Glucoza GOD-PAP (Lichid stabila) BXC0101 A se utiliza doar pentru diagnosticul in vitro. Temperatura de pastrare: 2-8 C. Componentele kitului BXC0101A BXC0101B BXC0101C R1 Reactiv Glucoza R4 Standard Glucoza 6 x 60 ml 6 x 125 ml 2 x 500 ml R1 Reactiv Glucoza R2 Standard Glucoza BXC0101D BXC0101E BXC0101T 4 X 250 ml 10 x 500 ml 5 x 100 ml Principiul metodei: Test enzimatic bazat pe reactia Trinder, ce cuantifica formarea chinoniminei colorata in roz. In cadrul acestei reactii, glucoza este determinata dupa oxidarea enzimatica in prezenta glucozoxidazei. Peroxidul de hidrogen format reactioneaza cu fenolul si 4-aminoantipirina in prezenta peroxidazei, pentru a forma compusul colorat. GOD Glucoza + O2 + H2O - -> Acid gluconic + H2O2 POD H2O2 + 4-aminoantipirina + fenol - -> chinonimina + 4 H2O Concentratia reactivilor: Glucozoxidaza >15 U/mL Peroxidaza >1 U/mL Glucoza 4-aminoantipirina 0.7 mmol/l Fenol 11 mmol/l Tampon MOPS 0.05 mol Tampon fosfat 0.025 mol Standard Glucoza 5.55 mmol/l (100 mg/dl) Depozitarea si prepararea reactivilor: Reactivul si standardul sunt furnizate gata de utilizare. Continutul neutilizat trebuie sa fie bine inchis, pastrat in flaconul original. A nu se transfera continutul din recipientele de reactie sau tuburile de testare inapoi in flaconul original. Reactivii sunt stabili pana la data expirarii daca sunt pastrati la temperatura recomandata (2-8 C). Proba: Ser, plasma EDTA sau plasma heparinizata. Glucoza este stabila timp de 24 ore la 2-8 C daca serul sau plasma se separa in 30 de minute din momentul recoltarii. Plasma trebuie conservata cu florura de sodiu, ducand la o stabilitate de 24 ore. In primele 2 ore apare totusi o scadere mica. Stabilitate 24 ore la 2-8 C Metoda manuala: Lungime de unda Temperatura Cuve Masurare 500 nm (Hg 546 nm) 15-25 C sau 37 C Raza de 1 cm Fata de blankul reactivului Pipetati in tuburile de testare dupa cum urmeaza: Blankul reactivului Standard/Proba Standard/Proba -- 10 μl Reactiv 1 ml 1 ml Pentru calibrare se recomanda folosirea unui calibrator pe baza de ser sau a unui standard apos de
glucoza. Se omogenizeaza si se incubeaza 10 minute la 15-25 C pe baie de apa sau 5 minute la 37 C. Se masoara absorbanta standardului si a probelor fata de blankul reactivului. Punctul de final este stabil timp de 60 minute. Rezultate: Abs. proba Conc. glucoza = X conc. standard Abs. standard Linearitate: Testul este linear pana la 30.0 mmol/l (550 mg/dl) Probele cu concentratii mai mari se dilueaza 1 + 2 cu apa distilata, se retesteaza, iar rezultatul se inmulteste cu 3. Sensibilitate: Metoda masoara cu acuratete nivele ale glucozei de pana la 0.35 mmol/l (6.3 mg/dl). Precizie: Conc. Glucoza (mmol/l) Intra-determinare n CV% 5.89 20 2.19 % 14.63 20 1.92 % Conc. Glucoza (mmol/l) Inter-determinare n CV% 5.89 10 3.14 % 14.63 10 2.9 % Aceste caracteristici au fost stabilite utilizand un analizor AU600. Rezultatele pot sa varieze in functie de sistemul utilizat. Valori normale: 4.1-6.4 mmol/l (74-115 mg/dl) Aceste valori sunt orientative. Fiecare laborator trebuie sa determine valori de referinta, in functie de varsta sau dieta. Limitari-Interferente: Nu s-a semnalat interferenta pana la urmatoarele valori: Bilirubina: <340 μmol/l (20 mg/dl) Trigliceride <14 mmol/l (1240 mg/dl) Hemoglobina <750 mg/dl. Testarea pe un analizor automat: Reactivii sunt destinati a fi utilizati pe anumite analizoare automate. Instructiuni si aplicatii specifice sunt disponibile la cerere. Pentru utilizarea pe analizoare automate se recomanda folosirea unui calibrator cu matrice de ser uman pentru a elimina orice bias de matrice, ce poate fi observat in cazul folosirii standardelor apoase. Calibratorul recomandat este Fortress Calibration Serum cat. No BXC0321K/L/M. Controlul calitatii: Se recomanda ca fiecare laborator sa utilizeze seruri control de referinta normal si patologic pentru verificarea performantei procedurii, atat performanta reactivilor cat si a instrumentelor utilizate. Rezultatele obtinute trebuie sa se incadreze in intervalele specificate. Fortress Normal Bovine Assayed Control Cat No BXC0313A (10x5ml) Fortress Elevated Bovine Assayed Control Cat No BXC0313B (10x5ml) Fortress Normal Human Assayed Control Cat No BXC0312A (10x5ml)
Fortress Elevated Human Assayed Control Cat No. BXC0312B (10x5ml) Serurile umane de control Fortress au fost testate pentru HBs Ag, anticorpi HIV 1&2, anticorpi anti-hcv si sunt negative. Cu toate acestea, niciun test nu ofera o siguranta completa pentru absenta bolilor infectioase, deci toate materialele trebuie utilizate si elimiate ca fiind cu potential infectios. In cazul in care rezultatele nu se incadreaza in limitele de referinta, se vor urma procedurile interne pentru controlul de calitate. Rezultatele deviante pot aparea din urmatoarele motive : 1. Lungimea de unda folosita 2. Sursa de lumina 3. Temperatura 4. Curatarea cuvelor utilizate pentru masurare 5. Contaminarea bacteriologica a reactivilor 6. Termenul de valabilitate expirat 7. Frecventa calibrarii. Masuri de siguranta : A se utiliza doar de catre personalul de laborator calificat. Trebuie respectate precautiile manipularii reactivilor de laborator. A nu se ingera reactivii. Aruncarea reactivilor se va face conform reglementarii locale. Bibliografie: 1. Barham D & Trynder P Analyst 1972;97:142 2. Teuscher, A & Richterich, P. Schweiz Med Wschr. 1971; 101:345 & 390 3. Tietz NW, Clinical guide to Laboratory Tests, 3 rd Edition. Rev. MB. 01.2015 en 052011