CK-MB. For use on IMMULITE 2000 systems

Transcript

1 CK-MB For use on IMMULITE 2000 systems

2 IMMULITE 2000 CK-MB English Intended Use: For in vitro diagnostic use with the IMMULITE 2000 Systems Analyzers for the quantitative measurement of creatine kinase isoenzyme MB (CK-MB) in heparinized plasma or serum, as an aid in patient management and the assessment of prognosis of myocardial infarction. Catalog Number: L2KMB2 (200 tests) Test Code: CMB Color: Dark Blue Summary and Explanation Creatine kinase (CK) is an enzyme, found primarily in muscle and brain tissue, which exists as three dimeric isoenzymes CK-MM (CK-3), CK-MB (CK-2), and CK-BB (CK-1) built from subunits designated M and B. The CK-MB isoenzyme, which has a molecular mass of approximately 87,000 daltons, accounts for 5 to 50% of total CK activity in myocardium. In skeletal muscle, by contrast, it normally accounts for just 1% or less, CK-MM being the dominant form, though the percentage can be as high as 10% in conditions reflecting skeletal muscle injury and regeneration (e.g., severe exercise, muscular dystrophy, polymyositis). 2 CK-MB is one of the most important myocardial markers (in spite of not being altogether cardiac-specific), with well-established roles in confirming acute myocardial infarction (AMI) and in monitoring reperfusion during thrombolytic therapy following AMI. 2 In AMI, plasma CK-MB typically rises some 3 to 8 hours after the onset of chest pains, peaks within 9 to 30 hours, and returns to baseline levels within 48 to 72 hours. 15 The pattern of serial CK-MB determinations is more informative than a single determination: one CK-MB measurement, even when taken at an appropriate time, cannot definitively confirm or rule out the occurrence of AMI. High levels might reflect skeletal injury rather than myocardial damage. A value within the reference range might be significant if it represents an increase from the patient's baseline level. (Low baseline levels are sometimes encountered in the elderly.) Accordingly, it has been recommended that CK-MB be measured on admission to the emergency room, and at intervals thereafter: for example, at 3-hour intervals over a 6- to 9-hour period in patients with nonspecific electrocardiogram changes; 2,5 or at 6- to 8-hour intervals over a 24-hour period and more frequently if thrombolytic therapy has been instituted. 2 Thrombolytic therapy, if successful, leads to an "enzyme washout" evidenced by a sharp increase in circulating CK-MB levels as early as 90 minutes after the initiation of therapy. 2 Accordingly, serial CK-MB levels have been used in this context to assess reperfusion. Principle of the Procedure IMMULITE 2000 CK-MB is a chemiluminescent enzyme-labeled immunometric assay, based on ligand-labeled anti-ck-mb monoclonal antibody and separation by anti-ligandcoated solid phase. The bound CK-MB complex and thus also the photon output, as measured by the luminometer is proportional to the concentration of CK-MB in the sample. Incubation Cycles: 1 30 minutes Specimen Collection An ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples. Hemolyzed samples may indicate mistreatment of a specimen before receipt by the laboratory; hence the results should be interpreted with caution. Icteric or grossly contaminated samples may give erroneous results. Centrifuging serum samples before a complete clot forms may result in the presence of fibrin. To prevent erroneous results due to the presence of fibrin, ensure that complete clot formation has taken place prior to centrifugation of samples. Some samples, particularly those from patients receiving anticoagulant therapy, may require increased clotting time. 2 IMMULITE 2000 CK-MB (PIEL2KMB-3 {19}, )

3 Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE 2000 CK-MB has not been tested with all possible variations of tube types. Consult the section on Alternate Sample Types for details on tubes that have been tested. Volume Required: 50 µl heparinized plasma or serum Storage: 24 hours at 2 8 C, or 30 days at 20 C. Warnings and Precautions For in vitro diagnostic use. CAUTION! POTENTIAL BIOHAZARD Contains human source material. Each donation of human blood or blood component was tested by FDA-approved methods for the presence of antibodies to human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) and type 2 (HIV-2) as well as for hepatitis B surface antigen (HBsAg) and antibody to hepatitis C virus (HCV). The test results were negative (not repeatedly reactive). No test offers complete assurance that these or other infectious agents are absent; this material should be handled using good laboratory practices and universal precautions CAUTION: This device contains material of animal origin and should be handled as a potential carrier and transmitter of disease. H412 P273, P501 Harmful to aquatic life with long lasting effects. Avoid release to the environment. Dispose of contents and container in accordance with all local, regional, and national regulations. Contains: sodium azide; CK-MB Adjustors Reagents: Store at 2 8 C. Dispose of in accordance with applicable laws. Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C. Sodium azide, at concentrations less than 0.1 g/dl, has been added as a preservative. On disposal, flush with large volumes of water to prevent the buildup of potentially explosive metal azides in lead and copper plumbing. Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert.) Water: Use distilled or deionized water. Materials Supplied Components are a matched set. Labels on the inside box are needed for the assay. Note that the antibodies to CK-MB used in the procedure are licensed from Washington University. CK-MB Bead Pack (L2MB12) With barcode. 200 beads, coated with anti-ligand. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KMB2: 1 pack CK-MB Reagent Wedge (L2MBA2) With barcode ml ligand-labeled anti-ck-mb murine monoclonal antibody and alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to murine monoclonal anti-ck-bb antibody in buffer. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KMB2: 1 wedge Before use, tear off the top of the label at the perforations, without damaging the barcode. Remove the foil seal from the top of wedge; snap the sliding cover down into the ramps on the reagent lid. CK-MB Adjustors (LMBL, LMBH) Two vials (Low and High) of lyophilized CK-MB in a nonhuman serum matrix, with preservative. At least 30 minutes before use, reconstitute each vial by adding 4.0 ml distilled or deionized water. Mix by gentle swirling or inversion. Aliquot and freeze after reconstitution: stable for 2 months (aliquotted) at 20 C. L2KMB2: 1 set IMMULITE 2000 CK-MB (PIEL2KMB-3 {19}, ) 3

4 Before making an adjustment, place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes so that the barcodes can be read by the on-board reader. Kit Components Supplied Separately Multi-Diluent 2 (L2M2Z, L2M2Z4) For the on-board dilution of patient samples. One vial of concentrated (ready-to-use), nonhuman protein/buffer matrix, with preservative. Stable at 2 8 C for 30 days after opening, or for 6 months (aliquotted) at 20 C. L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml Barcode labels are provided for use with the diluent. Before use, place an appropriate label on a mm test tube, so that the barcodes can be read by the on-board reader. L2M2Z: 3 labels L2M2Z4: 5 labels L2SUBM: Chemiluminescent Substrate L2PWSM: Probe Wash L2KPM: Probe Cleaning Kit LRXT: Reaction Tubes (disposable) L2ZT: 250 Sample Diluent Test Tubes ( mm) L2ZC: 250 Sample Diluent Tube Caps Also Required Distilled or deionized water; test tubes; controls. Assay Procedure Note that for optimal performance, it is important to perform all routine maintenance procedures as defined in the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual. See the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual for preparation, setup, dilutions, adjustment, assay and quality control procedures. Recommended Adjustment Interval: 2 weeks Quality Control Samples: Follow government regulations or accreditation requirements for quality control frequency. Use controls or sample pools with at least two levels (low and high) of CK-MB. Siemens Healthcare Diagnostics recommends the use of commercially available quality control materials with at least 2 levels (low and high). A satisfactory level of performance is achieved when the analyte values obtained are within the Acceptable Control Range for the system, or within an established range determined by an appropriate internal laboratory quality control scheme. Expected Values A reference range study was conducted on samples from 210 apparently healthy normal males and 210 apparently healthy normal females. The samples are of US origin collected at an FDA approved donor center. The samples yielded the following medians, 97.5th percentile, and upper 99th percentile values: Samples from apparently healthy normal males Median: 1.76 ng/ml 97.5 Percentile: 6.74 ng/ml 99th Percentile: 7.29 ng/ml Samples from apparently healthy normal females Median: 0.69 ng/ml 97.5 Percentile: 4.02 ng/ml 99th Percentile: 5.43 ng/ml A secondary study was performed on samples from 150 hospitalized males and 150 hospitalized females. These samples are of US origin drawn from individuals with confirmation of non-cardiac status, and no history of diabetes, renal disease, thyroid disease, or chronic skeletal muscular disease. Samples were obtained by reviewing charts and laboratory records for each patient and were de-identified and de-linked at point of collection. Samples from hospitalized males Median: 2.63 ng/ml 97.5 Percentile: 8.62 ng/ml 99th Percentile: 9.04 ng/ml Samples from hospitalized females Median: 1.04 ng/ml 97.5 Percentile: 7.01 ng/ml 99th Percentile: 8.38 ng/ml As with all in vitro diagnostic assays, each laboratory should determine its own reference ranges for the diagnostic evaluation of patient results. Consider these ranges as guidelines only. 4 IMMULITE 2000 CK-MB (PIEL2KMB-3 {19}, )

5 Limitation Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: ] Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings. Performance Data See Tables and Graphs for data representative of the assay's performance. Results are expressed in ng/ml. (Unless otherwise noted, all were generated on samples collected in heparinized tubes.) Conversion Factor: ng/ml 1 µg/l Calibration Range: Up to 500 ng/ml The assay is traceable to an internal standard manufactured using qualified materials and measurement procedures. Analytical Sensitivity: 0.6 ng/ml High-dose Hook Effect: None up to 200,000 ng/ml Precision: Samples were repeatedly assayed in duplicate over the course of several days, for a total of 40 runs and 80 replicates. (See "Precision" table.) Linearity: Samples were assayed under various dilutions. (See "Linearity" table for representative data.) Recovery: Samples spiked 1 to 19 with three CK-MB solutions (500, 2000, and 7000 ng/ml) were assayed. (See "Recovery" table for representative data.) Specificity: The antibody is highly specific for CK-MB, with particularly low crossreactivity to other naturally occurring forms of creatine kinase isoenzymes. (See "Specificity" table.) Bilirubin: May cause a decrease in values. (See "Bilirubin" table.) Hemolysis: Presence of hemoglobin in concentrations up to 512 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Lipemia: Presence of triglycerides in concentrations up to 3000 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Alternate Sample Type: To determine whether serum can be used in the IMMULITE 2000 CK-MB procedure, blood was collected from 36 laboratory volunteers into heparinized and plain vacutainer tubes. All samples were spiked with CK-MB and assayed by the IMMULITE 2000 CK-MB procedure, with the following results. (Serum) = 0.96 (Heparin) ng/ml r = Means: 122 ng/ml (Heparin) 120 ng/ml (Serum) A separate study on 44 endogenous samples from healthy volunteers was also conducted. (Serum) = 1.02 (Heparin) ng/ml r = Means: 1.44 ng/ml (Heparin) 1.49 ng/ml (Serum) Method Comparison 1: The assay was compared to IMMULITE CK-MB (LKMB) on 190 samples. (Concentration range: up to approximately 500 ng/ml. See graph 1.) By linear regression: (IML 2000) = 1.04 (LKMB) 0.82 ng/ml r = Means: 39.5 ng/ml (IMMULITE 2000) 38.7 ng/ml (IMMULITE LKMB) Method Comparison 2: One hundred twenty-five of these samples, with values less than 10 ng/ml, were analyzed by linear regression separately. (See graph 2.) (IML 2000) = 0.88 (LKMB) ng/ml r = Means: 3.12 ng/ml (IMMULITE 2000) 3.53 ng/ml (IMMULITE LKMB) IMMULITE 2000 CK-MB (PIEL2KMB-3 {19}, ) 5

6 References 1) Adams JE, Schechtman KB, Landt Y, et al. Comparable detection of acute myocardial infarction by creatine kinase MB isoenzyme and cardiac troponin I. Clin Chem 1994;40: ) Apple FS, Preese LM. Creatine kinase-mb: detection of myocardial infarction and monitoring reperfusion. J Clin Immunoassay 1994;17: ) Bhayana V, Cohoe S, Leung FY, et al. Diagnostic evaluation of creatine kinase-2 mass and creatine kinase-3 and -2 isoform ratios in early diagnosis of acute myocardial infarction. Clin Chem 1993;39: ) Bruns DE. Diagnosis of acute myocardial infarction when skeletal muscle damage is present: a caveat regarding use of creatine kinase isoenzymes. Clin Chem 1989;35:705. 5) Gibler WB, Lewis LM, Erb RE, et al. Early detection of acute myocardial infarction in patients presenting with chest pain and nondiagnostic ECGs; serial CK-MB sampling in the emergency department. Ann Emerg Med 1990;19: ) Henderson AR, Stark JA, McQueen MJ, et al. Is determination of creatine kinase-2 after electrophoretic separation accurate? Clin Chem 1994;40: ) Kallner A, Sylven C, Brodin U, et al. Early diagnosis of acute myocardial infarction; a comparison between chemical predictors. Scand J Clin Lab Invest 1989;49: ) Kiyasu Y. John. Current status of detecting CK-MB for patient management. Am Clin Prod Rev 1985;4: ) Lang H, Wuerzburg U. Creatine kinase, an enzyme of many forms. Clin Chem 1982;28: ) Lee KN, Csako G, Bernhardt P, Elin RJ. Relevance of macro creatine kinase type 1 and type 2 isoenzymes to laboratory and clinical data. Clin Chem 1994;40; ) Lee TH, Rouan GW, Weisberg MC, et al. Sensitivity of routine clinical criteria for diagnosing myocardial infarction within 24 hours of hospitalization. Ann Intern Med 1987;106: ) Panteghini M. Creatine kinase MB isoforms. J Clin Immunoassay 1994;17: ) Thompson WG, Mahr RG, Yohannan WS, Pincus MR. Use of creatine kinase MB isoenzyme for diagnosing myocardial infarction when total creatine kinase activity is high. Clin Chem 1988;34: ) Vaidya HC. Creatine kinase-mb. Clin Chem News 1988;14: ) Wong SS. Strategic utilization of cardiac markers for the diagnosis of acute myocardial infarction. Ann Clin Lab Sci 1996;26: ) Centers for Disease Control. Update: Universal precautions for prevention of transmission of human immunodeficiency virus, hepatitis B virus and other bloodborne pathogens in healthcare settings. MMWR, 1988;37:377 82, ) Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). Protection of Laboratory Workers From Occupationally Acquired Infections; Approved Guideline - Third Edition. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; NCCLS Document M29-A3. 18) Federal Occupational Safety and Health Administration, Bloodborne Pathogens Standard, 29 CFR Technical Assistance For technical assistance, contact your National Distributor. The Quality System of Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. is certified to ISO 13485:2003. Tables and Graphs Precision (ng/ml) Within-Run 1 Total 2 Mean 3 SD 4 CV 5 SD CV % % % % % % % % % % Česky. 1 V rámci stanovení, 2 Celkem, 3 Střední hodnota, 4 Směrodatná odchylka, 5 Variační koeficient. Ελληνικά. 1 Κατά την ίδια περίοδο, 2 Συνολικά, 3 Μέσος όρος, 4 SD, 5 CV. Polski. 1 W serii, 2 Całość, 3 Średnie, 4 SD, 5 CV. 6 IMMULITE 2000 CK-MB (PIEL2KMB-3 {19}, )

7 Linearity (ng/ml) Dilution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E in in % 2 in % 1 in % 2 8 in in % 2 in % 1 in % 3 8 in in % 2 in % 1 in % 4 8 in in % 2 in % 1 in % Česky. 1 Ředění, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 % Naměřená / Očekávaná, 5 8 v 8. Ελληνικά. 1 Αραίωση, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E, 5 8 στα 8. Polski. 1 Rozcieńczenie, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O, 5 8 w 8. Recovery (ng/ml) Solution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E A % B % C % 2 18 A % B % C % 3 54 A % B % C % 4 71 A % B % C % A % B % C % Česky. 1 Roztok, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 Naměřená / Očekávaná. Ελληνικά. 1 ιάλυμα, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E. Polski. 1 Roztwór, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O. Specificity Compound 1 Amount % Cross Added 2 reactivity 3 (ng/ml) CK-MM 5000 ND CK-MM 100, % CK-BB 2500 ND CK-BB 5000 ND ND: Not detectable 4 Česky. 1 Sloučenina, 2 Přidané množství, 3 % Zkřížená reaktivita, 4 ND: nezjistitelné. Ελληνικά. 1 Μείγμα, 2 Προστέθηκαν, 3 % ιασταυρ.αντίδραση, 4 ND: Μη ανιχνεύσιμη ποσότητα. Polski. 1 Składnik, 2 Ilość dodana, 3 % reaktywności Krzyżowej, 4 Nieoznaczlne. IMMULITE 2000 CK-MB (PIEL2KMB-3 {19}, ) 7

8 Effect of Bilirubin (ng/ml) Conjugated 1 Unconjugated 2 Unspiked mg/l 200 mg/l 100 mg/l 200 mg/l Česky. 1 Konjugovaný, 2 Nekonjugovaný, 3 Bez přídavku. Ελληνικά. 1 εσμευμένη (άμεση), 2 Αδέσμευτη (έμμεση), 3 Χωρίς εμπλουτισμό. Polski. 1 Związana, 2 Niezwiązana, 3 Wyjściowa. Method Comparison 1 (IML 2000) = 1.04 (LKMB) 0.82 ng/ml r = Method Comparison 2 (IML 2000) = 0.88 (LKMB) ng/ml r = English. CK-MB Česky. CK-MB. Ελληνικά. CK-MB. Polski. CK-MB. Česky IMMULITE 2000 CK-MB Použití : Pro in vitro diagnostické použití na analyzátorech IMMULITE 2000 ke stanovení koncentrace izoenzymu kreatin kináza MB (CK-MB) v heparinizované plazmě nebo séru, jakožto pomůcky při péči o pacienta a určení prognózy infarktu myokardu. Katalogové číslo : L2KMB2 (200 stanovení) Kód metody : CMB Barva : Tmavě modrá Shrnutí a vysvětlení Kreatin kináza (CK) je enzym, který se vyskytuje především ve svalové a mozkové tkáni ve formě tří dimerických izoenzymů CK-MM (CK-3), CK-MB (CK-2) a CK-BB (CK-1) sestávajících z podjednotek nazvaných M a B. Izoenzym CK-MB s molekulovou hmotností přibližně daltonů tvoří 5 až 50% celkové CK aktivity v srdečním svalu. Naproti tomu v kosterních svalech normálně představuje pouze 1% i méně a dominantním formou je zde izoenzym CK-MM. Při stavech vyvolaných poraněním kosterních svalů a při jejich regeneraci (např. namáhavé cvičení, svalová dystrofie, polymyozitida) stoupá podíl CK-MB až na 10%. 2 CK-MB je jedním z nejdůležitějších markerů myokardu (i když není zcela specifický pro myokard), hraje důležitou roli při potvrzení akutního infarktu myokardu (AMI) a při monitorování reperfuze během trombolytické léčby AMI. 2 Při AMI se hladina CK-MB v plazmě typicky zvyšuje asi 3 až 8 hodin po nástupu bolesti na prsou, vrcholí během 9 až 30 hodiny a na výchozí hodnotu se vrací do 48 až 72 hodin. 15 Stanovení CK-MB v několika sériových testech poskytuje více informací než jediné měření : jedno vyšetření CK-MB, i když udělané ve správný čas, nemůže definitivně potvrdit nebo vyloučit existenci AMI. Vysoké hodnoty CK-MB můžou svědčit spíše o skeletálním poranění než o poškození srdečního svalu. Hodnota koncentrace spadající do referenčního rozmezí může být významná, pokud se 8 IMMULITE 2000 CK-MB (PIEL2KMB-3 {19}, )

9 jedná o zvýšení oproti výchozí hladině pacienta. (Nízká počáteční koncentrace CK-MB se někdy vyskytuje u lidí pokročilého věku.) V souladu s tím se doporučuje měření CK-MB při příjmu na pohotovosti a pak ještě několikrát: například v 3-hodinových intervalech v průběhu 6 až 9 hodin u pacientů s nespecifickým ECG změnami, 2,5 nebo v 6 až 8-hodinových intervalech během 24 hodin a častěji při nařízení trombolytické léčby. 2 V případě úspěšnosti trombolytické léčby dochází k "vyplavení enzymu", o čemž svědčí prudký nárůst hladiny CK-MB v cirkulaci už 90 minut po započetí léčby. 2 Proto se při určení reperfuze v tomto kontextu používají sériově stanovené koncentrace CK-MB. Princip stanoveni Stanovení na analyzátoru je IMMULITE 2000 CK-MB enzymem značená chemiluminiscenční imunochemická reakce založená na ligandem značené monoklonální protilátce proti CK-MB a separaci pomocí pevné fáze potažené antiligandem. Množství navázaného komplexu CK-MB a tedy i intenzita záření měřená luminometrem je přímo úměrná koncentraci CK-MB ve vzorku. Inkubační cykly : 1 30 minut Odebírání vzorků K úpravě lipemických vzorků použijte ultracentrifugu. Hemolyzované vzorky můžou být známkou nesprávného zacházení s preparátem ještě před přijetím do laboratoře; proto by výsledky měly být interpretovány s obezřetností. Žloutenkové nebo značně kontaminované vzorky můžou dávat chybné výsledky. Centrifugace vzorků séra ještě před úplným vysrážením může mít za následek přítomnost fibrinu. Chybným výsledkům způsobeným přítomností fibrinu lze zamezit úplným vysrážením vzorků před jejich centrifugací. Některé vzorky, zejména od pacientů podstupujících antikoagulační léčbu, může srážlivost vyžadovat více času. Použití zkumavek pro odběr krve od různých výrobců může přinášet rozličné hodnoty v závislosti na materiálech a přísadách včetně gelových nebo fyzických bariér, aktivátorů sraženin a/nebo antikoagulačních činidel. Stanovení CK-MB na přístroji IMMULITE 2000 nebylo testováno se všemi možnými varianty jednotlivých typů zkumavek. Informace o testovaných zkumavkách najdete v části o alternativních typech vzorků. Potřebný objem vzorku : 50 μl heparinizované plazmy nebo séra Skladování : 24 hodin při teplotě 2 8 C, nebo 30 dní při teplotě 20 C. Upozornění a bezpečnostní opatření Pro in vitro diagnostické použití. POZOR! POTENCIÁLNÍ BIOHAZARD Obsahuje materiál lidského původu. Každé darování krve nebo jejích složek bylo testováno metodami schválenými FDA na přítomnost protilátek proti viru lidské imunodeficience typu 1 (HIV-1) a typu 2 (HIV-2) a také na povrchový antigen viru hepatitidy B (HBsAg) a protilátky proti viru hepatitidy C (HCV). Výsledky testu byly negativní (opakovaně nereaktivní). Žádný test však není absolutní zárukou nepřítomnosti uvedených nebo jiných infekčních zárodků ; s materiálem proto zacházejte podle zásad správné laboratorní praxe a dbejte obecných bezpečnostních opatření UPOZORNĚNÍ : Souprava obsahuje material živočišného původu, se kterým je třeba zacházet jako s potenciálním nosičem a přenašečem nemocí. H412 P273, P501 Škodlivý pro vodní organismy, s dlouhodobými účinky. Zabraňte uvolnění do životního prostředí. Odstraňte obsah a obal v souladu se všemi místními, regionálními a národními předpisy. Obsahuje : azid sodný ; CK-MB kalibrátory IMMULITE 2000 CK-MB (PIEL2KMB-3 {19}, ) 9

10 Reagencie : Skladujte při teplotě 2 8 C. Likvidujte v souladu s platnými předpisy. Řiďte se obecnými pravidly bezpečnosti práce a se všemi komponenty nakládejte, jako by byly potenciálně infekční. Zdrojové materiály získané z lidské krve byly testovány a shledány nereaktivní na syfilis, na protilátky proti HIV 1 a 2, na povrchový antigen hepatitidy typu B (HBsAg), a na protilátky proti hepatitidě typu C. Jako konzervační látka byl přidán azid sodný v koncentracích menších než 0,1 g/dl. Při likvidaci vypláchněte velkým množstvím vody, aby se zamezilo nahromadění potenciálně výbušných azidů kovů v olověném a měděném potrubí. Chemiluminiscenční substrát : Vyvarujte se kontaminace a nevystavujte přímému slunečnímu světlu. (Viz připojený letáček.) Voda: Použijte destilovanou nebo deionizovanou vodu. Dodaný materiál Komponenty představují ucelenou sadu. Pro stanovení jsou zapotřebí štítky s čárovým kódem na krabici. Protilátky vůči CK-MB použité u tohoto stanovení jsou licencovány z Washington University. CK-MB zásobník s kuličkami (L2MB12) Opatřeno čárovým kódem. 200 kuliček potažených antiligandem. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KMB2 : 1 balení CK-MB reagencie (L2MBA2) Opatřeno čárovým kódem. 11,5 ml ligandem značené myší monoklonální protilátky proti CK-MB a alkalické fosfatázy (z telecího střeva) konjugované s myší monoklonální protilátkou proti CK-BB, v pufru. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KMB2 : 1 nádobka Před použitím utrhněte vršek štítku v perforovaném místě, ale nepoškoďte čárový kód. Z vrchu nádobky odstraňte uzavírací fólii; posuvný uzávěr zaklapněte do ramp na víčku reagencie. CK-MB kalibrátory (LMBL, LMBH) Dvě ampulky s vysokou a nízkou koncentrací lyofilizovaného CK-MB v nehumánní sérové matrice, s konzervačním prostředkem. Alespoň 30 minut před použitím rekonstituujte každou ampulku přidáním 4,0 ml destilované nebo deionizované vody. Míchejte jemným kroužením nebo překlápěním. Po rekonstituci rozdělte na alikvotní části a zmrazte: stabilní 2 měsíce při teplotě 20 C. L2KMB2 : 1 sada Před adjustací nalepte na testovací zkumavky příslušné alikvotní štítky (dodané se soupravou) tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. Materiál dodávaný zvlášť Multidiluent 2 (L2M2Z, L2M2Z4) Pro automatické ředění vzorků analyzátorem. Jedna ampulka koncentrované (připravené k použití), nehumánní bílkovino/pufrové matrice, s konzervačním prostředkem. Stabilní 30 dní po otevření při teplotě 2 8 C nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při 20 C. L2M2Z : 25 ml L2M2Z4 : 55 ml Štítky s čárovými kódy jsou určeny pro diluent. Před použitím nalepte příslušný štítek na testovací zkumavku mm tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. L2M2Z : 3 štítky L2M2Z4 : 5 štítků L2SUBM : Chemiluminiscenční substrát L2PWSM : Promývací roztok L2KPM : Čistící roztok na jehly LRXT : Reakční zkumavky (na jedno použití) L2ZT : 250 testovacích zkumavek na diluent vzorků ( mm) L2ZC : 250 uzávěrů na testovací zkumavky na diluent vzorků Dále potřebujete Destilovanou nebo deionizovanou vodu; testovací zkumavky, kontroly Postup stanovení K dosažení optimálního výkonu je důležité provádět veškerou pravidelnou údržbu stanovenou v manuálu k analyzátorům IMMULITE IMMULITE 2000 CK-MB (PIEL2KMB-3 {19}, )

11 V manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000 najdete postupy přípravy, nastavení, ředění, adjustace, stanovení vzorků a kontrol. Doporučený interval mezi adjustacemi : 2 týdny Vzorky ke kontrole kvality : Pokud jde o četnost kontroly kvality, je třeba řídit se platnými předpisy a akreditačními požadavky. Použijte kontroly nebo směsné vzorky s alespoň dvěmi koncentracemi (vysokou a nízkou) CK-MB. Společnost Siemens Healthcare Diagnostics doporučuje používat obchodně dostupné materiály kontroly kvality o přinejmenším dvou koncentracích vysoké a nízké. Vyhovující funkčnosti se dosahuje, pokud zjištěné hodnoty analytu leží uvnitř přijatelného kontrolního rozmezí analyzátoru nebo uvnitř rozmezí stanoveného příslušným interním systémem kontroly kvality dané laboratoře. Očekávané hodnoty Studie referenčního rozsahu byla provedena na vzorcích od 210 zjevně zdravých normálních mužů a 210 zjevně zdravých normálních žen. Vzorky pocházejí z USA a byly odebrány dárcovském středisku schváleném úřadem FDA. Vzorky vykazovaly následující hodnoty mediánů, 97,5. percentilu a horní hodnota 99. percentilu : Vzorky od zjevně zdravých normálních mužů Medián : 1,76 ng/ml 97,5. Percentile : 6,74 ng/ml 99. percentil : 7,29 ng/ml Vzorky od zjevně zdravých normálních žen Medián : 0,69 ng/ml 97,5. Percentile : 4,02 ng/ml 99. percentil : 5,43 ng/ml Sekundární studie byla provedena na vzorcích od 150 hospitalizovaných mužů a 150 hospitalizovaných žen. Tyto vzorky pocházejí z USA a byly odebrány od jednotlivých osob, u kterých bylo potvrzeno, že nemají žádné srdeční onemocnění ani žádnou historii diabetu, onemocnění ledvin, štítné žlázy nebo chronické muskuloskeletální onemocnění. Vzorky byly získány kontrolou dat a laboratorních záznamů u každého pacienta, byly deidentifikovány a odosobněny v místě odběru. Vzorky od hospitalizovaných mužů Medián : 2,63 ng/ml 97,5. Percentile : 8,62 ng/ml 99. percentil : 9,04 ng/ml Vzorky od hospitalizovaných žen Medián : 1,04 ng/ml 97,5. Percentile : 7,01 ng/ml 99. percentil : 8,38 ng/ml Jako u všech diagnostických testů in vitro je třeba, aby si každá laboratoř stanovila pro diagnostické hodnocení vzorků pacientů své vlastní referenční rozsahy. Uvedené hranice považujte pouze za orientační. Omezení Heterofilní protilátky v lidském séru můžou reagovat s imunoglobuliny obsaženými v komponentech soupravy a způsobit interference s in vitro imunologickým stanovením. [Viz Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all imunologickým stanovením. Clin Chem 1988:34:27-33.] Vzorky pacientů rutinně vystavené kontaktu se zvířaty nebo produkty zvířecího séra můžou vykázat tento typ interference a potenciálně způsobit anomální výsledky. Tyto reagencie byly vyvinuty tak, aby bylo riziko interference minimalizováno; nicméně případné interakce mezi ojedinělými séry a komponenty testu se můžou vyskytnout. Pro diagnostické účely by se výsledky tohoto stanovení měly vždy používat v kombinaci s klinickými zkouškami, zdravotní historií pacienta a ostatními nálezy. Znaky metody Reprezentativní výsledky stanovení najdete v části Tabulky a grafy. Výsledky se udávají v ng/ml. (Pokud není uvedeno jinak, byly všechny výsledky získané prostřednictvím vzorků odebraných do heparinizovaných zkumavek.) Konverzní faktor : ng/ml 1 µg/l IMMULITE 2000 CK-MB (PIEL2KMB-3 {19}, ) 11

12 Kalibrační rozsah : Do 500 ng/ml Souprava má návaznost na mezinárodní standard vyrobený s použitím schválených materiálů a měřících procesů. Analytická citlivost : 0,6 ng/ml High-dose Hook Effect : Do ng/ml žádný Přesnost : Vzorky byly stanovovány dvojmo v průběhu několika dní, dva testy denně, celkem 40 testů a 80 replikátů. (Viz tabulka Přesnost.) Linearita : Stanovení vzorků bylo provedeno při rozličném ředění. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce Linearita.) Zpětná výtěžnost : Bylo provedeno stanovení vzorků séra s přídavkem tří roztoků CK-MB (500, 2000 a 7000 ng/ml) v poměru 1:19. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce Zpětná výtěžnost.) Specificita : Protilátka je silně specifická vůči CK-MB s mimořádně nízkou zkříženou reaktivitou s ostatním formami přirozeně se vyskytujících izoenzymů keratin kinázy. (Viz tabulka Specificita.) Bilirubin : Může způsobit pokles hodnot. (Viz tabulka Bilirubin.) Hemolýza : Přítomnost hemoglobinu v koncentracích do 512 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Lipémie : Přítomnost triglyceridů v koncentracích do 3000 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Alternativní typ vzorku : Ke zjištění zda u stanovení CK-MB na analyzátorech IMMULITE 2000 může být použité sérum, byly odebrány vzorky krve od 36 dobrovolníků do heparinizovaných a obyčejných vacutainer zkumavek. Do všech vzorků byl přidán CK-MB a následně byly vzorky vyšetřeny výšeuvedenou metodou IMMULITE 2000 CK-MB. Výsledky jsou následující : (Sérum) = 0,96 (Heparin) + 2,9 ng/ml r = 0,993 Střední hodnoty : 122 ng/ml (Heparin) 120 ng/ml (Sérum) Pomocí 44 endogenních vzorcích od zdravých dobrovolníků byl proveden jiný samostatný výzkum. (Sérum) = 1,02 (Heparin) + 0,03 ng/ml r = 0,995 Střední hodnoty : 1,44 ng/ml (Heparin) 1,49 ng/ml (Sérum) Srovnání metody 1 : Stanovení bylo porovnáno s testem CK-MB (LKMB) na analyzátoru IMMULITE na 190 vzorcích. (Koncentrační rozsah: přibližně do 500 ng/ml. Viz graf 1.) Podle lineární regrese : (IML 2000) = 1,04 (LKMB) 0,82 ng/ml r = 0,998 Střední hodnoty : 39,5 ng/ml (IMMULITE 2000) 38,7 ng/ml (IMMULITE LKMB) Srovnání metody 2 : Pomocí lineární regrese jsme analyzovali 125 z těchto vzorků, které měly hodnotu koncentrace CK-MB pod 10 ng/ml. (Viz graf 2.) (IML 2000) = 0,88 (LKMB) + 0,009 ng/ml r = 0,961 Střední hodnoty : 3,12 ng/ml (IMMULITE 2000) 3,53 ng/ml (IMMULITE LKMB) Technická Podpora Pro technickou podporu kontaktujte vašeho národního distributora. Systém kontroly jakosti společnosti Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. je certifikovaný podle ISO 13485:2003. Ελληνικά IMMULITE 2000 CK-MB Ενδεδειγμένη χρήση: Για in vitro διαγνωστική χρήση με τα συστήματα αναλυτών IMMULITE 2000 για τον ποσοτικό προσδιορισμό του ισοενζύμου ΜΒ της κρεατινινικής κινάσης (CK-MB) στο ηπαρινισμένο πλάσμα ή τον ορό, ως βοήθημα στην αντιμετώπιση ασθενών και την πρόγνωση του εμφράγματος του μυοκαρδίου. Αριθμός καταλόγου: L2KMB2 (200 εξετάσεις) Κωδικός εξέτασης: CMB Χρώμα: Σκούρο μπλε 12 IMMULITE 2000 CK-MB (PIEL2KMB-3 {19}, )

13 Περίληψη και επεξήγηση Η κρεατινική κινάση (CK) είναι ένα ένζυμο που συναντάται κυρίως στους μυϊκούς και εγκεφαλικούς ιστούς με τη μορφή τριών διμερών ισοενζύμων των CK-MM (CK-3), CK-MB (CK-2) και CK-BB (CK-1) τα οποία συντίθενται από τις υπομονάδες M και B. Το ισοένζυμο CK-MB, το οποίο έχει μοριακή μάζα περίπου dalton, ευθύνεται για το 5 έως 50% της συνολικής δραστηριότητας της CK στο μυοκάρδιο. Αντίθετα, στους σκελετικούς μύες, ευθύνεται συνήθως για έως 1% της δραστηριότητας, ενώ το CK-MM είναι η κυρίαρχη μορφή, αν και το ποσοστό του δεν υπερβαίνει το 10% σε νόσους που παραπέμπουν σε τραυματισμό και ανάπλαση των σκελετικών μυών (π.χ. έντονη άσκηση, μυική δυστροφία, πολυμυοσίτιδα). 2 Το CK-MB είναι ένας από τους σημαντικότερους μυοκαρδιακούς δείκτες (παρά το ότι δεν συναντάται αποκλειστικά στην καρδιά) με αξιόπιστο ρόλο στην επιβεβαίωση του οξέος εμφράγματος του μυοκαρδίου (ΟΕΜ) και την παρακολούθηση της επαναιμάτωσης κατά τη θρομβολυτική θεραπεία μετά το ΟΕΜ. 2 Στο ΟΕΜ, οι τιμές του CK-MB αυξάνονται κατά κανόνα 3 έως 8 ώρες μετά την εμφάνιση του οπισθοστερνικού πόνου, κορυφώνονται εντός 9 έως 30 ωρών και επιστρέφουν στην τιμή βάσης εντός 48 έως 72 ωρών. 15 Η παρακολούθηση της εξέλιξης των τιμών CK-MB με διαδοχικές μετρήσεις παρέχει περισσότερες πληροφορίες από μια μεμονωμένη μέτρηση: μία μόνον μέτρηση του CK-MB, ακόμη και κατά τον κατάλληλο χρόνο, δεν μπορεί να επιβεβαιώσει ή να αποκλείσει με ασφάλεια την παρουσία ΟΕΜ. Τα υψηλά επίπεδα είναι δυνατό να παραπέμπουν σε σκελετικούς τραυματισμούς και όχι σε βλάβη του μυοκαρδίου. Μια τιμή εντός του εύρους αναφοράς ενδέχεται να είναι σημαντική, εάν είναι αυξημένη σε σύγκριση με τα επίπεδα βάσης του ασθενούς. (Ορισμένες φορές τα βασικά επίπεδα είναι χαμηλά στους ηλικιωμένους). Συνεπώς, συνιστάται η μέτρηση του CK-MB κατά την εισαγωγή στη μονάδα επειγόντων και στη συνέχεια περιοδικά: για παράδειγμα, ανά 3 ώρες για διάστημα 6 έως 9 ωρών σε ασθενείς με μη ειδικές μεταβολές του ηλεκτροκαρδιογραφήματος 2,5 ή ανά 6 έως 8 ώρες για διάστημα 24 ωρών ή συχνότερα κατά την εφαρμογή θρομβολυτικής θεραπείας. 2 Η επιτυχημένη θρομβολυτική θεραπεία προκαλεί φαινόμενα ενζυματικής εξόξυνσης με έντονη αύξηση των επιπέδων κυκλοφορούντος CK-MB 90 λεπτά μετά την έναρξη της θεραπείας. 2 Συνεπώς, τα επίπεδα CK-MB σε διαδοχικές μετρήσεις έχουν χρησιμοποιηθεί στο πλαίσιο αυτό για την αξιολόγηση της επαναιμάτωσης. Αρχή της διαδικασίας Η IMMULITE 2000 CK-MB είναι μια χημειοφωταυγής ενζυμική, ανοσομετρική ανάλυση με βάση μονοκλωνικό αντίσωμα αντί-ck-mb με σήμανση ligand και διαχωρισμό ξηρής φάσης με επικάλυψη anti-ligand. Το δεσμευμένο σύμπλεγμα CK-MB και συνεπώς η παραγωγή φωτονίων, όπως μετρώνται με το μετρητή φωταύγειας είναι ανάλογο με τη συγκέντρωση CK-MB στο δείγμα. Κύκλοι επώασης: 1 30 λεπτά Συλλογή δειγμάτων Συνιστάται η χρήση της υπερφυγοκέντρου για να καθαριστούν τα λιπιδαιμικά δείγματα. Τα αιμολυμένα δείγματα μπορεί να υποδηλώνουν κακή μεταχείριση του δείγματος πριν την παραλαβή του από το εργαστήριο και τα αποτελέσματα πρέπει να ερμηνεύονται με προσοχή. Έντονα μολυσμένα και έχοντα ίκτερο δείγματα μπορεί να δώσουν λανθασμένα αποτελέσματα. Η φυγοκέντριση των δειγμάτων ορού πριν την πλήρη πήξη μπορεί να έχει ως αποτέλεσμα τη δημιουργία θρόμβων. Για να αποφευχθούν λανθασμένα αποτελέσματα εξαιτίας της παρουσίας θρόμβων, βεβαιωθείτε ότι πριν τη φυγοκέντριση, το αίμα έχει πήξει πλήρως. Κάποια δείγματα, ιδιαιτέρως αυτά των ασθενών που λαμβάνουν αντιπηκτική θεραπεία, ίσως χρειάζονται μεγαλύτερο χρόνο πήξης. Οι σωλήνες συγκέντρωσης αίματος διαφορετικών εταιρειών μπορεί να δώσουν αποκλίνουσες τιμές, ανάλογα με τα υλικά και τα συμπληρώματα, συμπεριλαμβανομένων των με τζελ ή φυσικών σωληναρίων, των IMMULITE 2000 CK-MB (PIEL2KMB-3 {19}, ) 13

14 ενεργοποιητών πήξεως και/ή των αντιπηκτικών. Η IMMULITE 2000 CK-MB δεν έχει δοκιμαστεί με όλους τους τύπους σωληναρίων. Συμβουλευθείτε την παράγραφο για τους εναλλακτικούς τύπους δειγμάτων για περισσότερες πληροφορίες σχετικά με τα σωληνάρια που έχουν δοκιμαστεί. Απαιτούμενος όγκος: 50 µl ηπαρινισμένου πλάσματος ή ορού Φύλαξη: 24 ώρες στους 2 8 C ή 30 ημέρες στους 20 C. Προειδοποιήσεις και προφυλάξεις Για in vitro διαγνωστική χρήση. ΠΡΟΣΟΧΗ! ΥΝΗΤΙΚΟΣ ΒΙΟΛΟΓΙΚΟΣ ΚΙΝ ΥΝΟΣ Περιέχει υλικό ανθρώπινης προέλευσης. Κάθε δωρεά ανθρώπινου αίματος ή συστατικού αίματος ελέγχθηκε με μεθόδους εγκεκριμένες από τον FDA για την ύπαρξη αντισωμάτων ενάντια στους ιούς της ανοσοανεπάρκειας του ανθρώπου τύπου 1 (HIV-1) και τύπου 2 (HIV-2), καθώς και για επιφανειακό αντιγόνο της ηπατίτιδας Β (HBsAg) και για αντισώματα ενάντια στον ιό της ηπατίτιδας C (HCV). Τα αποτελέσματα των εξετάσεων ήταν αρνητικά (όχι επανειλημμένα αντιδραστικά). Επειδή καμία εξέταση δεν παρέχει πλήρη διασφάλιση για την απουσία αυτών ή άλλων μολυσματικών παραγόντων, ο χειρισμός αυτού του υλικού θα πρέπει να γίνεται σύμφωνα με τις ορθές εργαστηριακές πρακτικές και γενικές προφυλάξεις ΠΡΟΣΟΧΗ: Η συσκευή αυτή περιέχει υλικό ζωικής προέλευσης και ο χειρισμός της πρέπει να γίνεται ως εάν επρόκειτο περί δυνητικού φορέα και παράγοντα μετάδοσης νόσου. H412 P273, P501 Επιβλαβές για τους υδρόβιους οργανισμούς, με μακροχρόνιες επιπτώσεις. Να αποφεύγεται η ελευθέρωση στο περιβάλλον. Απορρίψτε το περιεχόμενο και τον περιέκτη σε συμμόρφωση με όλους τους τοπικούς, περιφερειακούς και εθνικούς κανονισμούς. Περιέχει: αζίδιο νατρίου, Ρυθμιστές CK-MB Αντιδραστήρια: ιατήρηση στους 2 8 C. Απόρριψη σύμφωνα με την ισχύουσα νομοθεσία. Ακολουθήστε τις γενικές προφυλάξεις και χειριστείτε όλα τα συστατικά σαν να ήταν φορείς μολυσματικών παραγόντων. Όλα τα υλικά της μεθόδου που προέρχονται από ανθρώπινο αίμα έχουν ελεγχθεί και βρέθηκαν αρνητικά για σύφιλη, για αντισώματα στον HIV 1 και 2, για επιφανειακά αντιγόνα της ηπατίτιδας Β και για αντισώματα της ηπατίτιδας C. Αζίδιο του νατρίου σε συγκεντρώσεις μικρότερες από 0,1 g/dl έχει προστεθεί ως συντηρητικό. Κατά την απόρριψη, ξεπλύνετε με άφθονο νερό για την αποφυγή σχηματισμού πιθανών εκρηξιογόνων μεταλλικών αζιδίων στις αποχετεύσεις από μόλυβδο και χαλκό. Χημειοφωταυγές υπόστρωμα: Αποφύγετε τη μόλυνση και την έκθεση στο άμεσο ηλιακό φως. (Bλ. Ένθετο.) Νερό: Χρησιμοποιήστε απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό. Υλικά που διατίθενται Τα συστατικά αποτελούν ολοκληρωμένο σετ. Οι ετικέτες στο εσωτερικό κουτί είναι απαραίτητες για την ανάλυση. Σημειώστε ότι τα αντισώματα κατά του CK-MB που χρησιμοποιούνται στη διαδικασία είναι εγκεκριμένα από το Πανεπιστήμιο της Ουάσιγκτον. Συσκευασία σφαιριδίων CK-MB (L2MB12) Με ραβδοκώδικα. 200 σφαιρίδια, επικαλυμμένα με anti-ligand. Σταθερά στους 2 8 C έως την ημερομηνία λήξεως. L2KMB2: 1 συσκευασία οχείο αντιδραστηρίου CK-MB (L2MBA2) Με ραβδοκώδικα. 11,5 ml σημασμένου ως ligand μονοκλωνικού αντισώματος ποντικού αντί-ck-mb και αλκαλικής φωσφατάσης (από βόειο έντερο) συνδεδεμένης με μονοκλωνικό αντίσωμα ποντικού αντί-ck-bb σε ρυθμιστικό διάλυμα. Σταθερό στους 2 8 C έως την ημερομηνία λήξεως. L2KMB2: 1 δοχείο 14 IMMULITE 2000 CK-MB (PIEL2KMB-3 {19}, )

15 Πριν τη χρήση, σχίστε την πάνω ετικέτα στο σημείο διάτρησης, χωρίς να καταστρέψετε το ραβδοκώδικα. Αφαιρέστε (ξεκολλήστε) προσεκτικά το κάλυμμα από την επάνω επιφάνεια του δοχείου, και πιέστε το κάλυμμα κάτω προς τους κεκλιμένους οδηγούς-ράγες. Ρυθμιστές CK-MB (LMBL, LMBH) ύο φιαλίδια (χαμηλό και υψηλό) λυοφιλοποιημένου CK-MB σε μήτρα μη ανθρώπινου ορού, με συντηρητικό. Τουλάχιστον 30 λεπτά πριν τη χρήση, κάντε ανασύσταση του περιεχομένου κάθε φιαλιδίου με 4,0 ml απεσταγμένου ή απιονισμένου νερού. Αναμείξτε με απαλές κινήσεις ή αναστροφή. ιαχωρίστε και καταψύξτε μετά την ανασύσταση. Σταθεροί για 2 μήνες (διαχωρισμένοι) στους 20 C. L2KMB2: 1 σετ Πριν κάνετε κάποια ρύθμιση, τοποθετήστε τις κατάλληλες ετικέτες των διαλυμάτων (παρέχονται με το kit) σε δοκιμαστικούς σωλήνες, έτσι ώστε οι ραβδοκώδικες να μπορούν να διαβαστούν από σύστημα του αναλυτή Συστατικά του Kit που προμηθεύονται ξεχωριστά Πολύ-αραιωτικό 2 (L2M2Z, L2M2Z4) Για την αραίωση των δειγμάτων των ασθενών στο μηχάνημα. Ένα φιαλίδιο που περιέχει συμπυκνωμένη (έτοιμη για χρήση), μήτρα μη ανθρώπινης πρωτεΐνης/ρυθμιστικού, με συντηρητικό. Σταθερή 30 μέρες (μετά το άνοιγμα) στους 2 8 C ή 6 μήνες (διαχωρισμένα) στους 20 C. L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml Ετικέτες με ραβδοκώδικες παρέχονται για χρήση με το αραιωτικό. Πριν από τη χρήση, τοποθετείστε μια κατάλληλη ετικέτα σε ένα δοκιμαστικό σωλήνα mm, έτσι ώστε οι ραβδοκώδικες να μπορούν να διαβαστούν από το σύστημα του αναλυτή. L2M2Z: 3 ετικέτες L2M2Z4: 5 ετικέτες L2SUBM: Χημειοφωταυγές υπόστρωμα L2PWSM: Πλυστικό του ανιχνευτή L2KPM: Kit καθαρισμού του ανιχνευτή LRXT: Σωλήνες αντίδρασης (μιας χρήσεως) L2ZT: 250 δοκιμαστικοί σωλήνες για αραίωση του δείγματος ( mm) L2ZC: 250 καπάκια για σωλήνες αραίωσης δείγματος Απαιτούνται επίσης Απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό, δοκιμαστικοί σωλήνες, δείγματα ελέγχου ιαδικασία της ανάλυσης Σημειώστε ότι για το βέλτιστο αποτέλεσμα, είναι σημαντικό να ακολουθηθούν όλες οι τυπικές διαδικασίες όπως ορίζονται στο εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE Βλέπε το εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000 για: προετοιμασία, στήσιμο, αραιώσεις, ρυθμίσεις, ανάλυση και διαδικασίες ποιοτικού έλέγχου. Συνιστώμενος χρόνος μεταξύ των ρυθμίσεων: 2 εβδομάδες είγματα ποιοτικού ελέγχου: Εφαρμόστε τους κρατικούς κανονισμούς ή τις απαιτήσεις πιστοποίησης για τη συχνότητα του ποιοτικού ελέγχου. Χρησιμοποιείτε δείγματα ποιοτικού ελέγχου σε δύο τουλάχιστον επίπεδα (χαμηλό και υψηλό) CK-MB. Η Siemens Healthcare Diagnostics συνιστά τη χρήση εμπορικά διαθέσιμων υλικών ελέγχου ποιότητας με τουλάχιστον 2 επίπεδα (χαμηλό και υψηλό). Ένα ικανοποιητικό επίπεδο απόδοσης επιτυγχάνεται όταν οι τιμές που προκύπτουν βρίσκονται εντός του αποδεκτού εύρους των υλικών ελέγχου για τον αναλυτή ή εντός ενός καθορισμένου εύρους που καθορίστηκε με βάση ένα κατάλληλο πλαίσιο εσωτερικού εργαστηριακού ποιοτικού ελέγχου. Αναμενόμενες τιμές Μια μελέτη εύρους τιμών αναφοράς διενεργήθηκε σε δείγματα από 210 φαινομενικά υγιείς φυσιολογικούς άνδρες και 210 φαινομενικά υγιείς φυσιολογικές γυναίκες. Τα δείγματα ανήκουν σε άτομα εθνικής προέλευσης Η.Π.Α. και συλλέχθηκαν σε ένα εγκεκριμένο από τον FDA κέντρο δοτών. Από τα δείγματα προέκυψαν οι ακόλουθες διάμεσες τιμές, καθώς και οι τιμές της 97,5ης και της ανώτερης 99ης εκατοστιαίας θέσης: IMMULITE 2000 CK-MB (PIEL2KMB-3 {19}, ) 15

16 είγματα από φαινομενικά υγιείς φυσιολογικούς άνδρες ιάμεση τιμή: 1,76 ng/ml 97,5 η εκατοστιαία θέση: 6,74 ng/ml 99 η εκατοστιαία θέση: 7,29 ng/ml είγματα από φαινομενικά υγιείς φυσιολογικές γυναίκες ιάμεση τιμή: 0,69 ng/ml 97,5 η εκατοστιαία θέση: 4,02 ng/ml 99 η εκατοστιαία θέση: 5,43 ng/ml Μια δευτερογενής μελέτη διενεργήθηκε σε δείγματα από 150 νοσηλευόμενους άνδρες και 150 νοσηλευόμενες γυναίκες. Τα δείγματα αυτά ανήκουν σε άτομα εθνικής προέλευσης Η.Π.Α., για τα οποία είναι επιβεβαιωμένο ότι δεν πάσχουν από καρδιοπάθεια και ότι δεν έχουν ιστορικό διαβήτη, νεφροπάθειας, θυροειδοπάθειας ή χρόνιας μυοσκελετικής νόσου. Τα δείγματα ελήφθησαν με έλεγχο των διαγραμμάτων και των αρχείων των εργαστηριακών εξετάσεων του κάθε ασθενούς, ενώ στο σημείο της συλλογής των δειγμάτων απομακρύνθηκε από αυτά κάθε στοιχείο ταυτοποίησης ή σύνδεσής τους με τον ασθενή. είγματα από νοσηλευόμενους άνδρες ιάμεση τιμή: 2,63 ng/ml 97,5 η εκατοστιαία θέση: 8,62 ng/ml 99 η εκατοστιαία θέση: 9,04 ng/ml είγματα από νοσηλευόμενες γυναίκες ιάμεση τιμή: 1,04 ng/ml 97,5 η εκατοστιαία θέση: 7,01 ng/ml 99 η εκατοστιαία θέση: 8,38 ng/ml Όπως ισχύει για όλους τους in vitro διαγνωστικούς προσδιορισμούς, κάθε εργαστήριο θα πρέπει να καθορίσει το δικό του εύρος τιμών αναφοράς για τη διαγνωστική αξιολόγηση των αποτελεσμάτων των ασθενών. Θεωρήστε αυτά τα εύρη τιμών ως κατευθυντήριες οδηγίες μόνο. Περιορισμός Ετεροφυλικά αντισώματα στον ανθρώπινο ορό μπορεί να αντιδράσουν με τις ανοσοσφαιρίνες που περιέχονται στα συστατικά της μεθόδου προκαλώντας αλληλεπιδράσεις με in vitro ανοσοαναλύσεις. [Bλ. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: ] είγματα ασθενών που εκτίθενται συστηματικά σε ζώα ή προϊόντα ζωικού ορού μπορούν να παρουσιάσουν αυτού του τύπου την αλληλεπίδραση που προκαλεί δυνητικά ένα ανώμαλο αποτέλεσμα. Αυτά τα αντιδραστήρια έχουν μορφοποιηθεί έτσι, ώστε να ελαχιστοποιούν τον κίνδυνο της αλληλεπίδρασης. Παρόλ αυτά, μπορεί να εμφανιστούν πιθανές αλληλεπιδράσεις μεταξύ σπάνιων ορών και των συστατικών της μεθόδου. Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα που λαμβάνονται από αυτή τη μέθοδο θα πρέπει πάντα να χρησιμοποιούνται σε συνδυασμό με τις κλινικές εξετάσεις, το ιατρικό ιστορικό του ασθενούς και άλλα ευρήματα. Απόδοση Βλέπε Πίνακες και Γραφήματα για αντιπροσωπευτικά δεδομένα της εκτέλεσης της μεθόδου. Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε ng/ml. (Εκτός αν κάτι σημειώνεται διαφορετικά, όλα πραγματοποιήθηκαν σε δείγματα που συλλέχθηκαν σε ηπαρινισμένυς σωλήνες). Παράγοντας μετατροπής: ng/ml 1 µg/l Εύρος καμπύλης: Έως 500 ng/ml Η εξέταση είναι ιχνηλάσιμη σε ένα εσωτερικό πρότυπο που κατασκευάστηκε χρησιμοποιώντας κατάλληλα υλικά και μετρήσιμες διαδικασίες. Αναλυτική ευαισθησία: 0,6 ng/ml Επίδραση της υψηλής δόσης στο φαινόμενο Hook: εν εμφανίζεται μέχρι τις ng/ml Ακρίβεια: Για αρκετές ημέρες κάποια δείγματα εξετάστηκαν επανειλημμένα εις διπλούν, συνολικά 40 φορές ή 80 επαναλήψεις. (Βλ. πίνακα Precision.) Γραμμικότητα: Τα δείγματα αναλύθηκαν σε διάφορες αραιώσεις. (Βλ. πίνακα "Linearity" για αντιπροσωπευτικά δεδομένα.) Ανάκτηση: Κάποια δείγματα (1 με 19) εμπλουτίστηκαν με τρία διαλύματα CK-MB (500, 2000 και 7000 ng/ml) και αναλύθηκαν. (Βλ. πίνακα "Recovery" για αντιπροσωπευτικά δεδομένα.) Ειδικότητα: Το αντίσωμα έχει υψηλή εξειδίκευση στο CK-MB και ιδιαίτερα χαμηλή διασταυρούμενη αντίδραση με άλλα φυσικά ισοένζυμα κρεατινινικής κινάσης. (Βλ. πίνακα "Specificity".) 16 IMMULITE 2000 CK-MB (PIEL2KMB-3 {19}, )

17 Χολερυθρίνη: Μπορεί να δώσει μειωμένες τιμές. (Βλ. πίνακα "Bilirubin".) Αιμόλυση: Η παρουσία αιμοσφαιρίνης σε συγκεντρώσεις έως 512 mg/dl δεν επηρεάζει τα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Λιπιδαιμία: Η παρουσία τριγλυκεριδίων σε συγκεντρώσεις έως 3000 mg/dl δεν επηρεάζει τα αποτελέσματα της εξέτασης μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Εναλλακτικός τύπος δείγματος: Προκειμένου να διαπιστωθεί εάν είναι δυνατή η χρήση ορού με τη μέθοδο IMMULITE 2000 CK-MB, συλλέχθηκε αίμα από 36 εθελοντές εργαστηρίου σε ηπαρινισμένους και απλούς δοκιμαστικούς σωλήνες. Όλα τα δείγματα εμπλουτίστηκαν με CK-MB και εξετάστηκαν με τη μέθοδο IMMULITE 2000 CK-MB με τα ακόλουθα αποτελέσματα. (Ορός) = 0,96 (Ηπαρίνη) + 2,9 ng/ml r = 0,993 Μέσοι όροι: 122 ng/ml (Ηπαρίνη) 120 ng/ml (Ορός) ιενεργήθηκε επίσης μια ξεχωριστή μελέτη σε 44 ενδογενή δείγματα υγιών εθελοντών. (Ορός) = 1,02 (Ηπαρίνη) + 0,03 ng/ml r = 0,995 Μέσοι όροι: 1,44 ng/ml (Ηπαρίνη) 1,49 ng/ml (Ορός) Σύγκριση της Μεθόδου 1: Η ανάλυση συγκρίθηκε με την ανάλυση IMMULITE CK-MB (LKMB) σε 190 δείγματα. (Εύρος συγκέντρωσης: έως περίπου 500 ng/ml. Βλ. γράφημα 1.) Η ανάλυση γραμμικής παλινδρόμησης έδωσε τα ακόλουθα αποτελέσματα: (IML 2000) = 1,04 (LKMB) 0,82 ng/ml r = 0,998 Μέσοι όροι: 39,5 ng/ml (IMMULITE 2000) 38,7 ng/ml (IMMULITE LKMB) Σύγκριση της Μεθόδου 2: Εκατόν είκοσι πέντε από αυτά τα δείγματα με τιμές κάτω των 10 ng/ml αναλύθηκαν ξεχωριστά με γραμμική παλινδρόμηση. (Βλ. γράφημα 2.) (IML 2000) = 0,88 (LKMB) + 0,009 ng/ml r = 0,961 Μέσοι όροι: 3,12 ng/ml (IMMULITE 2000) 3,53 ng/ml (IMMULITE LKMB) Τεχνική Υποστήριξη Για τεχνική υποστήριξη αποταθείτε στον αντιπρόσωπο της χώρας σας. Το Σύστημα Ποιότητας της Siemens Healthcare Diagnostic Products Ltd. είναι επικυρωμένο με ISO 13485:2003 Polski IMMULITE 2000 CK-MB Przeznaczenie: Test diagnostyczny in vitro dla analizatorów systemów IMMULITE 2000 do ilościowego oznaczenia izoenzymu MB kinazy kreatynowej (CK-MB) w osoczu heparynowym lub surowicy, przydatny przy postępowaniu i prognozowaniu stanu chorego z zawałem mięśnia sercowego. Numery katalogowe: L2KMB2 (200 testów) Kod testu: CMB Kolor: Ciemnoniebieski Wprowadzenie Kinaza kreatynowa (CK) jest enzymem występującym głównie w tkance mięśniowej i mózgowej. Istnieją trzy dimeryczne izoenzymy kinazy CK-MM (CK-3), CK-MB (CK-2) i CK-BB (CK-1) zbudowane z podjednostek M i B. Izoenzym CK-MB o masie molekularnej około 87 kd stanowi od 5 do 50% całkowitej aktywności CK w mięśniu sercowym. W mięśniach szkieletowych natomiast, gdzie dominującą formą jest CK-MM, CK-MB stanowi do 1% aktywności kinazy, osiągając maksymalnie 10% w stanach uszkodzenia mięśni szkieletowych i ich regeneracji (np. nadmierny wysiłek, dystrofia mięśniowa, zapalenie wielomięśniowe). 2 CK-MB jest jednym z najważniejszych markerów mięśnia sercowego (pomimo braku specyficzności dla serca) o dobrze ustalonej roli w potwierdzaniu ostrego zawału mięśnia sercowego (AMI) i w monitorowaniu reperfuzji podczas terapii trombolitycznej po wystąpieniu AMI. 2 IMMULITE 2000 CK-MB (PIEL2KMB-3 {19}, ) 17

18 W przypadku AMI typowy wzrost poziomu CK-MB w osoczu następuje w 3 do 8 godzin po wystąpieniu bólu w klatce piersiowej, szczyt utrzymuje się pomiędzy 9 a 30 godziną, a powrót do wartości prawidłowych następuje pomiędzy 48 a 72 godziną. 15 Znacznie więcej informacji niż z pojedynczego oznaczenia uzyskuje się przy pomiarach seryjnych CK-MB izolowany pomiar, nawet w odpowiednim czasie, nie jest w stanie precyzyjnie ustalić czasu wystąpienia AMI. Wysokie wartości CK-MB mogą wskazywać raczej na uszkodzenie mięśni szkieletowych a nie sercowego. Wyniki mieszczące się w granicach wartości referencyjnych mogą być znaczące jeśli odzwierciedlają wzrost CK-MB w stosunku do wartości wyjściowych u danego chorego. (Niskie wartości wyjściowe występują czasami u ludzi starszych). W związku z tym zalecane jest oznaczanie CK-MB zaraz po przyjęciu na oddział nagłych przypadków oraz w odpowiednich odstępach: np. 3-godzinnych w okresie 6 9 godzin u chorych z niespecyficznymi zmianami w EKG 5,2 6- do 8-godzinnych w czasie 24 godzin i częściej, jeśli wprowadzono leczenie trombolityczne. 2 Skuteczna terapia trombolityczna prowadzi do nagłego wzrostu poziomu CK-MB w ciągu 90 minut od podania leku na skutek wypłukania enzymu. 2 W związku z tym seryjne pomiary CK-MB pomagają ocenić następującą reperfuzję naczyń. Zasada testu IMMULITE 2000 CK-MB jest chemiluminescencyjnym, testem immunometrycznym ze znakowanym enzymem. W teście zastosowano sprzężone z ligandem przeciwciało monoklonalne anty-ck-mb i rozdział na fazie stałej, którą jest kulka opłaszczona anty-ligandem. Wiązanie kompleksu CK-MB i tym samym emisja protonów mierzona przez luminometr jest proporcjonalne do stężenia CK-MB w badanej próbce. Czas inkubacji: 1 30 minut Preparatyka próbek Zalecane jest ultrawirowanie próbek lipemicznych. Hemoliza próbki może świadczyć o nieprawidłowym postępowaniu z próbką na etapie przedlaboratoryjnym. Fakt ten należy brać pod uwagę przy interpretacji wyników. Próbki żółtaczkowe i wysoko zanieczyszczone mogą dawać nieprawidłowe wyniki. Odwirowanie próbki krwi przed zakończeniem wykrzepiania może spowodować, że w supernatancie pozostanie fibryna stanowiąca przyczynę fałszywych wyników. Przed przystąpieniem do wirowania należy mieć pewność, że skrzep jest ostatecznie uformowany. Niektóre próbki, a zwłaszcza pochodzące od osób poddanych leczeniu antykoagulantami, wymagają dłuższego czasu na wytworzenie skrzepu. W zależności od producenta probówki do pobierania krwi mogą różnie wpływać na uzyskiwane wyniki. Istotne jest tworzywo i czynniki dodatkowe jak żel lub bariery oddzielające skrzep, aktywatory krzepnięcia oraz antykoagulanty. Wpływ wszystkich możliwych wariantów probówek na test IMMULITE 2000 CK-MB nie został określony. Informacje o przetestowanych wariantach podano w akapicie Wpływ materiału na oznaczenie. Wymagana objętość próbki: 50 µl osocza heparynowego lub surowicy Przechowywanie materiału: 24h w 2 8 C lub 30 dni w 20 C. 18 IMMULITE 2000 CK-MB (PIEL2KMB-3 {19}, )

19 Ostrzeżenia i warunki wstępne Test diagnostyczny in vitro. PRZESTROGA! POTENCJALNE ZAGROŻENIE BIOLOGICZNE Zawiera materiał pochodzenia ludzkiego. Każdą porcję ludzkiej krwi lub składnika krwi pochodzącą od dawców przetestowano metodami zaaprobowanymi przez FDA na obecność przeciwciał przeciwko ludzkiemu wirusowi nabytego niedoboru odporności typu 1 (HIV-1) i typu 2 (HIV-2), antygenu powierzchniowego zapalenia wątroby typu B (HBsAg) i przeciwciał przeciwko wirusowi zapalenia wątroby typu C (HCV). Wyniki tych badań były ujemne (nie wykazały powtarzalnej reaktywności). Jednak żadne badanie nie gwarantuje całkowitej pewności, że te lub inne czynniki chorobotwórcze nie są obecne w materiale; z tym materiałem należy postępować zgodnie z zasadami dobrej praktyki laboratoryjnej i stosować uniwersalne środki ostrożności PRZESTROGA: Materiał pochodzenia zwierzęcego. Postępować tak jak z materiałem potencjalnie zakaźnym. H412 P273, P501 Działa szkodliwie na organizmy wodne, powodując długotrwałe skutki. Unikać uwolnienia do środowiska. Pojemnik i zawartość usuwać zgodnie z wszystkimi lokalnymi, regionalnymi i krajowymi przepisami. Zawiera: azydek sodu; CK-MB - kalibratory zestawu Odczynniki: Przechowywać w 2 8 C. Usuwać zgodnie z instrukcją. Zachowywać środki ostrożności konieczne przy pracy z materiałem potencjalnie zakaźnym. W materiałach pochodzących z krwi ludzkiej wykluczono reaktywność w kierunku syfilisu, obecność przeciwciał anty-hiv1/2, HBsAg i przeciwciał anty-hcv. Azydek sodu w stężeniu mniejszym niż 0,1 g/dl jest dodawany jako konserwant. Wykorzystane odczynniki usuwać w dużej ilości wody, by zapobiec osadzaniu azydku sodu w rurach miedzianych lub ołowianych, co może doprowadzić do wytworzenia potencjalnie wybuchowych azydków tych metali. Substrat chemiluminescencyjny: Unikać zanieczyszczenia i chronić przed bezpośrednim światłem słonecznym (patrz ulotka). Woda: Dejonizowana lub destylowana. Elementy zestawu Elementy zestawu tworzą całość. Kody na wewnętrznych pokrywach pudełka są niezbędne do wykonania oznaczenia. Autoprzeciwciała zastosowane w teście posiadają licencję Uniwersytetu Washingtona. CK-MB - pojemnik z kulkami (L2MB12) Oznakowany kodem kreskowym. 200 kulek opłaszczonych antyligandem. Stabilne w 2 8 C do daty ważności. L2KMB2: 1 opakowanie CK-MB - klin z odczynnikiem (L2MBA2) Oznaczony kodem kreskowym. 11,5 ml monoklonalnego mysiego przeciwciała anty-ck-mb związanego z ligandem i alkalicznej fosfatazy (izolowanej z jelita cieląt) sprzęgniętej z monoklonalnym mysim przeciwciałem anty-ck-bb w buforowanym roztworze. Stabilny w temp. 2 8 C do daty ważności. L2KMB2: 1 klin Nie uszkadzając kodu kreskowego klina zerwij taśmę zabezpieczającą w okresie transportu przesuwne zamknięcie komór z odczynnikiem. Usuń tymczasowe foliowe uszczelnienie komór i wsuń zamknięcie komór na prowadnice w pokrywie klina. CK-MB - kalibratory zestawu (LMBL, LMBH) Dwie fiolki (kalibrator niski i wysoki) zawierające liofilizat CK-MB w matrycy surowicy zwierzęcej, z konserwantami. Co najmniej 30 min. przed użyciem zawartość każdej fiolki rekonstytuować 4,0 ml wody destylowanej. Mieszać przez delikatne wytrząsanie i obracanie do momentu pełnego rozpuszczenia zawartości. Rozlać i zamrozić. Stabilne (rozpipetowane) do 2 miesięcy w 20 C. L2KMB2: 1 zestaw IMMULITE 2000 CK-MB (PIEL2KMB-3 {19}, ) 19

20 Przed przystąpieniem do kalibracji umocuj na probówkach odpowiednie nalepki z kodem kreskowym (dostarczane z zestawem) rozpoznawane przez czytnik kodów kreskowych aparatu. Materiały dostarczane oddzielnie Rozcieńczalnik próbek Multidiluent 2 (L2M2Z, L2M2Z4) Do automatycznego rozcieńczania wysokich próbek. Jedna fiolka skoncentrowanej, gotowej do użycia, zwierzęcej buforowanej matrycy białkowej, z konserwantami. Stabilne w 2 8 C przez 30 dni (po otwarciu) lub 6 miesięcy (rozpipetowane) w 20 C. L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml Kody kreskowe przewidziane są do stosowania z rozcieńczalnikiem. Przed użyciem należy umieścić odpowiednią etykietę na probówce mm tak, aby kody kreskowe mogły być odczytane przez czytnik kodów kreskowych aparatu. L2M2Z: 3 nalepki L2M2Z4: 5 nalepek L2SUBM: Substrat Chemiluminescencyjny L2PWSM: Roztwór Płuczący L2KPM: Roztwór Czyszczący LRXT: Probówki Reakcyjne (jednorazowe) L2ZT: 250 Probówek do Rozcieńczania Próbek mm L2ZC: 250 Korków do Probówek na Rozcieńczalnik Ponadto niezbędne woda destylowana lub dejonizowana, probówki, kontrole Procedura oznaczenia Przestrzeganie procedur dotyczących utrzymania aparatu, zawartych w Podręczniku operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000 poprawia charakterystykę uzyskiwanych wyników. Procedury: przygotowania aparatu, ustawień aparatu, przygotowania i rozcieńczania próbek, rekalibracji, oznaczenia i kontroli jakości zgodnie z Podręcznikiem operatora do obsługi systemów IMMULITE Zalecany odstęp pomiędzy rekalibracjami: 2 tygodnie Próbki kontrolne: Przestrzegać przepisów państwowych i wymogów kontrolnych w zakresie częstotliwości kontroli jakości. Stosować kontrole lub pule surowic co najmniej o niskim i wysokim poziomie CK-MB. Siemens Healthcare Diagnostics zaleca stosowanie dostępnych w handlu próbek kontroli jakości o co najmniej 2 poziomach (niskim i wysokim). Uznaje się, że test przebiega prawidłowo, gdy uzyskane wartości analitu plasują się w przyjętym dla Kontroli zakresie dla danego analizatora lub w zakresie opracowanym w ramach wewnątrzlaboratoryjnego systemu zapewnienia jakości. Oczekiwane wartości Badanie zakresu referencyjnego zostało przeprowadzone na próbkach pobranych od 210 mężczyzn bez objawów chorobowych oraz 210 kobiet bez objawów chorobowych. Próbki zostały pobrane od pacjentów na terenie USA w ośrodkach zatwierdzonych przez amerykańską agencję FDA. Na podstawie analizy próbek uzyskano następujące mediany oraz wartości dla percentyla 97,5 i percentyla 99: Próbki pochodzące od mężczyzn bez objawów chorobowych Mediana: 1,76 ng/ml Percentyl 97,5: 6,74 ng/ml Percentyl 99: 7,29 ng/ml Próbki pochodzące od kobiet bez objawów chorobowych Mediana: 0,69 ng/ml Percentyl 97,5: 4,02 ng/ml Percentyl 99: 5,43 ng/ml Badanie dodatkowe zostało przeprowadzone na próbkach pobranych od 150 hospitalizowanych mężczyzn i 150 hospitalizowanych kobiet. Próbki zostały pobrane od pacjentów na terenie USA, u których potwierdzono brak schorzeń serca oraz brak wcześniejszych zachorowań na cukrzycę, schorzeń nerek, schorzeń tarczycy oraz przewlekłych schorzeń układu mięśniowo-szkieletowego. Próbki zostały pobrane po przeanalizowaniu kart i rejestrów laboratoryjnych wszystkich pacjentów. W momencie pobierania każda próbka została zanonimizowana. 20 IMMULITE 2000 CK-MB (PIEL2KMB-3 {19}, )

21 Próbki pochodzące od hospitalizowanych mężczyzn Mediana: 2,63 ng/ml Percentyl 97,5: 8,62 ng/ml Percentyl 99: 9,04 ng/ml Próbki pochodzące od hospitalizowanych kobiet Mediana: 1,04 ng/ml Percentyl 97,5: 7,01 ng/ml Percentyl 99: 8,38 ng/ml Tak jak w przypadku wszystkich testów in vitro, każde laboratorium powinno wyznaczyć własne zakresy referencyjne do oceny wyników pacjentów. Powyższe zakresy należy traktować jako orientacyjne. Ograniczenia Przeciwciała heterofilne obecne w surowicy ludzkiej mogą wchodzić w reakcję z immunoglobulinami będącymi reagentami testu immunologicznego, wpływając na przebieg oznaczenia in vitro. [Porównaj: Boscato LM., Stuart MC: Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays Przeciwciała heterofilne - problem wszystkich testów immunologicznych. Clin Chem 1988:34:27-33]. Wpływ przeciwciał heterofilnych może ujawnić się w oznaczeniach wykonywanych w surowicy osób mających ciągły kontakt ze zwierzętami lub zwierzęcymi produktami krwiopochodnymi, stanowiąc potencjalną przyczynę błędnych wyników. W teście ryzyko interferencji przeciwciał heterofilnych zostało zminimalizowane przez odpowiedni dobór proporcji odczynników, tym niemniej interferencja taka może potencjalnie nastąpić w rzadkich przypadkach. Wyniki uzyskane tą metodą powinny być zawsze interpretowane w połączeniu z badaniem klinicznym pacjenta, jego historią choroby oraz innymi okolicznościami. Parametry testu Dane charakteryzujące test przedstawiono w tabelach. Wyniki podano w ng/ml. O ile nie podano inaczej, wszystkie wyniki dotyczą próbek pobranych do probówek z heparyną. Faktor przeliczenia: ng/ml 1 μg/l Zakres Kalibracji: Do 500 ng/ml Test wykazuje zgodność pomiarową z wewnętrznymi standardami wytwarzania dzięki zastosowaniu kwalifikowanych materiałów i metod pomiaru. Czułość Analityczna: 0,6 ng/ml Efekt wysokiej dawki Hook Effect: Nie występuje do stężenia ng/ml Precyzja: Próbki testowano przez okres kilkunastu dni w duplikatach, dwa razy dziennie, co dało w sumie 40 serii i 80 powtórzeń (patrz tabela Precyzji). Liniowość: Oznaczano próbki poddane kolejnym rozcieńczeniom (patrz tabela Liniowość). Odzysk: Badano próbki wzbogacane w stosunku objętościowym 1 do 19 roztworami CK-MB o stężeniach, kolejno: 500, 2000 i 7000 ng/ml (patrz tabela Odzysk). Specyficzność: Przeciwciało jest wysoce specyficzne w stosunku do CK-MB, z niskim powinowactwem do innych naturalnych izoform kinazy kreatynowej (patrz tabela Specyficzność). Bilirubina: Może powodować zaniżanie wyników oznaczeń (patrz tabela Bilirubina w oryginalnej wersji ulotki). Hemoliza: Obecność hemoglobiny w ilości do 512 mg/dl nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Lipemia: Obecność trójglicerydów w ilości do 3000 mg/dl nie ma wpływu na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Wpływ rodzaju pobieranego materiału na oznaczenie: W celu określenia czy surowica może być stosowana jako materiał badany do oznaczania CK-MB, krew od 36 ochotników pobrano do probówek z heparyną i do czystych probówek (na skrzep).wszystkie próbki wzbogacono CK-MB i zmierzono testem IMMULITE 2000 CK-MB. Uzyskano następujące równanie regresji liniowej: (Srowica) = 0,96 (Heparyna) + 2,9 ng/ml r = 0,993 Średnie: 122 ng/ml (Heparyna) 120 ng/ml (Surowica) IMMULITE 2000 CK-MB (PIEL2KMB-3 {19}, ) 21

22 Przeprowadzono także osobne badania na grupie 44 zdrowych ochotników. (Surowica) = 1,02 (Heparyna) + 0,03 ng/ml r = 0,995 Średnie: 1,44 ng/ml (Heparyna) 1,49 ng/ml (Surowica) Porównanie metod 1: Wyniki porównywano z wynikami uzyskanymi przy zastosowaniu testu IMMULITE CK-MB (LKMB) w grupie 190 próbek (Zakres stężeń do około 500 ng/ml. Patrz wykres 1.) Otrzymano następujące równanie regresji liniowej: (IML 2000) = 1,04 (LKMB) 0,82 ng/ml r = 0,998 Średnie: 39,5 ng/ml (IMMULITE 2000) 38,7 ng/ml (IMMULITE LKMB) Porównanie metod 2: Przebadano 125 z pośród powyższych 190 próbek z wartościami poniżej 10 ng/ml (patrz wykres 2). Otrzymano następujące równanie regresji liniowej: (IML 2000) = 0,88 (LKMB) + 0,009 ng/ml r = 0,961 Średnie: 3,12 ng/ml (IMMULITE 2000) 3,53 ng/ml (IMMULITE LKMB) Pomoc techniczna i konsultacje Krajowy Dystrybutor udziela wszechstronnej pomocy technicznej. System Kontroli Jakości Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. posiada Certyfikat Jakości ISO 13485:2003. IMMULITE is a trademark of Siemens Healthcare Diagnostics Siemens Healthcare Diagnostics. All rights reserved. Made in: UK Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. Glyn Rhonwy, Llanberis, Gwynedd LL55 4EL United Kingdom Changes in this Edition: cc#eu22510: Revised the normal range information and values in the Expected Values section. cc#eu22593: 1) Removed references to discontinued products. 2) Under Warnings and Precautions, added biohazard symbol and potential biohazard statement, caution statement, required GHS pictograms/signal words/hazard and precautionary codes and statements, offending chemicals and sources. 3) Under References, added citations from the potential biohazard statement. 4) Changed Origin: UK to Made in: UK. 5) Updated the manufacturer address to include Glyn Rhonwy. 6) In Understanding the Symbols, revised the symbol for catalog number, added a GHS pictogram for health hazard, and updated existing symbols with GHS pictograms and terminology for exclamation mark, corrosion, skull and crossbones, and environment. Understanding the Symbols Understanding the Symbols En English Vysvětlivky symbolů Επεξήγηση των συμβόλων Znaczenie symboli Cz Česky El Ελληνικά Pl Polski The following symbols may appear on the product labeling: / Na štítku výrobku mohou být uvedeny následující symboly: / Τα ακόλουθα σύμβολα ενδέχεται να εμφανίζονται στην επισήμανση του προϊόντος: / Na etykietach produktu mogą pojawiać się poniższe symbole: Symbol Definition En: In vitro diagnostic medical device Cz: Zdravotnický prostředek pro in vitro diagnostiku El: In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή Pl: Sprzęt do medycznej diagnostyki in vitro En: Catalog Number Cz: Katalogové číslo El: Αριθμός καταλόγου Pl: Numer katalogowy En: Manufacturer Cz: Výrobce El: Κατασκευαστής Pl: Producent PIEL2KMB 3 {19} 22 IMMULITE 2000 CK-MB (PIEL2KMB-3 {19}, )

23 Symbol Definition En: Authorized Representative in the European Community Cz: Autorizované zastoupení v Evropské unii El: Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα Pl: Autoryzowany przedstawiciel w Unii Europejskiej En: CE Mark Cz: CE značka El: Σήμανση CE Pl: Znak CE En: CE Mark with identification number of notified body Cz: CE značka s identifikačním číslem notifikovaného orgánu El: Σήμανση CE με αριθμό αναγνώρισης του φορέα πιστοποίησης Pl: Znak CE z numerem identyfikacyjnym jednostki notyfikowanej En: Consult instructions for use Cz: Postupujte podle návodu k použití El: Συμβουλευτείτε τις οδηγίες λειτουργίας Pl: Zapoznać się z instrukcją użycia En: Caution! Potential Biohazard Cz: Pozor! Potenciální biohazard El: Πρoσοχή! υνητικός βιολογικός κίνδυνος Pl: Uwaga! Potencjalne zagrożenie biologiczne En: Temperature limitation (2 8 C) Cz: Teplotní rozsah (2 8 C) El: Περιορισμός θερμοκρασίας (2 8 C) Pl: Zakres temperatury (2 8 C) En: Upper limit of temperature ( -20 C) Cz: Horní teplotní limit ( -20 C) El: Ανώτερο όριο θερμοκρασίας ( -20 C) Pl: Górny zakres temperatury ( -20 C) En: Lower limit of temperature ( 2 C) Cz: Spodní teplotní limit ( 2 C) El: Κατώτερο όριο θερμοκρασίας ( 2 C) Pl: Dolny zakres temperatury ( 2 C) LOT Symbol Definition En: Do not freeze (> 0 C) Cz: Nezmrazovat (> 0 C) El: Μην καταψυχετε (> 0 C) Pl: Nie zamrażać (> 0 C) En: Do not reuse Cz: Pro jednorázové použití El: Μην κάνετε επαναληπτική χρήση Pl: Nie używać powtórnie En: Keep away from sunlight Cz: Chraňte před slunečním světlem El: ιατηρείτε μακριά από το ηλιακό φως Pl: Chronić przed światłem słonecznym En: Batch code Cz: Šarže El: Κωδικός παρτίδας Pl: Kod serii En: Contains sufficient for (n) tests Cz: Dostatečné množství pro (n) testů El: Περιεχόμενο επαρκές για (n) εξετάσεις Pl: Zawartość wystarczająca na (n) testów En: Date format (year-month) Cz: Formát data (rok-měsíc) El: Μορφή ημερομηνίας (έτος-μήνας) Pl: Zapis daty (rok-miesiąc) En: Use by Cz: Spotřebujte do El: Ημερομηνία λήξης Pl: Wykorzystać do En: Health Hazard Cz: Zdravotní riziko El: Κίνδυνος για την υγεία Pl: Zagrożenie dla zdrowia En: Exclamation Mark Cz: Vykřičník El: Θαυμαστικό Pl: Wykrzyknik En: Corrosion Cz: Koroze El: ιάβρωση Pl: Działanie żrące IMMULITE 2000 CK-MB (PIEL2KMB-3 {19}, ) 23

24 Symbol Definition En: Skull and Crossbones Cz: Lebka se zkříženými hnáty El: Νεκροκεφαλή με διασταυρούμενα οστά Pl: Czaszka i skrzyżowane piszczele DIL Symbol Definition En: Sample Diluent Cz: Diluent Vzorků El: Αραιωτικό δείγματος Pl: Rozcieńczalnik próbek BEAD PACK TEST UNIT REAG WEDGE REAG WEDGE A REAG WEDGE B REAG WEDGE D ADJUSTOR ADJUSTOR L ADJUSTOR H ADJUSTOR AB En: Environment Cz: Prostředí El: Περιβάλλον Pl: Środowisko En: Bead Pack Cz: Zásobník s kuličkami El: Συσκευασία σφαιριδίων Pl: Pojemnik z kulkami En: Test Unit Cz: Testovací Jednotky El: Μονάδες ανάλυσης Pl: Jednostki testowe En: Reagent Wedge Cz: Reagencie El: οχείο Αντιδραστηρίων Pl: Klin odczynnikowy En: Adjustor Cz: Kalibrátor El: Ρυθμιστής Pl: Kalibrator En: Adjustor, low Cz: Kalibrátor, nízký El: Ρυθμιστής, χαμηλό Pl: Kalibrator, niski En: Adjustor, high Cz: Kalibrátor, vysoký El: Ρυθμιστής, υψηλό Pl: Kalibrator, wysoki En: Adjustor Antibody Cz: Protilátka proti kalibrátoru El: Ρυθμιστής αντισώματος Pl: Przeciwciało Kalibratora CONTROL CONTROL 1 CONTROL 2 CONTROL 3 CONTROL + CONTROL + L CONTROL CONTROL AB PRE A PRE B DITHIOTHREITOL En: Control Cz: Kontrola El: Έλεγχος Pl: Kontrola En: Positive Control Cz: Pozitivní kontrola El: Θετικός Έλεγχος Pl: Kontrola dodatnia En: Low Positive Control Cz: Mírně pozitivní kontrola El: Χαμηλός Θετικός Έλεγχος Pl: Kontrola nisko dodatnia En: Negative Control Cz: Negativní kontrola El: Αρνητικός Έλεγχος Pl: Kontrola ujemna En: Control Antibody Cz: Protilátka proti kontrole El: Έλεγχος αντισώματος Pl: Przeciwciało Kontrolne En: Pretreatment Solution Cz: Roztok na úpravu vzorků El: ιάλυμα προεπεξεργασίας Pl: Roztwór do wstępnej preparatyki En: Dithiothreitol Solution Cz: Roztok dithiotreitolu El: ιάλυμα διθειοθρεϊτόλης Pl: Roztwór dithiothreitolu 24 IMMULITE 2000 CK-MB (PIEL2KMB-3 {19}, )