اثرات اتانول بر تغييرات کروموزمي سلولهاي فيبروبالست انساني

Transcript

1 كومش - جلد 61 شماره ( 2 پياپی )45 زمستان 6131 پونه امينگرام (Ph.D)1 مجيد رضايي طاويراني (M.D)2 مونا زمانيان عضدي (Ph.D)*3 بهادر باقري (Ph.D)4 رضا نصرر (M.Sc)5 محمدرضا اکبري عيدگاهي (Ph.D)5-1 دانشگاه آزاد اسالمي واحد علوم و تحقيقات تهران -2 دانشگاه علوم پزشکي ايالم دانشکده پزشکي -3 دانشگاه علوم پزشکي شهيد بهشتي مرکز تحقيقات پروتئوميکس -4 دانشگاه علوم پزشکي سمنان دانشکده پزشکي دپارتمان فارماکولوژي -5 دانشگاه علوم پزشکي سمنان مرکز تحقيقات بيوتکنولوژي چكيده سابقه و هدف : مصرف اتانول يا الکل اتيليک منجر به اثرات سمي در بدن مي شود. مسيرهاي متابوليسيمي متنووع اين ماده در بدن مي تواند متابوليتهايي ايجاد كند كه براي بدن سمي هستند. هدف ايون ماالهوه يررسوي اثورات اتانول بر تغييرات كروموزمي سلولهاي فيبروبالست انساني است. مواد و روشها : سلولهاي فيبروبالست انساني به مدت 84 ساعت در محيط كشت RPMI حاوي اتانول با دو غلظت 48 و 804 ميليموالر قرار داده شدند. پس از 84 ساعت انکوباسيون تغييرات كروموزمي آن بوه روش كاريوتيوپ بوا رنگآميزي گيمسا بررسي و نقشه كاريوتايپ ثبت گرديد. سپس نتايج از نظر وجود ناهنجاريهاي كروموزمي با طور كاريوتايپ سلولهاي فيبروبالست كنترل (بدون الکل) مقايسه شد. يافتهها : ماالهه كاريوتايپ نشان داد كه تغييرات انجام شده در غلظت 48 ميليمووالر بوهصوورت شکسوت ي در كروموزم گروه C و شماره 8 بوده و در غلظت باالي الکل يهني غلظت 804 ميليموالر شکست ي در كروموزوم شماره 9 كروماتيدها و همچنين پديده درون همانندسازي نيز مشاهده شد. نتيجهگيري : به نظر مي رسد كه كه دوزهاي مشخصي از اتانول ميتواند موجب بوروز تغييورات گسوترده سوااتار كروموزمي سلولها شوند. از اينرو استفاده از اين ماده بايد با دقت بيشتري صورت گيورد و تحقيقوات تکميلوي در زمينه اثر آن روي ساير ردههاي سلولي و بررسي تحت شرايط In-vivo نيز ميتواند سودمند باشد. واژههاي كليدي : الکل اتانول سلولهاي فيبروبالست انساني ناهنجاريهاي كروموزمي كاريوتايپ مقدمه داشت [.]2 3 متابوليسم الکل بدين صورت است کاه در ياک مصرف اتاانو مانناد دارواااي ديگار مايتواناد اثارات مسير آلدئيد دئيدروژناز اتانو به استالدئيد و در مرحله بعد به زيانبخشي براي بدن داشته باشد [.]1 آسيب عمده آن بر مغاز يک ماده جنبي با فعاليت کمتر به نام استات تبديل ميشود که است که ميتواند کارکرد طبيعي آن را دچار اختال کناد. ايان در نهايت استات باه آ و دياکسايد کاربن شکساته شاده و تغييرات شامل تاثيراتي است که بر ناقلااي عصبي گذاشاته و حذف ميگردد [ ]4 بهعالوه الکل ميتواند موجب افزايش توليد کااش سيگنا ااي مغزي و حتي مرگ سلولي را در بر خوااد متابوليتااي فرعي خطرناکي از جمله گونهااي اکسيژني فعا mona.azodi@gmail.com * نويسنده مسئو تلفن : نمابر : تاريخ دريافت : 1393/1/24 تاريخ پذيرش 1393/7/30 : اثرات اتانول بر تغييرات کروموزمي سلولهاي فيبروبالست انساني

2 پونه امينگرام و امکاران مطالعه اثر اتانول بر تغييرات کروموزمي سلولهاي... اکسيداتيو باهطاور خااد در کباد شاود [.]5 5 ايان فااکتور تعداد بانداا با توجه به مرحله ميتوز متفااوت و ممکان اسات ميتواند به DNA و پروتئين آسيبزده و ترکيباات سارطانزا شامل 300 يا کمتر در آخر متافاز و يا 1000 باند بيشتار در ايجاااد کنااد [.]7 اخااتال ت دسااتگاه گااوارش از شااايعتاارين اوايل پروفاز باشد [.]19 از آنجاييکه مصرف الکل اتانو در مشکالت استفاده از الکل باوده باهطاوري کاه سارطاناااي زمينهااي مختلف صنايع آرايشي خوراکي و داروياي در دنياا دستگاه گوارش يکي از بدخيميااي ناشاي از مصارف الکال گسترش فراواني پيدا کارده تحقياق در زميناه امکاان ايجااد گزارش شده است [.]8 از سوي ديگر الکل مايتواناد موجاب عوارضي در بدن مورد ااميت است. بنابراين در اين پاژواش افزايش روند پراکسيداسيون ليپيداا و بروز اختال ت مهمي در اثر اين ماده آلي را روي کروموزومااي متافازي سالو اااي کبد شود [.]9 بدين ترتيب که با افزايش توليد اسيدااي چر فيبروبالست انساني تيمار شده با الکل به عنوان يک سلو کم موجب با رفتن تراکم چربي در کبد (کباد چار ) افازايش تمايزيافته و مهم باا سالو اااي فيبروبالسات ساالم مقايساه ليپيد در خون و سرانجام ايجاد بيمااري سايروز کبادي گاردد ميشوند تا احتما بروز اختال ت ژنتيکي تعيين گردد. [.]10 بررسياا نشان داده که سلو اا در محيطاااي کشات پس از چند بار تقسيم شدن متوقف ميشاوند کاه ايان توقاف مواد و روش ها رشد به دليل تجمع آسيبااي اکسايداتيو در DNA سالو ااا مووا : مواد اساتفاده شاده باه شارر زيار بودناد : محايط ميباشد [.]11 مادهاي به نام oxoguanine-8 وجاود دارد کاه کشااااات RPMI1640 و سااااارم جناااااين گااااااوي در سلو ااي مسن 4 برابر بيشتر از سلو اااي تاازه کشات ) (Fetal bovine serum پناايساايلين (شاارکت ساايگما) شده بوده و امچنين سطح پايداري آن در سلو ااي مسن 35 استرپتومايسااين (شاارکت ساايگما) ساايکلوسااپورين (شاارکت در صد با تر از سلو ااي جوان است [.]12 اتاانو نياز باه سيگما) تريپسين (شرکت سايگما) ساود و اسايد کلريادريک واسطه نقشي کاه در افازايش ايان مااده دارد در پيار کاردن (شرکت مرک) ( PBS شرکت سيگما) رنا گيمساا (شارکت سلو اا نقش ايفا ميکند و موجب کااش پوششااي محافظ سيگما) متانو (شرکت مرک) اسيداساتيک (شارکت مارک) کروماتيني دانسيته کروماتيني و امچنين احتما شکساتگي و کلريدپتاسيم (شرکت مرک) تريپسين (شرکت سيگما) کلسميد ناانجاريااي کروموزومي با ميبرد [.]13 در کل تماس باا (شرکت سايگما) فالساک ( T25 شارکت NUNC دانماارک) اتانو چه کوتاهمدت و چه بلندمدت امکان تجمع اساتالدئيد و فيلتر سر سرنگي 0/22 ميکرومتر (شرکت NUNC دانمارک) پروتئينااي تغييريافته تغيير وضعيت مکانيسم اکسيد و احيااء ظروف استريل شامل پيپت پاستور (شرکت NUNC دانمارک) سلولي فعاليات سامي ميکروزوماالي تخرياب فعالياتاااي پيپت مدرج (شرکت NUNC دانمارک) لولاهاااي ساانتريفوژ ميتوکندريايي و تجمع سيتوتوکسيتاا در لنفوسيتااا را دارد در دار فااالکون 15 و 10 ميل ايليتااري (شاارکت [ G-banding.]14 از روشااي استاندارد کاريوتايپ است که دانمارک). NUNC الگويي از نواحي تيره و روشن به ما ميداد [.]15 ايان الگاو روش کار. سلو ااي فيبروبالست را در فالساک حااوي براي ار کروماوزوم منحصار باه فارد اسات. ناواحي روشان محيط کشت RPMI کشت داده شد و محيط حاوي رقتاااي ( )G-light مربوط به نواحي غني از G-C است و نواحي تياره 54 و 108 ميليمو ر اتانو تهياه شاد. پاس از 48 سااعت ( )G-dark مربوط به نواحي غني از A-T مايباشاد [.]15 17 انکوباسيون با شرايط دماايي 0/05 CO2 37 C و رطوبات در اصل نواحي روشن نواحي استند که در آناا ژنااي فعا 90 درصد به ار فالسک کلساميد باه مقادار زيادي وجود دارند ولي نواحي تيره نواحي فشرده با تعداد ژن اضافه ميگردد. به اين ترتيب سلو اااي ميتاوزي در مرحلاه /4 μg ml ( )ROS کاااش آنتاياکسايدانااا و فعااا شاادن مسايرااي کم و ويژه بافت ميباشد [.]18 الگوي نواحي تيره و روشان و

3 جلد 15 شماره ( 2 پياپي )54 زمستان 1393 کومش نگهداري شد و در تمام اين مدت بايد کلسميد با امان غلظات مطالعات ساختاري سلو اااي ماورد بررساي اطالعاات در محيط باقي بماند تا سلو اا از حالت ميتوز خارج نشاوند. مناسبي از بروز تغييرات ظااري و تاييد نتايج ساير آزمايشات به مقدار 1 ميليليتر تريپسين به محيط اضافه کرده و به مادت سلو شناساي فاراام ماينماياد [.]20 تغييارات مورفولاوژي 5 الي 8 دقيقه در انکوباتور با دماي 37 C قارار داده شاد و سلو ااي فيبروبالست انساني در حضور اتانو با اساتفاده از سپس به آرامي به لوله فالکون انتقا يافت تا به مادت 8 الاي ميکروسکوپ فاز معکوس در غلظت 200 ميلايماو ر الکال 10 دقيقه با دور 1200 rpm سانتريفوژ شاود. پاس از عمال بعد از انکوباسيون 48 ساعته مورد سنجش قرار گرفت (شکل سانتريفوژ مايع رويي که حاوي محيط کشت است دور ريخته.)1 شد. در ايان مرحلاه اام سوسپانسايون مجادد سالو ااا در باقيمانده محيط کشت انجام شد. پس از برداشتن محيط کشت الف به مقدار 8 تا 10 ميليليتر کلريد پتاسيم به سلو اا با غلظات 0/075 مو ر اضافه شد. بدين ترتياب سالو ااا در معار شوک اااايپوتونيک قرار داده شادند و ساپس باه مادت 15 دقيقه در انکاااوباتور باا دمااي 37 C قارار گرفتناد. باراي برداشتن کلريدپتاسيم از روي سلو اا دوباره به مدت 8 دقيقه در دور 1200 rpm سانتريفوژ انجام شاد. ماايع فوقااني دور ريخته و سلو ااي معلق در کلريدپتاسيم سوسپانسيون شادند. سپس 5 ميليليتر محلو فيکساتيو (متانو : اسايداساتيک باه نسبت )1:3 به سلو اا اضافه شد. حداقل به مادت 20 دقيقاه بايد سلو اا در معر فيکساتيو قرار گيرند. پاس از تببيات او محلو فيکساتيو با عمل سانتريفوژ در دور 1200rpm به مدت 8 دقيقه از سلو اا جدا شد. حا سالو ااا دوبااره در محلو فيکساتيو شستشو داده شدند. پس از تعليق سلو اا در شااکل.1 تصااوير ميکروسااکوپي فااازمعکوس بااا بزرگنمااايي 1000 در مقدار کم فيکساتيو يک يا دو قطره از آن را با پيپت پاستور از انکوباسيون 48 ساعته. الف : سلو ااي نرما دوکاي شاکل فيبروبالسات فاصله حداکبر 30 سانتيمتري روي م ميکروسکوپي پرتا انساني : سلو ااي فيبروبالست کروي و دوکايشاکل در محايط کشات و م در دماي اتاق خشک شد. م تهيه شده از سلو ااا باا رن حاوي 200 ميليمو ر اتانو گيمساي 5 درصد رن آميزي شد. ار م ميکروسکوپي تهيه شده حاوي تعدادي سالو اسات کاه در مرحلاه متافااز از آنجا که بررسي سيتولوژکي نشان ميداد که الکال بار متوقااف شاادهانااد. نتااايج ب اهدساات آمااده حاصاال مقايسااه مورفولوژي فيبروبالستاا تاثير گذاشته است احتما ميرود کروموزمااي دو نمونه در شرايط 3 بار تکرار آزماايش اسات اين تاثيرگذاري در سطور مولکولي و کروموزومي نيز مشااده که توسط شاخص آماري ارزش P تخمين زده شد. شود. يکي ار راهاااي بررساي ناانجاارياااي کروماوزومي استفاده از کاريوگرام است. در بررسي وضعيت کروماوزومااا متافاز خوااند بود. فالسکاا به مدت 4 ساعت در انکوبااتور نتايج

4 پونه امينگرام و امکاران مطالعه اثر اتانول بر تغييرات کروموزمي سلولهاي... banding Giemsa يک روش عمومي رن آميزي اسات کاه از الکل بررسي شده است [.]24 در اين تحقيق گزارش گرديده مااواد واکاانشدانااده در آن شااامل مخلااوطي از رن ا ااااي است که غلظتااي 54 و 108 ميليمو ر اتاانو بعاد از 48 آمينوفنولتيازين مانند متيلنبلو تيونين آزور A, B, C و رن ساعت انکوباسيون سبب تغييرات و بروز ناانجاري در برخاي اسيدي ائوزين است [.]23-21 در شکل 2 کاريوگرام به روش از سلو اااي فيبروبالسات شاده اسات باه اماين دليال در G-banding براي سلو ااي سالم فيبروبالست انساني نمايش شکلااي 3 تا 5 کاريوگرام تهيه شده براي اين سلو اا نشاان داده شده است. داده شده است. بروز اندورپليکيشن که اماان امانندساازي ژناوم بادون تقسيم سلو است که موجب افزايش محتوي ژنتيکي اساته و پلي پلوئيدي ميشود يکي ديگر از ناانجارياايي اسات کاه در نتيجه اثر اتانو ميتواند اتفااق بيفتاد ايان ناانجااري در شکل 5 نمايش داده شده است. شکل.2 کاریوگرام سلولهای سالم فیبروبالست انسانی کروموزومها از شماره 1 تا 22 بصورت جفتی نشان داده شدهاند. الف شکل.2 کاریوگرام سلولهای فیبروبالست انسانی در حضور غلظت 45 میلیموالر اتانول الف : شکستگی در کروماتیدد گدروه c و ب : شکسدتگی در کرومدوزوم شماره.1 بروز این ناهنجاریها با p value< 5/54 نسبت به نمونه سالم معناداردار است. الف شکل.5 کاریوگرام سلولهای فیبروبالست انسانی در حضور غلظت 151 میلیموالر اتانول پس از انکوباسیون 51 ساعته الف : شکستگی در کروموزوم شماره 9 و ب : شکستگی در کروموزوم و کروماتید(فلش سمت راست شکستگی در کروماتید و فلش سمت چپ شکستگی در کرومدوزوم را نشدان مدیدهدد. بدروز ایدن ناهنجاریها با p value< 5/54 نسبت به نمونه سالم معناداردار است. بهطاور متاداو از رنا آميازي گيمساا اساتفاده مايشاود. بقا سلو ااي فيبروبالست در حضور غلظتااي مختلفاي

5 جلد 15 شماره ( 2 پياپي )54 زمستان 1393 کومش ترتيب که سلو ااي دوکي شکل فيبروبالست در نتيجه تيماار با الکل به شکل کروي در آمدند و اين تغييرات در دو غلظات 54 و 108 ميليمو ر به حداکبر مقدار ميرسد. امچنين نتايج ايجاد حداکبر کااش بقا - سلولي استند [.]24 با توجه به شکل 1 امين تغييرات مورفولوژي در رقتااي با ي الکال يعناي دوز 200 ميليمو ر که منطبق با حداکبر غلظت پس از بسيار شکل.4 وقوع درون همانندسدازی ) (Endoreplication کده در نن نوشيدن الکل در بدن است مشااده ميشود اما ايان تغييارات کروموزومها به شکل تتراد نرایش گرفتهاند. این ناهنجاری در سدلولهدای امراه با فعا شدن سيساتماااي ترميماي و برگشات برخاي فیبروبالست انسانی در حضور 151 میلیموالر اتانول پس از انکوباسدیون سلو اا به حالت نرما ميباشد. امانطور که در قبال اشااره 51 ساعته رخ داده است. بروز این ناهنجاریها با p < 5/54 نسدبت بده نمونه سالم شد دو غلظت 54 و 108 ميليمو ر بيشترين تغييرات کيفي معناداردار است. و کمي را بر سلو ااي فيبروبالست اعما ميکنند از ايان رو بحث و نتيجه گيري در اين تحقيق اين دو غلظت به عناوان غلظاتاااي شااخص از آنجايي که متابوليتااي حاصل از متابوليسام اتاانو تهديدکننده حيات سلولي براي مطالعاات کاريوتاياپ در نظار ميتواند براي بدن انسان سمي باشند بررسيااي بايشتار در گرفته شدند و ناانجاريااي کروموزومي با مقايسه باا نموناه اين زمينه مورد نياز اسات [.]25 تااثير ضاد تکبياري اتاانو شااد به وسايله نقشاه کااريوگرام مشاخص شاد. بار اسااس ميتواند عامل بيماريزايي آن باشد بيماريااي کبدي ناشاي اطالعات بهدست آماده از شاکل 2 غلظات 54 ميلايماو ر از مصاارف الکاال نتيجااه مسااتقيم تضااعيف فعالي ات تکبي اري موجب شکستگي در کروموزم گروه C و کروماوزم شاماره 1 سلو ااي کبدي به دليل جلوگيري از سنتز DNA وابساته باه شده است. بهطوريکه در شکل 3 مشاخص اسات در غلظات فاکتور رشد تحريک شده است. اتانو در تکبيار سالو اااي باا ي الکاال يعناي غلظات 108 ميلايمااو ر شکسااتگي در مختلفاي از جملااه استروسايتاااا ساالو ااااي T انساااني و کرومااوزوم شااماره 9 و کروماتي اد دي اده م ايشااود کااه اي ان اپاتوسيتااي بنياادي ماوش در حالات In-vitro تاثيرگاذار ناانجاااريااااي کرومااوزمي م ايتواننااد بااه تغييارات شااديد نشان داده است. طبق قانون شلفورد که در سا 1911 مطارر متابوليکي و در نهايت مرگ سلو شوند. از ديگار اختال تاي شد شدت يک عامل اکولوژيک ميتواند رشد موجودات زنده که در مواجه با غلظت 108 ميليمو ر اتانو ديده شاد باروز را محدود نمايد [.]25 بنابراين خيلي از ماواد کاه در بادن تاا پديده درون امانندسازي بود کاه در شاکل 5 تشاکيل تتاراد حدي قابل تحمل استند اگر مقدار آناا از يک حادي تغييار کروموزمي در آن مشخص است. اين پديده نيز منجر به وقاايع کند ميتوانند براي بدن سم محسو شوند [.]27 گاااي ايان پليپلوئيدي ميگردد که فعاليت و عملکرد سلو ااا از شاکل دامنه خيلي پايين است و در دوزااي پايين ام مواد ميتوانناد نرما خود خارج ميشوند. بدين ترتيب که افزايش نساخه از در بدن عوارضي ايجاد کنند [.]29 28 بر اساس نتايجي کاه از ژنااي خاد ممکن است به مرگ سلو منجر شود. بنابراين اثر اتانو بر ساختار مورفولوژي سلو اااي فيبروبالسات در با استفاده روز افزون از اتانو در مواد آرايشي بهداشتي مانند غلظتااي پايين طي تحقيقات گذشاته توساط اماين گاروه انواع آنتيباکتريا اا و لوسيونااا و اثباات اثارات زياانباار بهدست آمد مشخص شد که تغييراتاي سااختاري باارزي در اتااانو باار ساالو ااااي فيبروبالساات پوسااتي و وقااوع نتيجه تيمار اين ترکيب بر ساختار سلولي تحميل ميشود. بدين ناانجارياااي کروماوزومي پيشانهاد مايشاود آزمايشاات مطالعات بقا سلولي مويد آن است کاه ايان دو غلظات عامال

6 Downloaded from koomeshjournal.semums.ac.ir at 13: on Tuesday October 9th 2018 پونه امينگرام و امکاران... مطالعه اثر اتانول بر تغييرات کروموزمي سلولهاي [13] Pawlowska E, Janik-Papis K, Rydzanicz M, Zuk K, Kaczmarczyk D, Olszewski J, et al. The Cys326 allele of the 8oxoguanine DNA N-glycosylase 1 gene as a risk factor in smoking-and drinking-associated larynx cancer. Tohoku J Exp Med 2009; 219: [14] Yan M, Zhu P, Liu HM, Zhang HT, Liu L. Ethanol induced mitochondria injury and permeability transition pore opening: role of mitochondria in alcoholic liver disease. World J Gastroenterol 2007; 13: [15] Hwang SM, See Cj, Choi J, Kim SY, Choi Q, Kim JA, et al. The application of an in situ karyotyping technique for mesenchymal stromal cells: a validation and comparison study with classical G-banding. Exp Mol Med 2013; 45: 68. [16] Fiorentino F, Caiazzo F, Napolitano S, Spizzichino L, Bono S, Sessa M, et al. Introducing array comparative genomic hybridization into routine prenatal diagnosis practice: a prospective study on over 1000 consecutive clinical cases. Prenat Diagn 2011; 31: [17] Ademà V, Hernández JM, Abáigar M, Lumbreras E, Such E, Calull A, et al. Application of FISH 7q in MDS patients without monosomy 7 or 7q deletion by conventional G-banding cytogenetics: Does 7/7q detection by FISH have prognostic value? Leuk Res 2013; 37: [18] Laevsky I. Karyotype and fluorescent in situ hybridization analysis of human embryonic stem cell and induced pluripotent stem cell lines. atlas of human pluripotent stem cells. Springer 2012; [19] Lahlou N, Fennoy I, Ross JL, Bouvattier C, Roger M. Clinical and hormonal status of infants with nonmosaic XXY karyotype. Acta Paediatr 2011; 100: [20] Dalilan S, Rezaei-Tavirani M, Nabiuni M, Heidari-Keshel S, Zamanian Azodi M, Zali H. Aqueous extract of lavender angustifolia inhibits lymphocytes proliferation of hodgkin s lymphoma patients. Iran J Cancer Prev 2013; 6: [21] Vadivel S, Vanitha M, Muthukrishnaraj A, Balasubramanian N. Graphene oxide BiOBr composite material as highly efficient photocatalyst for degradation of methylene blue and rhodamine-b dyes. J Water Proc Engin 2014; 1: [22] Mou Z, Dong Y, Li S, Du Y, Wang X, Yang P, Wang S. Eosin Y functionalized graphene for photocatalytic hydrogen production from water. Intern J Hydrogen Energy 2011; 36: [23] Bates SE. Classical cytogenetics: karyotyping techniques. human pluripotent stem cells. Springer 2011; 767: [24] Aminigram P, Heydari KS, Zamanian AM, Rezaei TM, Basati GH, Rezaei Tavirani M. The evaluation of ethanol effects on fibroblast cells viability. J Ilam Univ Med Sci 2013; 21: [25] Kaminen-Ahola N, Ahola A, Maga M, Mallitt KA, Fahey P, Cox TC, et al. Maternal ethanol consumption alters the epigenotype and the phenotype of offspring in a mouse model. Plos Genet 2010; 6: [26] Salter Townshend M, Haslett J. Fast inversion of a flexible regression model for multivariate pollen counts data. Environmetrics 2012; 23: [27] Sargent F. Ecological implications of individuality in the context of the concept of adaptive strategy. Int J Biometeorol 1966; 10: [28] Penniston KL, Tanumihardjo SA. The acute and chronic toxic effects of vitamin A. Am J Clin Nutr 2006; 83: [29] Ledl F, Schleicher E. New aspects of the Maillard reaction in foods and in the human body. Ang Chem Internat Edit Eng 1990; 29: گستردهتري در غلظتااي با ي اتانو که در ماواد آرايشاي روي سالو اااي فيبروبالسات بهداشتي مورد استفاده اسات پوستي و ديگر سلو ااي پوست انجام شود و امچنين انجاام اين آزمايشات در غلظت فيزيولوژيک روي ردهاااي سالولي. ديگر ضروري به نظر ميآيد تشكر و قدردانی از مرکز تحقيقات پروتئوميکس به خاطر حمايت از اجراي. اين پروژه قدرداني ميگردد منابع [1] Bushman BJ. Effects of alcohol on human aggression. Recent developments in alcoholism. Springer 1997; 13: [2] Ikonomidou C, Bittigau P, Ishimaru MJ, Wozniak DF, Koch C, Genz K, et al. Ethanol-induced apoptotic neurodegeneration and fetal alcohol syndrome. Science 2000; 287: [3] Harper C, Matsumoto I. Ethanol and brain damage. Curr Opin Pharmacol 2005; 5: [4] Köpke M, Mihalcea C, Bromley JC, Simpson SD. Fermentative production of ethanol from carbon monoxide. Curr Opin Biotechnol 2011; 22: [5] Alfonso-Loeches S, Ureña-Peralta JR, Morillo-Bargues MJ, Oliver-De La Cruz J, Guerri C. Role of mitochondria ROS generation in ethanol-induced NLRP3 inflammasome activation and cell death in astroglial cells. Front Cell Neurosci 2014; 8: 216. [6] Wu D, Cederbaum AI. Oxidative stress and alcoholic liver disease. Semin liver Dis 2009; 29: [7] Shield KD, Parry C, Rehm J. Chronic diseases and conditions related to alcohol use. Alcohol Res 2013; 35: [8] Cargiulo T. Understanding the health impact of alcohol dependence. Am J Health Syst Pharm 2007; 64: [9] Ziech D, Franco R, Pappa A, Panayiotidis MI. Reactive Oxygen Species (ROS) Induced genetic and epigenetic alterations in human carcinogenesis. Mutat Res 2011; 711: [10] Lieber CS. Alcoholic fatty liver: its pathogenesis and mechanism of progression to inflammation and fibrosis. Alcohol 2004; 34: [11] Chen Q, Fischer A, Reagan JD, Yan LJ, Ames BN. Oxidative DNA damage and senescence of human diploid fibroblast cells. Proc Natl Acad Sci U S A 1995; 9: [12] Bruskov VI, Malakhova LV, Masalimov ZK, Chernikov AV. Heat-induced formation of reactive oxygen species and 8oxoguanine, a biomarker of damage to DNA. Nucleic Acids Res 2002; 30:

7 Koomesh Winter 2015, 16 (2): Ethanol- induced chromosomal abnormalities in human fibroblast cells Downloaded from koomeshjournal.semums.ac.ir at 13: on Tuesday October 9th 2018 Pooneh Aminigram (Ph.D)1, Majid Rezaei Tavirani (M.D)2, Mona Zamanian-Azodi (Ph.D)*3, Bahador Bagheri (Ph.D)4, Reza Nasr (M.Sc)5, Mohamad Reza Akbari Eidgahi (Ph.D)5 1 - Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran 2 - Faculty of Medicine, Ilam University of Medical Sciences, Ilam, Iran 3 - Proteomics Research Center, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran 4 Dept. of Pharmacology, Faculty of Medicine, Semnan University of Medical Sciences, Semnan, Iran 5 - Biotechnology Research Center, Semnan University of Medical Sciences, Semnan, Iran (Received: 13 Apr 2014; Accepted: 22 Oct 2014) Introduction: ethanol consumption may impose cytotoxic effects on the human body, by producing toxic metabolites through different pathways. Furthermore, some studies have also linked alcohol consumption to various types of diseases. Therefore, this in vitro study is aimed to assess the ethanol toxic effects on the human fibroblastic chromosome structure. Materials and Methods: G banding staining method was used to determine the karyotype of chromosomal abnormalities of cultured fibroblast cells. Karyogram of ethanol-treated cells after 48 hours of incubation with 54 and 108 mmol of ethanol were assessed against the untreated cultured cells. Results: the comparison between two karyogram models confirmed that lower ethanol concentration (54mmol) caused breakage in chromosome type C and number 1, while with higher concentration (108mmol) breakage was observed in chromosome 9, chromatids as well as endoreplication in some other cells. Conclusion: this study indicates that specific concentrations of ethanol can cause vast alterations in chromosomal structure. Therefore, in general, more care is suggested in consuming this substance. In addition, to confirm the cytotoxic alterations in chromosomal structure in relation to alcohol consumption, using other cell lines and /or in vivo studies, more investigations are warrant. Keywords: Ethanol, Human fibroblast cell, Chromosome abnormalities, Karyotype * Corresponding author. Fax: ; Tel: mona.azodi@gmail.com How to cite this article: Aminigram P, Rezaei Tavirani M, Zamanian Azodi M, Bagheri B, Nasr R, Akbari Eidgahi M. Ethanolinduced chromosomal abnormalities in human fibroblast cells. koomesh. 2015; 16 (2) : URL 34