مقدمه چکیده محمدرضا نژاد مقدم* دکتر سیدمحمدحسین مدرسی** دکتر محمد باباشمسی*** دکتر محمود چمنخواه***

Μέγεθος: px
Εμφάνιση ξεκινά από τη σελίδα:

Download "مقدمه چکیده محمدرضا نژاد مقدم* دکتر سیدمحمدحسین مدرسی** دکتر محمد باباشمسی*** دکتر محمود چمنخواه***"

Transcript

1 مقاله اصلی مقاله اصلی (Original Article) پژوهش درپزشکی (مجله پژوهشی دانشکده پزشکی) دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی درمانی شهید بهشتی دوره 30 شماره 3 پاییز 1385 صفحات 245 تا 252 استرپتوکیناز: استخراج کلونسازی و بیان بالای پروتي ین نوترکیب فعال با رویکرد تسهیل در فرآیند خالصسازی محمدرضا نژاد مقدم* دکتر سیدمحمدحسین مدرسی** دکتر محمد باباشمسی*** دکتر محمود چمنخواه*** * مرکز تحقیقات نانوتکنولوژی زیستی پژوهشکده فنآوریهای نوین علوم پزشکی جهاد دانشگاهی ابن سینا تهران ** مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی تولیدمثل پژوهشکده فنآوریهای نوین علوم پزشکی جهاد دانشگاهی ابن سینا تهران *** مرکز تحقیقات آنتیبادی منوکلونال پژوهشکده فنآوریهای نوین علوم پزشکی جهاد دانشگاهی ابن سینا تهران چکیده سابقه و هدف: استرپتوکیناز به عنوان شناختهشدهترین داروی فیبرینولیتیک مدت مدیدی است در درمان سکته قلبی استفاده میشود. ویژگیهای ساختاری ساده این پروتي ین زمینه لازم برای دستیابی به انواع نوترکیب آن را فراهم ساخته است. هدف از این تحقیق تهیه سوش استرپتوکوک equisimilis H46A (پربازده از نظر تولید استرپتوکیناز) برای اولین بار در ایران بود تا پس از استخراج DNA ژن استرپتوکیناز بگونهای تکثیر شود که امکان کلونسازی آن در حاملهای متعدد بوجود آید. روش بررسی: پس از استخراج DNA ژنومی ژن استرپتوکیناز از دو ناحیه با استفاده از دو پرایمر بالادست و یک پرایمر پاییندست ضمن در نظر گرفتن یک جایگاه آنزیم برشدهنده معمول برای دو سر محصولات (کل 1323 bp ORF و قسمت مربوط به پروتي ین بالغ 1245) bp تکثیر شد و در حامل pgex-4t-2 تحت پروموتور قوی tac و قابلیت بیان بالا کلون شد. پلاسمید نوترکیب حاصل بوسیله عملیات هضم دو طرفه و تعیین توالی تا یید و در اشریشیاکلی سویه plyss ( BL21(DE3 ترانسفورم شد. میزان بیان و فعالیت استرپتوکیناز نوترکیب مربوط به کلون واجد قطعه 1245bp با استفاده از دانسیتومتر لیزری و تست اختصاصی با سوبسترای S2251 در مقایسه با یک نمونه استرپتوکیناز خارجی مورد ارزیابی قرار گرفت. یافتهها: استفاده از یک آنزیم برشدهنده برای دو سر قطعه ژن کلونشدن آنرا در تعداد زیادی از حاملهای بیانی امکانپذیر ساخت. میزان بیان پروتي ین نوترکیب به بیش از %45 کل پروتي ینهای میزبان موفقیت در کلونسازی را تا یید کرد. وجود دم اتصالی گلوتاتیون S ترانسفراز( GST ) مانع فعالیت استرپتوکیناز نشد و مقدار آن بدون بهینهسازی و تخلیص شرایط کشت بیش از 15000u/mlاز کشت ثبت شد. نتیجهگیری: استفاده از حامل pgex-4t-2 ضمن تولید استرپتوکیناز نوترکیب فعال و با بازدهی فراوان دم GST را نیز به ابتدای آمینی آن اضافه میکند که میتوان از آن برای تخلیص یک مرحلهای و آسان با استفاده از لیگاند گلوتاتیون سود برد. واژگان کلیدی: pgex-4t-2 استرپتوکیناز کلونسازی پروتي ین نوترکیب تخلیص. 1 مقدمه ژن استرپتوکیناز (skc) سوش S.equisimilis H46A بوسیله Malke و همکارانش در سال 1985 تعیین توالی شد آدرس نویسنده مسي ول: تهران پژوهشکده فنآوریهای نوین علوم پزشکی جهاد دانشگاهی ابن سینا مرکز تحقیقات آنتیبادی منوکلونال دکتر محمد باباشمسی babashams@avesina.ac.ir) ( تاریخ دریافت مقاله: 1384/8/2 تاریخ پذیرش مقاله: 1385/5/28 (1). در سال 1995 نحوه کنترل نسخهبرداری این ژن مورد مطالعه قرار گرفت (2) و در سال 1996 فعالیت کمپلکس پروموتوری آن آنالیز شد (3). این ژن سه نوع پلیپپتید تک زنجیرهای با وزنهای و 47 کیلودالتون را بیان میکند. نوع 47 کیلودالتون آن در فعالسازی پلاسمینوژن بیشترین نقش را دارد و همیشه مورد هدف بوده است. این پروتي ین بیش از 414 اسید آمینه دارد (5 4) و حداکثر فعالیت آن در

2 246/ مجله پژوهش در پزشکی استرپتوکیناز نوترکیب PH حدود 7/5 است همچنین PH ایزوالکتریک آن 4/7 میباشد (6). این پروتي ین Cysteine Cystine فسفر کربوهیدراتهای کونژوگه و چربی ندارد و قسمت N ترمینال آن همواره بدون تاخوردگی است (7) البته استرپتوکیناز تولیدی درگروههای استرپتوکوکی مختلف ساختار بسیار متفاوتی دارد (8). مدت مدیدی است که این پروتي ین به عنوان شناخته شدهترین داروی فیبرینولیتیک بر علیه بیماریهای ناشی از ایجاد لختههای خونی پرآکنده در سیستم گردش خون و سکتههای قلبی استفاده میشود (9). جدیدترین تحقیقات درباره ساختار استرپتوکیناز نشان میدهد ناحیه Asp41-His48 استرپتوکیناز در اتصال به پلاسمینوژن ناحیه C-terminal در شناسایی و فعالسازی پلاسمینوژن و ناحیه مربوط به اسیدآمینههای در فعالسازی پلاسمینوژن نقش دارد (4). استرپتوکیناز توانایی فعالسازی پلاسمینوژن آزاد در خون و هم پلاسمینوژن متصل به فیبرین را دارا است. مطالعات مقایسهای نشان میدهند که استرپتوکیناز نه تنها نسبت به سایر داروهای ترمبولیتیک مثل یوروکیناز( Urokinase ) و فعالکننده پلاسمینوژن بافتی( t-pa ) امتیاز کمتری ندارد بلکه پایین بودن هزینه تولید این دارو آن را از سایر انواع متمایز کرده است( ). ویژگیهای ساختاری ساده در این مولکول از جمله وجود نواحی عملکردی مستقل از هم نداشتن اتصالات دی سولفید و گروههای پروستتیک و مناطق اتصال به کاتیونهای دو ظرفیتی بطور کلی نداشتن ساختمان فضاي ی سوم زمینه لازم برای دستیابی به انواع نوترکیب استرپتوکیناز را فراهم میسازد. تاکنون در مطالعات کلونسازی ژن استرپتوکیناز از حاملهای بیانی چون باکتریوفاژλL47 (12) حاملهای خانواده pbr322 یا pmf5 (16) pekg-3 (15)pQE-30 (14)pKK223-3 (13)pSK100 و (17)pHT همچنین میزبانهای باسیلوس سوبتیلیس WB600) (18)(B. subtilis استرپتوکوکوس سنگوي یس( 5 ) اشریشیاکلی( ) و مخمر( ) استفاده شده است. براساس تجربیات قبلی در تولید استرپتوکیناز غیرنوترکیب( 19 ) تولید اندک سم تبزا در استرپتوکوکهای بتاهمولیتیک گروه C و همچنین موفقیتهای حاصل در تولید این پروتي ین نوترکیب از میزبان (4)E.coli ما برای استخراج ژن استرپتوکیناز از سوش S.equisimilisH46A و ازE.coli بعنوان میزبان کلونسازی و همچنین از حامل جدیدی با ویژگی تسهیل در عملیات تخلیص استرپتوکیناز نوترکیب اتصالی استفاده کردیم. مواد و روشها سوش S.equisimilisH46A ATCC از بانک میکروبی آمریکا سوشهای مهندسی شده DH5α و BL21(DE3) و همچنین پرایمرها و آنزیمهای محدودکننده BamHI) HindIII و (EcoRI از شرکت سیناژن ایران کیت RNaseA آنزیم آلکالین فسفاتاز لیزوزیم PCR و سایز مارکر از شرکت Roche آلمان IPTG از شرکت Fermentase آلمان سوبسترای S2251 از شرکت Chromogenix آلمان و تمامی نمکهای مورد استفاده از شرکت Merck آلمان خریداری شدند. تعیین توالی محصول PCR ونتیجه کلونسازی در مرکز ملیتحقیقاتکانادا (National Research Council,Canada:NRC) و بررسی نقشه آنزیمی( enzymes ( Restriction ژن استرپتوکیناز در سایت Webcutter 2.0 انجام شد. استخراج DNA ژنومی از سوش S.equisimilisH46A با روش لیز سلولها (20) و اصلاحات انجام شده توسط Gase و همکارانش انجام شد. واکنش زنجیرهای پلیمراز( PCR ): با دو پرایمربالادست STK1:5 GCTGGATCCATGAAAAATTACTTATCTTTTGG3 از ناحیه کدون شروع (برای تکثیر قطعه 1323 جفت باز) و CGCGGATCCATTGCTGGACCTGAG3 4SKf:5 از ناحیه مربوط به استرپتوکیناز بالغ (برای تکثیر قطعه 1245 جفت باز) و تک پرایمر پاییندست STK-2:5 GCTGGATCCTTATTTGTCGTTAGGGTTATC3 انجام شد. مقادیر مورد استفاده در واکنش شامل: 2/5 میکرولیتر 1/5 10XPCR buffer میلیمولار MgCL میکرومولار از هر کدام dntp 0/6 میکرومولار از هر دو پرایمر 1 واحد آنزیم و 100 نانوگرم از DNA الگو در حجم نهایی 25 میکرولیتر بود. از برنامه 30 ثانیه در 30 94ºC ثانیه در 50ºC و 45 ثانیه در 72ºC طی 29 دور استفاده شد (1). محصولات PCR با استفاده از سایز مارکر و عملیات هضم با آنزیم HindIII ارزیابی و تا یید شدند ( 21 )(شکل 1 و 2 ). ش کل 1 - الکتروف ورز مح صولات PCR در ژل آگ ارز: س تونهای 1 و 2 محصولات 1245bp و ستونهای 3 و 4 محصولات 1323bp

3 دوره 30 شماره 3 پاییز 85 محمدرضا نژاد مقدم و همکاران / 247 حدود 502bp را ایجاد کند) انجام شد (شکل 4 ). در نهایت با عمل تعیین توالی که توسط مرکز تحقیقات ملی کانادا (NRC) انجام شد صحت کامل توالی ژن استرپتوکیناز کلون شده و قرارگیری صحیح آن در جایگاه خواندن frame) (Reading مورد تایید قرار گرفت (21). پس از تا یید کلونسازی حامل تکثیر حامل: حامل pgex-4t-2 پس از ترانسفورم کردن (21) در DH5α مستعد (Competent) با استفاده از روش لیز قلیایی (20) و دو اصلاح ذیل تکثیرشد: 3 میلیلیتر کشت شبانه (overnight) را پس از سانتریفیوژ و دور ریختن 1/5 میلیلیتر مایع رویی به حجم 1/5 میلیلیتر رساندیم (بهمنظور امکانپذیری آزمایش در میکروتیوب). همچنین پس از اضافه کردن بافر لیزکننده I به آن 10 میکرولیتر آنزیم (1mg/ml) اضافه کردیم (با هدف حذف RNaseA RNA و همچنین حذف خودبخودی آنزیم در حین اضافه کردن محلولهای بعدی) (21). کلونسازی. هضم حامل و محصول PCR با تک آنزیم BamH I انجام شد. برای بالا بردن کارایی کلونسازی و جلوگیری از خود اتصالی حامل برداشتن فسفات از انتهای 5 آن با استفاده از آلکالین فسفاتاز( CIP ) انجام شد (20 21). تمام مراحل خالصسازی قطعه ژن (insert) و حامل به روش الکتروفورز و استخراج از ژل آگاروز انجام گردید. در نهایت قطعه مورد نظر با فرآیند Ligation در حامل pgex-4t-2 کلون شد. پس از ترانسفرم این مخلوط اتصالی( mix (Ligation در سلول DH5α و کشت آن روی محیط L.B آگار حاوی آنتیبیوتیک آمپیسیلین کلنیهای رشدیافته بهعنوان کلونهای واجد حامل و احتمالا واجد قطعه ژن انتخاب شدند. برای اطمینان از وارد شدن قطعه ژن در حامل این کلنیها بهصورت تصادفی انتخاب و پس از انجام عمل استخراج پلاسمید توسط الکتروفورز ژل آگاروز بررسی شدند (شکل 3 ). تا یید قرارگیری صحیح قطعه ژنی با توجه به نقشه تي وریک حامل واجد قطعه ژنی بهوسیله آزمایش هضم یکبار با آنزیمBamHI (که بایستی قطعه دخولی را از پلاسمید جدا کند) و بار دوم با آنزیم HindIII و EcoRI (بایستی توالی نوکلي وتیدی pgex-4t-2 واجد قطعه 1323bp و 1245bp از ژن استرپتوکیناز به ترتیب pgex-1.3-4t-2 و pgex-1.2-4t-2 لقب گرفتند. آنگاه حامل pgex-1.2-4t-2 در میزبانهای BF- dcm ompt hsds (rb- mb-) با ژنوتیپ BL21 (DE3)22 Lambda(DE3) BL21(DE3)plysS' gal با ژنوتیپ BF- dcm ompt hsds (rb- mb-) gal Camr] Lambda(DE3)[plysS و BL21(DE3)codon plus با ژنوتیپ (DE3) BF- dcm+ ompt hsds (rb- mb-)tetr gal enda Hte[argU prol CamR]extra copies of trna genes inbl21- codon plus-rp ترانسفورم شد. شکل 2 - تا یید محصولات PCR توسط هضم با آنزیم :HindIII ستون 1 و 3 به ترتیب محصول 1323bp و 1245bp و ستونهای 2 و 4 نتیجه هضم این محصول توسط آنزیم HindIII را نشان می دهد شکل 3 - غربالگری کلنیهای رشدیافته در محیط LB آگار واجد آمپی سیلین بعد از ترانسفورماسیون مخلوط اتصالی ) + pgex-4t-2 :( insert ستون 1 حامل pgex-4t-2 (بدون قطعه ژنی) و ستون های 3 2 و pgex-4t-2 4 واجد قطعه ژنی( احتمالا pgex-1.2-4t-2 و.( pgex-1.3-4t-2 شکل 4 - تا یید حضور و صحت قرارگیری قطعه ژن توسط آزمایش هضم دوطرفه: ستون 1 و 4 واجد حامل pgex-1.2-4t-2 وpGEX-1.3-4T-2 در صورت قرارگیری صحیح قطعات 1323bp و 1245bp درون پلاسمید pgex-4t-2 محصول آزمایش برش با آنزیم BamHI خروج قطعه ژنی 1323bp و 1245bp خواه د ب ود(ستون 2 و 5) و نتیج ه ه ضم با آنزیمهای HindIII و EcoRI یک قطعه 502bp خواهد بود (ستون 3 و 6 ).

4 248/ مجله پژوهش در پزشکی ارزیابی بیان پروتي ین نوترکیب با این روش ساده انجام شد: 0/5 میلیلیتر از کشت شبانه باکتری BL21(DE3) واجد پلاسمید نوترکیب را در 5 میلیلیتر محیط LB جدید (حاوی 100µg/ml آمپیسیلین) کشت دادیم و پس از 2 ساعت انکوباسیون در دمای 37ºC و هوادهی با دور 250rpm جذب نوری محیط کشت در طول موج 600nm به حدود 0/6 رسید در این زمان 0/1 میلیمولار IPTG اضافه کردیم تا عمل القاء صورت گیرد سپس در زمانهای 2 1 و 4 ساعت هر بار 1 میلیلیتر از کشت را برداشته وارد میکروتیوبهای جداگانه کردیم. آنگاه این میکروتیوبها با دور 8000rpm به مدت 3 دقیقه سانتریفیوژ شدند. به رسوب حاصله 100 میکرولیتر از 1X-SDS-PAGE Sample buffer اضافه کرده 5 دقیقه شدیدا ورتکس شدند سپس نمونهها را به مدت 5 دقیقه در آب جوش قرار داده و بعد از سانتریفیوژ با دور بالا از مایع رویی آنها برای انجام الکتروفورز( SDS-PAGE ) و بررسی وضعیت بیان پروتي ین در ساعات ذکر شده استفاده شد (21) (شکل 5 ). شکل 5- القاء کلون واجد :pgex-1.2-4t-2 ستون 1 کلون واجد pgex-4t-2 (کنترل منفی). ستونهای 2 تا BL21(DE3) 5 واجد pgex-1.2-4t-2 به ترتیب بعد از القاء با IPTG در زمانهای و 6 ساعت استرپتوکیناز نوترکیب هموژنایزر با دور 22000rpm بهمدت 4 دقیقه تخریب شد آنگاه با انجام میکروفیوژ در دور بالا محلول شفافی بدست آمد (20 21). این محلول شفاف از رسوب جدا شد و به این ترتیب برای آزمایش ارزیابی فعالیت پروتي ین مورد استفاده قرار گرفت: در میکروپلیتالایزا به 15 میکرولیترازمحلول شفافشده 1/5 میکرولیتر PH=7.4 Tris.HCl و 30 میکرولیتر (0.2mg/ml) plasminogen (تهیه شده در این آزمایشگاه) اضافه کرده 15 دقیقه در 37ºC انکوبه کردیم. پس از این زمان به آن 75 میکرولیتر سوب سترای کروموژنیک S2251(5mg/ml) اضافه کرده و بعد از 10 دقیقه نگهداری در 37ºC واکنش را توسط 10 میکرولیتر اسید استیک 4 نرمال متوقف کردیم. در این زمان جذب نوری واکنش در طول موج 405 نانومتر با الایزا ریدر در مقایسه با استرپتوکیناز استاندارد قراي ت شد و همچنین احتمال ترشح پروتي ین نوترکیب بصورت خارج سلولی با نمونهبرداری 100 میکرولیتر از محیط کشت و به روش ذکر شده فوق مورد ارزیابی قرار گرفت. برای تعیین دقیق وزن مولکولی باند منسوب به پروتي ین نوترکیب( GST-SKC ) در SDS-PAGE بدین صورت عمل شد: به کمک خطکش فاصله طی شده از چاهک (Rf) برای شش باند پروتي ینی مارکر به دست آمد. با توجه به رابطه معکوس بین Rf و وزن مولکولی پروتي ین منحنی مربوط به صورت نیمه لگاریتمی رسم شد. پس از رسم منحنی مربوطه با مشخص کردن Rf مربوط به باند منسوب به GST-SKC بر روی محور افقی نقطه معادل آن بر محور عمودی (وزن مولکولی) پیدا شد (شکل 7). 8 آزمایش فوق برای دو سویه میزبانی BL21(DE3)plysS و BL21(DE3)codonplus نیز جهت مقایسه میزان بیان پروتي ین نوترکیب انجام شد (شکل 6 ). تعیین فعالیت پروتي ین نوترکیب: از 3 میلیلیترکشت BL21(DE3)plysS پس از 4 ساعت القاء با IPTG به روش ذیل لیز سلولی تهیه شد: پس از سانتریفیوژ محیط کشت به رسوب حاصل 1 میلیلیتر بافرلیزکننده PH=8) 1mM EDTA 50mM Tris.Cl (100NaCl mm 0/5 میکرولیتر( PMF(0.2M و 10/4 میکرولیتر Lysozyme(10mg/ml) اضافه شد. پس از 5 دقیقه انکوباسیون در 37ºC دیواره باکتریهای این مخلوط توسط ش کل 6 - تران سفورم میزبانه ای اشری شیاکلی DH5α BL21(DE3) BL21(DE3)plysS و BL21(DE3)Codonplus با ساختار تا یید شده پلاسمید نوترکیب pgex-1.2-4t-2 و مقایسه Productivity در این سه میزبان: ستونهای 1 و 2 3 و 4 5 و 6 7 و به ترتیب قبل و بعد از القاء سویههایDH5α BL21(DE3) BL21(DE3)plysS و BL21(DE3)Codonplus میباشند

5 دوره 30 شماره 3 پاییز 85 محمدرضا نژاد مقدم و همکاران / 249 رسیدن به کدون ختم احتمالا ترجمه میشوند وزن پروتي ین نوترکیب GST-SKC حدود 73 کیلودالتون پیشبینی شد که این با منحنی نیمهلگاریتمی بر اساس RF و وزن مولکولی پروتي ین مطابقت دارد (شکل 7). بیان استرپتوکیناز نوترکیب اتصالی بوسیله SDS PAGE (شکل 6 ) و همچنین دانسیتومتر لیزری بیش از %45 کل پروتي ینهای سلول میزبان ارزیابی شد. این میزان در سویه شکل 7- تعیین دقیق وزن مولکولی باند منسوب به پروتي ین نوترکیب (GST-SKC) درSDS-PAGE : محور عمودی نمایانگر وزن مولکولی پروتي ین با تقسیمات لگاریتمی و محور افقی نمایانگر فاصله طی شده از چاهک با تقسیمات میلیمتر میباشد. RF باند مربوط به سایز مارکرهای و 28/9 کیلودالتون به ترتیب /5 3 و 60 میلی متر بود. بر این اساس RF باند منسوب به GST-SKC حدود 23 میلیمتر بوده که مختصات آن بر محور وزن مولکولی( MW ( نقطه حدود 73 کیلودالتون را نشان می دهد BL 21 (DE 3 )codon plus کمترین و در سویه )plyss' BL 21 (DE 3 حداکثر میباشد (شکل 6 ). مهمتر اینکه دم اتصالی مربوط بهGST تاثیری در غیر فعال کردن استرپتوکیناز نداشت بطوریکه بدون بهینهسازی شرایط کشت و تخلیص مجموع فعالیت حاصل از 1 میلیلیتر کشت بیش از واحد محاسبه شد. ضمن اینکه در ارزیابی احتمال ترشح این پروتي ین نوترکیب در محیط کشت مشاهده شد که %20 از پروتي ین نوترکیب بصورت خارج سلولی ترشح میشود. یافتهها شرایط بهینه (غلظتهای مختلف یون منیزیم و بافر dntp پرایمر آنزیم پلیمراز DNA الگو و درجه حرارتهای مختلف) برای جداسازی و تکثیر ژن استرپتوکیناز از ژنوم S.equisimilis H46A با استفاده از تکنیک PCR کنترل شد و روش عملی استانداردی با پرایمرهای طراحی شده به دست آمد. طی عملیات کلونسازی نیز لزوم بعضی اصلاحات در روشهای موجود برای کسب نتایج مطلوب لمس شد. الکتروفورز محصولات PCR و آزمایش با آنزیم HindIII که طبق نقشه محصولات را به دو قطعه بزرگتر 747bp) برای محصول 1245bp و 825bp برای محصول (1323bp و قطعه کوچکتر( 498bp ) برش میدهد حاکی از موفقیت در جداسازی و تکثیر ژن استرپتوکیناز (قطعه 1245bp مربوط به ناحیه فعال و قطعه 1323bp باز مربوط به ORF کامل ژن) بود (شکلهای 1 و 2). نتایج آزمایشهای استخراج پلاسمید و الکتروفورز (شکل 3 ) هضم دو طرفه (شکل 4 ) و تعیین توالی موفقیت انجام کلونسازی قطعات 1323bp و 1245bp از ژن استرپتوکیناز را در حامل pgex-4t-2 تا یید مینمایند. با محاسبه تي وریک وزن خالص استرپتوکیناز (47 کیلودالتون) بهعلاوه وزن خالص بحث از استرپتوکوکهای بتاهمولیتیک گروه C که کمترین میزان توکسینهای تبزا را تولید میکنند و کمترین مواد غذایی را نسبت به سوشهای اصلی گروه A مصرف میکنند بهعنوان منبع اصلی ژن استرپتوکیناز یاد میشود (4). به همین دلیل در این تحقیق ژن استرپتوکیناز از این سوش استخراج گردید و برای مراحل کلونسازی استفاده شد. گزارش شده است قسمت N ترمینال مولکول استرپتوکیناز تاثیر چندانی بر فعالیت آن ندارد (7). بنابراین احتمال داده شد که اضافه شدن توالی اسیدآمینهای مربوط به GST به N ترمینال این پروتي ین فعالیت بیولوژیکی آن را از بین نبرد همچنانکه افزایش 6 اسیدآمینه هیستیدینی (15) و نیز دم اتصالی (22) MBP این مطلب را تا یید میکرد. این ویژگی اساس تحقیق ما را در انتخاب حامل pgex-4t-2 تشکیل میدهد. وجود 26 اسید آمینه هیدروفوب بعنوان توالی راهنما در انتهای آمینی مولکول استرپتوکیناز امکان ترشح آن را توسط استرپتوکوکها فراهم میآورد (10) اما بر اساس گزارشات موجود ترشح استرپتوکیناز نوترکیب (r-sk) بیان شده در E.coli حتی در غیاب توالی راهنما نیز میتواند صورت گیرد (14). بر همین اساس ژن skc از ناحیه بعد از توالی راهنما بطول 1245 جفت باز نیز تکثیر شد. (23 GST کیلودالتون) و همچنین وزن مولکولی اسید آمینههای دیگری که در قالب ترجمه پروتي ین تا قبل از

6 250/ مجله پژوهش در پزشکی برخلاف مطالعات مشابه ( ) برای اولین بار طراحی پرایمر و استراتژی PCR با هدف تعبیه سایت شناساي ی BamHI در دو انتهای توالی ژنی تکثیر شده انجام گرفت. این استراتژی کلونسازی محصولات PCR (ژنskc ) را در حاملهای بیانی متعدد امکانپذیر میسازد و سبب میشود قطعه ژن درست بعد از توالی پروتي ینی GST قرار گیرد. با توجه به اینکه آخرین کدون در سمت '3 ژن skc توالی ختم ترجمه (TAA) میباشد انتظار میرود که اسیدآمینه اضافی دیگری در انتهای کربوکسیل پروتي ین قرار نگیرد. ولی در صورتی که به هر دلیل این کدون ختم عمل نکند کدون ختم موجود در حامل (TGA) که بعد از ناحیه MCS قرار گرفته است موجب ختم ترجمه خواهد شد. در این صورت تعداد 12 اسیدآمینه دیگر به انتهای کربوکسیل پروتي ین افزوده خواهد شد. به این ترتیب با دانستن وزن مولکولی اسید آمینههای اضافه شده به مولکول و جمع آنها با وزن مولکولی پروتي ین (47 SKC کیلو دالتون) میتوان وزن مولکولی پروتي ین نوترکیب (GST-SK) را حداقل 73 و حداکثر 74 کیلو دالتون پیشبینی کرد. در روش غربالگری برخلاف روش شناسایی کلونهای صحیح به روش (20 17) α-complementation مستقیما از این ویژگی که باکتریهای دریافتکننده ساختار pgex-4t-2 به آنتیبیوتیک آمپیسیلین مقاوم خواهند شد استفاده گردید این امر سبب صرفه جویی در زمان میشود. در مطالعات گذشته بیان پروتي ین r-sk در باکتری E.coli تحت اثر پروموتورهای مختلف به میزان %52 (12) و %25 (16) از کل پروتي ینهای سلول گزارش شده است. در این تحقیق نیز با استفاده از حامل pgex-4t-2 و پروموتور tac میزان بیان پروتي ین نوترکیب بدون بهینهسازی شرایط به حدود %45 از کل پروتي ینهای باکتری رسید. بطوریکه میزان فعالیت آن بیش از واحد در هر میلیلیتر از محیط کشت در مقایسه با مطالعات مشابه (23) و استرپتوکیناز استاندارد مطلوب میباشد. ضمنا آزمایش بیان در محیط مایع LB انجام گرفت در حالیکه با غنی کردن محیط کشت و در نتیجه تقویت روندهای متابولیکی باکتری افزایش میزان پروتي ین نوترکیب حتمی خواهد بود (4). در این مطالعه حضور IPTG به میزان 0/1 میلیمولار باعث روشن شدن اپرون و شروع سنتز mrna شد. این در حالی است که در موارد دیگر برای بیان پروتي ینهای نوترکیب غلظتهای بیشتری از IPTG بعنوان غلظت مناسب معرفی شدهاند (24 25). میزبانهای بیانی با داشتن عناصر تنظیمی مناسب و یا موتاسیون در پروتي ازهای خود امکان بیان بیشتر پروتي ین را استرپتوکیناز نوترکیب فرآهم میآورند. در تحقیق حاضر از چند گونه میزبان E.coli که از مشتقات ) 3 BL 21 (DE میباشند به منظور مقایسه بیان پروتي ین نوترکیب استفاده کردیم. همانطور که در شکل 6 مشاهده میشود میزان بیان استرپتوکیناز نوترکیب (GST-SKC) در این سه گونه اختلاف معنیداری را نشان میدهد بطوریکه میزان بیان درسویه BL 21 (DE 3 )codon plus کمترین و در سویه )plyss' BL 21 (DE 3 حداکثر میباشد. بنابراین دلیل بیان بیشتر در سویه )plyss' BL 21 (DE 3 به وجود موتاسیونهای پروتي ازی به نفع استرپتوکیناز بر میگردد. با وجود امکان تولید پروتي ین نوترکیب از حاملها و میزبانهای گوناگون هنوز هم تخلیص پروتي ینهای نوترکیب بعنوان یک مسي له مهم مطرح است. به همین دلیل مطالعات زیادی در زمینه تخلیص استرپتوکیناز صورت گرفته است. به نظر میرسد پیشتازترین روش استفاده از لیگاند پلاسمینوژن باشد که در بیشتر مطالعات قبلی مورد استفاده بوده است ( ). این روش مستلزم مراحل متعدد استفاده از ستون تعویض یونی دو مرحله رسوبگیری کاهش حجم نمونه تهیه ستون پلاسمینوژن-سفارز 4B و آسیلاسیون پلاسمینوژن و استفاده از بافرهای متعدد است. اما کلون نمودن ژن استرپتوکیناز در حامل pgex-4t-2 استرپتوکیناز نوترکیبی واجد دنباله اتصالی گلوتاتیون اس ترانسفراز را حاصل میآورد که میتوان آنرا بوسیله ستون کروماتوگرافی تمایلی با لیگاند گلوتاتیون تخلیص کرد (20 24). در این روش میتوان از امتیازات یک مرحلهای شدن عمل تخلیص کاهش میزان واسرشتگی عدم تغییر ph فیزیولوژیکی پروتي ین عدم اضافه کردن خاصیت آنتیژنیک جدید و کاهش تعداد بافرها و محلولهای مرحله تخلیص سود برد. پروتي ین ترومبین قادر به شناسایی جایگاه اسیدآمینهای بین SKC و GST میباشد و در صورت نیاز میتوان با استفاده از این جایگاه دنباله GST را از SKC جدا کرد (24). تولید استرپتوکیناز نوترکیب با بازدهی فراوان و قابلیت تخلیص آسان در مقیاس صنعتی میتواند گامی موثر در جهت تولید ماده اولیه این داروی ژنریک در کشور باشد که سالانه بیش از یک میلیون دلار هزینه صرف خرید 50 هزار آمپول مصرفی آن میشود (28). از فواي د دیگر قابل دسترس بودن کلون حاصل امکان مطالعات دیگر همچون استفاده از دیگر حاملها سلولهای بیانی جهشزایی کاهش ایمونوژنیسیته و بهینهسازی شرایط تولید (فاکتورهای موثر بر بیان پروتي ین مانند دما نوع محیط کشت غلظت القاءکننده انواع القاء

7 دوره 30 شماره 3 پاییز 85 محمدرضا نژاد مقدم و همکاران / 251 کننده زمان القاء مدت زمان القاء و پیدا کردن فاز لگاریتمی رشد باکتری در هنگام القاء) است. تشکر و قدردانی مقاله حاضر بخشی از دو پروژه تحقیقاتی سازمان مدیریت و برنامهریزی کشور مصوب شورای پژوهشهای علمی کشور و معاونت پژوهشی جهاد دانشگاهی میباشد. بدین وسیله از سازمانهای یاد شده بخاطر حمایت مالی و همچنین آقای مهدی ملکی دانشجوی کارشناسی ارشد بیوشیمی بخاطر همکاری در قسمت ارزیابی فعالیت پروتي ین نوترکیب قدردانی میگردد. REFERENCES 1. Nejadmoqaddam MR, Modaresi MH, editors. Topic parameters for PCR optimization. 1st edition. Acecr publication, Gase K, Ellinger T, Malke H. Complex transcriptional control of the streptokinase gene of streptococcus equisimilis H46A. Mol Gen Genet 1995;247(6): Gase K, Gase A, Schirmer H, Malke H. Cloning, sequencing and functional overexpression of the streptococcus equisimilish46a gapc gene encoding a glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase that also functions as a plasmin(ogen)-binding protein. Purification and biochemical characterization of the protein. Eur J Biochem 1996;239(1): Banerjee A, Yusuf Chisti UC. Streptokinase; a clinically useful thrombolytic agent. Biotech Adv 2004;22: Malke H, Gerlach D, Kohler W, Ferretti JJ. Expression of a streptokinase gene from Streptococcus equisimilis in Streptococcus sanguis. Mol Gen Genet 1984;196(2): De Renzo EC, Siiteri PK, Hutchings BL, Bell PH. Preparation and certain properties of highly purified streptokinase. J Biol Chem 1967;242(3): Tueten AG, Broadhurst RW, Smith AGR, Dobson MC. Characterization of structural and folding properties of streptokinase by N.M.R. spectroscopy. Biochem J 1993;290: Huang T, Malke H, Ferretti J. Heterogeneity of the streptokinase gene in group A streptococci. Infect Immun 1989;57(2): Karen GRN, Gold M. Acute coronary syndromes: New developments in pharmacological treatment strategies. Crit Care Nurse 2000;20: Campbell T, editor. Thrombolysis following acute myocardial infarction. An initiative of NSW Clinical Pharmacologists & Pharmacists Funded by the NSW Department of Health. 2 nd edition Kumar R, Singh J. Expression and secretion of a prokaryotic streptokinase without glycosilation and degradation. Schizosaccharomyces Pombe Wiley InterScience 2004;21(16): Malke H, Ferretti JJ. Streptokinase: cloning, expression and excretion by Escherichia coli. Proc Natl Acad Sci USA 1985;81: Ko JH, Park DK, Kim IC, Lee SH, Byun SM. High-level expression and secretion of streptokinase in Escherichia coli. Biotech Lett 1995;17: Avilan L, Yarzabal A, Jurgensen C, Bastidas M, Cruz J, Puig J. Cloning, expression and purification of recombinant streptokinase: partial characterization of the protein expressed in Escherichia coli. Bra J Med Biol Res 1997;30(12): Caballero AR, Lottenberg R, Johnston KH. Cloning, expression, sequence analysis, and characterization of streptokinases by porcine and Equine Isolates of Streptococcus equisimilis. Infect Immun 1999;67(12): Estrada MP, Hernandez L, Perez A, Rodriguez P, Fuente de la, Herrera L. High-level expression of streptokinase in E.coli. Biotechnology 1992;10: Hagenson MJ, Holden KA, Parker KA, Wood PJ, Stroman DW. Expression of streptokinase in Pichia pastoris yeast. Enzyme Microb Tech 1989;11:

8 252/ مجله پژوهش در پزشکی استرپتوکیناز نوترکیب 18. Wu XC, Ye RQ, Duan YJ, Wong SL. Engineering of plasmin-resistant forms of streptokinase and their production in Bacillus subtilis: streptokinase with longer functional half-life. Appl Environ Microbiol 1998;64(3): رضویان س م ح. استخراج و تخلیص استرپتوکیناز از استرپتوکوکهای بتاهمولیتیک گروه C. پایان نامه کارشناسی ارشد رشته بیوشیمی دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات تهران سال Sambrook J, Russell D, editors. Molecular cloning a laboratory manual. 3 rd edition. CSHL press, نژادمقدم م ر. استخراج کلونسازی و بیان ژن استرپتوکیناز با استفاده از.streptococcus equisimilis H46A پایان نامه کارشناسی ارشد دانشگاه آزاد اسلامی واحد جهرم. 22. Sazonova IY, Houng AK, Chowdhry SA, Robinson BR, Hedstrom L, Reed GL. The mechanism of a bacterial plasminogen activator intermediate between streptokinase and staphylokinase. J Biol Chem 2001;276(16): Makrides SC. Strategies for achieving high-level expression of genes in E.coli. Microbiol Res 1996;60(3): Amersham Biosciences. GST gene fusion system handbook. edition AA, 2004;18: available at: www4.amereshambiosiences.com. 25. Shibui T, Nagharia K. Secretion of a functional Fab fragment in E.coli and the influence of culture conditions. Appl Microbiol Biotech 1992;37(3): Rodriguez P, Hernandez L, Munoz E, Castro A, Fuente JDL, Herrera L. Purification of streptokinase by affinity chromatography on immobilized acylated human plasminogen. Bio Techniques 1992;12(3): م ح نژادمقدم م. تولید و خالص سازی استرپتوکیناز به روش کروماتوگرافی تمایلی حفاظت شده. مجموعه مقالات سومین همایش ملی باباشمسی م رضویان بیوتکنولوژی جمهوری اسلامی ایران سال 1382 جلد 4 صفحات معاونت غذا و دارو وزارت بهداشت درمان و آموزش پزشکی. آمار سال 1378 لیست داروهای وارداتی.

روش محاسبه ی توان منابع جریان و منابع ولتاژ

روش محاسبه ی توان منابع جریان و منابع ولتاژ روش محاسبه ی توان منابع جریان و منابع ولتاژ ابتدا شرح کامل محاسبه ی توان منابع جریان: برای محاسبه ی توان منابع جریان نخست باید ولتاژ این عناصر را بدست آوریم و سپس با استفاده از رابطه ی p = v. i توان این

Διαβάστε περισσότερα

محاسبه ی برآیند بردارها به روش تحلیلی

محاسبه ی برآیند بردارها به روش تحلیلی محاسبه ی برآیند بردارها به روش تحلیلی برای محاسبه ی برآیند بردارها به روش تحلیلی باید توانایی تجزیه ی یک بردار در دو راستا ( محور x ها و محور y ها ) را داشته باشیم. به بردارهای تجزیه شده در راستای محور

Διαβάστε περισσότερα

تصاویر استریوگرافی.

تصاویر استریوگرافی. هب انم خدا تصاویر استریوگرافی تصویر استریوگرافی یک روش ترسیمی است که به وسیله آن ارتباط زاویه ای بین جهات و صفحات بلوری یک کریستال را در یک فضای دو بعدی )صفحه کاغذ( تعیین میکنند. کاربردها بررسی ناهمسانگردی

Διαβάστε περισσότερα

آزمایش 8: تقویت کننده عملیاتی 2

آزمایش 8: تقویت کننده عملیاتی 2 آزمایش 8: تقویت کننده عملیاتی 2 1-8 -مقدمه 1 تقویت کننده عملیاتی (OpAmp) داراي دو یا چند طبقه تقویت کننده تفاضلی است که خروجی- هاي هر طبقه به وروديهاي طبقه دیگر متصل شده است. در انتهاي این تقویت کننده

Διαβάστε περισσότερα

آزمایش 1: پاسخ فرکانسی تقویتکننده امیتر مشترك

آزمایش 1: پاسخ فرکانسی تقویتکننده امیتر مشترك آزمایش : پاسخ فرکانسی تقویتکننده امیتر مشترك -- مقدمه هدف از این آزمایش بدست آوردن فرکانس قطع بالاي تقویتکننده امیتر مشترك بررسی عوامل تاثیرگذار و محدودکننده این پارامتر است. شکل - : مفهوم پهناي باند تقویت

Διαβάστε περισσότερα

ﯽﺳﻮﻃ ﺮﯿﺼﻧ ﻪﺟاﻮﺧ ﯽﺘﻌﻨﺻ هﺎﮕﺸﻧاد

ﯽﺳﻮﻃ ﺮﯿﺼﻧ ﻪﺟاﻮﺧ ﯽﺘﻌﻨﺻ هﺎﮕﺸﻧاد دانشگاه صنعتی خواجه نصیر طوسی دانشکده برق - گروه کنترل آزمایشگاه کنترل سیستمهای خطی گزارش کار نمونه تابستان 383 به نام خدا گزارش کار آزمایش اول عنوان آزمایش: آشنایی با نحوه پیاده سازی الکترونیکی فرایندها

Διαβάστε περισσότερα

TA Cloning Vector (کیت کلونینگ) شماره کاتالوگ (BP-153) این کیت جهت کلونینگ محصولات PCR با انتهاي da overhang '3 مي باشد. این کیت داراي وکتور

TA Cloning Vector (کیت کلونینگ) شماره کاتالوگ (BP-153) این کیت جهت کلونینگ محصولات PCR با انتهاي da overhang '3 مي باشد. این کیت داراي وکتور TA Cloning Vector (کیت کلونینگ) شماره کاتالوگ (BP-153) Component Vector PTZ T4 DNA ligaze 5X ligation Buffer Control Fragment Control 1 Control 2 BP-Medium BP-solution وکتور PTZ خطی باز با انتهای محتویات

Διαβάστε περισσότερα

مفاهیم ولتاژ افت ولتاژ و اختالف پتانسیل

مفاهیم ولتاژ افت ولتاژ و اختالف پتانسیل مفاهیم ولتاژ افت ولتاژ و اختالف پتانسیل شما باید بعد از مطالعه ی این جزوه با مفاهیم ولتاژ افت ولتاژ و اختالف پتانسیل کامال آشنا شوید. VA R VB به نظر شما افت ولتاژ مقاومت R چیست جواب: به مقدار عددی V A

Διαβάστε περισσότερα

مدار معادل تونن و نورتن

مدار معادل تونن و نورتن مدار معادل تونن و نورتن در تمامی دستگاه های صوتی و تصویری اگرچه قطعات الکتریکی زیادی استفاده می شود ( مانند مقاومت سلف خازن دیود ترانزیستور IC ترانس و دهها قطعه ی دیگر...( اما هدف از طراحی چنین مداراتی

Διαβάστε περισσότερα

آزمون مقایسه میانگین های دو جامعه )نمونه های بزرگ(

آزمون مقایسه میانگین های دو جامعه )نمونه های بزرگ( آزمون مقایسه میانگین های دو جامعه )نمونه های بزرگ( فرض کنید جمعیت یک دارای میانگین و انحراف معیار اندازه µ و انحراف معیار σ باشد و جمعیت 2 دارای میانگین µ2 σ2 باشند نمونه های تصادفی مستقل از این دو جامعه

Διαβάστε περισσότερα

(M.Sc) Downloaded from koomeshjournal.semums.ac.ir at 10: on Saturday August 18th 2018 چکیده. Ins T/Aclon. ptz57rgo رود.

(M.Sc) Downloaded from koomeshjournal.semums.ac.ir at 10: on Saturday August 18th 2018 چکیده. Ins T/Aclon. ptz57rgo رود. مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی سمنان- جلد 5 شماره و 2 پاي یز و زمستان 382 جدا سازی ژن گلوکز اکسیداز آسپرژیلوس نایجر و کلونینگ آن در پروکاریوت ها Downloaded from koomeshjournal.semums.ac.ir at 0:09 +0430

Διαβάστε περισσότερα

بسم اهلل الرحمن الرحیم آزمایشگاه فیزیک )2( shimiomd

بسم اهلل الرحمن الرحیم آزمایشگاه فیزیک )2( shimiomd بسم اهلل الرحمن الرحیم آزمایشگاه فیزیک )( shimiomd خواندن مقاومت ها. بررسی قانون اهم برای مدارهای متوالی. 3. بررسی قانون اهم برای مدارهای موازی بدست آوردن مقاومت مجهول توسط پل وتسون 4. بدست آوردن مقاومت

Διαβάστε περισσότερα

جلسه ی ۱۰: الگوریتم مرتب سازی سریع

جلسه ی ۱۰: الگوریتم مرتب سازی سریع دانشکده ی علوم ریاضی داده ساختارها و الگوریتم ها ۸ مهر ۹ جلسه ی ۱۰: الگوریتم مرتب سازی سریع مدر س: دکتر شهرام خزاي ی نگارنده: محمد امین ادر یسی و سینا منصور لکورج ۱ شرح الگور یتم الگوریتم مرتب سازی سریع

Διαβάστε περισσότερα

Answers to Problem Set 5

Answers to Problem Set 5 Answers to Problem Set 5 Principle of Economics Graduate School of Management and Economics, Sharif University of Technology Fall 94 5. Suppose a competitive firm has the following cost function c(y) =

Διαβάστε περισσότερα

چکیده مقدمه کلید واژه ها:

چکیده مقدمه کلید واژه ها: چکیده طی دهه های گذشته سازمان های بسیاری در اقسا نقاط جهان سیستم برنامه ریزی منابع سازمانی ERP را اتخاذ کرده اند. در باره ی منافع حسابداری اتخاذ سیستم های سازمانی تحقیقات کمی در مقیاس جهانی انجام شده است.

Διαβάστε περισσότερα

یافته / دوره شانزدهم / شماره / 2 تابستان / 93 مسلسل 60

یافته / دوره شانزدهم / شماره / 2 تابستان / 93 مسلسل 60 فصلنامه علمی پژوهشی دانشگاه علوم پزشکی لرستان مقایسه میزان تولید پروتي ین نوترکیب در دو رده سلولی CHO و MCF7 - -2 2 2* حسام میرشهابی حوریه سلیمان جاهی زهرا مشکات الهام احمدي کارشناسی ارشد گروه ویروس شناسی

Διαβάστε περισσότερα

تمرین اول درس کامپایلر

تمرین اول درس کامپایلر 1 تمرین اول درس 1. در زبان مربوط به عبارت منظم زیر چند رشته یکتا وجود دارد (0+1+ϵ)(0+1+ϵ)(0+1+ϵ)(0+1+ϵ) جواب 11 رشته کنند abbbaacc را در نظر بگیرید. کدامیک از عبارتهای منظم زیر توکنهای ab bb a acc را ایجاد

Διαβάστε περισσότερα

تحلیل مدار به روش جریان حلقه

تحلیل مدار به روش جریان حلقه تحلیل مدار به روش جریان حلقه برای حل مدار به روش جریان حلقه باید مراحل زیر را طی کنیم: مرحله ی 1: مدار را تا حد امکان ساده می کنیم)مراقب باشید شاخه هایی را که ترکیب می کنید مورد سوال مسئله نباشد که در

Διαβάστε περισσότερα

Spacecraft thermal control handbook. Space mission analysis and design. Cubesat, Thermal control system

Spacecraft thermal control handbook. Space mission analysis and design. Cubesat, Thermal control system سیستم زیر حرارتی ماهواره سرفصل های مهم 1- منابع مطالعاتی 2- مقدمه ای بر انتقال حرارت و مکانیزم های آن 3- موازنه انرژی 4 -سیستم های کنترل دما در فضا 5- مدل سازی عددی حرارتی ماهواره 6- تست های مورد نیاز

Διαβάστε περισσότερα

مکانيک جامدات ارائه و تحليل روش مناسب جهت افزایش استحکام اتصاالت چسبي در حالت حجم چسب یکسان

مکانيک جامدات ارائه و تحليل روش مناسب جهت افزایش استحکام اتصاالت چسبي در حالت حجم چسب یکسان پائیز 2931/ سال ششم/ شماره ویژه دوم فصلنامه علمي پژوهشي مهندسي مکانيک جامدات فصلنامه علمي پژوهشي مهندسي مکانيک جامدات www.jsme.ir ارائه و تحليل روش مناسب جهت افزایش استحکام اتصاالت چسبي در حالت حجم چسب

Διαβάστε περισσότερα

با.)eu/food/food/foodlaw/traceability/index_en. htm بر. تهران- )MBST(رMolecular Biological System Transfer موسسه )2 ایران

با.)eu/food/food/foodlaw/traceability/index_en. htm بر. تهران- )MBST(رMolecular Biological System Transfer موسسه )2 ایران Original Article 83-89 1 شماره 71 دوره 1395 دامپزشکی تحقیقات مجله Journal of Veterinary Research. 71,1:83-89, 2016 تحقیقی مقاله در DNA ژنومی بقایای آنالیز برای DNA استخراج متفاوت روش 3 کارگیری به سویا

Διαβάστε περισσότερα

ارزیابی بیان فیمبریه Fim2( و Bordetella pertussis )Fim3 در مراحل مختلف کشت به منظور تولید واکسن

ارزیابی بیان فیمبریه Fim2( و Bordetella pertussis )Fim3 در مراحل مختلف کشت به منظور تولید واکسن و 4 ارزیابی بیان فیمبریه Fim2( و Bordetella pertussis )Fim3 در مراحل مختلف کشت به منظور تولید واکسن 3 *2 1 طیبه لطیفی مجتبی نوفلی لیال جبل عاملی چکیده زمینه و هدف: فیمبریه) Fim2 و )Fim3 یکی از فاکتورهای

Διαβάστε περισσότερα

پروژه یازدهم: ماشین هاي بردار پشتیبان

پروژه یازدهم: ماشین هاي بردار پشتیبان پروژه یازدهم: ماشین هاي بردار پشتیبان 1 عموما براي مسایلی که در آنها دو دسته وجود دارد استفاده میشوند اما ماشین هاي بردار پشتیبان روشهاي متفاوتی براي ترکیب چند SVM و ایجاد یک الگوریتم دستهبندي چند کلاس

Διαβάστε περισσότερα

بسمه تعالی «تمرین شماره یک»

بسمه تعالی «تمرین شماره یک» بسمه تعالی «تمرین شماره یک» شماره دانشجویی : نام و نام خانوادگی : نام استاد: دکتر آزاده شهیدیان ترمودینامیک 1 نام درس : ردیف 0.15 m 3 میباشد. در این حالت یک فنر یک دستگاه سیلندر-پیستون در ابتدا حاوي 0.17kg

Διαβάστε περισσότερα

همبستگی و رگرسیون در این مبحث هدف بررسی وجود یک رابطه بین دو یا چند متغیر می باشد لذا هدف اصلی این است که آیا بین

همبستگی و رگرسیون در این مبحث هدف بررسی وجود یک رابطه بین دو یا چند متغیر می باشد لذا هدف اصلی این است که آیا بین همبستگی و رگرسیون در این مبحث هدف بررسی وجود یک رابطه بین دو یا چند متغیر می باشد لذا هدف اصلی این است که آیا بین دو صفت متغیر x و y رابطه و همبستگی وجود دارد یا خیر و آیا می توان یک مدل ریاضی و یک رابطه

Διαβάστε περισσότερα

BEH 111 و تعیین ویژگی های آنزیم آلفا-آمیالز تولید شده بوسیله این باکتری

BEH 111 و تعیین ویژگی های آنزیم آلفا-آمیالز تولید شده بوسیله این باکتری مجله تازه هاي بیوتکنولوژی سلولي- مولكولي دوره دوم شماره هفتم تابستان 1391 بررسی پروفیل آنزیمی باکتری باسیلوس آمیلولیکوئیفاسینس BEH 111 و تعیین ویژگی های آنزیم آلفا-آمیالز تولید شده بوسیله این باکتری 3

Διαβάστε περισσότερα

یونیزاسیون اشعهX مقدار مو ثر یونی را = تعریف میکنیم و ظرفیت مو ثر یونی نسبت مقدار مو ثر یونی به زمان تابش هدف آزمایش: مقدمه:

یونیزاسیون اشعهX مقدار مو ثر یونی را = تعریف میکنیم و ظرفیت مو ثر یونی نسبت مقدار مو ثر یونی به زمان تابش هدف آزمایش: مقدمه: ر 1 یونیزاسیون اشعهX هدف آزمایش: تعیین مقدار ظرفیت مو ثر یونی هوا تحقیق بستگی جریان یونیزاسیون به جریان فیلامان و ولتاژ آند لامپ اشعه x مقدمه: اشعه x موج الکترومغناطیسی پر قدرت با محدوده انرژي چند تا چند

Διαβάστε περισσότερα

راهنمای کاربری موتور بنزینی )سیکل اتو(

راهنمای کاربری موتور بنزینی )سیکل اتو( راهنمای کاربری موتور بنزینی )سیکل اتو( هدف آزمایش : شناخت و بررسی عملکرد موتور بنزینی تئوری آزمایش: موتورهای احتراق داخلی امروزه به طور وسیع برای ایجاد قدرت بکار می روند. ژنراتورهای کوچک پمپ های مخلوط

Διαβάστε περισσότερα

تلفات خط انتقال ابررسی یک شبکة قدرت با 2 به شبکة شکل زیر توجه کنید. ژنراتور فرضیات شبکه: میباشد. تلفات خط انتقال با مربع توان انتقالی متناسب

تلفات خط انتقال ابررسی یک شبکة قدرت با 2 به شبکة شکل زیر توجه کنید. ژنراتور فرضیات شبکه: میباشد. تلفات خط انتقال با مربع توان انتقالی متناسب تلفات خط انتقال ابررسی یک شبکة قدرت با 2 به شبکة شکل زیر توجه کنید. ژنراتور فرضیات شبکه: این شبکه دارای دو واحد کامال یکسان آنها 400 MW میباشد. است تلفات خط انتقال با مربع توان انتقالی متناسب و حداکثر

Διαβάστε περισσότερα

مثال( مساله الپالس در ناحیه داده شده را حل کنید. u(x,0)=f(x) f(x) حل: به کمک جداسازی متغیرها: ثابت = k. u(x,y)=x(x)y(y) X"Y=-XY" X" X" kx = 0

مثال( مساله الپالس در ناحیه داده شده را حل کنید. u(x,0)=f(x) f(x) حل: به کمک جداسازی متغیرها: ثابت = k. u(x,y)=x(x)y(y) XY=-XY X X kx = 0 مثال( مساله الپالس در ناحیه داده شده را حل کنید. (,)=() > > < π () حل: به کمک جداسازی متغیرها: + = (,)=X()Y() X"Y=-XY" X" = Y" ثابت = k X Y X" kx = { Y" + ky = X() =, X(π) = X" kx = { X() = X(π) = معادله

Διαβάστε περισσότερα

فعالیت = ) ( )10 6 ( 8 = )-4( 3 * )-5( 3 = ) ( ) ( )-36( = m n m+ m n. m m m. m n mn

فعالیت = ) ( )10 6 ( 8 = )-4( 3 * )-5( 3 = ) ( ) ( )-36( = m n m+ m n. m m m. m n mn درس»ریشه ام و توان گویا«تاکنون با مفهوم توان های صحیح اعداد و چگونگی کاربرد آنها در ریشه گیری دوم و سوم اعداد آشنا شده اید. فعالیت زیر به شما کمک می کند تا ضمن مرور آنچه تاکنون در خصوص اعداد توان دار و

Διαβάστε περισσότερα

Angle Resolved Photoemission Spectroscopy (ARPES)

Angle Resolved Photoemission Spectroscopy (ARPES) Angle Resolved Photoemission Spectroscopy (ARPES) روش ARPES روشی است تجربی که برای تعیین ساختار الکترونی مواد به کار می رود. این روش بر پایه اثر فوتوالکتریک است که توسط هرتز کشف شد: الکترونها می توانند

Διαβάστε περισσότερα

هدف از این آزمایش آشنایی با رفتار فرکانسی مدارهاي مرتبه اول نحوه تأثیر مقادیر عناصر در این رفتار مشاهده پاسخ دامنه

هدف از این آزمایش آشنایی با رفتار فرکانسی مدارهاي مرتبه اول نحوه تأثیر مقادیر عناصر در این رفتار مشاهده پاسخ دامنه آزما ی ش شش م: پا س خ فرکا نس ی مدا رات مرتبه اول هدف از این آزمایش آشنایی با رفتار فرکانسی مدارهاي مرتبه اول نحوه تأثیر مقادیر عناصر در این رفتار مشاهده پاسخ دامنه و پاسخ فاز بررسی رفتار فیلتري آنها بدست

Διαβάστε περισσότερα

رسوب سختی آلیاژهای آلومینیوم: تاريخچه : فرآیند رسوب سختی )پیرسختی( در سال 6091 بوسیله آلمانی کشف گردید.

رسوب سختی آلیاژهای آلومینیوم: تاريخچه : فرآیند رسوب سختی )پیرسختی( در سال 6091 بوسیله آلمانی کشف گردید. رسوب سختی آلیاژهای آلومینیوم تاريخچه فرآیند رسوب سختی )پیرسختی( در سال 6091 بوسیله Dr.A.Wilm آلمانی کشف گردید. دکتر Wilm یک آلیاژ 4 درصد مس و 9/5 درصد منیزیم را حرارت داده و پس از آن به سرعت سرد نمود و

Διαβάστε περισσότερα

دستور العمل تعیین مختصات بوسیله دستگاه GPS شرکت ملی گاز ایران شرکت گاز استان تهران امور خدمات فنی و فروش عمده واحد GIS نسخه 0.1.

دستور العمل تعیین مختصات بوسیله دستگاه GPS شرکت ملی گاز ایران شرکت گاز استان تهران امور خدمات فنی و فروش عمده واحد GIS نسخه 0.1. شرکت ملی گاز ایران شرکت گاز استان تهران امور خدمات فنی و فروش عمده واحد GIS نسخه 0.1.1 بهار 0131 GIS 1 پیش رو موارد الزم به جهت تعیین موقعیت تاسیسات گازرسانی بوسیله سیستم تعیین موقعیت جهانی( GPS ) را تشریح

Διαβάστε περισσότερα

ویرایشسال 95 شیمیمعدنی تقارن رضافالحتی

ویرایشسال 95 شیمیمعدنی تقارن رضافالحتی ویرایشسال 95 شیمیمعدنی تقارن رضافالحتی از ابتدای مبحث تقارن تا ابتدای مبحث جداول کاراکتر مربوط به کنکور ارشد می باشد افرادی که این قسمت ها را تسلط دارند می توانند از ابتدای مبحث جداول کاراکتر به مطالعه

Διαβάστε περισσότερα

ﺎﻫﻪﻨﯾﺰﻫ ﺰﯿﻟﺎﻧآ سﺎﺳا ﺮﺑ ﺎﻫ ﻪﻟﻮﻟ یدﺎﺼﺘﻗا ﺮﻄﻗ ﻪﺒﺳﺎﺤﻣ یاﺮﺑ ﻪﻄﺑار

ﺎﻫﻪﻨﯾﺰﻫ ﺰﯿﻟﺎﻧآ سﺎﺳا ﺮﺑ ﺎﻫ ﻪﻟﻮﻟ یدﺎﺼﺘﻗا ﺮﻄﻗ ﻪﺒﺳﺎﺤﻣ یاﺮﺑ ﻪﻄﺑار اراي ه رابطهای برای محاسبه قطر اقتصادی لوله ها بر اساس آنالیز هزینهها در ایران چکیده در تحقیق حاضر تعیین قطر بهینه اقتصادی براساس هزینه های موثر روی اجرای عملیات لوله کشی در ایران مورد مطالعه قرار گرفته

Διαβάστε περισσότερα

تاثیر اسیدسالیسیلیک و فنیلآالنین روی بیان ژنهای کلیدی مسیر بیوسنتز سزامین در کنجد

تاثیر اسیدسالیسیلیک و فنیلآالنین روی بیان ژنهای کلیدی مسیر بیوسنتز سزامین در کنجد مهندسی ژنتيک و ایمنی زیستی دوره 5 شماره 2 پایيز و زمستان 1395 صفحه 155-166 تاثیر اسیدسالیسیلیک و فنیلآالنین روی بیان ژنهای کلیدی مسیر بیوسنتز سزامین در کنجد Effect of salicylic acid and phenylalanine on

Διαβάστε περισσότερα

طراحی و تعیین استراتژی بهره برداری از سیستم ترکیبی توربین بادی-فتوولتاییک بر مبنای کنترل اولیه و ثانویه به منظور بهبود مشخصههای پایداری ریزشبکه

طراحی و تعیین استراتژی بهره برداری از سیستم ترکیبی توربین بادی-فتوولتاییک بر مبنای کنترل اولیه و ثانویه به منظور بهبود مشخصههای پایداری ریزشبکه طراحی و تعیین استراتژی بهره برداری از سیستم ترکیبی توربین بادی-فتوولتاییک بر مبنای کنترل اولیه و ثانویه به منظور بهبود مشخصههای پایداری ریزشبکه 2 1* فرانک معتمدی فرید شیخ االسالم 1 -دانشجوی دانشکده برق

Διαβάστε περισσότερα

تشخیص داده می شوند. بر رفتار سلول اثر می گذارد.

تشخیص داده می شوند. بر رفتار سلول اثر می گذارد. ارتباطات سلولی سلول ها برای پاسخ به سیگنال های محیطی )نور بو صدا و مزه(- رشد و متایز تولید و ترشح یک پروتئین )هورمون( و تنظیم بیان یک ژن و غیره باید بتوانند به پیام های خارجی پاسخ بدهند. مولکول پیام رسان

Διαβάστε περισσότερα

E_mail: چکیده فرکتال تشخیص دهد. مقدمه متحرک[ 2 ].

E_mail: چکیده فرکتال تشخیص دهد. مقدمه متحرک[ 2 ]. آنالیز کامپیوتری مسیر حرکت اسپرم و استخراج بعد فرکتال نویسندگان : ٣ ٢ ١ مریم پنجه فولادگران محمدحسن مرادی وحیدرضا نفیسی ٤ روشنک ابوترابی تهران دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات دانشکده مهندسی پزشکی

Διαβάστε περισσότερα

حفاظت مقایسه فاز خطوط انتقال جبرانشده سري.

حفاظت مقایسه فاز خطوط انتقال جبرانشده سري. حفاظت مقایسه فاز در خطوط انتقال جبران شده سري همراه با MOV 2 1 محمد رضا پویان فر جواد ساده 1 دانشگاه آزاد اسلامی واحد گناباد reza.pooyanfar@gmail.com 2 دانشکده فنی مهندسی دانشگاه فردوسی مشهد sadeh@um.ac.ir

Διαβάστε περισσότερα

فصل چهارم : مولتی ویبراتورهای ترانزیستوری مقدمه: فیدبک مثبت

فصل چهارم : مولتی ویبراتورهای ترانزیستوری مقدمه: فیدبک مثبت فصل چهارم : مولتی ویبراتورهای ترانزیستوری مقدمه: فیدبک مثبت در تقویت کننده ها از فیدبک منفی استفاده می نمودیم تا بهره خیلی باال نرفته و سیستم پایدار بماند ولی در فیدبک مثبت هدف فقط باال بردن بهره است در

Διαβάστε περισσότερα

جلسه ی ۲۴: ماشین تورینگ

جلسه ی ۲۴: ماشین تورینگ دانشکده ی علوم ریاضی نظریه ی زبان ها و اتوماتا ۲۶ ا ذرماه ۱۳۹۱ جلسه ی ۲۴: ماشین تورینگ مدر س: دکتر شهرام خزاي ی نگارندگان: حمید ملک و امین خسر وشاهی ۱ ماشین تور ینگ تعریف ۱ (تعریف غیررسمی ماشین تورینگ)

Διαβάστε περισσότερα

1- مقدمه. 2 Action. 1 Heuristic

1- مقدمه. 2 Action. 1 Heuristic یک الگوریتم نوین جهت رنگ آمیزی گراف با استفاده از آتوماتای یادگیر حبیب مطیع قادر دانشگاه آزاد اسلامی واحد تبریز باشگاه پژوهشگران جوان Habib_moti@yahoo.com عباس میرزایی ثمرین بورسیه هیات علمی دانشگاه آزاد

Διαβάστε περισσότερα

جریان نامی...

جریان نامی... مقاومت نقطه نوترال (NGR) مشخصات فنی فهرست مطالب 5 5... معرفی کلی... مشخصات... 1-2- ولتاژ سیستم... 2-2- ولتاژ نامی... -2- جریان نامی... -2- مقدار مقاومت -5-2 زمان... -2- جریان پیوسته... 7-2- ضریب دماي مقاومت...

Διαβάστε περισσότερα

مطالعه نظری تشکیل کمپلکسهای فلزی از لیگاند N -فنیل آزا- 15 -کرون 5 -اتر

مطالعه نظری تشکیل کمپلکسهای فلزی از لیگاند N -فنیل آزا- 15 -کرون 5 -اتر وΔ 5:11 )1314( 17-23 Journal of Quantum Chemistry and Spectroscopy (JQCS) مطالعه نظری تشکیل کمپلکسهای فلزی از لیگاند N -فنیل آزا- 15 -کرون 5 -اتر 2 عبدالرضا نکوئی *1 رقیه قجری 0 شیراز دانشگاه صنعتی شیراز

Διαβάστε περισσότερα

ثابت. Clausius - Clapeyran 1

ثابت. Clausius - Clapeyran 1 جدول 15 فشار بخار چند مایع خالص در دمای 25 C فشار بخار در دمایC (atm) 25 نام مایع 0/7 دیاتیل اتر 0/3 برم 0/08 اتانول 0/03 آب دمای جوش یک مایع برابر است با دمایی که فشار بخار تعادلی آن مایع با فشار اتمسفر

Διαβάστε περισσότερα

سايت ويژه رياضيات درسنامه ها و جزوه هاي دروس رياضيات

سايت ويژه رياضيات   درسنامه ها و جزوه هاي دروس رياضيات سايت ويژه رياضيات درسنامه ها و جزوه هاي دروس رياضيات دانلود نمونه سوالات امتحانات رياضي نمونه سوالات و پاسخنامه كنكور دانلود نرم افزارهاي رياضيات و... کانال سایت ریاضی سرا در تلگرام: https://telegram.me/riazisara

Διαβάστε περισσότερα

Iranian Journal of Medical Microbiology

Iranian Journal of Medical Microbiology Original Article Iranian Journal of Medical Microbiology Iran J Med Microbiol: Volume 8, Number 3 (10-2014( Journal homepage: www.ijmm.ir Evaluation of Type IV Pilin Sub Groups in Pseudomonas aeruginosa

Διαβάστε περισσότερα

عنوان: رمزگذاري جستجوپذیر متقارن پویا

عنوان: رمزگذاري جستجوپذیر متقارن پویا دانشگاه صنعتی شریف دانشکده مهندسی برق گزارش درس ریاضیات رمزنگاري عنوان: رمزگذاري جستجوپذیر متقارن پویا استاد درس: مهندس نگارنده: ز 94 دي ماه 1394 1 5 نماد گذاري و تعریف مسي له 1 6 رمزگذاري جستجوپذیر متقارن

Διαβάστε περισσότερα

1) { } 6) {, } {{, }} 2) {{ }} 7 ) { } 3) { } { } 8) { } 4) {{, }} 9) { } { }

1) { } 6) {, } {{, }} 2) {{ }} 7 ) { } 3) { } { } 8) { } 4) {{, }} 9) { } { } هرگاه دسته اي از اشیاء حروف و اعداد و... که کاملا"مشخص هستند با هم در نظر گرفته شوند یک مجموعه را به وجود می آورند. عناصر تشکیل دهنده ي یک مجموعه باید دو شرط اساسی را داشته باشند. نام گذاري مجموعه : الف

Διαβάστε περισσότερα

تاثیر آلودگی هاي صوتی تک فرکانس بر روي رشد باکتري اشیرشیاکلی

تاثیر آلودگی هاي صوتی تک فرکانس بر روي رشد باکتري اشیرشیاکلی مجله دانشگاه علوم پزشکی خراسان شمالی بهار 1392 177-183:(1)5 Journal of North Khorasan University of Medical Sciences Spring2013;5(1): 177-183 تاثیر آلودگی هاي صوتی تک فرکانس بر روي رشد باکتري اشیرشیاکلی

Διαβάστε περισσότερα

نکنید... بخوانید خالء علمی خود را پر کنید و دانش خودتان را ارائه دهید.

نکنید... بخوانید خالء علمی خود را پر کنید و دانش خودتان را ارائه دهید. گزارش کار آزمایشگاه صنعتی... مکانیک سیاالت ( رینولدز افت فشار ) دانشجویان : فردین احمدی محمد جاللی سعید شادخواطر شاهین غالمی گروه یکشنبه ساعت 2::0 الی رینولدز هدف : بررسی نوع حرکت سیال تئوری : یکی از انواع

Διαβάστε περισσότερα

سلسله مزاتب سبان مقدمه فصل : زبان های فارغ از متن زبان های منظم

سلسله مزاتب سبان مقدمه فصل : زبان های فارغ از متن زبان های منظم 1 ماشیه ای توریىگ مقدمه فصل : سلسله مزاتب سبان a n b n c n? ww? زبان های فارغ از متن n b n a ww زبان های منظم a * a*b* 2 زبان ها پذیرفته می شوند بوسیله ی : ماشین های تورینگ a n b n c n ww زبان های فارغ

Διαβάστε περισσότερα

تئوری جامع ماشین بخش سوم جهت سادگی بحث یک ماشین سنکرون دو قطبی از نوع قطب برجسته مطالعه میشود.

تئوری جامع ماشین بخش سوم جهت سادگی بحث یک ماشین سنکرون دو قطبی از نوع قطب برجسته مطالعه میشود. مفاهیم اصلی جهت آنالیز ماشین های الکتریکی سه فاز محاسبه اندوکتانس سیمپیچیها و معادالت ولتاژ ماشین الف ) ماشین سنکرون جهت سادگی بحث یک ماشین سنکرون دو قطبی از نوع قطب برجسته مطالعه میشود. در حال حاضر از

Διαβάστε περισσότερα

هدف از این آزمایش آشنایی با برخی قضایاي ساده و در عین حال مهم مدار از قبیل قانون اهم جمع آثار مدار تونن و نورتن

هدف از این آزمایش آشنایی با برخی قضایاي ساده و در عین حال مهم مدار از قبیل قانون اهم جمع آثار مدار تونن و نورتن آزما ی ش سوم: ربرسی اقنون ا ه م و قوانین ولتاژ و جریان اهی کیرشهف قوانین میسقت ولتاژ و میسقت جریان ربرسی مدا ر تونن و نورتن قضیه ااقتنل حدا کثر توان و ربرسی مدا ر پ ل و تس ون هدف از این آزمایش آشنایی با

Διαβάστε περισσότερα

شاخصهای پراکندگی دامنهی تغییرات:

شاخصهای پراکندگی دامنهی تغییرات: شاخصهای پراکندگی شاخصهای پراکندگی بیانگر میزان پراکندگی دادههای آماری میباشند. مهمترین شاخصهای پراکندگی عبارتند از: دامنهی تغییرات واریانس انحراف معیار و ضریب تغییرات. دامنهی تغییرات: اختالف بزرگترین و

Διαβάστε περισσότερα

ارزیابی پاسخ لرزهای درههای آبرفتی نیمسینوسی با توجه به خصوصیات مصالح آبرفتی

ارزیابی پاسخ لرزهای درههای آبرفتی نیمسینوسی با توجه به خصوصیات مصالح آبرفتی ارزیابی پاسخ لرزهای درههای آبرفتی نیمسینوسی با توجه به خصوصیات مصالح آبرفتی دانا امینی بانه 1 * بهروز گتمیری 2 دانشجوی کارشناسی ارشد مهندسی عمران ژئوتکنیک - دانشگاه تهران 2- استاد دانشکده مهندسی عمران

Διαβάστε περισσότερα

مشخصه های نابجایی ها چگالی نابجایی: مجموع طول نابجاییها در واحد حجم و یا تعداد نابجایی هایی که یک واحد از سطح مقطع دلخواه را قطع می کنند.

مشخصه های نابجایی ها چگالی نابجایی: مجموع طول نابجاییها در واحد حجم و یا تعداد نابجایی هایی که یک واحد از سطح مقطع دلخواه را قطع می کنند. مشخصه های نابجایی ها نابجاییها و مشخصات آنها تاثیرات مهمی بر روی خواص مکانیکی فلزات دارند. مهمترین این مشخصات میدان کرنشی است که در اطراف نابجایی ها وجود دارد. این میدان کرنش بر تحرک سایر نابجایی ها و

Διαβάστε περισσότερα

تخمین با معیار مربع خطا: حالت صفر: X: مکان هواپیما بدون مشاهده X را تخمین بزنیم. بهترین تخمین مقداری است که متوسط مربع خطا مینیمم باشد:

تخمین با معیار مربع خطا: حالت صفر: X: مکان هواپیما بدون مشاهده X را تخمین بزنیم. بهترین تخمین مقداری است که متوسط مربع خطا مینیمم باشد: تخمین با معیار مربع خطا: هدف: با مشاهده X Y را حدس بزنیم. :y X: مکان هواپیما مثال: مشاهده نقطه ( مجموعه نقاط کنارهم ) روی رادار - فرض کنیم می دانیم توزیع احتمال X به چه صورت است. حالت صفر: بدون مشاهده

Διαβάστε περισσότερα

آزمایش ۱ اندازه گیری مقاومت سیم پیچ های ترانسفورماتور تک فاز

آزمایش ۱ اندازه گیری مقاومت سیم پیچ های ترانسفورماتور تک فاز گزارش آزمایشگاه ماشینهای الکتریکی ۲ آزمایش ۱ اندازه گیری مقاومت سیم پیچ های ترانسفورماتور تک فاز شرح آزمایش ماژول تغذیه را با قرار دادن Breaker Circuit بر روی on روشن کنید با تغییر دستگیره ماژول منبع تغذیه

Διαβάστε περισσότερα

جداسازي پکتینلیاز از آسپرژیلوس نایژر و اثر آن در بهبود فرایند تخمیر در تولید چاي سیاه

جداسازي پکتینلیاز از آسپرژیلوس نایژر و اثر آن در بهبود فرایند تخمیر در تولید چاي سیاه و 2 234 5 Iranian Food Science and Technology Research Journal Vol. 7, No. 4, 2012, p. 305-313 نشریه پژوهشهاي علوم و صنایع غذایی ایران جلد 7 شماره 4 زمستان 1390 ص 305-313. جداسازي پکتینلیاز از آسپرژیلوس

Διαβάστε περισσότερα

هندسه تحلیلی بردارها در فضای R

هندسه تحلیلی بردارها در فضای R هندسه تحلیلی بردارها در فضای R فصل اول-بردارها دستگاه مختصات سه بعدی از سه محور ozوoyوox عمود بر هم تشکیل شده که در نقطه ای به نام o یکدیگر را قطع می کنند. قرارداد: دستگاه مختصات سه بعدی راستگرد می باشد

Διαβάστε περισσότερα

ارائه و حل مدل مساله زمانبندی زنجیره بحرانی پروژه با در نظر گرفتن بافر تغذیه

ارائه و حل مدل مساله زمانبندی زنجیره بحرانی پروژه با در نظر گرفتن بافر تغذیه فصلنامه علمی پژوهشی مطالعات مدیریت صنعتی سال چهاردهم شماره 4 پاییز 59 صفحات 95-3 ارائه و حل مدل مساله زمانبندی زنجیره بحرانی پروژه با در نظر گرفتن بافر تغذیه *** ** * اکبر عالم تبریز اشکان عیوق مهدیه بنی

Διαβάστε περισσότερα

مارکوف 1.مقدمه: سید مهدی صفوی محمد میکاییلی محمد پویان چکیده ما با مطالعه مدل مخفی میدان تصادفی مارکوف از الگوریتم EM

مارکوف 1.مقدمه: سید مهدی صفوی محمد میکاییلی محمد پویان چکیده ما با مطالعه مدل مخفی میدان تصادفی مارکوف از الگوریتم EM و بخش بندی تصاویر براساس مارکوف مدل میدان تصادفی مخفی 3 سید مهدی صفوی محمد میکاییلی محمد پویان -دانشجو گروه مهندسی پزشکی دانشکده فنی مهندسی دانشگاه شاهد 3- عضوهیات علمی دانشیار گروه مهندسی پزشکی دانشکده

Διαβάστε περισσότερα

مقدمه الف) مبدلهای AC/DC ب) مبدلهای DC/AC ج) مبدلهای AC/AC د) چاپرها. (Rectifiers) (Inverters) (Converters) (Choppers) Version 1.0

مقدمه الف) مبدلهای AC/DC ب) مبدلهای DC/AC ج) مبدلهای AC/AC د) چاپرها. (Rectifiers) (Inverters) (Converters) (Choppers) Version 1.0 چرا خازن مقدمه اغلب دستگاهها و مصرفکنندگان الکتریکی برای انجام کار مفید نیازمند مقداری توان راکتیو برای مهیا کردن شرایط لازم برای انجام کار میباشند. به عنوان مثال موتورهای الکتریکی AC برای تبدیل انرژی

Διαβάστε περισσότερα

دانشکده ی علوم ریاضی جلسه ی ۵: چند مثال

دانشکده ی علوم ریاضی جلسه ی ۵: چند مثال دانشکده ی علوم ریاضی احتمال و کاربردا ن ۴ اسفند ۹۲ جلسه ی : چند مثال مدر س: دکتر شهرام خزاي ی نگارنده: مهدی پاک طینت (تصحیح: قره داغی گیوه چی تفاق در این جلسه به بررسی و حل چند مثال از مطالب جلسات گذشته

Διαβάστε περισσότερα

http://econometrics.blog.ir/ متغيرهای وابسته نماد متغيرهای وابسته مدت زمان وصول حساب های دريافتني rcp چرخه تبدیل وجه نقد ccc متغیرهای کنترلی نماد متغيرهای کنترلي رشد فروش اندازه شرکت عملکرد شرکت GROW SIZE

Διαβάστε περισσότερα

شده و دستیابی به شرایط بهینه پایداری

شده و دستیابی به شرایط بهینه پایداری دوره 8 شماره بهار 95 صفحه 7 تا 0 Vol. 8, No., Spring 06, pp. 7-0 نشریه علمی پژوهشی امیرکبیر - مهندسی مکانیک AmirKabir Jounrnal of Science & Research Mechanical Engineering (ASJR-ME) بررسی تجربی پایداری

Διαβάστε περισσότερα

جلسه 3 ابتدا نکته اي در مورد عمل توابع بر روي ماتریس ها گفته می شود و در ادامه ي این جلسه اصول مکانیک کوانتمی بیان. d 1. i=0. i=0. λ 2 i v i v i.

جلسه 3 ابتدا نکته اي در مورد عمل توابع بر روي ماتریس ها گفته می شود و در ادامه ي این جلسه اصول مکانیک کوانتمی بیان. d 1. i=0. i=0. λ 2 i v i v i. محاسبات کوانتمی (671) ترم بهار 1390-1391 مدرس: سلمان ابوالفتح بیگی نویسنده: محمد جواد داوري جلسه 3 می شود. ابتدا نکته اي در مورد عمل توابع بر روي ماتریس ها گفته می شود و در ادامه ي این جلسه اصول مکانیک

Διαβάστε περισσότερα

چکیده مقدمه: کلیدواژهها: سیستمهای آزادسازی داور پایداری دارو - ترتینوي ین. Downloaded from hmj.hums.ac.ir at 15: on Thursday August 30th 2018

چکیده مقدمه: کلیدواژهها: سیستمهای آزادسازی داور پایداری دارو - ترتینوي ین. Downloaded from hmj.hums.ac.ir at 15: on Thursday August 30th 2018 کنترل فیزیکو شیمیایی مطالعه آزادسازی و بررسی پایداری ترتینوي ین از Downloaded from hmj.hums.ac.ir at 15:05 +0430 on Thursday August 30th 2018 فرآوردههای نیمه جامد موجود در ایران 2 1 1 دکتر الهه ملاذ دکتر

Διαβάστε περισσότερα

طور موفقیت آمیزی مورد استفاده واقع شده است.

طور موفقیت آمیزی مورد استفاده واقع شده است. مروری جامع و ضروری بر PCR انواع و کاربردهای آن Downloaded from labdiagnosis.ir at 9:37 +0330 on Monday November 19th 2018 طور موفقیت آمیزی مورد استفاده واقع شده است. کلمات کلیدی: Standard PCR- Variants,

Διαβάστε περισσότερα

مقاومت مصالح 2 فصل 9: خيز تيرها. 9. Deflection of Beams

مقاومت مصالح 2 فصل 9: خيز تيرها. 9. Deflection of Beams مقاومت مصالح فصل 9: خيز تيرها 9. Deflection of eams دکتر مح مدرضا نيرومند دااگشنه ايپم نور اصفهان eer Johnston DeWolf ( ) رابطه بين گشتاور خمشی و انحنا: تير طره ای تحت بار متمرکز در انتهای آزاد: P انحنا

Διαβάστε περισσότερα

فصل پنجم زبان های فارغ از متن

فصل پنجم زبان های فارغ از متن فصل پنجم زبان های فارغ از متن خانواده زبان های فارغ از متن: ( free )context تعریف: گرامر G=(V,T,,P) کلیه قوانین آن به فرم زیر باشد : یک گرامر فارغ از متن گفته می شود در صورتی که A x A Є V, x Є (V U T)*

Διαβάστε περισσότερα

ارزیابی نسبت حداکثرتغییر مکان غیرالاستیک به الاستیک در رابطه تغییر مکان هدف در تحت شتاب نگاشتهاي ایران و شتاب نگاشت هاي مصنوعی

ارزیابی نسبت حداکثرتغییر مکان غیرالاستیک به الاستیک در رابطه تغییر مکان هدف در تحت شتاب نگاشتهاي ایران و شتاب نگاشت هاي مصنوعی ارزیابی نسبت حداکثرتغییر مکان غیرالاستیک به الاستیک در رابطه تغییر مکان هدف در دستورالعمل بهسازي لرزه اي(نشریه 360 ( تحت شتاب نگاشتهاي ایران و شتاب نگاشت هاي مصنوعی 2 1 محمدعلی برخورداري ایمان باحشمت دانشکده

Διαβάστε περισσότερα

تخمین نقطه تغییر در ماتریس کواریانس فرآیند نرمال چند متغیره با استفاده از شبکه عصبی

تخمین نقطه تغییر در ماتریس کواریانس فرآیند نرمال چند متغیره با استفاده از شبکه عصبی تخمین نقطه تغییر در ماتریس کواریانس فرآیند نرمال چند متغیره با استفاده از شبکه عصبی امیرحسین امیری نویسنده مسئول( دانشیار گروه مهندسی صنایع دانشکده فنی و مهندسی دانشگاه شاهد تهران محمدرضا ملکی دانشجوی

Διαβάστε περισσότερα

مسائل. 2 = (20)2 (1.96) 2 (5) 2 = 61.5 بنابراین اندازه ی نمونه الزم باید حداقل 62=n باشد.

مسائل. 2 = (20)2 (1.96) 2 (5) 2 = 61.5 بنابراین اندازه ی نمونه الزم باید حداقل 62=n باشد. ) مسائل مدیریت کارخانه پوشاک تصمیم دارد مطالعه ای به منظور تعیین میانگین پیشرفت کارگران کارخانه انجام دهد. اگر او در این مطالعه دقت برآورد را 5 نمره در نظر بگیرد و فرض کند مقدار انحراف معیار پیشرفت کاری

Διαβάστε περισσότερα

2. β Factor. 1. Redundant

2. β Factor. 1. Redundant دوم قسمت نگارش مرتضوی محمد سید مهندس آباد نجف واحد نخبگان و جوان پژوهشگران باشگاه ایران آباد نجف اسالمی آزاد دانشگاه افزونه سامانههای اطمینان قابلیت کليدي: واژههاي فاکتور بتا روش خرابی مشترک علت علت نرخ

Διαβάστε περισσότερα

تا 33 صفحه 1394 زمستان 2 شماره 47 دوره Vol. 47, No. 2, Winter 2015, pp (Mechanical Engineering) (ASJR-ME)

تا 33 صفحه 1394 زمستان 2 شماره 47 دوره Vol. 47, No. 2, Winter 2015, pp (Mechanical Engineering) (ASJR-ME) 42 تا 33 صفحه 394 زمستان 2 شماره 47 دوره Vol. 47, No. 2, Winter 20, pp. 33-42 مکانیک( )مهندسی امیرکبیر پژوهشی علمی نشریه AmirKabir Jounrnal of Science & Research (Mechanical Engineering) (ASJR-ME) انحنای

Διαβάστε περισσότερα

بیوشیمی عمومی اسیدهای آمینه

بیوشیمی عمومی اسیدهای آمینه بیوشیمی عمومی اسیدهای آمینه اسیدهای آمینه تعریف بلوک های ساختمانی پروتئین ترکیبات آلی که دارای حداقل یک گروه کربوکسیل و یک گروه آمین )NH3( می باشند. )COOH( زنجیره جانبی عامل تنوع در آمینواسیدها ساختار

Διαβάστε περισσότερα

بهبود هماهنگی رلههای جریان زیاد با استفاده از محدود کنندههای جریان خطای جهتدار

بهبود هماهنگی رلههای جریان زیاد با استفاده از محدود کنندههای جریان خطای جهتدار بهبود هماهنگی رلههای زیاد با استفاده از محدود کنندههای ی جهتدار محمدعلی حائری 1 حسین عسکریان ابیانه 2 سعید خزایی 3 همایون حائری 4 1 دانشجوی کارشناسی ارشد گروه برق قدرت دانشگاه صنعتی امیرکبیر تهران Mohamad.hayeri@gmail.com

Διαβάστε περισσότερα

مقدمه در این فصل با مدل ارتعاشی خودرو آشنا میشویم. رفتار ارتعاشی به فرکانسهای طبیعی و مود شیپهای خودرو بستگی دارد. این مبحث به میزان افزایش راحتی

مقدمه در این فصل با مدل ارتعاشی خودرو آشنا میشویم. رفتار ارتعاشی به فرکانسهای طبیعی و مود شیپهای خودرو بستگی دارد. این مبحث به میزان افزایش راحتی مقدمه در این فصل با مدل ارتعاشی خودرو آشنا میشویم. رفتار ارتعاشی به فرکانسهای طبیعی و مود شیپهای خودرو بستگی دارد. این مبحث به میزان افزایش راحتی خودرو و کاهش سر و صداها و لرزشهای داخل اتاق موتور و...

Διαβάστε περισσότερα

آموزش SPSS مقدماتی و پیشرفته مدیریت آمار و فناوری اطالعات -

آموزش SPSS مقدماتی و پیشرفته مدیریت آمار و فناوری اطالعات - آموزش SPSS مقدماتی و پیشرفته تهیه و تنظیم: فرزانه صانعی مدیریت آمار و فناوری اطالعات - مهرماه 96 بخش سوم: مراحل تحلیل آماری تحلیل داده ها به روش پارامتری بررسی نرمال بودن توزیع داده ها قضیه حد مرکزی جدول

Διαβάστε περισσότερα

A New Generation of Cold-shock Vector Derived from pcold I (pcold I-LZ) for Expression of Recombinant Peptides and Proteins

A New Generation of Cold-shock Vector Derived from pcold I (pcold I-LZ) for Expression of Recombinant Peptides and Proteins pcold I-LZ Vector for Expression of Recombinant Peptides and Proteins A New Generation of Cold-shock Vector Derived from pcold I (pcold I-LZ) for Expression of Recombinant Peptides and Proteins Hamid Latifi

Διαβάστε περισσότερα

الکترونیکی: پست پورمظفری

الکترونیکی: پست پورمظفری 95/08/06 مقاله: دریافت تاریخ 95/11/20 مقاله: پذیرش تاریخ پایین مصرفی توان با به 2 5 و به 2 4 کمپرسورهای طراحی * گوابر داداشی مرتضی ايران تهران- امیرکبیر صنعتی دانشگاه اطالعات فناوری و کامپیوتر مهندسی دانشکده

Διαβάστε περισσότερα

اتصال گیردار به ستون 1-5 مقدمه 2-5- نمونه محاسبات اتصال گیردار جوشی با ورق روسري و زیر سري WPF) ( مشخصات اولیه مقاطع

اتصال گیردار به ستون 1-5 مقدمه 2-5- نمونه محاسبات اتصال گیردار جوشی با ورق روسري و زیر سري WPF) ( مشخصات اولیه مقاطع فصل پنجم: اتصال گیردار به ستون 1-5 مقدمه در اتصالات صلب خمشی لنگر خمشی انتهاي تیر به صورت کامل به ستون منتقل می گردد و زاویه چرخش بین تیر و ستون در محل اتصال ثابت باقی می ماند. قاب خمشی در این ساختمان

Διαβάστε περισσότερα

هو الحق دانشکده ي مهندسی کامپیوتر جلسه هفتم

هو الحق دانشکده ي مهندسی کامپیوتر جلسه هفتم هو الحق دانشکده ي مهندسی کامپیوتر کدگذاري شبکه Coding) (Network شنبه 2 اسفند 1393 جلسه هفتم استاد: مهدي جعفري نگارنده: سید محمدرضا تاجزاد تعریف 1 بهینه سازي محدب : هدف پیدا کردن مقدار بهینه یک تابع ) min

Διαβάστε περισσότερα

بررسي پارامترهای موثر بر روش اکستروژن در کانالهای هم مقطع زاویهدار و انتخاب سطح بهينه با استفاده از روش طراحي آزمایش تاگوچي برای ماده تيتانيوم

بررسي پارامترهای موثر بر روش اکستروژن در کانالهای هم مقطع زاویهدار و انتخاب سطح بهينه با استفاده از روش طراحي آزمایش تاگوچي برای ماده تيتانيوم زمستان / سال هفتم/ شماره سوم فصلنامه علمي پژوهشي مهندسي مکانيک جامدات فصلنامه علمي پژوهشي مهندسي مکانيک جامدات www.jsme.ir بررسي پارامترهای موثر بر روش اکستروژن در کانالهای هم مقطع زاویهدار و انتخاب سطح

Διαβάστε περισσότερα

تحلیل فرسایش ابزار در ماشینکاري فولاد

تحلیل فرسایش ابزار در ماشینکاري فولاد 77 ST-37 نشریه تخصصی مکانیک کاربردي دوره شماره 1 اسفندماه 1390 از صفحه 77 تا 85 تحلیل فرسایش ابزار در ماشینکاري فولاد 2 چکیده 3 2 1* رمضانعلی مهدوي نژاد محمد خواجه افضلی و عنایت االله دزیانی 1 دانشیار

Διαβάστε περισσότερα

Nonparametric Shewhart-Type Signed-Rank Control Chart with Variable Sampling Interval

Nonparametric Shewhart-Type Signed-Rank Control Chart with Variable Sampling Interval International Journal of Industrial Engineering & Production Management 2013) ugust 2013, Volume 24, Number 2 pp. 183-189 http://ijiepm.iust.ac.ir/ Nonparametric Shewhart-Type Signed-Rank Control Chart

Διαβάστε περισσότερα

2/13/2015 حمیدرضا پوررضا H.R. POURREZA 2 آخرین گام در ساخت یک سیستم ارزیابی آن است

2/13/2015 حمیدرضا پوررضا H.R. POURREZA 2 آخرین گام در ساخت یک سیستم ارزیابی آن است 1 ارزیا ی م حمیدرضا پوررضا قد 2 آخرین گام در ساخت یک سیستم ارزیابی آن است 1 ف ی ا ط لاحات 3 :Degrees of Freedom (DOF) این اصطلاح در سیستمهاي ردیاب استفاده میشود و بنابه تعریف عبارتست از آزادي حرکت انتقالی

Διαβάστε περισσότερα

Downloaded from koomeshjournal.semums.ac.ir at 22: on Sunday September 2nd 2018 چکیده کند. مقدمه

Downloaded from koomeshjournal.semums.ac.ir at 22: on Sunday September 2nd 2018 چکیده کند. مقدمه مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی سمنان- جلد 7 شماره 1 و پاي یز و زمستان 1384 تعیین اثر ضد دردی سایمتیدین در کنترل درد بعد از عمل جراحی و مقایسه اثر آن با مورفین Downloaded from koomeshjournal.semums.ac.ir

Διαβάστε περισσότερα

يدﻻﻮﻓ ﯽﻟﻮﻤﻌﻣ ﯽﺸﻤﺧ يﺎﻬﺑﺎﻗ ه يا زﺮﻟ رﺎﺘﻓر ﺖﯿﺳﺎﺴﺣ ﻞﯿﻠﺤﺗ يﺮﯿﻤﺧ ﻞﺼﻔﻣ يﺎﻬﯿﮔﮋﯾو ﻪﺑ ﺖﺒﺴﻧ

يدﻻﻮﻓ ﯽﻟﻮﻤﻌﻣ ﯽﺸﻤﺧ يﺎﻬﺑﺎﻗ ه يا زﺮﻟ رﺎﺘﻓر ﺖﯿﺳﺎﺴﺣ ﻞﯿﻠﺤﺗ يﺮﯿﻤﺧ ﻞﺼﻔﻣ يﺎﻬﯿﮔﮋﯾو ﻪﺑ ﺖﺒﺴﻧ تحلیل حساسیت رفتار لرزهاي قابهاي خمشی معمولی فولادي نسبت به ویژگیهاي مفصل خمیري مجید محمدي استادیار پژوهشکده مهندسی سازه پژوهشگاه بینالمللی زلزلهشناسی و مهندسی زلزله سیده سمانه میرکاظمی دانشجوي کارشناسی

Διαβάστε περισσότερα

- - - کارکرد نادرست کنتور ها صدور اشتباه قبض برق روشنایی معابر با توجه به در دسترس نبودن آمار و اطلاعات دقیق و مناسبی از تلفات غیر تاسیساتی و همچنین ب

- - - کارکرد نادرست کنتور ها صدور اشتباه قبض برق روشنایی معابر با توجه به در دسترس نبودن آمار و اطلاعات دقیق و مناسبی از تلفات غیر تاسیساتی و همچنین ب عنوان مقاله اولویت بندي روشهاي رفع افت ولتاژ به منظور کاهش تلفات در شبکه هاي فشار ضعیف امیر کاظمی شرکت توزیع نیروي برق خراسان جنوبی واژه هاي کلیدي : تلفات- افت ولتاژ- فیدر- شبکه- بار- بالانس - - - کارکرد

Διαβάστε περισσότερα

کنترل سوییچینگ بر مبنای دستیابی به نمودار حداکثر توان در سلول خورشیدی با روش هوشمند تطبیقی

کنترل سوییچینگ بر مبنای دستیابی به نمودار حداکثر توان در سلول خورشیدی با روش هوشمند تطبیقی کنترل سوییچینگ بر مبنای دستیابی به نمودار حداکثر توان در سلول خورشیدی با روش هوشمند تطبیقی مهندس سید عبدالحسین عمادی * دکتر احسان اسفندیاری چکیده: در این مقاله با استفاده از ساختار غیرخطی برای سلول خورشیدی

Διαβάστε περισσότερα

Top Down Parsing LL(1) Narges S. Bathaeian

Top Down Parsing LL(1) Narges S. Bathaeian طراحی کامپایلر Top Down Parsing LL1) تعریف top down parsing Parse tree را از ریشه به سمت برگها می سازد. دو نوع LL1), LLk) Recursive descent مثال G = {S},{, ) }, P, S) S S S ) S ε ))$ مثال S S ) S ε ))$

Διαβάστε περισσότερα

Combined Test غربالگری پیش از تولد جهت شناسایی ناهنجاری های شایع مادرزادی سواالت و جوابهای مربوط به خانمهایی که میخواهند این آزمایش را انجام دهند.

Combined Test غربالگری پیش از تولد جهت شناسایی ناهنجاری های شایع مادرزادی سواالت و جوابهای مربوط به خانمهایی که میخواهند این آزمایش را انجام دهند. Combined Test غربالگری پیش از تولد جهت شناسایی ناهنجاری های شایع مادرزادی سواالت و جوابهای مربوط به خانمهایی که میخواهند این آزمایش را انجام دهند. غربالگری پیش از تولد جهت شناسایی ناهنجاری های شایع مادرزادی:

Διαβάστε περισσότερα

جلسه 12 به صورت دنباله اي از,0 1 نمایش داده شده اند در حین محاسبه ممکن است با خطا مواجه شده و یکی از بیت هاي آن. p 1

جلسه 12 به صورت دنباله اي از,0 1 نمایش داده شده اند در حین محاسبه ممکن است با خطا مواجه شده و یکی از بیت هاي آن. p 1 محاسبات کوانتمی (67) ترم بهار 390-39 مدرس: سلمان ابوالفتح بیگی نویسنده: سلمان ابوالفتح بیگی جلسه ذخیره پردازش و انتقال اطلاعات در دنیاي واقعی همواره در حضور خطا انجام می شود. مثلا اطلاعات کلاسیکی که به

Διαβάστε περισσότερα

چکیده. Downloaded from

چکیده. Downloaded from بررسی آگاهی و عملکرد زنان ایرانی از سرطان دهانه رحم فهیمه رمضانی تهرانی (M.D.) 1 کاظم محمد (Ph.D.) 2 مهدی رهگذر (M.Sc.) 3 محسن نقوی(. M.Sc ) 4 1- متخصص زنان وزایمان استادیار سرپرست مرکز ملی تحقیقات بهداشت

Διαβάστε περισσότερα