MIKROBIOLOŠKI PRAKTIKUM Školska 2014/2015 KATEDRA ZA MIKROBIOLOGIJU Nastavnici: Prof. dr Branka Vuković-Gačić, šef Katedre Prof. dr Jelena Knežević-Vukčević Prof. dr Slaviša Stanković Doc. dr Tanja Berić tanjab@bio.bg.ac.rs Doc. dr Biljana Nikolić biljanan@bio.bg.ac.rs Saradnici: dr Dragana Mitić-Ćulafić Stoimir Kolarević stoimirk@bio.bg.ac.rs Ivica Dimkić ivicad@bio.bg.ac.rs Ivan Nikolić ice.nikolic@gmail.com Bojana Jovanović bojana.jovanovic@bio.bg.ac.rs Jovana Kostić kosticjovana@hotmail.com
Program praktičnih vežbi i predavanja za školsku 2014/2015: 1. Hranljive podloge (Priprema podloga, sterilizacija, razlivanje) 2. Određivanje krive rasta bakterija 3. Izolovanje i identifikacija bakterija (Bacillus sp.); Izolacija producenta antibiotika i određivanje antimikrobnog spektra izolata 4. Mikrobiološki pregled vode, vazduha i hrane. Studentski projekti (svi studenti će biti podeljeni u tri grupe i učestvovaće u izradi projekata na kraju kursa) 1. Identifikacija nepoznate bakterijske kulture do nivoa roda/vrste 2. Virusi: priprema stoka infekcijom osetljivog soja i određivanje titra virusa 3. Uticaj fizičkih i hemijskih faktora na rast mikroorganizama Termini vežbi i predavanja: Ponedeljak - vežbe I gr. 08:30 11:30h I grupa: molekularni biolozi + ekolozi II gr. 12:30 15:30h II grupa: biolozi *(Petak - vežbe: 14.00-16.00h) Zajednička grupa. * samo gde je naglašeno u rasporedu. Četvrtak - vežbe Zajednička grupa: 12:00 15:00h Četvrtak predavanja Zajednička grupa: 11:00-12:00h Vežbe i predavanja će se odvijati na Fizičkom fakultetu (Ul. Cara Dušana 13), ukoliko drugačije nije navedeno. Obnoviti poglavlja iz praktikuma: 1., 2., 3., 4., 5., 6, 7.1., 7.2., 12.
I predavanje (23.10. četvrtak) Gajenje i rast II predavanje (30.10. četvrtak) Virusi metode izučavanja; λ fag Vežba 1 (30.10. četvrtak) Hranljive podloge (Priprema podloga, sterilizacija, razlivanje) Uvodno predavanje: Hranljive podloge, kriva rasta, indirektne metode za određivanje broja mikroorganizama. Vežba 2 (03.11. ponedeljak) Eksperimentalno određivanje krive rasta bakterija. III predavanje (06.11. četvrtak) Identifikacija mikroorganizama Vežba 3 (06.11. četvrtak) Izolacija bakterija. Kriva rasta. Uvodno predavanje: Crtanje krive, Izolacija producenta antibiotika, Izolovanje bakterija roda Bacillus. Crtanje krive rasta, kalibrisanje krive optičke gustine i određivanje vremena generacije rezultati. Izolacija producenta antibiotika zasejavanje uzoraka zemlje. Izolovanje bakterija roda Bacillus (obogaćivanje i pravljenje išaranih ploča). Studenti su u obavezi da donesu uzorak zemlje, dovoljna je minimalna količina poput grumena tj. nekoliko grama. IV predavanje (13.11. četvrtak) Kontrola rasta mikroorganizama Vežba 4 (13.11. četvrtak) Izolacija bakterija nastavak. Određivanje bakteriološke ispravnosti vode i vazduha I. Uvodno predavanje: Određivanje bakteriološke ispravnosti vode i vazduha. Eksperimentalno određivanje bakteriološke ispravnosti vode (određivanje ukupnog broja bakterija u vodi, određivanje prisustva koliformnih bakterija-test A). Eksperimentalno određivanje brojnosti bakterija u vazduhu/m 3.
Izolovanje bakterija roda Bacillus (posmatranje izraslih kolonija Bacillus sp., katalaza test, presejavanje na nove išarane ploče). Izolacija producenta antibiotika presejavanje u tečni medijum i priprema osetljivih sojeva za antimikrobni spektar izolata. Overa praktikuma vežbe (Kriva rasta). Studenti su u obavezi da donesu uzorak vode. Vežba 5 (14.11. petak) Određivanje bakteriološke ispravnosti vode i vazduha. Izolovanje bakterija roda Bacillus (posmatranje izraslih kolonija Bacillus sp., katalaza test, bojenje po Gramu i Šefer-Fultonu i mikroskopiranje, tj. potvrda) rezultati. Određivanje antimikrobnog spektra izolata metod dvojne kultivacije prvi deo. Eksperimentalno određivanje bakteriološke ispravnosti vode Test B. Eksperimentalno određivanje brojnosti bakterija u vazduhu/m 3 rezultati. Vežba 6 (17.11. ponedeljak) Mikrobiološki pregled hrane. Uvodno predavanje: IMViC test, mikrobiološki pregled hrane. Određivanje bakteriološke ispravnosti vode IMViC test (Test C). Izolacija Lactobacillus sp., Sulfitoredukujuće klostridije, Salmonella sp. Određivanje antimikrobnog spektra izolata metod dvojne kultivacije drugi deo. Vežba 7 (20.11. četvrtak) Mikrobiološki pregled hrane i vode nastavak. Određivanje bakteriološke ispravnosti vode IMViC test rezultati. Izolacija Lactobacillus sp., Sulfitoredukujuće klostridije rezultati. Salmonella sp. presejavanje na SS agar. Priprema kultura za API test.
Određivanje antimikrobnog spektra izolata metod dvojne kultivacije rezultati. Overa praktikuma vežbe (Izolovanje bakterija roda Bacillus i Izolacija producenta antibiotika i određivanje antimikrobnog spektra izolata). Vežba 8 (24.11. ponedeljak) Savremene metode za identifikaciju pojedinih grupa mikroorganizama Uvodno predavanje: Savremene metode za identifikaciju pojedinih grupa mikroorganizama API 20E i API 50 CHB Salmonella sp. potvrdni test Overa praktikuma vežbe (Mikrobiološki pregled vode, vazduha). Vežba 9 (27.11. četvrtak) Konsultacije za studentske projekte Priprema podloga za studentske projekte API Rezultati Salmonella sp. potvrdni test- rezultati Napomena: Studenti koji se opredele za projekat sa virusima, u ovom terminu rade i infekciju osetljivog soja Vežba 10 (01.12. ponedeljak) Studentski projekti 1. Identifikacija nepoznate bakterijske kulture do nivoa roda/vrste bojenje po Gramu i zasejavanje uzoraka. 2. Virusi: priprema stoka infekcijom osetljivog soja i određivanje titra virusa 3. Uticaj fizičkih i hemijskih faktora na rast mikroorganizama zasejavanje uzoraka.
Vežba 11 (04.12. četvrtak) Studentski projekti 1. Identifikacija nepoznate bakterijske kulture do nivoa roda/vrste rezultati. 2. Virusi: priprema stoka infekcijom osetljivog soja i određivanje titra virusa rezultati. 3. Uticaj fizičkih i hemijskih faktora na rast mikroorganizama rezultati. Overa praktikuma vežbe (Mikrobiološki pregled hrane) Vežba 12 (05.12. petak) Studentski projekti Odbrana studentskih projekata i prezentacija rezultata. Kolokvijumi (termin kolokvijuma biće naknadno definisan prema dogovoru).