Conociendo al Bacilo de la Tuberculosis
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1 Instituto de Diagnóstico y Referencia Epidemiológicos Depto. de Bacteriología Lab. de Micobacterias Conociendo al Bacilo de la Tuberculosis MC. Alberto Alfaro López / Junio 2014
2 Descubrimiento del Bacilo de la Tuberculosis Robert Koch 1882 Describió por primera vez al agente causal de la tuberculosis, Mycobacterium tuberculosis o bacilo de Koch. «Parece como si el bacilo tuberculoso estuviera rodeado de una pared especial de propiedades inusuales y que la penetración de un colorante a través de ella sólo sucediera en presencia de un álcali, de anilina o de una sustancia similar» Primer obra de R. Koch De la etiología de la tuberculosis. R. Koch. Ilustración del original Herzog H. Respiration. 1998; 65:5-15. Ilustración:
3 Estructura de la Envoltura Celular de MTB 8 1. Lípidos externos 2. Ácidos micólicos Pared Celular 3. Polisacáridos (arabinogalactano) 4. Peptidoglicano 5. Membrana celular 6. Lipoarabinomanana (LAM) 7. Fosfatidilinositol-manosido 8. Porinas Forma Rigidez Unión con Ác. grasos Carácter Hidrofóbico Taxonómico Carácter Antigénico Molécula Anfipática Modificado de: wikipedia.org/wiki/mycobacterium
4 Por qué MTB es un Bacilo Ácido Alcohol Resistente? Lípidos Externos Porina LAM Ác. Micólicos Ác. Lipoteicoico Proteínas de Superficie Ác. Teicoico LPS Arabinogalactano Membrana Externa Peptidoglicano EP Membrana Celular Gram-Positivas Micobacterias Porina Proteínas Gram-Negativas Modificado de: Parsons L M, et al. Infect Dis Clin of North America. 1997; 11 (4):
5 Características Biológicas de MTB Bacilo largo ligeramente curvo o recto, inmóvil, no forma esporas y no presenta cápsula. Mide 3-5 µm x µm. Tinción Ziehl-Neelsen División binaria (18 a 22 horas). Crece en presencia de oxígeno, a un ph de 6.8 a 7.2. Muy resistente al frio, congelación y desecación. Tinción Fluorocromos Sensible al calor y a la luz solar. Palomino J C, et al. Tuberculosis 2007 From Basic Science to Patient Care. Chapter 3:
6 Metabolismo de MTB-Requerimiento Nutricional Proteínas, péptidos y aminoácidos ASPARAGINA GLICEROL Lípidos y Fosfolípidos Carbohidratos GLUCOSA Aminoácidos NH Acetil CoA glicólisis y vía de pentosa fosfato Fe +3 Cetoácidosis 3 NADH Intermediarios MICOBACTINA Ciclo ATC Transporte de e - AT P NADP H Fe +3 CO 2 + H 2 0 FADH Proteínas, ácidos nucleicos, polisacáridos, etc EXOQUELINA HOSPEDERO Adaptado de: Palomino J C, et al. Tuberculosis 2007 From Basic Science to Patient Care. Chapter 3:
7 Crecimiento in vitro y Morfología Colonial en Cultivo Glicerol (estimula el crecimiento de MTB) y Asparagina. Recuperación bacilar (3 a 4 semanas). Colonias rugosas (forma de coliflor) y secas. Medio Sólido Lowenstein Jensen Tonalidad crema (no pigmentadas). Caldo Middlebrook 7H9 modificado (medio enriquecido). Recuperación bacilar (1 a 2 semanas). Factor cuerda. Medio Líquido BBL MGIT M7H9 Se debe realizar tinción para confirmar BAAR positivo. Palomino J C, et al. Tuberculosis 2007 From Basic Science to Patient Care. Chapter 3:100,
8 Metabolismo de MTB-Marcadores Bioquímicos Proteínas, péptidos y aminoácidos Aminoácidos NAD-H Acetil CoA NIACINA (Ac. nicotínico) CO 2 + H 2 0 Ciclo ATC Transporte de e - H 2 + O 2 TERMOLÁBIL A 68 C 2H 2 O + O 2 FADH Ácidos nucleicos, enzimas, polisacáridos, etc H 2 O 2 2H 2 O 2 CATALASA PEROXIDASA AT P Reparación del ADN NITRATO REDUCTASA NH 3 e - NO e + H 2 NO 2 + H 2 O NITRITO NITRAT O NO 3 O 2 H 2 MACRÓFAGO NO Adaptado de: Palomino J C, et al. Tuberculosis 2007 From Basic Science to Patient Care. Chapter 3:
9 Marcadores Bioquímicos-Identificación de MTB NIACINA CATALASA PEROXIDASA NIACINA ( + ) CATALASA A 68 C ( - ) NITRATOS ( + ) Mycobacterium tuberculosis NITRATOS Manual para el diagnóstico bacteriológico de la tuberculosis. Normas y guía técnica. Parte 2 Cultivo. OPS/OMS
10 Características Genéticas de MTB 4,000 genes: 200 involucrados en la codificación de enzimas y proteínas de la familia PE y PEE. Presenta un elevado contenido de G + C en su ADN (65.5%). Secuencia de inserción IS6110 presente en MTB. Genes que codifican para la proteína hsp65, proteína de fusión (126kD) y el gen de la subunidad-β de la polimerasa de ARN. Genes asociados a resistencia: katg, inha y kasa (INH), rpoβ (RIF), pnca (PZA) y embc, emba y embb (EMB). Palomino J C. et al. Tuberculosis 2007 From Basic Science to Patient Care. Chapter 3:
11 Dianas de los Fármacos Anti-tuberculosis de 1. a Línea ISONIACIDA katg, inha y kasa Inhibe la síntesis de la pared celular (Ác. micólicos) Lípidos Externos Porina LAM ETAMBUTOL emba, embc y embb Inhibe la síntesis de la pared celular (arabinogalactano) Ác. Micólicos RIFAMPICINA rpoβ PIRAZINAMIDA pnca Actúa en medio ácido. Inhibe la biosíntesis de nucleótidos. ATP y membrana celular? Arabinogalactano Inhibe la elongación del marn ESTREPTOMICINA rrs y rpsl Mycobacterium tuberculosis Inhibe la traducción del marn Adaptado de: Palomino J C, et al. Tuberculosis 2007 From Basic Sciencie to Patient Care. Chapter 3: y Parsons L M, et al. Infect Dis Clin of North America. 1997; 11 (4):
12 La Importancia de Conocer al Bacilo de la TB Enfermos de TB DETECCIÓN DIAGNÓSTICO CONTROL DEL TRATAMIENTO
13 GRACIAS Correo E: Tel: Ext: y 59375
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