CEA. For use on IMMULITE 2000 systems

Transcript

1 CEA For use on IMMULITE 2000 systems

2 IMMULITE 2000 CEA English Intended Use: For in vitro diagnostic use with the IMMULITE 2000 Systems Analyzers for the quantitative measurement of carcinoembryonic antigen (CEA) in serum, as an aid in the management of cancer patients and in the assessment of prognosis. Catalog Number: L2KCE2 (200 tests), L2KCE6 (600 tests) Test Code: CEA Color: Light Green Summary and Explanation Carcinoembryonic antigen (CEA) comprises a heterogeneous family of glycoproteins ranging in weight from 175,000 to 200,000 daltons due to varying carbohydrate and amino acid content. Its biological function is not well defined, but it may play a role in intercellular recognition, regulation of the immune response, and metastasis of colorectal cancer. 6 The name derives from the previous belief that CEA occurred only in gastrointestinal carcinomas and the fetal digestive tract. Elevated levels have since been detected in a number of malignant and nonmalignant conditions of the gastrointestinal tract and other sites. These conditions include various hepatic diseases; inflammatory lesions, particularly of the gastrointestinal tract; infections; trauma; infarction; collagen vascular disease; renal impairment; and smoking (current and past). 2 CEA also occurs at low levels in normal colon and other tissues. Serum values in healthy adults are generally less than 5 ng/ml. 7 Though serum values exceeding five times the normal range usually indicate malignancy, values seen in malignant and nonmalignant conditions can overlap considerably, ruling out the use of CEA as a screen for malignancy. The value of CEA measurement lies, instead, in patient prognosis, status assessment, and monitoring. Until 1980, the only assay method for CEA used in the United States was a radioimmunoassay requiring extraction. Since then, several other nonextraction RIAs and sandwich-type EIAs have been developed for use on serum and plasma samples. CEA levels at diagnosis of colorectal carcinoma (CRC) correlate with prognosis. 5 Elevated preoperative serum CEA predicts increased risk of recurrence 6 or hepatic metastases. 4 The site of the primary cancer may influence interpretation of elevated CEA: in colon carcinomas, high CEA levels indicate a poor prognosis, but not necessarily so in rectal carcinomas. 9 In addition, monitoring levels during chemotherapy before surgery can be informative, and failure of CEA to fall during preoperative radiotherapy usually indicates the presence of a tumor outside the field of radiation and a poorer prognosis. 3 Preoperative elevated CEA has also been observed to correlate inversely with estimated mean time to recurrence, 4 and to correlate directly with degree of tumor stage, thickness, and differentiation in CRC patients at diagnosis. 3,4,9 CEA is not always elevated, however, in sera of those with poorly differentiated CRCs, which produce less CEA but which are more aggressive than moderately or well-differentiated carcinomas. 3,6 Rising CEA is deemed the most accurate indicator of recurrence in CRC. 5,8 Levels decrease to normal in nearly all patients after complete resection of CRCs, usually within 4 to 6 weeks after surgery. 3 Failure to decline after surgery may suggest incomplete resection, 5 and increasing levels can precede recurrent CRCs an average of 4 to 6 months before they are clinically evident in about two-thirds of cases. 3,5,8 Rising CEA levels have also been used to assist in selecting candidates for second-look surgery, in conjunction with antibody imaging using radiolabeled antibodies against CEA to provide information on tumor location. 3 Several studies have suggested a correlation between the rate of rise in CEA and the presence or probability of hepatic metastases: more rapid rises are seen with hepatic metastases than with 2 IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, )

3 localized recurrences and resectable localized tumors. In some cases, it has been CEA that signaled the asymptomatic recurrences. 4 Principle of the Procedure IMMULITE 2000 CEA is a solid-phase, two-site sequential chemiluminescent immunometric assay. Incubation Cycles: 2 30 minutes Specimen Collection The use of an ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples. Hemolyzed samples may indicate mistreatment of a specimen before receipt by the laboratory; hence the results should be interpreted with caution. Centrifuging serum samples before a complete clot forms may result in the presence of fibrin. To prevent erroneous results due to the presence of fibrin, ensure that complete clot formation has taken place prior to centrifugation of samples. Some samples, particularly those from patients receiving anticoagulant therapy, may require increased clotting time. Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE 2000 CEA has not been tested with all possible variations of tube types. Consult the section on Alternate Sample Types for details on tubes that have been tested. Volume Required: 15 µl serum Storage: 7 days at 2 8 C or for longer periods at 20 C. Warnings and Precautions For in vitro diagnostic use. CAUTION! POTENTIAL BIOHAZARD Contains human source material. Each donation of human blood or blood component was tested by FDA-approved methods for the presence of antibodies to human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) and type 2 (HIV-2) as well as for hepatitis B surface antigen (HBsAg) and antibody to hepatitis C virus (HCV). The test results were negative (not repeatedly reactive). No test offers complete assurance that these or other infectious agents are absent; this material should be handled using good laboratory practices and universal precautions CAUTION: This device contains material of animal origin and should be handled as a potential carrier and transmitter of disease. H318, P280, P264, P305 + P351 + P310 H412 P273, P501 Danger! Causes serious eye damage. Wear protective gloves/ protective clothing/eye protection/face protection. Wash hands thoroughly after handling. IF IN EYES: Rinse cautiously with water for several minutes. Immediately call a POISON CENTER or doctor/physician. Contains: tetrasodium ethylene diamine tetraacetate; CEA Reagent Wedge A Harmful to aquatic life with long lasting effects. Avoid release to the environment. Dispose of contents and container in accordance with all local, regional, and national regulations. Contains: sodium azide; CEA Adjustors Reagents: Store at 2 8 C. Dispose of in accordance with applicable laws. Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C. IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, ) 3

4 Sodium azide, at concentrations less than 0.1 g/dl, has been added as a preservative. On disposal, flush with large volumes of water to prevent the buildup of potentially explosive metal azides in lead and copper plumbing. Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert.) Water: Use distilled or deionized water. Materials Supplied Components are a matched set. The barcode labels are needed for the assay. CEA Bead Pack (L2CE12) With barcode. 200 beads, coated with monoclonal murine anti-cea antibody. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KCE2: 1 pack L2KCE6: 3 packs CEA Reagent Wedge (L2CEA2) With barcode ml buffer/murine serum matrix, with preservative; 11.5 ml alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to polyclonal rabbit anti-cea antibody in buffer, with preservative. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KCE2: 1 wedge L2KCE6: 3 wedges Before use, tear off the top of the label at the perforations, without damaging the barcode. Remove the foil seal from the top of wedge; snap the sliding cover down into the ramps on the reagent lid. CEA Adjustors (LCEL, LCEH) Two vials (Low and High) of lyophilized CEA in a CEA-free human serum, with preservative. Reconstitute each vial with 3.0 ml distilled or deionized water. Let stand for 30 minutes. Mix by gentle swirling or inversion until the lyophilized material is fully dissolved. Stable at 2 8 C for 7 days after reconstitution, or for 6 months (aliquotted) at 20 C. L2KCE2: 1 set L2KCE6: 2 sets Before making an adjustment, place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes so that the barcodes can be read by the on-board reader. Kit Components Supplied Separately Multi-Diluent 2 (L2M2Z, L2M2Z4) For the on-board dilution of patient samples. One vial, concentrated (ready-to-use), nonhuman protein/buffer matrix, with preservative. Storage: 30 days (after opening) at 2 8 C or 6 months (aliquotted) at 20 C. L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml Barcode labels are provided for use with the diluent. Before use, place an appropriate label on a mm test tube, so that the barcodes can be read by the on-board reader. L2M2Z: 3 labels L2M2Z4: 5 labels L2SUBM: Chemiluminescent Substrate L2PWSM: Probe Wash L2KPM: Probe Cleaning Kit LRXT: Reaction Tubes (disposable) L2ZT: 250 Sample Diluent Test Tubes ( mm) L2ZC: 250 Sample Diluent Tube Caps Also required Distilled or deionized water; test tubes; controls Assay Procedure Note that for optimal performance, it is important to perform all routine maintenance procedures as defined in the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual. See the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual for preparation, setup, dilutions, adjustment, assay and quality control procedures. Recommended Adjustment Interval: 2 weeks Quality Control Samples: Follow government regulations or accreditation requirements for quality control frequency. Use controls or sample pools with at least two levels (low and high) of CEA. Siemens Healthcare Diagnostics recommends the use of commercially available quality control materials with at least 2 levels (low and high). A satisfactory level of performance is achieved when the analyte values obtained are within the Acceptable Control Range for the system, or within an established range determined 4 IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, )

5 by an appropriate internal laboratory quality control scheme. Expected Values Based on its relationship to IMMULITE CEA (see Method Comparison), the IMMULITE 2000 CEA procedure can be expected to have essentially the same reference ranges. A reference range study for IMMULITE CEA was performed using serum samples from adult volunteers, including both men and nonpregnant women ranging from approximately 20 to 70 years of age (central 95%: years, median: 40 years). The subjects were in apparent good health, based on a questionnaire. Blood samples were collected in France, Germany, the Netherlands and Portugal. Results were generated by an independent laboratory in the Netherlands using IMMULITE kits. (The samples were collected in plain glass tubes without anticoagulants, gel barriers, or clot-promoting additives, and assayed in singlicate.) Medians and 95th percentiles for relevant subgroups are tabulated below. Percentiles were determined nonparametrically. Group Median 95%ile Units n Male Smokers ng/ml 153 Male Nonsmokers ng/ml 226 Female Smokers ng/ml 81 Female Nonsmokers ng/ml 262 Results from another study with the IMMULITE CEA assay are shown in the two tables below. The study was conducted at three sites in the United States. Included are individual results from 153 subjects in apparent good health (both smokers and nonsmokers); individual results from 243 patients with various nonmalignant diseases; and a total of 1382 samples (some collected during serial monitoring) from 657 patients with various types of cancer. Patient Category n Median 95 %ile Normal subjects Nonsmokers Smokers Nonmalignant Diseases Pulmonary Diseases Renal Diseases Hepatitis Thyroid Diseases Other Nonmalignant Diseases Malignant Diseases Bladder Cancer Breast Cancer Colorectal Cancer Esophageal Cancer Lung Cancer Ovarian Cancer Renal Cancer Pancreatic Cancer Stomach Cancer Prostate Cancer Rectal Cancer Other Cancers IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, ) 5

6 Patient Category n Percent of Samples in Range (ng/ml) Group Normal Subjects Nonsmokers % 7.0% 2.3% 0.0% Smokers % 14.9% 9.0% 4.5% Nonmalignant Diseases Pulmonary % 12.5% 18.8% 6.3% Diseases Renal Diseases % 15.8% 10.5% 0.0% Hepatitis % 10.6% 12.8% 2.1% Thyroid Diseases % 3.1% 4.6% 0.0% Other Nonmalignant % 12.5% 10.0% 7.5% Diseases Malignant Diseases Bladder Cancer % 18.5% 3.7% 7.4% Breast Cancer % 13.0% 10.9% 32.6% Colorectal Cancer % 13.1% 15.8% 35.0% Esophageal Cancer % 22.7% 9.1% 34.1% Lung Cancer % 13.5% 7.7% 40.4% Ovarian Cancer % 2.0% 6.0% 6.0% Renal Cancer % 7.7% 0.0% 2.6% Pancreatic Cancer % 5.3% 0.0% 63.2% Stomach Cancer % 0.0% 8.0% 56.0% Prostate Cancer % 24.1% 3.4% 3.4% Rectal Cancer % 14.3% 0.0% 14.3% Other Cancers % 12.8% 8.1% 20.9% Consider these limits as guidelines only. Each laboratory should establish its own reference ranges. Limitations Patients with confirmed carcinoma often have pretreatment CEA levels in the same range as healthy persons. Elevated CEA levels are frequently observed in smokers, in cancer patients and in patients with a variety of nonmalignant diseases and inflammatory conditions. Therefore, a serum CEA level, regardless of its value, should not be interpreted as absolute evidence for the presence or absence of malignant disease. The CEA value should be used in conjunction with information available from clinical evaluation and other diagnostic procedures. The IMMULITE 2000 CEA assay should not be used as a cancer screening test. Some individuals have antibodies to mouse protein which can cause interference in immunoassays that employ antibodies derived from mice. In particular, specimens from patients who have received preparations of mouse monoclonal antibodies for diagnosis or therapy may contain human anti-mouse antibodies (HAMA). These specimens may show erroneous results in such assays Therefore, results should be interpreted with caution for such patients. Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1998:34: ] Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings. Performance Data See Tables and Graphs for data representative of the assay's performance. Results are expressed in ng/ml. (Unless otherwise noted, all were generated on serum samples collected in tubes without gel barriers or clot-promoting additives.) Calibration Range: Up to 550 ng/ml The assay is traceable to an internal standard manufactured using qualified materials and measurement procedures. Analytical Sensitivity: 0.15 ng/ml High-dose Hook Effect: None up to 250,000 ng/ml 6 IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, )

7 Precision: Samples were assayed in duplicate over the course of 20 days, two runs per day, for a total of 40 runs and 80 replicates. (See Precision table.) Linearity: Samples were assayed under various dilutions. (See Linearity table for representative data.) Recovery: Samples spiked 1 to 19 with three CEA solutions (2520, 4160 and 5580 ng/ml) were assayed. (See Recovery table for representative data.) Specificity: The antibodies used in the IMMULITE 2000 CEA procedure are highly specific for CEA. (See Specificity table.) Bilirubin: Presence of conjugated bilirubin in concentrations up to 200 mg/l has no effect on results, within the precision of the assay. Hemolysis: Presence of hemoglobin in concentrations up to 381 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Lipemia: Presence of triglycerides in concentrations up to 3000 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Alternate Sample Type: To assess the effect of alternate sample types, blood was collected from 10 volunteers into plain, heparinized, EDTA and Becton Dickinson SST vacutainer tubes. Equal volumes of the matched samples were spiked with various concentrations of carcinoembryonic antigen, to obtain values throughout the calibration range of the assay, and then assayed by the IMMULITE 2000 CEA procedure. (Heparin) = 0.96 (Serum) 0.45 ng/ml r = (EDTA) = 1.0 (Serum) 0.91 ng/ml r = (SST) = 0.99 (Plain Tubes) ng/ml r = Means: 40.9 ng/ml (Serum) 38.9 ng/ml (Heparin) 40.0 ng/ml (EDTA) 41.4 ng/ml (SST) Method Comparison: The assay was compared to IMMULITE CEA assay on 48 samples. (Concentration range: approximately 2.1 to 550 ng/ml. See graph.) By linear regression: (IML 2000) = 1.06 (IML) ng/ml r = Means: 204 ng/ml (IMMULITE 2000) 187 ng/ml (IMMULITE) References 1) Beard DB, Haskell CM. Carcinoembryonic antigen in breast cancer. Am J Med 1986 Feb;80: ) Begent R. The value of carcinoembryonic antigen measurement in clinical practice. Ann Clin Biochem 1984;21: ) Begent R, Rustin GJS. Tumour markers: from carcinoembryonic antigen to products of hybridoma technology. Cancer Surv 1989;8(1): ) Cooper EH, de Mello Jr. JP, Giles GR. Biochemical markers in gastrointestinal malignancies. Arq Gastroenterol 1989;26(4): ) Fantini GA, DeCosse JJ. Surveillance strategies after resection of carcinoma of the colon and rectum. Surg Gynecol Obstet 1990;171: ) Jessup JM, Thomas P. Carcinoembryonic antigen: function in metastasis by human colorectal carcinoma. Cancer Metastasis Rev 1989;8: ) Nisselbaum JS, Smith CA, Schwartz D, Schwartz MK. Comparison of Roche RIA, Roche EIA, Hybritech EIA, and Abbott EIA methods for measuring carcinoembryonic antigen. Clin Chem 1988;34(4): ) Sardi A, Agnone CM, Nieroda CA, Mojzisik C, Hinkle G, Ferrara P, et al. Radioimmunoguided surgery in recurrent colorectal cancer: the role of carcinoembryonic antigen, computerized tomography, and physical examination. South Med J 1989;82: ) Sener SF, Imperato JP, Chmiel J, Fremgen A, Sylvester J. The use of cancer registry data to study preoperative carcinoembryonic antigen level as an indicator of survival in colorectal cancer. CA 1989;39(1): ) Shinkai T, Saijo N, Tominaga K, Eguchi K, Shimizu E, Sasaki Y, et al. Serial plasma carcinoembryonic antigen measurement for monitoring patients with advanced lung cancer during chemotherapy. Cancer 1986;57: ) National Committee for Clinical Laboratory Standards, Procedures for the collection of diagnostic blood specimens by venipuncture, 3rd ed, NCCLS Document H3-A3, ) Primus FJ et al. Sandwich -type immunoassay of carcinoembryonic antigen in patients receiving murine antibody for diagnosis and therapy. Clin Chem 1988;34: ) Hansen HJ et al. Solving the problem of antibody interference in commercial sandwich -type immunoassay of carcinoembryonic antigen. Clin Chem 1989;35: ) Schroff RJ et al. Human anti-murine immunoglobulin responses in IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, ) 7

8 patients receiving monoclonal antibody therapy. Cancer Res 1985;45: ) Centers for Disease Control. Update: Universal precautions for prevention of transmission of human immunodeficiency virus, hepatitis B virus and other bloodborne pathogens in healthcare settings. MMWR, 1988;37:377 82, ) Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). Protection of Laboratory Workers From Occupationally Acquired Infections; Approved Guideline - Third Edition. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; NCCLS Document M29-A3. 17) Federal Occupational Safety and Health Administration, Bloodborne Pathogens Standard, 29 CFR Technical Assistance For technical assistance, contact your National Distributor. The Quality System of Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. is certified to ISO 13485:2003. Tables and Graphs Precision (ng/ml) Within-Run 1 Total 2 Mean 3 SD 4 CV 5 SD CV % % % % % % Česky. 1 V rámci stanovení, 2 Celkem, 3 Střední hodnota, 4 Směrodatná odchylka, 5 Variační koeficient. Ελληνικά. 1 Κατά την ίδια περίοδο, 2 Συνολικά, 3 Μέσος όρος, 4 SD, 5 CV. Polski. 1 W serii, 2 Całość, 3 Średnie, 4 SD, 5 CV. Specificity Compound 1 ng/ml Added 2 % Cross reactivity 3 Chondroitin sulfate 270,000 ND Dextran sulfate 50,000 ND Hyaluronic acid 500,000 ND Heparin sodium 6,000,000 ND AFP 10,000 ND Ferritin 10,000 ND HCG 10,000 ND PAP 1000 ND PSA 1000 ND Prolactin 500 ND ND: not detectable 4 Česky. 1 Sloučenina, 2 Přidané množství, 3 % Zkřížená reaktivita, 4 ND: nezjistitelné. Ελληνικά. 1 Μείγμα, 2 Προστέθηκαν, 3 % ιασταυρ.αντίδραση, 4 ND: Μη ανιχνεύσιμη ποσότητα. Polski. 1 Składnik, 2 Ilość dodana, 3 % reaktywności krzyżowej, 4 No: Nie oznaczalne. Linearity (ng/ml) Dilution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E in in % 4 in % 2 in % 1 in % 2 16 in in % 4 in % 2 in % 1 in % 3 16 in in % 4 in % 2 in % 1 in % 4 16 in in % 4 in % 2 in % 1 in % 8 IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, )

9 5 16 in in % 4 in % 2 in % 1 in % Česky. 1 Ředění, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 % Naměřená / Očekávaná, 5 16 v 16. Ελληνικά. 1 Αραίωση, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E, 5 16 στα 16. Polski. 1 Rozcieńczenie, 2 Zmierzone (Z), 3 Obserwowane (O), 4 % Z/O, 5 16 w 16. Method Comparison IMMULITE 2000 CEA IMMULITE CEA, ng/ml (IML 2000) = 1.06 (IML) ng/ml r = English. CEA Česky. CEA. Ελληνικά. CEA. Polski. CEA. Recovery (ng/ml) Solution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E A % B % C % 2 73 A % B % C % 3 85 A % B % C % A % B % C % Česky. 1 Roztok, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 Naměřená / Očekávaná. Ελληνικά. 1 ιάλυμα, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E. Polski. 1 Roztwór, 2 Zmierzony (Z), 3 Oczekiwany (O), 4 % Z/O. Česky IMMULITE 2000 CEA Použití : Pro in vitro diagnostické použití na analyzátorech IMMULITE 2000 ke stanovení koncentrace karcinoembryonického antigenu (CEA) v séru, jakožto pomůcky při péči o pacienty s rakovinou a při určení prognózy onemocnění. Katalogové číslo : L2KCE2 (200 stanovení), L2KCE6 (600 stanovení) Kód metody : CEA Barva : Světle zelená Shrnutí a vysvětlení Karcinoembryonický antigen (CEA) zahrnuje heterogenní skupinu glykoproteinů s hmotností od do daltonů (z důvodu obsahu rozlišných uhlohydrátů a aminokyselin). Jeho biologická funkce není dobře definována, ale může mít roli v IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, ) 9

10 rozpoznávání mezi buňkami, regulaci imunitní odezvy a při metastázích kolorektálního karcinomu. 6 Název je odvozen od dřívější domněnky, že CEA se vyskytuje pouze u gastrointestinálních karcinomů a v trávícím traktu plodu. Od té doby byly zvýšené hladiny objeveny u četných zhoubných i nezhoubných stavů gastrointestinálního traktu i na jiných místech. Patří sem různé choroby jater, zánětlivá poranění, zejména gastrointestinálního traktu, infekce, traumata, infarkt, kolagen vaskulární onemocnění, poškození ledvin a kouření (současné i minulé). 2 CEA se v nízkých koncentracích vyskytuje rovněž v normální tkáni tlustého střeva a v jiných tkáních. Hodnoty CEA v séru zdravých dospělých jedinců jsou nižší než 5 ng/ml. 7 I když pětinásobné zvýšení koncentrace CEA v séru oproti normální hodnotě obyčejně signalizuje zhoubný nádor, hodnoty vyskytující se u zhoubných i nezhoubných stavů se můžou značně překrývat, což vylučuje použití CEA pro screening existence zhoubného nádoru. Význam měření CEA naopak tkví v monitorování a hodnocení stavu pacienta a ve stanovení prognózy vývoje onemocnění. Do roku 1980 byla jedinou metodou stanovení CEA používanou v USA radioimunochemická reakce vyžadující extrakci. Od té doby bylo vyvinuto několik dalších RIA metod bez použití extrakce a EIA metod sendvičového typu pro použití na vzorcích séra a plazmy. Hladina CEA při diagnostice kolorektálního karcinomu (CRC) koreluje s prognózou. 5 Zvýšené hodnoty CEA v séru před operací předpovídají zvýšené riziko recidivy 6 nebo hepatických metastáz. 4 Místo výskytu primárního karcinomu může ovlivnit interpretaci zvýšené hladiny CEA : při karcinomech tlustého střeva vysoká koncentrace CEA znamená špatnou prognózu, ale u rektálního karcinomu tomu tak nutně nemusí být. 9 Navíc, monitorování hladin CEA v průběhu chemoterapie před operací může být prospěšné a nulové snížení koncentrace CEA během předoperativní radioterapie obyčejně signalizuje existence nádoru mimo ozařovaného místa a horší prognózu. 3 Zvýšení CEA před operací rovněž nepřímo koreluje s odhadovanou střední dobou recidivy 4 a přímo koreluje se stadiem karcinomu, s tloušťkou a diferenciací pacientů s CRC při diagnostice. 3,4,9 Koncentrace CEA v séru ale není vždy zvýšená u jedinců se slabě diferencovanými CRC, které produkují méně CEA, ale jsou agresivnější než středně nebo zcela diferencované karcinomy. 3,6 Rostoucí koncentrace CEA se považuje za nejpřesnější ukazatel recidivy CRC. 5,8 Po úplné resekci CRC hladina CEA klesá na normální úroveň téměř u všech pacientů, a to obyčejně do 4 až 6 týdnů od operace. 3 Pokud se po operaci koncentrace CEA nesnižuje, může to znamenat neúplnou resekci. 5 Naopak nárůst koncentrace CEA může předcházet recidivu CRC v průměru 4 až 6 měsíců před tím, něž je onemocnění klinicky zjevné, a to asi ve dvou třetinách případů. 3,5,8 Rostoucí hladina CEA se rovněž využívá při výběru kandidátů pro druhou operaci, a to ve spojení se zobrazením protilátek pomocí radioaktivně označených protilátek proti CEA, čím se získají informace o lokalizaci nádoru. 3 Některé studie naznačily korelaci mezi mírou nárůstu koncentrace CEA a přítomností nebo pravděpodobností hepatických metastáz. Rychlejší nárůst bývá obvyklý spíše při hepatických metastázích než u lokalizovaných recidiv a lokalizovaných nádorů schopných resekce. V některých případech právě CEA upozornila na asymptomatickou recidivu. 4 Princip stanovení Stenovení IMMULITE 2000 CEA je oboustranná sekvenční chemiluminiscenční imunochemická reakce v pevné fázi. Inkubační cykly : 2 30 minut Odebírání vzorků Pro lipemické vzorky se doporučuje použití ultracentrifugy. Hemolyzované vzorky můžou být známkou nesprávného zacházení s preparátem ještě před přijetím do laboratoře; proto by výsledky měly být interpretovány s obezřetností. 10 IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, )

11 Centrifugace vzorků séra ještě před úplným vysrážením může mít za následek přítomnost fibrinu. Chybným výsledkům způsobeným přítomností fibrinu lze zamezit úplným vysrážením vzorků před jejich centrifugací. Některé vzorky, zejména od pacientů podstupujících antikoagulační léčbu, může srážlivost vyžadovat více času. Použití zkumavek pro odběr krve od různých výrobců může přinášet rozličné hodnoty v závislosti na materiálech a přísadách včetně gelových nebo fyzických bariér, aktivátorů sraženin a/nebo antikoagulačních činidel. Stanovení CEA na analyzátorech IMMULITE 2000 nebylo testováno se všemi možnými varianty jednotlivých typů zkumavek. Informace o testovaných zkumavkách najdete v části o alternativních typech vzorků. Potřebný objem vzorku : 15 μl séra Skladování : 7 dní při teplotě 2 8 C nebo déle při teplotě 20 C. Upozornění a bezpečnostní opatření Pro in vitro diagnostické použití. POZOR! POTENCIÁLNÍ BIOHAZARD Obsahuje materiál lidského původu. Každé darování krve nebo jejích složek bylo testováno metodami schválenými FDA na přítomnost protilátek proti viru lidské imunodeficience typu 1 (HIV-1) a typu 2 (HIV-2) a také na povrchový antigen viru hepatitidy B (HBsAg) a protilátky proti viru hepatitidy C (HCV). Výsledky testu byly negativní (opakovaně nereaktivní). Žádný test však není absolutní zárukou nepřítomnosti uvedených nebo jiných infekčních zárodků; s materiálem proto zacházejte podle zásad správné laboratorní praxe a dbejte obecných bezpečnostních opatření UPOZORNĚNÍ : Souprava obsahuje material živočišného původu, se kterým je třeba zacházet jako s potenciálním nosičem a přenašečem nemocí. H318, P280, P264, P305 + P351 + P310 H412 P273, P501 Nebezpečí! Způsobuje vážné poškození očí. Používejte ochranné rukavice/ochranný oděv/ ochranné brýle/obličejový štít. Po manipulaci důkladně omyjte ruce. PŘI ZASAŽENÍ OČÍ: Několik minut opatrně oplachujte vodou. Okamžitě volejte TOXIKOLOGICKÉ INFORMAČNÍ STŘEDISKO nebo lékaře. Obsahuje: ethylen diamin tetraacetát tetrasodný; CEA reagencie A Škodlivý pro vodní organismy, s dlouhodobými účinky. Zabraňte uvolnění do životního prostředí. Odstraňte obsah a obal v souladu se všemi místními, regionálními a národními předpisy. Obsahuje: azid sodný; CEA kalibrátory Reagencie : Skladujte při teplotě 2 8 C. Likvidujte v souladu s platnými předpisy. Řiďte se obecnými pravidly bezpečnosti práce a se všemi komponenty nakládejte, jako by byly potenciálně infekční. Zdrojové materiály získané z lidské krve byly testovány a shledány nereaktivní na syfilis, na protilátky proti HIV 1 a 2, na povrchový antigen hepatitidy typu B (HbsAg), a na protilátky proti hepatitidě typu C. Jako konzervační látka byl přidán azid sodný v koncentracích menších než 0,1 g/dl. Při likvidaci vypláchněte velkým množstvím vody, aby se zamezilo nahromadění potenciálně výbušných azidů kovů v olověném a měděném potrubí. Chemiluminescenční substrát : Vyvarujte se kontaminace a nevystavujte přímému slunečnímu světlu. (Viz připojený letáček.) Voda : Použijte destilovanou nebo deionizovanou vodu. Dodaný materiál Komponenty představují ucelenou sadu. Pro stanovení jsou zapotřebí štítky s čárovými kódy. CEA zásobník s kuličkami (L2CE12) Opatřeno čárovým kódem. 200 kuliček potažených monoklonální myší protilátkou proti CEA. Stabilní při teplotě 2 8 C do IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, ) 11

12 expirace. L2KCE2 : 1 balení L2KCE6 : 3 balení CEA reagencie (L2CEA2) Opatřeno čárovým kódem. 11,5 ml pufrovaného/myšího sérového matrixu s konzervačním prostředkem. 11,5 ml alkalické fosfatázy (z telecího střeva) konjugované s polyklonální králičí protilátkou proti CEA v pufru, s konzervačním prostředkem. Skladujte v chladu: Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KCE2 : 1 nádobka L2KCE6 : 3 nádobky Před použitím utrhněte vršek štítku v perforovaném místě, ale nepoškoďte čárový kód. Z vrchu nádobky odstraňte uzavírací fólii; posuvný uzávěr zaklapněte do ramp na víčku reagencie. CEA kalibrátory (LCEL, LCEH) Dvě ampulky s vysokou a nízkou koncentrací lyofilizovaného CEA v lidském séru bez CEA, s konzervačním prostředkem. Každou ampulku rekonstituujte přidáním 3,0 ml destilované nebo deionizované vody. Ponechte 30 minut stát. Míchejte jemným kroužením nebo překlápěním do úplného rozpuštění lyofilizovaného materiálu. Stabilní 7 dní po rekonstituci při teplotě 2 8 C nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při teplotě 20 C. L2KCE2 : 1 sada L2KCE6 : 2 sady Před adjustací nalepte na testovací zkumavky příslušné alikvotní štítky (dodané se soupravou) tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. Materiál dodávaný zvlášť Multidiluent 2 (L2M2Z, L2M2Z4) Pro automatické ředění koncentrovaných vzorků analyzátorem. Jedna ampulka koncentrovaného (připraveného k použití), nehumánního bílkovinového/pufrovaného matrixu, s konzervačním prostředkem. Skladování: 30 dní po otevření při teplotě 2 8 C nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při teplotě 20 C. L2M2Z : 25 ml L2M2Z4 : 55 ml Štítky s čárovými kódy jsou určeny pro diluent. Před použitím nalepte příslušný štítek na testovací zkumavku mm tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. L2M2Z : 3 štítky L2M2Z4 : 5 štítků L2SUBM : Chemiluminescenční substrát L2PWSM : Promývací roztok L2KPM : Čistící roztok na jehly LRXT : Reakční zkumavky (na jedno použití) L2ZT : 250 testovacích zkumavek na diluent vzorků ( mm) L2ZC : 250 uzávěrů na testovací zkumavky na diluent vzorků Dále potřebujete Destilovanou nebo deionizovanou vodu ; testovací zkumavky, kontroly Postup stanovení K dosažení optimálního výkonu je důležité provádět veškerou pravidelnou údržbu stanovenou v manuálu k analyzátorům IMMULITE V manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000 najdete postupy : přípravy, nastavení, ředění, adjustace, stanovení vzorků a kontrol. Doporučený interval mezi adjustacemi : 2 týdny Vzorky ke kontrole kvality : Pokud jde o četnost kontroly kvality, je třeba řídit se platnými předpisy a akreditačními požadavky. Použijte kontroly nebo směsné vzorky s alespoň dvěmi koncentracemi (vysokou a nízkou) CEA. Společnost Siemens Healthcare Diagnostics doporučuje používat obchodně dostupné materiály kontroly kvality o přinejmenším dvou koncentracích vysoké a nízké. Vyhovující funkčnosti se dosahuje, pokud zjištěné hodnoty analytu leží uvnitř přijatelného kontrolního rozmezí analyzátoru nebo uvnitř rozmezí stanoveného příslušným interním systémem kontroly kvality dané laboratoře. Očekávané hodnoty Na základě příbuznosti této metody s metodou CEA na analyzátoru IMMULITE (viz Srovnání metod) můžeme očekávat prakticky stejná referenční rozmezí. 12 IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, )

13 Výzkum referenčního rozmezí pro stanovení CEA na analyzátoru IMMULITE za použití vzorků séra od dospělých dobrovolníků, mužů a netěhotných žen, od přibližně 20 do 70 roků věku (středních 95 % : roků, medián : 40 roků). Podle vyplněných dotazníků byli všichni tito jedinci v dobrém zdravotním stavu Vzorky krve byly odebrány ve Francii, v Německu, Holandsku a v Portugalsku. Výsledky obstarala nezávislá laboratoř v Holandsku za použití souprav IMMULITE. (Vzorky byly odebrány do obyčejných skleněných zkumavek bez antikoagulantů, gelových bariér nebo přísad podporujících srážlivost. Stanovovalo se vždy po jednom vzorku.) Mediány a 95. percentily pro příslušné podskupiny se nachází v následující tabulce. Percentily byly stanoveny neparametricky. Skupina Medián 95. percentil Jednotky Muži kuřáci 2,1 6,2 ng/ml 153 Muži nekuřáci 1,1 3,4 ng/ml 226 Ženy kuřačky 1,3 4,9 ng/ml 81 Ženy nekuřačky 0,8 2,5 ng/ml 262 Výsledky další studie využívající metodu stanovení CEA na analyzátoru IMMULITE jsou shrnuty ve dvou tabulkách uvedených níže. Výzkum proběhl na třech místech ve Spojených státech. Použité byly výsledky od 153 jedinců dobrého zdraví (kuřáků i nekuřáků), dále výsledky 243 pacientů s různými nezhoubnými nemocemi a celkem 1382 vzorků (některé odebrané v rámci sériového monitoringu) od 657 pacientů s různými typy rakoviny. n Kategorie pacienta n Medián Normální jedinci 95. percentil Nekuřáci 86 1,2 4,1 Kuřáci 67 2,1 9,8 Nezhoubná onemocnění Plicní onemocnění 32 2,8 11,2 Onemocnění ledvin 19 1,5 6,3 Hepatitida 47 1,9 8,5 Onemocnění štítné 65 1,1 4,9 žlázy Ostatní nezhoubná 80 1,9 13,6 onemocnění Zhoubná onemocnění Rakovina močového měchýře 27 1,5 83,1 Rakovina prsu 46 4, Rakovina konečníku 944 5,1 849 a tračníku Rakovina jícnu 44 4,5 323 Rakovina plic 52 4,8 355 Rakovina vaječníků 50 1,3 24,6 Rakovina ledvin ,5 Rakovina slinivky 19 19,4 495 břišní Rakovina žaludku 25 56,5 277 Rakovina prostaty 29 1,2 13,2 Rakovina konečníku 21 1,4 23,8 Ostatní rakoviny IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, ) 13

14 Kategorie pacienta n Procento vzorků v rozmezí (ng/ml) Skupina 0 3,0 3,1 5,0 5, Normální jedinci Nekuřáci 86 90,7% 7,0% 2,3% 0,0% Kuřáci 67 71,6% 14,9% 9,0% 4,5% Nezhoubná onemocnění Plicní onemocnění 32 62,5% 12,5% 18,8% 6,3% Onemocnění 19 73,7% 15,8% 10,5% 0,0% ledvin Hepatitida 47 74,5% 10,6% 12,8% 2,1% Onemocnění 65 92,3% 3,1% 4,6% 0,0% štítné žlázy Ostatní nezhoubná 80 70,0% 12,5% 10,0% 7,5% onemocnění Zhoubná onemocnění Rakovina močového měchýře 27 70,4% 18,5% 3,7% 7,4% Rakovina prsu 46 43,5% 13,0% 10,9% 32,6% Rakovina konečníku a ,1% 13,1% 15,8% 35,0% tračníku Rakovina jícnu 44 34,1% 22,7% 9,1% 34,1% Rakovina plic 52 38,5% 13,5% 7,7% 40,4% Rakovina vaječníků 50 86,0% 2,0% 6,0% 6,0% Rakovina ledvin 39 89,7% 7,7% 0,0% 2,6% Rakovina slinivky břišní 19 31,6% 5,3% 0,0% 63,2% Rakovina žaludku 25 36,0% 0,0% 8,0% 56,0% Rakovina prostaty 29 69,0% 24,1% 3,4% 3,4% Rakovina konečníku 21 71,4% 14,3% 0,0% 14,3% Ostatní rakoviny 86 58,1% 12,8% 8,1% 20,9% Uvedené hranice považujte pouze za orientační. Každá laboratoř by si měla stanovit svoje vlastní referenční rozmezí. Omezení Pacienti s potvrzeným karcinomem mají často koncentraci CEA před léčbou ve stejném rozmezí jako zdraví jedinci. Zvýšené hodnoty CEA jsou mnohdy pozorovány u kuřáků, u pacientů s rakovinou a u pacientů s různými nezhoubnými onemocněními a u lidí se zánětlivými stavy. Proto by hodnoty koncentrace CEA v séru, ať jsou jakékoliv, neměly být chápány jako absolutní důkaz přítomnosti nebo neexistence zhoubného onemocnění. Hodnota CEA by měla být používána ve spojitosti s informacemi dostupnými v klinickém hodnocení a z ostatních diagnostických metod. Stanovení CEA na analyzátorech IMMULITE 2000 se nemá používat jako screening rakoviny. Někteří jedinci mají v těle protilátky proti myšímu proteinu, což může způsobit interferenci při imunologickém stanovení, které využívá protilátky odvozené od myší. Lidské protimyší protilátky (HAMA).můžou obsahovat zejména vzorky od pacientů, kteří užívali přípravky myších monoklonálních protilátek z diagnostických důvodů nebo v rámci léčby. Při stanovení těchto vzorků můžou být dosažené chybné výsledky U těchto pacientů je proto nutné být při výkladu výsledků obezřetný. Heterofilní protilátky v lidském séru můžou reagovat s imunoglobuliny obsaženými v komponentech soupravy a způsobit interference s in vitro imunologickým stanovením. [Viz Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all imunologickým stanovením. Clin Chem 1998:34:27-33.] Vzorky pacientů rutinně vystavené kontaktu se zvířaty nebo produkty zvířecího séra můžou vykázat tento typ interference a potenciálně způsobit anomální výsledky. Tyto reagencie byly vyvinuty tak, aby bylo riziko interference minimalizováno ; nicméně případné interakce mezi ojedinělými séry a komponenty testu se můžou vyskytnout. Pro diagnostické účely by se výsledky tohoto stanovení měly vždy používat v kombinaci s klinickými zkouškami, zdravotní historií pacienta a ostatními nálezy. 14 IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, )

15 Znaky metody Reprezentativní výsledky stanovení najdete v části Tabulky a grafy. Výsledky se udávají v ng/ml. (Pokud není uvedeno jinak, všechny výsledky byly získány na vzorcích séra odebraných do zkumavek bez gelových bariér nebo přísad podporujících srážlivost.) Kalibrační rozsah : Do 550 ng/ml Souprava má návaznost na mezinárodní standard vyrobený s použitím schválených materiálů a měřících procesů. Analytická citlivost : 0,15 ng/ml High-dose hook effect : Do ng/ml žádný Přesnost : Vzorky byly stanovovány dvojmo v průběhu 20 dní, dva testy denně, celkem 40 testů a 80 replikátů. (Viz tabulka "Precision".) Linearita : Stanovení vzorků bylo provedeno při rozličném ředění. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce Linearity.) Zpětná výtěžnost : Bylo provedeno stanovení vzorků s přídavkem tří roztoků CEA (2520, 4160 a 5580 ng/ml) v poměru 1:19. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce Recovery.) Specificita : Protilátky použité v stanovení CEA na analyzátorech IMMULITE 2000 jsou silně specifické vůči. (Viz tabulka Specificity.) Bilirubin : Přítomnost konjugovaného bilirubinu v koncentracích do 200 mg/l nemá žádný vliv na výsledek, v rámci přesnosti stanovení. Hemolýza : Přítomnost hemoglobinu v koncentracích do 381 mg/dl nemá žádný vliv na výsledek, v rámci přesnosti stanovení. Lipémie : Přítomnost triglyceridů v koncentracích do 3000 mg/dl nemá vliv na výsledek, v rámci přesnosti stanovení. Alternativní typ vzorku : Ke stanovení vlivu jiných typů vzorků byly odebrány vzorky krve od 10 dobrovolníků do obyčejných, heparinizovaných, EDTA a Becton Dickinson SST plastových vacutainer zkumavek. Do stejných objemů vhodných vzorků byly přidány různé koncentrace CEA, aby se získaly hodnoty přes celý kalibrační rozsah metody a následně byly vyšetřeny metodou IMMULITE 2000 CEA. (Heparin) = 0,96 (Sérum) 0,45 ng/ml r = 0,992 (EDTA) = 1,0 (Sérum) 0,91 ng/ml r = 0,995 (SST) = 0,99 (Obyčejné zkumavky) + 0,97 ng/ml r = 0,990 Střední hodnoty : 40,9 ng/ml (Sérum) 38,9 ng/ml (Heparin) 40,0 ng/ml (EDTA) 41,4 ng/ml (SST) Srovnání metody : Stanovení bylo porovnáno s metodou CEA na analyzátoru IMMULITE na 48 vzorcích. (Koncentrační rozsah: přibližně 2,1 až 550 ng/ml. Viz graf.) Podle lineární regrese : (IML 2000) = 1,06 (IML) + 5,0 ng/ml r = 0,989 Střední Hodnoty : 204 ng/ml (IMMULITE 2000) 187 ng/ml (IMMULITE) Technická Podpora Pro technickou podporu kontaktujte vašeho národního distributora. Systém kontroly jakosti společnosti Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. je certifikovaný podle ISO 13485:2003. Ελληνικά IMMULITE 2000 CEA Ενδεδειγμένη χρήση: Για in vitro διαγνωστική χρήση με τα συστήματα αναλυτών IMMULITE 2000 για τον ποσοτικό προσδιορισμό του καρκινοεμβρυϊκού αντιγόνου (CEA) στον ορό, ως βοήθημα στον χειρισμό των καρκινοπαθών καθώς και στην εκτίμηση της πρόγνωσης. Αριθμός καταλόγου: L2KCE2 (200 αναλύσεις), L2KCE6 (600 αναλύσεις) Κωδικός ανάλυσης: CEA Χρώμα: Ανοικτό Πράσινο IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, ) 15

16 Περίληψη και Επεξήγηση Το καρκινοεμβρυϊκό αντιγόνο (CEA) αποτελείται από μια ετερογενή οικογένεια γλυκοπρωτεϊνών που το βάρος τους κυμαίνεται από με daltons λόγω των διαφορετικών περιεχομένων υδατανθράκων και αμινοξέων. Η βιολογική του λειτουργία δεν είναι ξεκάθαρη, αλλά ενδέχεται να παίζει ρόλο στην διακυτταρική αναγνώριση, στην ρύθμιση της αμυντικής αντίδρασης καθώς και στην μετάσταση του καρκίνου του παχέος εντέρου. 6 Το όνομα του προέρχεται από την πρότερη αντίληψη ότι το CEA παρατηρείται μόνο σε γαστρεντερικά καρκινώματα και στην εμβρυϊκή πεπτική οδό. Αυξημένες τιμές έχουν ανιχνευθεί σε κακοήθεις και μη κακοήθεις παθήσεις της γαστρεντερικής οδού και άλλων σημείων του σώματος. Αυτές οι παθήσεις περιλαμβάνουν επίσης διάφορες ηπατικές ασθένειες, φλεγμονώδεις βλάβες ιδιαίτερα της γαστρεντερικής οδού, μολύνσεις, τραύματα, έμφραγμα, αγγειακή νόσο κολλαγόνου, νεφρική βλάβη,και κάπνισμα (τωρινό ή στο παρελθόν). 2 Το CEA επίσης παρουσιάζεται σε χαμηλά επίπεδα σε φυσιολογικό κόλον και σε άλλους ιστούς. Οι τιμές ορού σε υγιείς ενήλικες είναι γενικά λιγότερες από 5 ng/ml. 7 Αν και τιμές του ορού πέντε φορές πάνω από το κανονικό εύρος συνήθως δείχνουν κακοήθεια, οι τιμές που εμφανίζονται σε κακοήθεις και μη κακοήθεις ασθένειες μπορεί να αλληλοεπικαλύπτονται και συνεπώς η χρήση του CEA δεν ενδείκνυται σαν εξέταση για κακοήθεια. Η μέτρηση του CEA είναι σημαντική για την πρόγνωση της πορείας του ασθενή, για την εκτίμηση του status και για την παρακολούθηση. Μέχρι το 1980, η μόνη μέθοδος ανάλυσης CEA στις Ηνωμένες Πολιτείες ήταν μια ραδιοανοσοανάλυση που απαιτούσε εκχύλιση. Από τότε διάφορες nonextraction RIAs και sandwich-type EIAs έχουν αναπτυχθεί για χρήση σε δείγματα ορού και πλάσματος. Τα επίπεδα του CEA στην διάγνωση του καρκινώματος του παχέος εντέρου (CRC) σχετίζονται με την πρόγνωση. 5 Αυξημένα επίπεδα CEA σε προεγχειρητική περίοδο προβλέπουν αυξημένο κίνδυνο υποτροπής 6 ή μετάσταση στο ήπαρ. 4 Η θέση του πρωτογενούς καρκίνου μπορεί να επηρεάσει την ερμηνεία των αυξημένων επιπέδων CEA: στα καρκινώματα στο κόλον υψηλά επίπεδα CEA δείχνουν φτωχή πρόγνωση αλλά αυτό δεν ισχύει απαραίτητα στα καρκινώματα του ορθού. 9 Επιπρόσθετα, τα επίπεδα καταγραφής κατά την διάρκεια της χημειοθεραπείας και πριν την εγχείρηση μπορεί να είναι διαφωτιστικά. Μη ελλάτωση των επιπέδων CEA κατά την διάρκεια προεγχειρητικής ακτινοθεραπείας συνήθως υποδηλώνει την παρουσία όγκου εκτός του πεδίου της ακτινοβολίας και φτωχότερη πρόγνωση. 3 Έχει επίσης παρατηρηθεί ότι αυξημένα επίπεδα CEA κατά την προεγχειρητική περίοδο συνδέονται ανάστροφα με τον αναμενόμενο μέσο χρόνο υποτροπής 4 και συνδέονται άμεσα με τον βαθμό του σταδίου του όγκου, το πάχος και την διαφοροποίηση των ασθενών από CRC κατά την διάγνωση. 3,4,9 Το επίπεδο του CEA δεν είναι όμως πάντα αυξημένο, στον ορό των πασχόντων με ασθενώς διαφοροποιημένα CRCs, που παράγουν λιγότερο CEA αλλά που είναι περισσότερο επιθετικά από τα μέτρια ή τα καλώςδιαφοροποιημένα καρκινώματα. 3,6 Αυξανόμενα επίπεδα CEA θεωρούνται ως μια ακριβής ένδειξη υποτροπής. 5,8 Τα επίπεδα μειώνονται στα κανονικά σχεδόν σε όλους τους ασθενείς μετά από ολική εκτομή του CRCs, συνήθως 4 με 6 εβδομάδες μετά την εγχείρηση. 3 Μη ελλάτωση των τιμών μπορεί να είναι ένδειξη ατελούς εκτομής, 5 και αυξημένα επίπεδα μπορεί να προηγούνται υποτροπής των CRC περίπου 4 με 6 μήνες πριν από την κλινική εμφάνιση της ασθένειας σε περίπου τα δύο τρίτα των περιπτώσεων. 3,5,8 Τα αυξανόμενα επίπεδα CEA έχουν χρησιμοποιηθεί ως βοήθεια στην επιλογή υποψηφίων για επαναληπτική (second look) εγχείρηση σε συνδυασμό με απεικόνιση αντιγόνων χρησιμοποιώντας ραδιοσημασμένα αντιγόνα έναντι του CEA ώστε να ληφθούν πληροφορίες για την θέση του όγκου. 3 Σύμφωνα με πολλές μελέτες υπάρχει μια συσχέτιση μεταξύ της αναλογίας της αύξησής του και την παρουσία ή πιθανότητα ηπατικών μεταστάσεων: οι πιο απότομες αυξήσεις συνδέονται με ηπατικές μεταστάσεις παρά με τοπικές υποτροπές και με τοπικούς όγκους ικανούς για εκτομή. Σε κάποιες περιπτώσεις, ήταν το CEA που σήμανε τις ασυμπτωματικές υποτροπές IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, )

17 Αρχή της διαδικασίας Η IMMULITE 2000 CEA είναι μία ξηρής φάσης, διαδοχική, δι-φασική, ανοσομετρική ανάλυση. Κύκλοι Επώασης: 2 30 λεπτά Συλλογή δείγματος Συνιστάται η χρήση της υπερφυγοκέντρου για να καθαριστούν λιπιδαιμικά δείγματα. Αιμολυμένα δείγματα μπορεί να υποδηλώνουν κακή μεταχείριση του δείγματος πριν την παραλαβή του από το εργαστήριο και τα αποτελέσματα πρέπει να ερμηνεύονται με προσοχή. Η φυγοκέντρηση των δειγμάτων πριν την πλήρη πήξη μπορεί να έχει ως αποτέλεσμα την παρουσία θρόμβων. Για να αποφευχθούν λανθασμένα αποτελέσματα εξαιτίας της παρουσίας θρόμβων, βεβαιωθείτε ότι πριν την φυγοκέντρηση το αίμα έπηξε πλήρως. Κάποια δείγματα, ιδιαιτέρως αυτά των ασθενών που λαμβάνουν αντιπηκτική θεραπεία, ίσως χρειάζονται εκτεταμένο χρόνο πήξης. Οι σωλήνες συγκέντρωσης αίματος από διαφορετικές εταιρείες μπορεί να φέρουν διάφορες τιμές, ανάλογα με τα υλικά και τα συμπληρώματα, συμπεριλαμβανομένων των με τζελ ή φυσικών σωληναρίων, των ενεργοποιητών πήξεως και/ή των αντιπηκτικών. Η IMMULITE 2000 CEA δεν έχει δοκιμαστεί με όλους τους τύπους σωληναρίων. Συμβουλευτείτε την παράγραφο για τους εναλλακτικούς τύπους δειγμάτων για περισσότερες πληροφορίες σχετικά με τα σωληνάρια που έχουν δοκιμαστεί. Απαιτούμενος όγκος: 15 µl ορού Φύλαξη: 7 μέρες στους 2 8 C, ή για μακροβιότερη αποθήκευση στους 20 C. Προειδοποιήσεις και προφυλάξεις Για διαγνωστική εργαστηριακή χρήση ΠΡΟΣΟΧΗ! ΥΝΗΤΙΚΟΣ ΒΙΟΛΟΓΙΚΟΣ ΚΙΝ ΥΝΟΣ Περιέχει υλικό ανθρώπινης προέλευσης. Κάθε δωρεά ανθρώπινου αίματος ή συστατικού αίματος ελέγχθηκε με μεθόδους εγκεκριμένες από τον FDA για την ύπαρξη αντισωμάτων ενάντια στους ιούς της ανοσοανεπάρκειας του ανθρώπου τύπου 1 (HIV-1) και τύπου 2 (HIV-2), καθώς και για επιφανειακό αντιγόνο της ηπατίτιδας Β (HBsAg) και για αντισώματα ενάντια στον ιό της ηπατίτιδας C (HCV). Τα αποτελέσματα των εξετάσεων ήταν αρνητικά (όχι επανειλημμένα αντιδραστικά). Επειδή καμία εξέταση δεν παρέχει πλήρη διασφάλιση για την απουσία αυτών ή άλλων μολυσματικών παραγόντων, ο χειρισμός αυτού του υλικού θα πρέπει να γίνεται σύμφωνα με τις ορθές εργαστηριακές πρακτικές και γενικές προφυλάξεις ΠΡΟΣΟΧΗ: Η συσκευή αυτή περιέχει υλικό ζωικής προέλευσης και ο χειρισμός της πρέπει να γίνεται ως εάν επρόκειτο περί δυνητικού φορέα και παράγοντα μετάδοσης νόσου. H318, P280, P264, P305 + P351 + P310 H412 P273, P501 Κίνδυνος! Προκαλεί σοβαρή οφθαλμική βλάβη. Να φοράτε προστατευτικά γάντια/ προστατευτικά ενδύματα/μέσα ατομικής προστασίας για τα μάτια/πρόσωπο. Πλύνετε τα χέρια σας σχολαστικά μετά το χειρισμό. ΣΕ ΠΕΡΙΠΤΩΣΗ ΕΠΑΦΗΣ ΜΕ ΤΑ ΜΑΤΙΑ: Ξεπλύνετε προσεκτικά με νερό για αρκετά λεπτά. Καλέστε αμέσως το ΚΕΝΤΡΟ ΗΛΗΤΗΡΙΑΣΕΩΝ ή ένα γιατρό. Περιέχει: άλας του αιθυλενοδιαμινοτετραοξικού οξέος με τετρανάτριο, δοχείο αντιδραστηρίου Α CEA. Επιβλαβές για τους υδρόβιους οργανισμούς, με μακροχρόνιες επιπτώσεις. Να αποφεύγεται η ελευθέρωση στο περιβάλλον. Απορρίψτε το περιεχόμενο και τον περιέκτη σε συμμόρφωση με όλους τους τοπικούς, περιφερειακούς και εθνικούς κανονισμούς. Περιέχει: αζίδιο νατρίου, Ρυθμιστές CEA IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, ) 17

18 Αντιδραστήρια: Αποθηκεύετε στους 2 8 C. Καταστρέψτε σύμφωνα με την τοπική νομοθεσία. Ακολουθείτε τις κοινές οδηγίες και μεταχειρίζεστε όλα τα συστατικά σαν να ήταν φορείς λοιμωδών ασθενειών. Τα ανθρώπινου αίματος προέλευσης υλικά που χρησιμοποιούνται στην παρασκευή αυτού του κιτ εξετάστηκαν για σύφιλη, για αντισώματα έναντι Human Immunodeficiency Virus (HIV) 1 και 2, για ηπατίτιδας B αντιγόνο επιφανείας, και για αντισώματα ηπατίτιδας C και βρέθηκαν αρνητικά. Αζίδιο του Νατρίου έχει προστεθεί σε συγκέντρωση μικρότερη του 0,1 g/dl,σαν συντηρητικό. Κατά την απόθεση, ξεπλύνετε με πολύ νερό προκειμένου να εμποδίσετε την δημιουργία εκρηκτικών αζιδίων στους χάλκινους ή μολύβδινους σωλήνες αποχέτευσης. Υπόστρωμα χημειοφωταύγειας: εν πρέπει να μολυνθεί και δεν πρέπει να εκτίθεται σε απευθείας ηλιακό φως. Προσφύγετε στο ένθετο για λεπτομέρειες. Νερό: Χρήση απεσταγμένου ή απιονισμένου νερού. Υλικά που διατίθενται Τα υλικά είναι μια ολοκληρωμένη ενότητα. Οι ετικέτες στο εσωτερικό του κουτιού είναι απαραίτητες για την ανάλυση. CEA σε Συσκευασία σφαιριδίων (L2CE12) Με γραμμογράφηση. 200 σφαιρίδια καλυμμένα με μονοκλωνικά αντί-cea αντισώματα ποντικού. Φυλάσσεται στους 2 8 C μέχρι την ημερομηνία λήξεως που αναγράφεται στην συσκευασία. L2KCE2: 1 συσκευασία L2KCE6: 3 συσκευασίες οχείο αντιδραστηρίου CEA (L2CEA2) Με γραμμογράφηση. 11,5 ml μήτρα ορού ποντικού/ρυθμιστικού, με συντηρητικό. 11,5 ml αλκαλικής φωσφατάσης (από βόειο έντερο) συνδεδεμένη σε πολυκλωνικό αντίσωμα κουνελιού αντί- CEA, σε ρυθμιστικό διάλυμα (με συντηρητικό). Φυλάσσεται στους 2 8 C μέχρι την ημερομηνία λήξεως που αναγράφεται στην συσκευασία L2KCE2: 1 δοχείο L2KCE6: 3 δοχεία Πριν την χρήση, αφαιρέστε την διαφανή ταινία προσέχοντας να μην καταστραφεί η γραμμογράφηση. Αφαιρέστε (ξεκολλήστε) προσεκτικά το κάλυμμα από την επάνω επιφάνεια του δοχείου, και πιέστε το κάλυμμα κάτω προς τους κεκλιμένους οδηγούς-ράγες. Ρυθμιστές CEA (LCEL, LCEH) ύο φιαλίδια (χαμηλό και υψηλό) λυοφιλιομένης CEA σε ανθρώπινο ορό χωρίς CEA,με συντηρητικό. Κάντε ανασύσταση κάθε φιαλιδίου με 3,0 ml απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό. Αφήστε για 30 λεπτά και ανακινήστε με απαλές κινήσεις ή με αναστροφή μέχρι το λυοφιλοποιημένο υλικό να διαλυθεί πλήρως. Αποθηκεύονται στο ψυγείο: στους 2 8 C για 7 μέρες μετά την ανασύσταση ή για 6 μήνες (διαχωρισμένα) στους 20 C. L2KCE2: 1 σετ L2KCE6: 2 σετ Πριν την χρήση, κολλήστε τις κατάλληλες ετικέτες(προμηθεύονται με το κιτ) στα δοκιμαστικά σωληνάρια έτσι ώστε η γραμμογράφηση (barcode) να μπορεί να αναγνωστεί. Συστατικά του Kit που προμηθεύονται ξεχωριστά Πολυ-αραιωτικό 2 (L2M2Z, L2M2Z4) Για την αραίωση των δειγμάτων των ασθενών. Ένα φιαλίδιο, επεξεργασμένου (έτοιμου για χρήση) μη ανθρώπινης μήτρας πρωτεΐνης/ρυθμιστικού, με συντηρητικό. ιατηρείται για 30 μέρες (μετά το άνοιγμα) στους 2 8 C ή για 6 μήνες (διαχωρισμένο) στους 20 C. L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml Χωριστές γραμμογραφημένες ετικέτες προμηθεύονται με το κιτ, για χρήση με το Αραιωτικό. Πριν την χρήση τοποθετείστε την κατάλληλη ετικέτα σε ένα σωληνάριο mm, ούτως ώστε η ετικέτα να μπορεί να διαβαστεί. L2M2Z: 3 ετικέτες L2M2Z4: 5 ετικέτες L2SUBM: Χημειοφωταυγές υπόστρωμα L2PWSM: Πλυστικό του ανιχνευτή L2KPM: Kit καθαρισμού του ανιχνευτή LRXT: Σωλήνες εξέτασης μιας χρήσης L2ZT: 250 δοκιμαστικοί σωλήνες για αραίωση του δείγματος ( mm) L2ZC: 250 καπάκια για σωλήνες αραίωσης του δείγματος 18 IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, )

19 Χρειάζονται επίσης Απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό, δείγματα ελέγχου ποιότητας, γυάλινα σωληνάρια ιαδικασία της Ανάλυσης Σημειώστε ότι για το βέλτιστο αποτέλεσμα, είναι σημαντικό να ακολουθηθούν όλες οι τυπικές διαδικασίες όπως ορίζονται στο εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE Βλέπε το εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000 για προετοιμασία, στήσιμο, αραιώσεις, ρυθμίσεις, ανάλυση και διαδικασίες ποιοτικού έλέγχου. Συνιστώμενος χρόνος μεταξύ των ρυθμίσεων: 2 εβδομάδες είγματα ελέγχου ποιότητας: Εφαρμόστε τους κρατικούς κανονισμούς ή τις απαιτήσεις πιστοποίησης για τη συχνότητα του ποιοτικού ελέγχου. Χρησιμοποιείτε δείγματα ελέγχου ποιότητας σε δύο τουλάχιστον επίπεδα (χαμηλό και υψηλό) συγκέντρωσης του CEA. Η Siemens Healthcare Diagnostics συνιστά τη χρήση εμπορικά διαθέσιμων υλικών ελέγχου ποιότητας με τουλάχιστον 2 επίπεδα (χαμηλό και υψηλό). Ένα ικανοποιητικό επίπεδο απόδοσης επιτυγχάνεται όταν οι τιμές που προκύπτουν βρίσκονται εντός του αποδεκτού εύρους των υλικών ελέγχου για τον αναλυτή ή εντός ενός καθορισμένου εύρους που καθορίστηκε με βάση ένα κατάλληλο πλαίσιο εσωτερικού εργαστηριακού ποιοτικού ελέγχου. Αναμενόμενες Τιμές Βασιζόμενη στην σχέση με την IMMULITE CEA (βλ. Σύγκριση Μεθόδων), η ανάλυση IMMULITE 2000 CEA αναμένεται να έχει τις ίδιες τιμές αναφοράς. Οι τιμές αναφοράς διαμορφώθηκαν μετά από μια μελέτη σε δείγματα ορού από εθελοντές ενήλικες, άντρες και μη έγκυες γυναίκες, (ηλικία ετών) (κεντρικό εύρος 95%: ετών, ενδιάμεση τιμή: 40 ετών). Οι εθελοντές φαινομενικά έχουν καλή υγεία, όπως πιστοποιείται από ένα ερωτηματολόγιο. είγματα αίματος συλλέχθηκαν στην Γαλλία,Γερμανία, στις Κάτω Χώρες, και στην Πορτογαλία. Τα αποτελέσματα παρήχθησαν από ένα ανεξάρτητο εργαστήριο στις Κάτω Χώρες χρησιμοποιώντας IMMULITE kits. (Τα δείγματα συλλέχθηκαν σε απλούς γυάλινους σωλήνες χωρίς παρεμποδιστές πηκτών, τζελ, ή προσθετικών που προκαλούν θρόμβους, και αναλύθηκαν εις απλούν.) Οι ενδιάμεσες τιμές και το 95% των αντίστοιχων υποομάδων φαίνονται στον παρακάτω πίνακα. Η εκατοστιαία αναλογία καθορίστηκε μη παραμετρικά. Ομάδα Ενδιάμε ση τιμή 95%ile Μονάδ ες Άντρες Καπνιστές 2,1 6,2 ng/ml 153 Άντρες μη καπνιστές Γυναίκες Καπνιστές Γυναίκες μη καπνίστριες N 1,1 3,4 ng/ml 226 1,3 4,9 ng/ml 81 0,8 2,5 ng/ml 262 Τα αποτελέσματα μιας άλλης μελέτης με την εξέταση IMMULITE CEA φαίνονται στους δύο παρακάτω πίνακες. Η μελέτη διεξήχθη σε τρεις τοποθεσίες στις Ηνωμένες Πολιτείες και συμπεριλαμβάνει ατομικά αποτελέσματα 153 ατόμων με φαινομενικά καλή υγεία (καπνιστών και μη καπνιστών), ατομικά αποτελέσματα 243 πασχόντων από διάφορες μη κακοήθεις ασθένειες και ένα σύνολο 1382 δειγμάτων (μερικά συλλέχθηκαν κατά την διάρκεια σειριακής παρακολούθησης) από 657 πάσχοντες με διάφορους τύπους καρκίνου. IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, ) 19

20 Κατηγορία ασθενών Κανονικά υποκείμενα n Ενδιάμεση τιμή 95 %ile Μη καπνιστές 86 1,2 4,1 Καπνιστές 67 2,1 9,8 Μη κακοήθεις ασθένειες Πνευμονικές ασθένειες 32 2,8 11,2 Νεφρικές ασθένειες 19 1,5 6,3 Ηπατίτιδα 47 1,9 8,5 Ασθένειες του Θυρεοειδούς Άλλες μη κακοήθεις ασθένειες Κακοήθεις ασθένειες Καρκίνος της Ουροδόχου κύστης 65 1,1 4,9 80 1,9 13,6 27 1,5 83,1 Καρκίνος του μαστού 46 4, Καρκίνος του παχέος 944 5,1 849 εντέρου Καρκίνος του 44 4,5 323 οισοφάγου Καρκίνος του 52 4,8 355 πνεύμονα Καρκίνος των 50 1,3 24,6 ωοθηκών Καρκίνος του νεφρού ,5 Παγκρεατικός 19 19,4 495 καρκίνος Καρκίνος του 25 56,5 277 στομάχου Καρκίνος του 29 1,2 13,2 προστάτη Καρκίνος του ορθού 21 1,4 23,8 Άλλοι καρκίνοι Κατηγορία ασθενών n Εκατοστιαία αναλογία του εύρους των δειγμάτων (ng/ml) Ομάδα 0 3,0 3,1 5,0 5, Κανονικά Υποκείμενα Μη καπνιστές 86 90,7% 7,0% 2,3% 0,0% Καπνιστές 67 71,6% 14,9% 9,0% 4,5% Μη κακοήθεις ασθένειες Πνευμονικές ασθένειες 32 62,5% 12,5% 18,8% 6,3% Νεφρικές ασθένειες 19 73,7% 15,8% 10,5% 0,0% Ηπατίτιδα 47 74,5% 10,6% 12,8% 2,1% Ασθένειες του θυρεοειδούς 65 92,3% 3,1% 4,6% 0,0% Άλλες μη κακοήθεις 80 70,0% 12,5% 10,0% 7,5% ασθένειες Κακοήθεις ασθένειες Καρκίνος της Ουροδόχου κύστης 27 70,4% 18,5% 3,7% 7,4% Καρκίνος του μαστού 46 43,5% 13,0% 10,9% 32,6% Καρκίνος του ,1% 13,1% 15,8% 35,0% παχέος εντέρου Καρκίνος του οισοφάγου 44 34,1% 22,7% 9,1% 34,1% Καρκίνος του πνεύμονα 52 38,5% 13,5% 7,7% 40,4% Καρκίνος των ωοθηκών 50 86,0% 2,0% 6,0% 6,0% Καρκίνος του νεφρού 39 89,7% 7,7% 0,0% 2,6% Παγκρεατικός καρκίνος 19 31,6% 5,3% 0,0% 63,2% Καρκίνος του στομάχου 25 36,0% 0,0% 8,0% 56,0% Καρκίνος του προστάτη 29 69,0% 24,1% 3,4% 3,4% Καρκίνος του ορθού 21 71,4% 14,3% 0,0% 14,3% Άλλοι καρκίνοι 86 58,1% 12,8% 8,1% 20,9% Τα εργαστήρια πρέπει να θεωρούν αυτά στα όρια μόνο ως κατευθυντήριες γραμμές. Συνιστάται κάθε εργαστήριο να έχει τις δικές του τιμές αναφοράς. 20 IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, )

21 Περιορισμοί Οι ασθενείς με επιβεβαιωμένο καρκίνωμα συχνά παρουσιάζουν-πριν την θεραπείατο ίδιο εύρος στα επίπεδα του CEA με αυτό των υγιών ατόμων. Υψηλά επίπεδα CEA παρατηρούνται συχνά σε καπνιστές, σε πάσχοντες από καρκίνο, από μη κακοήθεις ασθένειες και από φλεγμονώδεις ασθένειες. Γι αυτό, τα επίπεδα CEA στον ορό, ανεξαρτήτως της τιμής, δεν πρέπει να εκτιμώνται σαν μια απόλυτη ένδειξη παρουσίας ή απουσίας κακοήθους ασθένειας. Η τιμή του CEA πρέπει να συνεκτιμάται με τις πληροφορίες από την κλινική εκτίμηση και άλλες διαγνωστικές διαδικασίες. Η ανάλυση IMMULITE 2000 CEA δεν πρέπει να χρησιμοποιείται ως προληπτική εξέταση καρκίνου. Κάποια άτομα έχουν αντισώματα στην πρωτεΐνη ποντικού που μπορεί να παρεμποδίσουν τις ανοσοαναλύσεις που χρησιμοποιούν αντισώματα προερχόμενα από ποντικό. Πιο συγκεκριμένα, δείγματα ασθενών που έχουν υποστεί προετοιμασία μονοκλωνικών αντισωμάτων ποντικού για διάγνωση ή θεραπεία μπορεί να περιέχουν ανθρώπινα αντί-ποντικίσια αντισώματα (HAMA). Αυτά τα δείγματα, σε τέτοιες αναλύσεις, ενδέχεται να δώσουν λανθασμένα αποτελέσματα Συνεπώς, γι αυτούς τους ασθενείς, τα αποτελέσματα πρέπει να ερμηνεύονται με προσοχή. Τα ετεροφιλικά αντισώματα που περιέχονται στον ανθρώπινο ορό μπορεί να αντιδράσουν με τις ανοσοσφαιρίνες που περιλαμβάνονται στα συστατικά της εξέτασης έχοντας ως αποτέλεσμα την παρεμβολή τους στις ανοσομετρικές εξετάσεις in vitro. [Βλ. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1998:34:27-33.] είγματα από ανθρώπους που εκτίθενται συχνά σε ζώα ή σε προϊόντα ορού ζώων μπορεί να έχουν τέτοια παρεμβολή και ως εκ τούτου λανθασμένο αποτέλεσμα. Τα αντιδραστήρια σχεδιάστηκαν έτσι ώστε να ελαχιστοποιείται αυτός ο κίνδυνος; παρόλα αυτά ενδεχόμενες αλληλεπιδράσεις μεταξύ κάποιων σπάνιων ορών και των συστατικών της εξέτασης μπορεί να συμβούν. Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα αυτής της εξέτασης πρέπει πάντοτε να συνδυάζονται με την κλινική εξέταση, το ιστορικό του ασθενούς και άλλα ευρήματα. Απόδοση είτε τους πίνακες και τα γραφικά που αναπαριστούν την απόδοση της εξέτασης. Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε ng/ml. (Εκτός αν κάτι σημειώνεται διαφορετικά, όλα πραγματοποιήθηκαν σε δείγματα ορών που συλλέχθηκαν σε σωλήνες χωρίς παρεμποδιστές πηκτών ή προσθετικών που προκαλούν θρόμβους.) Εύρος καμπύλης: μέχρι 550 ng/ml Η εξέταση είναι ιχνηλάσιμη σε ένα εσωτερικό πρότυπο που κατασκευάστηκε χρησιμοποιώντας κατάλληλα υλικά και μετρήσιμες διαδικασίες. Αναλυτική ευαισθησία: 0,15 ng/ml High-dose Επίδραση Φαινομένου Hook: εν εμφανίζεται μέχρι τα ng/ml Ακρίβεια: Για 20 μέρες κάποια δείγματα εξετάστηκαν εις διπλούν, δις ημερησίως, συνολικά 40 φορές ή 80 επαναλήψεις. (Βλ. Πίνακα Precision.) Γραμμικότητα: Ελέγχθηκαν δείγματα με διάφορες αραιώσεις. (Βλ. Πίνακα Linearity.) Ανάκτηση: Κάποια δείγματα (1 με 19) εμπλουτίστηκαν με τρία διαλύματα CEA (2520, 4160 και 5580 ng/ml) και αναλύθηκαν. (Βλ. Πίνακα Recovery για τα αντιπροσωπευτικά δείγματα.) Ειδικότητα: Τα αντισώματα που χρησιμοποιήθηκαν για την διαδικασία ανάλυσης με IMMULITE 2000 CEA παρουσιάζει υψηλή ειδικότητα για την CEA. (Βλ. Πίνακα Specificity.) Χολερυθρίνη: Παρουσία χολερυθρίνης σε συγκεντρώσεις μέχρι 200 mg/l δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Αιμόλυση: Παρουσία αιμοσφαιρίνης σε συγκεντρώσεις μέχρι 381 mg/dl δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Λιπιδαιμία: Παρουσία τριγλυκεριδίων σε συγκεντρώσεις μέχρι 3000 mg/dl δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης. IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, ) 21

22 Εναλλακτικοί Τύποι είγματος: Για να εκτιμηθεί το αποτέλεσμα των εναλλακτικών τύπων δείγματος, συλλέχθηκε αίμα από 10 εθελοντές σε απλούς ηπαρινισμένους EDTA και Becton Dickinson SST δοκιμαστικούς (vacutainer) σωλήνες. Ίσες ποσότητες των αντίστοιχων δειγμάτων εμπλουτίστηκαν με διάφορες ποσότητες καρκινοεμβρϋικού αντιγόνου, ώστε να ληφθούν τιμές για όλο το εύρος καμπύλης της εξέτασης, και μετά εξετάστηκαν σύμφωνα με τη διαδικασία της IMMULITE 2000 CEA. (Ηπαρίνη) = 0,96 (Ορός) 0,45 ng/ml r = 0,992 (EDTA) = 1,0 (Ορός) 0,91 ng/ml r = 0,995 (SST) = 0,99 (Απλοί σωλήνες) + 0,97 ng/ml r = 0,990 Μέσοι όροι: 40,9 ng/ml (Ορός) 38,9 ng/ml (Ηπαρίνη) 40,0 ng/ml (EDTA) 41,4 ng/ml (SST) Σύγκριση μεθόδων: Η εξέταση συγκρίθηκε με την ανάλυση IMMULITE CEA σε 48 δείγματα. (Εύρος συγκεντρώσεων: περίπου 2,1 ως 550 ng/ml. Βλ. Σχετικά γραφικά.) Η εξίσωση γραμμικής παλινδρόμησης είναι: (IML 2000) = 1,06 (IML) + 5,0 ng/ml r = 0,989 Μέσοι όροι: 204 ng/ml (IMMULITE 2000) 187 ng/ml (IMMULITE) Τεχνική Υποστήριξη Για τεχνική υποστήριξη αποταθείτε στον αντιπρόσωπο της χώρας σας. Το Σύστημα Ποιότητας της Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. είναι επικυρωμένο με ISO 13485:2003. Polski IMMULITE 2000 CEA Przeznaczenie: Test diagnostyczny in vitro dla analizatorów systemów IMMULITE 2000 do ilościowego oznaczenia poziomu antygenu karcynoembrionalnego (CEA) w surowicy, przydatny w prowadzeniu i prognozowaniu przypadków raka. Numer Katalogowy: L2KCE2 (200 testów), L2KCE6 (600 testów) Kod testu: CEA Kolor: Jasno zielony Wprowadzenie Antygen karcynoembrionalny (CEA) obejmuje heterogenną rodzinę glikoprotein o masie od do daltonów zależnej od zawartości węglowodanów i aminokwasów. Jego funkcja biologiczna nie jest jasno określona, ale przypuszcza się, że może odgrywać rolę w rozpoznawaniu się komórek, regulacji odpowiedzi immunologicznej oraz przerzutowaniu raka jelita grubego i odbytnicy. 6 Jego nazwa wywodzi ze wstępnych przypuszczeń, że występuje wyłącznie przy rakach żołądkowo-jelitowych oraz w przewodzie pokarmowym płodu. Od tego czasu podniesiony poziom CEA stwierdzono w wielu złośliwych i łagodnych stanach chorobowych przewodu pokarmowego i innych organów. Obejmują one różnorodne choroby wątroby; zapalenia, zwłaszcza przewodu pokarmowego; infekcje; urazy; martwice niedokrwienne; chorobę kolagenu naczyń; upośledzenie czynności nerek. Wzrost poziomu CEA obserwowany jest u byłych i obecnych palaczy papierosów. 2 CEA obecny jest w niskich stężeniach w zdrowej okrężnicy i innych tkankach. Poziom CEA w surowicy zdrowych dorosłych jest na ogół niższy niż 5 ng/ml. 7 Mimo iż pięciokrotny wzrost poziomu CEA zazwyczaj wskazuje na obecność nowotworu złośliwego, to ze względu na znaczne pokrywanie się rozkładu wartości CEA w chorobach złośliwych i łagodnych, oznaczenie CEA nie posiada waloru testu przesiewowego dla złośliwych chorób nowotworowych. Zasadnicze znaczenie pomiaru CEA to prognozowanie, ocena zaawansowania choroby oraz monitorowanie chorego. 22 IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, )

23 Do roku 1980 jedyną metodą oznaczania poziomu CEA była metoda radioimmunologiczna wymagająca ekstrakcji. Następnie opracowano testy RIA nie poprzedzane ekstrakcją oraz kanapkowe testy EIA do oznaczeń w surowicy i osoczu. Poziom CEA przy diagnozowaniu raka jelita grubego i odbytnicy (CRC) koreluje z rokowaniem. 5 Podniesione wartości CEA w surowicy przed zabiegiem wskazują na zwiększone ryzyko nawrotu 6 lub przerzutów do wątroby. 4 Umiejscowienie pierwotnego raka może wpływać na interpretację wzrostu stężenia CEA: przy raku okrężnicy wysoki poziom CEA rokuje źle, natomiast nie stanowi to reguły w przypadku raka odbytnicy. 9 Ponadto, monitorowanie CEA może być pomocne w ocenie przebiegu chemioterapii poprzedzającej zabieg chirurgiczny, a stały poziom CEA mimo zastosowania przedoperacyjnej radioterapii sugeruje zwykle istnienie nowotworu poza polem naświetlania i wiąże się ze złymi rokowaniami. 3 U chorych na CRC poziom przedoperacyjnego stężenia CEA jest odwrotnie proporcjonalny do średniego czasu wznowy i wprost proporcjonalny do stadium nowotworu, grubości i zróżnicowania. 3,4,9 Poziom CEA nie zawsze jednak wzrasta w surowicy chorych na słabo zróżnicowany CRC, produkujący mniejsze ilości CEA, lecz bardziej agresywny niż formy średnio lub wysoko zróżnicowane. 3,6 Sądzi się, że wzrastające stężenie CEA jest najlepszym wskaźnikiem wznowy CRC. 5,8 Prawie u wszystkich pacjentów po całkowitej resekcji CRC poziom CEA powraca do normy w ciągu zwykle 4 do 6 tygodni po operacji. 3 Brak spadku stężenia CEA do wartości granicznej może wskazywać na niekompletną resekcję, 3 a w dwóch trzecich przypadków wzrost poziomu CEA może o 4 6 miesięcy wyprzedzać kliniczne objawy nawrotu. 3,5,8 Wzrost poziomu CEA istotny jest przy doborze chorych do powtórnego zabiegu operacyjnego. Selekcja taka opiera się równolegle na obrazowaniem przy użyciu znakowanych izotopem przeciwciał anty-cea informującym o lokalizacji guza. 3 Niektóre badania sugerują korelację pomiędzy stopniem narastania CEA a prawdopodobieństwem przerzutów do wątroby. Wzrost CEA przy przerzutach do wątroby jest szybszy niż w przypadku wznowy w miejscu i nowotworach operacyjnych. W niektórych przypadkach to właśnie poziom CEA sygnalizuje nawrót choroby przy braku symptomów. 4 Zasada testu IMMULITE 2000 jest immunoenzymatycznym, chemiluminescencyjnym, dwupunktowym testem kanapkowym (imunometrycznym) fazy stałej. Preparatyka próbek Zalecane jest klarowanie próbek lipemicznych przez ultrawirowanie. Hemoliza próbki może świadczyć o nieprawidłowym postępowaniu z próbką na etapie przedlaboratoryjnym. Fakt ten należy brać pod uwagę przy interpretacji wyników. Odwirowanie próbki krwi przed zakończeniem wykrzepiania może spowodować, że w supernatancie pozostanie fibryna stanowiąca przyczynę fałszywych wyników. Przed przystąpieniem do wirowania należy mieć pewność, że skrzep jest ostatecznie uformowany. Niektóre próbki, a zwłaszcza pochodzące od osób poddanych leczeniu antykoagulantami, wymagają dłuższego czasu na wytworzenie skrzepu. W zależności od producenta probówki do pobierania krwi mogą różnie wpływać na uzyskiwane wyniki. Istotne jest tworzywo i czynniki dodatkowe jak żel lub bariery oddzielające skrzep, aktywatory krzepnięcia oraz antykoagulanty. Wpływ wszystkich możliwych wariantów probówek na test IMMULITE 2000 CEA nie został określony. Informacje o przetestowanych wariantach podano w akapicie Wpływ materiału na oznaczenie. Wymagana objętość próbki: 15 µl surowicy Przechowywanie: 7 dni w 2 8 C lub dłużej w 20 C. Ostrzeżenia i warunki wstępne Test diagnostyczny in vitro. IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, ) 23

24 PRZESTROGA! POTENCJALNE ZAGROŻENIE BIOLOGICZNE Zawiera materiał pochodzenia ludzkiego. Każdą porcję ludzkiej krwi lub składnika krwi pochodzącą od dawców przetestowano metodami zaaprobowanymi przez FDA na obecność przeciwciał przeciwko ludzkiemu wirusowi nabytego niedoboru odporności typu 1 (HIV-1) i typu 2 (HIV-2), antygenu powierzchniowego zapalenia wątroby typu B (HBsAg) i przeciwciał przeciwko wirusowi zapalenia wątroby typu C (HCV). Wyniki tych badań były ujemne (nie wykazały powtarzalnej reaktywności). Jednak żadne badanie nie gwarantuje całkowitej pewności, że te lub inne czynniki chorobotwórcze nie są obecne w materiale; z tym materiałem należy postępować zgodnie z zasadami dobrej praktyki laboratoryjnej i stosować uniwersalne środki ostrożności PRZESTROGA: Materiał pochodzenia zwierzęcego. Postępować tak jak z materiałem potencjalnie zakaźnym. H318, P280, P264, P305 + P351 + P310 H412 P273, P501 Niebezpieczeństwo! Powoduje poważne uszkodzenie oczu. Stosować rękawice ochronne/ odzież ochronną/ochronę oczu/ ochronę twarzy. Dokładnie umyć ręce po użyciu. W PRZYPADKU DOSTANIA SIĘ DO OCZU: Ostrożnie płukać wodą przez kilka minut. Natychmiast skontaktować się z OŚRODKIEM ZATRUĆ lub lekarzem. Zawiera: etylenodiaminotetraoctan tetrasodu; Klin z odczynnikami A - CEA. Działa szkodliwie na organizmy wodne, powodując długotrwałe skutki. Unikać uwolnienia do środowiska. Pojemnik i zawartość usuwać zgodnie z wszystkimi lokalnymi, regionalnymi i krajowymi przepisami. Zawiera: azydek sodu; CEA Kalibratory Odczynniki: Przechowywać w 2 8 C. Usuwać zgodnie z instrukcją. Zachowywać środki ostrożności konieczne przy pracy z materiałem potencjalnie zakaźnym. W materiałach pochodzących z krwi ludzkiej wykluczono reaktywność w kierunku syfilisu, obecność przeciwciał anty-hiv1/2, HBsAg i przeciwciał anty-hcv. Niektóre składniki zestawu mogą zawierać jako konserwant azydek sodu w stężeniu mniejszym niż 0,1 g/dl. Wykorzystane odczynniki usuwać w dużej ilości wody, by zapobiec osadzaniu azydku sodu w rurach miedzianych lub ołowianych, co może doprowadzić do wytworzenia potencjalnie wybuchowych azydków tych metali. Substrat chemiluminescencyjny: Unikać zanieczyszczenia i chronić przed bezpośrednim światłem słonecznym (patrz ulotka). Woda: Dejonizowana lub destylowana. Elementy zestawu Elementy zestawu stanowią komplet. Zestaw działa w oparciu o kod kreskowy. CEA Pojemnik z Kulkami (L2CE12) Z kodem kreskowym. 200 kulek opłaszczonych mysim przeciwciałem monoklonalnym anty-cea. Stabilne w 2 8 C do daty ważności. L2KCE2: 1 opakowanie L2KCE6: 3 opakowania CEA Klin z Odczynnikiem (L2CEA2) Z kodem kreskowym. 11,5 ml matrycy bufor/surowica, z konserwantem; 11,5 ml fosfatazy alkalicznej (izolowanej z jelita cieląt) związanej z poliklonalnym króliczym przeciwciałem anty-cea w buforze buforze konserwantem. Stabilne w 2 8 C do daty ważności. L2KCE2: 1 klin L2KCE6: 3 kliny Przed użyciem zerwać taśmę zabezpieczającą nie uszkadzając kodu kreskowego. Usunąć foliową uszczelką komór odczynnikowych. Wsunąć przesuwne zamknięcie komór w prowadnice w pokrywie klina. CEA Kalibratory (LCEL, LCEH) Dwie fiolki(niski i wysoki) liofilizatu CEA w pozbawionej CEA surowicy ludzkiej z konserwantem. Zawartość każdej rekonstytuować 3,0 ml destylowanej lub dejonizowanej wody. Odstawić na 30 minut. Mieszać przez delikatne 24 IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, )

25 obracanie i odwracanie aż do całkowitego rozpuszczenia liofilizatu. Po rekonstytucji stabilny w 2 8 C przez 7 dni lub 6 miesięcy (rozpietować) w 20 C. L2KCE2: 1 zestaw L2KCE6: 2 zestawy Przed wykonaniem kalibracji umocować na probówkach odpowiednie nalepki z kodem kreskowym (dostarczane z zestawem) rozpoznawane przez czytnik kodów kreskowych aparatu. Materiały Dostarczane Oddzielnie Multi-Diluent 2 (L2M2Z, L2M2Z4) Do automatycznego rozcieńczania wysokich próbek. Fiolka koncentrowanej (gotowej do użytku), buforowanej matrycy białka zwierzęcecego, z konserwantem. Po otwarciu przechowywać 30 dni w 2 8 C lub 6 miesięcy (rozpipetować) w 20 C. L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml Wraz z rozcieńczalnikiem dostarczane są nalepki z kodami kreskowymi. Nalepkę umieścić na probówce ( mm), by umożliwić jej rozpoznanie przez czytnik kodów aparatu. L2M2Z: 3 nalepek L2M2Z4: 5 nalepek L2SUBM: Substrat chemiluminescencyjny L2PWSM: Roztwór płuczący L2KPM: Roztwór czyszczący igłę pipetora LRXT: Probówki reakcyjne (jednorazowe) L2ZT: 250 probówek do rozcieńczania próbek mm L2ZC: 250 korków do probówek na rozcieńczalnik Ponadto niezbędne woda destylowana lub dejonizowana, probówki, kontrole Procedura oznaczenia Przestrzeganie procedur dotyczących utrzymania aparatu, zawartych w Podręczniku operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000 poprawia charakterystykę uzyskiwanych wyników. Procedury: przygotowania aparatu, ustawień aparatu, przygotowania i rozcieńczania próbek, rekalibracji, oznaczenia i kontroli jakości zgodnie z Podręcznikiem operatora do obsługi systemów IMMULITE Zalecany Odstęp Pomiędzy Rekalibracjami: 2 tygodnie Próbki Kontrolne: Przestrzegać przepisów państwowych i wymogów kontrolnych w zakresie częstotliwości kontroli jakości. Stosować kontrole lub pule surowic, co najmniej o niskim i wysokim poziomie CEA. Siemens Healthcare Diagnostics zaleca stosowanie dostępnych w handlu próbek kontroli jakości o co najmniej 2 poziomach (niskim i wysokim). Uznaje się, że test przebiega prawidłowo, gdy uzyskane wartości analitu plasują się w przyjętym dla Kontroli zakresie dla danego analizatora lub w zakresie opracowanym w ramach wewnątrzlaboratoryjnego systemu zapewnienia jakości. Oczekiwane wartości Opierając się na pokrewieństwie testu do IMMULITE CEA można oczekiwać, że zakresy wartości referencyjnych testów będą identyczne. Zakresy referencyjne dla IMMULITE CEA wyznaczono w grupie zdrowych dorosłych ochotników: mężczyzn i kobiet nie będących w ciąży, w wieku od około 20 do 70 roku życia (środkowe 95%: lat, mediana: 40 lat). Stan zdrowia badanych określono na podstawie ankiety. Próbki pobierano we Francji, Niemczech, Holandii i Portugalii. Wyniki zostały uzyskane w niezależnym laboratorium w Holandii w oparciu o zastawy IMMULITE. (Krew pobierano do szklanych probówek bez antykoagulantu, bariery żelowej i substancji przyspieszających krzepnięcie, pomiaru dokonywano w jednym powtórzeniu.) Mediany i górne 95% dla odpowiednich grup przedstawiono w tabeli poniżej. Wartości wyrażone w procentach wyliczono nieparametrycznie. Grupa Jed- Mediana 95% nostki n Mężczyźni palacze 2,1 6,2 ng/ml 153 Mężczyźni 1,1 3,4 ng/ml 226 niepalący Kobiety palące 1,3 4,9 ng/ml 81 Kobiety niepalące 0,8 2,5 ng/ml 262 IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, ) 25

26 Wyniki innych badań przy użyciu testu IMMULITE CEA przeprowadzonych w trzech ośrodkach w Stanach Zjednoczonych przedstawiono w dwóch tabelach poniżej. Obejmują oznaczenia u 153 widocznie zdrowych osób (palących i niepalących); 243 chorych z różnymi niezłośliwymi chorobami, a także 1382 próbek (część uzyskanych w ramach długotrwałego monitorowania) od 657 chorych z różnymi typami raka. Grupy chorych n Mediana 95 %ile Osoby zdrowe Niepalący 86 1,2 4,1 Palący 67 2,1 9,8 Choroby nienowotworowe Choroby płuc 32 2,8 11,2 Choroby nerek 19 1,5 6,3 Zapalenie wątroby 47 1,9 8,5 Choroby tarczycy 65 1,1 4,9 Inne choroby 80 1,9 13,6 nienowotowrowe Nowotowry złośliwe Rak pęcherza 27 1,5 83,1 Rak sutka 46 4, Rak jelita grubego i 944 5,1 849 odbytnicy Rak przełyku 44 4,5 323 Rak płuca 52 4,8 355 Rak jajnika 50 1,3 24,6 Rak nerki ,5 Rak trzustki 19 19,4 495 Rak żołądka 25 56,5 277 Rak prostaty 29 1,2 13,2 Rak odbytu 21 1,4 23,8 Inne rodzaje raka Kategorie chorych n % próbek w danym zakresie (ng/ml) Grupa 0 0,3 3,1-5,0 5,1-10 >10 Osoby zdrowe Niepalący 86 90,7% 7,0% 2,3% 0,0% Palący 67 71,6% 14,9% 9,0% 4,5% Choroby nienowotworowe Choroby płuc Choroby nerek Zapalenie wątroby Choroby tarczycy Inne choroby nienowotwor owe Nowotwory złośliwe Rak pęcherza 32 62,5% 12,5% 18,8% 6,3% 19 73,7% 15,8% 10,5% 0,0% 47 74,5% 10,6% 12,8% 2,1% 65 92,3% 3,1% 4,6% 0,0% 80 70,0% 12,5% 10,0% 7,5% 27 70,4% 18,5% 3,7% 7,4% Rak sutka 46 43,5% 13,0% 10,9% 32,6% Rak jelita grubego i odbytnicy ,1% 13,1% 15,8% 35,0% Rak przełyku 44 34,1% 22,7% 9,1% 34,1% Rak płuca 52 38,5% 13,5% 7,7% 40,4% Rak jajnika 50 86,0% 2,0% 6,0% 6,0% Rak nerki 39 89,7% 7,7% 0,0% 2,6% Rak trzustki 19 31,6% 5,3% 0,0% 63,2% Rak żołądka 25 36,0% 0,0% 8,0% 56,0% Rak prostaty 29 69,0% 24,1% 3,4% 3,4% Rak odbytu 21 71,4% 14,3% 0,0% 14,3% Inne rodzaje raka 86 58,1% 12,8% 8,1% 20,9% Powyższe wartości należy traktować jako orientacyjne. Każde laboratorium powinno wyznaczyć własne zakresy referencyjne. 26 IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, )

27 Ograniczenia Poziom CEA przed leczeniem u osób z potwierdzonym rozpoznaniem raka często odpowiada poziomowi spotykanemu u osób zdrowych. Podniesione stężenia CEA obserwowane są zazwyczaj u osób palących papierosy, u chorych na raka, a także u osób z różnymi chorobami nienowotworowymi i stanami zapalnymi. Dlatego też poziomy CEA w surowicy, niezależnie od wartości, nie mogą być traktowane jako kategoryczna przesłanka o obecności lub braku choroby nowotworowej. Wyniki oznaczenia CEA powinny być interpretowane w połączeniu z informacjami klinicznymi i innymi wynikami badań. Test IMMULITE 2000 CEA nie może być traktowany jako test przesiewowy dla raka. Niektórzy chorzy posiadają w surowicy przeciwciała przeciw białku mysiemu, tzw. HAMA, zaburzające wyniki testów, w których mysie przeciwciała stosowane są jako odczynniki. Dotyczy to osób, które w celach diagnostycznych lub terapeutycznych otrzymywały mysie przeciwciała monoklonalne. Wyniki oznaczeń u takich osób należy interpretować z ostrożnością Przeciwciała heterofilne obecne w surowicy ludzkiej mogą wchodzić w reakcję z immunoglobulinami będącymi reagentami testu immunologicznego, wpływając na przebieg oznaczenia in vitro. [Porównaj: Boscato L.M., Stuart M.C.: Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays Przeciwciała heterofilne - problem wszystkich testów immunologicznych. Clin Chem 1988:34:27-33]. Wpływ przeciwciał heterofilnych może ujawnić się w oznaczeniach wykonywanych w surowicy osób mających ciągły kontakt ze zwierzętami lub zwierzęcymi produktami krwiopochodnymi, stanowiąc potencjalną przyczynę błędnych wyników. W teście ryzyko interferencji przeciwciał heterofilnych zostało zminimalizowane przez odpowiedni dobór proporcji odczynników, tym niemniej interferencja taka może potencjalnie nastąpić w rzadkich przypadkach. W postępowaniu diagnostycznym wyniki uzyskane tą metodą powinny być z zasady interpretowane w połączeniu z badaniem klinicznym pacjenta, jego historią choroby oraz innymi okolicznościami. Parametry testu Dane charakteryzujące test przedstawiono w tabelach i wykresach. Wyniki podano w ng/ml. (O ile nie podano inaczej, wszystkie wyniki dotyczą surowicy, a próbki pobierano do probówek bez bariery żelowej i substancji przyspieszających krzepnięcie.) Zakres kalibracji: Do 550 ng/ml Test wykazuje zgodność pomiarową z wewnętrznymi standardami wytwarzania dzięki zastosowaniu kwalifikowanych materiałów i metod pomiaru. Czułość analityczna: 0,15 ng/ml Efekt wysokiej dawki Hook Effect: Nie występuje do stężenia ng/ml Precyzja: Próbki oznaczano w duplikatach w ciągu 20 dni, dwa razy dziennie uzyskując 40 serii i 80. (Patrz tabela Precyzja.) Liniowość: Oznaczano próbki poddane kolejnym rozcieńczeniom. (Patrz: tabela Liniowość.) Odzysk: Oznaczano próbki surowic wzbogacane w stosunku objętościowym 1 do 19 roztworami CEA o stężeniach, kolejno: 2520, 4160 serii i 5580 ng/ml. (Patrz: tabela Odzysk.) Specyficzność: Przeciwciało użyttw w Teście IMMULITE 2000 CEA jest wysoce specyficzne w stosunku do CEA. (Patrz: tabela Specyficzność.) Bilirubina: Obecność bilirubiny związanej w stężeniu do 200 mg/l nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Hemoliza: Obecność hemoglobiny w ilości 381 ng/ml nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Lipemia: Obecność trójglicerydów w stężeniu do 3000 mg/dl ml nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Wpływ materiału na oznaczenie: Wpływ rodzaju próbki na oznaczenie określano w próbkach krwi pobieranych od 10 wolontariuszy do probówek zwykłych, heparynowych z EDTA oraz probówek z barierą żelową SST, systemu próżniowego Becton Dickinson. Jednakowe objętości porównywanych próbek wzbogacano różnymi stężeniami IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, ) 27

28 antygenu karcinoembrionalnego dla uzyskania wartości rozłożonych w całym zakresie liniowości testu i oznaczano testem IMMULITE 2000 CEA. (Heparyna) = 0,96 (Surowica) 0,45 ng/ml r = 0,992 (EDTA) = 1,0 (Surowica) 0,91 ng/ml r = 0,995 (SST) = 0,99 (zwykłe probówki) + 0,97 ng/ml r = 0,990 Średnie: 40,9 ng/ml (Surowica) 38,9 ng/ml (Heparyna) 40,0 ng/ml (EDTA) 41,4 ng/ml (SST) Porównanie metod: test porównywano z IMMMULITE CEA w 48 próbkach (zakres: od 2,1 to 550 ng/ml. Patrz Wykres.) Uzyskano równanie regresji liniowej: (IML 2000) = 1,06 (IML) + 5,0 ng/ml r = 0,989 Średnie: 204 ng/ml (IMMULITE 2000) 187 ng/ml (IMMULITE) Pomoc techniczna i konsultacje Krajowy Dystrybutor udziela wszechstronnej pomocy technicznej. System Kontroli Jakości Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. posiada Certyfikat Jakości ISO 13485:2003. IMMULITE is a trademark of Siemens Healthcare Diagnostics Siemens Healthcare Diagnostics. All rights reserved. Made in: UK Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. Glyn Rhonwy, Llanberis, Gwynedd LL55 4EL United Kingdom PIEL2KCE 6 {13} Changes in this Edition: cc#eu22516: 1) Under Warnings and Precautions, added biohazard symbol and potential biohazard statement, caution statement, required GHS pictograms/signal words/hazard and precautionary codes and statements, offending chemicals and sources. 2) Under References, added citations from the potential biohazard statement. 3) Changed Origin: UK to Made in: UK. 4) Updated the manufacturer address to include Glyn Rhonwy. 5) In Understanding the Symbols, revised the symbol for catalog number, added a GHS pictogram for health hazard, and updated existing symbols with GHS pictograms and terminology for exclamation mark, corrosion, skull and crossbones, and environment. Understanding the Symbols Understanding the Symbols En English Vysvětlivky symbolů Επεξήγηση των συμβόλων Znaczenie symboli Cz Česky El Ελληνικά Pl Polski The following symbols may appear on the product labeling: / Na štítku výrobku mohou být uvedeny následující symboly: / Τα ακόλουθα σύμβολα ενδέχεται να εμφανίζονται στην επισήμανση του προϊόντος: / Na etykietach produktu mogą pojawiać się poniższe symbole: Symbol Definition En: In vitro diagnostic medical device Cz: Zdravotnický prostředek pro in vitro diagnostiku El: In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή Pl: Sprzęt do medycznej diagnostyki in vitro En: Catalog Number Cz: Katalogové číslo El: Αριθμός καταλόγου Pl: Numer katalogowy En: Manufacturer Cz: Výrobce El: Κατασκευαστής Pl: Producent En: Authorized Representative in the European Community Cz: Autorizované zastoupení v Evropské unii El: Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα Pl: Autoryzowany przedstawiciel w Unii Europejskiej 28 IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, )

29 Symbol Definition En: CE Mark Cz: CE značka El: Σήμανση CE Pl: Znak CE En: CE Mark with identification number of notified body Cz: CE značka s identifikačním číslem notifikovaného orgánu El: Σήμανση CE με αριθμό αναγνώρισης του φορέα πιστοποίησης Pl: Znak CE z numerem identyfikacyjnym jednostki notyfikowanej En: Consult instructions for use Cz: Postupujte podle návodu k použití El: Συμβουλευτείτε τις οδηγίες λειτουργίας Pl: Zapoznać się z instrukcją użycia En: Caution! Potential Biohazard Cz: Pozor! Potenciální biohazard El: Πρoσοχή! υνητικός βιολογικός κίνδυνος Pl: Uwaga! Potencjalne zagrożenie biologiczne En: Temperature limitation (2 8 C) Cz: Teplotní rozsah (2 8 C) El: Περιορισμός θερμοκρασίας (2 8 C) Pl: Zakres temperatury (2 8 C) En: Upper limit of temperature ( -20 C) Cz: Horní teplotní limit ( -20 C) El: Ανώτερο όριο θερμοκρασίας ( -20 C) Pl: Górny zakres temperatury ( -20 C) En: Lower limit of temperature ( 2 C) Cz: Spodní teplotní limit ( 2 C) El: Κατώτερο όριο θερμοκρασίας ( 2 C) Pl: Dolny zakres temperatury ( 2 C) En: Do not freeze (> 0 C) Cz: Nezmrazovat (> 0 C) El: Μην καταψυχετε (> 0 C) Pl: Nie zamrażać (> 0 C) En: Do not reuse Cz: Pro jednorázové použití El: Μην κάνετε επαναληπτική χρήση Pl: Nie używać powtórnie LOT Symbol Definition En: Keep away from sunlight Cz: Chraňte před slunečním světlem El: ιατηρείτε μακριά από το ηλιακό φως Pl: Chronić przed światłem słonecznym En: Batch code Cz: Šarže El: Κωδικός παρτίδας Pl: Kod serii En: Contains sufficient for (n) tests Cz: Dostatečné množství pro (n) testů El: Περιεχόμενο επαρκές για (n) εξετάσεις Pl: Zawartość wystarczająca na (n) testów En: Date format (year-month) Cz: Formát data (rok-měsíc) El: Μορφή ημερομηνίας (έτος-μήνας) Pl: Zapis daty (rok-miesiąc) En: Use by Cz: Spotřebujte do El: Ημερομηνία λήξης Pl: Wykorzystać do En: Health Hazard Cz: Zdravotní riziko El: Κίνδυνος για την υγεία Pl: Zagrożenie dla zdrowia En: Exclamation Mark Cz: Vykřičník El: Θαυμαστικό Pl: Wykrzyknik En: Corrosion Cz: Koroze El: ιάβρωση Pl: Działanie żrące En: Skull and Crossbones Cz: Lebka se zkříženými hnáty El: Νεκροκεφαλή με διασταυρούμενα οστά Pl: Czaszka i skrzyżowane piszczele En: Environment Cz: Prostředí El: Περιβάλλον Pl: Środowisko IMMULITE 2000 CEA (PIEL2KCE-6 {13}, ) 29