BD BBL Mycoslide. Ο ΗΓΙΕΣ ΧΡΗΣΗΣ ΕΤΟΙΜΑ ΠΡΟΣ ΧΡΗΣΗ ΥΛΙΚΑ ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΑΣ ΣΕ ΕΜΒΑΠΤΙΖΟΜΕΝΕΣ ΑΝΤΙΚΕΙΜΕΝΟΦΟΡΟΥΣ ΠΛΑΚΕΣ DA Αναθ.

Transcript

1 Ο ΗΓΙΕΣ ΧΡΗΣΗΣ ΕΤΟΙΜΑ ΠΡΟΣ ΧΡΗΣΗ ΥΛΙΚΑ ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΑΣ ΣΕ ΕΜΒΑΠΤΙΖΟΜΕΝΕΣ ΑΝΤΙΚΕΙΜΕΝΟΦΟΡΟΥΣ ΠΛΑΚΕΣ DA Αναθ.: Ιούνιος 2003 BD BBL Mycoslide ΧΡΗΣΗ ΓΙΑ ΤΗΝ ΟΠΟΙΑ ΠΡΟΟΡΙΖΕΤΑΙ Το BBL Mycoslide είναι µια εµβαπτιζόµενη αντικειµενοφόρος πλάκα τριών πλευρών, η οποία περιέχει υλικά καλλιέργειας για την ανίχνευση µυκήτων, συµπεριλαµβανοµένων των ζυµοµυκήτων, από ούρα, πτύελα, φαρυγγικές πλύσεις, δείγµατα κοπράνων και ποικιλία δειγµάτων που συλλέγονται σε στειλεούς. ΑΡΧΕΣ ΚΑΙ ΕΠΕΞΗΓΗΣΗ ΤΗΣ ΙΑ ΙΚΑΣΙΑΣ Μικροβιολογική µέθοδος. Οι νηµατώδεις µύκητες και ζυµοµύκητες είναι συχνοί παθογόνοι, προκαλώντας πολλούς τύπους τοπικών και συστηµατικών λοιµώξεων σε ανοσοκατεσταλµένα άτοµα. 1 Ένας από τους πλέον συχνούς παθογόνους µύκητες είναι το Candida albicans. Σε ανοσοκατεσταλµένους ασθενείς, το C. albicans, καθώς και το C. dubliniensis που περιγράφηκε πρόσφατα, προκαλούν συχνά εντοπισµένες και συστηµατικές λοιµώξεις. Οι τρεις κύριες θέσεις του σώµατος που ενέχονται σε τοπικές λοιµώξεις είναι η αναπνευστική, η ουρογεννητική και η εντερική οδός. Ο ποσοτικός προσδιορισµός των ζυµοµυκήτων που αποµονώνονται από αυτές τις θέσεις του σώµατος είναι σηµαντικός επειδή ενδέχεται να υπάρχουν σε χαµηλούς αριθµούς σε φυσιολογική χλωρίδα, αλλά αυξάνονται σηµαντικά κατά τη διάρκεια λοιµώξεων. 1-5 Το BBL Mycoslide αποτελείται από ένα φορέα άγαρ τριών πλευρών, καλυµµένο µε δύο υλικά καλλιέργειας µυκήτων και ένα υλικό για την ανίχνευση των βακτηριδίων που υπάρχουν στο δείγµα. Ολόκληρος ο φορέας άγαρ εµβαπτίζεται σε υγρά δείγµατα ή ενοφθαλµίζεται µε γραµµωτή επίστρωση δειγµάτων από στειλεούς. Μετά την επώαση, τα αποµονωµένα στελέχη είναι δυνατό να καταµετρηθούν και να χρησιµοποιηθούν για περαιτέρω εξετάσεις διαφοροποίησης και ταυτοποίησης, καθώς και για εξετάσεις ευαισθησίας. Το υλικό καλλιέργειας 1 είναι άγαρ βύνης για την ανίχνευση όλων των τύπων µυκήτων, συµπεριλαµβανοµένων των ευρωτοµυκήτων και των ζυµοµυκήτων. Το εκχύλισµα βύνης περιέχει όλα τα απαραίτητα θρεπτικά συστατικά για την υποστήριξη της ανάπτυξης των µυκήτων. Το χαµηλό ph του υλικού καλλιέργειας έχει ως αποτέλεσµα µερική ή πλήρη αναστολή των µολυσµατικών βακτηριδίων, αλλά είναι καλά ανεκτό από τους µύκητες. Το υλικό αυτό χρησιµοποιείται για τον ποσοτικό προσδιορισµό µυκητιακών παθογόνων. Το υλικό καλλιέργειας 2 είναι άγαρ βύνης συµπληρωµένο µε κυκλοεξιµίδη, η οποία είναι αναστολέας σαπροφυτικών ευρωτοµυκήτων και ορισµένων ζυµοµυκήτων. Οι περισσότεροι παθογόνοι µύκητες, συµπεριλαµβανοµένου του Candida albicans, δεν αναστέλλονται σε αυτό το υλικό καλλιέργειας. Ωστόσο, το Cryptococcus neoformans και ορισµένα είδη Candida εκτός του C. albicans, τα οποία ενδέχεται επίσης να διαδραµατίζουν ένα ρόλο ως λοιµώδεις παράγοντες, αναστέλλονται από την κυκλοεξιµίδη. Το υλικό καλλιέργειας 3 είναι το άγαρ CLED (Cystine-Lactose-Electrolyte-Deficient Ανεπαρκές σε Κυστίνη-Λακτόζη-Ηλεκτρολύτες), ένα διαφορικό υλικό καλλιέργειας για χρήση στην αποµόνωση και την απαρίθµηση βακτηριδίων σε ούρα. Είναι δυνατόν επίσης να χρησιµοποιηθεί για την αποµόνωση βακτηριδίων από άλλα δείγµατα, εάν δεν είναι πάρα πολύ απαιτητικά. Στο BBL Mycoslide, το υλικό καλλιέργειας χρησιµοποιείται κυρίως για τον προσδιορισµό της συνοδευτικής βακτηριδιακής χλωρίδας. Το BBL Mycoslide χρησιµοποιείται για την ανίχνευση, την αποµόνωση και την απαρίθµηση µυκήτων από µια ποικιλία θέσεων του σώµατος και τύπων δειγµάτων. Είναι δυνατόν επίσης να χρησιµοποιηθεί ως υλικό µεταφοράς από το ιατρείο έως τα αναλυτικά εργαστήρια. DA

2 ΑΝΤΙ ΡΑΣΤΗΡΙΑ Συνθέσεις* ανά λίτρο κεκαθαρµένου νερού BBL Mycoslide Υλικό καλλιέργειας 1: Άγαρ βύνης Υλικό καλλιέργειας 2: Άγαρ βύνης µε κυκλοεξιµίδη Υλικό καλλιέργειας 3: Άγαρ CLED Εκχύλισµα βύνης 30,0 g Εκχύλισµα βύνης 30,0 g Πεπτόνη ζελατίνης 4,0 g Άγαρ 15,0 Άγαρ 15,0 Πεπτόνη καζεΐνης 4,0 ph 4,1 ± 0,2 Κυκλοεξιµίδη 1,0 Εκχύλισµα βοείου 3,0 κρέατος ph 4,1 ± 0,2 Λακτόζη 10,0 L-κυστίνη 0,128 Κυανούν της 0,02 βρωµοθυµόλης Άγαρ 15,0 ph 7,3 ± 0,3 *Ρυθµισµένο ή/και συµπληρωµένο όπως απαιτείται, έτσι ώστε να πληρούνται τα κριτήρια απόδοσης. ΠΡΟΦΥΛΑΞΕΙΣ. Για επαγγελµατική χρήση µόνον. Μη χρησιµοποιείτε εµβαπτιζόµενες αντικειµενοφόρους πλάκες εάν παρουσιάζουν ενδείξεις µικροβιακής µόλυνσης, αποχρωµατισµό, ξηρότητα, ρωγµές ή άλλα σηµεία αλλοίωσης. Εφαρµόζετε άσηπτες τεχνικές και µέτρα προστασίας από βιολογικούς κινδύνους σε ολόκληρη τη διαδικασία. Συµβουλευτείτε το έγγραφο ΓΕΝΙΚΕΣ Ο ΗΓΙΕΣ ΧΡΗΣΗΣ σχετικά µε τις άσηπτες διαδικασίες χειρισµού, τους βιολογικούς κινδύνους και την απόρριψη του χρησιµοποιηµένου προϊόντος. Όταν χρησιµοποιείτε το BBL Mycoslide ως υλικό µεταφοράς από ένα ιατρείο έως ένα διαγνωστικό εργαστήριο, τηρείτε τους τοπικούς κανονισµούς για την αποστολή µολυσµατικών δειγµάτων. ΦΥΛΑΞΗ ΚΑΙ ΙΑΡΚΕΙΑ ΖΩΗΣ Κατά την παραλαβή, φυλάσσετε το BBL Mycoslide στο σκοτάδι στους C, στην αρχική συσκευασία, έως τη στιγµή της χρήσης. Αποφεύγετε την κατάψυξη, την υπερθέρµανση, την αποξήρανση και τις διακυµάνσεις θερµοκρασίας. Οι αντικειµενοφόροι πλάκες είναι δυνατό να ενοφθαλµιστούν έως την ηµεροµηνία λήξης (δείτε την ετικέτα της συσκευασίας) και να επωαστούν στους συνιστώµενους χρόνους επώασης. Οι µη ανοιγµένες αντικειµενοφόροι πλάκες από ανοιγµένες συσκευασίες είναι δυνατό να χρησιµοποιηθούν έως την ηµεροµηνία λήξης, εφόσον φυλάσσονται σε καθαρό χώρο στους C. Μόλις ανοιχτούν, οι αντικειµενοφόροι πλάκες πρέπει να χρησιµοποιούνται αµέσως. ΠΟΙΟΤΙΚΟΣ ΕΛΕΓΧΟΣ ΧΡΗΣΤΗ Παρασκευάζετε εναιωρήµατα των στελεχών που αναφέρονται παρακάτω, µε οπτική πυκνότητα αντίστοιχη µε το πρότυπο McFarland αρ. 0,5. Για κάθε µικροοργανισµό, παρασκευάστε ένα σωληνάριο (αρκετά ευρύ έτσι ώστε να επιτρέπεται η εισαγωγή του φορέα άγαρ BBL Mycoslide) µε 20 έως 25 ml στείρου αλατούχου διαλύµατος και προσθέστε 1 ml του παραπάνω εναιωρήµατος του στελέχους. Ανοίξτε ένα BBL Mycoslide, αφαιρέστε το φορέα του άγαρ, εµβαπτίστε τον για λίγο στο εναιώρηµα του στελέχους εξέτασης και προχωρήστε όπως περιγράφεται στην ενότητα ιαδικασία εξέτασης για υγρά δείγµατα. Επωάστε επί 2 έως 5 ηµέρες, στους 35 ± 2 C. Επιθεωρήστε τις επιφάνειες του άγαρ για τυχόν ανάπτυξη, όπως περιγράφεται στην ενότητα Αποτελέσµατα και ερµηνεία. DA

3 Στελέχη Υλικό καλλιέργειας 1 Άγαρ βύνης Υλικό καλλιέργειας 2 Άγαρ βύνης µε κυκλοεξιµίδη Υλικό καλλιέργειας 3 Άγαρ CLED Candida albicans Ανάπτυξη Ανάπτυξη Ανάπτυξη ATCC Aspergillus niger Ανάπτυξη Αναστολή µερική έως Ανάπτυξη ATCC E. coli Αναστολή µερική Αναστολή µερική έως Ανάπτυξη ATCC έως Pseudomonas aeruginosa Αναστολή µερική Αναστολή µερική έως Ανάπτυξη ATCC έως Enterococcus faecalis Αναστολή µερική Αναστολή µερική έως Ανάπτυξη ATCC έως Staphylococcus aureus Αναστολή µερική Αναστολή µερική έως Ανάπτυξη ATCC έως Μη ενοφθαλµισµένο Ανοικτό πορτοκαλί Ανοικτό πορτοκαλί Πρασινωπό-κίτρινο ΙΑ ΙΚΑΣΙΑ Παρεχόµενα υλικά BBL Mycoslide. Μικροβιολογικά ελεγµένο. Υλικά που δεν παρέχονται Βοηθητικά υλικά καλλιέργειας, αντιδραστήρια και εργαστηριακός εξοπλισµός, όπως περιγράφεται. Τύποι δειγµάτων Το BBL Mycoslide είναι κατάλληλο για την αποµόνωση και την απαρίθµηση µυκήτων από ούρα (τα οποία λαµβάνονται από το µέσον της ροής ούρησης ή µέσω καθετήρα ή τα οποία συλλέγονται µε υπερηβική παρακέντηση της ουροδόχου κύστης), πτύελα, φαρυγγικές πλύσεις, κόπρανα και ποικιλία άλλων δειγµάτων (π.χ. κολπικές αποσπογγίσεις). Μη χρησιµοποιείτε για την ανίχνευση βακτηριδιακών λοιµώξεων. Συλλογή και παρασκευή δειγµάτων Για τη συλλογή δειγµάτων εφαρµόζετε άσηπτες τεχνικές. Εφαρµόζετε πρότυπες διαδικασίες για τη συλλογή. 1,6 Τα ούρα πρέπει να είναι νωπά ή να µην έχουν συλλεχθεί πάνω από 2 ώρες. Εναλλακτικά, τα δείγµατα ούρων είναι δυνατό να διατηρούνται στη συντήρηση του ψυγείου (όχι περισσότερο από 24 ώρες) για την αποφυγή υπερβολικής ανάπτυξης των µολυσµατικών παραγόντων ή µολυσµατικών ουσιών πριν από τον ενοφθαλµισµό. Πτύελα: Ένα µέρος νωπών πτυέλων από βήχα ή επαγόµενων πτυέλων προστίθεται σε ένα µέρος διαλύµατος θρυψίνης 0,25% και ανακινείται µε στείρα γυάλινα σφαιρίδια επί 45 λεπτά στους 37 C. Εναλλακτικά, τα πτύελα είναι δυνατό να οµογενοποιηθούν σε συσκευή Stomacher επί 1 λεπτό. Εάν υπάρχει διαθέσιµη µόνο µια µικρή ποσότητα πτυέλων, είναι δυνατό να χρησιµοποιηθεί χωρίς προεπεξεργασία. Φαρυγγικές πλύσεις: Φυγοκεντρίστε το υγρό επί 10 λεπτά στα 2000 x g. Απορρίψτε την υγρή φάση, συλλέξτε το ίζηµα σε 5 ml διαλύµατος θρυψίνης (0,25%) ή σε στείρο αλατούχο διάλυµα και ανακινήστε µε στείρα γυάλινα σφαιρίδια επί 15 λεπτά στους 37 C. είγµατα κοπράνων, νωπών ή φυλαγµένων στη συντήρηση του ψυγείου το πολύ επί 48 ώρες. Οµογενοποιήστε 1 g κοπράνων σε 100 ml διαλύµατος θρυψίνης 0,25% ή σε στείρο αλατούχο διάλυµα µε στείρα γυάλινα σφαιρίδια επί 15 λεπτά στους 37 C. Στειλεοί: Συλλέξτε το δείγµα (π.χ. από το φάρυγγα ή τον κόλπο) σε ένα στειλεό και εφαρµόστε το απευθείας χωρίς προεπεξεργασία, όπως περιγράφεται παρακάτω. Εάν υπάρχει καθυστέρηση µεταξύ συλλογής και ενοφθαλµισµού, µεταφέρετε το στειλεό σε κατάλληλο υλικό µεταφοράς. 1,6 ιαδικασία της εξέτασης 1. Επιθεωρήστε οπτικά τις επιφάνειες του άγαρ µε το σωληνάριο BBL Mycoslide κλειστό. Απορρίψτε τις αντικειµενοφόρους πλάκες που εµφανίζουν συρρίκνωση του υλικού καλλιέργειας ή µόλυνση. 2. Επικολλήστε στο σωληνάριο µια ετικέτα µε το όνοµα του ασθενούς, τον αριθµό του δείγµατος και την ηµεροµηνία ενοφθαλµισµού. 3. Ξεβιδώστε το κάλυµµα και αφαιρέστε την αντικειµενοφόρο πλάκα από το πλαστικό σωληνάριο, χωρίς να αγγίξετε τις επιφάνειες του άγαρ. Ενοφθαλµισµός µε υγρά δείγµατα (π.χ. ούρα ή φαρυγγικές πλύσεις): DA

4 1. Εµβαπτίστε για λίγο την αντικειµενοφόρο πλάκα τρεις φορές σε υγρά δείγµατα (π.χ. ούρα ή προεπεξεργασµένα πτύελα, φαρυγγικές πλύσεις κ.λπ.), έτσι ώστε οι στοιβάδες του άγαρ να ενοφθαλµιστούν εντελώς από το υγρό. Μην αφήνετε την αντικειµενοφόρο πλάκα µέσα στο υγρό περισσότερο από 10 δευτερόλεπτα, επειδή µε αυτό ενδέχεται να εκπλυθούν τα συστατικά από τα υλικά καλλιέργειας ή/και να χαλαρώσει η πηκτή από τον πλαστικό φορέα. 2. Εάν διατίθεται µόνο ένας µικρός όγκος δείγµατος, συλλέξτε τον µε µια στείρα πιπέτα ή σύριγγα και εκπλύνετε τα τρία υλικά καλλιέργειας εντελώς. 3. Αφήστε την περίσσεια υλικού να αποστραγγίξει, κρατώντας το άκρο της αντικειµενοφόρου πλάκας πάνω στο εσωτερικό χείλος του σωληναρίου. 4. Οι τελευταίες σταγόνες είναι δυνατό να εξαλειφθούν από την άκρη της αντικειµενοφόρου πλάκας µε απορροφητικό χαρτί. Επιστρέψτε προσεκτικά την αντικειµενοφόρο πλάκα στο πλαστικό σωληνάριο και κλείστε το εντελώς. 5. Επωάστε την αντικειµενοφόρο πλάκα επί 48 ώρες στους 30 ± 2 C ή αποστείλετέ τη σε ειδικό εργαστήριο µετά τον ενοφθαλµισµό. Για την ανάπτυξη νηµατωδών µυκήτων, π.χ. από λοιµώξεις της κάτω αναπνευστικής οδού, ενδέχεται να είναι απαραίτητη επώαση µεγαλύτερης διάρκειας. Ενοφθαλµισµός µε δείγµατα σε στειλεούς: Επιστρώστε γραµµωτά το στειλεό µε προσοχή επάνω στα τρία υλικά καλλιέργειας της αντικειµενοφόρου πλάκας. Αποτελέσµατα και ερµηνεία Μετά την επώαση, αφαιρέστε προσεκτικά την αντικειµενοφόρο πλάκα από το σωληνάριο για ερµηνεία. Εφαρµόζετε άσηπτες τεχνικές κατά τη διάρκεια ολόκληρης της διαδικασίας επιθεώρησης. Κατά τη διάρκεια της επιθεώρησης, συνιστάται να φοράτε χειρουργικά γάντια. Μην αγγίζετε τις επιφάνειες του άγαρ! Υλικό καλλιέργειας 1 (Άγαρ βύνης): Με το υλικό αυτό επιτρέπεται η ανίχνευση του συνολικού αριθµού όλων των µυκήτων. Οι νηµατώδεις µύκητες συνήθως παράγουν αποικίες µε τραχεία επιφάνεια (εναέριο µυκήλιο). Οι αποικίες είναι συχνά κεχρωσµένες (µαύρες, γκρι, κυανοπράσινες, κιτρινωπές και άλλες). Τα είδη ζυµοµυκήτων παράγουν λευκές έως κρεµ, γυαλιστερές έως θαµπές αποικίες που συνήθως έχουν λεία επιφάνεια και οµοιάζουν µε βακτηριδιακές αποικίες. Για πλήρη ταυτοποίηση των παθογόνων χρειάζονται περαιτέρω εξετάσεις. 1 Για ποσοτικό προσδιορισµό, συγκρίνετε την πραγµατική ανάπτυξη στην αντικειµενοφόρο πλάκα µε τις εικόνες αναφοράς που παρέχονται στον Οδηγό ερµηνείας στο τέλος του εγγράφου αυτού. Σε περίπτωση έντονης ανάπτυξης και µεγάλων αριθµών αποικιών 10 5), οι επιφάνειες του άγαρ ενδέχεται να καλύπτονται εντελώς από συρρέοντα χλοοτάπητα ανάπτυξης. Ανατρέξτε στον πίνακα και στις αναφορές για την κλινική σηµασία των αριθµών των παθογόνων µικροοργανισµών για τα δείγµατα από διάφορες θέσεις του σώµατος: 1-5 Τύπος δείγµατος Αριθµός αποικιών ζυµοµυκήτων Φυσιολογικός 1) Αµφίβολος 2) Κλινικώς σηµαντικός Ούρα που λαµβάνονται από το µέσον της ροής ούρησης ή µέσω καθετήρα 10 3 /ml /ml >10 5 /ml Ούρα που συλλέγονται µε υπερηβική Οποιαδήποτε εµφάνιση µυκήτων είναι κλινικώς σηµαντική παρακέντηση της ουροδόχου κύστης Πτύελα 10 3 /ml /ml >10 5 /ml Φαρυγγικές πλύσεις >10 4 Κόπρανα 10 3 /g /g >10 5 /g 3) Κολπικά δείγµατα Οποιαδήποτε εµφάνιση µυκήτων είναι κλινικώς σηµαντική 1) Χαµηλοί αριθµοί ενδέχεται να είναι σηµαντικοί σε ασθενείς που έχουν υποβληθεί προηγουµένως σε θεραπεία ή σε ασθενείς µε χρόνιες λοιµώξεις. 2) Επαναξιολογήστε, εάν είναι δυνατό. 3) Η θεραπεία ασθενών µε υψηλούς αριθµούς ζυµοµυκήτων σε κόπρανα πρέπει να αξιολογείται προσεκτικά. Υψηλοί αριθµοί ζυµοµυκήτων σε κόπρανα παρουσιάζονται συχνά σε ασθενείς που έχουν υποβληθεί προηγουµένως σε θεραπεία µε αντιβακτηριδιακούς αντιµικροβιακούς παράγοντες. Μετά την ολοκλήρωση της αντιβακτηριδιακής θεραπείας, ο αριθµός ζυµοµυκήτων συνήθως µειώνεται και πάλι σε φυσιολογικά επίπεδα. Σε ανοσοκατεσταλµένους ασθενείς, ακόµα και χαµηλοί αριθµοί ενδέχεται να υποδηλώνουν λοίµωξη. 1,3 Υλικό καλλιέργειας 2 (Άγαρ βύνης µε κυκλοεξιµίδη): Αυτό το υλικό καλλιέργειας διασφαλίζει την καταστολή εκείνων των νηµατωδών µυκήτων που είναι ευαίσθητοι στην κυκλοεξιµίδη (π.χ. ευρωτοµύκητες όπως οι Aspergillus). Ορισµένοι ζυµοµύκητες αναστέλλονται επίσης από το πρόσθετο αυτό. Η ανθεκτικότητα στην κυκλοεξιµίδη είναι σηµαντικό χαρακτηριστικό για τη διαφοροποίηση των µυκήτων: DA

5 Ανθεκτικό στην κυκλοεξιµίδη Ευαίσθητο στην κυκλοεξιµίδη Μικροοργανισµοί 1) Κλινική σηµασία και συχνότητα Candida albicans Σηµαντικό παθογόνο, συχνή C. dubliniensis Απαντάται συχνά σε ασθενείς µε HIV C. guilliermondii Σπάνιο, χαµηλή C. kefyr (=C. pseudotropicalis) Σπάνιο, χαµηλή Άλλα είδη Σπάνια Candida tropicalis Σπάνιο, χαµηλή C. krusei Σχετικά συχνό, γνωστό παθογόνο C. parapsilosis Σπάνιο, γνωστό παθογόνο Candida (Torulopsis) glabrata Σχετικά συχνό, γνωστό παθογόνο Cryptococcus neoformans Σπάνιο, σηµαντικό παθογόνο Aspergillus, Penicillium και άλλοι µύκητες Οι Aspergillus είναι δυνατό να προκαλέσουν λοιµώξεις της κάτω αναπνευστικής οδού ή άλλες λοιµώξεις. Οι µύκητες αυτοί ενδέχεται επίσης να εµφανιστούν ως µολυσµατικοί. 1) Σηµειωτέον ότι η ανάπτυξη ή η αναστολή σε αυτό το υλικό καλλιέργειας δεν περιορίζεται στα είδη που αναφέρονται στον πίνακα αυτό. Οι µικροοργανισµοί που αναφέρονται εµφανίζονται µάλλον συχνά σε κλινικά δείγµατα. Για επιπλέον πληροφορίες, συµβουλευτείτε τις αναφορές. 1,7 Το υλικό καλλιέργειας 3 (Άγαρ CLED) χρησιµοποιείται για τον ποσοτικό προσδιορισµό του αριθµού βακτηριδίων που υπάρχουν στο δείγµα. Οι αριθµοί βακτηριδίων είναι δυνατό να είναι σηµαντικοί στην εκτίµηση της σχέσης µεταξύ βακτηριδιακής και µυκητιακής ανάπτυξης, π.χ. σε κόπρανα. Σηµειωτέον ότι για την πλήρη ταυτοποίηση των παθογόνων που αποµονώνονται σε αυτή την εµβαπτιζόµενη αντικειµενοφόρο πλάκα, είναι απαραίτητες περαιτέρω εξετάσεις, όπως βιοχηµικές ή/και µικροσκοπικές διαδικασίες. 1 Οι περισσότερες από αυτές τις µεθόδους είναι διαθέσιµες µόνον σε διαγνωστικά εργαστήρια και συνήθως δεν είναι δυνατό να εκτελεστούν σε ιατρείο. Εποµένως, όλες οι εµβαπτιζόµενες αντικειµενοφόροι πλάκες µε αµφίβολα ή σαφώς θετικά αποτελέσµατα θα πρέπει να αποστέλλονται σε αναλυτικό εργαστήριο που εκτελεί µυκολογικές εξετάσεις. Μετά τη χρήση και πριν από την απόρριψη, όλα τα χρησιµοποιηµένα σωληνάρια και άλλο τυχόν µολυσµένο υλικό πρέπει να αποστειρώνονται σε αυτόκαυστο ή να αποτεφρώνονται. Για λεπτοµέρειες, δείτε το έγγραφο ΓΕΝΙΚΕΣ Ο ΗΓΙΕΣ ΧΡΗΣΗΣ. ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΤΙΚΑ ΑΠΟ ΟΣΗΣ ΚΑΙ ΠΕΡΙΟΡΙΣΜΟΙ ΤΗΣ ΙΑ ΙΚΑΣΙΑΣ Το BBL Mycoslide χρησιµοποιείται για την ανίχνευση, την αποµόνωση και την απαρίθµηση των µυκήτων, συµπεριλαµβανοµένων των ζυµοµυκήτων, από ούρα, πτύελα, φαρυγγικές πλύσεις, δείγµατα κοπράνων και ποικιλία άλλων δειγµάτων. Τα υλικά καλλιέργειας που περιέχονται σε αυτή την εµβαπτιζόµενη αντικειµενοφόρο πλάκα είναι συνήθως χρησιµοποιούµενα πρότυπα υλικά καλλιέργειας για 1, 8-10 την αποµόνωση των αντίστοιχων µυκητιακών και βακτηριδιακών οµάδων. Περιστασιακά, η ανάπτυξη των βακτηριδίων στα υλικά καλλιέργειας µυκήτων (υλικό καλλιέργειας 1 και 2) αυτής της εµβαπτιζόµενης αντικειµενοφόρου πλάκας δεν καταστέλλεται εντελώς. Σε περιπτώσεις αµφιβολίας, πρέπει να εκτελείται χρώση µε κυανό του µεθυλενίου ή χρώση κατά Gram από ύποπτες αποικίες. Τα περισσότερα λιγότερο απαιτητικά είδη βακτηριδίων αναπτύσσονται στο υλικό καλλιέργειας 3 (Άγαρ CLED). Ωστόσο, αυτό το υλικό καλλιέργειας δεν υποστηρίζει τους µικροοργανισµούς ανάπτυξης όπως τα παθογόνα είδη Neisseria, Haemophilus spp. και άλλα. Οι β-αιµολυτικοί στρεπτόκοκκοι δεν αναπτύσσονται καλά σε αυτό το υλικό καλλιέργειας. Εποµένως, πρέπει να συµπεριλαµβάνεται αιµατούχο ή σοκολατούχο άγαρ, εάν υποψιάζεστε βακτηριδιακή λοίµωξη µε τέτοιου είδους µικροοργανισµούς. Στο BBL Mycoslide, το άγαρ CLED χρησιµοποιείται κυρίως για τον προσδιορισµό της συνοδευτικής βακτηριδιακής χλωρίδας. Για ακριβή διάγνωση των βακτηριδιακών λοιµώξεων, συνιστάται η χρήση άλλων συστηµάτων και υλικών καλλιέργειας. Για τη διάγνωση βακτηριδιακών λοιµώξεων από δείγµατα ούρων πρέπει να χρησιµοποιούνται τα συστήµατα BBL Urotube. είγµατα για την ανίχνευση βακτηριδιακών λοιµώξεων από άλλες θέσεις του σώµατος πρέπει να υποβάλλονται σε επεξεργασία σε επιστρωµένα υλικά καλλιέργειας, όπως είναι κατάλληλο για το δείγµα. DA

6 Ο αριθµός ειδών που είναι δυνατό να αναπτυχθούν στα υλικά καλλιέργειας αυτής της εµβαπτιζόµενης αντικειµενοφόρου πλάκας είναι µεγάλος και δεν περιορίζεται σε εκείνα που αναφέρονται στην ενότητα Αποτελέσµατα και ερµηνεία. Κατάλληλη ταυτοποίηση πολλών µικροοργανισµών είναι δυνατό να παρασχεθεί µόνον από αναλυτικά εργαστήρια. Εποµένως, οι αντικειµενοφόροι πλάκες πρέπει να αποστέλλονται σε τέτοιου είδους εργαστήρια µετά από ενοφθαλµισµό ή µετά από ενοφθαλµισµό και επώαση. Το BBL Mycoslide προορίζεται για χρήση για πρωτογενή αποµόνωση και καταµέτρηση. Για περαιτέρω εξετάσεις και ειδικά εάν παρουσιάζονται µεικτές καλλιέργειες στα υλικά του συστήµατος αυτού, πρέπει να πραγµατοποιούνται ανακαλλιέργειες επάνω σε κατάλληλα επιστρωµένα υλικά, έτσι ώστε να λαµβάνονται καθαρές καλλιέργειες, οι οποίες είναι υποχρεωτικές για πλήρη ταυτοποίηση και εξετάσεις ευαισθησίας. 1 Οι εµβαπτιζόµενες αντικειµενοφόροι πλάκες δεν πρέπει να χρησιµοποιούνται για εκτέλεση εξετάσεων ευαισθησίας σε δίσκους. ΑΝΑΦΟΡΕΣ 1. Fromtling, R.A. (section editor) Mycology. In: Murray, P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 2. Halle, E., et al Genitalinfektionen Teil I und II. In: Mauch, H., Lüttiken, R., and S. Gatermann (eds.): MiQ - Qualitätsstandards in der mikrobiologisch-infektiologischen Diagnostik, vol. 10 and 11. Urban & Fischer, Munich, Germany. 3. Kist, M., et al Infektionen des Darmes. In: Mauch, H., Lüttiken, R., and S. Gatermann (eds.): MiQ - Qualitätsstandards in der mikrobiologisch-infektiologischen Diagnostik, vol. 9. Urban & Fischer, Munich, Germany. 4. Podbielski, A., et al Infektionen des Mundes und der oberen Atemwege. In: Mauch, H. and R. Lüttiken (eds.): MiQ - Qualitätsstandards in der mikrobiologisch-infektiologischen Diagnostik, vol.13. Urban & Fischer, Munich, Germany. 5. Mauch, H., et al Infektionen der tiefen Atemwege Teil II. In: Mauch, H., Lüttiken, R., and S. Gatermann (eds.): MiQ - Qualitätsstandards in der mikrobiologisch-infektiologischen Diagnostik, vol. 8. Urban & Fischer, Munich, Germany. 6. Sutton, D.A Specimen collection, transport, and processing: mycology. In: Murray, P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 7. Hazen, K.C New and emerging yeast pathogens. Clin. Microbiol. Rev. 8: MacFaddin, J. D Media for isolation-cultivation-identification- maintenance of medical bacteria, vol. 1, p Williams & Wilkins, Baltimore, MD. 9. Larone, D.H. 1995: Medically important fungi - a guide to identification. 3rd edition. ASM Press, Washington. 10. Atlas, R.M Handbook of Microbiological media. CRC Press, Boca Raton, FL. ΣΥΣΚΕΥΑΣΙΑ/ ΙΑΘΕΣΙΜΟΤΗΤΑ BBL MycoslideBBL Mycoslide Αρ. κατ αντικειµενοφόροι πλάκες ΠΕΡΙΣΣΟΤΕΡΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ Για περισσότερες πληροφορίες παρακαλούµε επικοινωνήστε µε τον τοπικό αντιπρόσωπο της BD. BD Diagnostic Systems Tullastrasse 8 12 D Heidelberg/Germany Phone: , Fax: Reception_Germany@europe.bd.com BD Diagnostic Systems Europe Becton Dickinson France SA 11 rue Aristide Bergès Le Pont de Claix/France Tel: Fax: DA

7 BD, BD logo and BBL are trademarks of Becton, Dickinson and Company. Urotube and Mycoslide are trademarks of Becton Dickinson GmbH. ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection Becton, Dickinson and Company Ο ΗΓΟΣ ΕΡΜΗΝΕΙΑΣ (Άγαρ βύνης, υλικό καλλιέργειας 1) Για τον ποσοτικό προσδιορισµό των αριθµών κυττάρων (δείτε την ενότητα Αποτελέσµατα και ερµηνεία για κλινικώς σηµαντικούς αριθµούς) DA