. Fukuta Y, Muder RR, Agha ME, Clarke LG, Wagener MM, Hensler AM, et al. Risk factors for acquisition of multidrug-resistant Acinetobacter baumannii among cancer patients. Am J Infect Control. 2013;41(12):1249-52. 5. Vahdani P, Yaghoubi T, Aminzadeh Z. Hospital acquired antibiotic-resistant acinetobacter baumannii infections in a 400-bed hospital in Tehran, Iran. Int J Prev Med. 2011;2(3):127-30. 14 6. Mostofi S, Mirnejad R, Masjedian F. Multi-drug resistance in Acinetobacter baumannii strains isolated from clinical specimens from three hospitals in Tehran- Iran. African Journal of Microbiology Research. 2011; 5(7): 3579-583. 7. Peleg AY, Seifert H, Paterson DL. Acinetobacter baumannii: emergence of a successful pathogen. Clin Microbiol Rev. 2008;21(3):538-82. 8. Valencia R, Arroyo LA, Conde M, Aldana JM, Torres MJ, Fernandez-Cuenca F, et al. Nosocomial outbreak of infection with pan-drug-resistant Acinetobacter baumannii in a tertiary care university hospital. Infect Control Hosp Epidemiol. 2009;30(3):257-63. 9. Park YK, Peck KR, Cheong HS, Chung DR, Song JH, Ko KS. Extreme drug resistance in Acinetobacter baumannii infections in intensive care units, South Korea. Emerg Infect Dis. 2009;15(8):1325-7. 10. Li J, Nation RL, Turnidge JD, Milne RW, Coulthard K, Rayner CR,et al. Colistin: the re-emerging antibiotic for multidrug-resistant Gram-negative bacterial infections. Lancet Infect Dis. 2006;6(9):589-601.

مجله ميکرب شناسي پزشکي ایران سال 2 شماره 4 زمستان 1131 11. Mirnejad R, Mostofi S, Masjedian F. Antibiotic resistance and carriage class 1 and 2 integrons in clinical isolates of Acinetobacter baumannii from Tehran, Iran. Asian Pac J Trop Biomed. 2013;3(2):140-5. 12. Gordon NC, Wareham DW. Multidrug-resistant Acinetobacter baumannii: mechanisms of virulence and resistance. Int J Antimicrob Agents. 2010; 35(3):219-26. 13. Mirnejad R, Dehghani M, Masjedian F, Imani Fooladi AA, Haghighat S. Antimicrobial Susceptibility Patterns and Distribution of BlaKPC Genes among A. baumannii Isolated from Patients at Tehran - Iran Hospitals. Journal of Pure and Applied Microbiology, 2012; 6(2):707-12 14. Vafaei S, Mirnejad R, Amirmozafari N. Determining the Patterns of Antimicrobial Susceptibility and the Distribution of blactx-m Genes in Strains of Acinetobacter Baumannii Isolated from Clinical Samples. J Isfahan Med Sch 2013; 31(252): 1443-51. 15. Farajnia S, Azhari F, Alikhani MY, Hosseini MK, Peymani A, Sohrabi N. Prevalence of and VEB Type Extended Spectrum Betalactamases among Multidrug Resistant Acinetobacter baumannii Isolates in North-West of Iran. Iran J Basic Med Sci. 2013;16(6):751-5. 16. Naas T, Coignard B, Carbonne A, Blanckaert K, Bajolet O, Bernet C, et al. VEB-1 Extended-spectrum betalactamase-producing Acinetobacter baumannii, France. Emerg Infect Dis. 2006;12(8):1214-22. 17. Pasteran F, Rapoport M, Petroni A, Faccone D, Corso A, Galas M, et al. Emergence of -2 and VEB-1a in Acinetobacter baumannii Strains in the Americas. Antimicrob Agents Chemother. 2006;50(9):3222-4. 18. Al-Hassan L, El Mahallawy H, Amyes SG. First report of bla(-3) in Acinetobacter baumannii. Int J Antimicrob Agents. 2013;41(1):93-4. 19. Adams MD, Goglin K, Molyneaux N, Hujer KM, Lavender H, Jamison JJ, et al. Comparative genome sequence analysis of multidrug-resistant Acinetobacter baumannii. J Bacteriol. 2008;190(24):8053-64. 20. Swenson JM, Killgore GE, Tenover FC. Antimicrobial susceptibility testing of Acinetobacter spp. by NCCLS broth microdilution and disk diffusion methods. J Clin Microbiol. 2004;42(11):5102-8. 21. Alikhani MY, Karimi Tabar Z, Mihani F, Kalantar E, Karami P, Sadeghi M, et al. Antimicrobial Resistance Patterns and Prevalence of bla-1 and blaveb-1 Genes Among ESBL-producing Pseudomonas aeruginosa Isolates in West of Iran. Jundishapur J Microbiol. 2014;7(1):e8888. 22. Constantiniu S, Romaniuc A, Chiriac R, Berea C, Kalis O, Rezus E, et al. Antibacterial antibodies for some enterobacteria in sera of patients with reactive arthritis and other rheumatoid diseases. Roum Arch Microbiol Immunol. 2008;67(1-2):30-5. 23. Rit K, Saha R. Multidrug-resistant acinetobacter infection and their susceptibility patterns in a tertiary care hospital. Niger Med J. 2012;53(3):126-8. 24. Perez F, Hujer AM, Hujer KM, Decker BK, Rather PN, Bonomo RA. Global challenge of multidrug-resistant Acinetobacter baumannii. Antimicrob Agents Chemother. 2007;51(10):3471-84. 25. Begum S, Hasan F, Hussain S, Ali Shah A. Prevalence of multi drug resistant Acinetobacter baumannii in the clinical samples from Tertiary Care Hospital in Islamabad, Pakistan. Pak J Med Sci. 2013;29(5):1253-8. 26. Hasan B, Perveen K, Olsen B, Zahra R. Emergence of carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii in hospitals in Pakistan.J Med Microbiol. 2014;63(Pt 1):50-5. 27. Dally S, Lemuth K, Kaase M, Rupp S, Knabbe C, Weile J. DNA microarray for genotyping antibiotic resistance determinants in Acinetobacter baumannii clinical isolates. Antimicrob Agents Chemother. 2013;57(10):4761-8. 28. Kamalbeik S, Talaie H, Mahdavinejad A, Karimi A, Salimi A. Multidrug-resistant Acinetobacter baumannii infection in intensive care unit patients in a hospital with building construction: is there an association? Korean J Anesthesiol. 2014;66(4):295-9. 29. Shahcheraghi F, Abbasalipour M, Feizabadi M, Ebrahimipour G, Akbari N. Isolation and genetic characterization of metallo-beta-lactamase and carbapenamase producing strains of Acinetobacter baumannii from patients at Tehran hospitals. Iran J Microbiol. 2011;3(2):68-74. 30. Yong D, Shin JH, Kim S, Lim Y, Yum JH, Lee K, et al. High prevalence of -1 extended-spectrum betalactamase-producing Acinetobacter spp. in Korea. Antimicrob Agents Chemother. 2003;47(5):1749-51. 31. Sinha M, Srinivasa H, Macaden R. Antibiotic resistance profile & extended spectrum beta-lactamase (ESBL) production in Acinetobacter species. Indian J Med Res. 2007;126(1):63-7. 32. Maleki MH, Sekawi Z, Soroush S, Azizi-Jalilian F, Asadollahi K, Mohammadi S, et al. Phenotypic and genotypic characteristics of tetracycline resistant Acinetobacter baumannii isolates from nosocomial infections at Tehran hospitals. Iran J Basic Med Sci. 2014;17(1):21-6. 33. Joshi SG, Litake GM, Ghole VS, Niphadkar KB. Plasmid-borne extended-spectrum beta-lactamase in a clinical isolate of Acinetobacter baumannii. J Med Microbiol. 2003;52(Pt 12):1125-7. 34. Bahador A, Taheri M, Pourakbari B, Hashemizadeh Z, Rostami H, Mansoori N, et al. Emergence of rifampicin, tigecycline, and colistin-resistant Acinetobacter baumannii in Iran; spreading of MDR strains of novel International Clone variants. Microb Drug Resist. 2013;19(5):397-406. 35. Aubert D, Girlich D, Naas T, Nagarajan S, Nordmann P. Functional and structural characterization of the genetic environment of an extended-spectrum beta-lactamase blaveb gene from a Pseudomonas aeruginosa isolate obtained in India. Antimicrob Agents Chemother. 2004;48(9):3284-90. 36. Kim JW, Heo ST, Jin JS, Choi CH, Lee YC, Jeong YG, et al. Characterization of Acinetobacter baumannii carrying bla(oxa-23), bla(-1) and arma in a Korean hospital. Clin Microbiol Infect. 2008;14(7):716-8. 12