Φυτοχημική ανάλυση, αντιοξειδωτική δράση και ανασταλτική δράση της οξειδάσης της ξανθίνης των φύλλων και άνθεων του Crataegus azarolus

Transcript

1

2 Φυτοχημική ανάλυση, αντιοξειδωτική δράση και ανασταλτική δράση της οξειδάσης της ξανθίνης των φύλλων και άνθεων του Crataegus azarolus Click to edit Master subtitle style Moλοχάδης Ι. Θεμιστοκλής Προπτυχιακός φοιτητής Φαρμακευτικής Υπεύθυνος Καθηγητής: Δρ. Χρ. Πέτρου

3 Σκοπός εργασίας Διερεύνηση δράσεων των εκχυλισμάτων C. azarolus σύμφωνα με τη λαϊκή θεραπευτική Φυτοχημική ανάλυση ανθέων και φύλλων Ελεγχος της αντιοξειδωτικής τους δράσης in vitro. (DPPH) Έλεγχος της ανασταλτικής τους ικανότητας στην οξειδάσης της ξανθίνης in vitro.

4 Crataegus azarolus (Rosaceae) Φυλλοβόλο δέντρο Δρόγη: άνθη, καρποί, φύλλα. Εντοπίζεται σε: Κύπρο, Ελλάδα, Τυνησία,Τουρκία Χρήση αφεψήματος σε καρδιαγγειακά νοσήματα Μελέτες για: 1. Αντιοξειδωτική, 2. Αντικαρκινική, 3. Αντιμικροβιακή, 4. Αντιδιαβητική δράση.

5 Βιβλιογραφική ανασκόπηση της χημικής σύστασης του C.azarolus Φαινολικά Οξέα Φλαβονοειδή Τερπενοειδή Ταννίνες υδροξυκινναμωμικά οξέα υδροξυβενζοϊκά οξέα Γλυκοσίδες της κερκετίνης Βιτεξίνη Κατεχίνες Ουρσολικό οξύ Φυτόλη γ-σιτοστερόλη Σαπωνίνες Υδρολυόμενες (εστέρες γαλλικού οξέος)

6 Φλαβονοειδή Πολυφαινολικές ενώσεις που διαφέρουν ως προς την υποκάτασταση τους (>4000) Φαρμακολογικές δράσεις: 1. Αντιοξειδωτικά 2. Αντικαρκινική δράση i).αναστολή PKC Ανταγωνισμός ii).egfrs iii).vegfrs 3. Μείωση καρδιαγγειακού κινδύνου Μεταναλύσεις επιβεβαιώνουν το «γαλλικό παράδοξο» 4. Αντιφλεγμονώδης δράση Αναστολή COX, 5-LO 5. Αντιδιαβητική δράση Αναστολή α-γλυκοσιδάσης, DPP-4 και οξειδάσης της ξανθίνης

7 Οξειδάση της ξανθίνης Ουρικό οξύ Επιπέδων αντιοξειδωτική δράση Παθολογικές καταστάσεις Αντιμετώπιση οξειδωτικού στρες Προ-οξειδωτική δράση Χρόνια φλεγμονή Ουρική αρθίτιδα κινδύνου ανάπτυξης ΣΔ2 κινδύνου για κακοήθεις (αιμοποιητικούς καρκίνους) Αναστολείς της οξειδάσης της ξανθίνης: Αλλοπουρινόλη, Κερκετίνη

8 ΠΕΙΡΑΜΑΤΙΚΟ ΜΕΡΟΣ

9 Διαδικασία εκχυλίσεων Δρόγη: Φύλλα, Άνθη ΕΞΙΚΜΑΣΗ Αιθανολικό εκχύλισμα ΔΙΑΛΥΣΗ ΣΕ ΥΔΩΡ Υδατική φάση Εκχύλισμα Διαιθυλαιθέρα Εκχύλισμα Διχλωρομεθανίου Εκχύλισμα οξικού αιθυλεστέρα

10 Φυτοχημική ανάλυση των κλασμάτων από τα φύλλα και άνθη του C.azarolus ΦΥΛΛΑ ΑΝΘΗ Εκχύλισμα Et 2 O CH 2 Cl 2 EtOAc Et 2 O CH 2 Cl 2 EtOAc Τανίνες Σαπωνίνες Ανθοκυανίνες Στερόλες/Τριτερπένια Ανθρακινόνες

11 Προσδιορισμός αντιοξειδωτικής δράσης των εκχυλισμάτων του C.azarolus με την μέθοδο του DPPH. Αρχή της μεθόδου: Aποτελέσματα: Εκχύλισματα: EtOAc > CH 2 Cl 2 > Vit C (control) > Et 2 O

12 Ανασταλτική δράση των εκχυλισμάτων C.azarolus στην οξειδάση της ξανθίνης in vitro. Αρχή της μεθόδου: Η ανασταλτική δράση βασίστηκε στην μείωση του ρυθμού παραγωγής του ουρικού οξέος Aποτελέσματα: Δείγμα IC 50 (μg/ml) Κερκετίνη 3,174± 0,331 Αλλοπουρινόλη (control) 0,1077± 0,022 ΦΥΛΛΑ Διαιθυλαιθέρας - Διχλωρομεθάνιο 42,90± 0,513 Οξικός αιθυλεστέρας 38,96±1,23 ΑΝΘΗ Διαιθυλαιθέρας 5,196±0,364 Διχλωρομεθάνιο 48,03±3,92 Οξικός αιθυλεστέρας 9,043±0,592

13 Συμπεράσματα- Συζήτηση Ενδιαφέρον φυτοχημική σύσταση Υψηλή αντιοξειδωτική δράση (πολικά > μη πολικά εκχυλίσματα) Ικανοποιητική ανασταλτική δράση της οξειδάσης της ξανθίνης Ανάγκη για πλήρη φυτοχημική ανάλυση (HPLC, MS,NMR ) Εύρεση των βιοδραστικών ενώσεων In vivo μελέτες (καθορισμός δράσης,φαρμακοκινητικού προφίλ...)

14 Βιβλιογραφία Battelli, M. G. et al. (2018) The role of xanthine oxidoreductase and uric acid in metabolic syndrome, Biochimica et Biophysica Acta - Molecular Basis of Disease, pp doi: /j.bbadis Bisswanger, H. (2014) Enzyme assays, Perspectives in Science. Elsevier, 1(1 6), pp doi: /j.pisc Edwards, J. E. et al. (2012) A review of the chemistry of the genus Crataegus, Phytochemistry. Elsevier Ltd, 79, pp doi: /j.phytochem Elya, B. and Mun im, A. (2017) Antioxidant Activity and Isolation of Xanthine Oxidase Inhibitor from Ruellia tuberosa L. Leaves, Pharmacogn, 9(5), pp Fadda, A. et al. (2014) Reaction time and DPPH concentration influence antioxidant activity and kinetic parameters of bioactive molecules and plant extracts in the reaction with the DPPH radical, Journal of Food Composition and Analysis. Elsevier Inc., 35(2), pp doi: /j.jfca Ferry, D. R. et al. (1996) Phase I clinical trial of the flavonoid quercetin: Pharmacokinetics and evidence for in vivo tyrosine kinase inhibition, Clinical Cancer Research, 2(4), pp doi: /j.expthermflusci Kim, Y. and Je, Y. (2017) Flavonoid intake and mortality from cardiovascular disease and all causes: A meta-analysis of prospective cohort studies, Clinical Nutrition ESPEN, 20, pp doi: /j.clnesp Lakache, Z. et al. (2016) Phytochemical screening and antioxidant properties of methanolic extract and different fractions of Crataegus azarolus leaves and flowers from Algeria, International Food Research Journal, 23(4), pp Lv, Q. et al. (2013) High Serum Uric Acid and Increased Risk of Type 2 Diabetes: A Systemic Review and Meta-Analysis of Prospective Cohort Studies, PLoS ONE, 8(2). doi: /journal.pone Murugesu, S. et al. (2017) Antioxidant and Antidiabetic Effects of Flavonoids: A Structure-Activity Relationship Based Study, 2017.

15

16