PAP. For use on IMMULITE 2000 systems

Transcript

1 PAP For use on IMMULITE 2000 systems

2 IMMULITE 2000 PAP English Intended Use: For in vitro diagnostic use with the IMMULITE 2000 Systems Analyzers for the quantitative measurement of prostatic acid phosphatase (PAP) in serum, as an aid in patient management. Catalog Number: L2KPA2 (200 tests) Test Code: PAP Color: Dark Blue PAP measurement must not be regarded as an absolute test for malignancy since other factors including benign prostate hyperplasia, prostatic infarction, and manipulation of the prostate gland may result in elevated serum PAP concentrations. Accordingly, PAP results should always be interpreted in light of the patient's clinical history and the results of other diagnostic procedures. The concentration of PAP in a given specimen determined with assays from different manufacturers can vary due to differences in assay methods and reagent specificity. The results reported by the laboratory to the physician must include the identity of the assay used. Values obtained with different PAP assays cannot be used interchangeably. Before changing assays, the laboratory must confirm the baseline values for patients being serially monitored. Summary and Explanation The acid phosphatases are a diverse group of isoenzymes which are classified on the basis of their increasing electrophoretic mobility. These isoenzymes are capable of hydrolyzing phosphate esters in an acidic medium. 1 Prostatic acid phosphatase (PAP) is a member of this group of acid phosphatases. The major prostatic acid phosphatase fraction is isoenzyme 2, a glycoprotein synthesized by the prostate gland with a molecular mass of approximately 100,000 daltons. 2,3 High concentrations of acid phosphatase are found in the prostate gland. 4 Significant amounts are also found in platelets, bone, spleen, kidney and liver. The acid phosphatase isoenzymes which are found in the serum originate from the enzymes contributed by the various tissue cells. 1,5,6,7 PAP is a major constituent in seminal fluid and is also secreted into urine. PAP is normally present in the serum at low levels. Elevated levels of serum acid phosphatase in patients with advanced prostate cancer were first reported in 1938 by Gutman, et al. 8 It was later reported that the frequency with which PAP is elevated in serum in a population of prostate cancer patients increases with progressive stages of the disease Consequently, PAP measurement has been utilized as an adjunct in confirming the clinical staging of prostatic cancer. 13 PAP measurement has found clinical application in the management of prostatic cancer patients. 13,14 Serum PAP measurements have been useful in monitoring remission or relapse of a prostatic malignancy 3,15,16 and in assessing the effectiveness of various treatment regimens. 17,18 Thus, normalization in serum PAP has been observed following successful therapeutic intervention, while recurrent or residual disease has been associated with elevated levels of prostatic acid phosphatase. 13,17,18 Principle of the Procedure IMMULITE 2000 PAP is a solid-phase, chemiluminescent immunometric assay. Incubation Cycles: 1 30 minutes. Specimen Collection Samples should be obtained before rectal examination, biopsy, prostatectomy or prostatic massage, since manipulating the prostate gland may lead to elevated PAP levels persisting up to 24 or 48 hours. 19 The use of an ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples. Hemolyzed samples may indicate mistreatment of a specimen before receipt 2 IMMULITE 2000 PAP (PIEL2KPA-2 {16}, )

3 by the laboratory; hence the results should be interpreted with caution. Centrifuging serum samples before a complete clot forms may result in the presence of fibrin. To prevent erroneous results due to the presence of fibrin, ensure that complete clot formation has taken place prior to centrifugation of samples. Some samples, particularly those from patients receiving anticoagulant therapy, may require increased clotting time. Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE 2000 PAP has not been tested with all possible variations of tube types. Volume Required: 50 µl serum. Storage: Both enzymatic and immunological activities of PAP are labile at ph 8 (resultant ph following loss of CO 2 ). Samples should be stored refrigerated at 2 8 C within 3 hours of collection. If specimens will not be assayed within 24 hours of collection, store frozen at 20 C. The PAP antigen is stable when stored at 20 C for up to 6 months. Although several freeze-thaw cycles do not significantly affect assayed values, samples should be aliquoted to avoid repeated freeze-thaw cycles. Warnings and Precautions For in vitro diagnostic use. CAUTION: This device contains material of animal origin and should be handled as a potential carrier and transmitter of disease. H412 P273, P501 Harmful to aquatic life with long lasting effects. Avoid release to the environment. Dispose of contents and container in accordance with all local, regional, and national regulations. Contains: sodium azide; PAP Adjustors Reagents: Store at 2 8 C. Dispose of in accordance with applicable laws. Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C. Sodium azide, at concentrations less than 0.1 g/dl, has been added as a preservative. On disposal, flush with large volumes of water to prevent the buildup of potentially explosive metal azides in lead and copper plumbing. Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert.) Water: Use distilled or deionized water. Materials Supplied Components are a matched set. Labels on the inside box are needed for the assay. PAP Bead Pack (L2PA12) With barcode. 200 beads, coated with monoclonal murine anti-pap. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KPA2: 1 pack. PAP Reagent Wedge (L2PAA2) With barcode ml alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to polyclonal goat anti-pap in buffer. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KPA2: 1 wedge. Before use, tear off the top of the label at the perforations, without damaging the barcode. Remove the foil seal from the top of wedge; snap the sliding cover down into the ramps on the reagent lid. PAP Adjustors (LPAL, LPAH) Two vials (Low and High) of PAP in lyophilized, nonhuman serum/buffer matrix, with preservative. Reconstitute each vial with 4.0 ml distilled or deionized water. Let stand for 30 minutes, then mix by gentle swirling or inversion. Stable at 2 8 C for 30 days, after reconstitution, or for 6 months (aliquotted) at 20 C. L2KPA2: 1 set. Before making an adjustment, place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes so that the barcodes can be read by the on-board reader. IMMULITE 2000 PAP (PIEL2KPA-2 {16}, ) 3

4 Kit Components Supplied Separately Multi-Diluent 1 (L2M1Z) For the on-board dilution of high samples. One vial of concentrated (ready-to-use) processed, normal human serum, containing undetectable to low levels of PAP, with preservative. Stable at 2 8 C for 30 days after opening, or for 6 months (aliquotted) at 20 C. L2M1Z: 25 ml. Barcode labels are provided for use with the diluent. Before use, place an appropriate label on a mm test tube, so that the barcodes can be read by the on-board reader. L2M1Z: 3 labels. L2SUBM: Chemiluminescent Substrate L2PWSM: Probe Wash L2KPM: Probe Cleaning Kit LRXT: Reaction Tubes (disposable) L2ZT: 250 Sample Diluent Test Tubes ( mm) L2ZC: 250 Sample Diluent Tube Caps PACM: PAP Control Module (tri-level) Also Required Distilled or deionized water; test tubes; controls. Assay Procedure Note that for optimal performance, it is important to perform all routine maintenance procedures as defined in the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual. See the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual for: preparation, setup, dilutions, adjustment, assay and quality control procedures. Recommended Adjustment Interval: 2 weeks. Quality Control Samples: Use controls or serum pools with at least two levels (low and high) of PAP. Expected Values Based on its relationship to IMMULITE PAP (see Method Comparison), the assay can be expected to have essentially the same reference ranges. PAP values were obtained using the IMMULITE PAP assay on 51 adult male samples. The individuals ranged in age from 19 to 68 years. The distribution of PAP values was log normal. The median value was 1.70 ng/ml (mean PAP value was 1.79 ng/ml for the raw data and 1.70 ng/ml for the log-transformed data). The standard deviation for the raw data was 0.59 ng/ml and 1.37 for the log-transformed data. The upper 97.5 percentile was 3.4 ng/ml. A larger study of 403 healthy males using immunoradiometric PAP assay, which yields equivalent quantitative results, had an essentially identical upper 97.5 percentile of 3.49 ng/ml. Therefore, the assay can be expected to yield a reference range for healthy adult males of less than 3.5 ng/ml. Elevated serum concentrations have been observed frequently in patients with prostate cancer but also occur in patients with non-prostatic cancer and some but not all patients with non-malignant prostatic disease. 8,13,18 Additionally, a reference range study for IMMULITE PAP was performed using serum samples from adult volunteers, including men ranging from approximately 20 to 70 years of age (central 95%: years, median: 40 years). The subjects were in apparent good health, based on a questionnaire. Blood samples were collected in France, Germany, the Netherlands and Portugal. Results were generated by an independent laboratory in the Netherlands using IMMULITE kits. (The samples were collected in plain glass tubes without anticoagulants, gel barriers, or clotpromoting additives, and assayed in singlicate.) Medians and 95th percentiles are tabulated below. Percentiles were determined nonparametrically. Group Median 95%ile Units n Males ng/ml 425 Consider these limits as guidelines only. Each laboratory should establish its own reference ranges. 4 IMMULITE 2000 PAP (PIEL2KPA-2 {16}, )

5 Limitations Specimens should be obtained before rectal examination, biopsy, prostatectomy or prostatic massage since manipulation of the prostate gland may also lead to elevated PAP levels persisting for up to hours. 19 Both enzymatic and immunological activities of PAP are labile at ph = 8 (resultant ph following loss of CO 2 ). Serum samples should be stored at 2 8 C soon after collection. Longer storage of samples requires freezing at 20 C or colder. Improper handling of the sample may lead to erroneous results with potentially serious clinical implications. The effect of drugs on PAP measurement has not been thoroughly investigated and could represent a potential source of interference in the assay. Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings. Performance Data See Tables and Graphs for data representative of the assay's performance. Results are expressed in ng/ml. (Unless otherwise noted, all were generated on serum samples collected in tubes without gel barriers or clot-promoting additives.) Calibration Range: up to 100 ng/ml. Analytical Sensitivity: 0.02 ng/ml. High-Dose Hook Effect: None up to 15,000 ng/ml. Precision: Samples were processed in duplicate over the course of 20 days, two runs per day, for a total of 40 runs and 80 replicates. (See Precision table.) Linearity: Samples were assayed under various dilutions. (See "Linearity" table for representative data.) Recovery: Samples spiked 1 to 19 with three PAP solutions (100, 300 and 900 ng/ml) were assayed. (See "Recovery" table for representative data.) Specificity: The antibody is highly specific for PAP. (See "Specificity" table.) Bilirubin: Presence of bilirubin in concentrations up to 200 mg/l has no effect on results, within the precision of the assay. Hemolysis: Presence of hemoglobin in concentrations up to 512 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Lipemia: Presence of triglycerides in concentrations up to 3,000 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Method Comparison: The assay was compared to IMMULITE PAP on 71 samples. (Concentration range: approximately 1.5 to 90 ng/ml. See graph.) By linear regression: (IML 2000) = 1.03 (IML) ng/ml r = Means: 33 ng/ml (IMMULITE 2000) 31 ng/ml (IMMULITE) References 1) Yam LT. Clinical significance of human acid phosphatases a review. Amer J Med 1974;56: ) Derechin M, Ostrowski W, Galka M, Barnard E. Acid phosphomoesterase of human prostate molecular weight, dissociation and chemical composition. Biochim Biophys Acta 1971;250: ) Choe B, Pontes E, McDonald I, Rose NR. Immunochemical studies of prostatic acid phosphatase. Cancer Treat Rep 1977;61: ) Kutscher W, Wolbergs H. Prostataphosphatase. Zeitschrift fur Physiol Chem 1935;236:237. 5) Murphy G, et al. CA 1978;28:258. 6) Cooper J, Foti A, Shank P. Radioimmunochemical measurement of bone marrow prostatic acid phospatase. J Urol 1978;119: ) Rose N, et al. Lab Management 1978;16:31. 8) Gutman A, Gutman E. An 'acid' phosphatase occuring in the serum of patients with metastasizing carcinoma of the prostate gland. J Clin Invest 1938;297: ) Foti A, Cooper J, IMMULITE 2000 PAP (PIEL2KPA-2 {16}, ) 5

6 Herschman H, Malvaez R. Detection of prostatic cancer by solid-phase radioimmunoassay of serum prostatic acid phosphatase. N Engl J Med 1977;297: ) Mahan D, Doctor B. A radioimmunoassay for human prostatic acid phospatase levels in prostatic disease. Clin Biochem 1979;12: ) Pontes J, Choe B, Rose N, Ercole C, Pierce J. Clinical evaluation of immunological methods for detection of serum prostatic acid phosphatase. J Urol 1981;126: ) Chu T. Serum acid phosphohydrolase (phosphatase) and ribonuclease in diagnosis of prostatic cancer. Antibiot Chemother 1978;22: ) Pappas A, Gadsen H. Prostatic acid phosphatase: clinical utility in detection, assessment and monitoring carcinoma of the prostate. Ann Clin Lab Sci 1984;14: ) Vihko P, Lukkarinen O, Kontturi M, Vihko R. Effectiveness of radioimmunoassay of human prostatic-specific acid phosphatase in diagnosis and follow-up of therapy in prostatic cancer. Cancer Res 1981;41: ) Wajsman Z, Chu T. Detection and diagnosis of prostatic cancer. In: Prostatic Cancer. G.P. Murphy, ed. Littleton, MA: PSG Publishing, 1979: ) Chu T, Wang M, Kuciel R, Valenzuela L, Murphy G. Enzyme markers in human prostatic cancer. Cancer Treat Rep 1977;61: ) Chu T, et al. Tumor antigen and acid phosphatase isoenzymes in prostatic cancer. Cancer Chemother Rep 1975;59: ) Johnson D, et al. Clinical significance of serum acid phosphatase levels in prostatic carcinoma. Urology 1976;8: ) Vihko P, et al. The effect of manipulation of the prostate gland on serum prostate-specific acid phosphatase measured by radioimmunoassay. Invest Urol 1981;18(5): Technical Assistance For technical assistance, contact your National Distributor. Tables and Graphs Precision (ng/ml) Within-Run 1 Total 2 Mean 3 SD 4 CV 5 SD CV % % % % % % % % % % Česky. 1 V rámci stanovení, 2 Celkem, 3 Střední hodnota, 4 Směrodatná odchylka, 5 Variační koeficient. Ελληνικά. 1 Κατά την ίδια περίοδο, 2 Συνολικά, 3 Μέσος όρος, 4 SD, 5 CV. Polski. 1 W serii, 2 Całość, 3 Średnie, 4 SD, 5 CV. Method Comparison IMMULITE 2000 PAP IMMULITE PAP, ng/ml (IML 2000) = 1.03 (IML) ng/ml r = English. PAP Česky. PAP. Ελληνικά. PAP. Polski. PAP. The Quality System of Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. is certified to ISO 13485: IMMULITE 2000 PAP (PIEL2KPA-2 {16}, )

7 Specificity Compound 1 reactivity 3 Amount Added 2 % Cross Albumin 9 g/dl ND AFP 10,000 ng/ml ND CEA 10,000 ng/ml ND Ferritin 10,000 ng/ml ND Hemoglobin 200,000 g/dl ND HCG 10,000 miu/ml ND PSA 4,000 ng/ml ND Prolactin 2,000 ng/ml ND Transferrin 3,000 mg/dl ND Triglyceride 1,500 mg/dl ND ND: Not detectable. 4 Česky. 1 Sloučenina, 2 Přidané množství, 3 % Zkřížená reaktivita, 4 ND: nezjistitelné. Ελληνικά. 1 Μείγμα, 2 Προστέθηκαν, 3 % Διασταυρ.Αντίδραση, 4 ND: Μη ανιχνεύσιμη ποσότητα. Polski. 1 Składnik, 2 Ilość dodana, 3 % reaktywności Krzyżowej, 4 Nieoznaczlne. Linearity (ng/ml) Dilution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E in in % 2 in % 1 in in in % 2 in % 1 in % 3 8 in in % 2 in % 1 in % 4 8 in in % 2 in % 1 in % Dilution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E in in % 2 in % 1 in % 6 8 in in % 2 in % 1 in % Česky. 1 Ředění, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 % Naměřená / Očekávaná, 5 8 v 8. Ελληνικά. 1 Αραίωση, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E, 5 8 στα 8. Polski. 1 Rozcieńczenie, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O, 5 8 w 8. Recovery (ng/ml) Solution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E A % B % C % 2 14 A % B % C % 3 28 A % B % C % 4 50 A % B % C % Česky. 1 Roztok, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 Naměřená / Očekávaná. Ελληνικά. 1 Διάλυμα, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E. Polski. 1 Roztwór, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O. IMMULITE 2000 PAP (PIEL2KPA-2 {16}, ) 7

8 Česky IMMULITE 2000 PAP Použití: Pro in vitro diagnostické použití na analyzátorech IMMULITE 2000 ke stanovení koncentrace kyselé fosfatázy prostaty (PAP) v séru, jakožto pomůcky při péči o pacienty. Katalogové číslo: L2KPA2 (200 stanovení) Kód metody: PAP Barva: Tmavě modrá Měření koncentrace PAP nesmí být považováno za absolutní test existence zhoubného bujení, protože další faktory včetně nezhoubné hyperplazie prostaty, infarktu prostaty a manipulace s předstojnou žlázou můžou způsobit zvýšenou koncentraci PAP v séru. Obdobně, výsledky PAP je vždy třeba vykládat ve světle pacientovy zdravotní historie a s ohledem na výsledky dalších diagnostických metod. Koncentrace PAP v určitém vzorku stanovené různými metodami se mohou lišit s ohledem na rozdíly v použité metodě stanovení a specificity reagencií. Výsledky stanovení, které laboratoř posílá lékaři, musí zahrnovat označení použitého testu. Výsledky získané pomocí rozličných metod stanovení PAP se nesmí zaměňovat. Před změnou metody musí laboratoř provést konfirmaci počátečních hodnot pravidelně sledovaných pacientů. Shrnutí a vysvětlení Kyselé fosfatázy představují různorodou skupinu izoenzymů, které se klasifikují na základě zvyšující se elektroforetické pohyblivosti. Tyto izoenzymy mají schopnost hydrolyzovat v kyselém prostředí fosfátové estery. 1 Do této skupiny kyselých fosfatáz patří kyselá prostatická fosfatáza (PAP). Hlavní frakcí kyselé prostatické fosfatázy je izoenzym 2, glykoprotein s molekulovou hmotností přibližně daltonů, který se v předstojné žláze tvoři. 2,3 V předstojné žláze se nachází kyselá fosfatáza ve vysokých koncentracích. 4 Značné množství je rovněž přítomno v krevních destičkách, kostech, slezině, ledvinách a játrech. Izoenzymy kyselé fosfatázy, které se nachází v séru, pochází z enzymů různých tkáňových buněk. 1,5,6,7 PAP představuje hlavní složku seminální tekutiny a je také vylučován do moče. Normálně jsou koncentrace PAP v séru nízké. Zvýšená koncentrace kyselé fosfatázy v séru pacientů s pokročilým karcinomem prostaty byla prvně publikována v roce 1938 Gutmanem a kol. 8 Později bylo zjištěno, že četnost zvýšené koncentrace PAP v séru ve skupině pacientů s karcinomem prostaty narůstá s pokročilostí onemocnění Proto se stanovení PAP používá jako doplňková metoda při určování klinického stadia rakoviny prostaty. 13 Stanovení koncentrace PAP se využívá při péči o pacienty s karcinomem prostaty. 13,14 Měření koncentrace PAP v séru je vhodné pro monitorování remise nebo recidivy zhoubného bujení prostaty 3,15,16 a při hodnocení účinnosti různých způsobů léčby. 17,18 Po úspěšném léčebném zásahu se koncentrace PAP v séru normalizuje, zatímco recidiva nebo zbytky onemocnění se projevují zvýšenou hladinou kyselé prostatické fosfatázy. 13,17,18 Princip stanoveni Stanovení IMMULITE 2000 PAP je chemiluminiscenční imunometrická reakce v pevné fázi. Inkubační cykly: 1 30 minut. Odebírání vzorků Vzorky je třeba odebírat před rektálním vyšetřením, biopsií, prostatektomií nebo prostatickou masáži, protože manipulace s předstojnou žlázou může způsobit zvýšené hodnoty koncentrace PAP, které přetrvávají až 24 nebo 48 hodin. 19 K úpravě lipemických vzorků se doporučuje použití ultracentrifugy. Hemolyzované vzorky můžou být známkou nesprávného zacházení se vzorkem ještě před přijetím do laboratoře; proto by výsledky měly být interpretovány s obezřetností. 8 IMMULITE 2000 PAP (PIEL2KPA-2 {16}, )

9 Centrifugací vzorků séra ještě před úplným vysrážením může mít za následek přítomnost fibrinu. Chybným výsledkům způsobeným přítomností fibrinu lze zamezit úplným vysrážením vzorků před jejich centrifugací. Některé vzorky, zejména od pacientů podstupujících antikoagulační léčbu, může srážlivost vyžadovat více času. Použití zkumavek pro odběr krve od různých výrobců může poskytovat rozličné hodnoty v závislosti na materiálech a přísadách, včetně gelových nebo fyzických bariér, aktivátorů srážení a/nebo antikoagulačních činidel. Stanovení PAP na analyzátorech IMMULITE 2000 nebylo testováno se všemi možnými varianty jednotlivých typů zkumavek. Potřebný objem vzorku: 50 μl séra. Skladování: Enzymatická a imunologická aktivita PAP je nestabilní při ph 8 (výsledné ph po ztrátě CO 2 ). Vzorky je třeba do tří hodin po odběru uskladnit při teplotě 2 8 C. Pokud vzorky nebudou stanovovány do 24 hodin po odběru, skladujte zmražené při teplotě 20 C. PAP antigen je stabilní při skladování až 6 měsíců při teplotě 20 C. I když několik opakovaných zmražení a rozmražení vzorku nemá podstatný vliv na výsledky stanovení, měly by se vzorky rozdělit na alikvotní části aby se nemusely opakovaně zmrazovat a rozmrazovat. Upozornění a bezpečnostní opatření Určeno pro in vitro diagnostické použití. UPOZORNĚNÍ: Souprava obsahuje material živočišného původu, se kterým je třeba zacházet jako s potenciálním nosičem a přenašečem nemocí. H412 P273, P501 Škodlivý pro vodní organismy, s dlouhodobými účinky. Zabraňte uvolnění do životního prostředí. Odstraňte obsah a obal v souladu se všemi místními, regionálními a národními předpisy. Obsahuje: azid sodný; PAP kalibrátory Reagencie: Skladujte při teplotě 2 8 C. Likvidujte v souladu s platnými předpisy. Řiďte se obecnými pravidly bezpečnosti práce a se všemi komponenty nakládejte, jako by byly potenciálně infekční. Zdrojové materiály získané z lidské krve byly testovány a shledány nereaktivní na syfilis, na protilátky proti HIV 1 a 2, na povrchový antigen hepatitidy typu B (HBsAg), a na protilátky proti hepatitidě typu C. Jako konzervační látka byl přidán azid sodný v koncentracích menších než 1 g/l. Při likvidaci vypláchněte velkým množstvím vody, by se zamezilo nahromadění potenciálně výbušných azidů kovů v olověném a měděném potrubí. Chemiluminiscenční substrát: Vyvarujte se kontaminace a nevystavujte přímému slunečnímu světlu. (Viz připojený letáček.) Voda: Použijte destilovanou nebo deionizovanou vodu. Dodaný materiál Komponenty představují ucelenou sadu. Pro stanovení jsou zapotřebí štítky s čárovým kódem na krabici. PAP zásobník s kuličkami (L2PA12) Opatřeno čárovým kódem. 200 kuliček potažených monoklonální myší protilátkou proti PAP. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KPA2: 1 balení. PAP reagencie (L2PAA2) Opatřeno čárovým kódem. 11,5 ml alkalické fosfatázy (z telecího střeva) konjugované s polyklonální kozí protilátkou proti PAP v pufru. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KPA2: 1 nádobka. Před použitím utrhněte vršek štítku v perforovaném místě, ale nepoškoďte čárový kód. Z vrchu nádobky odstraňte uzavírací fólii; posuvný uzávěr zaklapněte do ramp na víčku reagencie. PAP kalibrátory (LPAL, LPAH) Dvě ampulky s nízkou a vysokou koncentrací PAP v lyofilizované nehumánní sérové/pufrové matrici, s konzervačním prostředkem. K rekonstituci každé ampule použijte 4,0 ml destilované nebo deionizované vody a nechte stát alespoň 30 minut. Pak promíchejte jemnými krouživými pohyby IMMULITE 2000 PAP (PIEL2KPA-2 {16}, ) 9

10 nebo převracením. Stabilní při teplotě 2 8 C třicet dní po rekonstituci nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při 20 C. L2KPA2: 1 sada. Před adjustací nalepte na testovací zkumavky příslušné alikvotní štítky (dodané se soupravou) tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. Materiál dodávaný zvlášť Multidiluent 1 (L2M1Z) Určeno k automatickému ředění vzorků s vysokou koncentrací analyzátorem. Jedna ampulka koncentrovaného (připraveného k použití), zpracovaného, normálního lidského séra obsahujícího nezjistitelné až malé množství PAP, s konzerrvačním prostředkem. Stabilní při teplotě 2 8 C třicet dnů po otevření nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při 20 C. L2M1Z: 25 ml. Štítky s čárovými kódy jsou určeny pro diluent. Před použitím nalepte příslušný štítek na testovací zkumavku mm tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. L2M1Z: 3 štítky. L2SUBM: Chemiluminiscenční substrát L2PWSM: Promývací roztok L2KPM: Čistící roztok na jehly LRXT: Reakční zkumavky (na jedno použití) L2ZT: 250 Testovací zkumavky na diluent vzorků ( mm) L2ZC: 250 Uzávěru na testovací zkumavky na diluent vzorků PACM: PAP Trojúrovňový kontrolní modul Dále potřebujete: Destilovanou nebo deionizovanou vodu; testovací zkumavky, kontroly. Postup stanovení K dosažení optimálního výkonu je důležité provádět veškerou pravidelnou údržbu stanovenou v manuálu k analyzátorům IMMULITE V manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000 najdete postupy: přípravy, nastavení, ředění, adjustace, stanovení vzorků a kontrol. Doporučený interval mezi adjustacemi: 2 týdny. Vzorky ke kontrole kvality: Použijte kontrolní vzorky nebo směsný vzorek s alespoň dvěma koncentracemi PAP (nízkou a vysokou). Očekávané hodnoty Na základě příbuznosti se stanovením PAP na analyzátoru IMMULITE firmy (viz Srovnání metody) je možné očekávat prakticky stejná referenční rozmezí Hodnoty PAP byly stanoveny metodou PAP na analyzátoru IMMULITE na vzorcích od 51 dospělých mužů. Tyto osoby ve věku 19 až 68 roků. Rozdělení hodnot PAP bylo logaritmické normální. Hodnota mediánu byla 1,70 ng/ml (střední hodnota PAP byla 1,79 ng/ml pro prvotní hodnoty a 1,70 ng/ml pro zlogaritmované hodnoty). Směrodatná odchylka prvotních hodnot byla 0,59 ng/ml a 1,37 pro zlogaritmované hodnoty. Horní 97,5 percentil byl 3,4 ng/ml. Rozsáhlejší výzkum na vzorcích od 403 zdravých mužů za použití imunochemické metody stanovení PAP od firmy, který přinesl ekvivalentní hodnoty koncentrace, se vyznačoval v podstatě shodným horním 97,5 percentilem 3,49 ng/ml. Stanovení by proto mohlo mít referenční rozmezí pro zdravé dospělé muže menší než 3,5 ng/ml. Zvýšená koncentrace v séru se často vyskytuje u pacientů s karcinomem prostaty, ale rovněž u pacientů s jiným druhem karcinomu a u některých, I když ne všech, pacientů s nezhoubným onemocněním prostaty. 8,13,18 Stanovení referenčního rozmezí IMMULITE PAP bylo dále provedeno na vzorcích séra dospělých dobrovolných dárců včetně mužů od přibližně 20 do 70 roků věku (středních 95%: roků, medián: 40 roků). Zdravotní stav těchto osoby byl podle vyplněných dotazníků dobrý. Vzorky krve byly odebrány ve Francii, v Německu, Holandsku a Portugalsku. Výsledky zajistila nezávislá laboratoř v Holandsku za použití analyzátoru a souprav IMMULITE. Vzorky byly odebrány do obyčejných skleněných zkumavek bez antikoagulačních činidel, gelových separátorů nebo přísad podporujících 10 IMMULITE 2000 PAP (PIEL2KPA-2 {16}, )

11 srážlivost. Testoval se vždy pouze jeden vzorek (bez duplikátu). Mediány a 95. percentily se nachází v následující tabulce. Percentily byly určeny neparametricky. Skupina Medián 95. percentil Jednotky Muži 1,4 2,2 ng/ml 425 Tyto hodnoty považujte pouze za orientační. Každá laboratoř by si měla stanovit svoje vlastní referenční rozmezí. Omezení Vzorky je třeba odebírat před rektálním vyšetřením, biopsií, prostatektomií nebo prostatickou masáži, protože manipulace s předstojnou žlázou může způsobit zvýšené hodnoty koncentrace PAP, které přetrvávají hodin. 19 Enzymatická a imunologická aktivita PAP je nestabilní při ph 8 (výsledné ph po ztrátě CO 2 ). Vzorky je třeba brzo po odběru uskladnit při teplotě 2 8 C. Delší skladování vyžaduje zmražení vzorků teplotu 20 C a nižší. Nesprávné nakládání se vzorky může vést k chybným výsledkům stanovení s možnými vážnými zdravotními následky. Dopad užívání léků na měření PAP nebyl zkoumán podrobněji a může představovat možný zdroj rušivých vlivu při stanovování. Heterofilní protilátky v lidském séru mohou reagovat s imunoglobuliny obsaženými v komponentech soupravy a způsobit interference s in vitro imunologickým stanovením. [Viz Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: ] Vzorky pacientů rutinně vystavených kontaktu se zvířaty nebo produkty zvířecího séra můžou vykázat tento typ interference a potenciálně způsobit anomální výsledky. Tyto reagencie byly vyvinuty tak, aby bylo riziko interference minimalizováno; nicméně případné interakce mezi ojedinělými séry a komponenty testu se můžou vyskytnout. Pro diagnostické účely by se výsledky tohoto stanovení měly vždy používat v kombinaci s klinickými zkouškami, anamnézou pacienta a ostatními nálezy. n Znaky metody Reprezentativní výsledky stanovení najdete v části Tabulky a grafy. Výsledky se udávají v ng/ml. (Pokud není uvedeno jinak, všechny výsledky byly získány na vzorcích séra odebraných do zkumavek bez gelových separátorů nebo přísad podporujících srážlivost.) Kalibrační rozsah: Do 100 ng/ml. Analytická citlivost: 0,02 ng/ml. High-Dose Hook Effect: Do ng/ml žádný. Přesnost: Vzorky byly opakovaně stanovovány dvojmo v průběhu 20 dní, celkem 40 cyklů a 80 replikátů. (Viz tabulka Přesnost.) Linearita: Stanovení vzorků bylo provedeno při rozličném ředění. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce "Linearita".) Zpětná výtěžnost: Bylo provedeno stanovení vzorků s přídavkem tří roztoků PAP (100, 300 a 900 ng/ml) v poměru 1:19. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce "Zpětná výtěžnost".) Specificita: Protilátka proti PAP je silně specifická. (Viz tabulka Specificita.) Bilirubin: Přítomnost bilirubinu v koncentracích do 200 mg/l nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Hemolýza: Přítomnost hemoglobinu v koncentracích do 512 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Lipémie: Přítomnost triglyceridů v koncentracích do mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Srovnání metody: Stanovení bylo porovnáno se stanovením PAP na analyzátoru IMMULITE firmy na 71 vzorcích. (Koncentrační rozsah: přibližně 1,5 do 90 ng/ml. Viz graf.) Podle lineární regrese: (IML 2000) = 1,03 (IML) + 0,73 ng/ml r = 0,995 Střední hodnoty: 33 ng/ml (IMMULITE 2000) 31 ng/ml (IMMULITE) IMMULITE 2000 PAP (PIEL2KPA-2 {16}, ) 11

12 Technická Podpora Pro technickou podporu kontaktujte vašeho národního distributora. Systém kontroly jakosti společnosti Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. je certifikovaný podle ISO 13485:2003. Ελληνικά IMMULITE 2000 PAP Ενδεδειγμένη χρήση: Για in vitro διαγνωστική χρήση με τα συστήματα αναλυτών IMMULITE 2000 για τον ποσοτικό προσδιορισμό της προστατικής όξινης φωσφατάσης (ΡΑΡ) στον ορό, ως βοήθημα στη θεραπευτική αντιμετώπιση των ασθενών. Αριθμός καταλόγου: L2KPA2 (200 εξετάσεις) Κωδικός εξέτασης: PAP Χρώμα: Σκούρο μπλε Οι μετρήσεις της ΡΑΡ δεν πρέπει να θεωρούνται απολύτως αξιόπιστες σε περιπτώσεις κακοήθειας, καθώς άλλοι παράγοντες, συμπεριλαμβανομένης της καλοήθους υπερπλασίας του προστάτη, του προστατικού εμφράγματος και του ερεθισμού του προστατικού αδένα είναι δυνατό να προκαλέσουν αυξημένη συγκέντρωση ΡΑΡ στον ορό. Συνεπώς, τα αποτελέσματα ΡΑΡ θα πρέπει πάντα να ερμηνεύονται υπό το φως του κλινικού ιστορικού του ασθενούς και των αποτελεσμάτων άλλων διαγνωστικών διαδικασιών. Οι συγκεντρώσεις ΡΑΡ σε ένα δεδομένο δείγμα με βάση αναλύσεις διαφορετικών κατασκευαστών είναι δυνατό να αποκλίνουν, λόγω διαφορών στις αναλυτικές μεθόδους και την ειδικότητα των αντιδραστηρίων. Τα αποτελέσματα που αναφέρονται από το εργαστήριο στο γιατρό πρέπει να περιλαμβάνουν και το ποια μέθοδος χρησιμοποιήθηκε. Οι τιμές που αποκτώνται με διαφορετικές αναλύσεις ΡΑΡ δεν θα πρέπει να χρησιμοποιούνται κατ εναλλαγήν. Πριν αλλάξει μεθοδολογία, το εργαστήριο πρέπει να επιβεβαιώσει τις βασικές τιμές για τους ασθενείς που ελέγχονται συνεχώς. Περίληψη και επεξήγηση Οι όξινες φωσφατάσες είναι μια γενική ομάδα ισοενζύμων, τα οποία κατηγοριοποιούνται βάσει της αυξανόμενης ηλεκτροφορητικής τους κινητικότητας. Αυτά τα ισοένζυμα μπορούν να προκαλούν υδρόλυση των φωσφορικών εστέρων σε όξινο μέσο. 1 Η προστατική όξινη φωσφατάση (PAP) ανήκει σε αυτή την ομάδα όξινων φωσφατασών. Το κυριότερο κλάσμα προστατικής όξινης φωσφατάσης είναι το ισοένζυμο 2, μια γλυκοπρωτεΐνη, η οποία συντίθεται από τον προστατικό αδένα και έχει μοριακή μάζα περίπου dalton. 2,3 Στον προστατικό αδένα εντοπίζονται υψηλές συγκεντρώσεις όξινης φωσφατάσεις. 4 Σημαντικές ποσότητες συναντώνται επίσης στα αιμοπετάλια, τα οστά, τη σπλήνα, τους νεφρούς και το ήπαρ. Τα εντοπιζόμενα στον ορό ισοένζυμα της όξινης φωσφατάσης προέρχονται από τα ένζυμα που παράγονται από διάφορα κύτταρα ιστών. 1,5,6,7 Η PAP είναι ένα από τα βασικά συστατικά του σπερματικού υγρού και εκκρίνεται και στα ούρα. Φυσιολογικά η ΡΑΡ είναι παρούσα σε χαμηλά επίπεδα στον ορό. Αυξημένα επίπεδα όξινης φωσφατάσης στον ορό σε ασθενείς με προχωρημένο καρκίνο του προστάτη αναφέρθηκαν για πρώτη φορά το 1938 από τους Gutman, et al. 8 Αργοτερα αναφέρθηκε ότι ο ρυθμός αύξησης της ΡΑΡ στον ορό μεταξύ των ασθενών με καρκίνο του προστάτη 12 IMMULITE 2000 PAP (PIEL2KPA-2 {16}, )

13 εξαρτάται από το στάδιο της νόσου Συνεπώς, οι μετρήσεις της PAP χρησιμοποιήθηκαν επικουρικά για την επιβεβαίωση της κλινικής σταδιοποίησης του καρκίνου του προστάτη. 13 Οι μετρήσεις της ΡΑΡ βρήκαν κλινική εφαρμογή στη διαχείριση των ασθενών με καρκίνο του προστάτη. 13,14 Οι μετρήσεις της PAP στον ορό αποδείχθηκαν χρήσιμες στην παρακολούθηση τυχόν υποχώρησης ή υποτροπής μιας προστατικής κακοήθους νεοπλασίας 3,15,16 καθώς και στην αποτίμηση της αποτελεσματικότητας των διαφόρων θεραπευτικών σχημάτων. 17,18 Έτσι, έπειτα από επιτυχείς θεραπευτικές παρεμβάσεις έχει παρατηρηθεί υποχώρηση των τιμών PAP σε φυσιολογικά επίπεδα, ενώ η επανεμφάνιση ή επιμονή της νόσου συνδέεται με αυξημένα επίπεδα προστατικής όξινης φωσφατάσης. 13,17,18 Αρχή της διαδικασίας Η IMMULITE 2000 ΡΑΡ είναι μια ξηρής φάσης, χημειοφωταυγής ανοσομετρική ανάλυση. Κύκλοι επώασης: 1 x 30 λεπτά. Συλλογή δειγμάτων Τα δείγματα πρέπει να λαμβάνονται πριν την πρωκτική εξέταση, τη βιοψία, την προστατεκτομή ή τη μάλαξη του προστάτη, επειδή ο ερεθισμός του προστατικού αδένα μπορεί να οδηγήσει σε αυξημένα επίπεδα PΑΡ που εμμένουν για 24 ή 48 ώρες. 19 Συνιστάται η χρήση της υπερφυγοκέντρου για να καθαριστούν τα λιπιδαιμικά δείγματα. Τα αιμολυμένα δείγματα μπορεί να υποδηλώνουν κακή μεταχείριση του δείγματος πριν την παραλαβή του από το εργαστήριο και τα αποτελέσματα πρέπει να ερμηνεύονται με προσοχή. Η φυγοκέντριση των δειγμάτων ορού πριν την πλήρη πήξη μπορεί να έχει ως αποτέλεσμα τη δημιουργία θρόμβων. Για να αποφευχθούν λανθασμένα αποτελέσματα εξαιτίας της παρουσίας θρόμβων, βεβαιωθείτε ότι πριν τη φυγοκέντριση, το αίμα έχει πήξει πλήρως. Κάποια δείγματα, ιδιαιτέρως αυτά των ασθενών που λαμβάνουν αντιπηκτική θεραπεία, ίσως χρειάζονται μεγαλύτερο χρόνο πήξης. Οι σωλήνες συγκέντρωσης αίματος διαφορετικών εταιρειών μπορεί να δώσουν αποκλίνουσες τιμές, ανάλογα με τα υλικά και τα συμπληρώματα, συμπεριλαμβανομένων των με τζελ ή φυσικών σωληναρίων, των ενεργοποιητών πήξεως και/ή των αντιπηκτικών. Η IMMULITE 2000 ΡΑΡ δεν έχει δοκιμαστεί με όλους τους τύπους σωληναρίων. Απαιτούμενος όγκος: 50 µl ορού. Φύλαξη: Οι ενζυματικές και ανοσολογικές δραστηριότητες του PAP είναι ασταθείς σε τιμή ph = 8 (το ph που προκύπτει από απώλεια CO 2 ). Τα δείγματα πρέπει να τοποθετηθούν στο ψυγείο σε θερμοκρασία 2 8 C εντός 3 ωρών από τη συλλογή. Εάν τα δείγματα δεν αναλυθούν εντός 24 ωρών από τη συλλογή, φυλάξτε τα στην κατάψυξη σε θερμοκρασία 20 C. Το αντιγόνο PAP παραμένει σταθερό στους 20 C επί 6 μήνες. Αν και η επανειλημμένη ψύξη και απόψυξη δεν επηρεάζει σημαντικά τα αποτελέσματα της εξέτασης, τα δείγματα θα πρέπει να διαχωρίζονται, προκειμένου να αποφευχθούν οι επανειλημμένοι κύκλοι ψύξης/απόψυξης. Προειδοποιήσεις και προφυλάξεις Για in vitro διαγνωστική χρήση. ΠΡΟΣΟΧΗ: Η συσκευή αυτή περιέχει υλικό ζωικής προέλευσης και ο χειρισμός της πρέπει να γίνεται ως εάν επρόκειτο περί δυνητικού φορέα και παράγοντα μετάδοσης νόσου. H412 P273, P501 Επιβλαβές για τους υδρόβιους οργανισμούς, με μακροχρόνιες επιπτώσεις. Να αποφεύγεται η ελευθέρωση στο περιβάλλον. Απορρίψτε το περιεχόμενο και τον περιέκτη σε συμμόρφωση με όλους τους τοπικούς, περιφερειακούς και εθνικούς κανονισμούς. Περιέχει: αζίδιο νατρίου, Ρυθμιστές PAP Αντιδραστήρια: Διατήρηση στους 2 8 C. Απόρριψη σύμφωνα με την ισχύουσα νομοθεσία. IMMULITE 2000 PAP (PIEL2KPA-2 {16}, ) 13

14 Ακολουθήστε τις γενικές προφυλάξεις και χειριστείτε όλα τα συστατικά σαν να ήταν φορείς μολυσματικών παραγόντων. Όλα τα υλικά της μεθόδου που προέρχονται από ανθρώπινο αίμα έχουν ελεγχθεί και βρέθηκαν αρνητικά για σύφιλη, για αντισώματα στον HIV 1 και 2, για επιφανειακά αντιγόνα της ηπατίτιδας Β και για αντισώματα της ηπατίτιδας C. Αζίδιο του νατρίου σε συγκεντρώσεις μικρότερες από 0,1 g/dl έχει προστεθεί ως συντηρητικό. Κατά την απόρριψη, ξεπλύνετε με άφθονο νερό για την αποφυγή σχηματισμού πιθανών εκρηξιογόνων μεταλλικών αζιδίων στις αποχετεύσεις από μόλυβδο και χαλκό. Χημειοφωταυγές υπόστρωμα: Αποφύγετε τη μόλυνση και την έκθεση στο άμεσο ηλιακό φως. (βλ. ένθετο). Νερό: Χρησιμοποιήστε απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό. Υλικά που διατίθενται Τα συστατικά αποτελούν ολοκληρωμένο σετ. Οι ετικέτες στο εσωτερικό κουτί είναι απαραίτητες για την ανάλυση. Συσκευασία σφαιριδίων ΡΑΡ (L2PA12) Με ραβδοκώδικα. 200 σφαιρίδια, επικαλυμμένα με μονοκλωνικό αντι-ραρ ποντικού. Σταθερά στους 2 8 C έως την ημερομηνία λήξεως. L2KPA2: 1 συσκευασία. Δοχείο αντιδραστηρίου PAP (L2PAA2) Με ραβδοκώδικα. 11,5 ml αλκαλικής φωσφατάσης (βόειο έντερο) συνδεδεμένης με πολυκλωνικό αντί-ραρ κατσίκας σε ρυθμιστικό διάλυμα. Σταθερό στους 2 8 C έως την ημερομηνία λήξεως. L2KPA2: 1 δοχείο. Πριν τη χρήση, σχίστε την πάνω ετικέτα στο σημείο διάτρησης, χωρίς να καταστρέψετε το ραβδοκώδικα. Αφαιρέστε (ξεκολλήστε) προσεκτικά το κάλυμμα από την επάνω επιφάνεια του δοχείου, και πιέστε το κάλυμμα κάτω προς τους κεκλιμένους οδηγούς-ράγες. Ρυθμιστές PAP (LPAL, LPAH) Δύο φιαλίδια (χαμηλό και υψηλό) ΡΑΡ σε λυοφιλοποιημένη σε μήτρα μη ανθρώπινου ορού/ρυθμιστικού διαλύματος, με συντηρητικό. Κάντε ανασύσταση κάθε φιαλιδίου με 4,0 ml απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό. Αφήστε για 30 λεπτά και ανακινήστε με απαλές κινήσεις ή με αναστροφή. Σταθεροί στους 2 8 C επί 30 μέρες μετά την ανασύσταση ή επί 6 μήνες (διαχωρισμένοι) στους 20 C. L2KPA2: 1 σετ. Πριν κάνετε κάποια ρύθμιση, τοποθετήστε τις κατάλληλες ετικέτες των διαλυμάτων (παρέχονται με το kit) σε δοκιμαστικούς σωλήνες, έτσι ώστε οι ραβδοκώδικες να μπορούν να διαβαστούν από σύστημα του αναλυτή. Συστατικά του Kit που προμηθεύονται ξεχωριστά Πολυαραιωτικό 1 (L2M1Z) Για την αραίωση στο μηχάνημα των υψηλών δειγμάτων. Ένα φιαλίδιο συμπυκνωμένου (έτοιμου για χρήση), επεξεργασμένου, φυσιολογικού ανθρωπίνου ορού με ΡΑΡ σε μη ανιχνεύσιμα επίπεδα με συντηρητικό. Διατηρείται για 30 μέρες (μετά το άνοιγμα) στους 2 8 C ή για 6 μήνες (διαχωρισμένο) στους 20 C. L2M1Z: 25 ml. Ετικέτες με ραβδοκώδικες παρέχονται για χρήση με το αραιωτικό. Πριν από τη χρήση, τοποθετείστε μια κατάλληλη ετικέτα σε ένα δοκιμαστικό σωλήνα 16 x 100 mm, έτσι ώστε οι ραβδοκώδικες να μπορούν να διαβαστούν από το σύστημα του αναλυτή. L2M1Z: 3 ετικέτες. L2SUBM: Χημειοφωταυγές υπόστρωμα L2PWSM: Πλυστικό του ανιχνευτή L2KPM: Kit καθαρισμού του ανιχνευτή LRXT: Σωλήνες αντίδρασης (μιας χρήσεως) L2ZT: 250 δοκιμαστικοί σωλήνες για αραίωση του δείγματος (16 x 100 mm) L2ZC: 250 καπάκια για σωλήνες αραίωσης δείγματος PACM: Μονάδα ελέγχου ΡΑΡ (τριών επιπέδων) 14 IMMULITE 2000 PAP (PIEL2KPA-2 {16}, )

15 Απαιτούνται επίσης Απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό, δοκιμαστικοί σωλήνες, δείγματα ελέγχου. Διαδικασία της ανάλυσης Σημειώστε ότι για το βέλτιστο αποτέλεσμα, είναι σημαντικό να ακολουθηθούν όλες οι τυπικές διαδικασίες όπως ορίζονται στο εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE Βλέπε το εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000 για: προετοιμασία, στήσιμο, αραιώσεις, ρυθμίσεις, ανάλυση και διαδικασίες ποιοτικού έλέγχου. Συνιστώμενος χρόνος μεταξύ των ρυθμίσεων: 2 εβδομάδες. Δείγματα ποιοτικού ελέγχου: Χρησιμοποιήστε δείγματα ελέγχου ή διαθέσιμα δείγματα ορού τουλάχιστον δύο επιπέδων (χαμηλό και υψηλό) PΑΡ. Αναμενόμενες τιμές Με βάση τη σχέση της με την IMMULITE ΡΑΡ της (βλ. Σύγκριση της μεθόδου), η ανάλυση αναμένεται να έχει ουσιαστικά τα ίδια εύρη αναφοράς. Οι τιμές PAP ελήφθησαν με χρήση της ανάλυσης IMMULITE PAP σε 51 δείγματα ενηλίκων ανδρών. Οι ηλικίες των ατόμων αυτών κυμαίνονταν από 19 έως 68 έτη. Η κατανομή των τιμών ΡΑΡ ήταν κανονική λογαριθμική. Η διάμεση τιμή ήταν 1,70 ng/ml (μέση τιμή PAP 1,79 ng/ml για τα μη επεξεργασμένα δεδομένα και 1,70 ng/ml για τα λογαριθμικά μετασχηματισθέντα δεδομένα).η τυπική απόκλιση για τα μη επεξεργασμένα δεδομένα ήταν 0,59 ng/ml και 1,37 για τα λογαριθμικά μετασχηματισθέντα δεδομένα. Το άνω εκατοστημόριο 97,5 ήταν 3,4 ng/ml. Μια μεγαλύτερη μελέτη σε 403 ενήλικες άνδρες με χρήση της ανοσοραδιομετρικής ανάλυσης ΡΑΡ της, η οποία δίνει ισότιμα ποσοτικά αποτελέσματα, έδωσε ουσιαστικά ταυτόσημο άνω εκατοστημόριο 97,5 με 3,49 ng/ml. Συνεπώς, αναμένεται η ανάλυση να έχει εύρος αναφοράς για υγιείς ενήλικες μικρότερο από 3,5 ng/ml. Αυξημένες συγκεντρώσεις στον ορό παρατηρούνται συχνά σε ασθενείς με καρκίνο του προστάτη, ενώ εμφανίζονται και σε ασθενείς με μη προστατικό καρκίνο, καθώς και σε ορισμένους ασθενείς με μη κακοήθη νόσο του προστάτη. 8,13,18 Επιπλέον, οι τιμές αναφοράς διαμορφώθηκαν μετά από μια μελέτη με IMMULITE ΡΑΡ σε δείγματα ορού ενηλίκων εθελοντών, η οποία συμπεριέλαβε άνδρες ηλικίας 20 έως 70 ετών (κεντρικό εύρος 95%: έτη, διάμεση τιμή: 40 έτη). Τα υπό εξέταση άτομα ήταν φαινομενικά υγιή, όπως διαπιστώθηκε από ένα ερωτηματολόγιο. Δείγματα αίματος συλλέχθηκαν στη Γαλλία, τη Γερμανία, τις Κάτω Χώρες και την Πορτογαλία. Τα αποτελέσματα παρήχθησαν από ένα ανεξάρτητο εργαστήριο στις Κάτω Χώρες χρησιμοποιώντας τα κιτ IMMULITE. (Τα δείγματα συλλέχθηκαν σε απλούς γυάλινους σωλήνες χωρίς παρεμποδιστές πηκτών, τζελ, ή προσθετικών που προκαλούν θρόμβους, και αναλύθηκαν εις απλούν.) Οι διάμεσες τιμές και το εκατοστημόριο 95% φαίνονται στον κατωτέρω πίνακα. Τα εκατοστημόρια καθορίστηκαν μη παραμετρικά. Ομάδα Ενδ. τιμή 95% Μονάδες n Άνδρες 1,4 2,2 ng/ml 425 Θεωρήστε αυτά τα όρια μόνο ως κατευθυντήριες γραμμές. Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να θεσπίσει τα δικά του εύρη αναφοράς. Περιορισμοί Τα δείγματα πρέπει να λαμβάνονται πριν την πρωκτική εξέταση, τη βιοψία, την προστατεκτομή ή τη μάλαξη του προστάτη, επειδή ο ερεθισμός του προστατικού αδένα μπορεί να οδηγήσει σε αυξημένα επίπεδα PΑΡ που εμμένουν για ώρες. 19 Οι ενζυματικές και ανοσολογικές δραστηριότητες της PAP είναι ασταθείς σε ph = 8 (το ph που προκύπτει από απώλεια CO 2 ). Τα δείγματα ορού πρέπει να φυλάσσονται στους 2 8 C μετά τη συλλογή. Για παρατεταμένη φύλαξη των δειγμάτων απαιτείται κατάψυξη τουλάχιστον στους 20 C. Ο λανθασμένος χειρισμός του δείγματος μπορεί να οδηγήσει σε παραπλανητικά αποτελέσματα με ενδεχόμενες σοβαρές κλινικές συνέπειες. IMMULITE 2000 PAP (PIEL2KPA-2 {16}, ) 15

16 Η επίδραση των φαρμάκων στις μετρήσεις του PAP δεν έχει διερευνηθεί πλήρως και ενδέχεται να επηρεάζει τα αποτελέσματα της ανάλυσης. Ετεροφυλικά αντισώματα στον ανθρώπινο ορό μπορεί να αντιδράσουν με τις ανοσοσφαιρίνες που περιέχονται στα συστατικά της μεθόδου προκαλώντας αλληλεπιδράσεις με τις in vitro ανοσοαναλύσεις. [βλ. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Δείγματα ασθενών που εκτίθενται συστηματικά σε ζώα ή προϊόντα ζωικού ορού μπορούν να παρουσιάσουν αυτού του τύπου την αλληλεπίδραση που προκαλεί δυνητικά ένα ανώμαλο αποτέλεσμα. Αυτά τα αντιδραστήρια έχουν μορφοποιηθεί έτσι, ώστε να ελαχιστοποιούν τον κίνδυνο της αλληλεπίδρασης. Παρόλ αυτά, μπορεί να εμφανιστούν πιθανές αλληλεπιδράσεις μεταξύ σπάνιων ορών και των συστατικών της μεθόδου. Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα που λαμβάνονται από αυτή τη μέθοδο θα πρέπει πάντα να χρησιμοποιούνται σε συνδυασμό με τις κλινικές εξετάσεις, το ιατρικό ιστορικό του ασθενούς και άλλα ευρήματα. Απόδοση Βλέπε Πίνακες και Γραφήματα για αντιπροσωπευτικά δεδομένα της εκτέλεσης της μεθόδου. Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε ng/ml. (Εκτός αν κάτι σημειώνεται διαφορετικά, όλα πραγματοποιήθηκαν σε δείγματα ορού, που συλλέχθηκαν σε σωλήνες χωρίς παρεμποδιστές πηκτών ή προσθετικών που προκαλούν θρόμβους.) Εύρος καμπύλης: έως 100 ng/ml. Αναλυτική ευαισθησία: 0,02 ng/ml. Υψηλή δόση φαινομένου Hook: Δεν παρατηρείται έως τα ng/ml. Ακρίβεια: Τα δείγματα υφίσταντο αναλύσεις εις διπλούν για διάστημα 20 ημερών, δύο τρεξίματα την ημέρα, για σε σύνολο 40 τρεξιμάτων και 80 επαναλήψεων. (Βλ. πίνακα Precision ) Γραμμικότητα: Τα δείγματα αναλύθηκαν σε διάφορες αραιώσεις. (Βλ. πίνακα "Linearity" για αντιπροσωπευτικά δεδομένα). Ανάκτηση: Κάποια δείγματα (1 με 19) εμπλουτίστηκαν με τρία διαλύματα ΡΑΡ (100, 300 και 900 ng/ml) και αναλύθηκαν. (Βλ. πίνακα "Recovery" για αντιπροσωπευτικά δεδομένα.) Ειδικότητα: Το αντίσωμα έχει υψηλή εξειδίκευση στην ΡΑΡ. (Βλ. πίνακα "Specificity".) Χολερυθρίνη: Η παρουσία χολερυθρίνης σε συγκεντρώσεις έως 200 mg/l δεν επηρεάζει τα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Αιμόλυση: Η παρουσία αιμοσφαιρίνης σε συγκεντρώσεις έως 512 mg/dl δεν επηρεάζει τα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Λιπιδαιμία: Η παρουσία τριγλυκεριδίων σε συγκεντρώσεις έως mg/dl δεν επηρεάζει τα αποτελέσματα της εξέτασης μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Σύγκριση της μεθόδου: Η ανάλυση συγκρίθηκε με την IMMULITE ΡΑΡ σε 71 δείγματα. (Εύρος συγκέντρωσης: περίπου 1,5 έως 90 ng/ml, βλ. γράφ.) Η ανάλυση γραμμικής παλινδρόμησης έδωσε τα ακόλουθα αποτελέσματα: (IML 2000) = 1,03 (IML) + 0,73 ng/ml r = 0,995 Μέσοι όροι: 33 ng/ml (IMMULITE 2000) 31 ng/ml (IMMULITE) Τεχνική Υποστήριξη Για τεχνική υποστήριξη αποταθείτε στον αντιπρόσωπο της χώρας σας. Το Σύστημα Ποιότητας της Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. είναι επικυρωμένο με ISO 13485: IMMULITE 2000 PAP (PIEL2KPA-2 {16}, )

17 Polski IMMULITE 2000 PAP Przeznaczenie: Test diagnostyczny in vitro dla analizatorów systemów IMMULITE 2000 przeznaczony do ilościowego oznaczenia fosfatazy kwasu sterczowego (PAP ang. prostatic acid phosphatase) w surowicy. Jest pomocny w monitorowaniu leczenia. Numer katalogowy: L2KPA2 (200 testów) Kod testu: PAP Kolor: ciemnoniebieski Oznaczenia poziomu PAP nie należy traktować jako jednoznacznego testu w kierunku złośliwej zmiany, ponieważ inne czynniki, włączając łagodny przerost prostaty, niedokrwienie gruczołu sterczowego, a także manipulacje w obrębie prostaty mogą podnosić stężenie PAP w surowicy. W związku z powyższym, wyniki oznaczenia PAP powinny być zawsze interpretowane w połączeniu z historią choroby oraz wynikami innych badań diagnostycznych. Stężenia PAP w danej próbce określane przy pomocy testów różnych firm mogą się różnić ze względu na odmienną technikę i specyficzność odczynników. Wyniki wydawane lekarzowi przez laboratorium muszą zawierać nazwę metody. Wartości uzyskane przy użyciu różnych metod oznaczania PAP nie mogą być stosowane zamiennie. Przed zmianą metody oznaczania laboratorium powinno ustalić wartości odniesienia dla pacjentów pozostających w trakcie monitorowania. Wprowadzenie Fosfatazy kwaśne stanowią różnorodną grupę izoenzymów klasyfikowanych na podstawie ich narastającej ruchliwości elektroforetycznej. Izoenzymy te posiadają zdolność do hydrolizowania estrów fosforanowych w środowisku kwaśnym. 1 Kwaśna fosfataza sterczowa (PAP) wchodzi w skład grupy kwaśnych fosfataz. Główną frakcją kwaśnej fosfatazy sterczowej jest izoenzym 2, glikoproteina syntetyzowana przez gruczoł sterczowy, o masie molekularnej około daltonów. 2,3 W wysokich stężeniach kwaśna fosfataza występuje w gruczole sterczowym. 4 Znaczące ilości znajdują się także w płytkach krwi, kościach, śledzionie, nerkach i wątrobie. Izoenzymy kwaśnej fosfatazy obecne w surowicy pochodzą z enzymów różnych komórek tkanek. 1,5,6,7 PAP jest głównym składnikiem płynu nasiennego, wydzielana jest także do moczu. W surowicy PAP prawidłowo występuje w niskich poziomach. Po raz pierwszy podniesione stężenia kwaśnej fosfatazy w surowicy chorych na zaawansowaną postać raka prostaty zostały opisane w roku 1938 przez Gutmana i współpracowników. 8 Następnie stwierdzono, że częstość, z jaką podniesione poziomy PAP w surowicy występują w populacji chorych na raka prostaty wzrastają wraz z postępem choroby W rezultacie pomiar PAP został przyjęty jako pomocniczy w określaniu klinicznego stadium raka prostaty. 13 Pomiar stężenia PAP znalazł kliniczne zastosowanie w postępowaniu z chorymi na raka prostaty. 13,14 Określanie poziomów PAP w surowicy jest przydatne przy monitorowaniu remisji 3,15,16 i nawrotów raka prostaty oraz przy ocenie efektywności różnych metod leczenia. 17,18 W związku z tym zaobserwowano, że powrót wartości PAP w surowicy do poziomów prawidłowych towarzyszy skutecznej interwencji terapeutycznej, podczas gdy pojawienie się nawrotu lub pozostanie resztkowej formy choroby łączy się podniesionymi stężeniami PAP. 13,17,18 Zasada postępowania IMMULITE 2000 PAP jest chemiluminescencyjnym testem imunometrycznym fazy stałej. Cykle inkubacji: 1 30 minut. Preparatyka próbek Próbki do badania powinny być pobrane przed badaniem per rectum, biopsją, prostatektomią lub masażem prostaty, ponieważ manipulacja w obrębie gruczołu IMMULITE 2000 PAP (PIEL2KPA-2 {16}, ) 17

18 sterczowego może prowadzić do wzrostu poziomu PAP, utrzymującego się do 24 lub 48 godzin. 19 Zalecane jest klarowanie próbek lipemicznych przez ultrawirowanie. Hemoliza próbki może świadczyć o nieprawidłowym postępowaniu z próbką na etapie przedlaboratoryjnym. Fakt ten należy brać pod uwagę przy interpretacji wyników. Odwirowanie próbek surowicy przed zakończeniem wykrzepiania może doprowadzić do pojawienia się w nich fibryny. W celu wyeliminowania błędnych wyników spowodowanych obecnością fibryny przed przystąpieniem do wirowania należy mieć pewność, że skrzep jest ostatecznie uformowany. Niektóre próbki, a zwłaszcza pochodzące od osób poddanych leczeniu antykoagulantami, wymagają dłuższego czasu na wytworzenie skrzepu. Stosowane przy pobieraniu krwi probówki różnych producentów mogą różnie wpływać na uzyskiwane wyniki. Istotny jest materiał i domieszki, np. żel lub bariery fizjologiczne, aktywatory krzepnięcia oraz/lub antykoagulanty. Test IMMULITE 2000 PAP nie został sprawdzony przy użyciu wszystkich możliwych wariantów probówek. Wymagana objętość: 50 µl surowicy. Przechowywanie: Zarówno enzymatyczna jak i immunologiczna aktywność PAP jest niestała w ph 8 (uzyskane ph po utracie CO 2 ). Próbki powinny zostać zamrożone w temp. 2 8 C i odłożone na przechowanie w ciągu 3 godzin od pobrania. Jeśli pomiar nie nastąpi w czasie 24 godzin od pobrania materiału, próbki należy zamrozić i przechować w temp. 20 C. Antygen PAP jest stabilny w temp. 20 C do 6 miesięcy. Pomimo, że rozmrażanie i ponowne zamrażanie materiału nie ma znaczącego wpływu na oznaczenie, należy materiał rozporcjować, by uniknąć tych czynności. Ostrzeżenia i środki ostrożności Do użytku diagnostycznego in vitro. PRZESTROGA: Materiał pochodzenia zwierzęcego. Postępować tak jak z materiałem potencjalnie zakaźnym. H412 P273, P501 Działa szkodliwie na organizmy wodne, powodując długotrwałe skutki. Unikać uwolnienia do środowiska. Pojemnik i zawartość usuwać zgodnie z wszystkimi lokalnymi, regionalnymi i krajowymi przepisami. Zawiera: azydek sodu; PAP Kalibratory Odczynniki: Przechowywać w temp. 2 8 C. Utylizować zgodnie z mającymi zastosowanie przepisami. Zachować ogólne środki ostrożności i obchodzić się ze wszystkimi składnikami, zakładając, że mogą one stanowić źródło zakażenia. Materiał źródłowy pochodzący z ludzkiej krwi został przetestowany i uznany za niereaktywny w przypadku syfilisu, przeciwciał HIV 1 i 2, antygenu powierzchniowego żółtaczki typu B oraz przeciwciał żółtaczki typu C. Azydek sodu w stężeniu mniejszym niż 0,1 g/dl został dodany jako środek konserwujący. Wykorzystane odczynniki spłukiwać dużą ilością wody, aby zapobiec osadzaniu się stwarzających potencjalne zagrożenie wybuchem azydków metalicznych w rurach ołowianych lub miedzianych. Substrat chemiluminescencyjny: Unikać zanieczyszczenia i chronić przed bezpośrednim działaniem światła słonecznego. (patrz ulotka) Woda: Używać wody destylowanej lub dejonizowanej. Elementy zestawu Składniki tworzą dopasowany zestaw. Etykiety po wewnętrznej stronie pudełka są niezbędne do wykonania oznaczenia. 18 IMMULITE 2000 PAP (PIEL2KPA-2 {16}, )

19 Pojemnik z kulkami PAP (L2PA12) Z kodem kreskowym. 200 kulek opłaszczonych monoklonalnym mysim przeciwciałem anty-pap. Stabilne w temp. 2 8 C przed upływem daty ważności. L2KPA2: 1 pojemnik. Klin odczynnikowy PAP (L2PAA2) Z kodem kreskowym. 11,5 ml zasadowej fosfatazy (izolowanej z jelita cieląt) sprzęgniętej z kozim poliklonalnym przeciwciałem anty- PAP w buforze. Stabilne w temp. 2 8 C przed upływem daty ważności. L2KPA2: 1 klin. Przed użyciem zerwać taśmę zabezpieczającą w wyperforowanym miejscu, nie uszkadzając kodu kreskowego. Usunąć foliową plombę w górnej części klina. Wsunąć przesuwne zamknięcie w dół w prowadnice w pokrywie odczynnika. Kalibratory PAP (LPAL, LPAH) Dwie fiolki (niska i wysoka) zawierające PAP w zliofilizowanej buforowej matrycy na bazie surowicy pochodzenia zwierzęcego, ze środkiem konserwującym. Zawartość każdej fiolki rekonstytuować 4,0 ml wody destylowanej lub dejonizowanej. Odstawić na 30 minut, a następnie wymieszać, delikatnie obracając lub odwracając. Po rekonstutucji stabilne w 2 8 C przez 30 dni lub przez 6 miesięcy (rozpipetowane) w temp. 20 C. L2KPA2: 1 zestaw. Przed przystąpieniem do kalibracji umocuj na probówkach odpowiednie nalepki z kodem kreskowym (dostarczane z zestawem) rozpoznawane przez czytnik kodów kreskowych aparatu. Elementy zestawu dostarczane odrębnie Multirozcieńczalnik 1 (L2M1Z) Do rozcieńczania w aparacie próbek o wysokim stężeniu. Jedna fiolka skoncentrowanej (gotowej do użycia), spreparowanej, prawidłowej surowicy ludzkiej zawierającej niewykrywalne do niskich stężeń PAP, ze środkiem konserwujacym. Stabilne w temp. 2 8 C przez 30 dni po otwarciu lub przez 6 miesięcy (rozpipetowane) w temp. 20 C. L2M1Z: 25 ml. Nalepki z odpowiednimi kodami kreskowymi są dostarczane wraz z rozcieńczalnikiem. Przed użyciem umieścić odpowiednią nalepkę na probówce o wymiarach 16x100 mm, by umożliwić rozpoznanie kodów przez czytnik aparatu. L2M1Z: 3 nalepki. L2SUBM: Substrat chemiluminescencyjny L2PWSM: Roztwór płuczący L2KPM: Zestaw do oczyszczania LRXT: Probówki reakcyjne (jednorazowe) L2ZT: 250 probówek (o wymiarach 16 x 100 mm) do rozcieńczania próbek L2ZC: 250 korków do probówek na rozcieńczalnik PACM: Moduł kontrolny PAP (trójpoziomowy) Również wymagane woda destylowana lub dejonizowana, probówki, kontrole. Procedura oznaczania próbek Przestrzeganie procedur dotyczących utrzymania aparatu, zawartych w Podręczniku operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000 poprawia charakterystykę uzyskiwanych wyników. Procedury: przygotowania aparatu, ustawień aparatu, przygotowania i rozcieńczania próbek, rekalibracji, oznaczenia i kontroli jakości zgodnie z Podręcznikiem operatora do obsługi systemów IMMULITE Zalecany odstęp pomiędzy rekalibracjami: 2 tygodnie. Próbki kontrolne: Stosować kontrole lub zestawy surowic o co najmniej dwu poziomach stężenia (niskim i wysokim) PAP. Oczekiwane wartości W oparciu o podobieństwo z zestawem IMMULITE PAP (patrz Porównanie metod) można spodziewać się, że zakresy referencyjne dla tego testu będą zasadniczo takie same. Wartości dla PAP uzyskano przy użyciu testu IMMULITE PAP w grupie 51 próbek surowic pobranych od dorosłych mężczyzn w wieku od 19 do 68 lat. Rozkład wartości PAP był normalnym rozkładem logarytmicznym. Mediana wyniosła 1,70 ng/ml (średnia wartość IMMULITE 2000 PAP (PIEL2KPA-2 {16}, ) 19

20 PAP wynosiła 1,79 ng/ml dla danych wyjściowych i 1,70 ng/ml dla danych przekształconych w logarytmiczne). Odchylenie standardowe dla danych wyjściowych było równe 0,59 ng/ml, dla przekształconych logarytmicznie: 1,37. Górne 97,5% wyniosło 3,4 ng/ml. Szersze badania w wykonane w grupie 403 zdrowych mężczyzn radioimmunometrycznym testem o porównywalnych wynikach, dały zasadniczo identyczną wartość górnych 97,5% równą 3,49 ng/ml. W związku z tym, za zakres referencyjny metody dla zdrowych, dorosłych mężczyzn można przyjąć wartości poniżej 3,5 ng/ml. Podniesione stężenia w surowicy obserwuje się często u chorych na raka prostaty, lecz również u chorych z innymi rodzajami raka, a także chorych u niektórych chorych z niezłośliwymi schorzeniami gruczołu sterczowego. 8,13,18 Dodatkowe badania referencyjne dla IMMULITE PAP prowadzono przy użyciu próbek surowic od dorosłych ochotników płci męskiej w wieku od około 20 do 70 lat (środkowe 95%: lat, mediana: 40 lat). Zdrowie ochotników zostało uznane za dobre w oparciu o kwestionariusz. Próbki krwi pobrano we Francji, Niemczech, Holandii i Portugalii. Wyniki zostały opracowane przez niezależne laboratorium w Holandii w oparciu o zastawy IMMULITE. (Krew pobierano do zwykłych probówek szklanych bez antykoagulantów, barier żelowych, czy substancji przyspieszających krzepnięcie; dokonano pojedynczego oznaczenia.) Wartość mediany i 95-ego percentyla przedstawiono w tabeli poniżej. Percentyle określono nieparametrycznie. Grupa Mediana 95 percentyl Jednostki Mężczyźni ng/ml 425 Powyższe wyznaczniki należy traktować jedynie jako orientacyjne. Każde laboratorium powinno wyznaczyć własne zakresy referencyjne. n Ograniczenia Próbki do badania powinny być pobrane przed badaniem per rectum, biopsją, prostatektomią lub masażem prostaty, ponieważ manipulacja w obrębie gruczołu sterczowego może prowadzić do wzrostu poziomu PAP, utrzymującego się nawet przez okres od 24 do 48 godzin. 19 Zarówno enzymatyczna jak i immunologiczna aktywność PAP jest niestała w ph = 8 (uzyskane ph po utracie CO 2 ). Próbki surowicy powinny być przechowywane w temp. 2 8 C zaraz po pobraniu. Dłuższe przechowywanie wymaga zamrożenia materiału w temp. 20 C lub niższej. Nieprawidłowe obchodzenie się z próbką może prowadzić do nieprawidłowych wyników o potencjalnie poważnych konsekwencjach klinicznych. Wpływ leków na pomiar PAP nie został dokładnie zbadany i może stanowić potencjalne źródło interferencji przy oznaczaniu. Przeciwciała heterofilne obecne w surowicy ludzkiej mogą wchodzić w reakcję z immunoglobulinami będącymi składnikami testu immunologicznego, wpływając na przebieg oznaczania in vitro. [Porównaj: Boscato L.M., Stuart M.C.: Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin. Chem. 1988: 34: (Przeciwciała heterofilne - problem wszystkich testów immunologicznych. Clin. Chem. 1988: 34: 27-33)] Wpływ przeciwciał heterofilnych może ujawnić się w oznaczeniach wykonywanych na próbkach pobranych od osób mających stały kontakt ze zwierzętami lub z produktami na bazie surowicy zwierzęcej, stanowiąc potencjalną przyczynę błędnych wyników. W teście ryzyko interferencji przeciwciał heterofilnych zostało zminimalizowane przez odpowiedni dobór proporcji odczynników, tym niemniej mogą wystąpić oddziaływania pomiędzy rzadkimi rodzajami surowic a składnikami testu. W postępowaniu diagnostycznym wyniki uzyskane tą metodą powinny być zawsze interpretowane w połączeniu z badaniem klinicznym pacjenta, jego historią choroby oraz innymi okolicznościami. 20 IMMULITE 2000 PAP (PIEL2KPA-2 {16}, )

21 Parametry testu Dane charakteryzujące test przedstawiono w Tabelach i rysunkach. Wyniki wyrażono w ng/ml. (O ile nie podano inaczej, wszystkie wyniki dotyczą próbek surowicy zebranych w probówkach bez bariery żelowej lub domieszek przyspieszających krzepnięcie.) Zakres kalibracji: do 100 ng/ml Czułość analityczna: 0,02 ng/ml Efekt wysokiej dawki (High-Dose Hook Effect): Niestwierdzany do ng/ml. Precyzja: Próbki oznaczano w duplikatach w ciągu 20 dni, po dwie serie dziennie, otrzymując 40 serii i 80 powtórzeń (patrz tabela Precyzja). Liniowość: Oznaczano próbki poddane różnym rozcieńczeniom. (Aby porównać reprezentatywne wyniki, patrz tabela Liniowość.) Odzysk: Oznaczano próbki wzbogacane w stosunku objętościowym 1 do 19 trzema roztworami PAP o stężeniach: 100, 300 i 900 ng/ml. (Aby porównać reprezentatywne wyniki, patrz tabela Odzysk.) Specyficzność: Przeciwciało jest wysoce specyficzne dla PAP. (patrz tabela Specyficzność). Bilirubina: Obecność bilirubiny w stężeniu do 200 mg/l nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Hemoliza: Obecność hemoglobiny w stężeniu do 512 mg/dl nie wpływa na wyniki w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Lipemia: Obecność trójglicerydów w stężeniu do mg/dl nie wpływa na wyniki w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Porównanie metod: Oznaczenie to porównano z testem IMMULITE PAP w grupie 71 próbek. (Zakres stężeń: od ok. 1,5 do 90 ng/ml. Porównaj wykres.) Równanie regresji liniowej: (IML 2000) = 1,03 (IML) + 0,73 ng/ml r = 0,995 Średnie: 33 ng/ml (IMMULITE 2000) 31 ng/ml (IMMULITE) Pomoc techniczna i konsultacje Krajowy Dystrybutor udziela wszechstronnej pomocy technicznej. System Kontroli Jakości Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. posiada Certyfikat Jakości ISO 13485:2003. IMMULITE is a trademark of Siemens Healthcare Diagnostics Siemens Healthcare Diagnostics. All rights reserved. Made in: UK Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. Glyn Rhonwy, Llanberis, Gwynedd LL55 4EL United Kingdom PIEL2KPA 2 {16} Changes in this Edition: cc#eu22565: 1) Removed references to discontinued products. 2) Under Warnings and Precautions, caution statement, required GHS pictograms/signal words/hazard and precautionary codes and statements, offending chemicals and sources. 3) Changed Origin: UK to Made in: UK. 4) Updated the manufacturer address to include Glyn Rhonwy. 5) In Understanding the Symbols, revised the symbol for catalog number, added a GHS pictogram for health hazard, and updated existing symbols with GHS pictograms and terminology for exclamation mark, corrosion, skull and crossbones, and environment. Understanding the Symbols Understanding the Symbols En English Vysvětlivky symbolů Επεξήγηση των συμβόλων Znaczenie symboli Cz Česky El Ελληνικά Pl Polski The following symbols may appear on the product labeling: / Na štítku výrobku mohou být uvedeny následující symboly: / Τα ακόλουθα σύμβολα ενδέχεται να εμφανίζονται στην επισήμανση του προϊόντος: / Na etykietach produktu mogą pojawiać się poniższe symbole: IMMULITE 2000 PAP (PIEL2KPA-2 {16}, ) 21

22 Symbol Definition En: In vitro diagnostic medical device Cz: Zdravotnický prostředek pro in vitro diagnostiku El: In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή Pl: Sprzęt do medycznej diagnostyki in vitro En: Catalog Number Cz: Katalogové číslo El: Αριθμός καταλόγου Pl: Numer katalogowy En: Manufacturer Cz: Výrobce El: Κατασκευαστής Pl: Producent En: Authorized Representative in the European Community Cz: Autorizované zastoupení v Evropské unii El: Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα Pl: Autoryzowany przedstawiciel w Unii Europejskiej En: CE Mark Cz: CE značka El: Σήμανση CE Pl: Znak CE En: CE Mark with identification number of notified body Cz: CE značka s identifikačním číslem notifikovaného orgánu El: Σήμανση CE με αριθμό αναγνώρισης του φορέα πιστοποίησης Pl: Znak CE z numerem identyfikacyjnym jednostki notyfikowanej En: Consult instructions for use Cz: Postupujte podle návodu k použití El: Συμβουλευτείτε τις οδηγίες λειτουργίας Pl: Zapoznać się z instrukcją użycia En: Caution! Potential Biohazard Cz: Pozor! Potenciální biohazard El: Πρoσοχή! Δυνητικός βιολογικός κίνδυνος Pl: Uwaga! Potencjalne zagrożenie biologiczne LOT Symbol Definition En: Temperature limitation (2 8 C) Cz: Teplotní rozsah (2 8 C) El: Περιορισμός θερμοκρασίας (2 8 C) Pl: Zakres temperatury (2 8 C) En: Upper limit of temperature ( -20 C) Cz: Horní teplotní limit ( -20 C) El: Ανώτερο όριο θερμοκρασίας ( -20 C) Pl: Górny zakres temperatury ( -20 C) En: Lower limit of temperature ( 2 C) Cz: Spodní teplotní limit ( 2 C) El: Κατώτερο όριο θερμοκρασίας ( 2 C) Pl: Dolny zakres temperatury ( 2 C) En: Do not freeze (> 0 C) Cz: Nezmrazovat (> 0 C) El: Μην καταψυχετε (> 0 C) Pl: Nie zamrażać (> 0 C) En: Do not reuse Cz: Pro jednorázové použití El: Μην κάνετε επαναληπτική χρήση Pl: Nie używać powtórnie En: Keep away from sunlight Cz: Chraňte před slunečním světlem El: Διατηρείτε μακριά από το ηλιακό φως Pl: Chronić przed światłem słonecznym En: Batch code Cz: Šarže El: Κωδικός παρτίδας Pl: Kod serii En: Contains sufficient for (n) tests Cz: Dostatečné množství pro (n) testů El: Περιεχόμενο επαρκές για (n) εξετάσεις Pl: Zawartość wystarczająca na (n) testów En: Date format (year-month) Cz: Formát data (rok-měsíc) El: Μορφή ημερομηνίας (έτος-μήνας) Pl: Zapis daty (rok-miesiąc) 22 IMMULITE 2000 PAP (PIEL2KPA-2 {16}, )

23 Symbol Definition En: Use by Cz: Spotřebujte do El: Ημερομηνία λήξης Pl: Wykorzystać do En: Health Hazard Cz: Zdravotní riziko El: Κίνδυνος για την υγεία Pl: Zagrożenie dla zdrowia ADJUSTOR L ADJUSTOR H Symbol Definition En: Adjustor, low Cz: Kalibrátor, nízký El: Ρυθμιστής, χαμηλό Pl: Kalibrator, niski En: Adjustor, high Cz: Kalibrátor, vysoký El: Ρυθμιστής, υψηλό Pl: Kalibrator, wysoki En: Exclamation Mark Cz: Vykřičník El: Θαυμαστικό Pl: Wykrzyknik En: Corrosion Cz: Koroze El: Διάβρωση Pl: Działanie żrące En: Skull and Crossbones Cz: Lebka se zkříženými hnáty El: Νεκροκεφαλή με διασταυρούμενα οστά Pl: Czaszka i skrzyżowane piszczele En: Environment Cz: Prostředí El: Περιβάλλον Pl: Środowisko ADJUSTOR AB DIL CONTROL CONTROL 1 CONTROL 2 CONTROL 3 En: Adjustor Antibody Cz: Protilátka proti kalibrátoru El: Ρυθμιστής αντισώματος Pl: Przeciwciało Kalibratora En: Sample Diluent Cz: Diluent Vzorků El: Αραιωτικό δείγματος Pl: Rozcieńczalnik próbek En: Control Cz: Kontrola El: Έλεγχος Pl: Kontrola BEAD PACK TEST UNIT REAG WEDGE REAG WEDGE A REAG WEDGE B REAG WEDGE D ADJUSTOR En: Bead Pack Cz: Zásobník s kuličkami El: Συσκευασία σφαιριδίων Pl: Pojemnik z kulkami En: Test Unit Cz: Testovací Jednotky El: Μονάδες ανάλυσης Pl: Jednostki testowe En: Reagent Wedge Cz: Reagencie El: Δοχείο Αντιδραστηρίων Pl: Klin odczynnikowy En: Adjustor Cz: Kalibrátor El: Ρυθμιστής Pl: Kalibrator CONTROL + CONTROL + L CONTROL CONTROL AB En: Positive Control Cz: Pozitivní kontrola El: Θετικός Έλεγχος Pl: Kontrola dodatnia En: Low Positive Control Cz: Mírně pozitivní kontrola El: Χαμηλός Θετικός Έλεγχος Pl: Kontrola nisko dodatnia En: Negative Control Cz: Negativní kontrola El: Αρνητικός Έλεγχος Pl: Kontrola ujemna En: Control Antibody Cz: Protilátka proti kontrole El: Έλεγχος αντισώματος Pl: Przeciwciało Kontrolne IMMULITE 2000 PAP (PIEL2KPA-2 {16}, ) 23