NADAL Troponin I Test (Ref )

NADAL Troponin I Test (Ref. 282001) 1. Kasutusotstarve NADAL Troponin I Test on üheastmeline kromatograafiline immunoloogiline analüüs kardiaalse troponiin I kiireks ja kvalitatiivseks tuvastamiseks täisveres, seerumis või plasmas. Seda kasutatakse abivahendina südamelihase infarkti diagnoosimisel (MI). 2. Näidustus ja kliiniline tähendus Kardiaalne troponiin (ctnl) on südamelihases leiduv valk, molekulmassiga 22.5 kda1. Troponiin I on osa kolmest alaühikust koosnevast troponiinkompleksist; kaks teist kompleksi kuuluvat valku on troponiin T ja troponiin C. Koos tropomüosiiniga moodustab see struktuurkompleks peamise komponendi, mis reguleerib kaltsiumitundliku aktomüoseeni ATPaasi vöötlihastes ja südamelihases2. Kardiaalse vigastuse ilmnemisel tungib 4-6 tundi pärast valu puhkemist vereringesse troponiin I. Kardiaalne TnI sarnaneb kreatiini kinaasi MBisoensüümile (CK-MB), kuid CK-MB kontsentratsioon langeb 72 tunni järel normaalsele tasemele, samas kui troponiin I jääb kõrgele tasemele 6-10 päeva pärast verre eritumist, luues sedasi pikema perioodi, mille vältel on võimalik kardiaalset vigastust avastada. ctni näitude kõrget spetsiifilisust südamelihase kahjustuste tuvastamisel on kogetud tingimustes nagu operatsioonil, pärast maratonijooksu või tömpi rindkere traumat3. ctnl vabanemist on täheldatud ka teiste kardiaalsete haiguste korral peale ägeda südamelihase infarkti (AMI), näiteks ägedaloomulise stenokardia, südamepuudulikkuse ja pärgarteri šuntimisoperatsiooni tagajärjel tekkinud isheelimise müokardia puhul4. Selle kõrge spetsiifilisuse ja tundlikkuse tõttu südamelihase koes on troponiin I hetkel eelistatuimaks biomarkeriks südamelihase infarkti tuvastamisel5. NADAL Troponin I Test on lihtne test, mis utiliseerib osakestega seonduvate ctnispetsiifiliste antikehade ja reaktiivide kombinatsiooni ctni tuvastamiseks täisveres, seerumis või plasmas. Minimaalne tuvastatav kontsentratsioon on 1 ng/ml. 3. Testi tööpõhimõte NADAL Troponin I Test on kvalitatiivne, membraanipõhine immunoloogiline analüüs ctni tuvastamiseks täisveres, seerumis või plasmas. Membraan on testiosas eelkaetud siduva reaktiiviga. Testimise käigus reageerib ctni sisaldusega täisveri, plasma või seerum kahe spetsiifilise testi anti-ctni antikehaga. Üks neist takistab siduva reaktiiviga sidunemist; teine on värvkodeeritud. Kapillaarjõu mõjul tungib segu läbi membraani. Testialas püütakse ctniantikeha kompleks immobiliseeritud siduva reaktiivi poolt kinni ja ilmub punane joon. Selle joone ilmumine testialas näitab positiivset tulemust, puudumine aga negatiivset. Testi toimimise kinnitamiseks ilmub kontrollalale (C) alati punane joon, näidates et kasutatud proovi kogus on olnud piisav ja membraan on läbistatud. 4. Reaktiivid ja kaasasolevad materjalid -20 NADAL Troponin I testikassetti -20 ühekordselt kasutatavat plastikpipetti (üks pakendi kohta) -20 hepariniseeritud kapillaartoru - 1 pakendivaheleht 5. Täiendavad vajalikud materjalid -Anum proovide kogumiseks -Tsentrifuug (ainult plasma ja seerumi jaoks) 1

-Lantsetid (ainult sõrmeotsast võetava täisvere jaoks) -Balloon (ainult sõrmeotsast võetava täisvere jaoks) -Taimer 6. Hoiustamine ja stabiilsus Hoidke algses pakendis - suletud pakendis külmikus või toatemperatuuril (2-30 C), sedasi tagate testi omaduste säilimise suletud pakendil märgitud kuupäevani. Testseade peab kasutamiseni jääma suletud pakendisse. -Ärge sügavkülmutage! -Ärge kasutage pärast aegumist! 7. Hoiatused ja ettevaatusabinõud -Mõeldud kasutamiseks ainult in vitro diagnostikas. -Ärge kasutage pärast aegumist. -Testseade peab kasutamiseni jääma suletud pakendisse. -Ärge sööge, jooge ega suitsetage proovide või testkomplektide käsitlemise alas. - Ärge kasutage testi, kui pakend on kahjustatud. -Kasutatud test tuleks utiliseerida lähtuvalt ettenähtud standarditest. -Niiskus ja kõrge temperatuur võivad tulemusi tugevat mõjutada. -Käsitlege kõiki proove sedasi nagu need sisaldaksid nakkusohtlikke toimeaineid. Järgige testimisel ettenähtud mikrobioloogiliste ohtudega seonduvaid ettevaatusabinõusid ning utiliseerige testid ja proovid lähtuvalt ettenähtud standarditest. -Kandke proovide testimisel kaitseriietust, nagu laborikitlid, ühekordsed kindad ja kaitseprillid. 8. Proovide kogumine ja ettevalmistamine NADAL Troponin I Test on võimalik kasutada täisvere (veenivere või sõrmeotsast võetud vere), seerumi või plasma testimisel. Proovide kogumine Kapillaartoruga sõrmeotsast võetav täisveri: 1. Peske patsiendi käsi seebi ja sooja veega või puhastage alkoholis immutatud lapiga. 2. Masseerige keskmist või nimetu sõrme proovi võtmise ala puutumata sõrmeotsa poole liikudes. 3. Läbistage sõrmeotsa nahk steriilse lantsetiga. Pühkige esimene veretilk ära. 4. Hõõruge kätt randmest peopesa ja sõrme poole kuni sõrmeotsa moodustub ümmargune veretilk. 5. Võtke kapillaartoru verd täis. Vältige õhu sattumist torru! 6. Asetage balloon kapillaartoru ülemisse otsa ja pigistage seda, kuni kogu veri on liikunud testkasseti kogumisavasse (S). Proovide transportimine ja hoiustamine -Eraldage seerum või plasma verest hemolüüsi vältimiseks esimesel võimalusel. -EDTA-sisaldusega proove võib kasutada vahetuks testimiseks. -Hepariinverd, EDTA verd või tsitraatverd võib kasutada plasma kogumiseks. -Kasutage ainult selgeid hemolüüsimata proove -Testimine peaks toimuma vahetult pärast proovi kogumist. Ärge jätke proove pikaks ajaks toatemperatuurile seisma. Seerumi- ja plasmaproove võib säilitada temperatuurivahemikus 2-8 C kuni 3 päeva. Pikaajaliseks hoiustamiseks tuleb proove hoida temperatuuril alla -20 C. 2

Kui test tehakse kahe proovi võtmisele järgneva päeva jooksul võib veenist võetud täisverd hoida temperatuurivahemikus 2-8 C. Ärge külmutage veenivere proove! Sõrmeotsast võetud täisverd tuleks testida vahetult. -Veenduge, et proovid oleksid enne testimist toatemperatuuri juures. Sügavkülmutatud proovid peavad olema enne testimit täielikult üles sulatatud ja segatud. Proove ei tohi korduvalt külmutada ja üles sulatada. -Kui proovid vajavad transporti tuleks need pakendada vastavalt kohalikele etioloogilistele agentidele esitatavatele nõuetele. 9. Testimisprotsess I. Ettevalmistamine 1. Laske NADAL Troponin I testkassetil, proovidel ja kontrollmehhanismidel enne testimist toatemperatuurile soojeneda. 2. Eemaldage NADAL Troponin I testkassett suletud pakendist ja kasutage see ära esimesel võimalusel. Parimad tulemused saadakse, kui test viiakse läbi ühe tunni jooksul pärast pakendi avamist. Asetage NADAL Troponin I testkassett puhtale ja ühetasasele pinnale. II. Testimisprotsess 1a) Seerumi- või plasmaproovid Hoidke ühekordset pipetti püstasendis ja tilgutage 2-3 tilka seerumit või plasmat (100 - NADAL Troponin I testkasseti kogumisavasse (S). 1b) Veenist võetud täisvereproovid Hoidke ühekordset pipetti püstasendis ja tilgutage 2-3 tilka seerumit või plasmat (100 - NADAL Troponin I testkasseti kogumisavasse (S). 1c) Sõrmeotsast võetud täisvereproovid Tilgutage 4-5 tilka täisverd kapillaartorust (100 - NADAL Troponin I testkasseti kogumisavasse (S). 2. Käivitage taimer. Oodake punas(t)e joon(t)e ilmumist. Lugege tulemust pärast 15 minuti möödumist. Kinnitage negatiivsed testitulemused pärast 20 minuti möödumist. Ärge lugege tulemusi pärast 20 minuti möödumist. 10. Tulemuste lugemine Positiivne tulemus* Ilmub kaks selget punast joont. Üks joon peaks olema kontrollalas (C) ja teine testalas (T). Mistahes punakat tooni joont testalas (T) tuleks lugeda positiivseks tulemuseks. 3

Negatiivne tulemus Kontrolljoone piirkonda ilmub üks punane joon (C). Testalasse ei ilmu selgelt nähtavat joont (T). Kinnitage negatiivsed testitulemused pärast 20 minuti möödumist. Vigane tulemus Kontrolljoont (C) ei ilmu. Vigase testitulemuse põhjuseks on tõenäoliselt puudulik proovi kogus või valede testimisprotseduuride kasutamine. Vaadake protsess üle ja viige test läbi uute vahenditega. Probleemi püsimisel lõpetage testimiskomplekti kasutamine koheselt ja võtke meiega ühendust. *MÄRKUS: Punase joone intensiivsus testalal (T) sõltub proovis sisalduva ctni kontsentratsioonist. Seetõttu tuleks mistahes punakat tooni joont testalas (T) lugeda positiivseks tulemuseks. 11. Kvaliteedikontroll NADAL Troponin I Test kasutab sisseehitatud kontrollmeetmeid. Kontrollalale (C) ilmuv punane joon toimib testisisese kontrollmeetnena. See kinnitab vajaliku proovikoguse kasutamist ja kromatograafia toimumist. NADAL Troponin I Test pole veel varustatud kontrollstandarditega, seetõttu soovitame kinnitada testi toimimist ja korrektsete testimisprotseduuride kasutamist positiviivse ja negatiivse proovi testimisega enne edasisi proseduure. 12. Piirangud NADAL Troponin I Testi kasutatakse professionaalsel otstarbel in vitro diagnostikas. Seda tuleks kasutada ainult troponiin I tuvastamiseks täisveres, seerumis plasmas. NADAL Troponin I Test võimaldab ainult kvalitatiivset ctni tuvastamist; kvantitatiivseid andmeid pole antud testi abil võimalik saada. NADAL Troponin I Test näitab ainult kardiaalse troponiin I kvalitatiivset kohalolu proovis ja see ei tohiks olla ainsaks kriteeriumiks südamelihase infarkti diagnoosimisel. -Kui kliinilised sümptomid jäävad püsima ka pärast negatiivse testitulemuse saamist, tuleks läbi viia täiendavad kliinilised uuringud. Analüüsi referentspiir on 1.0 ng ctni/ml proovi kohta. Isegi negatiivsetestitulemuse korral ei saa ctni olemasolu täielikult välistada, kuna valgu kontsentratsioon võib olla tuvastatavast miinimumist madalam. Pidage meeles, et ctnl kontsentratsioon tõuseb tavaliselt mõni tund pärast valu ilmnemist. Liiga varakult testides võib ctni kontsenratsioon olla tuvastamiseks veel liiga madal. Seetõttu ei välista negatiivsed testittulemused südamelihase infarkti võimalust. -Levinud standardmaterjalide heterogeensuse tõttu varieerub analüüsi tundlikkus sõltuvalt standarditest. Sellegipoolest on alati saavutatav tundlikkus kontsentratsioonis 1 ng/ml. Test ei tuvasta kontsentratsioone, mis jäävad alla 0.5 ng/ml. 4

Analüütiline tundlikkus Analüüsi referentspiir on 1.0 ng ctni/ml proovi kohta. Miinimumtundlikkuse regulaarseks kontrollimiseks kasutatakse Hytest standardmaterjale (vaba ctni). Pidage meeles, et levinud standardmaterjalide heterogeensuse tõttu varieerub analüüsi tundlikkus sõltuvalt standarditest. Uuring, kus testi võrreldi teise juhtiva tootja ELis müügiks sertifitseeritud testia, oli selle täpsuseks kasutatud proovide analüüsimisel >99%. Mõlemate analüüside puhul olid proovid, mis ei sisaldanud ctni-e püsivalt negatiivsed ja tuvastamismiinimumist kõrgema ctni kontsentratsiooniga testid positiivsed. Partiide võrdlemine ja partiisisene kontrollimine Analüüsi partiide vaheline ja partiisisene erinevus määrati kindlaks kolme sõltumatu partii abil, mis sisaldasid ctni-e kontsentratsioonis 0 ng/ml, 5 ng/ml, 10 ng/ml, 20 ng/ml ja 40 ng/ml ja mida kontrolliti 10x kordustäpsusega. Proovide testtulemused olid korrektsed enam kui 99% puhul testide koguhulgast. Korduvus Analüüsi korduvus määratleti kolme sõltumatu testi abil, mis kasutasid samu näidiseid: ctni kontsentratsioonis 0 ng/ml, 5 ng/ml, 10 ng/ml, 20 ng/ml ja 40 ng/ml. Kolme erinevat NADAL Troponin I Test partiid uuriti nende proovide abil kolm kuud. Proovide testtulemused olid korrektsed enam kui 99% puhul testide koguhulgast. Ristreageerimine Seerumeid, mis sisaldasid kindlas koguses ctni-antigeeni testiti 10,000 ng/ml luustikulise troponiin I, 2,000 ng/ml troponiin T ja 20,000 ng/ml kardiaalse müosiiniga. Ristreageerivust ei täheldatud. See näitab, et NADAL Troponin I Test on kõrgspetsiifiline troponiin I (ctni) suhtes. Näidised, mis sisaldasid 110 μg/ml inimese albumiini, 6 mg/ml bilirubiini, 1 mg/ml hemoglobiini, 100 g/ml kolesterooli ja 10 mg/ml triglütseriide, ei mõjutanud testitulemusi märkimisväärselt. Järgnevas tabelis on toodud ravimid, mida testiti NADAL Troponin I Test analüüsi abil. Ravimikontsentratsioon 50 μg/ml ei mõjutanud testitulemusi märkimisväärselt. Tabel ravimitega ja referentsid. Acetaminophen Captopril Hydrochloride Oxazepam Acetylsalicylic acid Chloramphenicol Furosemide Pentoxifylline Anisodamine Chlordiazepoxide Hydrochlorothiazi de Ascorbic acid Cilazapril Isosorbide Mononitrate Phenobarbital Chinin Atenolol Diclofenac Ramipril Atorvastatin Digoxin Labetalol DL-Tyrosine Calcium Erythromycin Metoprolol Tartrate Trimethoprim Bisoprololfumarat Felodipine Moracizine Verapamil e Caffeine Flunarizine Nifedipine 5

14. References 1. Adams, et al. Biochemical markers of myocardial injury, Immunoassay Circulation 88: 750-763 (1993). 2. Mehegan JP, Tobacman LS, Cooperative interaction between troponin molecules bound to the cardiac thin filament. J. Biol. Chem. 266:966 (1991) 3. Adams, et al. Diagnosis of Perioperative myocardial infarction with measurements of cardiac troponin I. N.Eng.J. Med 330:670 (1994). 4. Hossein-Nia M, et al. Cardiac troponin / release in heart transplantation. Ann.Thorac. Surg. 61 : 227 (1996). 5. Joint European Society of Cardiology/American College of Cardiology: J.Am. Coll. Cardio., 36(3), Myocardial Infarction Redefined, 2000. Rev. 2, 2012-11-26 SS/AO Tootja: nal von minden GmbH Carl-Zeiss-Strasse 12 47445 Moers Saksamaa info@nalvonminden.com www.nal-vonminden.com 6 Esindusõigus Eestis: Selfdiagnostics OÜ, Pärnu mnt. 27-1, 10141 Tallinn. Tel. 6604742 või (372)52 92394. info@selfdiagnostics.eu. E-ostukeskond: www.tervisetestid.ee 6