BD BBL UROTUBE 2s BBL UROTUBE BBL UROTUBE M BBL UROTUBE E BBL UROTUBE E. coli BBL UROTUBE SXT

Transcript

1 Ο ΗΓΙΕΣ ΧΡΗΣΗΣ ΕΤΟΙΜΑ ΠΡΟΣ ΧΡΗΣΗ ΥΛΙΚΑ ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΑΣ ΣΕ ΕΜΒΑΠΤΙΖΟΜΕΝΕΣ ΑΝΤΙΚΕΙΜΕΝΟΦΟΡΟΥΣ ΠΛΑΚΕΣ DA Αναθ.:Φεβρουαρίου 2004 BD BBL UROTUBE 2s BBL UROTUBE BBL UROTUBE M BBL UROTUBE E BBL UROTUBE E. coli BBL UROTUBE SXT ΧΡΗΣΗ ΓΙΑ ΤΗΝ ΟΠΟΙΑ ΠΡΟΟΡΙΖΕΤΑΙ Τα προϊόντα BBL UROTUBE είναι εµβαπτιζόµενες αντικειµενοφόροι πλάκες που χρησιµοποιούνται για την αποµόνωση και τον προσδιορισµό του αριθµού των αποικιών µικροοργανισµών που αποµονώνονται από δείγµατα ούρων. Οι επιφάνειες των εµβαπτιζόµενων αντικειµενοφόρων πλακών είναι επιστρωµένες µε δύο ή τρία διαφορετικά υλικά. Όλα τα προϊόντα BBL UROTUBE περιέχουν άγαρ CLED για τον προσδιορισµό του συνολικού αριθµού βακτηριδίων ή/και ζυµοµυκήτων, καθώς και άγαρ MacConkey για την ανίχνευση των Gram αρνητικών βακτηριδίων, π.χ. Enterobacteriaceae. Το τρίτο, εάν είναι διαθέσιµο, εξαρτάται από το αντίστοιχο προϊόν. ΑΡΧΕΣ ΚΑΙ ΕΠΕΞΗΓΗΣΗ ΤΗΣ ΙΑ ΙΚΑΣΙΑΣ Μικροβιολογική µέθοδος. Οι εµβαπτιζόµενες αντικειµενοφόροι πλάκες χρησιµοποιούνται ευρέως σήµερα ως τεχνική ελέγχου ανίχνευσης για την απαρίθµηση και την αποµόνωση µικροοργανισµών από δείγµατα ούρων ρουτίνας. 15 Μετά τη βύθιση της εµβαπτιζόµενης αντικειµενοφόρου πλάκας σε ένα φρέσκο δείγµα ούρων που έχει συλλεχθεί σωστά και την επακόλουθη επώαση της αντικειµενοφόρου πλάκας, ο αριθµός των αποικιών στην επιφάνεια του άγαρ CLED συγκρίνεται µε µια εικόνα αναφοράς. Το άγαρ CLED αναπτύχθηκε από τον Sandys το 1960 για την αποτροπή της συρροής του Proteus µε περιορισµό των ηλεκτρολυτών στο και τροποποιήθηκε αργότερα αρκετές φορές για χρήση σε α ούρων. 6 Ονοµάστηκε ανεπαρκές σε κυστίνη/λακτόζη/ηλεκτρολύτες (CystineLactoseElectrolyte Deficient CLED) και αναφέρθηκε ότι είναι ιδανικό για τεχνικές εµβάπτισης ενοφθαλµίσµατος και για βακτηριολογία ούρων γενικά. 6,7 Τα θρεπτικά συστατικά στο άγαρ CLED παρέχονται από τις πεπτόνες ζελατίνης και καζεΐνης, καθώς και από εκχύλισµα βοείου κρέατος. Η λακτόζη συµπεριλαµβάνεται για την παροχή πηγής ενέργειας για µικροοργανισµούς µε ικανότητα χρήσης της µε ζυµωτικό µηχανισµό. Το κυανό της βρωµοθυµόλης χρησιµοποιείται ως δείκτης του ph για τη διαφοροποίηση των ζυµωτικών της λακτόζης µικροοργανισµών από τους αζυµωτικούς της λακτόζης µικροοργανισµούς. Οι µικροοργανισµοί που ζυµώνουν τη λακτόζη µειώνουν το ph και µεταβάλλουν το χρώµα του υλικού από πράσινο σε κίτρινο. Η κυστίνη επιτρέπει την ανάπτυξη "νάνων αποικιών" κολοβακτηριδιόµορφων. 3 Οι πηγές των ηλεκτρολυτών είναι µειωµένες προκειµένου να ελαχιστοποιείται η συρροή των ειδών Proteus. Ο αριθµός αποικιών στο άγαρ CLED είναι ευθέως ανάλογος µε τον αριθµό βακτηριδίων ανά ml του δείγµατος ούρων. Το άγαρ CLED συµπεριλαµβάνεται σε όλα τα προϊόντα εµβαπτιζόµενων αντικειµενοφόρων πλακών BBL UROTUBE ως 1. Το δεύτερο είναι το άγαρ MacConkey. Είναι µόνον ελαφρώς εκλεκτικό επειδή η συγκέντρωση των χολικών αλάτων, τα οποία αναστέλλουν τους Gramθετικούς µικροοργανισµούς, είναι χαµηλή σε σύγκριση µε άλλα υλικά επίστρωσης εντερικών βακτηριδίων. Αυτό το συνιστάται για χρήση µε κλινικά δείγµατα που είναι πιθανόν να περιέχουν µεικτή µικροβιακή χλωρίδα, όπως ούρα, επειδή επιτρέπει µια προκαταρκτική οµαδοποίηση των εντερικών και πολλών άλλων Gramαρνητικών βακτηριδίων σε ζυµωτικούς της λακτόζης και αζυµωτικούς της λακτόζης µικροοργανισµούς. 8,9 Στο άγαρ MacConkey, οι πεπτόνες παρέχουν θρεπτικά συστατικά. Το κρυσταλλικό ιώδες αναστέλλει τα Gram θετικά βακτηρίδια, ειδικά τους εντερόκοκκους και τους σταφυλόκοκκους. Η διαφοροποίηση µεταξύ των εντερικών µικροοργανισµών επιτυγχάνεται µε το συνδυασµό της λακτόζης και του ουδέτερου ερυθρού δείκτη του ph. Ανάλογα µε την ικανότητα του DA

2 αποµονωµένου στελέχους να ζυµώνει τους υδατάνθρακες, σχηµατίζονται άχρωµες ή ροζ έως ερυθρές αποικίες. Το άγαρ MacConkey συµπεριλαµβάνεται σε όλα τα προϊόντα εµβαπτιζόµενων αντικειµενοφόρων πλακών UROTUBE ως 2. Η αντικειµενοφόρος πλάκα BBL UROTUBE 2S είναι δύο πλευρών και περιέχει µόνον άγαρ CLED και MacConkey. Ένα τρίτο συµπεριλαµβάνεται στις επιφάνειες όλων των εµβαπτιζόµενων αντικειµενοφόρων πλακών τριών πλευρών για την ανίχνευση της παρουσίας των χαρακτηριστικών βακτηριδιακών οµάδων και ζυµοµυκήτων. Ο τύπος υλικού εξαρτάται από το προϊόν που χρησιµοποιείται: Το BBL UROTUBE, εκτός των υλικών 1 και 2 που αναφέρονται παραπάνω, περιέχει άγαρ σετριµίδης, ένα ευρέως χρησιµοποιούµενο για την εκλεκτική αποµόνωση του Pseudomonas aeruginosa. 10,11 Η πεπτόνη ζελατίνης και η καζεΐνη παρέχουν θρεπτικά συστατικά. Τα άλατα καλίου και µαγνησίου ενισχύουν το σχηµατισµό χρωστικής από το P. aeruginosa. Η γλυκερόλη είναι µια πηγή ενέργειας και άνθρακα. Το βρωµιούχο κετυλοτριµεθυλαµµώνιο (=σετριµίδη) είναι ένα απορρυπαντικό που αναστέλλει εκλεκτικά τα περισσότερα Gram αρνητικά ραβδία εκτός του P. aeruginosa. Το BBL UROTUBE M, εκτός των υλικών 1 και 2 που αναφέρονται παραπάνω, περιέχει άγαρ βύνης, ένα µερικώς εκλεκτικό για την αποµόνωση ζυµοµυκήτων, π.χ. Candida albicans. Το εκχύλισµα βύνης και το γαλακτικό οξύ παρέχουν θρεπτικά συστατικά και διατηρούν το ph σε χαµηλό επίπεδο, γεγονός που παρέχει εκλεκτικότητα για την αναστολή πολλών ειδών βακτηριδίων. 11 Το BBL UROTUBE E, εκτός των υλικών 1 και 2 που αναφέρονται παραπάνω, περιέχει άγαρ Enterococcus, ένα εκλεκτικό διαφορικό για είδη Enterococcus. 11 Στο άγαρ Enterococcus, η καζεΐνη και το εκχύλισµα ζυµοµυκήτων παρέχουν θρεπτικά συστατικά. Το χλωριούχο νάτριο διατηρεί την οσµωτική σταθερότητα. Ο συνδυασµός κιτρικών, αζιδίων, καναµυκίνης, πολυµυξίνης B, ναλιδιξικού οξέος και νεοµυκίνης αναστέλλει τα περισσότερα βακτηρίδια εκτός των ειδών Enterococcus. Η εσκουλίνη είναι ένα υπόστρωµα για τη βγλυκοζιδάση, η οποία απαντάται χαρακτηριστικά σε είδη Enterococcus. Ένα από τα προϊόντα της ενζυµικής υδρόλυσης, η εσκουλιτίνη, αντιδρά µε ιόντα σιδήρου(ιιι) για τη δηµιουργία καστανού έως µαύρου ιζήµατος στο που περιβάλλει τις αποικίες Enterococcus. Το BBL UROTUBE E. coli, εκτός των υλικών 1 και 2 που αναφέρονται παραπάνω, περιέχει άγαρ βγλυκουρονιδάσης (=BGLU), ένα διαφορικό για την ειδική ανίχνευση της E. coli και των ειδών Proteus. Το περιέχει νιτροφαινυλβγλυκουρονίδη, ένα χρωµογόνο υπόστρωµα για την ανίχνευση της δραστικότητας της β γλυκουρονιδάσης, η οποία απαντάται τυπικά στην Escherichia coli, ενώ πολλά άλλα βακτηρίδια, συµπεριλαµβανοµένων των ειδών Proteus, Providencia και Morganella, είναι αρνητικά. 11,12 Κατά την αποδόµηση του υποστρώµατος, στο και τις αποικίες συσσωρεύεται κίτρινη νιτροφαινόλη, ενώ οι αρνητικές στη γλυκουρονιδάση αποικίες είναι άχρωµες έως γκριζωπές σε άχρωµο. Κίτρινη ανάπτυξη από αυτό το είναι δυνατό να υποβληθεί σε εξέταση ινδόλης, η οποία, εάν είναι θετική, επιβεβαιώνει την ταυτοποίηση της E. coli. Ο σχηµατισµός ινδόλης σε αυτό το ενισχύεται από την προσθήκη της πρόδροµης ένωσης της ινδόλης (θρυπτοφάνη). Επιπλέον, αυτό το αµινοξύ είναι το υπόστρωµα για το ένζυµο απαµινάση της θρυπτοφάνης (TDA), το οποίο απαντάται χαρακτηριστικά στα είδη Proteus, Providencia και Morganella. Το ένζυµο αυτό είναι δυνατό να ανιχνευτεί εύκολα µε εκτέλεση εξέτασης TDA µε χλωριούχο σίδηρο(ιιι). Για περαιτέρω επιβεβαίωση, είναι επίσης δυνατό να εκτελεστεί εξέταση ινδόλης από άχρωµη ανάπτυξη, η οποία είναι θετική στα είδη Proteus vulgaris, Providencia και Morganella morganii. Το BBL UROTUBE SXT, εκτός των υλικών 1 και 2 που αναφέρονται παραπάνω, περιέχει για εξετάσεις ευαισθησίας χωρίς ανταγωνιστές ( PDM) µε τριµεθοπρίµη/σουλφαµεθοξαζόλη (SXT), για τον προσδιορισµό της ανθεκτικότητας ή της ευαισθησίας στο SXT. Τυχόν ανάπτυξη οποιωνδήποτε βακτηριδίων σε αυτό το σηµαίνει ανθεκτικότητα στο SXT. DA

3 Μετά τον ενοφθαλµισµό ή µετά τον ενοφθαλµισµό και την επώαση, οι εµβαπτιζόµενες αντικειµενοφόροι πλάκες είναι δυνατόν να χρησιµοποιηθούν και ως υλικά µεταφοράς από το ιατρείο προς τα αναλυτικά εργαστήρια. Η ανάπτυξη από τα υλικά πάνω στις εµβαπτιζόµενες αντικειµενοφόρους πλάκες είναι δυνατό να χρησιµοποιηθεί για εξετάσεις ταυτοποίησης και ευαισθησίας των αποµονωµένων στελεχών. ΑΝΤΙ ΡΑΣΤΗΡΙΑ Συνθέσεις* ανά λίτρο κεκαθαρµένου νερού Τα υλικά 1 και 2 είναι κοινά για όλες τις εµβαπτιζόµενες αντικειµενοφόρους πλάκες BBL UROTUBE. Υλικό 1: Άγαρ CLED Υλικό 2: Άγαρ MacConkey Πεπτικό αφοµοίωµα καζεΐνης 4,0 g Πεπτικό αφοµοίωµα καζεΐνης 17,0 g Επιλεγµένες πεπτόνες 4,0 Πεπτόνη κρέατος 3,0 Εκχύλισµα κρέατος 3,0 Λακτόζη 10,0 Λακτόζη 10,0 Χλωριούχο νάτριο 5,0 Κυστίνη 0,128 Μείγµα χολικών αλάτων 1,5 Κυανό της βρωµοθυµόλης 0,02 Ουδέτερο ερυθρό 0,03 Άγαρ 15,0 Κρυσταλλικό ιώδες 0,001 ph 7,3 ± 0,2 Άγαρ 13,5 ph 7,1 ± 0,2 Υλικό 3: Ο τύπος του υλικού 3 (εάν είναι διαθέσιµος) εξαρτάται από το προϊόν που χρησιµοποιείται (δείτε την ενότητα ΑΡΧΕΣ ΚΑΙ ΕΠΕΞΗΓΗΣΗ ΤΗΣ ΙΑ ΙΚΑΣΙΑΣ). Το BBL UROTUBE, εκτός των υλικών 1 και 2 που αναφέρονται παραπάνω, περιέχει άγαρ σετριµίδης: Πεπτικό αφοµοίωµα ζελατίνης 16,0 g Γλυκερόλη 8,0 g Υδρολυµένη καζεΐνη 10,0 Βρωµιούχο κετυλοτριµεθυλαµµώνιο 0,3 Θειικό κάλιο 10,0 Άγαρ 13,0 Χλωριούχο µαγνήσιο 1,4 ph 7,1 ± 0,2 Το BBL UROTUBE M, εκτός των υλικών 1 και 2 που αναφέρονται παραπάνω, περιέχει άγαρ βύνης: Εκχύλισµα βύνης 30,0 g Άγαρ 18,0 g Γαλακτικό οξύ 6,3 ph 4,0 ± 0,4 Το BBL UROTUBE E, εκτός των υλικών 1 και 2 που αναφέρονται παραπάνω, περιέχει άγαρ Enterococcus: Πεπτικό αφοµοίωµα καζεΐνης 20,0 g Καναµυκίνη 0,02 g Εκχύλισµα ζυµοµυκήτων 5,0 Πολυµυξίνη B 0,002 Χλωριούχο νάτριο 5,0 Ναλιδιξικό οξύ 0,0075 Κιτρικό 1,5 Νεοµυκίνη 0,002 Αζίδιο του νατρίου 0,15 Άγαρ 15,0 Εσκουλίνη 1,0 ph 7,1 ± 0,2 Κιτρικό σιδηρo(iii)αµµώνιο 0,5 Το BBL UROTUBE E. coli, εκτός των υλικών 1 και 2 που αναφέρονται παραπάνω, περιέχει άγαρ βγλυκουρονιδάσης (=BGLU): Πεπτόνη 10,0 g Χλωριούχο νάτριο 5,0 g Νιτροφαινυλβγλυκουρονίδη 0,1 Άγαρ 15,0 Θρυπτοφάνη 0,3 ph 7,2 ± 0,2 DA

4 Το BBL UROTUBE SXT, εκτός των υλικών 1 και 2 που αναφέρονται παραπάνω, περιέχει χωρίς ανταγωνιστή ( PDM) µε τριµεθοπρίµη/σουλφαµεθοξαζόλη (SXT). Υλικό PDM 32,3 g Τριµεθοπρίµη 0,003 g Σουλφαµεθοξαζόλη 0,04 ph 7,3 ± 0,3 *Οι συνθέσεις είναι δυνατό να είναι ρυθµισµένες ή/και συµπληρωµένες όπως απαιτείται, έτσι ώστε να πληρούνται τα κριτήρια απόδοσης. ΠΡΟΦΥΛΑΞΕΙΣ. Για επαγγελµατική χρήση µόνον. Μη χρησιµοποιείτε εµβαπτιζόµενες αντικειµενοφόρους πλάκες εάν παρουσιάζουν ενδείξεις µικροβιακής µόλυνσης, αποχρωµατισµό, ξηρότητα, ρωγµές ή άλλα σηµεία αλλοίωσης. Εφαρµόζετε άσηπτες τεχνικές και µέτρα προστασίας από βιολογικούς κινδύνους σε ολόκληρη τη διαδικασία. Φοράτε προστατευτικά γάντια κατά τη συλλογή και το χειρισµό δειγµάτων, καθώς και των θετικών αντικειµενοφόρων πλακών που περιέχουν µολυσµατικούς παράγοντες. Συµβουλευτείτε το έγγραφο ΓΕΝΙΚΕΣ Ο ΗΓΙΕΣ ΧΡΗΣΗΣ σχετικά µε τις άσηπτες διαδικασίες χειρισµού, τους βιολογικούς κινδύνους και την απόρριψη του χρησιµοποιηµένου προϊόντος. Όταν χρησιµοποιείτε τα προϊόντα αυτά ως µεταφοράς από ένα ιατρείο έως ένα διαγνωστικό εργαστήριο, τηρείτε τους τοπικούς κανονισµούς για την αποστολή µολυσµατικών δειγµάτων. ΦΥΛΑΞΗ ΚΑΙ ΙΑΡΚΕΙΑ ΖΩΗΣ Κατά την παραλαβή, φυλάσσετε τα προϊόντα BBL UROTUBE στο σκοτάδι στους C, στην αρχική συσκευασία, έως τη στιγµή της χρήσης. Αποφεύγετε την κατάψυξη, την υπερθέρµανση, την αποξήρανση και τις διακυµάνσεις θερµοκρασίας. Οι αντικειµενοφόροι πλάκες είναι δυνατό να ενοφθαλµιστούν έως την ηµεροµηνία λήξης (δείτε την ετικέτα της συσκευασίας) και να επωαστούν στους συνιστώµενους χρόνους επώασης. Οι µη ανοιγµένες αντικειµενοφόροι πλάκες από ανοιγµένες συσκευασίες είναι δυνατό να χρησιµοποιηθούν έως την ηµεροµηνία λήξης, εφόσον φυλάσσονται σε καθαρό χώρο στους C. Μόλις ανοιχτούν, οι αντικειµενοφόροι πλάκες πρέπει να χρησιµοποιούνται αµέσως. ΠΟΙΟΤΙΚΟΣ ΕΛΕΓΧΟΣ ΧΡΗΣΤΗ Παρασκευάζετε εναιωρήµατα των στελεχών εξέτασης που αναφέρονται παρακάτω σε φυσιολογικό αλατούχο διάλυµα, µε οπτική πυκνότητα που αντιστοιχεί στο πρότυπο McFarland 0,5 (περίπου 5 x 10 7 CFU/mL). Αραιώστε τα εναιωρήµατα σε επίπεδα CFU 10 4 έως 10 5 ανά ml. Εµβαπτίστε τα δείγµατα των αντικειµενοφόρων πλακών στην αραίωση αυτή. Αφήστε την περίσσεια εναιωρήµατος να αποστραγγιστεί και επιστρέψτε τις αντικειµενοφόρους πλάκες στα σωληνάριά τους. Επωάστε στους 35 έως 37 C επί ώρες. Επιθεωρήστε όπως περιγράφεται. Τα αναµενόµενα αποτελέσµατα αναφέρονται στον πίνακα: DA

5 Προϊόν και BBL UROTUBE 1 ας 2 ας 3 Χρώµα (µη ενοφθαλµισµένο) τριανταφυλλί άχρωµο έως ανοικτό πορτοκαλί BBL UROTUBE M ας 1 ας 2 ας 3 BBL UROTUBE E ας 1 ας 2 ας 3 τριανταφυλλί άχρωµο έως ανοικτό πορτοκαλί τριανταφυλλί Escherichia coli ATCC κίτρινο +, ροζ ερυθρό έως ροζ κίτρινο +, ροζ ερυθρό έως ροζ κίτρινο +, ροζ ερυθρό έως ροζ Proteus mirabilis ATCC έως πράσινο έως µπεζ πορτοκαλίκαστανό Enterococcus faecalis ATCC κίτρινο Pseudomonas aeruginosa ATCC , αχνές έως +, αχνές έως αποικίες µε ή χωρίς φθορισµό +, αποικίες κιτρινωπές έως έως πράσινο έως µπεζ πορτοκαλίκαστανό κίτρινο +, αχνές έως +, αχνές έως αποικίες µε ή χωρίς φθορισµό Candida albicans ATCC , µικρές λευκωπές +, µικρές λευκωπές +, λευκωπές αποικίες έως πράσινο έως µπεζ πορτοκαλίκαστανό κίτρινο ανοικτό πορτοκαλί +, καστανές έως µαύρες καστανό έως µαύρο +, αχνές έως +, αχνές έως αποικίες µε ή χωρίς φθορισµό +, µικρές λευκωπές (+)/ DA

6 Προϊόν και Χρώµα (µη ενοφθαλµισµένο) BBL UROTUBE E. coli ας 1 ας 2 ας 3 Εξέταση σηµειακής ινδόλης α TDA β τριανταφυλλί άχρωµο έως ανοικτό πορτοκαλί BBL UROTUBE 2s ας 1 ας 2 τριανταφυλλί BBL UROTUBE SXT ας 1 ας 2 ας 3 Escherichia coli ATCC κίτρινο +, ροζ ερυθρό έως ροζ +, κίτρινο και κίτρινες αποικίες + κίτρινο +, ροζ ερυθρό έως ροζ κίτρινο τριανταφυλλί +, ροζ ερυθρό έως ροζ άχρωµο έως ανοικτό πορτοκαλί Proteus mirabilis ATCC έως πράσινο έως µπεζ πορτοκαλίκαστανό αποικίες + + έως πράσινο έως µπεζ πορτοκαλίκαστανό έως πράσινο έως µπεζ πορτοκαλίκαστανό Enterococcus faecalis ATCC κίτρινο +, κίτρινο και κίτρινες αποικίες Pseudomonas aeruginosa ATCC , αχνές έως +, αχνές έως αποικίες µε ή χωρίς φθορισµό κίτρινο κίτρινο +, αχνές έως +, αχνές έως αποικίες µε ή χωρίς φθορισµό +, αχνές έως +, αχνές έως αποικίες µε ή χωρίς φθορισµό Candida albicans ATCC , µικρές λευκωπές (+) +, µικρές λευκωπές +, µικρές λευκωπές + + = χωρίς ανάπτυξη έως ίχνη ανάπτυξης, (+) = ασθενής ανάπτυξη, + = καλή έως εξαιρετική ανάπτυξη α, β Εκτελέστε αυτές τις συµπληρωµατικές εξετάσεις µε ανάπτυξη από το 3. Για τη διαθεσιµότητα των αντιδραστηρίων, δείτε την ενότητα Υλικά που δεν παρέχονται. ΙΑ ΙΚΑΣΙΑ Παρεχόµενα υλικά BBL UROTUBE 2s, BBL UROTUBE, BBL UROTUBE M, BBL UROTUBE E, BBL UROTUBE E. coli ή BBL UROTUBE SXT Μικροβιολογικά ελεγµένο. Υλικά που δεν παρέχονται DA

7 Βοηθητικά υλικά, αντιδραστήρια και εργαστηριακός εξοπλισµός, όπως περιγράφεται. Για τις εξετάσεις ινδόλης και TDA στο 3 του BBL UROTUBE E. coli: Indole Dropper Reagent (αρ. κατ ) ή Indole DMACA Dropper Reagent (αρ. κατ ). Ferric Chloride Dropper Reagent (αρ. κατ ). Για εξετάσεις οξειδάσης στο 3 του BBL UROTUBE: Oxidase Dropper Reagent (αρ. κατ ). Τύποι δειγµάτων Τα προϊόντα αυτά είναι κατάλληλα για την αποµόνωση και την απαρίθµηση βακτηριδίων και µυκήτων από ούρα (που λαµβάνονται από το µέσον της ροής ούρησης ή µέσω καθετήρα ή που συλλέγονται µε υπερηβική παρακέντηση της ουροδόχου κύστης). Συµβουλευτείτε την ενότητα ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΤΙΚΑ ΑΠΟ ΟΣΗΣ ΚΑΙ ΠΕΡΙΟΡΙΣΜΟΙ ΤΗΣ ΙΑ ΙΚΑΣΙΑΣ. Συλλογή και παρασκευή δειγµάτων Για τη συλλογή δειγµάτων εφαρµόζετε άσηπτες τεχνικές. Εφαρµόζετε πρότυπες διαδικασίες για τη συλλογή. 1,13 Τα ούρα πρέπει να είναι φρέσκα ή να µην έχουν συλλεχθεί πάνω από 2 ώρες. Εναλλακτικά, τα δείγµατα ούρων είναι δυνατό να διατηρούνται στη συντήρηση του ψυγείου (όχι περισσότερο από 24 ώρες) για την αποφυγή υπερβολικής ανάπτυξης των λοιµωδών παραγόντων ή µολυσµατικών ουσιών πριν από τον ενοφθαλµισµό. 13 ιαδικασία της εξέτασης 1. Επιθεωρήστε τις επιφάνειες του άγαρ µε το σωληνάριο κλειστό. Εµβαπτιζόµενες αντικειµενοφόροι πλάκες που εµφανίζουν ενδείξεις αποξήρανσης, µόλυνσης ή άλλη αλλοίωση δεν πρέπει να χρησιµοποιούνται. 2. Επικολλήστε στο σωληνάριο µια ετικέτα µε το όνοµα του ασθενούς, τον αριθµό του δείγµατος και την ηµεροµηνία ενοφθαλµισµού. 3. Ξεβιδώστε το κάλυµµα και αφαιρέστε την αντικειµενοφόρο πλάκα από το πλαστικό σωληνάριο, χωρίς να αγγίξετε τις επιφάνειες του άγαρ (Εικόνα 1). Μη συλλέγετε δείγµατα ούρων στο σωληνάριο του περιέκτη του BBL UROTUBE! 4. Εµβαπτίστε την αντικειµενοφόρο πλάκα τρεις φορές για λίγο στα ούρα, έτσι ώστε οι επιφάνειες του άγαρ να είναι εντελώς βυθισµένες (Εικόνα 2). Μην αφήνετε την αντικειµενοφόρο πλάκα µέσα στο υγρό περισσότερο από 10 δευτερόλεπτα, επειδή στην περίπτωση αυτή ενδέχεται να εκπλυθούν τα συστατικά από τα υλικά ή/και να αποκολληθεί η πηκτή από τον πλαστικό φορέα. Εάν δεν υπάρχει επαρκής όγκος ούρων για εµβάπτιση, τα ούρα είναι δυνατό να εκχυθούν προσεκτικά πάνω στις επιφάνειες του άγαρ. 5. Αφήστε την περίσσεια των ούρων να αποστραγγιστεί, κρατώντας το άκρο της αντικειµενοφόρου πλάκας πάνω στο εσωτερικό χείλος του σωληναρίου (Εικόνα 3). Οι τελευταίες σταγόνες είναι δυνατό να εξαλειφθούν από την άκρη της αντικειµενοφόρου πλάκας µε απορροφητικό χαρτί (Εικόνα 4). 6. Επιστρέψτε προσεκτικά την αντικειµενοφόρο πλάκα µέσα στο πλαστικό σωληνάριό της και κλείστε το σωληνάριο ερµητικά. 7. Επωάστε το σωληνάριο επί 18 έως 24 ώρες στους 35 έως 37 C (Εικόνα 5) ή αποστείλετέ το σε ένα εργαστήριο βακτηριολογίας για περαιτέρω επεξεργασία. Σηµειωτέον ότι τα ενοφθαλµισµένα σωληνάρια πρέπει να µεταφέρονται στο εργαστήριο εντός 24 ωρών. Κατά τη διάρκεια της µεταφοράς, αποφεύγετε τις αυξηµένες θερµοκρασίες και την κατάψυξη των αντικειµενοφόρων πλακών. DA

8 Εικόνα 1 Εικόνα 2 Εικόνα 3 Εικόνα 4 Εικόνα 5 Εικόνα 6 Αποτελέσµατα και ερµηνεία Μετά την επώαση, αφαιρέστε την αντικειµενοφόρο πλάκα από το σωληνάριο για ερµηνεία. Για ποσοτική εκτίµηση των βιώσιµων αριθµών, συγκρίνετε την ανάπτυξη πάνω στο άγαρ CLED µε τις εικόνες αναφοράς που παρέχονται παρακάτω. Για την ερµηνεία χρησιµοποιήστε καλό φωτισµό (Εικόνα 6). Συρρέουσα ανάπτυξη, η οποία προκαλείται από βιώσιµους αριθµούς 10 6 /ml, ενδέχεται να είναι δύσκολο να αναγνωριστεί διότι ενδέχεται να καλύπτει οµοιόµορφα ολόκληρη την επιφάνεια του άγαρ. Η επαφή ενός κρίκου ή στειλεού µε την επιφάνεια ενδέχεται να βοηθήσει στην περίπτωση αυτή. Η ανάπτυξη σε άγαρ MacConkey ( 2) υποδηλώνει την παρουσία Gram αρνητικών ραβδίων. Η παρουσία ανάπτυξης στο 3 (εάν υπάρχει διαθέσιµο) υποδηλώνει την παρουσία των αντίστοιχων οµάδων µικροοργανισµών, ανάλογα µε το και τον τύπο αντικειµενοφόρου πλάκας που χρησιµοποιούνται. Παρακάτω παρέχεται µια λεπτοµερής περιγραφή της ανάπτυξης των υλικών. Μην επιχειρήσετε τον προσδιορισµό των βιώσιµων αριθµών των µικροοργανισµών που αναπτύσσονται στην πλευρά 2 και 3, επειδή οι εκλεκτικοί παράγοντες που περιέχονται σε αυτά τα υλικά ενδέχεται να επηρεάσουν την ανάπτυξη! Μετά την αναα πάνω σε κατάλληλα υλικά σε πλάκες, τυχόν ανάπτυξη από οποιοδήποτε από τα υλικά που περιέχονται στις αντικειµενοφόρους πλάκες είναι δυνατό να χρησιµοποιηθεί για περαιτέρω βιοχηµικές εξετάσεις ή εξετάσεις ευαισθησίας. Άγαρ CLED (Υλικό 1 σε όλα τα προϊόντα BBL UROTUBE): Στο άγαρ CLED αναπτύσσονται Gram θετικά και Gram αρνητικά βακτηρίδια και ζυµοµύκητες. Ο κίτρινος αποχρωµατισµός του υλικού υποδηλώνει ζύµωση της λακτόζης, ενώ ένα ή πράσινο υποδηλώνει ζυµωτικούς της γλυκόζης µικροοργανισµούς. Για τον προσδιορισµό των βιώσιµων αριθµών που λαµβάνονται στο άγαρ CLED, είναι δυνατό να χρησιµοποιηθούν οι κατευθυντήριες οδηγίες και ο οδηγός ερµηνείας (εικόνες) που ακολουθούν, στο τέλος του εγγράφου αυτού: Βιώσιµος Κλινική ερµηνεία DA

9 αριθµός Λιγότερα από βακτηρίδια ανά ml έως βακτηρίδια ανά ml Περισσότερα από βακτηρίδια ανά ml Ούρα που λαµβάνονται από το µέσον της ροής ούρησης: Μόλυνση. Χαµηλοί αριθµοί ενδέχεται να είναι σηµαντικοί σε ασθενείς που έχουν υποβληθεί προηγουµένως σε θεραπεία ή σε ασθενείς µε χρόνιες λοιµώξεις. Ούρα που λαµβάνονται µε καθετηριασµό ή παρακέντηση της ουροδόχου κύστης: Στις περιπτώσεις αυτές, λιγότερα από βακτηρίδια ml ενδέχεται να υποδηλώνουν ήδη λοίµωξη. Ούρα που λαµβάνονται από το µέσον της ροής ούρησης: Αµφίβολη. Συνιστάται η επανάληψη της εξέτασης, επειδή αυτοί οι αριθµοί βακτηριδίων εµφανίζονται σε χρόνιες λοιµώξεις της ουροφόρου οδού, αλλά ενδέχεται επίσης να υπάρχουν σε ούρα που λαµβάνονται από το µέσον της ροής ούρησης ως µολυσµατικοί παράγοντες. Αυτοί οι αριθµοί ενδέχεται να είναι σηµαντικοί σε ασθενείς που έχουν υποβληθεί προηγουµένως σε θεραπεία ή σε ασθενείς µε χρόνιες λοιµώξεις. Ούρα που λαµβάνονται µε καθετηριασµό ή παρακέντηση της ουροδόχου κύστης: Στις περιπτώσεις αυτές, λιγότερα από βακτηρίδια ml ενδέχεται να υποδηλώνουν ήδη λοίµωξη. Αυτοί οι υψηλοί βιώσιµοι αριθµοί υποδηλώνουν την παρουσία λοίµωξης σε όλους τους τύπους ούρων (συµπεριλαµβανοµένων των ούρων που λαµβάνονται από το µέσον της ροής ούρησης). Στις περιπτώσεις αυτές, η διάγνωση είναι δυνατό να επιβεβαιωθεί από την παρουσία υψηλών αριθµών λευκοκυττάρων στο ίζηµα των ούρων. Στις γυναίκες, ενδέχεται να εµφανιστεί υψηλός αριθµός αποικιών βακτηριδίων ως αποτέλεσµα εξωτερικής µόλυνσης (λευκόρροια, κολπίτιδα). Η διάγνωση αυτή επιβεβαιώνεται από την παρουσία αυξηµένου αριθµού πλακωδών επιθηλιακών κυττάρων, χωρίς οποιαδήποτε αύξηση του αριθµού λευκοκυττάρων στο ίζηµα των ούρων. Άγαρ MacConkey (Υλικό 2 σε όλα τα προϊόντα BBL UROTUBE): Σε αυτό το, αναπτύσσονται όλοι οι Enterobacteriaceae και ορισµένα αζυµωτικά βακτηρίδια (π.χ. Pseudomonas aeruginosa). Τυχόν ροζ έως ερυθρός αποχρωµατισµός είναι ενδεικτικός ζύµωσης της λακτόζης, π.χ. µε την E. coli, ενώ άχρωµες, µπεζ ή πορτοκαλί αποικίες πάνω σε πορτοκαλίκαστανωπό υποδηλώνουν αζυµωτικά της λακτόζης βακτηρίδια. Σηµειωτέον ότι η αντικειµενοφόρος πλάκα BBL UROTUBE 2s είναι δύο πλευρών και περιέχει µόνον άγαρ CLED και MacConkey. Ερµηνεία της ανάπτυξης στο αντίστοιχο τρίτο (Υλικό 3) Όπως αναφέρεται παραπάνω, το τρίτο εξαρτάται από τον τύπο αντικειµενοφόρου πλάκας που χρησιµοποιείται: BBL UROTUBE: Η ανάπτυξη σε άγαρ σετριµίδης πρέπει να ερµηνεύεται ως εξής: πράσινες έως κίτρινες, φθορίζουσες αποικίες υποδηλώνουν την παρουσία του Pseudomonas aeruginosa. Η διάγνωση είναι δυνατό να επιβεβαιωθεί από µια θετική στην οξειδάση εξέταση (δείτε την ενότητα Υλικά που δεν παρέχονται). Μη φθορίζουσα ανάπτυξη πάνω σε αυτό το πρέπει να εξετάζεται περαιτέρω για πλήρη ταυτοποίηση. BBL UROTUBE M: Η ανάπτυξη σε άγαρ βύνης υποδηλώνει την παρουσία ζυµοµυκήτων, π.χ. Candida albicans ή άλλων µυκήτων. Σηµειωτέον ότι ορισµένα στελέχη ζυµοµυκήτων χρειάζονται 42 έως 48 ώρες για πλήρη εµφάνιση της ανάπτυξης στα υλικά. Σπανίως, ορισµένα βακτηρίδια, όπως οι γαλακτοβάκιλλοι, ενδέχεται να αναπτυχθούν σε αυτό το. Εποµένως, µια χρώση κατά Gram από την ανάπτυξη σε αυτό το ενδέχεται να είναι χρήσιµη. Για πλήρη ταυτοποίηση απαιτείται περαιτέρω εξέταση. BBL UROTUBE E: Καστανές έως µαύρες αποικίες πάνω σε άγαρ Enterococcus υποδηλώνουν την παρουσία ειδών Enterococcus, π.χ. Enterococcus faecalis. Η ανάπτυξη άχρωµων έως γκρι αποικιών ενδέχεται να υποδηλώνει την παρουσία στρεπτόκοκκων, αλλά χρειάζεται επιβεβαίωση. DA

10 BBL UROTUBE E. coli: Εάν το χρώµα του υλικού BGLU µεταβληθεί σε κίτρινο, τότε στο δείγµα υπάρχει η Escherichia coli ή άλλα θετικά στη βγλυκουρονιδάση βακτηρίδια. Εκτελέστε εξέταση ινδόλης από κίτρινη ανάπτυξη σε αυτό το. Μια θετική αντίδραση ινδόλης υποδηλώνει την παρουσία της E. coli. Εάν υπάρχει άχρωµη έως µπεζ ανάπτυξη σε αυτό το, εκτελέστε εξέταση TDA. Μια θετική εξέταση TDA υποδηλώνει την παρουσία µικροοργανισµών από την οµάδα ProteusMorganella Providencia. Για τη διαθεσιµότητα των αντιδραστηρίων εξέτασης ινδόλης και TDA, δείτε την ενότητα Υλικά που δεν παρέχονται. Για την εκτέλεση αυτών των συµπληρωµατικών εξετάσεων, ακολουθήστε τις οδηγίες που παρέχονται µε τα αντιδραστήρια. BBL UROTUBE SXT: Αυτό το χρησιµοποιείται για τον προσδιορισµό της ευαισθησίας (ή της ανθεκτικότητας) των αποµονωµένων βακτηριδίων στην τριµεθοπρίµη/ σουλφαµεθοξαζόλη (SXT). Η απουσία ανάπτυξης σε αυτό το υποδηλώνει ευαισθησία, ενώ η έντονη ανάπτυξη υποδηλώνει ανθεκτικότητα στην SXT. Η µειωµένη ανάπτυξη σε αυτό το, όταν συγκρίνεται µε το άγαρ CLED (Υλικό 1), ενδέχεται να υποδηλώνει την παρουσία µεικτής που περιέχει τουλάχιστον έναν µικροοργανισµό ανθεκτικό στην SXT. Μετά τη χρήση και πριν από την απόρριψη, όλα τα χρησιµοποιηµένα σωληνάρια και κάθε άλλο τυχόν µολυσµένο πρέπει να αποστειρώνονται σε αυτόκαυστο ή να αποτεφρώνονται. Για λεπτοµέρειες, δείτε το έγγραφο ΓΕΝΙΚΕΣ Ο ΗΓΙΕΣ ΧΡΗΣΗΣ. ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΤΙΚΑ ΑΠΟ ΟΣΗΣ ΚΑΙ ΠΕΡΙΟΡΙΣΜΟΙ ΤΗΣ ΙΑ ΙΚΑΣΙΑΣ Τα BBL UROTUBE 2s, BBL UROTUBE, BBL UROTUBE M, BBL UROTUBE E, BBL UROTUBE E. coli και BBL UROTUBE SXT είναι κατάλληλα για τη διάγνωση συνήθων λοιµώξεων της ουροφόρου οδού από δείγµατα ούρων. Η µέθοδος εµβαπτιζόµενης αντικειµενοφόρου πλάκας µε άγαρ CLED και MacConkey έχει αποδειχθεί ότι είναι ένα αποτελεσµατικό και απλό µέσο για την καταµέτρηση των κοινών βακτηριδίων (π.χ. Enterobacteriaceae, άλλων Gram αρνητικών ραβδίων (όπως Pseudomonas), εντερόκοκκων, σταφυλόκοκκων και άλλων µικροοργανισµών που υπάρχουν στα ούρα. 18 Η χρήση ενός τρίτου υλικού (εάν υπάρχει διαθέσιµο), εκτός αυτών των πρότυπων υλικών, είναι χρήσιµη εάν υποψιάζεστε την παρουσία ειδικών οµάδων µικροοργανισµών ως λοιµωδών παραγόντων. 912 Τα δείγµατα ούρων, που χρησιµοποιούνται µε αυτά ή άλλα συστήµατα και υλικά, πρέπει να έχουν συλλεχθεί υπό άσηπτες συνθήκες και να είναι φρέσκα (να µην έχουν συλλεχθεί πάνω από 2 ώρες) ή να έχουν φυλαχθεί στη συντήρηση του ψυγείου (το πολύ 24 ώρες). 1,13 Τυχόν εσφαλµένη συλλογή των ούρων, φύλαξη των δειγµάτων για χρονικό διάστηµα που υπερβαίνει τις περιόδους που υποδεικνύονται παραπάνω, µακρές χρονικές περίοδοι µεταφοράς πριν από την επεξεργασία των ενοφθαλµισµένων αντικειµενοφόρων πλακών, καθώς και έκθεση των ενοφθαλµισµένων αντικειµενοφόρων πλακών σε ακραίες τιµές θερµοκρασίας, ενδέχεται να έχουν ως αποτέλεσµα εσφαλµένη διάγνωση ή ακόµα και να καταστήσουν αδύνατη τη διάγνωση. 1,13 Η πλέον ακριβής διάγνωση των λοιµώξεων της ουροφόρου οδού επιτυγχάνεται εάν χρησιµοποιηθούν ούρα που λαµβάνονται µε παρακέντηση της ουροδόχου κύστης, επειδή οι µικροοργανισµοί που υπάρχουν στη φυσιολογική χλωρίδα της ουρήθρας ενδέχεται να µολύνουν τα ούρα που λαµβάνονται µε άλλες τεχνικές συλλογής. Απαιτητικά βακτηρίδια όπως µυκοπλάσµατα, χλαµύδια, Neissseria gonorrhoeae, µυκοβακτηρίδια ή Gardnerella vaginalis δεν αναπτύσσονται στα υλικά αυτών των προϊόντων εµβαπτιζόµενων αντικειµενοφόρων πλακών. Εάν υποψιάζεστε ότι οι µικροοργανισµοί αυτοί ενέχονται σε λοίµωξη της ουροφόρου οδού, πρέπει να εφαρµόσετε τις κατάλληλες τεχνικές για την ανίχνευσή τους. 1,13 Ορισµένα στελέχη στρεπτόκοκκων, ιδιαίτερα του Streptococcus agalactiae (οµάδα B), δεν αναπτύσσονται επαρκώς στο 1 (άγαρ CLED). Εάν υποψιάζεστε ότι ενέχονται DA

11 σε λοίµωξη της ουροφόρου οδού, συνιστάται α των ούρων σε πλάκα αιµατούχου άγαρ (π.χ. BD Columbia Agar with 5% Sheep Blood). Υλικά πάνω σε εµβαπτιζόµενες αντικειµενοφόρους πλάκες δεν πρέπει να χρησιµοποιούνται για εκτέλεση εξετάσεων ευαισθησίας µε τη µέθοδο διάχυσης σε δίσκο. Παρότι ορισµένες διαγνωστικές εξετάσεις είναι δυνατό να εκτελεστούν απευθείας στα υλικά, για πλήρη ταυτοποίηση είναι απαραίτητες βιοχηµικές και, εάν υποδεικνύεται, ανοσολογικές εξετάσεις, µε χρήση καθαρών καλλιεργειών. Εξαιρέσεις αποτελούν η E. coli και οι οµάδες ProteusMorganellaProvidencia, οι οποίες είναι δυνατό να ταυτοποιηθούν στο 3 (Άγαρ BGLU) του BBL UROTUBE E. coli, εάν έχουν εκτελεστεί οι συνιστώµενες συµπληρωµατικές εξετάσεις (ινδόλης, TDA). Επίσης, το Pseudomonas aeruginosa είναι δυνατό να ταυτοποιηθεί απευθείας στο 3 (Άγαρ σετριµίδης) του BBL UROTUBE, εάν διαπιστωθούν πρασινωπές φθορίζουσες οι οποίες παράγουν θετική αντίδραση οξειδάσης. Για κατάλληλη θεραπεία, ενδέχεται να είναι απαραίτητες εξετάσεις ευαισθησίας των αποµονωµένων µικροοργανισµών. Η ανάπτυξη τυχόν βακτηριδίων στο 3 (Υλικό PDM µε τριµεθοπρίµη/σουλφαµεθοξαζόλη) του BBL UROTUBE SXT πρέπει να ερµηνεύεται ως ανθεκτικότητα των µικροοργανισµών σε αυτό τον αντιµικροβιακό παράγοντα (SXT). ΑΝΑΦΟΡΕΣ 1. Gallien, R Mikrobiologische Diagnostik in der ärztlichen Praxis, G. Fischer Verlag, Stuttgart. 2. Ellner, P.D., and M.S. Papachristos Detection of bacteriuria by dipslide. Am. J. Clin. Pathol. 63: Guttmann, D Dipslide: an aid to quantitative urine culture in general practice. Br. Med. J. 3: McAllister, T.A., et al Assessment of plane dipslide quantitation of bacteriuria. Nephron 11: Van Dorsten, J.P., and E.R. Bannister Office diagnosis of asymptomatic bacteriuria in pregnant women. Am. J. Obstet. Gynecol. 155: Sandys, G.H A new method of preventing swarming of Proteus sp. with a description of a new medium suitable for use in routine laboratory practice. J. Med. Lab. Technol. 17: Mackey, J.P., and G.H. Sandys Laboratory diagnosis of infection of the urinary tract in general practice by means of a dipinoculum transport medium. Br. Med. J. 2: Farmer III, J.J Enterobacteriaceae: introduction and identification. In: Murray, P.R., E.J. Baron, J.H. Jorgensen, M.A. Pfaller, and R.H. Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 9. Murray, P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R.H. Yolken (ed.) Manual of clinical microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 10. King, E.O., M.K. Ward, and E.E. Raney Two simple media for the demonstration of pyocyanin and fluorescein. J. Lab. Clin. Med. 44: MacFaddin, J.F Media for the isolation cultivation maintenance of medical bacteria. Volume 1. Williams and Wilkins, Baltimore, London. 12. Chapin, K.C., and T.L. Lauderdale Reagents, stains, an media: bacteriology. In: Murray, P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 13. Thomson, R.B. jr., and J.M. Miller Specimen collection, transport, and processing: bacteriology. In: Murray, P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. DA

12 ΙΑΘΕΣΙΜΟΤΗΤΑ Αρ. κατ. Όνοµα προϊόντος Μέγεθος συσκευασίας BBL UROTUBE E. coli 10 αντικειµενοφόροι πλάκες BBL UROTUBE E 10 αντικειµενοφόροι πλάκες BBL UROTUBE 10 αντικειµενοφόροι πλάκες BBL UROTUBE 50 αντικειµενοφόροι πλάκες BBL UROTUBE SXT 10 αντικειµενοφόροι πλάκες BBL UROTUBE M 10 αντικειµενοφόροι πλάκες BBL UROTUBE 2s 10 αντικειµενοφόροι πλάκες ΠΕΡΙΣΣΟΤΕΡΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ Για περισσότερες πληροφορίες, παρακαλούµε επικοινωνήστε µε τον τοπικό αντιπρόσωπο της BD. BD Diagnostic Systems Tullastrasse 8 12 D69126 Heidelberg/Germany Phone: , Fax: Reception_Germany@europe.bd.com BD Diagnostic Systems Europe Becton Dickinson France SA 11 rue Aristide Bergès Le Pont de Claix/France Tel: Fax: BD, BD logo and BBL are trademarks of Becton, Dickinson and Company. Urotube is a trademark of Becton Dickinson GmbH. ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection 2003 Becton, Dickinson and Company Ο ΗΓΟΣ ΕΡΜΗΝΕΙΑΣ (Άγαρ CLED, (=10 3 )/ml (=10 4 )/ml (=10 5 )/ml (=10 6 )/ml Μόλυνση: (= ) CFU/mL Αµφίβολη: > < (= ) CFU/mL Λοίµωξη: (= ) CFU/mL DA