The culture of lower respiratory specimens may result in more unnecessary microbiologic effort than any other type of specimen

Transcript

1 The culture of lower respiratory specimens may result in more unnecessary microbiologic effort than any other type of specimen Bartlett RC, Medical Microbiology: Quality Cost and Clinical Relevance

2 To Mηθξνβηνινγηθό Γείγκα ζηε Γηάγλσζε ησλ Λνηκώμεσλ: από ηε Λήςε ζηελ Αμηνιόγεζε Γείγκαηα από ην Καηώηεξν Αλαπλεπζηηθό Λ. Ζέπβα Επγαζηήπιο Κλινικήρ Μικποβιολογίαρ Αηηικό Νοζοκομείο Εθνικό και Καποδιζηπιακό Πανεπιζηήμιο Αθηνών

3 Γηάθξηζε Πλεπκνλίαο Πλεπκνλία ηεο θνηλόηεηαο (CAP, Community Acquired Pneumonia) - αζζελείο πνπ λνζειεύνληαη ζην ζπίηη - αζζελείο πνπ εηζάγνληαη ζην λνζνθνκείν - αζζελείο πνπ εηζάγνληαη ζηε ΜΔΘ Ννζνθνκεηαθή Πλεπκνλία (HAP, hospital acquired pneumonia) - εθδειώλεηαη 48 ώξεο κεηά ηελ εηζαγσγή ζην λνζνθνκείν Πλεπκνλία ηoπ Αλαπλεπζηήξα (VAP, Ventilator Associated Pneumonia) - εθδειώλεηαη ώξεο κεηά ηελ δηαζσιήλσζε Πλεπκνλία πνπ ζρεηίδεηαη κε πξνεγνύκελε λνζειεία (HCAP, Healthcare Associated Pneumonia) ε ηη ρξεζηκεύεη ε δηάθξηζε από εξγαζηεξηαθή άπνςε?? Δξγαζηεξηαθή Γηάγλσζε = Αηηηνινγηθή Γηάγλσζε ζπζρεηηζκόο κε πηζαλά παζνγόλα (σζηόζν, αιιειεπηθάιπςε) δηαθνξεηηθή πξνζέγγηζε/επηηπρία εξγαζηεξηαθήο δηάγλσζεο

4 Παζνγόλα Bαθηεξηαθά Μπθνβαθηεξίδηα Ινγελε Μύθεηεο

5 πρλόηεξα αίηηα πλεπκνλίαο ηεο θνηλόηεηαο Δίδνο Αζζελώλ Αζζελείο πνπ λνζειεύνληαη ζην ζπίηη Αζζελείο πνπ λνζειεύνληαη ζην λνζνθνκείν (εθηόο ΜΔΘ) Αζζελείο πνπ λνζειεύνληαη ζηε ΜΔΘ Αηηηνινγία Streptococcus pneumoniae Mycoplasma pneumoniae Haemophilus influenzae Chlamydophila pneumoniae Αλαπλεπζηηθνί ηνί Streptococcus pneumoniae Mycoplasma pneumoniae Chlamydophila pneumoniae Haemophilus influenzae Legionella species Δηζξόθεζε Αλαπλεπζηηθνί ηνί Streptococcus pneumoniae Staphylococcus aureus Legionella species Gram-αξλεηηθά βαθηεξίδηα Haemophilus influenzae Αλαπλεπζηηθνί ηνί: influenza A θαη B, adenovirus, RSV, parainfluenza

6 - Λήςε Γεηγκάησλ - Μεηαθνξά ζην Δξγαζηήξην - Δπεμεξγαζία - Φύιαμε Η ρξώζε Gram θαη ε θαιιηέξγεηα πηπέισλ πξέπεη λα δηελεξγνύληαη κόλνλ εάλ κπνξεί λα ιεθζεί δείγκα πςειήο πνηόηεηαο θαη εάλ θαηά ηελ ζπιινγή, κεηαθνξά θαη επεμεξγαζία ηνπ δείγκαηνο εθαξκόδνληαη κέηξα πνπ εμαζθαιίδνπλ ηελ πνηόηεηα ηεο εμέηαζεο. Δπίζεο, πξέπεη λα δηελεξγνύληαη πξηλ ηελ ρνξήγεζε ηεο αληηβηνηηθήο ζεξαπείαο. IDSA / ATS Consensus Guidelines on the Management of Community-Acquired Pneumonia in Adults. CID 2007, 44 (suppl 2) S27.

7 Γηάγλσζε Λνηκώμεσλ Καη. Αλαπλεπζηηθνύ Δίδε Κιηληθώλ Γεηγκάησλ «Με Eπεκβαηηθά» Πηύεια ( θαιιηέξγεηεο) Πεξηθεξηθό αίκα ( θαιιηέξγεηεο) Ούξα ( αλίρλεπζε αληηγόλσλ) Οξόο αίκαηνο ( αλίρλεπζε αληηζσκάησλ) Γείγκαηα αλώη αλαπλ/ζηηθνύ ( αλίρλεπζε αληηγόλσλ)

8 Γείγκαηα Καηώηεξνπ Αλαπλεπζηηθνύ Βξνγρνζθνπηθή Λήςε Γείγκα πξνζηαηεπκέλεο ςήθηξαο Βξνγρνθπςειηδηθό έθπιπκα Βξνγρηθό έθπιπκα Βξνγρηθά μύζκαηα Γηαβξνγρηθή βηνςία Γηαβξνγρηθή αλαξξόθεζε κε βειόλε Αιιε «Δπεκβαηηθή» Λήςε Σξαρεηαθή αλαξξόθεζε Πιεπξηηηθό πγξό Γηαζσξαθηθή βηνςία κε βειόλε Αλνηρηή βηνςία πλεύκνλα

9 Πηύεια Ι. ΑΤΣΟΜΑΣΗ ΑΠΟΥΡΔΜΦΗ (EXPECTORATED SPUTUM) - Καηαιιειόηεξν είλαη ην πξσηλό δείγκα πξηλ από ην πξόγεπκα. - Δάλ ππάξρνπλ νδνληνζηνηρίεο αθαηξνύληαη. - Ο άξξσζηνο πιέλεη θαιά ην ζηόκα ηνπ κε απνζηεηξσκέλν λεξό ή θπζηνινγηθό νξό. - Δθπαηδεύεηαη λα δώζεη πηύεια κε βαζηά απόρξεκςε. - Δάλ ρξεηάδεηαη δεηείηαη ε βνήζεηα θπζηθνζεξαπεπηνύ. - Σα πηύεια ζπιιέγνληαη ζε επξύζηνκν δνρείν πνπ θιείλεη θαιά. - Σν δνρείν ζεκαίλεηαη κε ην όλνκα ηνπ αξξώζηνπ - Απνζηέιιεηαη ζην εξγαζηήξην ζε < 1 ώξα.

10 ΙΙ. ΠΡΟΚΛΗΣΑ ΠΣΤΔΛΑ (INDUCED SPUTUM) Σν δείγκα ζπιιέγεηαη κεηά από εηζπλνή δηαιύκαηνο NaCl 3 % ππό κνξθή αεξνζόιεο ζε λεθεινπνηεηή γηα ρξνληθό δηάζηεκα min

11 Βξνγρνθπςειηδηθό Έθπιπκα (BAL) ηαζεξνπνηείηαη ην βξνγρνζθόπην. Πξνζαξκόδεηαη ην δνρείν ζπιινγήο. Ξεπιέλνληαη νη θαηώηεξνη αεξνθόξνη νδνί ζηαδηαθά θαη αλά 20 ml κε θπζηνινγηθό νξό ζεξκνθξαζίαο 37 ν C. Αθνινπζεί ε ζπιινγή ηνπ πγξνύ ζην δνρείν ζπιινγήο (παγίδα ησλ ml). Η δηαδηθαζία επαλαιακβάλεηαη 3 5 θνξέο γηα θάζε ζεκείν επηινγήο. Ο ζπλνιηθόο όγθνο είλαη ml.

12 Πξνζηαηεπκέλε Βξνγρηθή Φήθηξα (Protected Specimen Βrushings, PSB) Η βνύξηζα ηνπνζεηείηαη ζε 1 ml απνζηεηξσκέλνπ θπζηνινγηθνύ νξνύ, ή ζε 1 ml Ringer s lactate. πιινγή εθθξίζεσλ από ηα άπσ βξνγρηόιηα εκεηώλνληαη ηα ζηνηρεία ηνπ αξξώζηνπ θαη ε ώξα ηεο ζπιινγήο. Μεηαθέξεηαη ζην εξγαζηήξην.

13 - IDSA / ATS Consensus Guidelines on the Management of Community-Acquired Pneumonia in Adults. CID 2007, 44 (suppl 2) S27. πζηάζεηο εθαξκνγήο δηαγλσζηηθώλ εμεηάζεσλ CAP παξακέλνπλ αληηθαηηθέο Αζζελείο κε CAP πνπ ΓΔΝ λνζειεύνληαη ζην λνζνθνκείν: νη δηαγλσζηηθέο εμεηάζεηο ξνπηίλαο είλαη πξναηξεηηθέο Αζζελείο κε CAP πνπ λνζειεύνληαη ζην λνζνθνκείν θαη κε αληίζηνηρεο θιηληθέο ελδείμεηο: αηκνθαιιηέξγεηεο θαη θαιιηέξγεηα πηπέισλ πξηλ ηελ ρνξήγεζε ζεξαπείαο (γηα ηνπο ππόινηπνπο: πξναηξεηηθέο) Αζζελείο κε ζνβαξή ινίκσμε CAP: ηνπιάρηζηνλ αηκνθαιιηέξγεηεο, αληηγόλα νύξσλ (L. pneumophila θαη S. pneumoniae) θαη θαιιηέξγεηα πηπέισλ. ε δηαζσιελσκέλνπο θαιιηέξγεηα αλαξξνθήζεσλ ηξαρείαο - Guidelines for the Management of Adults with Hospital-acquired, Ventilator-associated, and Healthcare-associated pneumonia. Am J Respir Crit Care Med 2005, 171:388. Αληίζεηα ζε αζζελείο κε VAP: επηβεβιεκέλεο νη θαιιηέξγεηεο

14 Κιηληθέο ελδείμεηο πεξηζζόηεξν εθηεηακέλνπ δηαγλσζηηθνύ ειέγρνπ Δλδεημε Καιιηέξγεηα Αίκαηνο Καιιηέξγεηα Πηπέισλ Αg νύξσλ Legionella Αg νύξσλ S. pneumoniae Αιιεο εμεηάζεηο Δηζαγσγή ζε ΜΔΘ Υ Υ Υ Υ Υ 1 Απνηπρία εμσλνζνθ. ζεξαπείαο Υ Υ Υ πειαηώδεηο δηεζήζεηο Υ Υ Υ 2 Λεπθνπελία Υ Υ Υξόληα θαηάρξεζε αιθνόι Υ Υ Υ Υ Υξόληα επαηνπάζεηα Υ Υ νβαξή ΥΑΠ/άιιε αλαπλ. λόζνο Αζπιελία Υ Υ Πξόζθαην ηαμίδη (2 εβδ.) Υ Υ 3 (+) ηεζη Legionella (νύξα) Υ 3 - (+) ηεζη S. pneumoniae (νύξα) Υ Υ - Πιεπξηηηθή ζπιινγή Υ Υ Υ Υ Υ 4 1 Αλαξξνθήζεηο ηξαρείαο (δηαζσιήλσζε), πηζαλώο βξνγρνζθόπεζε ή κε βξνγρνζθνπηθό BAL 2 Καιιηέξγεηα γηα κύθεηεο θαη θπκαηίσζε 3 Καιιηέξγεηα γηα Legionella 4 Παξαθέληεζε θαη θαιιηέξγεηα πιεπξηηηθνύ πγξνύ Υ

15 Κιηληθέο ελδείμεηο εθαξκνγήο πην εθηεηακέλνπ δηαγλσζηηθνύ ειέγρνπ κε βάζε 2 θξηηήξηα: 1. Σν απνηέιεζκα ηεο εμέηαζεο είλαη πηζαλό λα ηξνπνηήζεη ηελ αγσγή 2. Η εμέηαζε αλακέλεηαη όηη ζα έρεη πςειή δηαγλσζηηθή απόδνζε

16 Mεηαθνξά ηνπ δείγκαηνο Από ηελ δεηγκαηνιεςία κέρξη ηελ επεμεξγαζία ηνπ θιηληθνύ δείγκαηνο κέγηζηε θαζπζηέξεζε 2 σξώλ Δηδάιισο, θύιαμε δείγκαηνο ζηνπο 4 0 C

17 Υξεζηκόηεηα ρξώζεο Gram ζηα πηύεια (Cumitech 7B, 2004) Βηβιηνγξαθία: απόξξηςε ηεο εμέηαζεο θαλαηηθή ππνζηήξημε θιηληθήο ρξεζηκόηεηαο Γηαρσξηζκόο δεηγκάησλ: απηά πνπ πηζαλόλ εκπεξηέρνπλ ην παζνγόλν θαη απηά πνπ είλαη επηκνιπζκέλα από ηελ ζηνκαηνθαξπγγηθή ρισξίδα Πξνζδηνξηζκόο είδνπο θπηηάξσλ ηνπ μεληζηή θαη θπξίαξρνπ κηθξννξγαληζκνύ πξνθαηαξθηηθέο πιεξνθνξίεο αξρηθή επηινγή ηεο ζεξαπείαο Οδεγόο επηινγήο «πηζαλώλ παζνγόλσλ» πνπ αλαπηύζζνληαη ζηελ θαιιηέξγεηα ( ηαπηνπνίεζε, έιεγρνο επαηζζεζίαο)

18 Κξηηήξηα δηαινγήο/αμηνιόγεζεο ρξώζεο Gram Πξνηππνπνίεζε ησλ θξηηεξίσλ ηεο ρξώζεο Gram απαξαίηεηε εμαζθάιηζε αληηθεηκεληθήο αλάγλσζεο ησλ απνηειεζκάησλ από θάζε εμεηαζηή εμαζθάιηζε πνηόηεηαο ηνπ θιηληθνύ δείγκαηνο Γηάθνξα πνζνηηθά θξηηήξηα έρνπλ πξνηαζεί γηα ηελ δηαινγή θαηάιιεισλ (πνηνηηθώλ) δεηγκάησλ Η παξνπζία πνιιώλ επηζειηαθώλ θπηηάξσλ είλαη ελδεηθηηθή επηκόιπλζεο κε ζηνκαηνθαξπγγηθή ρισξίδα ππνδεηθλύεη ηελ αλαγθαηόηεηα λέαο δεηγκαηνιεςίαο Σσόλιο: «Το κλινικό δείγμα δεν ανηιπποζυπεύει εκκπίζειρ ηος καηώηεπος αναπνεςζηικού ζςζηήμαηορ και αποππίθθηκε. Σςνιζηάηαι η επανάλητη ηηρ δειγμαηολητίαρ.»

19 Καιιηεξγεηηθά Τιηθά, πλζήθεο Η πιεηνςεθία ησλ βαθηεξηαθώλ παζνγόλσλ αλαπηύζζεηαη ζηα θνηλά θαιιηεξγεηηθά πιηθά Δπηινγή βιελνππώδνπο/αηκαηεξνύ ηκήκαηνο δείγκαηνο 5% αηκαηνύρν, MacConkey, ζνθνιαηόρξσκν 35 0 C, 5% CO 2, ώξεο Γελ ελδείθλπληαη: ρξήζε εκπινπηηζηηθώλ δσκώλ, αλαεξόβηα θαιιηέξγεηα

20 Πνζνηηθέο Καιιηέξγεηεο BAL θαη PSB ΑΞΙΟΛΟΓΗΗ ΓΔΙΓΜΑΣΟ BAL Παζνγόλνο κηθξννξγαληζκόο : 10 4 CFU / ml ΑΞΙΟΛΟΓΗΗ ΓΔΙΓΜΑΣΟ PSB Παζνγόλνο κηθξννξγαληζκόο 10 3 CFU/ml

21 Καιιηέξγεηεο Αίκαηνο (ΑΚ) ζηελ Πλεπκνλία πρλόηεηα (+) ΑΚ: 5%-14% (πηζαλό παζνγόλν) - Με επηιεγκέλνη αζζελείο κε CAP πνπ λνζειεύνληαη ζε λνζνθνκείν, ρσξίο πξνεγνύκελε ρνξήγεζε αληηβίσζεο - ε ρνξήγεζε αληηβίσζεο: ε ζπρλόηεηα θαηά 50% - πρλόηεξν παζνγόλν: Streptococcus pneumoniae Μεηνλεθηήκαηα Αηκνθαιιηεξγεηώλ (1) Τςειό θόζηνο αηκνθαιιηεξγεηώλ (2) Φεπδώο (+) αηκνθαιιηέξγεηεο: ζεκαληηθέο (-) ζπλέπεηεο Η θιηληθή ηνπο ρξεζηκόηεηα έρεη ακθηζβεηεζεί, ζπγθεθξηκέλα, ε αδηάθξηηε εθαξκνγή ηνπο

22 Δπνκέλσο, πόηε ζπληζηάηαη ε ιήςε ΑΚ?? πξνζπάζεηα αλεύξεζεο παξαγόλησλ πνπ ζπζρεηίδνληαη (+) ΑΚ παξάγνληεο θηλδύλνπ ζνβαξήο πλεπκνλίαο κεγαιύηεξε δηαγλσζηηθή αμία ζνβαξή πλεπκνλία «Πξναηξεηηθή» εμέηαζε γηα λνζειεπόκελνπο αζζελείο

23 Πλεπκνληθέο Μπθνβαθηεξηδηώζεηο Mycobacterium tuberculosis (ΜΣΒ) απνκόλσζε πάληα παζνγλσκνληθή (?) Αηππα Μπθνβαθηεξίδηα (>180) δηάθξηζε κεηαμύ επηκόιπλζεο, απνηθηζκνύ θαη λόζνπ δηαγλσζηηθά θξηηήξηα ATS (2007???) - απνκόλσζε από 2 δείγκαηα πηπέισλ ηνπιάρηζηνλ - απνκόλσζε από 1 ηνπιάρηζηνλ δεηγκα BAL - ζπκβαηά ηζηνπαζνινγηθά επξήκαηα βηνςίαο πλεύκνλα Καλόλαο ησλ 3 δηαδνρηθώλ πξσηλώλ δεηγκάησλ (ηνπιάρηζηνλ) θαηώη. αλαπλεπζηηθνύ ή γαζηξηθνύ πγξνύ ΜΣΒ αύμεζε επαηζζεζίαο δηάγλσζεο Αηππα δπλαηόηεηα αμηνιόγεζεο απνκόλσζεο

24 Πλεπκνληθέο Μπθνβαθηεξηδηώζεηο Πνηέ λεξό ηεο βξύζεο Πάληα ηαρεία ιήςε απνηειεζκάησλ / άκεζε ελεκέξσζε Κιηληθήο Δπίζεο «εμεηδηθεπκέλα» εξγαζηήξηα (ηερλνγλσζία, βηναζθάιεηα) Δπεμεξγαζία δείγκαηνο Γηαιπηνπνίεζε (δηάιπκα N-αθεηπιν-L-θπζηεΐλεο) Δμνπδεηέξσζε ρισξίδαο (δηάιπκα NaOH) - επηηξεπηό πνζνζηό επηκόιπλζεο < 5% πκπύθλσζε (ςπρόκελε θπγόθεληξνο, 3.000xg) ε γαζηξηθό πγξό: πξνεγείηαη άκεζε εμνπδεηέξσζε ph Ομεάληνρε Υξώζε Ziehl-Neelsen (Kinyoun, Auramine) ηεξείηαη επαηζζεζίαο (10 4 CFU/ml), εηδηθόηεηαο (είδνο?) Πνζνηηθή εθθξαζε απνηειέζκαηνο (Νν κπθνβαθηεξηδίσλ / ν.π.)

25 Καιιηέξγεηεο Μπθνβαθηεξηδίσλ Τγξό ζξεπηηθό πιηθό θαη ζηεξεό (Loewenstein-Jensen) Δκπνξηθά ζπζηήκαηα πγξώλ θαιιηεξγεηώλ αύμεζε επαηζζεζίαο (πεξίπνπ θαηά ην 1/3) ηαρύηεξνο ρξόλνο ζεηηθνπνίεζεο (πεξίπνπ 10 εκέξεο) Σαπηνπνίεζε ζηειέρνπο: πιένλ κνξηαθή (2-6 ώξεο) Νέεο κνξηαθέο ηερληθέο Γηάγλσζεο Φπκαηίσζεο Ακεζε κνξηαθή αλίρλεπζε ΜΣΒ ζε θιηληθό δείγκα [νμ. ρξώζε (+)] Ακεζε κνξηαθή αλίρλεπζε αληνρήο ζε ξηθακπηθίλε θαη ηζνληαδίδε

26 Καιιηέξγεηεο αίκαηνο γηα ΜΣΒ ζηεξνύληαη δηαγλσζηηθήο αμίαο επαηζζεζία κόλν 10% (ζε ελδεκηθή θπκαηίσζε θαη HIV νξνζεηηθόηεηα) Σσόλιο «Οι καλλιέπγειερ αίμαηορ για ΜΤΒ ζηεπούνηαι διαγνυζηικήρ αξίαρ (εςαιζθηζία έυρ 10% και μόνον ζε αζθενείρ με εκζεζημαζένη ανοζοκαηαζηολή). Σςνιζηάηαι η λήτη πιο καηάλληλος δείγμαηορ για ηην διάγνυζη ηηρ θςμαηίυζηρ»

27 Αλίρλεπζε αληηγόλσλ ζηα νύξα - Kπξίσο, κεζνδνινγία αλνζνρξσκαηνγξαθίαο - Απνηειέζκαηα εμέηαζεο: 15 min Legionella pneumophila νξόηππνο 1 Streptococcus pneumoniae Δκθαλίδνπλ κεγαιύηεξε δηαγλσζηηθή ρξεζηκόηεηα ζε αζζελείο κε ζνβαξόηεξε ινίκσμε ΔΡΧΣΗΜΑ: ζα νδεγήζεη έλα ζεηηθό απνηέιεζκα ζε αιιαγή ηεο εκπεηξηθήο αληηβηνηηθήο αγσγήο?? ΔΡΧΣΗΜΑ: Ση ζεκαζία έρεη έλα αξλεηηθό απνηέιεζκα??

28 Πξόηππε Μέζνδνο Γηάγλσζεο Λεγεσλέιισζεο Καιιέξγεηεο ζε εηδηθό ζξεπηηθό πιηθό Κιηληθό δείγκα: εθθξίζεηο θαηώη. αλαπλεπζηηθνύ θαη άιια Διεγρνο θαηαιιειόηεηαο (ρξώζε Gram) δελ ελδείθλπηαη Legionellae δελ ρξσκαηίδνληαη ζηελ ρξώζε Gram Buffered Charcoal Yeast Extract (BCYE-α) (α-θεηνγινπηαξηθό, θπζηετλε, ζίδεξνο, ελεξγόο άλζξαθαο) Δθιεθηηθό άγαξ: BMPA-α (πνιπκπμίλε, αληζνκπθίλε, θεθακαλδόιε) Δπώαζε 7-14 εκέξεο ( C, αηκόζθαηξα πεξηβάιινληνο) Καζεκεξηλόο έιεγρνο Δπηκόιπλζε: ρξήζε δηαιύκαηνο 0.2Μ KCl, ph 2.2 Δκθάληζε ραξαθηεξηζηηθώλ απνηθηώλ ( ground glass ) Σαπηνπνίεζε: αληη-νξνί, κνξηαθέο ηερληθέο

29 Δμεηάζεηο δηάγλσζεο ηεο λόζνπ ησλ ιεγεσλαξίσλ πνπ πξνθαιείηαη από ηελ Legionella pneumophila ** [ Mandell, Infectious Diseases ] Δμέηαζε Δίδνο θιηληθνύ δείγκαηνο Δπαηζζεζία Δηδηθόηεηα ρόιηα Καιιηέξγεηα πηύεια, άιιεο εθθξίζεηο θαη. αλαπλεπζηηθνύ, πιεπξηηηθό, αίκα, ηζηνί, πγξά 20-95% 100% Δλδερνκέλσο ζεηηθή πνιιέο εκέξεο κεηά ηελ ζεξαπεηα, απαηηεί εηδηθά πιηθά θαη εκπεηξία Αληηγνλνπξία νύξα 60-95% >99% Τςειόηεξε επαηζζεζία γηα L. pneumophila νξόηππνπ 1, ηύπνπ Pontiac Άκεζνο Αλνζνθζ/ζκόο όπσο ζε θαιιηέξγεηα 20-50% 99% Τςειόηεξε εηδηθόηεηα κε κνλνθισληθό Ab, εκπεηξία Αλίρλεπζε Αb 2 δείγκαηα νξνύ 20-70% 95-99% Τςειόηεξε εηδηθόηεηα γηα L. pneumophila νξόηππνπ 1 Μνξηαθόο Πνιιαπια/ζκόο πηύεια, εθθξίζεηο θαη. αλαπλ/θνύ, νύξα 20-75% 90-95% Με πξνηππνπνηεκέλε, θαιή απόδνζε ζε θέληξα αλαθνξάο ** Χαμηλόηεπη εςαιζθηζία ζε άλλα είδη (ιδιαίηεπα ηυν ανοζολογικών ηεσνικών)

30 Legionella pneumophila νξόηππνο 1 Δκπνξηθά θηη αληρλεύνπλ πάληα ηελ L. p. νξόηππνπ % όισλ ησλ πεξηζηαηηθώλ λόζνπ ιεγεσλαξίσλ Τπόηππνο Pontiac: 85% ησλ πεξηζηαηηθώλ Γεσγξαθηθή θαηαλνκή άιισλ νξνηύπσλ ή εηδώλ πνηθίιιεη πκπύθλσζε ηνπ δείγκαηνο αύμεζε Δπαηζζεζίαο Δμέηαζε ζεηηθή από ηελ 1 ε εκέξα εθδήισζεο ηεο λόζνπ, έσο κεηά από εβδνκάδεο ( αμηνιόγεζε!) πληζηάηαη ε θαιιηέξγεηα ζε ζεηηθό απνηέιεζκα (γηα επηδεκηνινγηθνύο ιόγνπο) Σσόλιο: Ενα απνηηικό αποηέλεζμα δεν αποκλείει ηην λοίμυξη από ζηελέση L. pneumophila άλλυν οποηύπυν (ή και άλλυν ειδών)

31 Αξιολόγηζη: Κλινικο-Οικονομική Δμέηαζε Αληηγνλνπξίαο-Legionella ζην Αηηηθό Nνζνθνκείν 3 έηε δείγκαηα 14 (+) αζζελείο (0.6%) αλαδξνκηθόο έιεγρνο θαθέιισλ αζζελώλ 13/14 αζζελείο αιεζώο (+) 93% ΘΠΑ εμέηαζεο Binax Κόζηνο αληηδξαζηεξίσλ: 25 επξώ/ηεζη επξώ γηα ηε δηάγλσζε 13 αζζελώλ (ρσξίο λα απνθιεηζζεί ε ινίκσμε ζηνπο αζζελείο) πκπέξαζκα νξζή θιηληθή εθαξκνγή ηεο εμέηαζεο

32 Δμέηαζε αληηγνλνπξίαο: S. pneumoniae [Αλίρλεπζε C-polysaccharide] ε ελήιηθεο: Δπαηζζεζία 50-80%, Δηδηθόηεηα >90% Πιενλεθηήκαηα: ρξήζηκν ζε κε έγθαηξε ιήςε θαιιηεξγεηώλ (ρνξήγεζε ζεξαπείαο), ηαρεία ιήςε απνηειεζκάησλ (15 min) Θεηηθή εμέηαζε ζην 80% αζζελώλ κε (+) αηκνθαιιηέξγεηα Υακειόηεξα % ζε (-) αηκνθαιιηέξγεηα ε ζύγθξηζε κε ρξώζε Gram: ζπκθσλία ζεηηθώλ απνηειεζκάησλ κόλν ζην 28%

33 Φεπδώο ζεηηθά απνηειέζκαηα: παηδηά (απνηθηζκόο από S. pneumoniae, ρξόληα αλαπλεπζηηθή λόζνο) Μεηνλεθηήκαηα: έιιεηςε εηδηθόηεηαο (παηδηά), κε δπλαηόηεηα δηελέξγεηαο αληηβηνγξάκκαηνο, θόζηνο (25 επξώ) Αθξηβήο ξόινο εμέηαζεο ζηε δηάγλσζε??? Πάληα ζε ζπλάξηεζε κε ηελ θιηληθή εηθόλα

34 Οξνινγηθή Γηάγλσζε Πλεπκνλίαο, θπξίσο: Mycoplasma pneumoniae Chlamydophila pneumoniae Legionella spp Μέζνδνη κηθξν-αλνζνθζνξηζκνύ, ELISA Δμέηαζε δύν δεηγκάησλ νξνύ: 1 ν (νμείαο θάζεο) θαη 2 ν δείγκα (θάζε αλάξξσζεο) Σαρεία δηάγλσζε κε 1 ν δείγκα νξνύ: κόλν ζε αλίρλεπζε IgM ή IgA Δηδάιισο: νινθιήξσζε ζεξαπείαο πξηλ από ηελ ιήςε 2 νπ δείγκαηνο

35 Μεζνδνινγίεο Πνιιαπιαζηαζκνύ Ννπθιεΐθώλ Ομέσλ (PCR) Η εθαξκνγή κνξηαθώλ ηερληθώλ γηα ηελ άκεζε αλίρλεπζε ησλ παζνγόλσλ ζην θιηληθό δείγκα δελ έρεη αθόκα απνδείμεη ηελ ρξεζηκόηεηά ηεο Διιεηςε εκπνξηθώλ κεζόδσλ (πξνηππνπνίζε θαη αμηνιόγεζε) Πιεζώξα πηζαλώλ παζνγόλσλ

36 The major goal of the clinical microbiology laboratory is to provide information of maximal clinical or epidemiological usefulness as rapidly as is consistent with acceptable accuracy and minimal cost Sanford JP, Medical Microbiology: Quality Cost and Clinical Relevance

37 Σαρεία αλίρλεπζε αληηγόλσλ ηνπ ηνύ ηεο γξίπεο Η απόδνζε ηεο εμέηαζεο πνηθίιεη αλάινγα κε ην ηεζη, είδνο θιηληθνύ δείγκαηνο, δηάξθεηα λόζνπ θαη ειηθία αζζελνύο ε ελήιηθεο: Δπαηζζεζία 50-70%, Δηδηθόηεηα ζρεδόλ 100% Πιενλεθηήκαηα: πςειή εηδηθόηεηα, ηαρύηεηα δηάγλσζεο, δηάθξηζε κεηαμύ ηύπνπ Α θαη Β (ζε κεξηθέο), ειάηησζε ρνξήγεζεο αληηβηνηηθώλ, ζέκαηα ειέγρνπ ινηκώμεσλ ζην πεξηβάιινλ ηνπ λνζνθνκείνπ, κπνξεί λα νδεγήζεη ζε απόθαζε ρνξήγεζεο εηδηθήο ζεξαπείαο Μεηνλεθηήκαηα: θόζηνο, πςειό πνζνζηό ςεπδώο αξλεηηθώλ, ςεπδώο ζεηηθά ζε ινίκσμε από αδελν-ηνύο (επαηζζεζία όρη κεγαιύηεξε από θιηληθή δηάγλσζε)

38 Ακεζε αλίρλεπζε αληηγόλσλ ηνπ ηνύ ηεο γξίπεο, ηνπ RSV κε αλνζνθζνξηζκό Απαηηνύληαη πεξίπνπ 2 ώξεο γηα ιήςε απνηειεζκάησλ Γηα ηνλ ηό ηεο γξίπεο κεγαιύηεξε επαηζζεζία (85-95%) Αλίρλεπζε θαη ππνηύπσλ δώσλ (Η5Ν1) (λνζειεπόκελνη αζζελείο) Αλίρλεπζε RSV ζε ελήιηθεο: ζηεξείηαη επαηζζεζίαο (20%- 30%)