HCG. For use on IMMULITE 2000 systems

Transcript

1 HCG For use on IMMULITE 2000 systems

2 IMMULITE 2000 HCG English Intended Use: For in vitro diagnostic use with the IMMULITE 2000 Systems Analyzers for the quantitative measurement of human chorionic gonadotropin (HCG) in serum, and for strictly qualitative determinations in urine, as an aid in the detection of pregnancy. Catalog Number: L2KCG2 (200 tests), L2KCG6 (600 tests) Test Code: HCG Color: Orange Summary and Explanation Human chorionic gonadotropin (HCG) is a two-chain glycoprotein hormone (MW ~37,000) normally found in blood and urine only during pregnancy. It is secreted by placental tissue, beginning with the primitive trophoblast, almost from the time of implantation, and serves to support the corpus luteum during the early weeks of pregnancy. According to the literature, circulating HCG typically reaches levels of approximately 2000 miu/ml one month after conception. A peak level on the order of 100,000 miu/ml is attained in the third month, after which a gradual decline sets in. Following delivery, the HCG level normally undergoes rapid descent, reaching nonpregnant concentrations (usually less than 5 miu/ml) some two weeks later. Ectopic pregnancies and pregnancies terminating in spontaneous abortion tend to have lower than normal circulating HCG levels, while somewhat higher levels are often seen in multiple pregnancies. Principle of the Procedure IMMULITE 2000 HCG is a solid-phase, two-site chemiluminescent immunometric assay. Incubation Cycles: 1 30 minutes Time to First Result: 35 minutes Specimen Collection The use of an ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples. Hemolyzed samples may indicate mistreatment of a specimen before receipt by the laboratory; hence the results should be interpreted with caution. Centrifuging serum samples before a complete clot forms may result in the presence of fibrin. To prevent erroneous results due to the presence of fibrin, ensure that complete clot formation has taken place prior to centrifugation of samples. Some samples, particularly those from patients receiving anticoagulant therapy, may require increased clotting time. Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE 2000 HCG has not been tested with all possible variations of tube types. Consult the section on Alternate Sample Types for details on tubes that have been tested. Volume Required: 5 µl serum or urine Urine: A freshly voided, first-morning specimen is preferred. 22 Centrifuging or filtering (Whatman #1) is recommended to clear cloudy samples. Storage: Serum: 7 days at 2 8 C, or 2 months at 20 C. 18 Urine: 48 hours at 2 8 C, 22 or at 20 C until assayed. 13 Warnings and Precautions For in vitro diagnostic use. 2 IMMULITE 2000 HCG (PIEL2KCG-7 {33}, )

3 CAUTION! POTENTIAL BIOHAZARD Contains human source material. Each donation of human blood or blood component was tested by FDA-approved methods for the presence of antibodies to human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) and type 2 (HIV-2) as well as for hepatitis B surface antigen (HBsAg) and antibody to hepatitis C virus (HCV). The test results were negative (not repeatedly reactive). No test offers complete assurance that these or other infectious agents are absent; this material should be handled using good laboratory practices and universal precautions CAUTION: This device contains material of animal origin and should be handled as a potential carrier and transmitter of disease. H412 P273, P501 Harmful to aquatic life with long lasting effects. Avoid release to the environment. Dispose of contents and container in accordance with all local, regional, and national regulations. Contains: sodium azide; HCG Adjustors Reagents: Store at 2 8 C. Dispose of in accordance with applicable laws. Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C. Sodium azide, at concentrations less than 0.1 g/dl, has been added as a preservative. On disposal, flush with large volumes of water to prevent the buildup of potentially explosive metal azides in lead and copper plumbing. Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert.) Water: Use distilled or deionized water. Materials Supplied Components are a matched set. Labels on the inside box are needed for the assay. HCG Bead Pack (L2CG12) With barcode. 200 beads, coated with monoclonal murine anti-hcg. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KCG2: 1 pack L2KCG6: 3 packs HCG Reagent Wedge (L2CGA2) With barcode ml of alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to polyclonal ovine anti-hcg, in buffer, with preservative. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KCG2: 1 wedge L2KCG6: 3 wedges Before use, tear off the top of the label at the perforation, without damaging the barcode. Remove the foil seal from the top of wedge; snap the sliding cover down into the ramps on the reagent lid. HCG Adjustors (LCGL, LCGH) Two vials (Low and High) 2 ml each, of HCG in an HCG-free human serum matrix, with preservative. Stable at 2 8 C for 30 days after opening, or for 6 months (aliquotted) at 20 C. L2KCG2: 1 set L2KCG6: 2 sets Before running adjustors, place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes, so that the barcodes can be read by the on-board reader. Kit Components Supplied Separately HCG Sample Diluent (L2CGZ, L2CGZ4) For the on-board dilution of high samples. One vial of concentrated (ready-to-use) HCG-free human serum, with barcode labels. Storage: 30 days (after opening) at 2 8 C or 6 months (aliquotted) at 20 C. Before use, place an appropriate label on a mm test tube, so that the barcodes can be read by the on-board reader. L2CGZ, L2CGZ4: 5 labels L2CGZ: 50 ml L2CGZ4: 100 ml L2SUBM: Chemiluminescent Substrate L2PWSM: Probe Wash L2KPM: Probe Cleaning Kit IMMULITE 2000 HCG (PIEL2KCG-7 {33}, ) 3

4 LRXT: Reaction Tubes (disposable) L2ZT: 250 Sample Diluent Test Tubes ( mm) L2ZC: 250 Sample Diluent Tube Caps LCGCM: HCG High Level Control Module Also Required Distilled or deionized water; test tubes; controls Assay Procedure Note that for optimal performance, it is important to perform all routine maintenance procedures as defined in the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual. See the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual for preparation, setup, dilutions, adjustment, assay and quality control procedures. Recommended Adjustment Interval: 4 weeks Quality Control Samples: Follow government regulations or accreditation requirements for quality control frequency. Use controls or serum pools with at least two levels (low and high) of HCG. Siemens Healthcare Diagnostics recommends the use of commercially available quality control materials with at least 2 levels (low and high). A satisfactory level of performance is achieved when the analyte values obtained are within the Acceptable Control Range for the system, or within an established range determined by an appropriate internal laboratory quality control scheme. Qualitative Procedure for Urine The qualitative procedure allows for determining whether a urine sample has an HCG concentration above or below 30 miu/ml, within the precision of the assay. Concentrations above this cutoff may be considered positive for pregnancy providing other causes of high HCG levels have been ruled out, viz. trophoblastic and nontrophoblastic neoplasia. 4,9,10,15 Concentrations below this cutoff are to be expected for samples from individuals who are not pregnant, as well as for women in such an early stage of pregnancy that the HCG concentration has not yet reached the decision level set for the procedure. Assaying another sample collected two or more days later should settle the matter, since in early pregnancy HCG levels can be expected to double in approximately this time. 11 Interpretation of Results A result of greater than or equal to 30 miu/ml indicates that the patient sample is positive for pregnancy. A result of less than 30 miu/ml indicates that the patient sample is negative for pregnancy. Expected Values Based on its relationship to IMMULITE HCG (see Method Comparison), the assay can be expected to have essentially the same reference ranges. Males and Nonpregnant Females In a study performed with the IMMULITE HCG assay and involving serum samples from 797 adult volunteers, including 428 males and 369 nonpregnant females, 95% of the results for males were below that assay's detection limit (1.1 miu/ml) and all were below 2.5 miu/ml, while 83% of the results for nonpregnant females were below the detection limit, 95% were below 2.7 miu/ml, and all were below 5.3 miu/ml. The subjects were in apparent good health based on a questionnaire. Pregnant Females A total of 593 serum samples from apparently healthy pregnant women were processed by the IMMULITE HCG assay. The results are summarized below (in miu/ml) by gestational age (Gest.) equivalently, by weeks since last menstrual period (LMP). Also see Expected Values During Pregnancy graph. Weeks of Pregnancy Gest. LMP n Median Central 95% , , , ,090 23, , ,598 27, , ,678 20, , , , , , , ,100 4 IMMULITE 2000 HCG (PIEL2KCG-7 {33}, )

5 Consider these limits as guidelines only. Each laboratory should establish its own reference ranges. Pathological Conditions Ectopic pregnancies or abnormal intrauterine pregnancies have circulating HCG levels below normal for that gestational period; after an initial rise these levels plateau or fall. 3,17,18 Limitations The procedure for urine samples is designed solely as a screen for pregnancy, using a 30 miu/ml cutoff. Hence urinary results should be reported in a strictly qualitative manner, e.g. as positive or negative for pregnancy concentration values should not be reported for this sample type. Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings. Performance Data See tables and graphs for data representative of the assay's performance. Results are expressed as miu/ml. (Unless otherwise noted, all were generated on serum samples collected in tubes without gel barriers or clot-promoting additives.) Reportable Range: Up to 5000 miu/ml, in terms of the WHO 3rd IS 75/537 for quantitative determinations in serum. Analytical Sensitivity: 0.4 miu/ml High-Dose Hook Effect: None up to 600,000 miu/ml Precision: Samples were assayed in duplicate over the course of 20 days, two runs per day, for a total of 40 runs and 80 replicates. (See Precision table.) Linearity: Samples were assayed under various dilutions. (See Linearity table for representative data.) Recovery: Samples spiked 1 to 19 with three solutions (1313, 5720 and 30,340 miu/ml) were assayed. (See Recovery table for representative data.) Specificity: The assay is highly specific for HCG, with low crossreactivity to other glycoprotein hormones present in patient samples. (See Specificity table.) For concentrations as high as 10,000 ng/ml, the HCG α-subunit (WHO 75/569) showed less than 1% crossreactivity. HCG β-subunit (WHO 75/551), spiked into HCG Sample Diluent, yielded the tabulated results. (See Specificity table.) Bilirubin: Presence of bilirubin in concentrations up to 200 mg/l has no effect on results, within the precision of the assay. Hemolysis: Presence of hemoglobin in concentrations up to 384 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Lipemia: Presence of triglycerides in concentrations up to 3000 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Alternate Sample Type: To assess the effect of alternate sample types, blood was collected from 14 volunteers into plain, heparinized, EDTA vacutainer tubes, and Becton Dickinson SST vacutainer tubes. Equal volumes of the matched samples were spiked with various concentrations of HCG, to obtain values throughout the calibration range of the assay, and then assayed by the IMMULITE 2000 HCG procedure. (Heparin) = 1.06 (Serum) 7.06 miu/ml r = 0.99 (EDTA) = 1.08 (Serum) 6.7 miu/ml r = 0.99 (SST) = 0.98 (PlainTubes) 3.25 miu/ml r = 0.99 Means: 204 miu/ml (Serum) 211 miu/ml (Heparin) 197 miu/ml (EDTA) 214 miu/ml (SST) IMMULITE 2000 HCG (PIEL2KCG-7 {33}, ) 5

6 Method Comparison (Serum): The assay was compared to IMMULITE HCG on 115 patient samples. (Concentration range: approximately 1 to over 3000 miu/ml. See graph.) By linear regression: (IML 2000) = 1.0 (IML) 21 miu/ml r = Means: 668 miu/ml (IMMULITE 2000) 689 miu/ml (IMMULITE) For the 63 data pairs (out of 116) with results by both methods from 1 to 500 miu/ml: (IML 2000) = 0.91 (IML) miu/ml r = For the 22 data pairs (out of 116) with results by both methods from 1 to 50 miu/ml: (IML 2000) = 0.96 (IML) miu/ml r = Method Comparison (Urine): A total of 123 urine samples from pregnant women were processed by the IMMULITE 2000 HCG assay and by Double Antibody HCG. The samples, some of which were diluted, had HCG values ranging up to approximately 300 miu/ml. By linear regression: (IML 2000) = 1.04 (DAb) 10 miu/ml r = In another study with the IMMULITE 2000 HCG assay, as a check on the appropriateness of the 30 miu/ml cutoff used in the qualitative procedure, urinary results for nonpregnant women showed a clean separation from the distribution of repeated measurements made on a 30 miu/ml sample. (All results for the nonpregnant women: less than 3 miu/ml. Mean 6SD for the 30 miu/ml sample: 23 miu/ml.) References 1) Bangham DR, Storring PL. Standardisation of human chorionic gonadotropin, HCG subunits, and pregnancy tests. Lancet 1982;1:390. 2) Batzer F. Hormonal evaluation of early pregnancy. Fertil Steril 1980;34: ) Braunstein GD, et al. First-trimester chorionic gonadotropin measurements as an aid in the diagnosis of early pregnancy disorders. Amer J Obstet Gynecol 1978;131: ) Clayton L, et al. Endocrine aspects of trophoblastic neoplasia. J Reprod Med 1981;26: ) Corson SL, Horwitz CA, Lau HL, Soderstrom R. Early diagnosis of pregnancy: a symposium. J Reprod Med 1981;26: ) DeCherney AH, Minkin MJ, Spangler S. Contemporary management of ectopic pregnancy. J Reprod Med 1981;26: ) Goldstein DP, Berkowitz RS, Kosasa TS. Measurement of human chorionic gonadotropin. Major Problems in Obstet Gynecol 1982;14: ) Hager H, Van Weemen BK. Standardisation of human chorionic gonadotropin, HCG subunits, and pregnancy tests. Lancet 1982;1:629. 9) Kohorn EI. Hydatidiform mole and gestational trophoblastic disease in southern Connecticut. Obstet and Gynecol 1982;59: Erratum: The first diagram belongs with the caption to Figure 3, and vice versa. 10) Kosasa TS. Measurement of human chorionic gonadotropin. J Reprod Med 1981;26: ) Lenton E, Neal L, Sulaiman R. Plasma concentrations of human gonadotropin from the time of implantation until the second week of pregnancy. Fertil Steril 1982;37; ) Lindstedt G, Janson PO, Thorburn J. Sensitivity of serum chorionic gonadotropin assay for ectopic pregnancy. Lancet 1981;1: ) McCready J, Braunstein GD, et al. Modification of the choriogonadotropin beta-subunit radioimmunoassay for determination of urinary choriogonadotropin. Clin Chem 1978;24: ) Storring PL, Gaines-Das R, Bangham DR. International Reference Preparation of Human Chorionic Gonadotrophin for Immunoassay: potency estimates in various bioassay and protein binding assay systems. J Endocrinol 1980;84: ) Vaitukaitis J. Human chorionic gonadotropin a hormone secreted for many reasons. N Eng J Med 1979;301: ) Danzer H, Braunstein GD, et al. Maternal serum human chorionic gonadotropin concentrations and fetal sex predictions. Fertil Steril 1980;34: ) Hussa RO. The Clinical Marker HCG. New York: Praeger Publishers, ) Greene MF, de Montserrat MF, Tulchinsky D. In: Tietz NW, editor. Textbook of Clinical Chemistry. Philadelphia: Saunders, 1986: ) Braunstein GD, et al. Serum human chorionic gonadotropin levels throughout normal pregnancy. Am J Obstet Gynecol 1976;126: ) Babson AL The IMMULITE Automated Immunoassay System. J Clin Immunoassay 1991;14: ) National Committee for Clinical Laboratory Standards. Procedures for the collection of diagnostic blood specimens by venipuncture; approved standard. 4th ed. NCCLS Document H3-A4, Wayne, PA: NCCLS, ) Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests. 2nd Ed. Philadelphia: W.B. Saunders, ) Centers for Disease Control. Update: Universal precautions for prevention of transmission of human immunodeficiency virus, hepatitis B virus and other bloodborne pathogens in healthcare settings. MMWR, 1988;37:377 82, ) Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). Protection of Laboratory 6 IMMULITE 2000 HCG (PIEL2KCG-7 {33}, )

7 Workers From Occupationally Acquired Infections; Approved Guideline - Third Edition. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; NCCLS Document M29-A3. 25) Federal Occupational Safety and Health Administration, Bloodborne Pathogens Standard, 29 CFR Technical Assistance For technical assistance, contact your National Distributor. The Quality System of Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. is certified to ISO 13485:2003. Tables and Graphs Dilution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E in in % 4 in % 2 in % 1 in % 4 16 in in % 4 in % 2 in % 1 in % Česky. 1 Ředění, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 % Naměřená / Očekávaná, 5 16 v 16. Ελληνικά. 1 Αραίωση, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E, 5 16 στα 16. Polski. 1 Rozcieńczenie, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O, 5 16 w 16. Precision (miu/ml) Within-Run 1 Total 2 Mean 3 SD 4 CV 5 SD CV % % % % % % % % % % Česky. 1 V rámci stanovení, 2 Celkem, 3 Střední hodnota, 4 Směrodatná odchylka, 5 Variační koeficient. Ελληνικά. 1 Κατά την ίδια περίοδο, 2 Συνολικά, 3 Μέσος όρος, 4 SD, 5 CV. Polski. 1 Wewnątrz serii, 2 Całość, 3 Średnie, 4 SD, 5 CV. Linearity (miu/ml) Dilution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E in in % 4 in % 2 in % 1 in % 2 16 in in % 4 in % 2 in % 1 in % Recovery (miu/ml) Solution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E A % B % C % A % B % C % A % B % C % Česky. 1 Roztok, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 Naměřená / Očekávaná. Ελληνικά. 1 Διάλυμα, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E. Polski. 1 Roztwór, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O. Specificity Amount Added (ng/ml) 1 Apparent Concentration (ng/ml) 2 % Crossreactivity FSH 26.8 ND ND LH 16.5 ND ND TSH 860 ND ND ND: not detectable 4 Česky. 1 Přidané množství, 2 Zjevná koncentrace, 3 % Zkřížená reaktivita, 4 ND: nezjistitelné. IMMULITE 2000 HCG (PIEL2KCG-7 {33}, ) 7

8 Ελληνικά. 1 Προστέθηκαν, 2 Εμφανής συγκέντρωση, 3 % Διασταυρ.Αντίδραση, 4 ND: Μη ανιχνεύσιμη ποσότητα. Polski. 1 Ilość dodana, 2 Zmierzone stężenie, 3 % Reaktywności krzyżowej, 4 ND: nieoznaczalna. β-hcg WHO 75/551 ng/ml Apparent HCG Concentration HCG miu/ml HCG ng/ml* β-hcg ng/ml Crossreactivity % % % % *miu HCG/mL ng HCG/mL ng HCG/mL ng β-hcg/ml Method Comparison (IML 2000) = 1.0 (IML) 21 miu/ml r = English. HCG. Česky. HCG. Ελληνικά. HCG. Polski. HCG. Expected Values During Pregnancy English. Gestational Week. Česky. Týden těhotenství. Ελληνικά. Εβδομάδα της κύησης. Polski. Tydzień ciąży. Česky IMMULITE 2000 HCG Použití : Pro in vitro diagnostické použití na analyzátorech IMMULITE 2000 ke stanovení koncentrace lidského choriogonadotropinu (HCG) v séru a stanovení jeho přítomnosti v moči, jakožto pomůcky ke zjištění těhotenství. Katalogové číslo : L2KCG2 (200 stanovení), L2KCG6 (600 stanovení) Kód Metody : HCG Barva : Oranžová Shrnutí a vysvětlení Lidský choriogonadotropin (HCG) je dvouřetězcový glykoproteinový hormon (molekulová hmotnost ~ daltonů), který se normálně vyskytuje v krvi a moči během těhotenství. Je vylučován tkání placenty od prvotního trofoblastu, téměř od doby jeho implantace, a podporuje žluté tělísko během prvních týdnů těhotenství. V literatuře udávané typické množství HCG v cirkulaci jeden měsíc po početí je přibližně 2000 miu/ml. Nejvyšší koncentrace v řádu miu/ml dosahuje HCG ve třetím měsíci, pak postupně klesá. Po porodu normálně nastává rychlý sestup hladiny HCG a asi po dvou týdnech jeho koncentrace dosáhne úrovně jako u netěhotných žen (obyčejně méně než 5 miu/ml). U mimoděložního těhotenství a těhotenství končícího spontánním potratem bývají koncentrace HCG v cirkulaci nižší než normálně, zatímco při vícečetném těhotenství jsou často hodnoty HCG zvýšené. Princip stanovení Stanovení HCG na analyzátorech IMMULITE 2000 je oboustranná chemiluminiscenční imunochemická reakce v pevné fázi. Inkubační cykly : 1 30 minut Čas do prvního výsledku : 35 minut 8 IMMULITE 2000 HCG (PIEL2KCG-7 {33}, )

9 Odebírání vzorků K úpravě lipemických vzorků se doporučuje použití ultracentrifugy. Hemolyzované vzorky můžou být známkou nesprávného zacházení s preparátem ještě před přijetím do laboratoře; proto by výsledky měly být interpretovány s obezřetností. Centrifugace vzorků séra ještě před úplným vysrážením může mít za následek přítomnost fibrinu. Chybným výsledkům způsobeným přítomností fibrinu lze zamezit úplným vysrážením vzorků před jejich centrifugací. Pro některé vzorky, zejména od pacientů podstupujících antikoagulační léčbu, může srážlivost vyžadovat více času. Použití zkumavek pro odběr krve od různých výrobců může poskytovat rozličné hodnoty v závislosti na materiálech a přísadách, včetně gelových nebo fyzických bariér, aktivátorů srážení a/nebo antikoagulačních činidel. Stanovení HCG na analyzátorech IMMULITE 2000 nebylo testováno se všemi možnými variantami jednotlivých typů zkumavek. Informace o testovaných zkumavkách najdete v části o alternativních typech vzorků. Potřebný objem vzorku : 5 μl séra nebo moči Moč : Nejlepší je vzorek čerstvé první ranní moči. 22 Zakalené vzorky je vhodné upravit centrifugací nebo filtrací (Whatman #1). Skladování sérum : 7 dní při teplotě 2 8 C nebo 2 měsíce při teplotě 20 C. 18 Moč : 48 hodin při teplotě 2 8 C 22 nebo při teplotě 20 C do stanovení. 13 Upozornění a bezpečnostní opatření Pro in vitro diagnostické použití. POZOR! POTENCIÁLNÍ BIOHAZARD Obsahuje materiál lidského původu. Každé darování krve nebo jejích složek bylo testováno metodami schválenými FDA na přítomnost protilátek proti viru lidské imunodeficience typu 1 (HIV-1) a typu 2 (HIV-2) a také na povrchový antigen viru hepatitidy B (HBsAg) a protilátky proti viru hepatitidy C (HCV). Výsledky testu byly negativní (opakovaně nereaktivní). Žádný test však není absolutní zárukou nepřítomnosti uvedených nebo jiných infekčních zárodků ; s materiálem proto zacházejte podle zásad správné laboratorní praxe a dbejte obecných bezpečnostních opatření UPOZORNĚNÍ : Souprava obsahuje material živočišného původu, se kterým je třeba zacházet jako s potenciálním nosičem a přenašečem nemocí H412 P273, P501 Škodlivý pro vodní organismy, s dlouhodobými účinky. Zabraňte uvolnění do životního prostředí. Odstraňte obsah a obal v souladu se všemi místními, regionálními a národními předpisy. Obsahuje : azid sodný ; HCG kalibrátory Reagencie : Skladujte při teplotě 2 8 C. Likvidujte v souladu s platnými předpisy. Řiďte se obecnými pravidly bezpečnosti práce a se všemi komponenty nakládejte, jako by byly potenciálně infekční. Zdrojové materiály získané z lidské krve byly testovány a shledány nereaktivní na syfilis, na protilátky proti HIV 1 a 2, na povrchový antigen hepatitidy typu B (HbsAg), a na protilátky proti hepatitidě typu C. Jako konzervační látka byl přidán azid sodný v koncentracích menších než 0,1 g/dl. Při likvidaci vypláchněte velkým množstvím vody, aby se zamezilo nahromadění potenciálně výbušných azidů kovů v olověném a měděném potrubí. IMMULITE 2000 HCG (PIEL2KCG-7 {33}, ) 9

10 Chemiluminiscenční substrát : Vyvarujte se kontaminace a nevystavujte přímému slunečnímu světlu. (Viz připojený letáček.) Voda : Použijte destilovanou nebo deionizovanou vodu. Dodaný materiál Komponenty představují ucelenou sadu. Pro stanovení jsou zapotřebí štítky na vnitřní krabici. HCG zásobník s kuličkami (L2CG12) Opatřeno čárovým kódem. 200 kuliček potažených monoklonální myší protilátkou proti HCG. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KCG2 : 1 balení L2KCG6 : 3 balení HCG reagencie (L2CGA2) Opatřeno čárovým kódem. 11,5 ml alkalické fosfatázy (z telecího střeva) konjugované s polyklonální ovčí protilátkou proti HCG, v pufru, s konzervačním prostředkem. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KCG2 : 1 nádobka L2KCG6 : 3 nádobky Před použitím utrhněte vršek štítku v perforovaném místě, ale nepoškoďte čárový kód. Z vrchu nádobky odstraňte uzavírací fólii ; posuvný uzávěr zaklapněte do ramp na víčku reagencie. HCG kalibrátory (LCGL, LCGH) Dvě ampule (s nízkou a vysokou koncentrací), každá obsahuje 2 ml HCG v lidské sérové matrici bez HCG, s konzervačním prostředkem. Stabilní 30 dní po otevření při teplotě 2 8 C nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při 20 C. L2KCG2 : 1 sada L2KCG6 : 2 sady Před adjustací nalepte na testovací zkumavky příslušné alikvotní štítky (dodané se soupravou) tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. Materiál dodávaný zvlášť HCG diluent vzorků (L2CGZ, L2CGZ4) K automatickému ředění koncentrovaných vzorků analyzátorem. Jedna lahvička koncentrovaného (připraveného k použití) lidského séra bez HCG, se štítky s čárovým kódem. Skladování : 30 dní po otevření při teplotě 2 8 C nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při 20 C. Před použitím nalepte příslušný štítek na testovací zkumavku mm tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. L2CGZ, L2CGZ4 : 5 štítků L2CGZ: 50 ml L2CGZ4: 100 ml L2SUBM : Chemiluminiscenční Substrát L2PWSM : Promývací Roztok L2KPM : Čistící roztok na jehly LRXT : Reakční zkumavky (na jedno použití) L2ZT : 250 testovacích zkumavek na diluent vzorků ( mm) L2ZC : 250 uzávěrů na testovací zkumavky na diluent vzorků LCGCM : Kontrolní modul s vysokou koncentrací HCG Dále potřebujete Destilovanou nebo deionizovanou vodu; testovací zkumavky, kontroly Postup stanovení K dosažení optimálního výkonu je důležité provádět veškerou pravidelnou údržbu stanovenou v manuálu k analyzátorům IMMULITE V manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000 najdete postupy : přípravy, nastavení, ředění, adjustace, stanovení vzorků a kontrol. Doporučený Interval Mezi Adjustacemi : 4 týdny Vzorky ke kontrole kvality: Pokud jde o četnost kontroly kvality, je třeba řídit se platnými předpisy a akreditačními požadavky. Použijte kontroly nebo směsné vzorky s alespoň dvěma koncentracemi (vysokou a nízkou) HCG. Společnost Siemens Healthcare Diagnostics doporučuje používat obchodně dostupné materiály kontroly kvality o přinejmenším dvou koncentracích vysoké a nízké. Vyhovující funkčnosti se dosahuje, pokud zjištěné hodnoty analytu leží uvnitř přijatelného kontrolního rozmezí analyzátoru nebo uvnitř rozmezí stanoveného příslušným interním systémem kontroly kvality dané laboratoře. 10 IMMULITE 2000 HCG (PIEL2KCG-7 {33}, )

11 Stanovení přítomnosti HCG v moči Tato kvalitativní metoda umožňuje v rámci přesnosti stanovení určit, zda je koncentrace HCG ve vzorku moči nad nebo pod hodnotou 30 miu/ml. Koncentrace nad touto cut off hodnotou se dají považovat za pozitivní na těhotenství za předpokladu, že další příčiny (trofoblastické a netrofoblastické novotvary) byly vyloučeny. 4,9,10,15 Koncentrace pod touto cut off hodnotou se dají očekávat u osob, které nejsou těhotné a také u žen v tak časném stadiu těhotenství, že koncentrace HCG ještě nedosáhla rozhodující úrovně stanovené pro tuto metodu. Analýza dalšího vzorku za dva a více dnů by měla tuto záležitost vyřešit, protože v časném stadiu těhotenství se hladina HCG může přibližně za tuto dobu zdvojnásobit. 11 Hodnocení výsledků Výsledek větší než nebo rovný 30 miu/ml znamená, že vzorek pacientky je pozitivní na těhotenství. Výsledek menší než 30 miu/ml znamená, znamená, že vzorek pacientky je negativní na těhotenství. Očekávané hodnoty Na základě příbuznosti s testem HCG na analyzátoru IMMULITE (viz Srovnání metody) se u této metody dají očekávat prakticky shodná referenční rozmezí. Muži a netěhotné ženy Při výzkumu uskutečněném pomocí testu HCG na analyzátoru IMMULITE, který zahrnoval vzorky séra od 797 dospělých dobrovolníků včetně 428 mužů a 369 netěhotných žen, bylo 95% výsledků mužských vzorků pod detekční hranicí tohoto stanovení (1,1 miu/ml) a všechny byly pod 2,5 miu/ml. U netěhotných žen bylo 83% výsledků pod detekční hranicí, 95% bylo pod 2,7 miu/ml a všechny byly pod 5,3 miu/ml. Na základě dotazníků byly všichni tito jedinci v zjevně dobrém zdravotním stavu. Těhotné ženy Testem HCG na analyzátoru IMMULITE bylo stanoveno celkem 593 vzorků séra od zjevně zdravých těhotných žen. V následující tabulce je souhrn výsledků tohoto výzkumu (v miu/ml) podle stáří těhotenství (Gest.), podle počtu týdnů od poslední menstruace (LMP). Viz také graf Expected Values During Pregnancy. Týden těhotenství Gest. LMP n Medián Středních 95% 1,3 2 3, Uvedené hranice považujte pouze za orientační. Každá laboratoř by si měla stanovit svoje vlastní referenční rozmezí. Patologické stavy U mimoděložního nebo abnormálního nitroděložního těhotenství jsou hodnoty HCG v cirkulaci pod normální koncentrací odpovídající danému stáří těhotenství. Po počátečním růstu se tyto hodnoty ustálí nebo klesnou. 3,17,18 Omezení Tato metoda stanovení HCG ve vzorcích moči slouží pouze jako screen pro těhotenství a používá cut off hodnotu 30 miu/ml. Proto je u výsledků stanovení vzorků moči nutné zdůraznit jejich kvalitativní povahu, např. pozitivní nebo negativní na těhotenství hodnota koncentrace se pro tento typ vzorku nemá udávat. Heterofilní protilátky v lidském séru můžou reagovat s imunoglobuliny obsaženými v komponentech soupravy a způsobit interference s in vitro imunologickým stanovením. [Viz Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all imunologickým stanovením. Clin Chem 1988:34:27-33.] Vzorky pacientů rutinně vystavené kontaktu se zvířaty nebo produkty zvířecího séra můžou vykázat tento typ interference a potenciálně způsobit anomální výsledky. Tyto reagencie byly vyvinuty tak, aby bylo riziko interference minimalizováno; nicméně případné interakce mezi ojedinělými séry a komponenty testu se můžou vyskytnout. Pro IMMULITE 2000 HCG (PIEL2KCG-7 {33}, ) 11

12 diagnostické účely by se výsledky tohoto stanovení měly vždy používat v kombinaci s klinickými zkouškami, zdravotní historií pacienta a ostatními nálezy. Znaky metody Reprezentativní výsledky stanovení najdete v části Tabulky a grafy. Výsledky se udávají v miu/ml. (Pokud není uvedeno jinak, všechny výsledky byly získány na vzorcích séra odebraných do zkumavek bez gelových bariér nebo přísad podporujících srážlivost.) Rozsah měření : Do 5000 miu/ml, dle nařízení WHO 3rd IS 75/537 pro stanovení koncentrace v séru. Analytická citlivost : 0,4 miu/ml High-Dose Hook Effect : Do miu/ml žádný Přesnost : Vzorky byly stanovovány dvojmo v průběhu 20 dní, dva testy denně, celkem 40 testů a 80 replikátů. (Viz tabulka Precision.) Linearita : Stanovení vzorků bylo provedeno při rozličném ředění. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce Linearity.) Zpětná výtěžnost : Bylo provedeno stanovení vzorků séra s přídavkem tří roztoků (1313, 5720 a miu/ml) v poměru 1 : 19. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce Recovery.) Specificita : Stanovení je silně specifické vůči HCG s nízkou zkříženou reaktivitou s jinými glykoproteinovými hormony vyskytujícími se ve vzorku. (Viz tabulka Specificity.) Při koncentracích dosahujících ng/ml vykázala alfa-podjednotka HCG (WHO 75/569) méně než 1% zkříženou reaktivitu. Přídavek betapodjednotky HCG (WHO 75/551) do HCG diluentu vzorků poskytl výsledky uvedené v tabulce. (Viz tabulka Specificity.) Bilirubin : Přítomnost bilirubinu v koncentracích do 200 mg/l nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Hemolýza : Přítomnost hemoglobinu v koncentracích do 384 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Lipémie : Přítomnost triglyceridů v koncentracích do 3000 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Alternativní typ vzorku : K zhodnocení vlivu alternativního typu vzorku byly odebrány vzorky krve 14 dobrovolníků do obyčejných, heparinizovaných a EDTA vacutainer zkumavek a také do Becton Dickinson SST plastových vacutainer zkumavek. Do úměrných objemů odpovídajících vzorků byl v různých koncentracích přidán HCG, čímž byl pokryt celý kalibrační rozsah, a vzorky byly následně stanoveny pomocí testu HCG na analyzátorech IMMULITE (Heparin) = 1,06 (Sérum) 7,06 miu/ml r = 0,99 (EDTA) = 1,08 (Sérum) 6,7 miu/ml r = 0,99 (SST) = 0,98 (obyčejné zkumavky) 3,25 mlu/ml r = 0,99 Střední hodnoty : 204 miu/ml (Sérum) 211 miu/ml (Heparin) 197 miu/ml (EDTA) 214 miu/ml (SST) Srovnání metody (sérum) : Stanovení bylo porovnáno s testem HCG na analyzátoru IMMULITE na 115 vzorcích. (Koncentrační rozsah : přibližně 1 až přes 3000 miu/ml. Viz graf.) Podle lineární regrese : (IML 2000) = 1,0 (IML) 21 miu/ml r = 0,994 Střední hodnoty : 668 miu/ml (IMMULITE 2000) 689 miu/ml (IMMULITE) Pro 63 dvojic dat (z 116) s hodnotami podle obou metod od 1 do 500 miu/ml : (IML 2000) = 0,91 (IML) + 0,9 miu/ml r = 0,987 Pro 22 dvojic dat (z 116) s hodnotami podle obou metod od 1 do 50 miu/ml : (IML 2000) = 0,96 (IML) + 0,3 miu/ml r = 0,953 Srovnání metody (moč) : Celkem 123 vzorků moči od těhotných žen bylo zpracováno metodou HCG na analyzátorech IMMULITE 2000 a metodou Double Antibody HCG. Tyto vzorky, některé zředěné, měly hodnoty HCG do přibližně 300 miu/ml. Podle lineární regrese : (IML 2000) = 1,04 (DAb) 10 miu/ml r = 0, IMMULITE 2000 HCG (PIEL2KCG-7 {33}, )

13 V další studii pomocí testu HCG na analyzátorech IMMULITE 2000, která měla prověřit vhodnost hodnoty cut off ve výši 30 miu/ml použité při stanovení přítomnosti HCG ve vzorcích moči, se vzorky od netěhotných žen jasně izolovaly od rozdělení opakovaných měření vzorku s koncentrací 30 miu/ml. (Všechny vzorky od netěhotných žen : méně než 3 miu/ml. Střední hodnota 6SD pro vzorek s koncentrací 30 miu/ml : 23 miu/ml.) Technická Podpora Pro technickou podporu kontaktujte vašeho národního distributora. Systém kontroly jakosti společnosti Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. je certifikovaný podle ISO 13485:2003. Ελληνικά IMMULITE 2000 Χοριονική Γοναδοτροπίνη (HCG) Ενδεδειγμένη χρήση: Για in vitro διαγνωστική χρήση με τα συστήματα αναλυτών IMMULITE 2000 για την ποσοτική μέτρηση της ανθρώπινης χοριονικής γοναδοτροπίνης (HCG) στον ορό, και για αυστηρά ποιοτικούς προσδιορισμούς στα ούρα, ως βοήθημα για την ανίχνευση της εγκυμοσύνης. Αριθμός Καταλόγου: L2KCG2 (200 αναλύσεις), L2KCG6 (600 αναλύσεις) Κωδικός Ανάλυσης: HCG Χρώμα: Πορτοκαλί Περίληψη και Επεξήγηση Η ανθρώπινη χοριονική γοναδοτροπίνη (HCG) είναι μια δίκλωνη γλυκοπρωτεϊνική ορμόνη (ΜΒ ~37000) που βρίσκεται κανονικά στο αίμα και στα ούρα μόνο κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης. Εκκρίνεται από τον πλακούντα, ξεκινώντας με τον αρχικό τροφοβλάστη, σχεδόν από τη στιγμή της εμφύτευσης και εξυπηρετεί στο να υποστηρίζει to ωχρό σωμάτιο κατά τη διάρκεια των αρχικών εβδομάδων της εγκυμοσύνης. Σύμφωνα με τη βιβλιογραφία, η HCG στην κυκλοφορία τυπικά φτάνει σε επίπεδα περίπου 2000 miu/ml ένα μήνα μετά τη σύλληψη. Ένα κορυφαίο επίπεδο της τάξης των miu/ml αποκτάται στον τρίτο μήνα, μετά τον οποίο ξεκινά μια βαθμιαία μείωση. Στη συνέχεια, το επίπεδο της HCG κανονικά υφίσταται γρήγορη μείωση, φτάνοντας συγκεντρώσεις μη-εγκυμοσύνης (συνήθως μικρότερες των 5 miu/ml) περίπου δύο εβδομάδες αργότερα. Εξωμήτριες κυήσεις και εγκυμοσύνες που σταματούν με αυτόματες αποβολές τείνουν να έχουν χαμηλότερα επίπεδα από την HCG που είναι κανονικά στην κυκλοφορία, ενώ κάπως υψηλότερα επίπεδα παρατηρούνται συχνά σε πολλαπλές εγκυμοσύνες. Αρχή της Διαδικασίας Η IMMULITE 2000 HCG είναι μια ξηρής φάσης, δύο βημάτων, χημειοφωταυγής ανοσοεξέταση. Κύκλοι Επώασης: 1 30 λεπτά Χρόνος για το πρώτο αποτέλεσμα: 35 λεπτά Συλλογή δείγματος Συνιστάται η χρήση της υπερφυγοκέντρου για να καθαριστούν λιπιδαιμικά δείγματα. Αιμολυμένα δείγματα μπορεί να υποδηλώνουν κακή μεταχείριση του δείγματος πριν την παραλαβή του από το εργαστήριο και τα αποτελέσματα πρέπει να ερμηνεύονται με προσοχή. Η φυγοκέντρηση των δειγμάτων πριν την πλήρη πήξη μπορεί να έχει ως αποτέλεσμα την παρουσία θρόμβων. Για να αποφευχθούν λανθασμένα αποτελέσματα εξαιτίας της παρουσίας θρόμβων, βεβαιωθείτε ότι πριν την φυγοκέντρηση το αίμα έπηξε πλήρως. Κάποια δείγματα, ιδιαιτέρως αυτά των ασθενών που λαμβάνουν αντιπηκτική θεραπεία, ίσως χρειάζονται εκτεταμένο χρόνο πήξης Οι σωλήνες συγκέντρωσης αίματος από διαφορετικές εταιρείες μπορεί να φέρουν διάφορες τιμές, ανάλογα με τα υλικά και τα συμπληρώματα, συμπεριλαμβανομένων των με τζελ ή φυσικών σωληναρίων, των ενεργοποιητών πήξεως και/ή των αντιπηκτικών. Η IMMULITE 2000 HCG δεν έχει δοκιμαστεί με όλους τους τύπους IMMULITE 2000 HCG (PIEL2KCG-7 {33}, ) 13

14 σωληναρίων. Συμβουλευτείτε την παράγραφο για τους εναλλακτικούς τύπους δειγμάτων για περισσότερες πληροφορίες σχετικά με τα σωληνάρια που έχουν δοκιμαστεί. Απαιτούμενος όγκος: 5 µl ορού ή ούρων Ούρα: Προτιμάται δείγμα πρωινών ούρων, από τα οποία έχουν πεταχτεί τα πρώτα. 22 Φυγοκέντρηση ή φιλτράρισμα (Whatman #1) συνιστάται για να καθαριστούν τα θολά δείγματα. Φύλαξη Ορός: 7 ημέρες στους 2 8 C ή 2 μήνες στους 20 C. 18 Ούρα: 48 ώρες στους 2 8 C 22 ή στους 20 C μέχρι να αναλυθούν. 13 Προειδοποιήσεις και Προφυλάξεις Για in vitro διαγνωστική χρήση. ΠΡΟΣΟΧΗ! ΔΥΝΗΤΙΚΟΣ ΒΙΟΛΟΓΙΚΟΣ ΚΙΝΔΥΝΟΣ Περιέχει υλικό ανθρώπινης προέλευσης. Κάθε δωρεά ανθρώπινου αίματος ή συστατικού αίματος ελέγχθηκε με μεθόδους εγκεκριμένες από τον FDA για την ύπαρξη αντισωμάτων ενάντια στους ιούς της ανοσοανεπάρκειας του ανθρώπου τύπου 1 (HIV-1) και τύπου 2 (HIV-2), καθώς και για επιφανειακό αντιγόνο της ηπατίτιδας Β (HBsAg) και για αντισώματα ενάντια στον ιό της ηπατίτιδας C (HCV). Τα αποτελέσματα των εξετάσεων ήταν αρνητικά (όχι επανειλημμένα αντιδραστικά). Επειδή καμία εξέταση δεν παρέχει πλήρη διασφάλιση για την απουσία αυτών ή άλλων μολυσματικών παραγόντων, ο χειρισμός αυτού του υλικού θα πρέπει να γίνεται σύμφωνα με τις ορθές εργαστηριακές πρακτικές και γενικές προφυλάξεις ΠΡΟΣΟΧΗ: Η συσκευή αυτή περιέχει υλικό ζωικής προέλευσης και ο χειρισμός της πρέπει να γίνεται ως εάν επρόκειτο περί δυνητικού φορέα και παράγοντα μετάδοσης νόσου. H412 P273, P501 Επιβλαβές για τους υδρόβιους οργανισμούς, με μακροχρόνιες επιπτώσεις. Να αποφεύγεται η ελευθέρωση στο περιβάλλον. Απορρίψτε το περιεχόμενο και τον περιέκτη σε συμμόρφωση με όλους τους τοπικούς, περιφερειακούς και εθνικούς κανονισμούς. Περιέχει: αζίδιο νατρίου, Ρυθμιστές HCG Αντιδραστήρια: Φύλαξη στους 2 8 C. Υπόκεινται στην ισχύουσα νομοθεσία. Ακολουθείστε τις γενικές προφυλάξεις και χειριστείτε όλα τα συστατικά σαν να ήταν φορείς μολυσματικών παραγόντων. Όλα τα υλικά της μεθόδου που προέρχονται από ανθρώπινο αίμα έχουν ελεγχθεί και βρέθηκαν αρνητικά για σύφιλη, για αντισώματα στον HIV 1 και 2, για τα επιφανειακά αντιγόνα της ηπατίτιδας B και για αντισώματα της ηπατίτιδας C. Αζίδιο του νατρίου σε συγκεντρώσεις μικρότερες από 0,1 g/dl, έχει προστεθεί ως συντηρητικό. Κατά την απόθεση, ξεπλύνετε με πολύ νερό προκειμένου να εμποδίσετε την δημιουργία εκρηκτικών αζιδίων στους χάλκινους ή μολύβδινους σωλήνες αποχέτευσης. Υπόστρωμα χημειοφωταύγειας: Δεν πρέπει να εκτίθεται σε απευθείας ηλιακό φως. Δεν πρέπει να μολυνθεί. Προσφύγετε στο ένθετο για λεπτομέρειες. Νερό: Χρήση απεσταγμένου ή απιονισμένου νερού. Υλικά που διατίθενται Τα υλικά είναι μια ολοκληρωμένη ενότητα. Οι ετικέτες στο εσωτερικό κουτί είναι απαραίτητες για την ανάλυση. HCG σε συσκευασία σφαιριδίων (L2CG12) Με barcode. 200 σφαιρίδια, επικαλυμμένα με μονοκλωνικά αντισώματα anti-hcg ποντικού. Σταθερά στους 2 8 C μέχρι την ημερομηνία λήξης. L2KCG2: 1 πακέτο L2KCG6: 3 πακέτα 14 IMMULITE 2000 HCG (PIEL2KCG-7 {33}, )

15 Δοχείο Αντιδραστηρίων HCG (L2CGA2) Με barcode. 11,5 ml αλκαλικής φωσφατάσης (έντερο μόσχου) συζευγμένης σε πολυκλωνικά αμνιακά αντισώματα αντί-hcg, σε ρυθμιστικό διάλυμα, με συντηρητικό. Σταθερή στους 2 8 C μέχρι την ημερομηνία λήξης. L2KCG2: 1 δοχείο L2KCG6: 3 δοχεία Πριν την χρήση, αφαιρέστε την διαφανή ταινία προσέχοντας να μην καταστραφεί το πλαστικό κάλυμμα ή η γραμμογράφηση. Αφαιρέστε (ξεκολλήστε) προσεκτικά το κάλυμμα από την επάνω επιφάνεια του δοχείου, και πιέστε το κάλυμμα κάτω προς τους κεκλιμένους οδηγούς-ράγες. Ρυθμιστές HCG (LCGL, LCGH) Δύο φιαλίδια (Χαμηλό και Ψηλό) 2 ml το καθένα, με HCG σε υπόστρωμα ανθρώπινου ορού ελεύθερου HCG, με συντηρητικό. Σταθερά στους 2 8 C για 30 μέρες μετά το άνοιγμα ή 6 μήνες (διαχωρισμένα) στους 20 C. L2KCG2: 1 σετ L2KCG6: 2 σετ Πριν κάνετε τη ρύθμιση, τοποθετείστε τις κατάλληλες ετικέτες (παρέχονται με το kit) σε δοκιμαστικούς σωλήνες, έτσι, ώστε τα barcodes να μπορούν να διαβαστούν από κατάλληλο σύστημα. Συστατικά του Kit που παρέχονται ξεχωριστά Αραιωτικό δείγματος HCG (L2CGZ, L2CGZ4) Για την αραίωση δειγμάτων υψηλής συγκέντρωσης στο σύστημα. Ένα φιαλίδιο συμπυκνωμένου ανθρώπεινου ορού (έτοιμο προς χρήση), χωρίς HCG, με ετικέτες γραμμωτού κώδικα. Αποθήκευση: 30 μέρες (μετά το άνοιγμα) στους 2 8 C ή 6 μήνες (διαχωρισμένο) στους 20 C. Πριν τη χρήση, τοποθετείστε μια κατάλληλη ετικέτα σε ένα δοκιμαστικό σωλήνα mm, έτσι ώστε τα barcodes να μπορούν να διαβαστούν από κατάλληλο σύστημα. L2CGZ, L2CGZ4: 5 ετικέτες L2CGZ: 50 ml L2CGZ4: 100 ml L2SUBM: Χημειοφωταυγές υπόστρωμα L2PWSM: Πλυστικό του ανιχνευτή L2KPM: Kit καθαρισμού του ανιχνευτή LRXT: Σωλήνες αντίδρασης (μιας χρήσεως) L2ZT: 250 δοκιμαστικοί σωλήνες για διάλυση του δείγματος ( mm) L2ZC: 250 καπάκια για σωλήνες διάλυσης δείγματος LCGCM: HCG Υψηλού επιπέδου δείγμα ελέγχου Επίσης απαιτούνται Απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό, δοκιμαστικοί σωλήνες, δείγματα ελέγχου Διαδικασία της ανάλυσης Σημειώστε ότι για το βέλτιστο αποτέλεσμα, είναι σημαντικό να ακολουθηθούν όλες οι τυπικές διαδικασίες όπως ορίζονται στο εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE Βλέπε το εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000 για προετοιμασία, στήσιμο, αραιώσεις, ρυθμίσεις, ανάλυση και διαδικασίες ποιοτικού έλέγχου. Χρόνος μεταξύ των ρυθμίσεων: 4 εβδομάδες Δείγματα ποιοτικού ελέγχου: Εφαρμόστε τους κρατικούς κανονισμούς ή τις απαιτήσεις πιστοποίησης για τη συχνότητα του ποιοτικού ελέγχου. Χρησιμοποιήστε δείγματα ελέγχου ή δείγματα ορού τουλάχιστον δύο επιπέδων (χαμηλό και υψηλό) HCG. Η Siemens Healthcare Diagnostics συνιστά τη χρήση εμπορικά διαθέσιμων υλικών ελέγχου ποιότητας με τουλάχιστον 2 επίπεδα (χαμηλό και υψηλό). Ένα ικανοποιητικό επίπεδο απόδοσης επιτυγχάνεται όταν οι τιμές που προκύπτουν βρίσκονται εντός του αποδεκτού εύρους των υλικών ελέγχου για τον αναλυτή ή εντός ενός καθορισμένου εύρους που καθορίστηκε με βάση ένα κατάλληλο πλαίσιο εσωτερικού εργαστηριακού ποιοτικού ελέγχου. Διαδικασία Ποιοτικής Ανάλυσης των ούρων Η διαδικασία ποιοτικής ανάλυσης επιτρέπει τον προσδιορισμό του αν ένα δείγμα ούρων έχει συγκέντρωση HCG πάνω ή κάτω των 30 miu/ml, μέσα στα όρια ακρίβειας της μεθόδου. Συγκεντρώσεις πάνω από αυτό το όριο μπορεί να θεωρηθούν θετικές για εγκυμοσύνη δεδομένου ότι έχουν αποκλειστεί άλλες αιτίες υψηλών IMMULITE 2000 HCG (PIEL2KCG-7 {33}, ) 15

16 επιπέδων HCG, όπως τροφοβλαστική και μη τροφοβλαστική νεοπλασία. 4,9,10,15 Συγκεντρώσεις κάτω από αυτό το όριο αναμένεται για δείγματα από γυναίκες που δεν είναι εγκυμονούν, όπως επίσης και για γυναίκες σε τόσο αρχικό στάδιο εγκυμοσύνης που η συγκέντρωση της HCG δεν έχει φτάσει ακόμη το κρίσιμο επίπεδο για τη διαδικασία. Αναλύοντας άλλο δείγμα που συλλέχθηκε δύο ή περισσότερες ημέρες αργότερα θα λύσει το πρόβλημα, αφού τα χαμηλά επίπεδα της HCG στην αρχή της κύησης αναμένεται να διπλασιαστούν περίπου αυτήν τη στιγμή. 11 Ανάλυση των Αποτελεσμάτων Ένα αποτέλεσμα μεγαλύτερο ή ίσο του 30 miu/ml είναι ενδεικτικό ότι το υπό ανάλυση δείγμα είναι θετικό για εγκυμοσύνη. Ένα αποτέλεσμα μικρότερο του 30 miu/ml είναι ενδεικτικό ότι το υπό ανάλυση δείγμα είναι αρνητικό για εγκυμοσύνη. Αναμενόμενες τιμές Δεδομένης της σχέσης της με τη μέθοδο της IMMULITE HCG (βλ. Σύγκριση της Μεθόδου), η μέθοδος αναμένεται να έχει βασικά το ίδια εύρη αναφοράς. Αρσενικά άτομα και μη κυοφορούντα θηλυκά Σε μια μελέτη που πραγματοποιήθηκε με τη μέθοδο IMMULITE HCG και αφορούσε δείγματα ορού από 797 ενήλικες εθελοντές, μεταξύ των οποίων 428 αρσενικά άτομα και 369 μη κυοφορούντα θηλυκά, το 95% των αποτελεσμάτων για τα αρσενικά άτομα ήταν κάτω από το όριο ανίχνευσης της μεθόδου (1,1 miu/ml) και όλα ήταν κάτω από 2.5 miu/ml, ενώ το 83% των αποτελεσμάτων για τα μη κυοφορούντα θηλυκά ήταν κάτω από το όριο ανίχνευσης, το 95% ήταν κάτω από 2,7 miu/ml και όλα ήταν κάτω από 5,3 miu/ml. Τα υπό εξέταση άτομα ήταν φαινομενικά υγιείς, όπως διαπιστώθηκε από ερωτηματολόγιο. Κυοφορούντα θηλυκά Ένα σύνολο 593 δείγματα ορού από φαινομενικά υγιείς έγκυες γυναίκες υποβλήθηκε σε ανάλυση με τη μέθοδο IMMULITE HCG. Τα αποτελέσματα συνοψίζονται παρακάτω (σε miu/ml) σε χρόνο κύησης (Gest.) ισοδύναμα, σε εβδομάδες από την τελευταία έμμηνο ρύση (LMP). Βλέπε, επίσης, το γράφημα Αναμενόμενες τιμές κατά τη διάρκεια της κύησης. Εβδομάδες κύησης Gest. LMP n Μέσος όρος Κεντρική τιμή 95% 1,3 2 3, Θεωρείστε αυτά τα όρια μόνο σαν οδηγούς. Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να θεσπίσει τα δικά του εύρη αναφοράς. Παθολογικές Καταστάσεις Εξωμήτριες κυήσεις ή ανώμαλες ενδομήτριες κυήσεις έχουν επίπεδα HCG στην κυκλοφορία κάτω από το κανονικό για την περίοδο κύησης, μετά από μια αρχική αύξηση αυτά τα επίπεδα σταθεροποιούνται ή πέφτουν. 3,17,18 Περιορισμοί Η διαδικασία για τα δείγματα ούρων είναι σχεδιασμένη μόνο σαν έλεγχος για την εγκυμοσύνη, χρησιμοποιώντας ένα όριο των 30 miu/ml. Έτσι, τα αποτελέσματα των ούρων θα πρέπει να αναφέρονται με αυστηρά ποιοτικό τρόπο, π.χ. οι τιμές της συγκέντρωσης δεν θα πρέπει να είναι καθοριστικές για το «θετικό» ή «αρνητικό» μιας εγκυμοσύνης. Ετεροφυλικά αντισώματα στον ανθρώπινο ορό μπορούν να αντιδράσουν με τις ανοσοσφαιρίνες που χρησιμοποιούνται στην ανάλυση επιδρώντας στις in vitro μεθόδους ανοσοανάλυσης. [βλ. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Δείγματα από ασθενείς που εκτίθενται σε ζώα ή σε προϊόντα ζωικού ορού μπορεί να εμφανίσουν αυτού του τύπου την επίδραση που προκαλεί δυνητικά ανώμαλα αποτελέσματα. Αυτά τα αντιδραστήρια έχουν σχεδιαστεί έτσι ώστε να ελαχιστοποιείται ο κίνδυνος της επίδρασης, παρόλ αυτά, δυνητικές 16 IMMULITE 2000 HCG (PIEL2KCG-7 {33}, )

17 επιδράσεις ανάμεσα σε σπάνιους ορούς και συστατικά της ανάλυσης μπορεί να παρατηρηθούν. Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα που παίρνονται από αυτή τη μέθοδο θα πρέπει πάντα να χρησιμοποιούνται σε συνδυασμό με την κλινική εξέταση, το ιατρικό ιστορικό του ασθενούς και άλλα ευρήματα. Απόδοση Βλέπε Πίνακες και Γραφήματα για αντιπροσωπευτικά δεδομένα της εκτέλεσης της μεθόδου. Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε miu/ml. (Εκτός αν κάτι σημειώνεται διαφορετικά, όλα πραγματοποιήθηκαν σε δείγματα ορών που συλλέχθηκαν σε σωλήνες χωρίς παρεμποδιστές πηκτών ή προσθετικών που προκαλούν θρόμβους.) Εύρος μέτρησης: Μέχρι 5000 miu/ml, σε σχέση με το WHO 3rd IS 75/537 για τους ποσοτικούς προσδιορισμούς στον ορό. Αναλυτική Ευαισθησία: 0,4 miu/ml Επίδραση φαινομένου υψηλής δόσης Hook: Κανένα μέχρι τα miu/ml. Ακρίβεια: Τα δείγματα υφίσταντο αναλύσεις εις διπλούν σε διάστημα 20 ημερών, δύο τρεξίματα την ημέρα, σε σύνολο 40 τρεξιμάτων και 80 επαναλήψεων. (βλ. Πίνακα Precision.) Γραμμικότητα: Τα δείγματα υφίσταντο αναλύσεις σε διαφορετικά διαλύματα. (βλ. πίνακα Linearity για αντιπροσωπευτικά δεδομένα.) Ανάκτηση: Τα δείγματα 1 με 19 εμπλουτιστηκαν με τρία διαλύματα (1313, 5720 και miu/ml). (βλ. πίνακα Recovery για αντιπροσωπευτικά δεδομένα). Ειδικότητα: Η μέθοδος έχει υψηλή ειδικότητα για την HCG, με μικρή διασταυρούμενη αντίδραση με άλλες γλυκοπρωτεϊνικές ορμόνες που υπάρχουν στα δείγματα των ασθενών. (βλ. Πίνακα Specificity.) Για συγκεντρώσεις υψηλές της τάξης των ng/ml, η α-υπομονάδα της HCG (WHO 75/569) έδειξε λιγότερο από 1% διασταυρούμενη αντίδραση. Η β-υπομονάδα της HCG (WHO 75/551), που δοκιμάστηκε στο διαλύτη του δείγματος για την HCG έδωσε τα αποτελέσματα του πίνακα. (βλ. πίνακα Specificity.) Χολερυθρίνη: Παρουσία χολερυθρίνης σε συγκεντρώσεις μέχρι 200 mg/l δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Αιμόλυση: Παρουσία αιμοσφαιρίνης σε συγκεντρώσεις μέχρι 384 mg/dl/ml δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Λιπιδαιμία: Παρουσία τριγλυκεριδίων σε συγκεντρώσεις μέχρι 3000 mg/dl δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Εναλλακτικοί Τύποι Δείγματος: Για να αναλυθεί η επίδραση των εναλλακτικών τύπων δείγματος, συλλέχθηκε αίμα 14 εθελοντών σε απλούς, ηπαρινισμένους και EDTA δοκιμαστικούς σωλήνες (vacutainer) και SST. Ίδιες ποσότητες αντίστοιχων δειγμάτων εμπλουτίστηκαν (spiked) με διαφορετικές ποσότητες HCG, ώστε να υπάρχουν τιμές από όλο το εύρος καμπύλης, και όλα τα δείγματα μετά εξετάστηκαν σύμφωνα με τη διαδικασία της HCG IMMULITE 2000: (Ηπαρίνη) = 1,06 (Ορός) 7,06 miu/ml r = 0,99 (EDTA) = 1,08 (Ορός) 6,7 miu/ml r = 0,99 (SST) = 0,98 (Απλοί Σωλήνες) 3.25 mlu/ml r = 0.99 Μέσοι Όροι: 204 miu/ml (Ορός) 211 miu/ml (Ηπαρίνη) 197 miu/ml (EDTA) 214 miu/ml (SST) Σύγκριση της Μεθόδου (ορός): Η μέθοδος συγκρίθηκε με την αντίστοιχη μέθοδο της IMMULITE HCG σε 115 δείγματα ασθενών. (Εύρος συγκέντρωσης: περίπου 1 με πάνω από 3000 miu/ml. Βλ. γράφημα.) Η ανάλυση γραμμικής παλινδρόμησης έδωσε τα ακόλουθα αποτελέσματα: (IML 2000) = 1,0 (IML) 21 miu/ml r = 0,994 Μέσοι Όροι: 668 miu/ml (IMMULITE 2000) 689 miu/ml (IMMULITE) IMMULITE 2000 HCG (PIEL2KCG-7 {33}, ) 17

18 Για τα 63 ζεύγη δεδομένων (από τα 116) με αποτελέσματα και από τις δύο μεθόδους από 1 έως 500 miu/ml: (IML 2000) = 0,91 (IML) + 0,9 miu/ml r = 0,987 Για τα 22 ζεύγη δεδομένων (από τα 116) με αποτελέσματα και από τις δύο μεθόδους από 1 έως 50 miu/ml: (IML 2000) = 0,96 (IML) + 0,3 miu/ml r = 0,953 Σύγκριση της Μεθόδου (Ούρα): Ένα σύνολο 123 δειγμάτων ούρων από έγκυες γυναίκες αναλύθηκε με τη μέθοδο IMMULITE 2000 HCG και με τη μέθοδο Double Antibody HCG. Τα δείγματα, μερικά από τα οποία ήταν διαλυμένα, είχαν τιμές HCG που κυμαίνονταν μέχρι περίπου τα 300 miu/ml. Η ανάλυση γραμμικής παλινδρόμησης έδωσε τα ακόλουθα αποτελέσματα: (IML 2000) = 1,04 (DAb) 10 miu/ml r = 0,988 Σε μια άλλη μελέτη με τη μέθοδο IMMULITE 2000 HCG, σαν έλεγχο για το πόσο κατάλληλο είναι το όριο των 30 miu/ml που χρησιμοποιείται στη διαδικασία ποιοτικής ανάλυσης, τα αποτελέσματα από τα ούρα για τις μη κυοφορούσες γυναίκες έδειξαν μια καθαρή διάκριση από την κατανομή των επαναλαμβανόμενων μετρήσεων που έγιναν σε δείγμα 30 miu/ml. (Όλα τα αποτελέσματα για τις μη κυοφορούσες γυναίκες: μικρότερα από 3 miu/ml. Μέσος όρος 6SD για το 30 miu/ml δείγμα: 23 miu/ml.) Τεχνική Υποστήριξη Για τεχνική υποστήριξη αποταθείτε στον αντιπρόσωπο της χώρας σας. Το Σύστημα Ποιότητας της Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. είναι επικυρωμένο με ISO 13485:2003. Polski IMMULITE 2000 HCG Przeznaczenie: Test diagnostyczny in vitro przeznaczony dla analizatorów systemów IMMULITE 2000 do ilościowego oznaczenia poziomu ludzkiej gonadotropiny kosmówkowej (HCG) w surowicy i wyłącznie jakościowego oznaczenia HCG w moczu w celu wykrywania ciąży. Numer katalogowy: L2KCG2 (200 testów), L2KCG6 (600 testów) Kod testu: HCG Kolor: Pomarańczowy Wprowadzenie Ludzka gonadotropina kosmówkowa (HCG) jest hormonem składającym się z dwóch łańcuchów glikoproteinowych (MW ~ ), występującym normalnie we krwi a w moczu wyłącznie w okresie ciąży. Jest wydzielana przez tkankę łożyska począwszy od pierwotnego trofoblastu, prawie od momentu inplantacji, a jej rola polega na podtrzymywaniu ciałka żółtego we wczesnych tygodniach ciąży. Zgodnie z piśmiennictwem, miesiąc po zapłodnieniu krążąca HCG osiąga poziom około 2000 miu/ml. Szczytowy poziom - rzędu miu/ml przypada na trzeci miesiąc ciąży, po czym następuje stopniowy spadek stężenia HCG. Po porodzie poziom HCG gwałtownie obniża się osiągając wartość jak przed ciążą (zazwyczaj mniej niż 5 miu/ml) już w dwa tygodnie później. Ciąże pozamaciczne i kończące się samoistnymi poronieniami charakteryzują się niższymi stężeniami HCG niż ciąże prawidłowe, natomiast wyższe stężenia zdarzają się w przypadku ciąż mnogich. Zasada testu IMMULITE 2000 HCG jest chemiluminescencyjnym, dwupunktowym, immunomentrycznym testem fazy stałej. Czas Inkubacji: 1 30 minut Czas do pierwszego wyniku: 35 minut 18 IMMULITE 2000 HCG (PIEL2KCG-7 {33}, )

19 Preparatyka Próbek Zalecane jest klarowanie próbek lipemicznych przez ultrawirowanie. Hemoliza może świadczyć o nieprawidłowym postępowaniu z próbką na etapie przedlaboratoryjnym. Fakt ten należy brać pod uwagę przy interpretacji wyników. Odwirowanie próbki krwi przed zakończeniem wykrzepiania może spowodować, że w supernatancie pozostanie fibryna stanowiąca przyczynę fałszywych wyników. Przed przystąpieniem do wirowania należy mieć pewność, że skrzep jest ostatecznie uformowany. Niektóre próbki, a zwłaszcza pochodzące od osób poddanych leczeniu antykoagulantami, wymagają dłuższego czasu na wytworzenie skrzepu. W zależności od producenta probówki do pobierania krwi mogą różnie wpływać na uzyskiwane wyniki. Istotne jest tworzywo i czynniki dodatkowe jak żel lub bariery oddzielające skrzep, aktywatory krzepnięcia oraz antykoagulanty. Wpływ wszystkich możliwych wariantów probówek na test IMMULITE 2000 HCG nie został określony. Informacje o przetestowanych wariantach podano w akapicie Wpływ materiału na oznaczenie. Wymagana objętość próbki: 5 µl surowicy lub moczu Mocz: preferowana jest próbka świeżo oddanego, porannego moczu. 22 Zaleca się wirowanie lub filtrowanie (Whatman #1) próbek mętnych. Przechowywanie : Surowica: 7 dni w 2 8 C lub 2 miesiące w 20 C. 18 Mocz: 48 godzin w 2 8 C 22 lub w 20 C do oznaczenia. 13 Ostrzeżenia i warunki wstępne Test diagnostyczny in vitro. PRZESTROGA! POTENCJALNE ZAGROŻENIE BIOLOGICZNE Zawiera materiał pochodzenia ludzkiego. Każdą porcję ludzkiej krwi lub składnika krwi pochodzącą od dawców przetestowano metodami zaaprobowanymi przez FDA na obecność przeciwciał przeciwko ludzkiemu wirusowi nabytego niedoboru odporności typu 1 (HIV-1) i typu 2 (HIV-2), antygenu powierzchniowego zapalenia wątroby typu B (HBsAg) i przeciwciał przeciwko wirusowi zapalenia wątroby typu C (HCV). Wyniki tych badań były ujemne (nie wykazały powtarzalnej reaktywności). Jednak żadne badanie nie gwarantuje całkowitej pewności, że te lub inne czynniki chorobotwórcze nie są obecne w materiale; z tym materiałem należy postępować zgodnie z zasadami dobrej praktyki laboratoryjnej i stosować uniwersalne środki ostrożności PRZESTROGA: Materiał pochodzenia zwierzęcego. Postępować tak jak z materiałem potencjalnie zakaźnym. H412 P273, P501 Działa szkodliwie na organizmy wodne, powodując długotrwałe skutki. Unikać uwolnienia do środowiska. Pojemnik i zawartość usuwać zgodnie z wszystkimi lokalnymi, regionalnymi i krajowymi przepisami. Zawiera: azydek sodu; HCG Kalibratory Odczynniki: Przechowywać w 2 8 C. Usuwać zgodnie z instrukcją. Zachowywać środki ostrożności konieczne przy pracy z materiałem potencjalnie zakaźnym. W materiałach pochodzących z krwi ludzkiej wykluczono obecność syfilisu, przeciwciał anty-hiv1/2, HBsAg i przeciwciał anty-hcv. Niektóre składniki zestawu mogą zawierać azydek sodu w stężeniu mniejszym niż 0,1 g/dl, użyty jako konserwant. Wykorzystane odczynniki usuwać w dużej ilości wody, by zapobiec osadzaniu azydku sodu w rurach miedzianych lub ołowianych, co może doprowadzić do wytworzenia potencjalnie wybuchowych azydków tych metali. IMMULITE 2000 HCG (PIEL2KCG-7 {33}, ) 19

20 Substrat chemiluminescencyjny: Unikać zanieczyszczenia i chronić przed bezpośrednim światłem słonecznym (patrz ulotka). Woda: Dejonizowana lub destylowana. Elementy zestawu Elementy zestawu tworzą całość. Kody na wewnętrznych pokrywach pudełka są niezbędne do wykonania oznaczenia HCG Pojemnik z Kulkami (L2CG12) Z kodem kreskowym. 200 kulek opłaszczonych mysim przeciwciałem monoklonalnym anty-hcg. Stabilne w 2 8 C do daty ważności. L2KCG2: 1 opakowanie L2KCG6: 3 opakowań HCG Klin Odczynnikowy (L2CGA2) Z kodem kreskowym. 11,5 ml alkalicznej fosfatazy (izolowanej z jelita cieląt) sprzęgniętej z owczym poliklonalnym przeciwciałem anty-hcg, w buforze, z konserwantem. Stabilny 2 8 C do daty ważności. L2KCG2: 1 klin L2KCG6: 3 kliny Przed użyciem zerwać taśmę zabezpieczającą nie uszkadzając kodu kreskowego. Usunąć foliową uszczelką komór odczynnikowych. Wsunąć przesuwne zamknięcie komór w prowadnice w pokrywie klina. HCG Kalibratory (LCGL, LCGH) Dwie fiolki (niski i wysoki) po 2 ml każda, zawierające HCG w matrycy surowicy ludzkiej pozbawionej HCG, z konserwantem. Po otwarciu stabilny 30 dni w 2 8 C lub 6 miesięcy w 20 C (rozpipetować). L2KCG2: 1 zestaw L2KCG6: 2 zestawy Przed wykonaniem kalibracji umocować na probówkach odpowiednie nalepki z kodem kreskowym (dostarczane z zestawem) rozpoznawane przez czytnik kodów kreskowych aparatu. Materiały dostarczane oddzielnie HCG - Rozcieńczalnik próbek (L2CGZ, L2CGZ4) Do automatycznego rozcieńczania wysokich próbek. Jedna fiolka koncentrowanej, gotowej do użycia pozbawionej HCG-surowicy ludzkiej, nalepkami kodu kreskowego. Po otwarciu stabilny przez 30 dni w 2 8 C lub 6 miesięcy w 20 C (rozpipetować). Usuwać zgodnie z instrukcją. Wraz z rozcieńczalnikiem dostarczane są nalepki z kodami kreskowymi. Nalepkę umieścić na probówce ( mm), by umożliwić jej rozpoznanie przez czytnik kodów aparatu. L2CGZ, L2CGZ4: 5 nalepek L2CGZ: 50 ml L2CGZ4: 100 ml L2SUBM: Substrat chemiluminescencyjny L2PWSM: Roztwór płuczący L2KPM: Roztwór czyszczący igłę pipetora LRXT: Probówki reakcyjne (jednorazowe) L2ZT: 250 probówek do rozcieńczania próbek mm L2ZC: 250 korków do probówek na rozcieńczalnik LCGCM: Zestaw Wysokiej Kontroli HCG Ponadto niezbędne woda destylowana lub dejonizowana, probówki, kontrole Procedura oznaczenia Przestrzeganie procedur dotyczących utrzymania aparatu, zawartych w Podręczniku operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000 poprawia charakterystykę uzyskiwanych wyników. Procedury: przygotowania aparatu, ustawień aparatu, przygotowania i rozcieńczania próbek, rekalibracji, oznaczenia i kontroli jakości zgodnie z Podręcznikiem operatora do obsługi systemów IMMULITE Zalecany odstęp pomiędzy rekalibracjami: 4 tygodnie Próbki kontrolne: Przestrzegać przepisów państwowych i wymogów kontrolnych w zakresie częstotliwości kontroli jakości. Stosować kontrole lub pule surowic co najmniej o niskim i wysokim poziomie HCG. 20 IMMULITE 2000 HCG (PIEL2KCG-7 {33}, )

21 Siemens Healthcare Diagnostics zaleca stosowanie dostępnych w handlu próbek kontroli jakości o co najmniej 2 poziomach (niskim i wysokim). Uznaje się, że test przebiega prawidłowo, gdy uzyskane wartości analitu plasują się w przyjętym dla Kontroli zakresie dla danego analizatora lub w zakresie opracowanym w ramach wewnątrzlaboratoryjnego systemu zapewnienia jakości. Jakościowe oznaczenie HCG w moczu Jakościowe oznaczenie HCG w moczu polega na ustaleniu, czy próbka zawiera HCG w stężeniu powyżej lub poniżej 30 miu/ml, w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Stężenie powyżej wartości granicznej wskazuje na ciążę u badanej po wykluczeniu innych przyczyn podwyższonego poziomu HCG a mianowicie trofoblastycznych i nietrofoblastycznych nowotworów. 4,9,10,15 Stężenie HCG poniżej 30 miu/ml wskazuje na brak ciąży lub na tę jej fazę, w której hormon nie osiągnął jeszcze poziomu decyzyjnego dla testu. Przebadanie kolejnej próbki dwa lub więcej dni później powinno dać ostateczną odpowiedź, gdyż we wczesnym etapie ciąży stężenie HCG powinno ulec w ciągu kilku dni podwojeniu. 11 Interpretacja wyników Wynik większy lub równy 30 miu/ml wskazuje, że próbka jest dodatnia pod kątem ciąży. Wynik mniejszy niż 30 miu/ml wskazuje, że próbka jest ujemna pod kątem ciąży. Oczekiwane wartości Opierając się na pokrewieństwie z testem IMMULITE HCG (Porównanie metod) można oczekiwać, że zakresy wartości referencyjnych testów będą identyczne. Mężczyźni i kobiety nie będące w ciąży Badania przeprowadzone przy użyciu metody IMMULITE HCG objęły surowice pochodzące od dorosłych 797 ochotników: 428 mężczyzn 369 kobiet nie będących w ciąży, 95% wyników mężczyzn mieściło się poniżej zakresu oznaczalności metody (1,1 miu/ml), a wszystkie były poniżej 2,5 miu/ml. Natomiast u kobiet nie będących w ciąży 83% wyników plasowało się poniżej zakresu oznaczalności testu, 95% poniżej 2,7 miu/ml, a wszystkie plasowały się poniżej 5,3 miu/ml. Na podstawie wywiadu stwierdzono, że badani byli w dobrej kondycji zdrowotnej. Kobiety ciężarne Testem IMMULITE HCG przebadano grupę 593 próbek surowicy od ewidentnie zdrowych ciężarnych kobiet. Wynik podano poniżej (w miu/ml) w zależności od wieku ciąży (Gest.) i odpowiednio, tygodnia od ostatniej miesiączki (LMP). Porównaj również z wykresem "Wartości oczekiwane dla ciąży. Tygodnie ciąży Wiek. LMP n Mediana Środkowe 95% 1,3 2 3, Powyższe wartości należy traktować jako orientacyjne. Każde laboratorium powinno wyznaczyć własne zakresy referencyjne. Stany patologiczne W ciążach pozamacicznych lub nieprawidłowych ciążach wewnątrzmacicznych poziom krążącej HCG był poniżej normalnego zakresu wartości dla tego okresu. Po początkowym wzroście HCG utrzymywała się na stałym poziomie lub ulegała obniżeniu. 3,17,18 Ograniczenia Oznaczenie HCG w moczu należy traktować wyłącznie jako przesiewowy test ciążowy z wartością graniczną 30 miu/ml. Wynik w moczu należy traktować wyłącznie jakościowo to znaczy dodatni lub ujemny pod kątem ciąży. Nie należy podawać wartości liczbowych. Przeciwciała heterofilne obecne w surowicy ludzkiej mogą wchodzić w reakcję z immunoglobulinami będącymi reagentami testu immunologicznego, wpływając na IMMULITE 2000 HCG (PIEL2KCG-7 {33}, ) 21

22 przebieg oznaczenia in vitro. [Porównaj: Boscato L.M., Stuart M.C.: Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays Przeciwciała heterofilne - problem wszystkich testów immunologicznych. Clin Chem 1988:34: 27-33]. Wpływ przeciwciał heterofilnych może ujawnić się w oznaczeniach wykonywanych w surowicy osób mających ciągły kontakt ze zwierzętami lub zwierzęcymi produktami krwiopochodnymi, stanowiąc potencjalną przyczynę błędnych wyników. W teście ryzyko interferencji przeciwciał heterofilnych zostało zminimalizowane przez odpowiedni dobór proporcji odczynników, tym niemniej interferencja taka może potencjalnie nastąpić w rzadkich przypadkach. W postępowaniu diagnostycznym wyniki uzyskane tą metodą powinny być z zasady interpretowane w połączeniu z badaniem klinicznym pacjenta, jego historią choroby oraz innymi okolicznościami. Parametry testu Dane charakteryzujące test przedstawiono w tabelach i wykresach. Wyniki podano w miu/ml. (O ile nie podano inaczej, wszystkie wyniki dotyczą surowicy, a próbki pobierano do probówek bez bariery żelowej i substancji przyspieszających krzepnięcie.) Zakres raportowania: Do 5000 miu/ml (WHO 3 nd IS 75/537) dla badań ilościowych w surowicy. Czułość analityczna: 0,4 miu/ml Efekt wysokiej dawki Hook Effect: Nie występuje do stężenia miu/ml Precyzja: Próbki testowano przez okres 20 dni w duplikatach, dwa razy dziennie, co dało w sumie 40 serii i 80 powtórzeń. (patrz: tabela Precyzja). Liniowość: Oznaczano próbki poddane kolejnym rozcieńczeniom. (Tabela Liniowość.) Odzysk: Badano próbki wzbogacane w stosunku objętościowym 1 do 19 roztworami HCG o stężeniach, kolejno: (1313, 5720 i miu/ml) (patrz: Tabela Odzysk). Specyficzność: Metoda jest wysoce specyficzna w stosunku do HCG, wykazując niską reaktywność krzyżową z innymi hormonami glikoproteinowymi występującymi w badanej surowicy (patrz: Tabela Specyficzność). Dla stężeń ng/ml podjednostka α HCG (WHO 75/569) dawała reakcję krzyżową poniżej 1%. Podjednostka β HCG (WHO 75/551) dodawana do Rozcieńczalnika HCG wykrywana była w ilościach podanych w tabeli (patrz: Tabela Specyficzność). Bilirubina: Obecność bilirubiny w stężeniu do 200 mg/l nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Hemoliza: Obecność hemoglobiny w stężeniu do 384 mg/dl nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Lipemia: Obecność trójglicerydów w stężeniu do 3000 mg/dl nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Wpływ rodzaju materiału na oznaczenie: Wpływ rodzaju próbki na oznaczenie określano w próbkach krwi pobieranych od 14 wolontariuszy do probówek zwykłych, heparynowych, EDTA oraz probówek z barierą żelową SST, systemu próżniowego Becton Dickinson. Jednakowe objętości porównywanych próbek wzbogacano stężeniami HCG dobieranymi tak, by pokryć zakres liniowości testu i oznaczano w teście IMMULITE 2000 HCG. (Heparyna) = 1,06 (Surowica) 7,06 miu/ml r = 0,99 (EDTA) = 1,08 (Surowica) 6,7 miu/ml r = 0,99 (SST) = 0,98 (Zwykłe probówki) 3,25 miu/ml r = 0,99 Średnie: 204 miu/ml (Surowica) 211 miu/ml (Heparyna) 197 miu/ml (EDTA) 214 miu/ml (SST) Porównanie metod (Surowica): Test porównywano z testem IMMULITE HCG w grupie 115 próbek badanych. (Zakres stężeń około: 1 do ponad 3000 miu/ml. Porównaj wykres.) Uzyskano równanie regresji liniowej: (IML 2000) = 1,0 (IML) 21 miu/ml r = 0,994 Średnie: 668 miu/ml (IMMULITE 2000) 689 miu/ml (IMMULITE) 22 IMMULITE 2000 HCG (PIEL2KCG-7 {33}, )

23 Dla 63 (z 116) par wyników z obu metod o stężeniach od 1 do 500 miu/ml: (IML 2000) = 0,91 (IML) + 0,9 miu/ml r = 0,987 Dla 22 (z 116) par wyników z obu metod o stężeniach od 1 to 50 miu/ml: (IML 2000) = 0,96 (IML) + 0,3 miu/ml r = 0,953 Porównanie metod (Mocz): 123 próbki moczu od ciężarnych oznaczano testem IMMULITE 2000 HCG i testem HCG Double Antibody (podwójne przeciwciało). Próbki (niektóre rozcieńczone) zawierały HCG w stężeniach do około 300 miu/ml. Uzyskano następujące równanie regresji liniowej: (IML 2000) = 1,04 (DAb) 10 miu/ml r = 0,988 W innych badaniach weryfikowano wartość diagnostyczną 30 miu/ml jako punktu odcięcia dla poziomu HCG w moczu w jakościowym teście ciążowym IMMULITE 2000 HCG. Wykazano wyraźną różnicę rozkładu wyników u kobiet nie ciężarnych i wyników uzyskanych w wielokrotnych Pomoc techniczna i konsultacje Krajowy Dystrybutor udziela wszechstronnej pomocy technicznej. System Kontroli Jakości Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. posiada Certyfikat Jakości ISO 13485:2003. IMMULITE is a trademark of Siemens Healthcare Diagnostics Siemens Healthcare Diagnostics. All rights reserved. Made in: UK Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. Glyn Rhonwy, Llanberis, Gwynedd LL55 4EL United Kingdom PIEL2KCG 7 {33} Changes in this Edition: cc#eu22534: 1) Removed references to discontinued products. 2) Under Warnings and Precautions, added biohazard symbol and potential biohazard statement, caution statement, required GHS hazard and precautionary codes and statements, offending chemicals and sources. 3) Under References, added citations from the potential biohazard statement. 4) Changed Origin: UK to Made in: UK. 5) Updated the manufacturer address to include Glyn Rhonwy. 6) In Understanding the Symbols, revised the symbol for catalog number, added a GHS pictogram for health hazard, and updated existing symbols with GHS pictograms and terminology for exclamation mark, corrosion, skull and crossbones, and environment. Understanding the Symbols Understanding the Symbols En English Vysvětlivky symbolů Επεξήγηση των συμβόλων Znaczenie symboli Cz Česky El Ελληνικά Pl Polski The following symbols may appear on the product labeling: / Na štítku výrobku mohou být uvedeny následující symboly: / Τα ακόλουθα σύμβολα ενδέχεται να εμφανίζονται στην επισήμανση του προϊόντος: / Na etykietach produktu mogą pojawiać się poniższe symbole: Symbol Definition En: In vitro diagnostic medical device Cz: Zdravotnický prostředek pro in vitro diagnostiku El: In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή Pl: Sprzęt do medycznej diagnostyki in vitro En: Catalog Number Cz: Katalogové číslo El: Αριθμός καταλόγου Pl: Numer katalogowy En: Manufacturer Cz: Výrobce El: Κατασκευαστής Pl: Producent 0088 when used for Trisomy 21 testing pøi použití k testu Trizomie 21 Όταν χρησιμοποιείται για εξέταση Τρισωμίας 21 przy użyciu z testem Trisomy 21 IMMULITE 2000 HCG (PIEL2KCG-7 {33}, ) 23

24 Symbol Definition En: Authorized Representative in the European Community Cz: Autorizované zastoupení v Evropské unii El: Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα Pl: Autoryzowany przedstawiciel w Unii Europejskiej En: CE Mark Cz: CE značka El: Σήμανση CE Pl: Znak CE En: CE Mark with identification number of notified body Cz: CE značka s identifikačním číslem notifikovaného orgánu El: Σήμανση CE με αριθμό αναγνώρισης του φορέα πιστοποίησης Pl: Znak CE z numerem identyfikacyjnym jednostki notyfikowanej En: Consult instructions for use Cz: Postupujte podle návodu k použití El: Συμβουλευτείτε τις οδηγίες λειτουργίας Pl: Zapoznać się z instrukcją użycia En: Caution! Potential Biohazard Cz: Pozor! Potenciální biohazard El: Πρoσοχή! Δυνητικός βιολογικός κίνδυνος Pl: Uwaga! Potencjalne zagrożenie biologiczne En: Temperature limitation (2 8 C) Cz: Teplotní rozsah (2 8 C) El: Περιορισμός θερμοκρασίας (2 8 C) Pl: Zakres temperatury (2 8 C) En: Upper limit of temperature ( -20 C) Cz: Horní teplotní limit ( -20 C) El: Ανώτερο όριο θερμοκρασίας ( -20 C) Pl: Górny zakres temperatury ( -20 C) En: Lower limit of temperature ( 2 C) Cz: Spodní teplotní limit ( 2 C) El: Κατώτερο όριο θερμοκρασίας ( 2 C) Pl: Dolny zakres temperatury ( 2 C) LOT Symbol Definition En: Do not freeze (> 0 C) Cz: Nezmrazovat (> 0 C) El: Μην καταψυχετε (> 0 C) Pl: Nie zamrażać (> 0 C) En: Do not reuse Cz: Pro jednorázové použití El: Μην κάνετε επαναληπτική χρήση Pl: Nie używać powtórnie En: Keep away from sunlight Cz: Chraňte před slunečním světlem El: Διατηρείτε μακριά από το ηλιακό φως Pl: Chronić przed światłem słonecznym En: Batch code Cz: Šarže El: Κωδικός παρτίδας Pl: Kod serii En: Contains sufficient for (n) tests Cz: Dostatečné množství pro (n) testů El: Περιεχόμενο επαρκές για (n) εξετάσεις Pl: Zawartość wystarczająca na (n) testów En: Date format (year-month) Cz: Formát data (rok-měsíc) El: Μορφή ημερομηνίας (έτος-μήνας) Pl: Zapis daty (rok-miesiąc) En: Use by Cz: Spotřebujte do El: Ημερομηνία λήξης Pl: Wykorzystać do En: Health Hazard Cz: Zdravotní riziko El: Κίνδυνος για την υγεία Pl: Zagrożenie dla zdrowia En: Exclamation Mark Cz: Vykřičník El: Θαυμαστικό Pl: Wykrzyknik En: Corrosion Cz: Koroze El: Διάβρωση Pl: Działanie żrące 24 IMMULITE 2000 HCG (PIEL2KCG-7 {33}, )

25 Symbol Definition En: Skull and Crossbones Cz: Lebka se zkříženými hnáty El: Νεκροκεφαλή με διασταυρούμενα οστά Pl: Czaszka i skrzyżowane piszczele CONTROL CONTROL 1 CONTROL 2 Symbol Definition En: Control Cz: Kontrola El: Έλεγχος Pl: Kontrola BEAD PACK TEST UNIT En: Environment Cz: Prostředí El: Περιβάλλον Pl: Środowisko En: Bead Pack Cz: Zásobník s kuličkami El: Συσκευασία σφαιριδίων Pl: Pojemnik z kulkami En: Test Unit Cz: Testovací Jednotky El: Μονάδες ανάλυσης Pl: Jednostki testowe CONTROL 3 CONTROL + CONTROL + L En: Positive Control Cz: Pozitivní kontrola El: Θετικός Έλεγχος Pl: Kontrola dodatnia En: Low Positive Control Cz: Mírně pozitivní kontrola El: Χαμηλός Θετικός Έλεγχος Pl: Kontrola nisko dodatnia REAG WEDGE REAG WEDGE A REAG WEDGE B REAG WEDGE D ADJUSTOR ADJUSTOR L ADJUSTOR H ADJUSTOR AB DIL En: Reagent Wedge Cz: Reagencie El: Δοχείο Αντιδραστηρίων Pl: Klin odczynnikowy En: Adjustor Cz: Kalibrátor El: Ρυθμιστής Pl: Kalibrator En: Adjustor, low Cz: Kalibrátor, nízký El: Ρυθμιστής, χαμηλό Pl: Kalibrator, niski En: Adjustor, high Cz: Kalibrátor, vysoký El: Ρυθμιστής, υψηλό Pl: Kalibrator, wysoki En: Adjustor Antibody Cz: Protilátka proti kalibrátoru El: Ρυθμιστής αντισώματος Pl: Przeciwciało Kalibratora En: Sample Diluent Cz: Diluent Vzorků El: Αραιωτικό δείγματος Pl: Rozcieńczalnik próbek CONTROL CONTROL AB PRE PRE A B DITHIOTHREITOL BORATE-KCN BUF En: Negative Control Cz: Negativní kontrola El: Αρνητικός Έλεγχος Pl: Kontrola ujemna En: Control Antibody Cz: Protilátka proti kontrole El: Έλεγχος αντισώματος Pl: Przeciwciało Kontrolne En: Pretreatment Solution Cz: Roztok na úpravu vzorků El: Διάλυμα προεπεξεργασίας Pl: Roztwór do wstępnej preparatyki En: Dithiothreitol Solution Cz: Roztok dithiotreitolu El: Διάλυμα διθειοθρεϊτόλης Pl: Roztwór dithiothreitolu En: Borate-KCN Buffer Solution Cz: Pufrový roztok boritan-kcn El: Ρυθμιστικό διάλυμα Βορικού-KCN Pl: Bufor boranowocyjankowy IMMULITE 2000 HCG (PIEL2KCG-7 {33}, ) 25