Genetic study of 46 Greek grape cultivars by random amplified polymorphic DNA markers (RAPD- PCR). K. Biniari and M.N.Stavrakakis

Transcript

1 Genetic study of 46 Greek grape cultivars by random amplified polymorphic DNA markers (RAPD- PCR). K. Biniari and M.N.Stavrakakis Laboratory of Viticulture Agricultural University of Athens, Greece

2 Difficulties in the discrimination and classification of grape varieties due to their large number and due to the existence of many different types and clones. Existence of synonyms or different cultivars under the same name Problems: The large number, the genetic variability and the polyclonality of grape varieties. These problems emerge during their determination and dicrimination with ampelographic methods. Ampelographic characters are affected by environmental factors and cultivation methods.

3 1. AGIORGITIKO 24. MANDILARIA AIDANI ASPRO 25. MAVRODAFNI 3. AIDANI MAVRO 26. MAVROTRAGANO 4. ATHIRI 27. MAVRO MESSENIKOLA 5. ASSYRTIKO 28. MONEMVASSIA 6. VAPSA 29. MOSCHATO SAMOU 7. VERTZAMI 30. MOSCHOFILERO 8. VILANA 31. NEGKOSKA 9. VIDIANO 32. NTEMPINA 10. GLYKERITHRA 33. XYNOMAVRO 11. GOUSTOLIDI 34. PLATANI 12. DAFNI 35. PLYTO 13. THRAPSATHIRI 36. POTAMISSIO 14. KATSANO 37. RAZAKI ARCHANON 15. KOLLINIATIKO 38. REFOSKO 16. KORINTHIAKI 39. RODITIS 17. KOTSIFALI 40. ROMPOLA ASPRI 18. KRITIKO 41. ROMEIKO 19. LAGORTHI 42. SAVVATIANO 20. LADIKINO 43. SIDERITIS 21. LIMNIO 44. SOULTANINA 22. LIATIKO 45. STAVROTO

4 Materials and Methods Collection of young and fully expanded leaves in the period of rapid increase of shoots Storage at - 80 o C DNA extraction According to Thomas et al (1993) with minor modifications

5 1224 CAGGCCCTTC AGGTGACCGT CGCAGGATGG GTGTGCCCCA 18 OPF-01 ACGGATCCTG 17 OPF-02 GAGGATCCCT 17 OPF-03 CCTGATCACC 14 OPF-04 GGTGATCAGG 20 OPF-05 CCGAATTCCC 21 OPF-06 GGGAATTCGG 8 OPF-07 CCGATATCCC 14 OPF-08 GGGATATCGG 11 OPF-09 CCAAGCTTCC 16 OPF-10 GGAAGCTTGG 13 OPF-11 TTGGTACCCC 13 OPF-12 ACGGTACCAG 5 OPF-13 GGCTGCAGAA 15 OPF-14 TGCTGCAGGT 13 OPF-15 CCAGTACTCC 2 OPF-16 GGAGTACTGG 10 OPF-17 AACCCGGGAA 12 OPF-20 GGTCTAGAGG 16 OPM-01 GTTGGTGGCT 22 OPM-02 ACAACGCCTC 17 OPM-03 GGGGGATGAG 16 OPM-04 GGCGGTTGTC 16 OPM-05 GGGAACGTGT 13 OPM-06 CTGGGCAACT 22 OPM-07 CCGTGACTCA 19 OPM-08 TCTGTTCCCC 18 OPM-09 GTCTTGCGGA 14 OPM-10 TCTGGCGCAC 12 OPM-11 GTCCACTGTG 11 OPM-12 GGGACGTTGG 18 OPM-13 GGTGGTCAAG 19 OPM-14 AGGGTCGTTC 17 OPM-15 GACCTACCAC 19 OPM-16 GTAACCAGCC 11 OPM-17 TCAGTCCGGG 10 OPM-18 CACCATCCGT 20 OPM-19 CCTTCAGGCA 10 OPM-20 AGGTCTTGGG 18 OPE-01 CCCAAGGTCC 14 OPE-04 GTGACATGCC 18 OPE-08 TCACCACGGT 9 OPE-12 TTATCGCCCC 15 OPE-17 CTACTGCCGT 14 OPQ-01 GGGACGATGG 12

6 Η 2 Ο PCR reaction Buffer solution 200 μμ from each deoxynucleotide (datp, dgtp, dctp and dttp) 50 ng primer 60 ng DNA 1 unit polymerase (Qiagen) Final volume of reaction 25 μl

7 Amplification conditions 5 min 94 o C 1 min 1 min 2 min 94 o C 44 o C 72 o C 35 cycles 10 min 72 o C

8 Electrophoresis Gel concentration 2 % agarose in TAE buffer 120 V for 4 hours Staining with EtBr Photograph gels on Gel - Doc 1000 (Biorad) Statistical analysis Calculation of degree of genetic similarity (I) with the type Ι= n/ m+n, where n is the number of common bands of x and y cultivars. Dendrogram with the statistical program NT-SYSTEM 1.8 developed by Rohlf, based on method UPGMA

9 OPF-01 OPF-02 OPF-03 OPF-04 OPF-05 OPF-06 OPF-07 OPF-08 OPF-09 OPF-10 OPF-11 OPF-12 OPF-13 OPF-14 OPF-15 OPF-16 OPF-17 ΑΓΙΩΡΓΙΤΙΚΟ ΑΗΔΑΝΙ ΛΕΥΚΟ ΑΗΔΑΝΙ ΜΑΥΡΟ ΑΘΗΡΙ ΑΣΥΡΤΙΚΟ ΒΑΨΑ ΒΕΡΖΑΜΙ ΒΗΛΑΝΑ ΒΙΔΙΑΝΟ ΓΛΥΚΕΡΗΘΡΑ ΓΟΥΣΤΟΛΙΔΙ ΔΑΦΝΙ ΘΡΑΨΑΘΗΡΙ ΚΑΤΣΑΝΟ ΚΟΛΛΙΝΙΑΤΙΚΟ ΚΟΡΙΝΘΙΑΚΗ ΣΤΑΦΙΔΑ ΚΟΤΣΙΦΑΛΙ ΚΡΗΤΙΚΟ ΛΑΓΟΡΘΙ ΛΑΔΙΚΙΝΟ ΛΗΜΝΙΟ ΛΙΑΤΙΚΟ ΜΑΛΑΓΟΥΖΙΑ ΜΑΝΤΗΛΑΡΙ ΜΑΥΡΟΔΑΦΝΗ ΜΑΥΡΟΤΡΑΓΑΝΟ ΜΑΥΡΟ ΜΕΣΕΝΙΚΟΛΑ ΜΟΝΕΜΒΑΣΙΑ ΜΟΣΧΑΤΟ ΣΑΜΟΥ ΜΟΣΧΟΦΙΛΕΡΟ ΝΕΓΚΟΣΚΑ ΝΤΕΜΠΙΝΑ ΞΥΝΟΜΑΥΡΟ ΠΛΑΤΑΝΙ ΠΛΥΤΟ ΠΟΤΑΜΙΣΙΟ ΡΑΖΑΚΙ ΑΡΧΑΝΩΝ ΡΕΦΟΣΚΟ ΡΟΔΙΤΗΣ ΡΟΜΠΟΛΑ ΑΣΠΡΗ ΡΩΜΕΙΚΟ ΣΑΒΒΑΤΙΑΝΟ ΣΙΔΕΡΙΤΗΣ ΣΟΥΛΤΑΝΙΝΑ ΣΤΑΥΡΩΤΟ ΦΡΑΟΥΛΑ ΚΟΚΚΙΝΗ OPF-20 OPM-01 OPM-02 OPM-03 OPM-04 OPM-05 OPM-06 OPM-07 OPM-08 OPM-09 OPM-10 OPM-11 OPM-12 OPM-13 OPM-14 OPM-15 OPM-16 OPM-17 OPM-18 OPM-19 OPM-20 OPE-01 OPE-04 OPE-08 OPE-12 OPE-17 OPQ-01

10 PRIMERS High polymorphism (more than 15 bands) Medium Low (between bands) (up to 10 bands) Total bands 710 with 89.7 % polymorphism. More effective : 1225, OPF-02, OPF-04, OPF-05, OPM-01, OPM-06, OPM13 and The most effective OPE-04

11 OPM-01 (44)

12 OPF-03 (39)

13 OPF- 12 (14)

14 ΑΓΙΩΡΓΙΤΙΚΟ ΑΗΔΑΝΙ ΛΕΥΚΟ ΑΗΔΑΝΙ ΜΑΥΡΟ ΑΘΗΡΙ ΑΣΥΡΤΙΚΟ ΒΑΨΑ ΒΕΡΤΖΑΜΙ ΒΗΛΑΝΑ ΒΙΔΙΑΝΟ ΓΛΥΚΕΡΗΘΡΑ ΓΟΥΣΤΟΛΙΔΙ ΔΑΦΝΙΑ ΘΡΑΨΑΘΗΡΙ ΚΑΤΣΑΝΟ ΚΟΛΛΙΝΙΑΤΙΚΟ ΚΟΡΙΝΘΙΑΚΗ ΣΤΑΦΙΔΑ ΚΟΤΣΙΦΑΛΙ ΚΡΗΤΙΚΟ ΛΑΓΟΡΘΙ ΛΑΔΙΚΙΝΟ ΛΗΜΝΙΟ ΛΙΑΤΙΚΟ ΜΑΛΑΓΓΟΥΖΙΑ ΜΑΝΤΗΛΑΡΙ ΜΑΥΡΟΔΑΦΝΗ ΜΑΥΡΟΤΡΑΓΑΝΟ ΜΑΥΡΟ ΜΕΣΕΝΙΚΟΛΑ ΜΟΝΕΜΒΑΣΙΑ ΜΟΣΧΑΤΟ ΣΑΜΟΥ ΜΟΣΧΟΦΙΛΕΡΟ ΝΕΓΚΟΣΚΑ ΝΤΕΜΠΙΝΑ ΞΙΝΟΜΑΥΡΟ ΠΛΑΤΑΝΙ ΠΛΥΤΟ ΠΟΤΑΜΙΣΙΟ ΡΑΖΑΚΙ ΑΡΧ ΡΕΦΟΣΚΟ ΡΟΔΙΤΗΣ ΡΟΜΠΟΛΑ ΑΣΠ ΡΩΜΕΙΚΟ ΣΑΒΒΑΤΙΑΝΟ ΣΙΔΕΡΙΤΗΣ ΣΟΥΛΤΑΝΙΝΑ ΣΤΑΥΡΩΤΟ ΦΡΑΟΥΛΑ ΚΟΚ ΑΓΙΩΡΓΙΤΙΚΟ 1,00 ΑΗΔΑΝΙ ΛΕΥΚΟ 0,751 1,00 ΑΗΔΑΝΙ ΜΑΥΡΟ 0,736 0,963 1,00 ΑΘΗΡΙ 0,734 0,732 0,729 1,00 ΑΣΥΡΤΙΚΟ 0,713 0,689 0,686 0,691 1,00 ΒΑΨΑ 0,725 0,749 0,758 0,715 0,731 1,00 ΒΕΡΤΖΑΜΙ 0,697 0,696 0,701 0,684 0,680 0,732 1,00 ΒΗΛΑΝΑ 0,711 0,698 0,696 0,732 0,706 0,707 0,707 1,00 ΒΙΔΙΑΝΟ 0,744 0,706 0,694 0,728 0,735 0,720 0,722 0,827 1,00 ΓΛΥΚΕΡΗΘΡΑ 0,691 0,687 0,690 0,684 0,756 0,713 0,693 0,752 0,751 1,00 ΓΟΥΣΤΟΛΙΔΙ 0,700 0,724 0,724 0,715 0,644 0,698 0,715 0,693 0,706 0,687 1,00 ΔΑΦΝΙΑ 0,741 0,767 0,762 0,697 0,732 0,756 0,689 0,739 0,749 0,714 0,706 1,00 ΘΡΑΨΑΘΗΡΙ 0,720 0,681 0,679 0,713 0,731 0,701 0,698 0,769 0,818 0,721 0,659 0,737 1,00 ΚΑΤΣΑΝΟ 0,707 0,711 0,720 0,697 0,794 0,720 0,694 0,748 0,746 0,751 0,672 0,749 0,748 1,00 ΚΟΛΛΙΝΙΑΤΙΚΟ 0,710 0,717 0,714 0,708 0,707 0,737 0,725 0,691 0,715 0,677 0,714 0,704 0,683 0,718 1,00 ΚΟΡΙΝΘΙΑΚΗ ΣΤΑΦΙΔΑ 0,762 0,718 0,715 0,715 0,663 0,713 0,701 0,693 0,711 0,662 0,676 0,714 0,724 0,680 0,731 1,00 ΚΟΤΣΙΦΑΛΙ 0,732 0,742 0,737 0,706 0,718 0,728 0,691 0,742 0,758 0,708 0,686 0,741 0,711 0,729 0,701 0,703 1,00 ΚΡΗΤΙΚΟ 0,727 0,737 0,737 0,697 0,684 0,731 0,691 0,697 0,732 0,689 0,680 0,741 0,737 0,710 0,693 0,717 0,764 1,00 ΛΑΓΟΡΘΙ 0,703 0,741 0,738 0,707 0,703 0,732 0,704 0,696 0,706 0,693 0,701 0,700 0,704 0,706 0,717 0,721 0,728 0,731 1,00 ΛΑΔΙΚΙΝΟ 0,717 0,738 0,735 0,704 0,711 0,749 0,707 0,769 0,762 0,724 0,682 0,756 0,769 0,742 0,714 0,729 0,751 0,762 0,744 1,00 ΛΗΜΝΙΟ 0,732 0,717 0,711 0,706 0,707 0,742 0,742 0,711 0,707 0,694 0,737 0,713 0,703 0,713 0,775 0,759 0,721 0,718 0,776 0,742 1,00 ΛΙΑΤΙΚΟ 0,742 0,718 0,707 0,696 0,734 0,718 0,721 0,729 0,762 0,732 0,673 0,728 0,766 0,720 0,711 0,763 0,745 0,734 0,760 0,786 0,759 1,00 ΜΑΛΑΓΓΟΥΖΙΑ 0,706 0,715 0,718 0,712 0,700 0,707 0,718 0,732 0,734 0,699 0,713 0,705 0,735 0,714 0,700 0,718 0,717 0,711 0,718 0,707 0,739 0,769 1,00 ΜΑΝΤΗΛΑΡΙ 0,725 0,724 0,735 0,713 0,694 0,752 0,718 0,699 0,714 0,693 0,699 0,711 0,693 0,717 0,731 0,738 0,708 0,720 0,738 0,729 0,768 0,744 0,755 1,00 ΜΑΥΡΟΔΑΦΝΗ 0,721 0,731 0,725 0,714 0,696 0,753 0,711 0,734 0,704 0,700 0,703 0,704 0,689 0,721 0,704 0,703 0,701 0,710 0,725 0,720 0,729 0,711 0,717 0,742 1,00 ΜΑΥΡΟΤΡΑΓΑΝΟ 0,724 0,725 0,717 0,720 0,729 0,756 0,677 0,762 0,735 0,731 0,683 0,738 0,734 0,721 0,676 0,677 0,738 0,726 0,706 0,734 0,704 0,714 0,700 0,720 0,777 1,00 ΜΑΥΡΟ ΜΕΣΕΝΙΚΟΛΑ 0,725 0,707 0,707 0,687 0,691 0,721 0,715 0,721 0,731 0,710 0,727 0,700 0,690 0,700 0,691 0,701 0,714 0,711 0,715 0,724 0,725 0,721 0,701 0,724 0,751 0,748 1,00 ΜΟΝΕΜΒΑΣΙΑ 0,722 0,758 0,755 0,718 0,689 0,741 0,704 0,704 0,728 0,704 0,707 0,731 0,715 0,694 0,706 0,727 0,737 0,748 0,729 0,749 0,722 0,715 0,707 0,755 0,728 0,753 0,749 1,00 ΜΟΣΧΑΤΟ ΣΑΜΟΥ 0,696 0,697 0,697 0,731 0,690 0,694 0,691 0,686 0,732 0,677 0,711 0,690 0,702 0,656 0,684 0,717 0,682 0,704 0,711 0,680 0,698 0,700 0,737 0,725 0,707 0,707 0,711 0,748 1,00 ΜΟΣΧΟΦΙΛΕΡΟ 0,694 0,698 0,693 0,698 0,675 0,715 0,732 0,679 0,683 0,673 0,721 0,689 0,665 0,675 0,734 0,698 0,700 0,677 0,721 0,698 0,714 0,704 0,684 0,701 0,714 0,700 0,746 0,724 0,748 1,00 ΝΕΓΚΟΣΚΑ 0,711 0,724 0,721 0,684 0,694 0,738 0,724 0,698 0,714 0,704 0,704 0,714 0,698 0,725 0,737 0,724 0,714 0,677 0,721 0,724 0,739 0,715 0,701 0,729 0,734 0,708 0,746 0,744 0,737 0,760 1,00 ΝΤΕΜΠΙΝΑ 0,708 0,729 0,718 0,704 0,672 0,721 0,746 0,701 0,731 0,707 0,707 0,700 0,707 0,689 0,711 0,721 0,708 0,711 0,715 0,713 0,737 0,718 0,729 0,746 0,720 0,714 0,718 0,741 0,717 0,738 0,755 1,00 ΞΙΝΟΜΑΥΡΟ 0,693 0,666 0,661 0,686 0,676 0,720 0,737 0,677 0,687 0,672 0,711 0,684 0,680 0,679 0,724 0,680 0,690 0,662 0,691 0,697 0,707 0,697 0,669 0,683 0,704 0,673 0,697 0,694 0,682 0,784 0,714 0,711 1,00 ΠΛΑΤΑΝΙ 0,717 0,698 0,701 0,690 0,776 0,710 0,684 0,724 0,734 0,744 0,642 0,720 0,727 0,872 0,694 0,687 0,742 0,683 0,689 0,721 0,697 0,698 0,696 0,710 0,734 0,722 0,698 0,707 0,675 0,687 0,732 0,690 0,706 1,00 ΠΛΥΤΟ 0,715 0,708 0,708 0,677 0,713 0,711 0,706 0,751 0,744 0,722 0,675 0,741 0,706 0,746 0,696 0,686 0,738 0,687 0,694 0,722 0,704 0,706 0,714 0,697 0,698 0,721 0,691 0,703 0,668 0,691 0,706 0,722 0,710 0,753 1,00 ΠΟΤΑΜΙΣΙΟ 0,713 0,720 0,706 0,703 0,693 0,720 0,660 0,739 0,732 0,711 0,689 0,738 0,714 0,690 0,690 0,689 0,713 0,727 0,708 0,737 0,698 0,711 0,700 0,703 0,713 0,732 0,697 0,731 0,676 0,680 0,689 0,725 0,707 0,694 0,746 1,00 ΡΑΖΑΚΙ ΑΡΧ 0,697 0,715 0,710 0,698 0,731 0,721 0,682 0,718 0,722 0,713 0,665 0,722 0,673 0,711 0,711 0,693 0,728 0,689 0,704 0,701 0,706 0,727 0,724 0,715 0,694 0,728 0,690 0,715 0,680 0,704 0,715 0,718 0,697 0,721 0,776 0,751 1,00 ΡΕΦΟΣΚΟ 0,720 0,707 0,710 0,724 0,708 0,707 0,684 0,713 0,725 0,715 0,668 0,703 0,696 0,700 0,703 0,718 0,703 0,691 0,724 0,713 0,717 0,732 0,729 0,727 0,691 0,728 0,693 0,727 0,734 0,701 0,701 0,718 0,689 0,704 0,717 0,734 0,758 1,00 ΡΟΔΙΤΗΣ 0,742 0,718 0,724 0,704 0,731 0,729 0,696 0,738 0,734 0,741 0,701 0,731 0,724 0,737 0,703 0,707 0,717 0,697 0,727 0,732 0,731 0,724 0,718 0,727 0,720 0,734 0,727 0,732 0,697 0,690 0,724 0,710 0,700 0,744 0,734 0,739 0,727 0,760 1,00 ΡΟΜΠΟΛΑ ΑΣΠ 0,708 0,710 0,707 0,693 0,652 0,704 0,701 0,701 0,711 0,682 0,853 0,703 0,682 0,680 0,711 0,668 0,706 0,689 0,698 0,701 0,717 0,673 0,698 0,704 0,708 0,689 0,718 0,707 0,711 0,741 0,707 0,724 0,745 0,668 0,706 0,697 0,701 0,693 0,732 1,00 ΡΩΜΕΙΚΟ 0,713 0,717 0,717 0,694 0,696 0,711 0,691 0,722 0,727 0,683 0,677 0,744 0,711 0,721 0,704 0,700 0,732 0,732 0,756 0,798 0,718 0,751 0,694 0,711 0,696 0,696 0,706 0,737 0,690 0,689 0,717 0,694 0,710 0,703 0,718 0,738 0,711 0,700 0,722 0,714 1,00 ΣΑΒΒΑΤΙΑΝΟ 0,704 0,711 0,708 0,700 0,701 0,717 0,706 0,720 0,732 0,720 0,689 0,704 0,714 0,729 0,696 0,689 0,710 0,679 0,711 0,697 0,707 0,691 0,717 0,708 0,707 0,710 0,706 0,722 0,670 0,677 0,689 0,717 0,676 0,725 0,701 0,707 0,722 0,737 0,818 0,722 0,713 1,00 ΣΙΔΕΡΙΤΗΣ 0,683 0,684 0,693 0,690 0,677 0,698 0,684 0,684 0,700 0,639 0,673 0,697 0,687 0,655 0,703 0,698 0,691 0,691 0,698 0,693 0,691 0,687 0,690 0,721 0,683 0,700 0,670 0,721 0,706 0,656 0,701 0,673 0,677 0,662 0,663 0,669 0,721 0,690 0,721 0,704 0,703 0,739 1,00 ΣΟΥΛΤΑΝΙΝΑ 0,690 0,706 0,706 0,706 0,662 0,691 0,666 0,675 0,687 0,655 0,658 0,701 0,677 0,659 0,687 0,689 0,679 0,707 0,686 0,694 0,684 0,689 0,694 0,694 0,676 0,698 0,703 0,703 0,701 0,672 0,672 0,680 0,670 0,652 0,668 0,696 0,691 0,697 0,700 0,666 0,707 0,687 0,703 1,00 ΣΤΑΥΡΩΤΟ 0,693 0,694 0,697 0,686 0,721 0,714 0,703 0,739 0,735 0,745 0,666 0,704 0,697 0,760 0,704 0,675 0,724 0,687 0,717 0,717 0,715 0,703 0,720 0,728 0,749 0,710 0,711 0,697 0,684 0,689 0,714 0,700 0,690 0,768 0,738 0,693 0,720 0,697 0,779 0,700 0,718 0,744 0,683 0,690 1,00 ΦΡΑΟΥΛΑ ΚΟΚ 0,693 0,711 0,706 0,708 0,687 0,706 0,686 0,714 0,713 0,694 0,658 0,713 0,691 0,704 0,701 0,706 0,732 0,690 0,711 0,722 0,696 0,731 0,700 0,708 0,710 0,746 0,691 0,700 0,701 0,700 0,711 0,686 0,668 0,706 0,732 0,701 0,728 0,706 0,734 0,717 0,718 0,721 0,691 0,713 0,758 1,00

15 AGIORGITIKO KORINTHIAKH-ST KOLINIATIKO LAGORTHI LHMNIO BAPSA MAYRODAFNI MAYROTRAGANO MAYRO-MESENIK MANTILARI MONEMBASIA NEGKOSKA NTEMPINA AIDANI-LEYK AIDANI-MAYR DAFNIA KOTSIFALI KRHTIKO LADIKINO ROMEIKO BILANA BIDIANO THRAPSATHIRI LIATIKO MALAGOYSIA ASYRTIKO KATSANO PLATANI GLIKERITHRA RODITIS SABATIANO STAYROTO FRAOYLA-KOK PLYTO RAZAKI-ARX POTAMISIO REFOSKO BERZAMI MOSXOFILERO XINOMAYRO GOYSTOLIDI ROMPOLA-ASP ATHIRI MOSXATO-SAMOY SOYLTANINA SIDERITIS

16 From the cultivars studied, high degree of genetic similarity appears in the following pairs of cultivars: Aidani aspro - Aidani mavro (Ι= 0.963) Katsano Platani (Ι= 0.872) Vilana Vidiano (Ι= 0.827) Goustolidi Rompola (Ι= 0.853) Thrapsathiri Vidiano (Ι= 0.818).

17 Aidani aspro- Aidani mavro: They are identical for 31 primers. This high degree of genetic similarity (I=0.963) indicates that these cultivars originated from a common stock (maybe due to mutation). Katsano- Platani : Same electrophoretical patterns for 11 primers with degree of genetic similarity Ι= The results showed that they are different cultivars. Vilana- Vidiano (0.827) and Vidiano- Thrapsathiri (0.818): This genetic similarity showed that these cultivars (which have been cultivated for many years in Crete) are relative.

18 The degree of genetic similarity among the cultivars Athiri and Thrapsathiri is quite low (0.713), even though Thrapsathiri is considered a different type of Athiri. They are cultivars that arose probably from mutations. Goustolidi Rompola (0.853): Showed identity in 7 primers. They are grown in the Ionian Islands and they are relatives cultivars.

19 There is genetic variation among studied greek cultivars. RAPDs is a reliable and very useful method for the identification and genetic analysis of grape cultivars.

20 Thank you