Dako REAL Detection System, Peroxidase/DAB+, Rabbit/Mouse

Transcript

1 Dako REAL Detection System, Peroxidase/DAB+, Rabbit/Mouse Κωδικός K5001 6η έκδοση Για χρήση µε τα όργανα αυτοµατοποιηµένης ανοσοχρώσης της Dako. Το κιτ περιέχει αντιδραστήρια που επαρκούν για 500 εξετάσεις. ( ) P04097GR_01_K / σελ. 1/8

2 Περιεχόµενα Σελίδα Προοριζόµενη χρήση... 3 Περίληψη και επεξήγηση... 3 Αντιδραστήρια... 4 A. Υλικά που παρέχονται... 4 B. Υλικά που απαιτούνται, αλλά δεν παρέχονται... 4 Προφυλάξεις... 5 Αποθήκευση... 6 Προετοιµασία αντιδραστηρίων... 6 Συλλογή και προετοιµασία του δείγµατος... 6 ιαδικασία... 6 Ποιοτικός έλεγχος... 8 Ερµηνεία των αποτελεσµάτων... 8 Επεξήγηση των συµβόλων... 8 ( ) P04097GR_01_K / σελ. 2/8

3 Προοριζόµενη χρήση Για in vitro διαγνωστική χρήση. Το REAL Detection System, Peroxidase/DAB+, Rabbit/Mouse της Dako προορίζεται για χρήση στην ανοσοϊστοχηµεία µαζί µε τα όργανα αυτοµατοποιηµένης ανοσοχρώσης της Dako. Το κιτ βασίζεται στη µέθοδο LSAB (σηµασµένη στρεπταβιδίνη-βιοτίνη) και χρησιµοποιείται σε µια διαδικασία τριών βηµάτων. Το πρώτο βήµα είναι η επώαση του ιστού µε πρωτοταγές αντίσωµα κουνελιού ή αντίσωµα ποντικού σε βέλτιστη αραίωση, το δεύτερο βήµα είναι η επώαση µε το REAL Link, Biotinylated Secondary Antibodies (AB2) της Dako και το τρίτο βήµα είναι η επώαση µε το REAL Streptavidin Peroxidase (HRP) της Dako. Η εποπτική παρουσίαση της αντίδρασης πραγµατοποιείται µε το χρωµογόνο REAL DAB+ της Dako, το οποίο επίσης περιλαµβάνεται στο κιτ. Για να εξασφαλίσετε τη σωστή χρώση, προτείνουµε τη χρήση του κιτ σε συνδυασµό µε άλλα προτεινόµενα αντιδραστήρια που παρατίθενται στην ενότητα "Υλικά που απαιτούνται, αλλά δεν παρέχονται". Περίληψη και επεξήγηση Το REAL Detection System, Peroxidase/DAB+, Rabbit/Mouse της Dako, σχεδιάστηκε για να προσφέρει βέλτιστη χρώση µε τα όργανα αυτοµατοποιηµένης ανοσοχρώσης της Dako, χρησιµοποιώντας τις φόρµες/πρωτόκολλα που προτείνονται στο ένθετο της παρούσας συσκευασίας. Πριν τη χρώση, ορισµένες τοµές από ιστούς µονιµοποιηµένους µε τον συνήθη τρόπο και εγκλεισµένους σε παραφίνη πρέπει να υποβάλλονται σε θερµικά επαγόµενη ανάκτηση του επιτόπου (HIER), χρησιµοποιώντας το διάλυµα ανάκτησης στόχου που καθορίζεται στο ένθετο της συσκευασίας για το πρωτοταγές αντίσωµα. Ορισµένα πρωτοταγή αντισώµατα απαιτούν, αντί του HIER, ενζυµική προ-επεξεργασία του ιστού για βέλτιστη χρώση. Σηµειώστε ότι το REAL Proteinase K της Dako, κωδικός S2019, έχει σχεδιαστεί για χρήση σε συνδυασµό µε το HIER, ώστε να διευκολύνει την επεξεργασία παρτίδας αντικειµενοφόρων. Η ενδογενής υπεροξειδάση πρέπει να αποκλειστεί µε το REAL Peroxidase-Blocking Solution της Dako, κωδικός S2023, ή το Dual Endogenous Enzyme Block της Dako, κωδικός S2003. Λόγω µιας αποτελεσµατικής διαδικασίας πλύσης και την παρουσία σταθεροποιητικών πρωτεϊνών στα αντιδραστήρια της Dako, δεν είναι απαραίτητα επιπλέον βήµατα αποκλεισµού για τη µείωση της µη ειδικής χρώσης στο υπόβαθρο. Προτείνεται να χρησιµοποιείται το ρυθµιστικό διάλυµα πλύσης της Dako που καθορίζεται για το συγκεκριµένο όργανο της Dako. Το κιτ δεν περιλαµβάνει πρωτοταγή αντισώµατα. Προτείνεται να χρησιµοποιούνται τα N-Series Ready-to-Use Primary Antibodies της Dako ή τα πυκνά διαλύµατα πρωτοταγών αντισωµάτων της Dako. Το REAL Detection System, Peroxidase/DAB+, Rabbit/Mouse της Dako, βασίζεται στην έµµεση µέθοδο στρεπταβιδίνης-βιοτίνης η οποία έχει διαπιστωθεί ότι προσφέρει αυξηµένη ευαισθησία σε σύγκριση µε ανάλογες µεθόδους. Το αντιδραστήριο του βιοτινυλιωµένου δευτεροταγούς αντισώµατος του κιτ αντιδρά το ίδιο καλά τόσο µε τις ανοσοσφαιρίνες του κουνελιού όσο και µε τις ανοσοσφαιρίνες του ποντικού. Για το λόγο αυτό, απαιτείται µόνο ένα δευτεροταγές αντιδραστήριο για τα πρωτοταγή αντισώµατα του κουνελιού ή του ποντικού. Το αντιδραστήριο του δευτεροταγούς αντισώµατος σηµάνθηκε βέλτιστα µε βιοτίνη χρησιµοποιώντας έναν διαχωριστικό βραχίονα 7-ατόµων (spacer arm). Ο παραπάνω βραχίονας επιτρέπει σε κάθε βιοτινυλιωµένο µόριο αντισώµατος να αντιδρά µε πολλά µόρια στρεπταβιδίνης που είναι συζευγµένα µε υπεροξειδάση, αυξάνοντας µε τον τρόπο αυτό την ευαισθησία του συστήµατος εντοπισµού. Η συζευγµένη µε υπεροξειδάση στρεπταβιδίνη που υπάρχει στο κιτ έχει παρασκευαστεί µε στρεπταβιδίνη αποµονωµένη από το Streptomyces avidinii και υψηλής καθαρότητας υπεροξειδάση χρένου. Η σύζευξη πραγµατοποιείται µε µια εκλεπτυσµένη µέθοδο γλουταραλδεΰδης, δύο βηµάτων. Επειδή το ισοηλεκτρικό σηµείο της στρεπταβιδίνης είναι κοντά στο ουδέτερο, αποφεύγονται οι µη ειδικές ιοντικές αλληλεπιδράσεις µε τα συστατικά του δείγµατος. Το βιοτινυλιωµένο δευτεροταγές αντίσωµα όπως και η συζευγµένη µε υπεροξειδάση στρεπταβιδίνη παρέχονται έτοιµα προς χρήση σε σταγονοµετρικές φιάλες µε τη βοήθεια των οποίων πρέπει να τα προσθέσετε στα κατάλληλα δοχεία του οργάνου πριν τη χρήση. ( ) P04097GR_01_K / σελ. 3/8

4 Το σύστηµα του υποστρώµατος αποτελείται από δύο συστατικά, το DAB+ Chromogen, ένα πυκνό διάλυµα διαµινοβενζιδίνης (DAB), και το HRP Substrate Buffer που περιέχει υπεροξείδιο του υδρογόνου. Πριν από τη χρήση, πρέπει να αραιώσετε το DAB+ Chromogen µε το HRP Substrate Buffer. Στη θέση του αντιγόνου-στόχου, το σύστηµα του υποστρώµατος παράγει ένα τελικό προϊόν µε ζωηρό καφέ χρώµα. Για την αντίχρωση, προτείνονται τα REAL Hematoxylin της Dako, κωδικός S2020, ή Hematoxylin for the Dako Autostainer, κωδικός S3301, καθόσον προσδίδουν στον πυρήνα ένα καθαρό µπλε χρώµα. Οι χρωµατισµένες τοµές του ιστού µπορούν να καλυφθούν είτε µε υδατικό µέσο επικάλυψης είτε µε µέσο επικάλυψης βασισµένο σε οργανικό διαλύτη. Αντιδραστήρια A. Υλικά που παρέχονται Φιάλη A Dako REAL Link, Biotinylated Secondary Antibodies (AB2) 100 ml, έτοιµο προς χρήση Βιοτινυλιωµένες ανοσοσφαιρίνες αίγας έναντι ποντικού και έναντι κουνελιού. Σε ρυθµιστικό διάλυµα που περιέχει σταθεροποιητική πρωτεΐνη και νατραζίδιο. Το χρώµα του παραπάνω αντιδραστηρίου ενδέχεται να ποικίλει από έντονο κίτρινο έως άχρωµο, χωρίς καµία επίπτωση στην απόδοση του κιτ. Φιάλη B Φιάλη C Φιάλη D Dako REAL Streptavidin Peroxidase (HRP) 100 ml, έτοιµο προς χρήση Στρεπταβιδίνη συζευγµένη σε υπεροξειδάση του χρένου. Σε ρυθµιστικό διάλυµα που περιέχει πρωτεΐνη και συντηρητικό. Dako REAL DAB+ Chromogen 5 ml, πυκνό διάλυµα x50 τετραϋδροχλωρική 3,3'-διαµινοβενζιδίνη σε οργανικό διαλύτη. Το χρώµα του παραπάνω αντιδραστηρίου ενδέχεται να ποικίλει από έντονο µοβ έως άχρωµο, χωρίς καµία επίπτωση στην απόδοση του κιτ. Dako REAL AP Substrate Buffer 250 ml, έτοιµο προς χρήση Ρυθµιστικό διάλυµα που περιέχει υπεροξείδιο του υδρογόνου και συντηρητικό. B. Υλικά που απαιτούνται, αλλά δεν παρέχονται Όργανα αυτοµατοποιηµένης ανοσοχρώσης της Dako Ρυθµιστικό διάλυµα πλύσης της Dako ειδικό για το συγκεκριµένο όργανο REAL Peroxidase-Blocking Solution της Dako, κωδικός S2023 ή Dual Endogenous Enzyme Block, κωδικός S2003 REAL Proteinase K της Dako, κωδικός S2019, αραιωµένο σε REAL Proteinase K Diluent της Dako, κωδικός S2032 ή Proteinase K (Ready-to-Use), κωδικός S3020 (εφόσον κρίνεται απαραίτητο) ( ) P04097GR_01_K / σελ. 4/8

5 N-Series Ready-to-Use Primary Mouse Antibodies της Dako ή άλλο πυκνό διάλυµα πρωτοταγών αντισωµάτων κουνελιού ή ποντικού από την Dako N-Series Ready-to-Use Rabbit or Mouse Universal Negative Control ή αντιδραστήριο αρνητικού µάρτυρα κατάλληλο για το πρωτοταγές αντίσωµα REAL Antibody Diluent της Dako, κωδικός S2022 (για αραίωση του πυκνού διαλύµατος των αντισωµάτων) REAL Hematoxylin της Dako, κωδικός S2020 ή Hematoxylin for the Dako Autostainer, κωδικός S3301 ιάλυµα ανάκτησης στόχου. Βλέπε το ένθετο της συσκευασίας του πρωτοταγούς αντισώµατος REAL Incubation Container της Dako, κωδικός S2030 (προαιρετικό) REAL Slide Holder της Dako, κωδικός S2029 (προαιρετικό) Σκεύη για τα όργανα της Dako Αντικειµενοφόροι πλάκες µικροσκοπίου Γενικά εργαστηριακά αντιδραστήρια για την αποκήρωση τοµών των εγκλεισµένων σε παραφίνη ιστών Υλικό επικάλυψης (υδατικό ή µε βάση από οργανικό διαλύτη) και καλυπτρίδες Προφυλάξεις 1. Για επαγγελµατίες χρήστες. 2. Η φιάλη A, Dako REAL Link, Biotinylated Secondary Antibodies (AB2), περιέχει υλικό προερχόµενο από θηλαστικό. Όπως ισχύει για κάθε προϊόν βιολογικής προέλευσης, πρέπει να εφαρµόζονται οι κατάλληλες διαδικασίες χειρισµού. 3. Η φιάλη A, Dako REAL Link, Biotinylated Secondary Antibodies (AB2), περιέχει νατραζίδιο (NaN 3 ), µια χηµική ουσία ιδιαίτερα τοξική σε καθαρή µορφή. Στις συγκεντρώσεις του προϊόντος, παρόλο που δεν έχει ταξινοµηθεί ως επικίνδυνο, το νατραζιδίο ενδέχεται να αντιδράσει µε τις µολύβδινες ή χάλκινες υδραυλικές σωληνώσεις και να δηµιουργήσει ιδιαίτερα εκρηκτικές εναποθέσεις µεταλλικών αζιδίων. Κατά την απόρριψη, ξεπλύνετε µε άφθονο νερό για να αποτρέψετε τη συσσώρευση µεταλλικών αζιδίων στις σωληνώσεις. 4. Μην εκθέτετε τη φιάλη C, Dako REAL DAB+ Chromogen ή το διάλυµα εργασίας του υποστρώµατος (CHROM) σε δυνατό φως. 5. Η φιάλη C, Dako REAL DAB+ Chromogen, περιέχει 5-<10% biphenyl-3,3',4,4'- tetrayltetraammonium tetrachloride µε την επισήµανση: H350 H341 P201 P280 P308 + P313 P405 P501 Κίνδυνος Μπορεί να προκαλέσει καρκίνο. Ύποπτο για πρόκληση γενετικών ελαττωµάτων. Εφοδιαστείτε µε τις ειδικές οδηγίες πριν από τη χρήση. Να φοράτε προστατευτικά γάντια. Να φοράτε µέσα ατοµικής προστασίας για τα µάτιαή το πρόσωπο. Να φοράτε προστατευτικά ενδύµατα. ΣΕ ΠΕΡΙΠΤΩΣΗ έκθεσης ή πιθανότητας έκθεσης: Συµβουλευθείτε/Επισκεφθείτε γιατρό. Φυλάσσεται κλειδωµένο. ιάθεση του περιεχοµένου και του περιέκτη σύµφωνα µε όλους τους τοπικούς, περιφερειακούς, εθνικούς και διεθνείς κανονισµούς. Ως βασικός κανόνας, άτοµα κάτω των 18 ετών δεν επιτρέπεται να εργάζονται µε το προϊόν αυτό. Οι χρήστες πρέπει να διδάσκονται προσεκτικά τις σωστές διαδικασίες εργασίας, τις επικίνδυνες ιδιότητες του προϊόντος και τις απαραίτητες οδηγίες ασφαλείας. Ανατρέξτε στο φύλλο δεδοµένων ασφαλείας υλικού (MSDS) για επιπρόσθετες πληροφορίες. ( ) P04097GR_01_K / σελ. 5/8

6 6. Πρέπει να φοράτε κατάλληλο εξοπλισµό προσωπικής προστασίας για να αποφύγετε την επαφή µε τα µάτια και το δέρµα. 7. Όσο διάλυµα δεν χρησιµοποιηθεί πρέπει να απορρίπτεται σύµφωνα µε τους τοπικούς, κρατικούς και οµοσπονδιακούς κανονισµούς. Αποθήκευση Αποθηκεύετε το κιτ σε θερµοκρασία 2 8 C. Μην το χρησιµοποιείτε µετά την ηµεροµηνία λήξης που αναγράφεται στο κιτ. Μην εναλλάσσετε περιεχόµενα του κιτ µε άλλες παρτίδες. Αν τα αντιδραστήρια φυλάσσονται σε διαφορετικές συνθήκες από εκείνες που προδιαγράφονται, ο χρήστης πρέπει να επαληθεύσει τις συνθήκες. Αποθηκεύστε το παρασκευασµένο διάλυµα εργασίας του υποστρώµατος (CHROM) σε θερµοκρασία 2 8 C και χρησιµοποιήστε το εντός 5 ηµερών. Αν παρατηρηθεί µη αναµενόµενη χρώση, που δεν µπορεί να εξηγηθεί από την ποικιλία των εργαστηριακών διαδικασιών και αν υπάρχουν υποψίες για πρόβληµα µε το αντίσωµα, επικοινωνήστε µε την Τεχνική µας Υπηρεσία. Προετοιµασία αντιδραστηρίων ιάλυµα εργασίας του υποστρώµατος (CHROM) Το διάλυµα εργασίας του υποστρώµατος µε DAB (CHROM) παρασκευάζεται αναµιγνύοντας καλά 20 µl DAB+ Chromogen (φιάλη C) και 1 ml HRP Substrate Buffer (φιάλη D). Ετοιµάστε µόνο όσον όγκο απαιτείται για τον αριθµό των αντικειµενοφόρων που πρέπει να χρωµατιστούν. Χρησιµοποιήστε το CHROM εντός 5 ηµερών (αποθηκεύεται στο σκοτάδι σε θερµοκρασία 2 8 C). Για την παρασκευή των αντιδραστηρίων που δεν παρέχονται µε το κιτ, δείτε τις οδηγίες που παρέχονται µε κάθε αντιδραστήριο. Συλλογή και προετοιµασία του δείγµατος Τα δείγµατα ενδέχεται να είναι τοµές ιστών µονιµοποιηµένων µε τον συνήθη τρόπο και εγκλεισµένων σε παραφίνη καθώς και τοµές κατεψυγµένων ιστών. Μεγάλη ποικιλία από στερεωτικά µπορεί να χρησιµοποιηθεί για τη διατήρηση των δειγµάτων. Τα δείγµατα δεν πρέπει να µονιµοποιούνται σε ουδέτερο ρυθµιστικό διάλυµα φορµαλίνης για περισσότερες από 24 ώρες ενώ είναι προτιµότερο µικρότερο χρονικό διάστηµα. Το βέλτιστο πάχος για τις εγκλεισµένες στην παραφίνη τοµές είναι περίπου 4 µm. Το βέλτιστο πάχος των κατεψυγµένων τοµών είναι 4 6 µm. Τα δείγµατα πρέπει να τοποθετούνται πάνω σε αντικειµενοφόρους. Οι τοµές πρέπει να τοποθετηθούν στις αντικειµενοφόρους όσο πιο επίπεδα και χωρίς ζάρες γίνεται. Οι πολλές ζάρες µπορεί να επηρεάσουν τα αποτελέσµατα χρώσης. ΣΗΜΕΙΩΣΗ: Το πλάτος των αντικειµενοφόρων πρέπει να είναι κατάλληλο για το όργανο της Dako. Ανατρέξτε στο εγχειρίδιο χρήσης του οργάνου της Dako για να προσδιορίσετε τις αντικειµενοφόρους που µπορείτε να χρησιµοποιήσετε. Οι τοµές παραφίνης πρέπει να τοποθετούνται από ένα προθερµασµένο υδατόλουτρο που να περιέχει αποσταγµένο ή απιονισµένο νερό. Το υδατόλουτρο δεν πρέπει να περιέχει πρόσθετα (όπως ζελατίνη, πολυ-l-λυσίνη κλπ). Οι τοµές πρέπει να στεγνώσουν µε θέρµανση, γενικά σε µια θερµοκρασία όχι πάνω από 60 C επί τουλάχιστον 60 λεπτά (π.χ. κατά τη διάρκεια της νύχτας) Για να εξασφαλιστεί η σωστή πρόσφυση των τοµών στις αντικειµενοφόρους είναι σηµαντικό να στεγνώσει το νερό κάτω από τις τοµές πριν από τη διαδικασία ξήρανσης στο φούρνο. ιαδικασία Για την επίτευξη του βέλτιστου αποτελέσµατος στη χρώση, τα όργανα αυτοµατοποιηµένης ανοσοχρώσης της Dako εφαρµόζουν τεχνικές που βασίζονται σε διαφορετικές αρχές. Προτού ( ) P04097GR_01_K / σελ. 6/8

7 ξεκινήσετε την εκτέλεση των πρωτοκόλλων στα όργανα αυτοµατοποιηµένης ανοσοχρώσης της Dako, διαβάστε προσεκτικά το εγχειρίδιο χρήσης για το αντίστοιχο όργανο της Dako. Οι περισσότερες τοµές των ιστών, µετά την αποπαραφίνωση και την ενυδάτωση σε ρυθµιστικό διάλυµα (νερό), πρέπει να υποβάλλονται σε HIER. Προτείνεται η τυποποίηση της HIER για να µπορείτε να διασφαλίζετε την επαναλήψιµη ανάκτηση του επιτόπου. Για την τυποποίηση της επεξεργασίας, προτείνεται να φορτώνετε πλήρως µε αντικειµενοφόρους την υποδοχή των αντικειµενοφόρων, ακόµα και όταν µόνο µια αντικειµενοφόρος φέρει ιστό. Με τον τρόπο αυτό εξασφαλίζετε την ιδανική θέρµανση των τοµών σε κάθε κύκλο. Στο τέλος του βήµατος της ανάκτησης επιτόπου, οι αντικειµενοφόροι πρέπει να αφήνονται στο ρυθµιστικό διάλυµα επί 20 τουλάχιστον λεπτά, σε θερµοκρασία δωµατίου. Για όσο διάστηµα κρυώνουν οι αντικειµενοφόροι, τα όργανα αυτοµατοποιηµένης ανοσοχρώσης της Dako µπορούν να προετοιµαστούν για τον κύκλο χρώσης. Μερικοί επίτοποι δεν αντέχουν στην HIER. Ανατρέξτε στο ένθετο της συσκευασίας για τις οδηγίες προ-επεξεργασίας του συγκεκριµένου πρωτοταγούς αντισώµατος της Dako. Επώαση µε πρωτοταγές αντίσωµα Τα N-series, Ready-to-Use Primary Antibodies της Dako µπορούν να χρησιµοποιηθούν µε το REAL Detection System, Peroxidase/DAB+, Rabbit/Mouse της Dako, που απλώνεται πάνω σε τοµές µονιµοποιηµένες µε φορµαλίνη και εγκλεισµένες σε παραφίνη. Στο ένθετο της συσκευασίας του πυκνού διαλύµατος του πρωτοταγούς αντισώµατος δίνονται οδηγίες για την αραίωση του πυκνού διαλύµατος των πρωτοταγών αντισωµάτων της Dako καθώς και τη χρησιµότητα της προ-επεξεργασίας της πρωτεϊνάσης K σε σχέση µε το REAL Detection System, Peroxidase/DAB+, Rabbit/Mouse της Dako, που απλώνεται σε τοµές µονιµοποιηµένες µε φορµαλίνη και εγκλεισµένες σε παραφίνη. Το πυκνό διάλυµα των πρωτοταγών αντισωµάτων πρέπει να αραιώνεται στο REAL Antibody Diluent της Dako, κωδικός S2022. Οι αντικειµενοφόροι φορτώνονται στο όργανο της Dako και χρωµατίζονται εφαρµόζοντας την αντίστοιχη φόρµα/πρωτόκολλο για το REAL Detection System, Peroxidase/DAB+, Rabbit/Mouse, της Dako, κωδικός K5001. Σε περίπτωση που δεν υπάρχει η φόρµα/πρωτόκολλο στο δικό σας όργανο της Dako, επικοινωνήστε µε την τεχνική µας υπηρεσία. Προτού χρησιµοποιήσετε για πρώτη φορά το REAL Detection System, Peroxidase/DAB+, Rabbit/Mouse της Dako στο Autostainer της Dako, είναι απαραίτητο να προσθέσετε στον κατάλογο αντιδραστηρίων του οργάνου τα αντιδραστήρια και τους χρόνους που παρατίθενται στον πίνακα 1. Πίνακας 1. Απαραίτητες προσθήκες στον κατάλογο των αντιδραστηρίων και βέλτιστοι χρόνοι επώασης Αντιδραστήριο Κωδικός. Πρόταση για "συντόµευση" Dako REAL Peroxidase-Blocking Solution ή Dual Endogenous Enzyme Block Dako REAL Proteinase K Solution ή Dako Proteinase K S2023 ή S2003 S S2032 HP Block Βήµα φόρµας Χρόνος Αποκλεισµός ενδ. ενζ. επώασης 5 λεπτά Pro K Προ-επεξεργασία 10 λεπτά υπό το αντίσωµα S2030 Πρωτοταγή αντισώµατα Ατοµικός - Αντίσωµα 10* 25 λεπτά Dako REAL Detection System Link, Biotinylated Secondary Antibodies (AB2) Dako REAL Detection System, Streptavidin Peroxidase (HRP) K5001 K5001LIN ευτεροταγές αντιδραστήριο K5001 K5001HRP Τριτοταγές αντιδραστήριο 15 λεπτά 15 λεπτά Dako REAL Detection System (DAB+) K5001 K5001DAB Υπόστρωµα 3 λεπτά (2 φορές) Dako REAL Hematoxylin S2020 Βοηθητικό 1 2 λεπτά ή - Dako Hematoxylin for the Dako Autostainer S λεπτά Blueing Buffer (= Ρυθµιστικό διάλυµα S Βοηθητικό 5 λεπτά ( ) P04097GR_01_K / σελ. 7/8

8 Autostainer) * N-Series Ready-to-Use Primary Antibodies Για άλλα όργανα της Dako, τα ονόµατα των αντιδραστηρίων και οι χρόνοι επώασης είναι προγραµµατισµένα εκ των προτέρων στις φόρµες/πρωτόκολλα. Ποιοτικός έλεγχος Για να διασφαλιστεί η σωστή απόδοση όλων των αντιδραστηρίων που χρησιµοποιούνται, κάθε κύκλος χρώσης πρέπει να περιλαµβάνει ένα γνωστό δείγµα θετικού µάρτυρα. Αν το δείγµα θετικού µάρτυρα δεν παρουσιάσει θετική χρώση, η σήµανση των δειγµάτων της εξέτασης πρέπει να θεωρείται άκυρη. Με κάθε δείγµα πρέπει να χρησιµοποιείται αντιδραστήριο αρνητικού µάρτυρα για την αναγνώριση κάθε χρώσης µη ειδικής. Όταν η µη ειδική χρώση δεν µπορεί να διαφοροποιηθεί ευκρινώς από την ειδική χρώση, η σήµανση του δείγµατος της εξέτασης πρέπει να θεωρηθεί άκυρη. Ως αντιδραστήριο αρνητικού µάρτυρα, προτείνεται το Negative Control for N-Series Rabbit Primary Antibodies, κωδικός N1699 ή το Negative Control for N-Series Mouse Primary Antibodies, κωδικός N1698. Ερµηνεία των αποτελεσµάτων Το διάλυµα εργασίας του υποστρώµατος µε διαµινοβενζιδίνη (CHROM) προσδίδει ένα καφέ χρώµα στη θέση του αντιγόνου-στόχου, το οποίο αναγνωρίζεται από το πρωτοταγές αντίσωµα. Το καφέ χρώµα πρέπει να εµφανίζεται και στο δείγµα θετικού µάρτυρα στην αναµενόµενη θέση εντοπισµού του αντιγόνου-στόχου. Αν εκδηλωθεί µη ειδική χρώση, εµφανίζεται ως κάπως διάχυτη καφέ χρώση στις αντικειµενοφόρους που έχουν υποβληθεί σε επεξεργασία µε το αντιδραστήριο αρνητικού µάρτυρα. Οι πυρήνες χρωµατίζονται µπλε από την αντίχρωση αιµατοξυλίνης. Επεξήγηση των συµβόλων Αριθµός καταλόγου Περιορισµοί θερµοκρασίας Ηµεροµηνία λήξης In vitro διαγνωστικό ιατροτεχνολογικό προϊόν Περιεχόµενο επαρκές για «ν» εξετάσεις Κατασκευαστής Συµβουλευτείτε τις οδηγίες χρήσης Κωδικός παρτίδας Εικονοσύµβολο GHS (ανατρέξτε στην ενότητα για τις προφυλάξεις) Προϊόν της: Dako Denmark A/S Produktionsvej 42 DK-2600 Glostrup ανία Τηλ Φαξ ( ) P04097GR_01_K / σελ. 8/8