Mέθοδοι. ανίχνευσης αντιγόνων αντισωμάτων στη διάγνωση των λοιμώξεων. Μαρία Γιαννάκη

Transcript

1 Mέθοδοι ανίχνευσης αντιγόνων αντισωμάτων στη διάγνωση των λοιμώξεων Μαρία Γιαννάκη Μικροβιολογικό Εργαστήριο Νοσοκομείου Παίδων «Η Αγία Σοφία»

2 Ορολογικές δοκιμές Σύνδεση αντιγόνου - αντισώματος Αναζήτηση: αντιγόνου, αντισώματος Προέλευση όρου ορός ορολογικός (serum serology) Αρχικά αναζήτηση αντισωμάτων στον ορό 1896 Widal Αργότερα αναζήτηση αντιγόνου σε κλινικό δείγμα Σωστός όρος: Ανοσολογικές δοκιμές (immunoassays)

3 Aντιγόνο Μπορεί να χρησιμοποιηθεί Ολόκληρο το κύτταρο του παθογόνου μικροοργανισμού Ουσίες του κυτταρικού τοιχώματος Ουσίες που παράγει και εκκρίνει το μικρόβιο (τοξίνες, ένζυμα) Κυτταροκαλλιέργεια της oποίας τα κύτταρα έχουν προσβληθεί από το λοιμογόνο παράγοντα

4 Aντισώματα Ανοσοσφαιρίνες πολυκλωνικά μονοκλωνικά Παραγωγή αντισωμάτων για τις ορολογικές τεχνικές Παλαιά: Πολυκλωνικά Παρασκευή αντιορών σε πειραματόζωα Καθαρισμός με προσροφήσεις Τώρα: Μονοκλωνικά Σύντηξη του Β-λεμφοκυττάρου που παράγει το αντίσωμα με κύτταρο πολλαπλού μυελώματος. Παραγωγή σε μεγάλες ποσότητες ειδικού αντισώματος

5

6 Αξιολόγηση για την επιλογή της ορολογικής τεχνικής Ευαισθησία Ειδικότητα Θετική και Αρνητική Προγνωστική Αξία Επαναληψιμότητα Ταχύτητα - χρόνος εκτέλεσης Δυνατότητα εκτέλεσης μεμονωμένων εξετάσεων Κόστος

7 Ευαισθησία (sensitivity) % Ποσοστόατόμωνμετηνόσοπουβρίσκονται θετικοί με τη συγκεκριμένη δοκιμή Αριθμός θετικών απαντήσεων σε 100 ασθενείς που πάσχουν από τη νόσο Ευαισθησία= ψευδώςαρνητικά

8 Ευαισθησία (sensitivity) % (συνέχεια) Διαγνωστική ευαισθησία Αναλυτική Φυσιολογική τιμή ημικρότερητιμή που μπορεί να μετρηθεί

9 Ειδικότητα (specificity) % Ποσοστό ατόμων χωρίς τη νόσο, που βρίσκονται αρνητικά με την συγκεκριμένη δοκιμή Αριθμός αρνητικών απαντήσεων σε 100 μη πάσχοντες Ειδικότητα = ψευδώςθετικάαποτελέσματα

10 Cutoff = όριο αρνητικού θετικού αποτελέσματος Κατά την ανάπτυξη μιας τεχνικής Cutoff Ευαισθησία Ειδικότητα Cutoff = Ευαισθησία Ειδικότητα Πρέπει να προσδιορίζεται για κάθε πληθυσμό

11 Προγνωστική αξία (Predictive value) Θετική Η πιθανότητα να έχει τη νόσο ασθενής με θετικό αποτέλεσμα δοκιμής ή η πιθανότητα να είναι αληθινό το θετικό αποτέλεσμα Αρνητική Η πιθανότητα να μη νοσεί άτομο με αρνητικό αποτέλεσμα δοκιμής ή η πιθανότητα να είναι αληθινό το αρνητικό αποτέλεσμα

12 Υπολογισμός των παραμέτρων αξιολόγησης μιας ορολογικής δοκιμής ΤP Eυαισθησία (sensitivity) TP + FN X 100% TΝ Eιδικότητα (specificity) TN+FP X 100% Θετική Προγνωστική Αξία TP (Positive Predictive Value) TP+FP X 100% Aρνητική Προγνωστική Αξία ΤΝ (Positive Predictive Value) ΤΝ + FN X 100% TP = True Positive Αληθώς Θετικό Αποτέλεσμα (Ο εξεταζόμενοςπάσχει από το νόσημα) FP = False Positive Ψευδώς Θετικό Αποτέλεσμα Οεξεταζόμενοςδεν πάσχει απότονόσημα) TΝ = True Negative Αληθώς Αρνητικό Αποτέλεσμα (Ο εξεταζόμενοςδεν πάσχει από το νόσημα) FN = False Negative Ψευδώς Αρνητικό Αποτέλεσμα Οεξεταζόμενοςπάσχει απότονόσημα)

13 Κατάργηση έννοιας «χρυσό πρότυπο» Gold standard Χρησιμοποίηση όρων Αληθώς / Ψευδώς, Θετικό / Αρνητικό αποτέλεσμα Οι όροι αυτοί αναφέρονται σε πάσχοντα ή όχι από το νόσημα άτομα σύμφωνα με κλινικά και λοιπά εργαστηριακά κριτήρια Στην αποδοχή του αποτελέσματος υπεισέρχονται και στατιστικά στοιχεία όπως η συχνότητα του νοσήματος στον πληθυσμό που ανήκει ο εξεταζόμενος ασθενής

14 Πυρετός Φαρυγγίτιδα Λεμφαδένες Ήπαρ Σπλην Λευκά, άτυπα Τρανσαμινάσες Λοιμώδη μονοπυρήνωση Ετερόφιλα αντισώματα (mono test) Ευαισθησία: Ηλικία <2 ετών 0% Ενήλικες 70%

15 Επαναληψιμότητα Intra-assay Inter-assay Συντελεστής μεταβλητότητας - CV%

16 Συνήθης αντισωματική απάντηση σε λοίμωξη

17 Διαγνωστικές ανοσολογικές μέθοδοι Συγκολλητιναντιδράσεις Ιζηματιναντιδράσεις Σύνδεση συμπληρώματος Αναστολή αιμολύσεως Αναστολή αιμοσυγκολλήσεως Ανοσοφθορισμός Ραδιοανοσολογικές Ανοσοενζυμικές

18 Συγκολλητιναντιδράσεις Το αντιγόνο σε σωματιδιακή μορφή Μικροβιακή συγκόλληση Έμμεση αιμοσυγκόλληση Συγκόλληση σωματιδίων Latex Επισυγκόλληση σταφυλοκόκκου

19 Μικροβιακή συγκόλληση 1896 Widal Αρχή: όταν ένα μικροβιακό εναιώρημα έρθει σε επαφή με ορό ατόμου που πάσχει από λοίμωξη με αυτό το μικρόβιο, θα προκληθεί συγκόλληση των αιωρουμένων μικροβίων Τεχνική: α. σε πλάκα Διαχωριστικές δοκιμές (screening test) Kατά προσέγγιση προσδιορισμός τίτλου

20 Μικροβιακή συγκόλληση 2 β. σε σωληνάρια (τύπου Widal) Αραιώσεις ορού Ανάμιξη με το εναιώρημα Επώαση Ανάγνωση την επόμενη ημέρα - προσδιορισμός τίτλου 1/100 1/200 1/400 1/800 1/1600 1/3200 1/6400 (+) (-) Τίτλος: Η μεγαλύτερη αραίωση που δίνει συγκόλληση Φαινόμενο προζώνης αρνητικό αποτέλεσμα στις πρώτες αραιώσεις σε πολύ θετικά δείγματα

21 Έμμεση (παθητική) αιμοσυγκόλληση (ΙΗΑ) Αρχή: αν το εναιώρημα «ευαισθητοποιημένων» ερυθρών αιμοσφαιρίων έρθει σε επαφή με ορό αίματος ανθρώπου που έχει αντισώματα ομόλογα προς το αντιγόνο που τα επικαλύπτει, τότε θα σχηματιστούν πλέγματα ερυθρών ορατά με γυμνό μάτι Τεχνική: Αραιώσεις σε μικροτιτλοποιητική πλάκα Πολύ ευαίσθητη Όχι πολύ ειδική Εξετάζονται αντισώματα: Σύφιλης, Εχινοκόκκου, Τοξοπλάσματος, Candida, Aspergillus κ.λπ.

22 Latex συγκόλληση (σωματίδια πολυμερούς υδρογονάνθρακα) Τεχνική: Σε πλάκα Πολύ ειδική Όχι πολύ ευαίσθητη

23 Ιζηματιναντιδράσεις 1 Το αντιγόνο σε διαλυτή μορφή Ίζημα το ανοσοσύμπλεγμα Ag-Ab κατακρημνίζεται (ίζημα) σύμφωνα με την καμπύλη Heidelberger - Kendall Στην «άριστη αναλογία» αντιγόνου αντισώματος το περισσότερο ίζημα

24 Ιζηματιναντιδράσεις 2 Ανοσοδιάχυση Ανοσοηλεκτροφόρηση Νεφελομετρία

25 Νεφελομετρία 1 Αρχή: σκέδαση του φωτός Μετρώντας ένα εναιώρημα, την ένταση του φωτός που σκεδάζεται υπό ορισμένη γωνία, υπολογίζεται η συγκέντρωση των σωματιδίων μέσα σ αυτό. Σωματίδια = σύμπλεγμα αντιγόνου αντισώματος Μετρούμενη ουσία = αντιγόνο Αντιδραστήριο = αντίσωμα σ αυτήν

26 Νεφελομετρία 2 Η Νεφελομετρία μετράει την ένταση του φωτός που σκεδάζεται υπό ορισμένη γωνία προς το προσπίπτον φως όταν αυτό συναντά τα αιωρούμενα ανοσοσυμπλέγματα Η Θολοσιμετρία μετράει την ελάττωση της έντασης του φωτός όταν αυτό προσπέσει στα ανοσοσυμπλέγματα

27 Νεφελομετρία 3 Τύποι νεφελομετρικών μεθόδων 1. Τελικού σημείου (end point nephelometry) 1 2. Κινητική (rate nephelometry) α. σταθερού χρόνου (fixedtime rate nephelometry) 2a β. Μέγιστης τιμής (peak rate nephelometry) 2β

28 Νεφελομετρία 4 Αναλυτική ευαισθησία Ταχεία Εύκολη στη χρήση Απαιτεί μικρούς όγκους δείγματος Αιμολυμένα ή ικτερικά δείγματα δεν επηρεάζουν το αποτέλεσμα Αυτοματισμός Με τη βοήθεια υπολογιστή το αποτέλεσμα εκφράζεται στις μονάδες που επιθυμούμε π.χ. mg/l για τη CRP, IU/ml για ASTO

29 Νεφελομετρία 5 Eξετάσεις: - πρωτεΐνεςοξείαςφάσεως(crp) - Ανοσοσφαιρίνες -RF - ASTO - αντι DNAάση στρεπτοκοκκική - μικρολευκωματίνη - Φάρμακα, βιταμίνες κ.λπ.

30 ΑSTO = IU/ml αντι-dnαση = U/ml Aντισώματα σε λοίμωξη από στρεπτόκοκκο Φυσιολογικές τιμές 0-6 μηνών: πιθανόν μητρικά αντισώματα 6 μην. -2 ετών: < ετών: < 280 > 50 ετών: < 80

31 Σύνδεση συμπληρώματος (και αυτοματοποιημένη) Αναστολή αιμολύσεως Αναστολή αιμοσυγκολλήσεως

32 Ανοσολογικές τεχνικές σήμανσης Γενική αρχή αναζήτησης αντισωμάτων Αντιγόνο + ορός (Αντίσωμα;;;) + Αντι-αντίσωμα συνεζευγμένο (conjugate) F* R* Ένζυμο Mικροσκόπηση (ανοσοφθορισμός) Προσβολή ακτινολογικής πλάκας ή αριθμός κρούσεων (ραδιοανοσολογικές τεχνικές) Υπόστρωμα + χρωμογόνο Παραγωγή χρώματος (Ανοσοενζυμικές τεχνικές)

33 Ανοσοφθορισμός (1) Φθορισμός: η εκπομπή μεγαλύτερου μήκους κύματος φωτός από μία ουσία, όταν ακτινοβολείται από φως μικρότερου κύματος Φθοριοχρώματα: ισοθειοκυανική φθορισκεΐνη FITC (πράσινο) Ισοθειοκυανική τετραμεθυλροδαμίνη TMRITC (κόκκινο) Φυκοερυθρίνη RE (πορτοκαλί )

34 Ανοσοφθορισμός (1) Άμεσος: αναζητείται αντιγόνο (DFA) Αρχή: Κλινικό δείγμα + αντίσωμα συνδεδεμένο με φθοριόχρωμα (αντιδραστήριο) φθορισμός Τεχνική: Προετοιμασία δείγματος (κολπικό, πτύελα, κόπρανα, φαρυγγικό επίχρισμα, βρογχικό έκκριμα, περιφερικό αίμα, ουρηθρικό, αρθρικό, ούρα) - φυγοκέντρηση - έκπλυση - ρευστοποίηση

35 Άμεσος Ανοσοφθορισμός (DFA) συνέχεια Ευαισθησία ;; Χρόνος Τρόπος λήψης Σταθερή ή όχι παρουσία του μικροοργανισμού στο κλινικό δείγμα Υψηλή ειδικότητα (δυσκολία στην ανεύρεση του «ειδικού» αντιγονικού τμήματος για την παρασκευή του μονοκλωνικού αντισώματος)

36

37 Αντιγόνα HSV (τύπου 1) από δερματικές βλάβες (DFA)

38 Αντιγόνο Bordetella κοκκύτη σε δείγμα αναπνευστικού (DFA)

39 Pneumocystis carinii σε αναπνευστικό δείγμα (DFA)

40 Aνοσοφθορισμός (2) Έμμεσος: ανιχνεύονται αντισώματα IgG, IgM, IgA Αρχή: Αντιγόνο + ορός (αντίσωμα) + Conjugate (αντιαντίσωμα με φθορίζουσα χρωστική) φθορισμός Τεχνική: Αραίωση oρού Τοποθέτηση στην πλάκα Επώαση Πλύσιμο Προσθήκη Conjugate (IgG( IgG, IgM, IgA) Επώαση Πλύσιμο Μικροσκόπηση Απαραίτητη η χρήση (+) και (-) μάρτυρα Μη ειδικός φθορισμός

41 Αντισώματα ιλαράς (IFA)

42 Αντισώματα Candida (IFA)

43 Αντισώματα μυκοπλάσματος πνευμονίας (IFA)

44 Αντισώματα έναντι αναπνευστικών ιών (IFA)

45 Αντισώματα HSV (IFA)

46 Αντισώματα Legionella (IFA) Αντισώματα Rickettsia (IFA)

47 Ραδιοανοσολογικές τεχνικές (1) 1960 Βerson και Yalow Σήμανση με ραδιονουκλίδιο Aντιγόνου RIA Αντισώματος IRMA -τρίτιο (3Η) I cpm κρούσεις / λεπτό Μετράται η ραδιανέργεια σε μετρητή β ή γ ακτινοβολίας και εκφράζεται σαν αριθμός κρούσεων ανά λεπτό (cpm). Συγκέντρωση μετρούμενης ουσίας

48 Ραδιοανοσολογικές τεχνικές (2) Οι νεότεροι μετρητές διαθέτουν υπολογιστή με ειδικό πρόγραμμα που δίνει κατ ευθείαν τη ζητούμενη συγκέντρωση. Πολύ καλή αναλυτική ευαισθησία Μετρούνται: ορμόνες καρκινικοί δείκτες φάρμακα Δυσκολία στη διαχείρηση των ραδιονουκλιδίων

49 Ανοσοενζυμική μέθοδος (ELISA) Aνιχνεύονται: αντισώματα IgG, IgM, IgA Αρχή: Αντιγόνο (στο βύθισμα) + ορός (αντίσωμα;;;) + Conjugate (αντιαντίσωμα με ένζυμο) + υπόστωμα του ενζύμου με χρωμογόνο Παραγωγή Χρώματος (φωτομέτρηση) Mονάδες Απορρόφηση (ένταση χρώματος)

50 Ανοσοενζυμική για ανίχνευση αντιγόνου σε κλινικό δείγμα (Sandwich ELISA) Ειδικό αντίσωμα (στο βύθισμα) + Κλινικό δείγμα (αντιγόνο;;) + Conjugate (αντίσωμα με ένζυμο) + Υπόστρωμα του ενζύμου με χρωμογόνο Παραγωγή χρώματος (φωτομέτρηση) Μειονεκτήματα: Ακατάλληλη για λίγα δείγματα

51 Ανοσοενζυμική Capture τεχνική Αντι IgM-αντίσωμα (στο βύθισμα) + Ορός (IgM ειδικό αντίσωμα;;;) + Αντι ΙgM ένζυμο + Αg + Υπόστρωμα του ενζύμου με χρωμογόνο + Παραγωγή χρώματος (φωτομέτρηση) Πλεονέκτημα: Υψηλότερη ειδικότητα

52 Μικροσωματιδιακή Τεχνική Τοαντιγόνοήτοαντίσωμαείναιπροσφροφημένο σε μικρά σωματίδια Latex Αυξάνεται η συνολική επιφάνεια σύνδεσης αντιγόνου αντισώματος η ευαισθησία ο χρόνος επώασης Μικροσωματιδιακή Aνοσοενζυμική Τεχνική (Microparticle Enzyme Immunoassay-MEIA) Μικροσωματιδιακή ανοσοτεχνική χημειοφωταύγειας (Chemiluminesence Immunoassay CLIA) Αυτοματισμός Το αποτέλεσμα δεν είναι υποκειμενικό (μονάδες) Μειονέκτημα: Κλειστό σύστημα

53 Μέθοδοι ανοσοαποτύπωσης 1 (Western blotting, Dot blotting) Διαχωρισμός των αντιγονικών πρωτεϊνών αναλόγως του μοριακού βάρους με ηλεκτροφόρηση Ανοσοενζυμική ανίχνευση των αντισωμάτων ειδικότητα επιβεβαιωτικές δοκιμές κόστος

54 Μέθοδοι ανοσοαποτύπωσης 2 Tαινίες 1-5: πρόσφατη λοίμωξη 6-10: παλαιά λοίμωξη 11: θετικός μάρτυρας 12: αρνητικός μάρτυρας Αντισώματα έναντι VCA gp 125, EBNA p76, EA p54 και VCA p18 του EBV

55 Ταχείες ανοσολογικές τεχνικές 1 Πολύ χρήσιμη ομάδα εξετάσεων Αποτέλεσμα σε λίγα λεπτά Δεν απαιτείται ειδικός εργαστηριακός εξοπλισμός Ανίχνευση αντιγόνων, αντισωμάτων Τα αντιδραστήρια διατηρούνται εκτός ψυγείου Ειδικότητα Η ευαισθησία εξαρτάται από το χρόνο και τον τρόπο λήψης του δείγματος

56 Ταχείες ανοσολογικές τεχνικές 2 80 η σκέψη για εξετάσεις στα ιατρεία των κλινικών γιατρών «παρά την κλίνην» (bedside) τεχνικές Καλύτερα αποτελέσματα όταν εφαρμόζονται από εργαστηριακούς ιατρούς Σε χώρες με οργανωμένα συστήματα περίθαλψης: κλινικοί ιατροί νοσηλευτές τεχνολόγοι Ακολουθούν προγράμματα συνεχούς εκπαίδευσης Συμμετέχουν σε Προγράμματα Ποιοτικού Ελέγχου

57 Ταχείες ανοσολογικές τεχνικές 3 - Latex συγκόλληση - Aνοσοενζυμική τεχνική - Ανοσοχρωματογραφία

58 Ταχείες ανοσολογικές τεχνικές 3 - Latex συγκόλληση - Aνοσοενζυμική τεχνική - Ανοσοχρωματογραφία

59 Ταχείες ανοσολογικές τεχνικές 3 - Latex συγκόλληση - Aνοσοενζυμική τεχνική - Ανοσοχρωματογραφία

60 Ταχείες ανοσολογικές τεχνικές 3 - Latex συγκόλληση - Aνοσοενζυμική τεχνική - Ανοσοχρωματογραφία

61 Εξετάσεις με ταχείες τεχνικές 4 Α. Αναζήτησης αντιγόνου ΦΑΡΥΓΓΙΚΟ ΕΠΙΧΡΙΣΜΑ: Στρεπτοκόκκου ομάδας Α ΣΕ ΚΟΛΠΙΚΟ ΕΚΚΡΙΜΑ: Στρεπτοκόκκου ομάδας Β, χλαμύδια ΚΟΠΡΑΝΑ Ιοί Rota Adeno Noro Αμοιβάδα Κρυπτοσπορίδιο Λάμβλια Helicobacter pylori Τοξίνη του C. Difficile OYΡΑ Πνευμονιοκόκκου Legionella ΔΕΙΓΜΑ ΑΝΑΠΝΕΥΣΤΙΚΟΥ Ιοί γρίππης Α, Β, Η1Ν1 Αδενοϊοί RSV OΡΟ Candida Aspergillus Κρυπτόκοκκου ΕΝΥ Πνευμονιοκόκκου, Μηνιγγιτιδοκόκκου, Αιμοφίλου, E. coli Kρυπτοκόκκου

62 Εξετάσεις με ταχείες τεχνικές 5 Β. Αναζήτηση αντισωμάτων Λεϊσμάνια dipstick έναντι Κ39 αντιγόνου Εχινοκόκκου Πλασμωδίου ελονοσίας Ετερόφιλα αντισώματα στη λοιμώδη μονοπυρήνωση IgM μυκοπλάσματος πνευμονίας

63 Αντιγόνο noro ιού σε κόπρανα

64 Αναζήτηση αντιγόνου (π.χ. Strep test) αντισώματος (π.χ. Leishmania)

65 Ταυτόχρονη ανίχνευση αντιγόνων: Γρίππης Α και Β Rota και αδενο Κρυπτοσπορίδιο και λάμβλια Κρυπτοσπορίδιο, λάμβλια και αμοιβάδα

66 Επίχρισμα Έκπλυμα

67 Αντισώματα στο Εγκεφαλονωτιαίο Υγρό (ΕΝΥ) 1 Διάκριση: τοπικής παραγωγής παθητικής διέλευσης μέσω του αιματοεγκεφαλικού φραγμού Δείκτες ορολογικού ελέγχου ΕΝΥ Ειδικά αντισώματα ΕΝΥ / Ειδικά αντισώματα ορού Λευκωματίνη ΕΝΥ / Λευκωματίνη ορού Ειδικά αντισώματα ΕΝΥ / Ειδικά αντισώματα ορού IgG ENY / IgG ορού Ειδικά αντισώματα: IgG, IgM, IgA Δείκτης > 1 ένδειξη παραγωγής εντός Κ.Ν.Σ.

68 Αντισώματα στο Εγκεφαλονωτιαίο Υγρό (ΕΝΥ) 2 Σ ή μ ε ρ α Θετικά για πρόσφατη λοίμωξη αντισώματα στον ορό Κλινική εικόνα λοίμωξης ΚΝΣ PCR ENY για τον συγκεκριμένο μικροοργανισμό

69 Αντισώματα στο Εγκεφαλονωτιαίο Υγρό (ΕΝΥ) 3 Αγγειΐτιδα («εγκεφαλίτιδα») ΚΝΣ από VZV Υποξεία μεθιλαρική πανεγκεφαλίτιδα Van Bogaert Υποτροπές HSV μυελίτιδας

70 Λειτουργική συγγένεια των αντισωμάτων (αvidity) 1 Συμπληρωματική εξέταση Σύνδεση Ag-Ab επιτυγχάνεται με: δυνάμεις Coulomb Van der Waals δεσμοί υδρογόνου υδρόφοβοι δεσμοί Η ισχύς σύνδεσης (λειτουργική συγγένεια) αυξάνεται με την πάροδο του χρόνου

71 Λειτουργική συγγένεια (avidity) 2 Ασθενής: Υψηλή: πρόσφατη λοίμωξη παλαιά λοίμωξη επαναλοίμωξη επανενεργοποίηση Μέθοδοι: «εκλούσεως» «προαραιώσεως των ορών» με: ουρία, διαιθυλαμίνη, γονανιδίνη, θειοκυανικό οξύ Avidity Index : τίτλος παρουσία ουσίας τίτλος απουσία ουσίας Χ 100%

72 Avidity index και χρόνος από την πρωτολοίμωξη Ημέρες

73 Avidity index και CMV λοίμωξη Περίπτωση 1 Περίπτωση 2 CMV IgG + + CMV IgM + + CMV IgG Avidity Χαμηλή Υψηλή Ερμηνεία Πρωτοπαθής λοίμωξη (Υψηλός κίνδυνος) Αναμόλυνση ή αναζωπύρωση (Μικρός κίνδυνος)

74 Έλεγχος ποιότητας ορολογικών δοκιμών Quality Control (1) A. Eσωτερικός Δείγματα ελέγχου που περιλαμβάνονται στη συσκευασία των αντιδραστηρίων ή παραγγέλλονται χωριστά Γνωστής περιεκτικότητας συνήθως: (-), (+) για τις ποιοτικές εύρος τιμών για τις ποσοτικές Ελέγχονται: αντιδραστήρια και διαδικασία, π.χ. RPR

75 Έλεγχος ποιότητας ορολογικών δοκιμών Quality Control (2) Β. Eξωτερικός Δείγματα άγνωστης περιεκτικότητας Παρέχονται από οίκους του εξωτερικού Εξετάζονται όπως ακριβώς τα δείγματα του εργαστηρίου Αποστολή των αποτελεσμάτων και της κλινικής αξιολόγησης Απάντηση και σχόλια ΧΡΗΣΙΜΟΤΗΤΑ! Μειονέκτημα: Υψηλό κόστος

76 Εφαρμογή Α: Αντισώματα σε συγγενή λοίμωξη

77 Ag, κ/α Εφαρμογή Β: Ορολογικές και άλλες διαγνωστικές εξετάσεις στη διάγνωση λοίμωξης

78 κ/α Εφαρμογή Γ: Κλινικές εκδηλώσεις και εργαστηριακά ευρήματα σε λοίμωξη από ιό Parvo Β19 σε ανοσοεπαρκές άτομο