Beta-2 Microglobulin. For use on IMMULITE 2000 systems

Transcript

1 Beta-2 Microglobulin For use on IMMULITE 2000 systems

2 IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin English Intended Use: For in vitro diagnostic use with the IMMULITE 2000 Systems Analyzers for the quantitative measurement of β 2 -microglobulin (β 2 M) in serum and urine, as an aid in clinical diagnosis of active rheumatoid arthritis and kidney disease. Catalog Number: L2KBM2 (200 tests) Test Code: BMG Color: Orange Summary and Explanation β 2 -Microglobulin (β 2 M) was first isolated in 1968 from the urine of patients with Wilson's disease and cadmium poisoning. It has since been identified as the light chain of the HLA-A, -B, and -C major histocompatibility complex antigens, 100 amino acids in length and noncovalently associated with the heavy chain. In structure and amino acid sequence, it resembles the CH3 region of IgG, though it is antigenically distinct. β 2 M occurs on the surface of nucleated cells abundantly on lymphocytes and monocytes and on many tumor cell lines. Its function is unknown, but it may control the expression and biosynthesis of antigens on the cell surface. Because of its low molecular weight (11,800 daltons), 95 percent of all free β 2 M is rapidly eliminated by glomerular filtration. Proximal tubular cells then take up 99.9 percent of this filtered amount by endocytosis, after which degradation to amino acids occurs. Normal urinary excretion of β 2 M is less than 370 micrograms per 24 hours; higher rates are interpreted as evidence of tubular dysfunction. Increased urinary excretion of β 2 M has been observed in a wide variety of conditions including Wilson's disease, Fanconi's syndrome, untreated congenital galactosemia, nephrocalcinosis, cystinosis, chronic potassium depletion, interstitial nephritis, connective-tissue diseases such as rheumatoid arthritis and Sjogren's syndrome, 2 occupational exposure to heavy metals such as cadmium and mercury, 11 upper urinary tract infections, 8 kidney transplantation, 4 and nephrotoxicity resulting from cyclosporin, 7 aminoglycoside 9 or cis-platinum therapy. 10 Elevated serum concentrations in the presence of a normal glomerular filtration rate suggest increased β 2 M production or release. Increased levels may be seen in lymphoproliferative diseases such as multiple myeloma, -cell chronic lymphocytic leukemia, 6 Hodgkin's disease, non-hodgkin's lymphoma; 5 systemic lupus erythematosus; rheumatoid arthritis; Sjogren's syndrome; Crohn's disease; 5 and certain viral infections, including cytomegalovirus, non-a and non-b hepatitis and infectious mononucleosis. 3 Elevated serum levels have also been observed in some hemodialysis patients and in renal transplant rejection. 1 Measurement of β 2 M is considered a sensitive means for diagnosing proximal tubular dysfunction. It is reportedly the most reliable test for distinguishing upper from lower urinary tract infections, and a useful method for assessing the results of therapy and diagnosing recurrences of acute pyelonephritis using serial determinations. 2 Principle of the Procedure IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin is a solid-phase, two-site chemiluminescent immunometric assay. Incubation Cycles: 1 30 minutes Time to first result: 35 minutes Specimen Collection Serum The use of an ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples. Hemolyzed samples may indicate mistreatment of a specimen before receipt by the laboratory; hence the results should be interpreted with caution. Centrifuging serum samples before a complete clot forms may result in the presence of fibrin. To prevent erroneous results due to the presence of fibrin, ensure that complete clot formation has taken place prior to centrifugation of 2 IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin (PIEL2KBM-3 {20}, )

3 samples. Some samples, particularly those from patients receiving anticoagulant therapy, may require increased clotting time. Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin has not been tested with all possible variations of tube types. Consult the section on Alternate Sample Types for details on tubes that have been tested. Volume Required: 5 µl serum sample Storage: 7 days at 2 8 C, or 2 weeks at 20 C. Dilution Factor: 40 For serum samples, select 40 in the Dilution Factor window. Urine Volume Required: 5 µl urine sample Special Instructions: First void the urinary bladder, then drink a large glass of water and collect a urine sample within 1 hour. ph Adjustment: Once collected, adjust the ph of all urine samples to between 6 and 8 with 1.0 M NaOH. Storage (ph-adjusted): 2 days at 2 8 C, or 2 months at 20 C. Warnings and Precautions For in vitro diagnostic use. CAUTION: This device contains material of animal origin and should be handled as a potential carrier and transmitter of disease. H411 P273, P391, P501 Toxic to aquatic life with long lasting effects. Avoid release to the environment. Collect spillage. Dispose of contents and container in accordance with all local, regional, and national regulations. Contains: 2-methyl-2Hisothiazol-3-one; Beta-2 Microglobulin Adjustors Reagents: Store at 2 8 C. Dispose of in accordance with applicable laws. Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C. Sodium azide, at concentrations less than 0.1 g/dl, has been added as a preservative. On disposal, flush with large volumes of water to prevent the buildup of potentially explosive metal azides in lead and copper plumbing. Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert.) Water: Use distilled or deionized water. Materials Supplied Components are a matched set. Labels on the inside box are needed for the assay. Beta-2 Microglobulin Bead Pack (L2BM12) With barcode. 200 beads, coated with polyclonal goat anti-β 2 -microglobulin. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KBM2: 1 pack Beta-2 Microglobulin Reagent Wedge (L2BMA2) With barcode ml alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to murine monoclonal anti-β 2 -microglobulin in buffer, with preservative. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KBM2: 1 wedge Before use, tear off the top of the label at the perforations, without damaging the barcode. Remove the foil seal from the top of wedge; snap the sliding cover down into the ramps on the reagent lid. Beta-2 Microglobulin Adjustors (LBML, LBMH) Two vials (Low and High) of lyophilized β 2 -microglobulin in a synthetic matrix. Reconstitute each vial with 4.0 ml distilled or deionized water. Mix by gentle swirling or inversion until the lyophilized material is fully dissolved. Stable at 2 8 C for 30 days after reconstitution, or for 6 months (aliquotted) at 20 C. L2KBM2: 1 set IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin (PIEL2KBM-3 {20}, ) 3

4 Before making an adjustment, place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes so that the barcodes can be read by the on-board reader. Kit Components Supplied Separately Multi-Diluent 2 (L2M2Z, L2M2Z4) For on-board dilution of high urine samples, and for 1:40 dilution of all serum samples. One vial, concentrated (ready-to-use), nonhuman protein/buffer matrix, with preservative. Storage: 30 days (after opening) at 2 8 C or 6 months (aliquotted) at 20 C. L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml Barcode labels are provided for use with the diluent. Before use, place an appropriate label on a mm test tube, so that the barcodes can be read by the on-board reader. L2M2Z: 3 labels L2M2Z4: 5 labels L2SUBM: Chemiluminescent Substrate L2PWSM: Probe Wash L2KPM: Probe Cleaning Kit LRXT: Reaction Tubes (disposable) L2ZT: 250 Sample Diluent Test Tubes ( mm) L2ZC: 250 Sample Diluent Tube Caps BMCM: Tri-level Beta-2 Microglobulin Control Module Also Required Distilled or deionized water; test tubes; controls Assay Procedure See the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual for preparation, setup, dilutions, adjustment, assay and quality control procedures. Note that for optimal performance, it is important to perform all routine maintenance procedures as defined in the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual. Recommended Adjustment Interval: 4 weeks Quality Control Samples: Use controls or serum or urine pools with at least two levels (low and high) of β 2 -microglobulin. Expected Values Based on its relationship to IMMULITE Beta-2 Microglobulin (see Method Comparison), the assay can be expected to have essentially the same reference ranges. Serum: A reference range study for IMMULITE Beta-2 Microglobulin was performed using serum samples from adult volunteers, including both men and nonpregnant women ranging from approximately 20 to 70 years of age (central 95%: years, median: 40 years). The subjects were in apparent good health, based on a questionnaire. Blood samples were collected in France, Germany, the Netherlands and Portugal. Results were generated by an independent laboratory in the Netherlands using IMMULITE kits. (The samples were collected in plain glass tubes without anticoagulants, gel barriers, or clot-promoting additives, and assayed in singlicate.) Medians and 95th percentiles for relevant subgroups are tabulated below. Percentiles were determined nonparametrically. ng/ml Group Median 2.5%ile 95%ile 97.5%ile n Males 1, ,157 2, Females 1, ,295 2, Combined 1, ,164 2, Urine: The upper limit of normal in urine has been reported to be 300 ng/ml. 9 This is consistent with expectations for the IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin kit. Consider these limits as guidelines only. Each laboratory should establish its own reference ranges. Limitations Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: ] Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of 4 IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin (PIEL2KBM-3 {20}, )

5 interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings. Performance Data See Tables and Graphs for data representative of the assay's performance. Results are expressed in ng/ml. (Unless otherwise noted, all were generated on serum samples collected in tubes without gel barriers or clot-promoting additives.) Conversion Factor: ng/ml 1 µg/l Calibration Range: up to 500 ng/ml (up to 500 µg/l) The assay is traceable to an internal standard manufactured using qualified materials and measurement procedures. Analytical Sensitivity: 4.0 ng/ml (4.0 µg/l) High-dose Hook: No effect up to 10,000 ng/ml (10,000 µg/l) Precision: Samples were assayed in duplicate over the course of 20 days, two runs per day, for a total of 40 runs and 80 replicates. (See Precision table.) Linearity: Samples were assayed under various dilutions. (See "Linearity" table for representative data.) Recovery: Samples spiked 1 to 19 with three β 2 -microglobulin solutions (678, 1,291, and 2,420 ng/ml) were assayed. (See "Recovery" table for representative data.) Specificity: The antibody is highly specific for β 2 -microglobulin. (See "Specificity" table.) Bilirubin: Presence of bilirubin in concentrations up to 200 mg/l has no effect on results, within the precision of the assay. Hemolysis: Presence of hemoglobin in concentrations up to 384 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Lipemia: Presence of triglycerides in concentrations up to 3,000 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Alternate Sample Type: To assess the effect of alternate sample types, blood was collected from 15 volunteers into plain, heparinized, EDTA and Becton Dickinson SST vacutainer tubes. Equal volumes of the matched samples were spiked with various concentrations of β 2 -microglobulin, to obtain values throughout the calibration range of the assay, and then assayed by the IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin procedure. (Heparin) = 1.02 (Serum) 1.53 ng/ml r = 0.99 (EDTA) = 1.04 (Serum) 7.85 ng/ml r = 0.99 (SST) = 1.06 (Plain Tubes) ng/ml r = 0.99 Means: 118 ng/ml (Serum) 119 ng/ml (Heparin) 115 ng/ml (EDTA) 126 ng/ml (SST) Method Comparison Serum: The assay was compared to IMMULITE Beta-2 Microglobulin on 55 serum samples. (Concentration range: approximately 1,270 to 9,500 ng/ml, prior to 1-in-40 on-board dilution.) See "Method Comparison: Serum" graph.) By linear regression: (IML 2000) = 0.92 (IML) 102 ng/ml r = Means: 2,767 ng/ml (IMMULITE 2000) 3,112 ng/ml (IMMULITE) Method Comparison Urine: The assay was compared to IMMULITE Beta-2 Microglobulin on 52 urine samples. (Concentration range: approximately 6 to 300 ng/ml. See "Method Comparison: Urine" graph.) By linear regression: (IML 2000) = 0.89 (IML) ng/ml r = Means: 89 ng/ml (IMMULITE 2000) 98 ng/ml (IMMULITE) IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin (PIEL2KBM-3 {20}, ) 5

6 References 1) Backman L, Ringden O, Bjorkhem I, Lindback B. Increased serum β2-microglobulin during rejection, cyclosporin-induced nephrotoxity, and cytomegalovirus infection in renal transplant recipients. Transplantation 1986;42: ) Cooper E, Forbes M, Hammbling M. Serum β2-microglobulin and C-reactive protein concentrations in viral infections. J Clin Path 1984;37: ) Fields B, Sollinger H, Glass N, Carlson I, Belzer F. Beta-2-microglobulin versus creatinine as the sole indicator of rejection in renal transplants. Transplant Proc 1984;16: ) Forman D. Serum β2-microglobulin as an indicator of neoplasia. J Clin Immunoassay 1983;6: ) Gejyo F, Homma N, Suzuki J, Arakawa M. Serum levels of β2-microglobulin as a new form of amyloid protein in patients undergoing long-term hemodialysis. N Engl J Med 1986;314: ) Peterson L. β2-microglobulin. CCN 1988;14:6. 7) Schardijn G, Statius van Eps L. b2-microglobulin: its significance in the evaluation of renal function. Kidney Int 1987;32: ) Schentag J, Sutfin T, Plaut M, Jusko W. Early detection of aminoglycoside nephrotoxity with urinary β2-microglobulin. J Med 1978;9: ) Sims H, Miller L. β2-microglobulin in laboratory diagnosis. Lab Med 1984;15: ) Taniguchi N, Tanaka M, Kishihara C, Ohno H, Kondo T, Matsuda I, Fujino T, Harada M. Determination of carbonic anhydrase C and β2-microglobulin by radioimmunoassay in urine of heavy-metalexposed subjects and patients with renal tubular acidosis. Environ Res 1979;20: ) Woo KT, Lee EJC, Lau YK, Lim CH. Beta-2-microglobulin in the assessment of renal function of the transplanted kidney. Nephron 1985;39: Tables and Graphs Precision (ng/ml) Within-Run 1 Total 2 Mean 3 SD 4 CV 5 SD CV % % % % % % % % % % % % Česky. 1 V rámci stanovení, 2 Celkem, 3 Střední hodnota, 4 Směrodatná odchylka, 5 Variační koeficient. Ελληνικά. 1 Κατά την ίδια περίοδο, 2 Συνολικά, 3 Μέσος όρος, 4 SD, 5 CV. Polski. 1 W serii, 2 Całość, 3 Średnie, 4 SD, 5 CV. Specificity Compound 1 Amount Added 2 % Cross reactivity 3 Human IgG 5 g/l ND ND 4 : not detectable Česky. 1 Sloučenina, 2 Přidané množství, 3 % Zkřížená reaktivita, 4 ND: nezjistitelné. Ελληνικά. 1 Μείγμα, 2 Προστέθηκαν, 3 % Διασταυρ. Αντίδραση, 4 ND: Μη ανιχνεύσιμη ποσότητα. Polski. 1 Składnik, 2 Ilość dodana, 3 % reaktywności Krzyżowej, 4 ND: Nieoznaczlne. Technical Assistance For technical assistance, contact your National Distributor. The Quality System of Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. is certified to ISO 13485: IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin (PIEL2KBM-3 {20}, )

7 Linearity (ng/ml) Dilution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E in in % 4 in % 2 in % 1 in % 2 16 in in % 4 in % 2 in % 1 in % 3 16 in in % 4 in % 2 in % 1 in % 4 16 in in % 4 in % 2 in % 1 in % 5 16 in in % 4 in % 2 in % 1 in % Česky. 1 Ředění, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 % Naměřená / Očekávaná, 5 16 v 16. Ελληνικά. 1 Αραίωση, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E, 5 16 στα 16. Polski. 1 Rozcieńczenie, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O, 5 16 w 16. Recovery (ng/ml) Solution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E A % B % C % A % B % C % 3 35 A % B % C % 4 60 A % B % C % A % B % C % A % B % C % Česky. 1 Roztok, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 Naměřená / Očekávaná. Ελληνικά. 1 Διάλυμα, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E. Polski. 1 Roztwór, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O. Method Comparison: Serum IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin IMMULITE Beta-2 Microglobulin, ng/ml (IML 2000) = 0.92 (IML) 102 ng/ml r = IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin (PIEL2KBM-3 {20}, ) 7

8 Method Comparison: Urine IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin IMMULITE Beta-2 Microglobulin, ng/ml (IML 2000) = 0.89 (IML) ng/ml r = English. Beta-2 Microglobulin Česky. Beta-2 Mikroglobulin. Ελληνικά. Μικροσφαιρίνη Βήτα-2. Polski. Beta-2 Mikroglobulina. Česky IMMULITE 2000 Beta-2 Mikroglobulin Použití : Pro in vitro diagnostické použití na analyzátorech IMMULITE 2000 ke stanovení koncentrace β 2 -mikroglobulinu (β 2 M) v moči nebo séru, jakožto pomůcky při klinické diagnóze aktivní revmatoidní artritidy a onemocnění ledvin. Katalogové číslo : L2KBM2 (200 stanovení) Kód metody : BMG Barva : Oranžová Shrnutí a vysvětlení β 2 -Mikroglobulin (β 2 M) byl poprvé izolován v roce 1968 z moči pacientů s Wilsonovou chorobou a otravou kadmiem. Jedná se o lehký řetězec hlavních komplexních antigenů tkáňové snášenlivosti HLA-A, -B a -C složený ze 100 aminokyselin, který je s těžkým řetězcem spojený nekovalentní vazbou. Jeho struktura a pořadí aminokyselin připomíná CH3 část řetězce imunoglobulinů (IgG), i když antigenově je odlišný. β 2 M se nachází na povrchu buněk s jádrem hojně na lymfocytech a monocytech a na mnohých nádorových buňkách. Jeho funkci neznáme, snad je to regulace vyznačení a biosyntézy antigenů na povrchu buněk. Jeho nízká molekulová hmotnost ( daltonů) je příčinou toho, že 95 % veškerého volného β 2 M se rychle vyloučí glomerulární filtrací. Proximální tubulární buňky následně endocytózou resorbují 99,9 % tohoto přefiltrovaného množství, pak následuje rozpad na jednotlivé aminokyseliny. Normálně se močí vyloučí méně než 370 mikrogramů β 2 M za 24 hodin. Vyšší vyloučené množství se považuje za příznak tubulární dysfunkce. Zvýšené množství β 2 M vyloučené do moči bylo pozorováno u různých stavů včetně Wilsonovy choroby, Fanconiho syndromu, neléčené kongenitální galaktosemie, nefrokalcinóze, cystinóze, chronické ztrátě draslíku, intersticiální nefritíze, při onemocněních pojivových tkání jako jsou revmatoidní artritida a Sjogrensův syndrom, 2 při práci s těžkými kovy (kadmium, rtuť), 11 infekcích horních močových cest, 8 transplantacích ledvin 4 a nefrotoxicitě způsobené cyklosporinem, 7 aminoglykosidem 9 nebo cis-platinovou terapií. 10 Zvýšená koncentrace v séru za přítomnosti normální glomerulární filtrace poukazuje na zvýšenou tvorbu nebo uvolňování β 2 M. Zvýšené hodnoty se vyskytují při lymfoproliferativních onemocněních jako jsou mnohočetné myelomy, chronická lymfoidní leukémie, 6 Hodgkinsonova choroba, nonhodgkinsonovy lymfomy, 5 systémové lupus erythematosus, revmatoidní artritida, Sjogrenův syndrom, Crohnova nemoc 5 a při některých virových infekcích včetně cytomegaloviru, non-a a non-b hepatitidě a infekční mononukleóze. 3 Zvýšená hladina v séru byla rovněž pozorována u některých hemodialyzovaných pacientů a při rejekci po transplantaci ledvin. 1 Měření β 2 M se považuje za citlivou metodu při diagnostice proximální tubulární dysfunkce. Údajně se jedná o nejspolehlivější metodu při rozlišování infekce horních a dolních močových cest. Při sériovém testování je to i vhodná metoda pro hodnocení výsledků léčby a při diagnostice recidivy akutní pyelonefritidy. 2 8 IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin (PIEL2KBM-3 {20}, )

9 Princip Stanovení Stanovení IMMULITE 2000 Beta-2 Mikroglobulin je oboustranná chemiluminiscenční imunometrická reakce v pevné fázi. Inkubační cykly : 1 30 minut Čas do prvního výsledku : 35 minut Odebírání vzorků Sérum K úpravě lipemických vzorků se doporučuje použití ultracentrifugy. Hemolyzované vzorky můžou být známkou nesprávného zacházení s preparátem ještě před přijetím do laboratoře ; proto by výsledky měly být interpretovány s obezřetností. Centrifugace vzorků séra ještě před úplným vysrážením může mít za následek přítomnost fibrinu. Chybným výsledkům způsobeným přítomností fibrinu lze zamezit úplným vysrážením vzorků před jejich centrifugací. Některé vzorky, zejména od pacientů podstupujících antikoagulační léčbu, může srážlivost vyžadovat více času. Použití zkumavek pro odběr krve od různých výrobců může poskytovat rozličné hodnoty v závislosti na materiálech a přísadách, včetně gelových nebo fyzických bariér, aktivátorů srážení a/nebo antikoagulačních činidel. Stanovení Beta-2 Mikroglobulin na analyzátorech IMMULITE 2000 nebylo testováno se všemi možnými varianty jednotlivých typů zkumavek. Informace o testovaných zkumavkách najdete v části o alternativních typech vzorků. Potřebný objem vzorku : 5 μl séra Skladování : 7 dní při teplotě 2 8 C nebo 2 týdny při teplotě 20 C. Faktor ředění : 40 Pro vzorky séra zvolte 40 v okně Dilution Factor. Moč Potřebný objem vzorku : 5 μl moče Speciální pokyny : Po vyprázdnění močového měchýře vypijte velkou sklenici vody a během jedné hodiny odeberte moč. Úprava ph : Po odebrání moči upravte ph všech vzorků moči na hodnotu mezi 6 a 8 s 1,0 M NaOH. Skladování (po úpravě ph) : 2 dny při teplotě 2 8 C nebo 2 měsíce při teplotě 20 C. Upozornění a bezpečnostní opatření Pro in vitro diagnostické použití. UPOZORNĚNÍ : Souprava obsahuje material živočišného původu, se kterým je třeba zacházet jako s potenciálním nosičem a přenašečem nemocí. H411 P273, P391, P501 Toxický pro vodní organismy, s dlouhodobými účinky. Zabraňte uvolnění do životního prostředí. Uniklý produkt seberte. Odstraňte obsah a obal v souladu se všemi místními, regionálními a národními předpisy. Obsahuje : 2-methyl-2Hisothiazol-3-jedna ; Beta-2 Mikroglobulin kalibrátory Reagencie : Skladujte při teplotě 2 8 C. Likvidujte v souladu s platnými předpisy. Řiďte se obecnými pravidly bezpečnosti práce a se všemi komponenty nakládejte, jako by byly potenciálně infekční. Zdrojové materiály získané z lidské krve byly testovány a shledány nereaktivní na syfilis, na protilátky proti HIV 1 a 2, na povrchový antigen hepatitidy typu B (HBsAg), a na protilátky proti hepatitidě typu C. Jako konzervační látka byl přidán azid sodný v koncentracích menších než 1 g/l. Při likvidaci vypláchněte velkým množstvím vody, aby se zamezilo nahromadění potenciálně výbušných azidů kovů v olověném a měděném potrubí. Chemiluminiscenční substrát : Vyvarujte se kontaminace a nevystavujte přímému slunečnímu světlu. (Viz připojený letáček.) Voda : Použijte destilovanou nebo deionizovanou vodu. Dodaný materiál Komponenty představují ucelenou sadu. Pro stanovení jsou zapotřebí štítky na vnitřní krabici. IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin (PIEL2KBM-3 {20}, ) 9

10 Beta-2 Mikroglobulin zásobník s kuličkami (L2BM12) Opatřeno čárovým kódem. 200 kuliček potažených polyklonální kozí protilátkou proti beta-2-mikroglobulinu. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KBM2 : 1 balení Beta-2 Mikroglobulin reagencie (L2BMA2) Opatřeno čárovým kódem. 11,5 ml alkalické fosfatázy (z telecího střeva) konjugované s myší monoklonální protilátkou proti beta-2-mikroglobulinu v pufru, s konzervačním prostředkem. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KBM2 : 1 nádobka Před použitím utrhněte vršek štítku v perforovaném místě, ale nepoškoďte čárový kód. Z vrchu nádobky odstraňte uzavírací fólii; posuvný uzávěr zaklapněte do ramp na víčku reagencie. Beta-2 Mikroglobulin kalibrátory (LBML, LBMH) Dvě ampulky s vysokou a nízkou koncentrací lyofilizovaného beta-2-mikroglobulinu v syntetické matrici. Každou ampulku rekonstituujte přidáním 4,0 ml destilované nebo deionizované vody. Míchejte mírným kroužením nebo překlápěním až do úplného rozpuštění lyofilizovaného materiálu. Stabilní 30 dní po rekonstituci při teplotě 2 8 C nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při teplotě 20 C. L2KBM2 : 1 sada Před adjustací nalepte na testovací zkumavky příslušné alikvotní štítky (dodané se soupravou) tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. Materiál dodávaný zvlášť Multidiluent 2 (L2M2Z, L2M2Z4) Pro ředění koncentrovaných vzorků moči samotným analyzátorem a pro ředění všech vzorků séra v poměru 1 : 40. Jedna ampulka koncentrované (připravené k použití), nehumánní bílkovinové/pufrované matrice s konzervačním prostředkem. Lagerung : 30 Tage (nach Öffnen) bei 2 8 C oder 6 Monate (ungeteilt) bei 20 C (aliquotiert). L2M2Z : 25 ml L2M2Z4 : 55 ml Štítky s čárovými kódy jsou určeny pro diluent. Před použitím nalepte příslušný štítek na testovací zkumavku mm tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. L2M2Z : 3 štítky L2M2Z4 : 5 štítků L2SUBM : Chemiluminescenční substrát L2PWSM : Promývací roztok L2KPM : Čistící roztok na jehly LRXT : Reakční zkumavky (na jedno použití) L2ZT : 250 testovacích zkumavek na diluent vzorků ( mm) L2ZC : 250 uzávěrů na testovací zkumavky na diluent vzorků BMCM : Trojúrovňový kontrolní modul beta-2-mikroglobulinu Dále potřebujete Destilovanou nebo deionizovanou vodu ; testovací zkumavky, kontroly Postup stanovení V manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000 najdete postupy : přípravy, nastavení, ředění, adjustace, stanovení vzorků a kontrol. K dosažení optimálního výkonu je důležité provádět veškerou pravidelnou údržbu stanovenou v manuálu k analyzátorům IMMULITE Doporučený interval mezi adjustacemi : 4 týdny Vzorky ke kontrole kvality : Použijte kontroly nebo směsné vzorky s alespoň dvěmi koncentracemi (vysokou a nízkou) beta-2-mikroglobulinu. Očekávané hodnoty Na základě příbuznosti s metodou Beta-2-Mikroglobulin na analyzátoru IMMULITE od (viz Srovnání metody) můžeme očekávat prakticky stejná referenční rozmezí. Sérum : Ke studii referenčního rozmezí pro stanovení Beta-2-Mikroglobulinu na analyzátoru IMMULITE byly použity vzorky séra od dospělých dobrovolníků, mužů a netěhotných žen, přibližně od 20 do 70 roků věku (středních 95 % : roků, medián : 40 roků). Podle vyplněných dotazníků byli všichni tito jedinci v dobrém zdravotním stavu. 10 IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin (PIEL2KBM-3 {20}, )

11 Vzorky krve byly odebrány ve Francii, v Německu, Holandsku a v Portugalsku. Výsledky obstarala nezávislá laboratoř v Holandsku za použití souprav IMMULITE. (Vzorky byly odebrány do obyčejných skleněných zkumavek bez antikoagulantů, gelových bariér nebo přísad podporujících srážlivost. Stanovovalo se vždy po jednom vzorku.) Mediány a 95. percentily pro příslušné podskupiny se nachází v následující tabulce. Percentily byly stanoveny neparametricky. Skupina Medián ng/ml 2, ,5. percentil percentil percentil Muži Ženy Muži i ženy Moč : Horní hranice pro normální vzorky moče se udává 300 ng/ml. 9 Tato hodnota odpovídá předpokládaným hodnotám pro stanovení Beta-2-Mikroglobulinu na analyzátorech IMMULITE Uvedené hranice považujte pouze za orientační. Každá laboratoř by si měla stanovit svoje vlastní referenční rozmezí. Omezení Heterofilní protilátky v lidském séru můžou reagovat s imunoglobuliny obsaženými v komponentech soupravy a způsobit interference s in vitro imunologickým stanovením. [Viz Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all imunologickým stanovením. Clin Chem 1988:34:27-33.] Vzorky pacientů rutinně vystavených kontaktu se zvířaty nebo produkty zvířecího séra můžou vykázat tento typ interference a potenciálně způsobit anomální výsledky. Tyto reagencie byly vyvinuty tak, aby bylo riziko interference minimalizováno ; nicméně případné interakce mezi ojedinělými séry a komponenty testu se můžou vyskytnout. Pro diagnostické účely by se výsledky tohoto stanovení měly vždy používat v kombinaci s klinickými zkouškami, zdravotní historií pacienta a ostatními nálezy. n Znaky metody Reprezentativní výsledky stanovení najdete v části Tabulky a grafy. Výsledky se udávají v ng/ml. (Pokud není uvedeno jinak, všechny výsledky byly získány na vzorcích séra odebraných do zkumavek bez gelových bariér nebo přísad podporujících srážlivost.) Konverzní faktor : ng/ml 1 µg/l Kalibrační rozsah : do 500 ng/ml (do 500 µg/l) Souprava má návaznost na mezinárodní standard vyrobený s použitím schválených materiálů a měřících procesů. Analytická citlivost : 4,0 ng/ml (4,0 µg/l) High-dose Hook : Do ng/ml ( µg/l) žádný Přesnost : Vzorky byly stanovovány dvojmo v průběhu 20 dní, dva testy denně, celkem 40 testů a 80 replikátů. (Viz tabulku Přesnost.) Linearita : Stanovení vzorků bylo provedeno při rozličném ředění. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce Linearita.) Zpětná výtěžnost : Bylo provedeno stanovení vzorků s přídavkem tří roztoků beta-2-mikroglobulinu (678, 1291 a 2420 ng/ml) v poměru 1:19. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce Zpětná výtěžnost.) Specificita : Protilátka je silně specifická pro beta-2-mikroglobulin. (Viz tabulka "Specificita".) Bilirubin : Přítomnost bilirubinu v koncentracích do 200 mg/l nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Hemolýza : Přítomnost hemoglobinu v koncentracích do 384 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Lipémie : Přítomnost triglyceridů v koncentracích do 3000 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin (PIEL2KBM-3 {20}, ) 11

12 Alternativní typ vzorku : K ohodnocení vlivu použití alternativních typů vzorků byla odebrána krev 15 dobrovolníkům do obyčejných, heparinizovaných EDTA a Becton Dickinson SST vacutainer zkumavek. Do stejných objemů vzorků byly přidány roztoky různých koncentrací β 2 M, aby se získaly hodnoty přes celé kalibrační rozpětí stanovení. Všechny vzorky byly následně stanoveny pomocí testu Beta-2 Mikroglobulin na analyzátorech IMMULITE (Heparin) = 1,02 (Sérum) 1,53 ng/ml r = 0,99 (EDTA) = 1,04 (Sérum) 7,85 ng/ml r = 0,99 (SST) = 1,06 (obyčejné zkumavky) + 0,66 ng/ml r = 0,99 Střední hodnoty : 118 ng/ml (Sérum) 119 ng/ml (Heparin) 115 ng/ml (EDTA) 126 ng/ml (SST) Srovnání metody sérum : Stanovení bylo porovnáno s testem IMMULITE Beta-2 Mikroglobulin od 55 sérových vzorcích (Koncentrační rozsah : přibližně 1270 až 9500 ng/ml, před automatickým naředěním 1:40. Viz graf Srovnání metody - sérum.) Podle lineární regrese : (IML 2000) = 0,92 (IML) 102 ng/ml r = 0,989 Střední hodnoty : 2767 ng/ml (IMMULITE 2000) 3112 ng/ml (IMMULITE) Srovnání metody moč : Stanovení bylo porovnáno s testem IMMULITE Beta-2 Mikroglobulin od 52 vzorcích moče. (Koncentrační rozsah : přibližně 6 až 300 ng/ml. Viz graf Srovnání metody - moč.) Podle lineární regrese : (IML 2000) = 0,89 (IML) + 1,71 ng/ml r = 0,985 Střední hodnoty : 89 ng/ml (IMMULITE 2000) 98 ng/ml (IMMULITE) Technická Podpora Pro technickou podporu kontaktujte vašeho národního distributora. Systém kontroly jakosti společnosti Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. je certifikovaný podle ISO 13485:2003. Ελληνικά IMMULITE 2000 Μικροσφαιρίνη Βήτα-2 Ενδεδειγμένη χρήση: Για in vitro διαγνωστική χρήση με τα συστήματα αναλυτών IMMULITE 2000 για τον ποσοτικό προσδιορισμό της μικροσφαιρίνης β 2 (β 2 M) στον ορό και τα ούρα, ως βοήθημα στην κλινική διάγνωση της ενεργής ρευματοειδούς αρθρίτιδας και της νεφροπάθειας. Αριθμός καταλόγου: L2KBM2 (200 εξετάσεις) Κωδικός εξέτασης: BMG Χρώμα: Πορτοκαλί Περίληψη και επεξήγηση Η μικροσφαιρίνη β 2 (β 2 M) απομονώθηκε για πρώτη φορά το1968 στα ούρα ασθενών με νόσο του Wilson και δηλητηρίαση από κάδμιο. Εκτοτε προσδιορίστηκε ως η ελαφρά αλυσιδα των αντιγόνων μείζονος συμπλέγματος ιστοσυμβατότητας HLA-A, -B και -C με μήκος 100 αμινοξέα και μη ισοσθενή σύνδεση με τη βαριά αλυσίδα. Ως προς τη δομή και την αλληλουχία των αμινοξέων προσομοιάζει στην περιοχή CH3 της IgG, αν και είναι διακριτή ως προς το αντιγόνο. Η β 2 M εμφανίζεται στην επιφάνεια των πυρηνοειδών κυττάρων σε άφθονες ποσότητες στα λεμφοκύτταρα και τα μονοκύτταρα και σε πολλά καρκινικά κύτταρα. Η λειτουργία της είναι άγνωστη, αλλά μπορεί να ελέγξει την έκφραση και τη βιοσύνθεση αντιγόνων στην κυτταρική επιφάνεια. Λόγω του χαμηλού μοριακού βάρους της ( dalton), το 95 τοις εκατό της ελεύθερης β 2 M εξουδετερώνεται ταχέως με σπειραματική διήθηση. Στη συνέχεια, τα εγγύς σωληνοειδή κύτταρα απορροφουν το 99,9 τοις εκατό αυτής της φιλτραρισμένης ποσότητας με ενδοκυτάρωση, η οποία συνοδεύεται από μετατροπή σε αμινοξέα. Η φυσιολογική αποβολή της β 2 M από τα ούρα είναι χαμηλότερη από 370 μικρογραμμάρια ανά 24 ώρες. Οι υψηλότερες τιμές ερμηνεύονται ως ένδειξη δυσλειτουργίας των σωληναρίων. Αυξημένη αποβολή β 2 M από τα ούρα παρατηρείται σε μια σειρά νόσων, όπως για παράδειγμα τη νόσο 12 IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin (PIEL2KBM-3 {20}, )

13 Wilson, το σύνδρομο Fanconi, τη μη αντιμετωπιζόμενη συγγενή γαλακτοζαιμία, τη νεφρασβέστωση, την κυστίνωση, τη χρόνια έλλειψη καλίου, τη διάμεση νεφρίτιδα, νόσους των συνδετικών ιστών, όπως είναι η ρευματοειδής αρθρίτιδα και το σύνδρομο Sjogren, 2 σε εργασιακή έκθεση σε βαρέα μέταλλα, όπως το κάδμιο και ο υδράργυρος, 11 σε λοιμώξεις των άνω ουροφόρων οδών, 8 μεταμοσχεύσεις νεφρού 4 και νεφροτοξικότητα λόγω θεραπείας με κυκλοσπορίνη, 7 αμινογλυκοσίδη 9 ή cis-platinum. 10 Τα αυξημένα επίπεδα στον ορό υπό φυσιολογικό ρυθμό σπειραματικής διήθησης παραπέμπουν σε αυξημένη παραγωγή ή έκκριση β 2 M. Αυξημένα επίπεδα συναντώνται σε νόσους με αναπαραγωγή λεμφοκυττάρων, όπως είναι το πολλαπλό μυέλωμα, η χρόνια λεμφοκυτταρική λευχαιμία, 6 η νόσος του Hodgkin, τα μη Hodgkin λεμφώματα; 5 ο διάχυτος ερυθηματώδης λύκος, η ρευματοειδής αρθρίτιδα, το σύνδρομο Sjogren, η νόσος του Crohn 5 καθώς και σε ορισμένες ιογενείς λοιμώξεις, για παράδειγμα από κυτταρομεγαλοϊό, μη Α και μη Β ηπατίτιδα και μολυσματική μονοπυρήνωση. 3 Αυξημένα επίπεδα στον ορό παρατηρήθηκαν επίσης σε ορισμένους ασθενείς υπό αιμοκάθαρση και σε απόρριψη νεφρικών μοσχευμάτων. 1 Η μέτρηση της β 2 M θεωρείται ένα ευαίσθητο μέσο διάγνωσης των δυσλειτουργιών στα εγγύς νεφρικά σωληνάρια. Θεωρείται η πιο αξιόπιστη εξέταση για τη διάκριση των λοιμώξεων των ανώτερων και κατώτερων ουροφόρων οδών, καθώς και μια χρήσιμη μέθοδος αξιολόγησης του αποτελέσματος της θεραπείας και διάγνωσης υποτροπών οξείας πυελονεφρίτιδας με χρήση προσδιορισμών. 2 Αρχή της διαδικασίας Η IMMULITE 2000 Μικροσφαιρίνη βήτα 2 είναι μια ξηρής φάσης, δύο σημείων, χημειοφωταυγής ανοσομετρική ανάλυση. Κύκλοι επώασης: 1 x 30 λεπτά Χρόνος για το πρώτο αποτέλεσμα: 35 λεπτά Συλλογή δειγμάτων Ορός Συνιστάται η χρήση της υπερφυγοκέντρου για να καθαριστούν τα λιπιδαιμικά δείγματα. Αιμολυμένα δείγματα μπορεί να υποδηλώνουν κακή μεταχείριση του δείγματος πριν την παραλαβή του από το εργαστήριο και τα αποτελέσματα πρέπει να ερμηνεύονται με προσοχή. Η φυγοκέντριση των δειγμάτων ορού πριν την πλήρη πήξη μπορεί να έχει ως αποτέλεσμα τη δημιουργία θρόμβων. Για να αποφευχθούν λανθασμένα αποτελέσματα εξαιτίας της παρουσίας θρόμβων, βεβαιωθείτε ότι πριν τη φυγοκέντριση, το αίμα έχει πήξει πλήρως. Κάποια δείγματα, ιδιαιτέρως αυτά των ασθενών που λαμβάνουν αντιπηκτική θεραπεία, ίσως χρειάζονται μεγαλύτερο χρόνο πήξης. Οι σωλήνες συγκέντρωσης αίματος διαφορετικών εταιρειών μπορεί να δώσουν αποκλίνουσες τιμές, ανάλογα με τα υλικά και τα συμπληρώματα, συμπεριλαμβανομένων των με τζελ ή φυσικών σωληναρίων, των ενεργοποιητών πήξεως και/ή των αντιπηκτικών. Η IMMULITE 2000 Μικροσφαιρίνη Βήτα 2 δεν έχει δοκιμαστεί με όλους τους τύπους σωληναρίων. Συμβουλευθείτε την παράγραφο για τους εναλλακτικούς τύπους δειγμάτων για περισσότερες πληροφορίες σχετικά με τα σωληνάρια που έχουν δοκιμαστεί. Απαιτούμενος όγκος: 5 µl δείγματος ορού Φύλαξη: 7 ημέρες στους 2 8 C ή 2 εβδομάδες στους 20 C. Παράγοντας αραίωσης: 40 Για δείγματα ορού, επιλέξτε 40 στο παράθυρο Dilution Factor (Παράγοντας Αραίωσης). Ούρα Απαιτούμενος όγκος: 5 µl δείγματος ούρων Ειδικές οδηγίες: Κατ' αρχήν αδειάστε την κύστη, έπειτα πιείτε ένα μεγάλο ποτήρι νερό και συλλέξτε το δείγμα ούρων εντός 1 ώρας. IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin (PIEL2KBM-3 {20}, ) 13

14 Ρύθμιση ph: Μετά τη συλλογή, ρυθμίστε το ph όλων των δειγμάτων ούρων από 6 έως 8 με 1,0 M NaOH. Φύλαξη (ρυθμισμένο ph): 2 ημέρες στους 2 8 C ή 2 μήνες στους 20 C. Προειδοποιήσεις και προφυλάξεις Για in vitro διαγνωστική χρήση. ΠΡΟΣΟXH: Η συσκευή αυτή περιέχει υλικό ζωικής προέλευσης και ο χειρισμός της πρέπει να γίνεται ως εάν επρόκειτο περί δυνητικού φορέα και παράγοντα μετάδοσης νόσου. H411 P273, P391, P501 Τοξικό για τους υδρόβιους οργανισμούς, με μακροχρόνιες επιπτώσεις. Να αποφεύγεται η ελευθέρωση στο περιβάλλον. Μαζέψτε τη χυμένη ποσότητα. Απορρίψτε το περιεχόμενο και τον περιέκτη σε συμμόρφωση με όλους τους τοπικούς, περιφερειακούς και εθνικούς κανονισμούς. Περιέχει: 2-μεθυλ-2Hισοθειαζολ-3-όνη, Ρυθμιστές μικροσφαιρίνης βήτα 2 Αντιδραστήρια: Διατήρηση στους 2 8 C. Απόρριψη σύμφωνα με την ισχύουσα νομοθεσία. Ακολουθήστε τις γενικές προφυλάξεις και χειριστείτε όλα τα συστατικά σαν να ήταν φορείς μολυσματικών παραγόντων. Όλα τα υλικά της μεθόδου που προέρχονται από ανθρώπινο αίμα έχουν ελεγχθεί και βρέθηκαν αρνητικά για σύφιλη, για αντισώματα στον HIV 1 και 2, για επιφανειακά αντιγόνα της ηπατίτιδας Β και για αντισώματα της ηπατίτιδας C. Αζίδιο του νατρίου σε συγκεντρώσεις μικρότερες από 0,1 g/dl έχει προστεθεί ως συντηρητικό. Κατά την απόρριψη, ξεπλύνετε με άφθονο νερό για την αποφυγή σχηματισμού πιθανών εκρηξιογόνων μεταλλικών αζιδίων στις αποχετεύσεις από μόλυβδο και χαλκό. Χημειοφωταυγές υπόστρωμα: Αποφύγετε τη μόλυνση και την έκθεση στο άμεσο ηλιακό φως. (Bλ. Ένθετο.) Νερό: Χρησιμοποιήστε απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό. Υλικά που διατίθενται Τα συστατικά αποτελούν ολοκληρωμένο σετ. Οι ετικέτες στο εσωτερικό κουτί είναι απαραίτητες για την ανάλυση. Συσκευασία σφαιριδίων μικροσφαιρίνης βήτα 2 (L2BM12) Με ραβδοκώδικα. 200 σφαιρίδια, επικαλυμμένα με μονοκλωνικό αντίσωμα κατσίκας έναντι της μικροσφαιρίνης β 2. Σταθεράστους 2 8 C έως την ημερομηνία λήξεως. L2KBM2: 1 συσκευασία Δοχείο αντιδραστηρίου μικροσφαιρίνης βήτα 2 (L2BMA2) Με ραβδοκώδικα. 11,5 ml αλκαλικής φωσφατάσης (από βόειο έντερο) συζευγμένης με μονοκλωνικό αντίσωμα ποντικού έναντι της μικροσφαιρίνης β 2 σε ρυθμιστικό διάλυμα, με συντηρητικό. Σταθερή στους 2 8 C έως την ημερομηνία λήξεως. L2KBM2: 1 δοχείο Πριν τη χρήση, σχίστε την πάνω ετικέτα στο σημείο διάτρησης, χωρίς να καταστρέψετε το ραβδοκώδικα. Αφαιρέστε (ξεκολλήστε) προσεκτικά το κάλυμμα από την επάνω επιφάνεια του δοχείου, και πιέστε το κάλυμμα κάτω προς τους κεκλιμένους οδηγούς-ράγες. Ρυθμιστές μικροσφαιρίνης βήτα 2 (LBML, LBMH) 2 φιαλίδια (χαμηλό και υψηλό) λυοφιλοποιημένης μικροσφαιρίνης β 2 σε συνθετική μήτρα. Κάντε ανασύσταση κάθε φιαλιδίου με 4,0 ml απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό. Αναμείξτε με απαλές κινήσεις ή με αναστροφή έως ότου το λυοφιλοποιημένο υλικό διαλυθεί πλήρως. Σταθερή στους 2 8 C για 30 μέρες μετά την ανασύσταση ή για 6 μήνες (διαχωρισμένα) στους 20 C. L2KBM2: 1 σετ Πριν κάνετε κάποια ρύθμιση, τοποθετήστε τις κατάλληλες ετικέτες των διαλυμάτων (παρέχονται με το kit) σε δοκιμαστικούς σωλήνες, έτσι ώστε οι ραβδοκώδικες να μπορούν να διαβαστούν από σύστημα του αναλυτή. 14 IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin (PIEL2KBM-3 {20}, )

15 Συστατικά του Kit που προμηθεύονται ξεχωριστά Πολύ-αραιωτικό 2 (L2M2Z, L2M2Z4) Για την επί του αναλυτή αραίωση υψηλών δειγμάτων ούρων και για την αραίωση 1 προς 40 όλων των δειγμάτων ορού. Ένα φιαλίδιο συμπυκνωμένης (έτοιμης για χρήση) μήτρας μη ανθρώπινης πρωτεΐνης/ρυθμιστικού, με συντηρητικό. Φύλαξη: 30 μέρες (μετά το άνοιγμα) στους 2 8 C ή 6 μήνες (διαχωρισμένα) στους 20 C. L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml Ετικέτες με ραβδοκώδικες παρέχονται για χρήση με το αραιωτικό. Πριν από τη χρήση, τοποθετείστε μια κατάλληλη ετικέτα σε ένα δοκιμαστικό σωλήνα 16 x 100 mm, έτσι ώστε οι ραβδοκώδικες να μπορούν να διαβαστούν από το σύστημα του αναλυτή. L2M2Z: 3 ετικέτες L2M2Z4: 5 ετικέτες L2SUBM: Χημειοφωταυγές υπόστρωμα L2PWSM: Πλυστικό του ανιχνευτή L2KPM: Kit καθαρισμού του ανιχνευτή LRXT: Σωλήνες αντίδρασης (μιας χρήσης) L2ZT: 250 δοκιμαστικοί σωλήνες για αραίωση του δείγματος ( mm) L2ZC: 250 καπάκια για σωλήνες αραίωσης δείγματος BMCM: Μονάδα ελέγχου μικροσφαιρίνης βήτα 2 τριών επιπέδων Απαιτούνται επίσης Απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό, δοκιμαστικοί σωλήνες, δείγματα ελέγχου Διαδικασία της ανάλυσης Βλέπε το εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000 για προετοιμασία, στήσιμο, αραιώσεις, ρυθμίσεις, ανάλυση και διαδικασίες ποιοτικού έλέγχου. Σημειώστε ότι για το βέλτιστο αποτέλεσμα, είναι σημαντικό να ακολουθηθούν όλες οι τυπικές διαδικασίες όπως ορίζονται στο εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE Συνιστώμενος χρόνος μεταξύ των ρυθμίσεων: 4 εβδομάδες Δείγματα ποιοτικού ελέγχου: Χρησιμοποιήστε δείγματα ελέγχου, ορού ή διαθέσιμα δείγματα ούρων τουλάχιστον δύο επιπέδων (χαμηλό και υψηλό) μικροσφαιρίνης β 2. Αναμενόμενες τιμές Με βάση τη σχέση με την IMMULITE Μικροσφαιρίνη Βήτα 2 της (βλ. Σύγκριση της μεθόδου), η ανάλυση αναμένεται να έχει ουσιαστικά το ίδιο εύρος αναφοράς. Ορός: Οι τιμές αναφοράς διαμορφώθηκαν έπειτα από μια μελέτη για την ανάλυση IMMULITE Μικροσφαιρίνη Βήτα 2 σε δείγματα ορού από εθελοντές ενήλικες, άντρες και μη έγκυες γυναίκες, ηλικίας περίπου 20 έως 70 ετών (κεντρικό εύρος 95%: έτη, διάμεση τιμή: 40 έτη). Τα υπό εξέταση άτομα ήταν φαινομενικά υγιή, όπως πιστοποιήθηκε από ένα ερωτηματολόγιο. Δείγματα αίματος συλλέχθηκαν στη Γαλλία, τη Γερμανία, τις Κάτω Χώρες και την Πορτογαλία. Τα αποτελέσματα παρήχθησαν από ένα ανεξάρτητο εργαστήριο στις Κάτω Χώρες χρησιμοποιώντας τα κιτ IMMULITE. (Τα δείγματα συλλέχθηκαν σε απλούς γυάλινους σωλήνες χωρίς παρεμποδιστές πηκτών, τζελ, ή προσθετικών που προκαλούν θρόμβους, και αναλύθηκαν εις απλούν.) Οι διάμεσες τιμές και το 95% των αντίστοιχων υπο-ομάδων φαίνονται στον παρακάτω πίνακα. Οι εκατοστιαίες αναλογίες καθορίστηκαν μη παραμετρικά. Ομάδα ng/ml Ενδ. τιμή 2,5% 95% 97,5% n Άνδρες Γυναίκες Μεικτά Ούρα: Όπως αναφέρεται, το ανώτατο φυσιολογικό οριο στα ούρα είναι 300 ng/ml. 9 Η τιμή αυτή συμφωνεί με τα αναμενόμενα για το κιτ IMMULITE 2000 Μικροσφαιρίνη Βήτα 2. Θεωρήστε αυτά τα όρια μόνο ως κατευθυντήριες γραμμές. Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να θεσπίσει τα δικά του εύρη αναφοράς. Περιορισμοί Ετεροφυλικά αντισώματα στον ανθρώπινο ορό μπορεί να αντιδράσουν με τις ανοσοσφαιρίνες που περιέχονται στα συστατικά της μεθόδου προκαλώντας αλληλεπιδράσεις με in vitro IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin (PIEL2KBM-3 {20}, ) 15

16 ανοσοαναλύσεις. [Bλ. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: ] Δείγματα ασθενών που εκτίθενται συστηματικά σε ζώα ή προϊόντα ζωικού ορού μπορούν να παρουσιάσουν αυτού του τύπου την αλληλεπίδραση που προκαλεί δυνητικά ένα ανώμαλο αποτέλεσμα. Αυτά τα αντιδραστήρια έχουν μορφοποιηθεί έτσι, ώστε να ελαχιστοποιούν τον κίνδυνο της αλληλεπίδρασης. Παρόλ αυτά, μπορεί να εμφανιστούν πιθανές αλληλεπιδράσεις μεταξύ σπάνιων ορών και των συστατικών της μεθόδου. Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα που λαμβάνονται από αυτή τη μέθοδο θα πρέπει πάντα να χρησιμοποιούνται σε συνδυασμό με τις κλινικές εξετάσεις, το ιατρικό ιστορικό του ασθενούς και άλλα ευρήματα. Απόδοση Βλέπε Πίνακες και Γραφήματα για αντιπροσωπευτικά δεδομένα της εκτέλεσης της μεθόδου. Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε ng/ml. (Εκτός αν κάτι σημειώνεται διαφορετικά, όλα πραγματοποιήθηκαν σε δείγματα ορού, που συλλέχθηκαν σε σωλήνες χωρίς παρεμποδιστές πηκτών ή προσθετικών που προκαλούν θρόμβους.) Παράγοντας μετατροπής: ng/ml 1 µg/l Εύρος καμπύλης: έως 500 ng/ml (έως 500 µg/l) Η εξέταση είναι ιχνηλάσιμη σε ένα εσωτερικό πρότυπο που κατασκευάστηκε χρησιμοποιώντας κατάλληλα υλικά και μετρήσιμες διαδικασίες. Αναλυτική ευαισθησία: 4,0 ng/ml (4,0 µg/l) Επίδραση φαινομένου Hook σε υψηλή δόση: Χωρίς επίδραση έως τα ng/ml ( µg/l) Ακρίβεια: Για 20 μέρες κάποια δείγματα εξετάστηκαν εις διπλούν, δις ημερησίως, συνολικά 40 φορές ή 80 επαναλήψεις. (Βλ. πίνακα Precision.) Γραμμικότητα: Τα δείγματα αναλύθηκαν σε διάφορες αραιώσεις. (Βλ. πίνακα "Linearity" για αντιπροσωπευτικά δεδομένα.) Ανάκτηση: Κάποια δείγματα (1 με 19) εμπλουτίστηκαν με τρία διαλύματα μικροσφαιρίνης β 2 (678, 1291 και 2420 ng/ml) και αναλύθηκαν. (Βλ. πίνακα "Recovery" για αντιπροσωπευτικά δεδομένα.) Ειδικότητα: Το αντίσωμα έχει υψηλή εξειδίκευση στην μικροσφαιρίνη β 2. (Βλ. πίνακα "Specificity".) Χολερυθρίνη: Η παρουσία χολερυθρίνης σε συγκεντρώσεις έως 200 mg/l δεν επηρεάζει τα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Αιμόλυση: Η παρουσία αιμοσφαιρίνης σε συγκεντρώσεις έως 384 mg/dl δεν επηρεάζει τα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Λιπιδαιμία: Η παρουσία τριγλυκεριδίων σε συγκεντρώσεις έως 3000 mg/dl δεν επηρεάζει τα αποτελέσματα της εξέτασης μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Εναλλακτικός τύπος δείγματος: Για να εκτιμηθεί το αποτέλεσμα των εναλλακτικών τύπων δείγματος, συλλέχθηκε αίμα από 15 εθελοντές σε απλούς, ηπαρινισμένους, EDTA και Becton Dickinson SST δοκιμαστικούς (vacutainer) σωλήνες. Ίσες ποσότητες των αντίστοιχων δειγμάτων εμπλουτίστηκαν με διάφορες συγκεντρώσεις μικροσφαιρίνης β 2, ώστε να ληφθούν τιμές καθόλο το εύρος καμπύλης της ανάλυσης, και στη συνέχεια αναλύθηκαν σύμφωνα με τη διαδικασία IMMULITE 2000 Μικροσφαιρίνη Βήτα 2. (Ηπαρίνη) = 1,02 (Ορός) 1,53 ng/ml r = 0,99 (EDTA) = 1,04 (Ορός) 7,85 ng/ml r = 0,99 (SST) = 1,06 (Απλά σωληνάρια) + 0,66 ng/ml r = 0,99 Μέσοι όροι: 118 ng/ml (Ορός) 119 ng/ml (Ηπαρίνη) 115 ng/ml (EDTA) 126 ng/ml (SST) Σύγκριση της μεθόδου - Ορός: Η μέθοδος συγκρίθηκε με τη μέθοδο IMMULITE Μικροσφαιρίνη Βήτα 2 της 55 δείγματα ορού. (Εύρος συγκέντρωσης: περίπου 1270 έως 9500 ng/ml, πριν την αραίωση 1 προς 40 στο μηχάνημα. Βλ. γράφημα Method Comparison: Serum".) Η ανάλυση γραμμικής παλινδρόμησης έδωσε τα ακόλουθα αποτελέσματα: (IML 2000) = 0,92 (IML) 102 ng/ml r = 0, IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin (PIEL2KBM-3 {20}, )

17 Μέσοι όροι: 2767 ng/ml (IMMULITE 2000) 3112 ng/ml (IMMULITE) Σύγκριση της μεθόδου ούρα: Η ανάλυση συγκρίθηκε με την ανάλυση IMMULITE Μικροσφαιρίνη Βήτα 2 σε 52 δείγματα ούρων. (Εύρος συγκέντρωσης: περίπου 6 έως 300 ng/ml. Βλ. γράφημα Method Comparison: Urine".) Η ανάλυση γραμμικής παλινδρόμησης έδωσε τα ακόλουθα αποτελέσματα: (IML 2000) = 0,89 (IML) + 1,71 ng/ml r = 0,985 Μέσοι όροι: 89 ng/ml (IMMULITE 2000) 98 ng/ml (IMMULITE) Τεχνική Υποστήριξη Για τεχνική υποστήριξη αποταθείτε στον αντιπρόσωπο της χώρας σας. Το Σύστημα Ποιότητας της Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. είναι επικυρωμένο με ISO 13485:2003. Polski IMMULITE 2000 Beta-2 Mikroglobulina Przeznaczenie: Test diagnostyczny in vitro dla analizatorów systemów IMMULITE 2000 do ilościowego oznaczenia poziomu β 2 -mikroglobuliny (β 2 M) w surowicy i moczu, pomocny w diagnostyce ostrego gośćcowego zapalenia stawów i chorób nerek. Numery katalogowe: L2KBM2 (200 testów) Kod testu: BMG Kolog: Pomarańczowy Wprowadzenie β 2 -mikroglobulina (β 2 -M) po raz pierwszy została wyizolowana w 1968 roku z moczu chorego na chorobę Wilsona i zatrucie kadmem. Później została zidentyfikowana jako lekki łańcuch kompleksu głównych antygenów zgodności tkankowej HLA-A, -B i - C o długości 100 aminokwasów, niekowalentnie związany z łańcuchem ciężkim. Mimo różnic antygenowych, β 2 -M przypomina strukturą i sekwencją aminokwasów region CH3 cząsteczki IgG. β 2 -M występuje na powierzchni komórek jądrzastych obficie na limfocytach i monocytach oraz na komórkach szeregu linii nowotworowych. Jej funkcja jest nieznana, wydaje się, że może kontrolować ekspresję i biosyntezę antygenów powierzchniowych komórki. Ze względu na mały ciężar cząsteczkowy ( daltonów), 95% β 2 -M jest szybko usuwanych przez filtrację kłębuszkową. Proksymalne komórki kanalikowe wyłapują następnie do 99,9% tej przefiltrowanej ilości na drodze endocytozy, po której dochodzi do degradacji do aminokwasów. Prawidłowe wydalanie β 2 -M jest mniejsze niż 370 mikrogramów na 24 godz., wyższe traktowane jest jako objaw dysfunkcji kanalików. Wzrost wydzielania β 2 -M obserwowany jest w szeregu stanów, w tym w chorobie Wilsona, zespole Fanconisa, nie leczonej wrodzonej galaktozemii, wapnicy nerek, cystynozie, chronicznym obniżeniu potasu, śródmiąższowym zapaleniu nerek, chorobach tkanki łącznej takich jak gośćcowe zapalenie stawów i zespół Sjogrena 2, środowiskowej ekspozycji na metale ciężkie jak kadm i rtęć, 11 zakażeniach górnych dróg moczowych, 8 transplantacjach nerek 4 oraz toksycznych chorobach nerek wywołanych przez leczenie cyklosporyną, 7 aminoglikozydami 9 oraz cis-platyną. 10 Podniesiony poziom β 2 -M w surowicy, przy prawidłowej filtracji kłębuszkowej sugeruje wzrost produkcji lub uwalniana β 2 -M. Wzrost poziomu może towarzyszyć chorobom limfoproliferacyjnym takim jak szpiczak mnogi, chroniczna białaczka z komórkami B, 6 choroba Hodgkina, chłoniak non-hodgkin, 5 uogólniony toczeń trzewny, gośćcowe zapalenie stawów, zespół Sjogrena, choroba Crohna 5 oraz pewne infekcje wirusowe, w tym CMV, wirusem zapalenie wątroby Nie-A, nieb i zakaźna mononukleoza. 3 Podniesiony poziom β 2 -M obserwowany jest również u niektórych chorych dializowanych i w przypadkach odrzucania przeszczepionej nerki. 1 Pomiar β 2 -M uważany jest za czułą metodę w diagnostyce dysfunkcji proksymalnych kanalików nerkowych. Wykazano jego przydatność jako IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin (PIEL2KBM-3 {20}, ) 17

18 najbardziej wiarygodnego testu pozwalającego na odróżnienie infekcji górnych i dolnych dróg moczowych oraz jako użytecznej metody oceny wyników terapii i diagnozowania nawrotów ostrego odmiedniczkowego zapalenie nerek. 2 Zasada testu IMMULITE 2000 Beta-2 Mikroglobulina jest immunoenzymatycznym, chemiluminescencyjnym, dwupunktowym testem kanapkowym (imunometrycznym) fazy stałej. Czas inkubacji: 1 30 minut Czas do pierwszego wyniku: 35 minut Preparatyka próbek Surowica Zalecane jest klarowanie próbek lipemicznych przez ultrawirowanie. Hemoliza próbki może świadczyć o nieprawidłowym postępowaniu z próbką na etapie przedlaboratoryjnym. Fakt ten należy brać pod uwagę przy interpretacji wyników. Odwirowanie próbki krwi przed zakończeniem wykrzepiania może spowodować, że w supernatancie pozostanie fibryna stanowiąca przyczynę fałszywych wyników. Przed przystąpieniem do wirowania należy mieć pewność, że skrzep jest ostatecznie uformowany. Niektóre próbki, a zwłaszcza pochodzące od osób poddanych leczeniu antykoagulantami, wymagają dłuższego czasu na wytworzenie skrzepu. W zależności od producenta probówki do pobierania krwi mogą różnie wpływać na uzyskiwane wyniki. Istotne jest tworzywo i czynniki dodatkowe jak żel lub bariery oddzielające skrzep, aktywatory krzepnięcia oraz antykoagulanty. Wpływ wszystkich możliwych wariantów probówek na test IMMULITE 2000 Beta-2 Mikroglobulina nie został określony. Informacje o przetestowanych wariantach podano w akapicie Wpływ materiału na oznaczenie. Wymagana Objętość Próbki: 5 µl surowicy Przechowywanie Materiału: 7 dni w 2 8 C lub 2 tygodnie w 20 C. Współczynnik rozcieńczenia: 40 Dla próbek surowicy należy wybrać rozcieńczenie 40 w oknie automatycznego rozcieńczenia. Mocz Wymagana Objętość Próbki: 5 µl moczu Wskazówki specjalne: Oddać mocz, a następnie wypić duża szklankę wody i pobrać próbkę moczu po 1 godzinie. Ustalanie ph: ph moczu należy doprowadzić do 6 8 za pomocą 1,0 M NaOH. Przechowywanie (po ustaleniu ph): 2 dni w 2 8 C lub 2 miesiące w 20 C. Ostrzeżenia i warunki wstępne Test diagnostyczny in vitro. PRZESTROGA: Materiał pochodzenia zwierzęcego. Postępować tak jak z materiałem potencjalnie zakaźnym. H411 P273, P391, P501 Działa toksycznie na organizmy wodne, powodując długotrwałe skutki. Unikać uwolnienia do środowiska. Zebrać wyciek. Pojemnik i zawartość usuwać zgodnie z wszystkimi lokalnymi, regionalnymi i krajowymi przepisami. Zawiera: 2-metylo-2H-izotiazol- 3-on; Beta-2 Microglobulin Kalibratory Odczynniki: Przechowywać w 2 8 C. Usuwać zgodnie z instrukcją. Zachowywać środki ostrożności konieczne przy pracy z materiałem potencjalnie zakaźnym. W materiałach pochodzących z krwi ludzkiej wykluczono reaktywność w kierunku syfilisu, obecność przeciwciał anty-hiv1/2, HBsAg i przeciwciał anty-hcv. Niektóre składniki zestawu mogą zawierać jako konserwant azydek sodu w stężeniu mniejszym niż 0,1 g/dl. Wykorzystane odczynniki usuwać w dużej ilości wody, by zapobiec osadzaniu azydku sodu w rurach miedzianych lub ołowianych, co może doprowadzić do wytworzenia potencjalnie wybuchowych azydków tych metali. 18 IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin (PIEL2KBM-3 {20}, )

19 Substrat Chemiluminescencyjny: Unikać zanieczyszczenia i chronić przed bezpośrednim światłem słonecznym (patrz ulotka). Woda: Dejonizowana lub destylowana. Elementy zestawu Elementy zestawu tworzą całość. Kody na wewnętrznych pokrywach pudełka są niezbędne do wykonania oznaczenia Beta-2 Mikroglobulina Pojemnik z Kulkami (L2BM12) Z kodem kreskowym. 200 kulek opłaszonych kozim przeciwciałem poliklonalnym anty-β 2 M. Stabilne 2 8 C do daty ważności. L2KBM2: 1 pojemnik Beta-2 Mikroglobulina Klin Odczynnikowy (L2BMA2) Z kodem kreskowym. 11,5 ml alkalicznej fosfatazy (izolowanej z jelita cieląt) sprzęgniętej z mysim przeciwciałem monoklonalnym anty-β 2 M w buforze z konserwantem. Zamknięty przechowywać w chłodni. Stabilny w 2 8 C do daty ważności. L2KBM2: 1 Klin Przed użyciem zerwać taśmę zabezpieczającą nie uszkadzając kodu kreskowego. Usunąć foliową uszczelką komór odczynnikowych. Wsunąć przesuwne zamknięcie komór w prowadnice w pokrywie klina. Beta-2 Mikroglobulina Kalibratory (LBML, LBMH) Dwie fiolki (niski i wysoki) zawierające liofilizowaną β 2 -M w syntetycznej matrycy. Zawartość każdej rozpuścić w 4,0 ml wody destylowanej lub dejonizowanej. Mieszać przez delikatne obracanie i odwracanie aż do całkowitego rozpuszczenia liofilizatu. Po rekonstytucji stabilne 30 dni w 2 8 o C lub 6 miesiące w 20 C (rozpipetować). L2KBM2: 1 zestaw Przed wykonaniem kalibracji umocować na probówkach odpowiednie nalepki z kodem kreskowym (dostarczane z zestawem) rozpoznawane przez czytnik kodów kreskowych aparatu. Materiały dostarczane oddzielnie Multi-Diluent 2 (L2M2Z, L2M2Z4) Dorozcieńczania w analizatorze wysokich próbek moczu oraz 1 do 40 próbek surowicy. Fiolka zawierająca koncentrowaną (gotową do użytku) matrycę buforowanego białka zwierzęcego z konserwantem. Po otwarciu przechowywać 30 dni w 2 8 C lub 6 miesięcy (rozpipetować) at 20 C. L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml Wraz z rozcieńczalnikiem dostarczane są nalepki z kodami kreskowymi. Nalepkę umieścić na probówce ( mm), by umożliwić jej rozpoznanie przez czytnik kodów aparatu. L2M2Z: 3 nalepki L2M2Z4: 5 nalepek L2SUBM: Substrat chemiluminescencyjny L2PWSM: Roztwór płuczący L2KPM: Roztwór czyszczący igłę pipetora LRXT: Probówki reakcyjne (jednorazowe) L2ZT: 250 probówek do rozcieńczania próbek mm L2ZC: 250 korków do probówek na rozcieńczalnik BMCM: Trzy-poziomowy Zestaw kontroli Beta-2 Mikroglobuliny Ponadto niezbędne pipety pasterowskie, woda destylowana lub dejonizowana, kontrole Procedura oznaczenia Przestrzeganie procedur dotyczących utrzymania aparatu, zawartych w Podręczniku operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000 poprawia charakterystykę uzyskiwanych wyników. Procedury: przygotowania aparatu, ustawień aparatu, przygotowania i rozcieńczania próbek, rekalibracji, oznaczenia i kontroli jakości zgodnie z Podręcznikiem operatora do obsługi systemów IMMULITE Zalecany odstęp pomiędzy rekalibracjami: 4 tygodnie Próbki Kontrolne: Kontrole lub pule surowicy lub moczu o co najmniej dwu poziomach beta-2 mikroglobulin (niskim i wysokim). IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin (PIEL2KBM-3 {20}, ) 19

20 Oczekiwane wartości Opierając się na pokrewieństwie z testem IMMULITE Beta-2 Mikroglobulina (zobacz porównanie metod), można oczekiwać, że zakresy wartości referencyjnych dla obu testów będą identyczne. Surowica: Badania referencyjne testem IMMULITE Beta-2 Mikroglobulina przeprowadzono grupie próbek surowicy od zdrowych ochotników, mężczyzn i nie ciężarnych kobiet w wieku lat (środkowe 95% lata, mediana 40 lat). Kryterium zdrowia badanych stanowiła ankieta. Próbki pochodziły z Francji, Niemiec, Holandi i Portugalii. Badania wykonywano Immulite Beta-2 Mikroglobulina w niezależnym laboratorium w Holandii. (Próbki pobierano do szklanych probówek bez antykoagulantów, bariery żelowej i czynników przyspieszających krzepnięcie. Oznaczenia wykonywano pojedyńczo). Mediany i 95 percentyl (wyznaczony nieparametrycznie) podano w poniższej ng/ml Groupa Medians 2,5%ile 95%ile 97,5%ile n Mężczyźni Kobiety Łącznie Mocz: Według piśmiennictwa górny zakres prawidłowy dla moczu wynosi 300 ng/ml. 3 Wartości te są zgodne z oczekiwanymi wartościami uzyskiwanymi w IMMULITE 2000-Beta-2 Mikroglobulina. Powyższe dane należy traktować orientacyjnie. Każde laboratorium powinno ustalić własny zakres referencyjny. Ograniczenia Przeciwciała heterofilne obecne w surowicy ludzkiej mogą wchodzić w reakcję z immunoglobulinami będącymi reagentami testu immunologicznego, wpływając na przebieg oznaczenia in vitro. [Porównaj: Boscato L.M., Stuart M.C.: Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays Przeciwciała heterofilne - problem wszystkich testów immunologicznych. Clin Chem 1988:34: 27-33]. Wpływ przeciwciał heterofilnych może ujawnić się w oznaczeniach wykonywanych w surowicy osób mających ciągły kontakt ze zwierzętami lub zwierzęcymi produktami krwiopochodnymi, stanowiąc potencjalną przyczynę błędnych wyników. W teście ryzyko interferencji przeciwciał heterofilnych zostało zminimalizowane przez odpowiedni dobór proporcji odczynników, tym niemniej interferencja taka może potencjalnie nastąpić w rzadkich przypadkach. W postępowaniu diagnostycznym wyniki uzyskane tą metodą powinny być z zasady interpretowane w połączeniu z badaniem klinicznym pacjenta, jego historią choroby oraz innymi okolicznościami. Parametry testu Dane charakteryzujące test przedstawiono w tabelach i na wykresach. Wyniki podano w ng/ml. (O ile nie podano inaczej, wszystkie wyniki dotyczą próbek surowicy pobranych bez bariery żelowej i substancji przyspieszających krzepnięcie.) Przelicznik: ng/ml 1 µg/l Zakres kalibracji: Do 500 ng/ml (do 500 µg/l) Test wykazuje zgodność pomiarową z wewnętrznymi standardami wytwarzania dzięki zastosowaniu kwalifikowanych materiałów i metod pomiaru. Czułość Analityczna: 4,0 ng/ml (4,0 µg/l) Efekt wysokiej dawki Hook Effect: Nie występuje do stężenia ng/ml ( µg/l) Precyzja: Próbki oznaczano w duplicatach, w ciągu 20 dni, dwa razy dziennie, uzyskując 40 serii i 80 powtórzeń. (Patrz: tabela Precyzja.) Liniowość: Oznaczano próbki poddane kolejnym rozcieńczeniom. (Patrz: Tabela Liniowość.) Odzysk: Oznaczano próbki wzbogacane w stosunku objętościowym 1 do 19 roztworami β 2 -mikroglobuliny o stężeniach kolejno: 678, 1291 i 2420 ng/ml. (Patrz: Tabela Odzysk.) Specyficzność: Przeciwciało jest wysoce specyficzne w stosunku do β 2 -mikroglobuliny. (Patrz: Tabela Specyficzność.) 20 IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin (PIEL2KBM-3 {20}, )

21 Bilirubina: Obecność bilirubiny w stężeniu do 200 mg/l nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Hemoliza: Obecność hemoglobiny w stężeniu do 384 mg/dl nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Lipemia: Obecność trójglicerydów w stężeniu do 3000 mg/dl nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Wpływ rodzaju materiału na oznaczenie: Wpływ rodzaju próbki na oznaczenie określano w próbkach krwi pobieranych od 15 wolontariuszy do probówek zwykłych, heparynowych EDTA oraz probówek z barierą żelową SST, systemu próżniowego Becton Dickinson. Jednakowe objętości porównywanych próbek wzbogacano stężeniami β 2 -M dobieranymi tak, by pokryć zakres liniowości testu i oznaczano w teście IMMULITE 2000 Beta-2 Mikroglobulina. (Heparyna) = 1,02 (Surowica) 1,53 ng/ml r = 0,99 (EDTA) = 1,04 (Surowica) 7,85 ng/ml r = 0,99 (SST) = 1,06 (Zwykłe probówki) + 0,66 ng/ml r = 0,99 Średnie: 118 ng/ml (Surowica) 119 ng/ml (Heparyna) 115 ng/ml (EDTA) 126 ng/ml (SST) Porównanie metod Surowica: Test porownywano testem IMMULITE Beta-2 Mikroglobulina w grupie 55 próbek surowicy. (Zakres stężeń od około 1270 to 9500 ng/ml, po wstępnym rozcieńczeniu 1-w-40 w aparacie. Patrz wykres Porównanie metod: Surowica.) Otrzymano następujące równanie regresji liniowej: (IML 2000) = 0,92 (IML) 102 ng/ml r = 0,989 Średnie: 2767 ng/ml (IMMULITE 2000) 3112 ng/ml (IMMULITE) Porównanie metod Mocz: Test porównywano z testem IMMULITE Beta-2 Mikroglobulina w grupie 52 próbek moczu. (Zakres stężeń od około: 6 do 300 ng/ml. Patrz wykres Porównanie metod: Surowica.) Otrzymano następujące równanie regresji liniowej: (IML 2000) = 0,89 (IML) + 1,71 ng/ml r = 0,985 Średnie: 89 ng/ml (IMMULITE 2000) 98 ng/ml (IMMULITE) Pomoc techniczna i konsultacje Krajowy Dystrybutor udziela wszechstronnej pomocy technicznej. System Kontroli Jakości Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. posiada Certyfikat Jakości ISO 13485:2003. IMMULITE is a trademark of Siemens Healthcare Diagnostics Siemens Healthcare Diagnostics. All rights reserved. Made in: UK Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. Glyn Rhonwy, Llanberis, Gwynedd LL55 4EL United Kingdom PIEL2KBM 3 {20} Changes in this Edition: cc#eu22526: 1) Under Warnings and Precautions, caution statement, required GHS pictograms/signal words/hazard and precautionary codes and statements, offending chemicals and sources. 2) Changed Origin: UK to Made in: UK. 3) Updated the manufacturer address to include Glyn Rhonwy. 4) In Understanding the Symbols, revised the symbol for catalog number, added a GHS pictogram for health hazard, and updated existing symbols with GHS pictograms and terminology for exclamation mark, corrosion, skull and crossbones, and environment. IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin (PIEL2KBM-3 {20}, ) 21

22 Understanding the Symbols Understanding the Symbols En English Vysvětlivky symbolů Επεξήγηση των συμβόλων Znaczenie symboli Cz Česky El Ελληνικά Pl Polski The following symbols may appear on the product labeling: / Na štítku výrobku mohou být uvedeny následující symboly: / Τα ακόλουθα σύμβολα ενδέχεται να εμφανίζονται στην επισήμανση του προϊόντος: / Na etykietach produktu mogą pojawiać się poniższe symbole: Symbol Definition En: In vitro diagnostic medical device Cz: Zdravotnický prostředek pro in vitro diagnostiku El: In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή Pl: Sprzęt do medycznej diagnostyki in vitro En: Catalog Number Cz: Katalogové číslo El: Αριθμός καταλόγου Pl: Numer katalogowy En: Manufacturer Cz: Výrobce El: Κατασκευαστής Pl: Producent En: Authorized Representative in the European Community Cz: Autorizované zastoupení v Evropské unii El: Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα Pl: Autoryzowany przedstawiciel w Unii Europejskiej En: CE Mark Cz: CE značka El: Σήμανση CE Pl: Znak CE En: CE Mark with identification number of notified body Cz: CE značka s identifikačním číslem notifikovaného orgánu El: Σήμανση CE με αριθμό αναγνώρισης του φορέα πιστοποίησης Pl: Znak CE z numerem identyfikacyjnym jednostki notyfikowanej LOT Symbol Definition En: Consult instructions for use Cz: Postupujte podle návodu k použití El: Συμβουλευτείτε τις οδηγίες λειτουργίας Pl: Zapoznać się z instrukcją użycia En: Caution! Potential Biohazard Cz: Pozor! Potenciální biohazard El: Πρoσοχή! Δυνητικός βιολογικός κίνδυνος Pl: Uwaga! Potencjalne zagrożenie biologiczne En: Temperature limitation (2 8 C) Cz: Teplotní rozsah (2 8 C) El: Περιορισμός θερμοκρασίας (2 8 C) Pl: Zakres temperatury (2 8 C) En: Upper limit of temperature ( -20 C) Cz: Horní teplotní limit ( -20 C) El: Ανώτερο όριο θερμοκρασίας ( -20 C) Pl: Górny zakres temperatury ( -20 C) En: Lower limit of temperature ( 2 C) Cz: Spodní teplotní limit ( 2 C) El: Κατώτερο όριο θερμοκρασίας ( 2 C) Pl: Dolny zakres temperatury ( 2 C) En: Do not freeze (> 0 C) Cz: Nezmrazovat (> 0 C) El: Μην καταψυχετε (> 0 C) Pl: Nie zamrażać (> 0 C) En: Do not reuse Cz: Pro jednorázové použití El: Μην κάνετε επαναληπτική χρήση Pl: Nie używać powtórnie En: Keep away from sunlight Cz: Chraňte před slunečním světlem El: Διατηρείτε μακριά από το ηλιακό φως Pl: Chronić przed światłem słonecznym En: Batch code Cz: Šarže El: Κωδικός παρτίδας Pl: Kod serii 22 IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin (PIEL2KBM-3 {20}, )

23 Symbol Definition En: Contains sufficient for (n) tests Cz: Dostatečné množství pro (n) testů El: Περιεχόμενο επαρκές για (n) εξετάσεις Pl: Zawartość wystarczająca na (n) testów REAG WEDGE REAG WEDGE A REAG WEDGE B REAG WEDGE D Symbol Definition En: Reagent Wedge Cz: Reagencie El: Δοχείο Αντιδραστηρίων Pl: Klin odczynnikowy En: Date format (year-month) Cz: Formát data (rok-měsíc) El: Μορφή ημερομηνίας (έτος-μήνας) Pl: Zapis daty (rok-miesiąc) En: Use by Cz: Spotřebujte do El: Ημερομηνία λήξης Pl: Wykorzystać do En: Health Hazard Cz: Zdravotní riziko El: Κίνδυνος για την υγεία Pl: Zagrożenie dla zdrowia En: Exclamation Mark Cz: Vykřičník El: Θαυμαστικό Pl: Wykrzyknik En: Corrosion Cz: Koroze El: Διάβρωση Pl: Działanie żrące En: Skull and Crossbones Cz: Lebka se zkříženými hnáty El: Νεκροκεφαλή με διασταυρούμενα οστά Pl: Czaszka i skrzyżowane piszczele En: Environment Cz: Prostředí El: Περιβάλλον Pl: Środowisko ADJUSTOR ADJUSTOR L ADJUSTOR H ADJUSTOR AB DIL CONTROL CONTROL 1 CONTROL 2 CONTROL 3 En: Adjustor Cz: Kalibrátor El: Ρυθμιστής Pl: Kalibrator En: Adjustor, low Cz: Kalibrátor, nízký El: Ρυθμιστής, χαμηλό Pl: Kalibrator, niski En: Adjustor, high Cz: Kalibrátor, vysoký El: Ρυθμιστής, υψηλό Pl: Kalibrator, wysoki En: Adjustor Antibody Cz: Protilátka proti kalibrátoru El: Ρυθμιστής αντισώματος Pl: Przeciwciało Kalibratora En: Sample Diluent Cz: Diluent Vzorků El: Αραιωτικό δείγματος Pl: Rozcieńczalnik próbek En: Control Cz: Kontrola El: Έλεγχος Pl: Kontrola BEAD PACK En: Bead Pack Cz: Zásobník s kuličkami El: Συσκευασία σφαιριδίων Pl: Pojemnik z kulkami CONTROL + En: Positive Control Cz: Pozitivní kontrola El: Θετικός Έλεγχος Pl: Kontrola dodatnia TEST UNIT En: Test Unit Cz: Testovací Jednotky El: Μονάδες ανάλυσης Pl: Jednostki testowe CONTROL + L En: Low Positive Control Cz: Mírně pozitivní kontrola El: Χαμηλός Θετικός Έλεγχος Pl: Kontrola nisko dodatnia IMMULITE 2000 Beta-2 Microglobulin (PIEL2KBM-3 {20}, ) 23