Calcitonin. For use on IMMULITE 2000 systems

Transcript

1 Calcitonin For use on IMMULITE 2000 systems

2 IMMULITE 2000 Calcitonin English Intended Use: For in vitro diagnostic use with the IMMULITE 2000 Systems Analyzers for the quantitative measurement of calcitonin (thyrocalcitonin) in human serum or heparinized plasma, as an aid in the diagnosis and treatment of diseases involving the thyroid and parathyroid glands, including carcinoma and hyperparathyroidism. Catalog Number: L2KCL2 (200 tests) Test Code: CAL Color: Dark Pink Summary and Explanation Human calcitonin is a single-chain peptide hormone produced primarily in the thyroid gland, where it is secreted by the parafollicular "C" cells rather than by the thyroxine-secreting cells. 1 The calcitonin chain is 32 amino acids in length, and has a molecular mass of 3418 daltons. 1 In pathological conditions, the hormone exhibits a certain degree of heterogeneity. Its half-life in plasma is approximately 10 minutes. Metabolized predominantly by the kidney, calcitonin is also degraded to some extent by a plasma factor, making it important to freeze samples soon after collection. 1,3 The physiological significance of calcitonin is uncertain, but it does have a modest calcium- and phosphorus-lowering effect. Its secretion is normally modulated by rising and falling calcium levels, with an increase in circulating calcium prompting an increase in the calcitonin level. 1,18 A fasting basal range of 3 19 pg/ml for healthy adults, based on radioimmunoassay of extracted plasma, has been reported. 2 Elevated levels (greater than 100 pg/ml) are encountered in a variety of pathological conditions, notably medullary thyroid carcinoma, a tumor of the calcitonin-secreting cells of the thyroid. The peptide is also frequently elevated in leukemic and myeloproliferative disorders. 9 In addition, it may be produced ectopically by tumors, e.g. those of the lung or breast. 10,11,12,15,19 Its measurement, however, does not appear to be of value in the diagnosis of such disorders. Elevations may also be seen in connection with hyperparathyroidism, hypergastrinemia, renal failure and chronic inflammatory disease. 13,18 Principle of the Procedure IMMULITE 2000 Calcitonin is a solid-phase, enzyme-labeled, two-site chemiluminescent immunometric assay. Incubation Cycles: 2 30 minutes Time to First Result: 65 minutes Specimen Collection A fasting morning specimen is usually obtained to establish baseline values. If the samples are being collected as part of a provocative test, the time of collection should be noted relative to calcium or pentagastrin infusion. EDTA has an effect on the assay and is not recommended as a sample type. The use of an ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples. Hemolyzed samples may indicate mistreatment of a specimen before receipt by the laboratory; hence the results should be interpreted with caution. Centrifuging serum samples before a complete clot forms may result in the presence of fibrin. To prevent erroneous results due to the presence of fibrin, ensure that complete clot formation has taken place prior to centrifugation of samples. Some samples, particularly those from patients receiving anticoagulant therapy, may require increased clotting time. Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE 2000 Calcitonin has not been tested with all possible variations of tube types. Consult the section on Alternate 2 IMMULITE 2000 Calcitonin (PIEL2KCL-2 {17}, )

3 Sample Types for details on tubes that have been tested. Volume Required: 75 µl serum or heparinized plasma. Storage: Stable 15 days at 20 C or longer at 70 C. 23 Freeze immediately. Warnings and Precautions For in vitro diagnostic use. Reagents: Store at 2 8 C. Dispose of in accordance with applicable laws. Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C. Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert.) Water: Use distilled or deionized water. Materials Supplied Components are a matched set. Labels on the inside box are needed for the assay. Calcitonin Bead Pack (L2CL12) With barcode. 200 beads, coated with monoclonal murine anti-calcitonin. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KCL2: 1 pack Calcitonin Reagent Wedge (L2CLA2) With barcode ml alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to polyclonal goat anti-calcitonin, in a protein buffer. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KCL2: 1 wedge Before use, tear off the top of the label at the perforations, without damaging the barcode. Remove the foil seal from the top of wedge; snap the sliding cover down into the ramps on the reagent lid. Calcitonin Adjustors (LCLL, LCLH) Two vials (Low and High) of lyophilized calcitonin, in a protein/buffer matrix. Reconstitute each vial with 3.0 ml distilled or deionized water. Aliquot and freeze. Stable at 20 C for 3 months after reconstitution. L2KCL2: 1 set Before making an adjustment, place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes so that the barcodes can be read by the on-board reader. Kit Components Supplied Separately Multi-Diluent 2 (L2M2Z, L2M2Z4) For the on-board dilution of patient samples. One vial, concentrated (ready-to-use), nonhuman protein/buffer matrix, with preservative. Storage: 30 days (after opening) at 2 8 C or 6 months (aliquotted) at 20 C. L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml Barcode labels are provided for use with the diluent. Before use, place an appropriate label on a mm test tube, so that the barcodes can be read by the on-board reader. L2M2Z: 3 labels L2M2Z4: 5 labels L2SUBM: Chemiluminescent Substrate L2PWSM: Probe Wash L2KPM: Probe Cleaning Kit LRXT: Reaction Tubes (disposable) L2ZT: 250 Sample Diluent Test Tubes ( mm) L2ZC: 250 Sample Diluent Tube Caps LCLCM: Bi-level, protein/buffer-based control module Also Required Distilled or deionized water; test tubes; controls. Assay Procedure Note that for optimal performance, it is important to perform all routine maintenance procedures as defined in the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual. See the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual for: preparation, setup, dilutions, adjustment, assay and quality control procedures. Recommended Adjustment Interval: 4 weeks IMMULITE 2000 Calcitonin (PIEL2KCL-2 {17}, ) 3

4 Quality Control Samples: Use controls or sample pools with at least two levels (low and high) of calcitonin. Follow government regulations or accreditation requirements for quality control frequency. Expected Values Serum samples from 120 male and 90 female subjects in apparent good health were analyzed by the IMMULITE 2000 Calcitonin procedure Males: Females: Upper 95% range: 8.4 pg/ml (2.46 pmol/l) Absolute range: ND 18.2 pg/ml (ND 5.33 pmol/l) Upper 95% range: 5.0 pg/ml (1.46 pmol/l) Absolute range: ND 11.5 pg/ml (ND 3.36 pmol/l) Limitations Multiple forms of immunoreactive calcitonin are present in the circulation of healthy subjects, patients with medullary thyroid carcinoma, and patients with other malignancies. These different forms of calcitonin (polymers and/or glycosylated forms) can have molecular weights varying from 3.4 to 70 KDa. Therefore, samples may exhibit varied response in an immunoassay and non-linear dilution Some healthy individuals may be encountered who have elevated immunoreactive calcitonin levels. 2 Because calcitonin is highly labile, special attention must be paid to proper specimen collection and preservation. 1,3,7 Where several samples are collected from a single patient, e.g. in pentagastrin stimulation testing or serial monitoring, all samples should be assayed by the same procedure. Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: ] Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings. Performance Data See Tables and Graphs for data representative of the assay's performance. Results are expressed in pg/ml. (Unless otherwise noted, all were generated on serum samples collected in tubes without gel barriers or clot-promoting additives.) Conversion Factor: pg/ml pmol/l Reportable Range: pg/ml (WHO 2nd IRP 89/620) High-dose Hook Effect: None up to 25,000 pg/ml Analytical Sensitivity: 2 pg/ml (0.6 pmol/l) Precision: Samples were assayed in duplicate over the course of 20 days, two runs per day, for a total of 40 runs and 80 replicates. (See "Precision" table.) Linearity: Samples were assayed under various dilutions. (See "Linearity" table for representative data.) Recovery: Samples spiked 1 to 19 with three calcitonin solutions (600, 6000 and 18,000 pg/ml) were assayed. (See "Recovery" table for representative data.) Specificity: The antibody is highly specific for calcitonin. (See "Specificity" table.) Bilirubin: Presence of conjugated and unconjugated bilirubin in concentrations up to 200 mg/l has no effect on results, within the precision of the assay. Hemolysis: Presence of hemoglobin in concentrations up to 512 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Lipemia: Presence of triglycerides in concentrations up to 3000 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. 4 IMMULITE 2000 Calcitonin (PIEL2KCL-2 {17}, )

5 Alternate Sample Type: To assess the effect of alternate sample types, blood was collected from 16 volunteers into plain, heparinized, EDTA and Becton Dickinson SST vacutainer tubes. Equal volumes of the matched samples were spiked with various concentrations of calcitonin, to obtain values throughout the reportable range of the assay, and then assayed by the IMMULITE 2000 Calcitonin procedure. (Heparin) = 0.99 (Serum) 3.6 pg/ml r = (EDTA) = 0.79 (Serum) 16.1 pg/ml r = (SST) = 1.02 (Plain Serum) 5.2 pg/ml r = Means: 542 pg/ml (Plain Serum) 535 pg/ml (Heparin) 413 pg/ml (EDTA) 549 pg/ml (SST) Method Comparison 1: The assay was compared to IMMULITE Calcitonin on 150 samples. (Concentration range: approximately up to 1500 pg/ml. See graph 1.) By linear regression: (IML 2000) = 1.08 (IML) 9.6 pg/ml r = Means: 265 pg/ml (IMMULITE 2000) 253 pg/ml (IMMULITE) Method Comparison 2: The assay was also compared to a commercially available assay (Kit A) on 67 samples. (Concentration range: approximately up to 1500 pg/ml. See graph 2.) By linear regression: (IML 2000) = 0.81 (Kit A) 0.4 pg/ml r = Means: 193 pg/ml (IMMULITE 2000) 239 pg/ml (Kit A) References 1) Austin L, Heath H. Calcitonin; physiology and pathophysiology. New Engl J Med 1981;304: ) Body J-J, Heath H. 'Nonspecific' increases in plasma immunoreactive calcitonin in healthy individuals. Clin Chem 1984;30: ) Catherwood BD, Deftos LJ. General principles, problems, and interpretation in the radioimmunoassay of calcitonin and parathyroid hormone. In: Bikle DD, editor. Assay of calcium-regulating Hormones. New York: Springer-Verlag, 1983: ) Charpin C, et al. Calcitonin, somatostatin and ACTH immunoreactive cells in a case of familial bilateral thyroid medullary carcinoma. Cancer 1982;50: ) Deftos LJ, et al. Influence of age and sex on plasma calcitonin in human beings. New Engl J Med 1980;302: ) Heath H, Sizemore GW. Plasma calcitonin in normal man. J Clin Invest 1977;60: ) Heath H, Sizemore GW. Radioimmunoassay for calcitonin. Clin Chem 1982;28: ) Hillyard C, et al. Familial medullary thyroid carcinoma. Lancet 1978;i: ) Hillyard C, et al. Immunoreactive calcitonin in leukaemia. Br Med J 1979;2: ) Hillyard C, Stevenson J. Calcitonin as a tumour marker. Ligand Rev 1980 (Spring);2(1): ) Milhaud G. Ectopic secretion of calcitonin. In: Pecile A, editor. Calcitonin Amsterdam: Excerpta Medica, 1981: ) Mulder H, Hackeng WHL. Ectopic secretion of calcitonin. Acta Med Scand 1978;204: ) Mulder H, et al. Hypercalcitoninaemia in patients with chronic inflammatory disease. Neth J Med 1980;23: ) Parthemore J, Deftos LJ. Calcitonin secretion in normal human subjects. J Clin Endocrinol Metab 1978;47: ) Schwartz KE, et al. Calcitonin in nonthyroidal cancer. J Clin Endocrinol Metab 1979;49: ) Sizemore GW, Go VLW. Stimulation tests for diagnosis of medullary thyroid carcinoma. Mayo Clin Proc 1975;50: ) Stepanas AV, et al. Medullary thyroid carcinoma; importance of serial serum calcitonin measurements. Cancer 1979;43: ) Toffaletti J. Calcitonin. Clinical Chemistry News 1984 (July);10(7):20-1, ) Wallach S, et al. Plasma calcitonin as a marker of disease activity in patients with small cell carcinoma of the lung. J Clin Endocrinol Metab 1981;53: ) Wells SA. Provocative agents and the diagnosis of medullary carcinoma of the thyroid gland. Ann Surg 1978;188: ) Wells SA, et al. The importance of early diagnosis in patients with hereditary medullary thyroid carcinoma. Ann Surg 1982;195: ) National Committee for Clinical Laboratory Standards. Procedures for the collection of diagnostic blood specimens by venipuncture; approved standard. 4th ed. NCCLS Document H3-A4, Wayne, PA: NCCLS, ) Tietz NW, editor. Clincal guide to laboratory tests. 3nd ed. Philadelphia: W.B. Saunders 1995: ) Golzman D, Tischler AS. Characterization of the immunochemical forms of calcitonin released by a medullary thyroid carcinoma in tissue culture. J Clin Invest 1978 Feb; 61: ) Becker KL, Snider RH, Silva OL, Moore CF. Calcitonin heterogeneity in lung cancer and medullary thyroid cancer. Acta Endocrinol 1978 Sep; 89(1): ) Zajac JD, Martin TJ, Hudson P, Niall H, Jacobs JW. Biosynthesis of calcitonin by human lung cancer cells. Endocrinology 1985 Feb; 116(2): ) Becker KL, Gazdar AF, Carney DN, Snider RH, Moore CF, Silva OL. Calcitonin secretion by continuous cultures of small cell carcinoma of the lung: incidence and immunoheterogeneity studies. Cancer Lett 1983 IMMULITE 2000 Calcitonin (PIEL2KCL-2 {17}, ) 5

6 Mar; 18(2): ) Bertagna XY, Nicholson WE, Pettengill OS, Sorenson GD, Mount CD, Orth DN. Ectopic production of high molecular weight calcitonin and corticotropin by human small cell carcinoma cells in tissue culture: evidence for separate precursors. J Clin Endocrinol Metab 1978 Dec; 47(6): Technical Assistance For technical assistance, contact your National Distributor. The Quality System of Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. is certified to ISO 13485:2003. Tables and Graphs Precision (pg/ml) Within-Run 1 Total 2 Mean 3 SD 4 CV 5 SD CV % % % % % % % % 5 1, % % 6 1, % % Česky. 1 V rámci stanovení, 2 Celkem, 3 Střední hodnota, 4 Směrodatná odchylka, 5 Variační koeficient. Ελληνικά. 1 Κατά την ίδια περίοδο, 2 Συνολικά, 3 Μέσος όρος, 4 SD, 5 CV. Polski. 1 W serii, 2 Całość, 3 Średnie, 4 SD, 5 CV. Linearity (pg/ml) Dilution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E in in % 2 in % 1 in % 2 8 in in % 2 in % 1 in % 3 8 in in % 2 in % 1 in % 4 8 in in % 2 in % 1 in % 5 8 in 8 1,606 4 in % 2 in % 1 in % Česky. 1 Ředění, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 % Naměřená / Očekávaná, 5 8 v 8. Ελληνικά. 1 Αραίωση, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E, 5 8 στα 8. Polski. 1 Rozcieńczenie, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O, 5 8 w 8. 6 IMMULITE 2000 Calcitonin (PIEL2KCL-2 {17}, )

7 Recovery (pg/ml) Solution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E A % B % C % A % B % C % A % B % C 1,103 1, % A % B % C 1,335 1,347 99% A % B 1,066 1,075 99% C 1,666 1,675 99% Česky. 1 Roztok, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 Naměřená / Očekávaná. Ελληνικά. 1 Διάλυμα, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E. Polski. 1 Roztwór, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O. Specificity Compound 1 pg/ml Added 2 Apparent pg/ml 3 % Crossreactivity 4 ACTH 100,000 ND ND C-Peptide 40,000,000 ND ND Insulin 33,000,000 ND ND HGH 910,000 ND ND Prolactin 1,000,000 ND ND PTH 150,000 ND ND TSH 140,000 ND ND Salmon 50,000 ND ND Calcitonin Pre- 500,000 ND ND Procalcitonin Gastrin 2,000,000 ND ND (G-17) Human Big 1,000,000 ND ND Gastrin CCK 10,000,000 ND ND ND: not detectable. 5 Česky. 1 Sloučenina, 2 Přidané množství, 3 Zjevná koncentrace, 4 % Zkřížená reaktivita, 5 ND: nezjistitelné. Ελληνικά. 1 Μείγμα, 2 Προστέθηκαν, 3 Εμφανής συγκέντρωση, 4 % Διασταυρ.Αντίδραση, 5 ND: Μη ανιχνεύσιμη ποσότητα. Polski. 1 Składnik, 2 Ilość dodana, 3 Ilość stwierdzona, 4 % reaktywności krzyżowej, 5 Nieoznaczlne. Method Comparison IMMULITE 2000 Calcitonin IMMULITE Calcitonin, pg/ml (IML 2000) = 1.08 (IML) 9.6 pg/ml r = IMMULITE 2000 Calcitonin (PIEL2KCL-2 {17}, ) 7

8 Method Comparison 2 IMMULITE 2000 Calcitonin Kit A, pg/ml (IML 2000) = 0.81 (Kit A) 0.4 pg/ml r = English. Calcitonin Česky. Kalcitonin. Ελληνικά. Καλσιτονίνη. Polski. Kalcytonina. Česky IMMULITE 2000 Kalcitonin Použití : Pro in vitro diagnostické použití na analyzátorech IMMULITE 2000 ke stanovení koncentrace kalcitoninu (tyreokalcitoninu) v lidském séru nebo heparinizované plazmě, jakožto pomůcky při stanovení diagnózy a léčby onemocnění štítné žlázy a příštítných tělísek včetně karcinomu a hyperparatyreoidizmu. Katalogové číslo : L2KCL2 (200 stanovení) Kód metody : CAL Barva : Tmavě růžová Shrnutí a vysvětlení Lidský kalcitonin je jednořetězcový peptidický hormon primárně produkován ve štítné žláze, kde je vylučován spíše parafolikulárními "C" buňkami než buňkami vylučujícími tyroxin. 1 Řetězec kalcitoninu se skládá z 32 aminokyselin a jeho molekulová hmotnost je 3418 daltonů. 1 V patologických podmínkách tento hormon vykazuje určitý stupeň heterogenity. Poločas rozpadu kalcitoninu v plazmě je přibližně 10 minut. Metabolizován je převážně v ledvinách, do určité míry je odbouráván i plazma faktorem, pročež je důležité vzorky brzo po odběru zmrazit. 1,3 Fyziologický význam kalcitoninu je nejistý, ale s určitostí má mírnou schopnost snižovat hladinu kalcia a fosforu. Jeho sekrece je normálně modulována stoupající a klesající hladinou kalcia, přičemž vzestup kalcia v cirkulaci vyvolává zvýšení hladiny kalcitoninu. 1,18 Na základě radiově značeného imunologického stanovení extrahované plazmy bylo určeno bazální rozmezí nalačno 3 19 pg/ml pro zdravého jedince. 2 Zvýšené hladiny (nad 100 pg/ml) se vyskytují u různých patologických stavů, zejména u medulárního karcinomu štítné žlázy, nádoru buněk štítné žlázy, které produkují kalcitonin. Koncentrace tohoto peptidu se zvyšuje rovněž při leukémii a myeloproliferativních poruchách. 9 Dále může být produkován ektopicky nádory, např. plic nebo prsou. 10,11,12,15,19 Zdá se ale, že u stanovení diagnózy těchto poruch nemá jeho měření velkou hodnotu. Zvýšené hladiny kalcitoninu se rovněž můžou objevit v souvislosti s hyperparatyreoidizmem, hypergastrinemií, selháním ledvin a chronickým zánětlivým onemocněním. 13,18 Princip stanovení Stanovení Kalcitonin na analyzátorech IMMULITE 2000 je enzymem značená oboustranná chemiluminiscenční imunochemická reakce v pevné fázi. Inkubační cykly : 2 30 minut Čas do prvního výsledku : 65 minut Odebírání vzorků Ke stanovení základních výchozích hodnot se obyčejně odebírá ranní vzorek nalačno. Pokud jsou vzorky odebírány v rámci provokativního testu, čas odběru by měl být zaznamenán v relaci k infuzi kalcia nebo pentagastrinu. Pro svůj účinek na stanovení není použití EDTA jako typu vzorku vhodné. K úpravě lipemických vzorků se doporučuje použití ultracentrifugy. Hemolyzované vzorky můžou být známkou nesprávného zacházení s preparátem ještě před přijetím do laboratoře ; proto by výsledky měly být interpretovány s obezřetností. 8 IMMULITE 2000 Calcitonin (PIEL2KCL-2 {17}, )

9 Centrifugace vzorků séra ještě před úplným vysrážením může mít za následek přítomnost fibrinu. Chybným výsledkům způsobeným přítomností fibrinu lze zamezit úplným vysrážením vzorků před jejich centrifugací. Některé vzorky, zejména od pacientů podstupujících antikoagulační léčbu, může srážlivost vyžadovat více času. Použití zkumavek pro odběr krve od různých výrobců může poskytovat rozličné hodnoty v závislosti na materiálech a přísadách, včetně gelových nebo fyzických bariér, aktivátorů srážení a/nebo antikoagulačních činidel. Stanovení Kalcitonin na analyzátorech IMMULITE 2000 nebylo testováno se všemi možnými varianty jednotlivých typů zkumavek. Informace o testovaných zkumavkách najdete v části o alternativních typech vzorků. Potřebný objem vzorku : 75 µl séra nebo heparinizované plazmy. Skladování : Stabilní 15 dní při teplotě 20 C nebo déle při teplotě 70 C. 23 Okamžitě zmrazte. Upozornění a bezpečnostní opatření Pro in vitro diagnostické použití. Reagencie : Skladujte při teplotě 2 8 C. Likvidujte v souladu s platnými předpisy. Řiďte se obecnými pravidly bezpečnosti práce a se všemi komponenty nakládejte, jako by byly potenciálně infekční. Zdrojové materiály získané z lidské krve byly testovány a shledány nereaktivní na syfilis, na protilátky proti HIV 1 a 2, na povrchový antigen hepatitidy typu B (HBsAg), a na protilátky proti hepatitidě typu C. Chemiluminiscenční substrát : Vyvarujte se kontaminace a nevystavujte přímému slunečnímu světlu. (Viz připojený letáček.) Voda: Použijte destilovanou nebo deionizovanou vodu. Dodaný materiál Komponenty představují ucelenou sadu. Pro stanovení jsou zapotřebí štítky s čárovým kódem na krabici. Kalcitonin zásobník s kuličkami (L2CL12) Opatřeno čárovým kódem. 200 kuliček potažených monoklonální myší protilátkou proti kalcitoninu. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KCL2 : 1 balení Kalcitonin reagencie (L2CLA2) Opatřeno čárovým kódem. 11,5 ml alkalické fosfatázy (z telecího střeva) konjugované s polyklonální kozí protilátkou proti kalcitoninu, v bílkovinovém pufru. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KCL2 : 1 nádobka Před použitím utrhněte vršek štítku v perforovaném místě, ale nepoškoďte čárový kód. Z vrchu nádobky odstraňte uzavírací fólii; posuvný uzávěr zaklapněte do ramp na víčku reagencie. Kalcitonin kalibrátory (LCLL, LCLH) Dvě ampulky s vysokou a nízkou koncentrací lyofilizovaného kalcitoninu v bílkovino/pufrové matrici. Každou ampulku rekonstituujte přidáním 3,0 ml destilované nebo deionizované vody. Rozpipetujte na alikvotní části a zmrazte. Stabilní 3 měsíce po rekonstituci při teplotě 20 C. L2KCL2 : 1 sada Před adjustací nalepte na testovací zkumavky příslušné alikvotní štítky (dodané se soupravou) tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. Materiál dodávaný zvlášť Multidiluent 2 (L2M2Z, L2M2Z4) Pro automatické ředění vzorků od pacientů samotným analyzátorem. Jedna ampulka koncentrované (připravené k použití) nehumánní bílkovino/pufrové matrice s konzervačním prostředkem. Skladování: 30 dní po otevření při teplotě 2 8 C nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při teplotě 20 C. L2M2Z : 25 ml L2M2Z4 : 55 ml Štítky s čárovými kódy jsou určeny pro diluent. Před použitím nalepte příslušný štítek na testovací zkumavku mm tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. L2M2Z : 3 štítky L2M2Z4 : 5 štítků IMMULITE 2000 Calcitonin (PIEL2KCL-2 {17}, ) 9

10 L2SUBM : Chemiluminiscenční substrát L2PWSM : Promývací roztok L2KPM : Čistící roztok na jehly LRXT : Reakční zkumavky (na jedno použití) L2ZT : 250 Testovacích Zkumavek Na Diluent Vzorků ( mm) L2ZC : 250 Uzávěrů Na Testovací Zkumavky Na Diluent Vzorků LCLCM : Dvojúrovňový kontrolní modul na bílkovino/pufrové bázi Dále potřebujete : Destilovanou nebo deionizovanou vodu, testovací zkumavky, kontroly. Postup stanovení K dosažení optimálního výkonu je důležité provádět veškerou pravidelnou údržbu stanovenou v manuálu k analyzátorům IMMULITE V manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000 najdete postupy : přípravy, nastavení, ředění, adjustace, stanovení vzorků a kontrol. Doporučený interval mezi adjustacemi : 4 týdny Vzorky ke kontrole kvality : Použijte kontroly nebo směsné vzorky s alespoň dvěmi koncentracemi (vysokou a nízkou) kalcitoninu. Pokud jde o četnost kontroly kvality, je třeba řídit se platnými předpisy a akreditačními požadavky. Očekávané hodnoty Vzorky séra od 120 mužů a 90 žen v dobrém zdravotním stavu byly stanoveny metodou Kalcitonin na analyzátorech IMMULITE 2000 Muži : Ženy : Horní 95% rozpětí : 8,4 pg/ml (2,46 pmol/l) Absolutní rozpětí : ND 18,2 pg/ml (ND 5,33 pmol/l) Horní 95% rozpětí : 5,0 pg/ml (1,46 pmol/l) Absolutní rozpětí : ND 11,5 pg/ml (ND 3,36 pmol/l) Omezení Četné formy imunoreaktivního kalcitoninu jsou přítomny v oběhu zdravých osob, pacientů s medulárním karcinomem štítné žlázy a pacientů s jinými malignitami. Tyto různé formy kalcitoninu (polymery a/nebo glykosylované formy) mohou mít molekulovou hmotnost 3,4 až 70 kda. Vzorky od těchto pacientů mohou vykazovat různé odezvy při imunostanovení a nelinearitu při ředění U některých zdravých jedinců se může vyskytnout zvýšená hladina imunoreaktivního kalcitoninu. 2 Protože kalcitonin je vysoce nestabilní je nutné odebírání a uchovávání vzorků věnovat náležitou pozornost. 1,3,7 Když je jednomu pacientovi odebráno více vzorků, např. při pentagastrinové stimulační zkoušce, všechny vzorky je třeba stanovit naráz. Heterofilní protilátky v lidském séru můžou reagovat s imunoglobuliny obsaženými v komponentech soupravy a způsobit interference s in vitro imunologickým stanovením. [Viz Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all imunologickým stanovením. Clin Chem 1988:34:27-33.] Vzorky pacientů rutinně vystavených kontaktu se zvířaty nebo produkty zvířecího séra můžou vykázat tento typ interference a potenciálně způsobit anomální výsledky. Tyto reagencie byly vyvinuty tak, aby bylo riziko interference minimalizováno ; nicméně případné interakce mezi ojedinělými séry a komponenty testu se můžou vyskytnout. Pro diagnostické účely by se výsledky tohoto stanovení měly vždy používat v kombinaci s klinickými zkouškami, zdravotní historií pacienta a ostatními nálezy. Znaky metody Reprezentativní výsledky stanovení najdete v části Tabulky a grafy. Výsledky se udávají v pg/ml. (Pokud není uvedeno jinak, všechny výsledky byly získány na vzorcích séra odebraných do zkumavek bez gelových bariér a přísad podporujících srážlivost.) Konverzní faktor : pg/ml 0,2926 pmol/l Rozsah měření : pg/ml (WHO 2nd IRP 89/620) High-dose Hook Effect : Do pg/ml žádný. Analytická citlivost : 2 pg/ml (0,6 pmol/l) 10 IMMULITE 2000 Calcitonin (PIEL2KCL-2 {17}, )

11 Přesnost : Vzorky byly stanovovány dvojmo v průběhu 20 dní, dva testy denně, celkem 40 testů a 80 replikátů. (Viz tabulka Přesnost.) Linearita : Stanovení vzorků bylo provedeno při rozličném ředění. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce Linearita.) Zpětná výtěžnost : Bylo provedeno stanovení vzorků séra s přídavkem tří roztoků kalcitoninu (600, 6000 a pg/ml) v poměru 1 : 19. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce Zpětná výtěžnost.) Specificita : Protilátka proti kalcitoninu je silně specifická. (Viz tabulka Specificita.) Bilirubin : Přítomnost konjugovaného a nekonjugovaného bilirubinu v koncentracích do 200 mg/l nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Hemolýza : Přítomnost hemoglobinu v koncentracích do 512 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Lipémie : Přítomnost triglyceridů v koncentracích do 3000 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Alternativní typ vzorku : K určení vlivu alternativního typy vorku jsme metodou Kalcitonin na analyzátorech IMMULITE 2000 stanovili vzorky od 16 dobrovolníků odebrané do obyčejných, heparinizovaných, EDTA a Becton Dickinson SST vacutainer zkumavek. Do stejných objemů odpovídajících vzorků byly přidány roztoky s různou koncentrací kalcitoninu, abychom získali hodnoty z celého kalibrační rozsahu stanovení. Všechny vzorky byly následně stanoveny pomocí testu Kalcitonin na analyzátorech IMMULITE (Heparin) = 0,99 (Sérum) 3,6 pg/ml r = 0,999 (EDTA) = 0,79 (Sérum) 16,1 pg/ml r = 0,993 (SST) = 1,02 (Sérum obyčejné) 5,2 pg/ml r = 0,999 Střední hodnoty : 542 pg/ml (Sérum obyčejné) 535 pg/ml (Heparin) 413 pg/ml (EDTA) 549 pg/ml (SST) Srovnání metody 1 : Stanovení bylo porovnáno s metodou Kalcitonin na analyzátoru IMMULITE na 150 vzorcích. (Koncentrační rozsah : přibližně do 1500 pg/ml. Viz graf 1.) Podle lineární regrese : (IML 2000) = 1,08 (IML) 9,6 pg/ml r = 0,991 Střední hodnoty : 265 pg/ml (IMMULITE 2000) 253 pg/ml (IMMULITE) Srovnání metody 2 : Stanovení bylo rovněž porovnáno s komerčně dostupným imunologickým testem (Kit A) na 67 vzorcích pacientů. (Koncentrační rozsah : přibližně do 1500 pg/ml. Viz graf 2.) Podle lineární regrese: (IML 2000) = 0,81 (Kit A) 0,4 pg/ml r = 0,982 Střední hodnoty : 193 pg/ml (IMMULITE 2000) 239 pg/ml (Kit A) Technická Podpora Pro technickou podporu kontaktujte vašeho národního distributora. Systém kontroly jakosti společnosti Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. je certifikovaný podle ISO 13485:2003. Ελληνικά IMMULITE 2000 Καλσιτονίνη Ενδεδειγμένη χρήση: Για in vitro διαγνωστική χρήση με τα συστήματα αναλυτών IMMULITE 2000 για τον ποσοτικό προσδιορισμό της καλσιτονίνης (θυροκαλσιτονίνη) στον ανθρώπινο ορό ή το ηπαρινισμένο πλάσμα, ως βοήθημα στη διάγνωση και θεραπεία νόσων του θυρεοειδούς και του παραθυρεοειδούς αδένα, συμπεριλαμβανομένων των καρκινωμάτων και του υπερπαραθυροειδισμού. Αριθμός καταλόγου: L2KCL2 (200 εξετάσεις) Κωδικός εξέτασης: CAL Χρώμα: Σκούρο Ροζ IMMULITE 2000 Calcitonin (PIEL2KCL-2 {17}, ) 11

12 Περίληψη και επεξήγηση Η ανθρώπινη καλσιτονίνη είναι μια ορμόνη μονής αλυσίδας πεπτιδίων, η οποία παράγεται κατά κύριο λόγο στο θυρεοειδή αδένα, όπου εκκρίνεται κυρίως από τα παραωοθυλακικά κύτταρα "C" και λιγότερο από τα κύτταρα που εκκρίνουν θυροξίνη. 1 Η αλυσίδα καλσιτονίνης έχει μήκος 32 αμινοξέα και μοριακή μάζα 3418 dalton. 1 Σε παθολογικές καταστάσεις, η ορμόνη εμφανίζει κάποιο βαθμό ετερογένειας. Ο χρόνος ημίσειας ζωής στο πλάσμα είναι περίπου 10 λεπτά. Η καλσιτονίνη μεταβολίζεται κατά κύριο λόγο στους νεφρούς, ενώ διασπάται σε κάποιο βαθμό από έναν παράγοντα του πλάσματος. Συνεπώς, είναι απαραίτητη η κατάψυξη των δειγμάτων αμέσως μετά τη συλλογή. 1,3 Η φυσιολογική σημασία της καλσιτονίνης είναι ασαφής, ωστόσο παρουσιάζει ένα μέτριο αποτέλεσμα μείωσης του ασβεστίου και του φωσφόρου. Η έκκρισή της ρυθμίζεται κατά κανόνα από την αυξομείωση των επιπέδων ασβεστίου, ενώ η αύξηση του κυκλοφορούντος ασβεστίου προκαλεί αύξηση στα επίπεδα καλσιτονίνης. 1,18 Αναφέρθηκε βασικό εύρος 3 19 pg/ml για υγιή άτομα υπό νηστεία με βάση ραδιολογική ανοσοανάλυση του εξαγόμενου πλάσματος. 2 Αυξημένα επίπεδα (άνω των 100 pg/ml) παρατηρούνται σε ποικίλες παθολογικές καταστάσεις, και κυρίως στο μυελοειδές καρκίνωμα θυρεοειδούς, έναν όγκο των κυττάρων του θυρεοειδούς που εκκρίνουν καλσιτονίνη. Επίσης, το πεπτίδιο παρουσιάζεται συχνά αυξημένο σε λευχαιμικές και μυελοπολλαπλασιαστικές διαταραχές. 9 Επιπλέον, είναι δυνατό να παράγεται εκτοπικά από όγκους, για παράδειγμα στους πνεύμονες ή στο μαστό. 10,11,12,15,19 Ωστόσο, η μέτρησή του δεν φαίνεται να συνεισφέρει στη διάγνωση παρόμοιων διαταραχών. Αύξηση παρατηρείται επίσης σε συνδυασμό με υπερπαραθυρεοειδισμό, υπεργαστριναιμία, νεφρική ανεπάρκεια και χρόνια φλεγμονώδη νόσο. 13,18 Αρχή της διαδικασίας Το IMMULITE 2000 Καλσιτονίνη είναι μια στερεής φάσης, ενζυμική, δύο βημάτων, χημειοφωταυγής ανοσομετρική ανάλυση. Κύκλοι επώασης: 2 30 λεπτά Χρόνος για το πρώτο αποτέλεσμα: 65 λεπτά Συλλογή δειγμάτων Για τον προσδιορισμό των τιμών βάσης λαμβάνεται κατά κανόνα πρωινό δείγμα έπειτα από νηστεία. Εάν τα δείγματα ληφθούν στο πλαίσιο εξέτασης με πρόκληση, θα πρέπει να σημειωθεί ο χρόνος συλλογής σε σχέση με το χρόνο χορήγησης ασβεστίου ή πενταγαστρίνης. Οι EDTA επηρεάζουν την ανάλυση και δεν συνιστώνται ως τύπος δειγμάτων. Συνιστάται η χρήση της υπερφυγοκέντρου για να καθαριστούν τα λιπιδαιμικά δείγματα. Αιμολυμένα δείγματα μπορεί να υποδηλώνουν κακή μεταχείριση του δείγματος πριν την παραλαβή του από το εργαστήριο και τα αποτελέσματα πρέπει να ερμηνεύονται με προσοχή. Η φυγοκέντριση των δειγμάτων ορού πριν την πλήρη πήξη μπορεί να έχει ως αποτέλεσμα τη δημιουργία θρόμβων. Για να αποφευχθούν λανθασμένα αποτελέσματα εξαιτίας της παρουσίας θρόμβων, βεβαιωθείτε ότι πριν τη φυγοκέντριση, το αίμα έχει πήξει πλήρως. Κάποια δείγματα, ιδιαιτέρως αυτά των ασθενών που λαμβάνουν αντιπηκτική θεραπεία, ίσως χρειάζονται μεγαλύτερο χρόνο πήξης. Οι σωλήνες συγκέντρωσης αίματος διαφορετικών εταιρειών μπορεί να δώσουν αποκλίνουσες τιμές, ανάλογα με τα υλικά και τα συμπληρώματα, συμπεριλαμβανομένων των με τζελ ή φυσικών σωληναρίων, των ενεργοποιητών πήξεως και/ή των αντιπηκτικών. Η IMMULITE 2000 Καλσιτονίνη δεν έχει δοκιμαστεί με όλους τους τύπους σωληναρίων. Συμβουλευθείτε την παράγραφο για τους εναλλακτικούς τύπους δειγμάτων για περισσότερες πληροφορίες σχετικά με τα σωληνάρια που έχουν δοκιμαστεί. 12 IMMULITE 2000 Calcitonin (PIEL2KCL-2 {17}, )

13 Απαιτούμενος όγκος: 75 µl ορού ή ηπαρινισμένου πλάσματος. Φύλαξη: Σταθερό επί 15 ημέρες στους 20 C ή για μεγαλύτερο διάστημα στους 70 C. 23 Να καταψύχεται αμέσως. Προειδοποιήσεις και προφυλάξεις Για in vitro διαγνωστική χρήση. Αντιδραστήρια: Διατήρηση στους 2 8 C. Απόρριψη σύμφωνα με την ισχύουσα νομοθεσία. Ακολουθήστε τις γενικές προφυλάξεις και χειριστείτε όλα τα συστατικά σαν να ήταν φορείς μολυσματικών παραγόντων. Όλα τα υλικά της μεθόδου που προέρχονται από ανθρώπινο αίμα έχουν ελεγχθεί και βρέθηκαν αρνητικά για σύφιλη, για αντισώματα στον HIV 1 και 2, για επιφανειακά αντιγόνα της ηπατίτιδας Β και για αντισώματα της ηπατίτιδας C. Χημειοφωταυγές υπόστρωμα: Αποφύγετε τη μόλυνση και την έκθεση στο άμεσο ηλιακό φως. (Bλ. Ένθετο.) Νερό: Χρησιμοποιήστε απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό. Υλικά που διατίθενται Τα συστατικά αποτελούν ένα ολοκληρωμένο σετ. Οι ετικέτες στο εσωτερικό κουτί είναι απαραίτητες για την ανάλυση. Συσκευασία σφαιριδίων καλσιτονίνης (L2CL12) Με ραβδοκώδικα. 200 σφαιρίδια, επικαλυμμένα με μονοκλωνικό αντίσωμα ποντικού αντι-καλσιτονίνης. Σταθερά στους 2 8 C έως την ημερομηνία λήξης. L2KCL2: 1 συσκευασία Δοχείο αντιδραστηρίου καλσιτονίνης (L2CLA2) Με ραβδοκώδικα. 11,5 ml αλκαλικής φωσφατάσης (βόειο έντερο) συνδεδεμένης με πολυκλωνικό αντίσωμα αντικαλσιτονίνης κατσίκας σε ρυθμιστικό διάλυμα πρωτεΐνης. Σταθερό στους 2 8 C μέχρι την ημερομηνία λήξης. L2KCL2: 1 δοχείο Πριν τη χρήση, σχίστε την πάνω ετικέτα στο σημείο διάτρησης, χωρίς να καταστρέψετε το ραβδοκώδικα. Αφαιρέστε (ξεκολλήστε) προσεκτικά το κάλυμμα από την επάνω επιφάνεια του δοχείου, και πιέστε το κάλυμμα κάτω προς τους κεκλιμένους οδηγούς-ράγες. Ρυθμιστές καλσιτονίνης (LCLL, LCLH) Δύο φιαλίδια (χαμηλό και υψηλό) λυοφιλοποιημένης καλσιτονίνης σε μήτρα πρωτεΐνης/ρυθμιστικού διαλύματος. Κάντε ανασύσταση κάθε φιαλιδίου με 3,0 ml απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό. Διαχωρίστε και καταψύξτε. Σταθεροί στους 2 8 C επί 3 μήνες μετά την ανασύσταση. L2KCL2: 1 σετ Πριν κάνετε κάποια ρύθμιση, τοποθετήστε τις κατάλληλες ετικέτες των διαλυμάτων (παρέχονται με το kit) στους δοκιμαστικούς σωλήνες, έτσι ώστε οι ραβδοκώδικες να μπορούν να διαβαστούν από το σύστημα του αναλυτή. Συστατικά του Kit που προμηθεύονται ξεχωριστά Πολύ-αραιωτικό 2 (L2M2Z, L2M2Z4) Για την αραίωση των δειγμάτων των ασθενών στο μηχάνημα. Ένα φιαλίδιο που περιέχει συμπυκνωμένη (έτοιμη για χρήση), μήτρα μη ανθρώπινης πρωτεΐνης/ ρυθμιστικού, με συντηρητικό. Φύλαξη: 30 μέρες (μετά το άνοιγμα) στους 2 8 C ή 6 μήνες (διαχωρισμένα) στους 20 C. L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml Ετικέτες με ραβδοκώδικες παρέχονται για χρήση με το αραιωτικό. Πριν από τη χρήση, τοποθετείστε μια κατάλληλη ετικέτα σε ένα δοκιμαστικό σωλήνα mm, έτσι ώστε οι ραβδοκώδικες να μπορούν να διαβαστούν από το σύστημα του αναλυτή. L2M2Z: 3 ετικέτες L2M2Z4: 5 ετικέτες L2SUBM: Χημειοφωταυγές υπόστρωμα L2PWSM: Πλυστικό του ανιχνευτή L2KPM: Kit καθαρισμού του ανιχνευτή LRXT: Σωλήνες αντίδρασης (μιας χρήσεως) L2ZT: 250 δοκιμαστικοί σωλήνες για αραίωση του δείγματος ( mm) L2ZC: 250 καπάκια για σωλήνες αραίωσης δείγματος LCLCM: Δύο επιπέδων μονάδα ελέγχου με βάση πρωτεΐνη/ρυθμιστικό Απαιτούνται επίσης Απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό, δοκιμαστικοί σωλήνες, δείγματα ελέγχου. IMMULITE 2000 Calcitonin (PIEL2KCL-2 {17}, ) 13

14 Διαδικασία της ανάλυσης Σημειώστε ότι για το βέλτιστο αποτέλεσμα, είναι σημαντικό να ακολουθηθούν όλες οι τυπικές διαδικασίες όπως ορίζονται στο εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE Βλέπε το εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000 για: προετοιμασία, στήσιμο, αραιώσεις, ρυθμίσεις, ανάλυση και διαδικασίες ποιοτικού έλέγχου. Συνιστώμενος χρόνος μεταξύ των ρυθμίσεων: 4 εβδομάδες Δείγματα ποιοτικού ελέγχου: Χρησιμοποιείτε δείγματα ποιοτικού ελέγχου σε δύο τουλάχιστον επίπεδα (χαμηλό και υψηλό) καλσιτονίνης. Εφαρμόστε τους κρατικούς κανονισμούς ή τις απαιτήσεις πιστοποίησης για τη συχνότητα του ποιοτικού ελέγχου. Αναμενόμενες τιμές Με τη μέθοδο IMMULITE 2000 Καλσιτονίνη αναλύθηκαν δείγματα ορού 120 υγιών ανδρών και 90 υγιών γυναικών. Άντρες: Γυναίκες: Ανώτατο εύρος 95%: 8,4 pg/ml (2,46 pmol/l) Απόλυτο εύρος: ND 18,2 pg/ml (ND 5,33 pmol/l) Ανώτατο εύρος 95%: 5,0 pg/ml (1,46 pmol/l) Απόλυτο εύρος: ND 11,5 pg/ml (ND 3,36 pmol/l) Περιορισμοί Πολλαπλές μορφές ανοσοαντιδραστικής καλσιτονίνης βρίσκονται στην κυκλοφορία των υγιών ατόμων, των ασθενών με μυελώδες καρκίνωμα του θυροειδούς καθώς και ασθενών με άλλους κακοήθεις όγκους. Οι διαφορετικές αυτές μορφές καλσιτονίνης (πολυμερή και/ή γλυκοζυλιωμένες μορφές) μπορούν να έχουν μοριακά βάρη, τα οποία να κυμαίνονται από 3,4 εως 70 KDa. Συνεπώς, τα δείγματα μπορούν να παρουσιάζουν διαφορετική απόκριση σε μια ανοσοανάλυση και μη γραμμική αραίωση Αυξημένες τιμές καλσιτονίνης είναι δυνατό να παρατηρηθούν σε υγιή άτομα λόγω ανοσοαντίδρασης. 2 Επειδή η καλσιτονίνη είναι εξαιρετικά ασταθής, ιδιαίτερη προσοχή πρέπει να δίδεται στη σωστή συλλογή και συντήρηση των δειγμάτων. 1,3,7 Εάν από τον ασθενή συλλέγονται πολλαπλά δείγματα, π.χ. σε εξετάσεις διέγερσης πενταγαστρίνης ή τακτικής παρακολούθησης, όλα τα δείγματα πρέπει να αναλύονται με την ίδια διαδικασία. Ετεροφυλικά αντισώματα στον ανθρώπινο ορό μπορεί να αντιδράσουν με τις ανοσοσφαιρίνες που περιέχονται στα συστατικά της μεθόδου προκαλώντας αλληλεπιδράσεις με in vitro ανοσοαναλύσεις. [Bλ. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: ] Δείγματα ασθενών που εκτίθενται συστηματικά σε ζώα ή προϊόντα ζωικού ορού μπορούν να παρουσιάσουν αυτού του τύπου την αλληλεπίδραση που προκαλεί δυνητικά ένα ανώμαλο αποτέλεσμα. Αυτά τα αντιδραστήρια έχουν μορφοποιηθεί έτσι, ώστε να ελαχιστοποιούν τον κίνδυνο της αλληλεπίδρασης. Παρόλ αυτά, μπορεί να εμφανιστούν πιθανές αλληλεπιδράσεις μεταξύ σπάνιων ορών και των συστατικών της μεθόδου. Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα που λαμβάνονται από αυτή τη μέθοδο θα πρέπει πάντα να χρησιμοποιούνται σε συνδυασμό με τις κλινικές εξετάσεις, το ιατρικό ιστορικό του ασθενούς και άλλα ευρήματα. Απόδοση Βλέπε Πίνακες και Γραφήματα για αντιπροσωπευτικά δεδομένα της απόδοσης της μεθόδου. Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε pg/ml. (Εκτός αν κάτι σημειώνεται διαφορετικά, όλα πραγματοποιήθηκαν σε δείγματα ορού, που συλλέχθηκαν σε σωλήνες χωρίς παρεμποδιστές πηκτών ή προσθετικών που προκαλούν θρόμβους.) Παράγοντας μετατροπής: pg/ml 0,2926 pmol/l Εύρος αναφοράς: pg/ml (WHO 2nd IRP 89/620) Υψηλή δόση φαινομένου Hook: Καμία επίδραση έως τα pg/ml Αναλυτική ευαισθησία: 2 pg/ml (0,6 pmol/l) Ακρίβεια: Για 20 μέρες κάποια δείγματα εξετάστηκαν εις διπλούν, δις ημερησίως, συνολικά 40 φορές ή 80 επαναλήψεις. (Βλ. Πίνακα "Precision".) 14 IMMULITE 2000 Calcitonin (PIEL2KCL-2 {17}, )

15 Γραμμικότητα: Τα δείγματα αναλύθηκαν σε διάφορες αραιώσεις. (Bλ.Πίνακα "Linearity" για αντιπροσωπευτικά δεδομένα.) Ανάκτηση: Κάποια δείγματα (1 με 19) εμπλουτίστηκαν με τρία διαλύματα καλσιτονίνης (600, 6000 και pg/ml) και αναλύθηκαν. (Bλ. πίνακα "Recovery" για αντιπροσωπευτικά δεδομένα.) Ειδικότητα: Το αντίσωμα έχει υψηλή εξειδίκευση στην καλσιτονίνη. (Βλ. Πίνακα "Specificity".) Χολερυθρίνη: Η παρουσία χολερυθρίνης (συνδεδεμένης και έμμεσης) σε συγκεντρώσεις έως 200 mg/l δεν επηρεάζει τα αποτελέσματα της εξέτασης μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Αιμόλυση: Η παρουσία αιμοσφαιρίνης σε συγκεντρώσεις έως 512 mg/dl δεν επηρεάζει τα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Λιπιδαιμία: Η παρουσία τριγλυκεριδίων σε συγκεντρώσεις έως 3000 mg/dl δεν επηρεάζει τα αποτελέσματα της εξέτασης μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Εναλλακτικός τύπος δείγματος: Για να εκτιμηθεί το αποτέλεσμα των εναλλακτικών τύπων δείγματος, συλλέχθηκε αίμα από 16 εθελοντές σε απλούς, ηπαρινισμένους, EDTA και Becton Dickinson SST δοκιμαστικούς (vacutainer) σωλήνες. Ίσες ποσότητες των αντίστοιχων δειγμάτων εμπλουτίστηκαν με διάφορες συγκεντρώσεις καλσιτονίνης, ώστε να ληφθούν τιμές καθ' όλο το εύρος αναφοράς της ανάλυσης, και στη συνέχεια εξετάστηκαν σύμφωνα με τη διαδικασία του IMMULITE 2000 Καλσιτονίνη. (Ηπαρίνη) = 0,99 (Ορός) 3,6 pg/ml r = 0,999 (EDTA) = 0,79 (Ορός) 16,1 pg/ml r = 0,993 (SST) = 1,02 (Απλός ορός) 5,2 pg/ml r = 0,999 Μέσοι όροι: 542 pg/ml (Απλός ορού) 535 pg/ml (Ηπαρίνης) 413 pg/ml (EDTA) 549 pg/ml (SST) Σύγκριση της Μεθόδου 1: Η ανάλυση συγκρίθηκε με την ανάλυση IMMULITE Καλσιτονίνη σε 150 δείγματα. (Εύρος συγκέντρωσης: περίπου έως 1500 pg/ml. Δες γράφ 1.) Η ανάλυση γραμμικής παλινδρόμησης έδωσε τα ακόλουθα αποτελέσματα: (IML 2000) = 1,08 (IML) 9,6 pg/ml r = 0,991 Μέσοι όροι: 265 pg/ml (IMMULITE 2000) 253 pg/ml (IMMULITE) Σύγκριση της Μεθόδου 2: Η ανάλυση συγκρίθηκε επίσης με μια διαθέσιμη στο εμπόριο ανάλυση (Kit A) σε 67 δείγματα. (Εύρος συγκέντρωσης: περίπου έως 1500 pg/ml. Δες γράφ 2.) Η ανάλυση γραμμικής παλινδρόμησης έδωσε τα ακόλουθα αποτελέσματα: (IML 2000) = 0,81 (Kit A) 0,4 pg/ml r = 0,982 Μέσοι όροι: 193 pg/ml (IMMULITE 2000) 239 pg/ml (Kit A) Τεχνική Υποστήριξη Για τεχνική υποστήριξη αποταθείτε στον αντιπρόσωπο της χώρας σας. Το Σύστημα Ποιότητας της Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. είναι επικυρωμένο με ISO 13485:2003. Polski IMMULITE 2000 Kalcytonina Przeznaczenie: Test diagnostyczny in vitro dla analizatorów systemów IMMULITE 2000 do ilościowego oznaczenia kalcytoniny w surowicy i osoczu heparynowym, przydatny w diagnozowaniu i leczeniu chorób tarczycy i przytarczyc, włącznie z rakiem i nadczynnością przytarczyc. Numer katalogowy: L2KCL2 (200 testów) Kod testu: CAL Kolor: ciemnoróżowy Wprowadzenie Kalcytonina jest jednołańcuchowym hormonem peptydowym produkowanym głównie w gruczole tarczycy, w którym to wydzielana raczej przez komórki parafolikularne C niż komórki wydzielające tyroksynę. 1 Łańcuch kalcytoniny ma długość 32 aminokwasów i ciężar molekularny 3418 daltonów. 1 W IMMULITE 2000 Calcitonin (PIEL2KCL-2 {17}, ) 15

16 warunkach patologicznych hormon wykazuje pewne zróżnicowanie. Okres połowicznego trwania kalcytoniny w osoczu wynosi ok. 10 minut. Metabolizowana jest głownie w nerkach, lecz do jej częściowej degradacji dochodzi również pod wpływem czynników zawartych w osoczu, co implikuje konieczność zamrażania próbek wkrótce po pobraniu. 1,3 Fizjologiczne znaczenie kalcytoniny nie jest jasne, lecz na pewno wywiera nieznaczny wpływ na obniżenie poziomu wapnia i fosforu. Jej wydzielanie jest zazwyczaj modulowane przez wahania poziomu wapnia - wzrost stężenia wapnia w krążeniu stymuluje wzrost poziomu kalcytoniny. 1,18 Przy pomocy radioimmunotestu ustalono, że podstawowy zakres poziomu kalcytoniny na czczo w ekstrahowanym osoczu zdrowych osób dorosłych wynosi od 3 do 19 pg/ml. 2 Podniesiony poziom (ponad 100 pg/ml) wiąże się z szeregiem stanów patologicznych, a szczególnie z rakiem rdzeniastym tarczycy, nowotworem komórek tarczycy wydzielających kalcytoninę. Wzrost poziomu kalcytoniny jest często obserwowany przy białaczkach i zespołach mieloproliferacyjnych. 9 Ektopowo kalcytonina może być wydzielana przez nowotwory, np. płuc lub piersi. 10,11,12,15,19 Pomiar kalcytoniny nie posiada jednak waloru diagnostycznego przy takich schorzeniach. Wzrost poziomu kalcytoniny może mieć również związek z nadczynnością przytarczyc, hipergastrynemią, dysfunkcją nerek i chroniczną chorobą zapalną. 13,18 Zasada testu IMMULITE 2000 kalcytonina jest chemiluminescencyjnym, dwupunktowym testem imunometrycznym fazy stałej. Cykle inkubacji: 2 30 minut Czas do pierwszego wyniku: 65 minut Preparatyka próbek Wartości podstawowe wyznacza się zwykle na próbkach pobranych rano na czczo. Gdy próbki są zbierane w ramach testu prowokacyjnego, należy notować czas pobrania próbki w odniesieniu do czasu podania w kroplówce wapnia lub pentagastryny. EDTA wpływa na oznaczenie i nie jest zalecane do próbek. Zalecane jest klarowanie próbek lipemicznych przez ultrawirowanie. Hemoliza próbki może świadczyć o nieprawidłowym postępowaniu z próbką na etapie przedlaboratoryjnym. Fakt ten należy brać pod uwagę przy interpretacji wyników. Odwirowanie próbek surowicy przed zakończeniem wykrzepiania może doprowadzić do pojawienia się w nich fibryny. W celu wyeliminowania błędnych wyników spowodowanych obecnością fibryny przed przystąpieniem do wirowania należy mieć pewność, że skrzep jest ostatecznie uformowany. Niektóre próbki, a zwłaszcza pochodzące od osób poddanych leczeniu antykoagulantami, wymagają dłuższego czasu na wytworzenie skrzepu. Stosowane przy pobieraniu krwi probówki różnych producentów mogą różnie wpływać na uzyskiwane wyniki. Istotny jest materiał i domieszki, np. żel lub bariery fizjologiczne, aktywatory krzepnięcia oraz/lub antykoagulanty. Test IMMULITE 2000 kalcytonina nie został sprawdzony przy użyciu wszystkich możliwych wariantów probówek. Szczegółowe informacje o przetestowanych probówkach podano w dziale Różnorodne typy próbek. Wymagana objętość: 75 µl surowicy lub heparynowanego osocza. Przechowywanie: Stabilne przez 15 dni w temp. 20 C lub dłużej w temp. 70 C. 23 Natychmiast zamrozić. Ostrzeżenia i warunki wstępne Do użytku diagnostycznego in vitro. Odczynniki: Przechowywać w temp. 2 8 C. Utylizować zgodnie z mającymi zastosowanie przepisami. Zachować ogólne środki ostrożności i obchodzić się ze wszystkimi składnikami, zakładając, że mogą one stanowić źródło zakażenia. Materiał źródłowy pochodzący z ludzkiej krwi został przetestowany i uznany za niereaktywny w przypadku syfilisu, przeciwciał HIV 1 i 2, antygenu 16 IMMULITE 2000 Calcitonin (PIEL2KCL-2 {17}, )

17 powierzchniowego żółtaczki typu B oraz przeciwciał żółtaczki typu C. Substrat chemiluminescencyjny: Unikać zanieczyszczenia i chronić przed bezpośrednim działaniem światła słonecznego (patrz ulotka). Woda: Używać wody destylowanej lub dejonizowanej. Elementy zestawu Składniki tworzą dopasowany zestaw. Etykiety po wewnętrznej stronie pudełka są niezbędne do wykonania oznaczenia. Kalcytonina Pojemnik z kulkami (L2CL12) Z kodem kreskowym. 200 kulek opłaszczonych monoklonalnym mysim przeciwciałem antykalcytoninowym. Stabilne w temp. 2 8 C przed upływem daty ważności. L2KCL2: 1 pojemnik Kalcytonina Klin odczynnikowy (L2CLA2) Z kodem kreskowym. 11,5 ml zasadowej fosfatazy (izolowanej z jelita cielęcego) sprzęgniętej z poliklonalną kozią antykalcytoniną w buforze białkowym. Stabilne w temp. 2 8 C przed upływem daty ważności. L2KCL2: 1 klin Przed użyciem zerwać taśmę zabezpieczającą w wyperforowanym miejscu, nie uszkadzając kodu kreskowego. Usunąć foliową plombę w górnej części klina. Wsunąć przesuwne zamknięcie w dół w prowadnice w pokrywie odczynnika. Kalcytonina Kalibratory (LCLL, LCLH) Dwie fiolki (niska i wysoka) zawierające zliofilizowaną kalcytoninę w proteinowym buforze/matrycy. Zawartość każdej fiolki rekonstytuować 3,0 ml wody destylowanej lub dejonizowanej. Rozpipetować i zamrozić. Stabilne w temp. 20 C przez 3 miesiące po rekonstytucji. L2KCL2: 1 zestaw Przed przystąpieniem do kalibracji umocuj na probówkach odpowiednie nalepki z kodem kreskowym (dostarczane z zestawem) rozpoznawane przez czytnik kodów kreskowych aparatu. Materiały dostarczane oddzielnie Multirozcieńczalnik 2 (L2M2Z, L2M2Z4) Do rozcieńczania w aparacie próbek pobranych od pacjentów. Jedna fiolka skoncentrowanej, gotowej do użycia, buforowej, białkowej matrycy zwierzęcej ze środkiem konserwującym. Przechowywanie: 30 dni (po otworzeniu) w temp. 2 8 C lub 6 miesięcy (rozpipetowane) w temp. 20 C. L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml Nalepki z odpowiednimi kodami kreskowymi są dostarczane wraz z rozcieńczalnikiem. Przed użyciem umieścić odpowiednią nalepkę na probówce o wymiarach 16x100 mm, by umożliwić rozpoznanie kodów przez czytnik aparatu. L2M2Z: 3 nalepki L2M2Z4: 5 nalepek L2SUBM: Substrat chemiluminescencyjny L2PWSM: Roztwór płuczący L2KPM: Zestaw do oczyszczania LRXT: Probówki reakcyjne (jednorazowe) L2ZT: 250 probówek (o wymiarach mm) do rozcieńczania próbek L2ZC: 250 korków do probówek na rozcieńczalnik LCLCM: Dwupoziomowy moduł kontrolny na bazie buforu białkowego Również wymagane woda destylowana lub dejonizowana, probówki, kontrole. Procedura oznaczenia Przestrzeganie wszystkich procedur dotyczących konserwacji aparatu, zawartych w Instrukcji obsługi systemu IMMULITE 2000 pomaga zoptymalizować charakterystykę uzyskiwanych wyników. W Instrukcji obsługi systemu IMMULITE 2000 znajduje się opis procedur związanych z przygotowaniem i ustawieniem zestawu, rozcieńczaniem, kalibracją, oznaczaniem próbek oraz kontrolą jakości. Zalecany odstęp pomiędzy rekalibracjami: 4 tygodnie IMMULITE 2000 Calcitonin (PIEL2KCL-2 {17}, ) 17

18 Próbki kontrolne: Stosować kontrole lub zestawy próbek o co najmniej dwu poziomach stężenia (niskim i wysokim) kalcytoniny. Przestrzegać przepisów państwowych i wymogów kontrolnych w zakresie częstotliwości kontroli jakości. Oczekiwane wartości Przeanalizowane zostały według procedury testu IMMULITE 2000 kalcytonina próbki surowicy pochodzące od 120 mężczyzn i 90 kobiet, których stan zdrowia został określony jako dobry. Mężczyźni: Zakres 95% (wartości górne): 8,4 pg/ml (2,46 pmol/l) Zakres całkowity: NW 18,2 pg/ml (NW 5,33 pmol/l) Kobiety: Zakres 95% (wartości górne): 5,0 pg/ml (1,46 pmol/l) Zakres całkowity: NW 11,5 pg/ml (NW 3,36 pmol/l) Ograniczenia Wielorakie formy immunoreaktywnej kalcytoniny obecne są w krążeniu zdrowych osób, pacjentów z rakiem rdzeniastym tarczycy oraz pacjentów z innymi guzami nowotworowymi. Te różne formy kalcytoniny (polimery oraz/lub formy glikozylowane) mogą posiadać ciężary molekularne w zakresie od 3,4 do 70 KDa. Z tego względu próbki mogą wykazywać zróżnicowaną odpowiedź w immunoteście i nieliniowym rozcieńczeniu Spotyka się zdrowe osoby, u których poziom immunoreaktywnej kalcytoniny jest podwyższony. 2 Ze względu na wysoką labilność kalcytoniny należy zwracać szczególną uwagę na sposób pobierania i przechowywania próbek. 1,3,7 Jeśli szereg próbek pobiera się od jednej osoby, np. testując stymulację pentagastryną lub przy regularnym monitoringu, wszystkie próbki należy oznaczać według tej samej procedury. Przeciwciała heterofilne obecne w surowicy ludzkiej mogą wchodzić w reakcję z immunoglobulinami będącymi składnikami testu immunologicznego, wpływając na przebieg oznaczania in vitro. [Porównaj: Boscato L.M., Stuart M.C.: Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: (Przeciwciała heterofilne - problem wszystkich testów immunologicznych. Clin Chem 1988:34:27-33)] Wpływ przeciwciał heterofilnych może ujawnić się w oznaczeniach wykonywanych na próbkach pobranych od osób mających stały kontakt ze zwierzętami lub z produktami na bazie surowicy zwierzęcej, stanowiąc potencjalną przyczynę błędnych wyników. W teście ryzyko interferencji przeciwciał heterofilnych zostało zminimalizowane przez odpowiedni dobór proporcji odczynników, tym niemniej mogą wystąpić oddziaływania pomiędzy rzadkimi rodzajami surowic a składnikami testu. W postępowaniu diagnostycznym wyniki uzyskane tą metodą powinny być zawsze interpretowane w połączeniu z badaniem klinicznym pacjenta, jego historią choroby oraz innymi okolicznościami. Parametry testu Dane charakteryzujące test przedstawiono w Tabelach i rysunkach. Wyniki wyrażono w pg/ml. (O ile nie podano inaczej, wszystkie wyniki dotyczą próbek surowicy zebranych w probówkach bez bariery żelowej lub domieszek przyspieszających krzepnięcie.) Przelicznik: pg/ml 0,2926 pmol/l Zakres raportowania: pg/ml (WHO 2nd IRP 89/620) Efekt wysokiej dawki (High-Dose Hook Effect): Niestwierdzany do pg/ml. Czułość analityczna: 2 pg/ml (0,6 pmol/l) Precyzja: Próbki oznaczano w duplikatach w ciągu 20 dni, po dwie serie dziennie, otrzymując 40 serii i 80 powtórzeń (patrz tabela Specyficzność). Liniowość: Oznaczano próbki poddane różnym rozcieńczeniom. (Aby porównać reprezentatywne wyniki, patrz tabela Liniowość.) Odzysk: Oznaczano próbki wzbogacone w stosunku objętościowym 1 do 19 trzema roztworami kalcytoniny o stężeniach: 600, 6000 i pg/ml. (Aby porównać reprezentatywne wyniki, patrz tabela Odzysk.) Specyficzność: Przeciwciało jest wysoce specyficzne dla kalcytoniny (patrz tabela Specyficzność). 18 IMMULITE 2000 Calcitonin (PIEL2KCL-2 {17}, )

19 Bilirubina: Obecność sprzężonej i niesprzężonej bilirubiny w stężeniu do 200 mg/l nie wpływa na wyniki w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Hemoliza: Obecność hemoglobiny w stężeniu do 512 mg/dl nie wpływa na wyniki w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Lipemia: Obecność trójglicerydów w stężeniu do 3000 mg/dl nie wpływa na wyniki w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Różnorodne typy próbek: W celu określenia wpływu różnych typów próbek na wynik oznaczenia pobrano krew od 16 ochotników do zwykłych probówek, probówek heparynowanych, probówek z EDTA oraz probówek typu SST Vacutainer firmy Becton Dickinson. Równe objętości pogrupowanych próbek wzbogacono kalcytoniną o różnym stężeniu tak, aby uzyskać wartości pokrywające cały odnotowywany zakres kalibracji testu. Próbki oznaczono następnie zgodnie z procedurą testu IMMULITE 2000 kalcytonina. (heparyna) = 0,99 (surowica) 3,6 pg/ml r = 0,999 (EDTA) = 0,79 (surowica) 16,1 pg/ml r = 0,993 (SST) = 1,02 (surowica bez dodatków) 5,2 pg/ml r = 0,999 Średnie: 542 pg/ml (surowica bez dodatków) 535 pg/ml (heparyna) 413 pg/ml (EDTA) 549 pg/ml (SST) Porównanie metod 1: Oznaczenie to porównano z testem IMMULITE kalcytonina w grupie 150 próbek badanych. (Zakres stężeń: do około 1500 pg/ml. Porównaj wykres 1.) Równanie regresji liniowej: (IML 2000) = 1,08 (IML) 9,6 pg/ml r = 0,991 Średnie: 265 pg/ml (IMMULITE 2000) 253 pg/ml (IMMULITE) Porównanie metod 2: Oznaczenie to porównano z dostępnym na rynku testem Kit A (zestaw A) w grupie 67 próbek badanych. (Zakres stężeń: do około 1500 pg/ml. Porównaj wykres 2.) Równanie regresji liniowej: (IML 2000) = 0,81 (Kit A) 0,4 pg/ml r = 0,982 Średnie: 193 pg/ml (IMMULITE 2000) 239 pg/ml (Kit A) Pomoc techniczna i konsultacje Krajowy Dystrybutor udziela wszechstronnej pomocy technicznej. System Kontroli Jakości Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. posiada Certyfikat Jakości ISO 13485:2003. IMMULITE is a trademark of Siemens Healthcare Diagnostics Siemens Healthcare Diagnostics. All rights reserved. Origin: UK Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. Llanberis, Gwynedd LL55 4EL United Kingdom PIEL2KCL 2 {17} Changes in this Edition: cc#eu21889, cc#eu21889a: Added Time to First Result to the Principles of the Procedure section and quality control frequency information to the Assay Procedure section. Corrected regression equation under Alternate Sample Type. Was: (Heparin) = 0.99 (Serum) pg/ml. Is: (Heparin) = 0.99 (Serum) 3.6 pg/ml. Understanding the Symbols Understanding the Symbols En English Vysvětlivky symbolů Επεξήγηση των συμβόλων Znaczenie symboli Cz Česky El Ελληνικά Pl Polski IMMULITE 2000 Calcitonin (PIEL2KCL-2 {17}, ) 19

20 The following symbols may appear on the product labeling: / Na štítku výrobku mohou být uvedeny následující symboly: / Τα ακόλουθα σύμβολα ενδέχεται να εμφανίζονται στην επισήμανση του προϊόντος: / Na etykietach produktu mogą pojawiać się poniższe symbole: Symbol Definition En: In vitro diagnostic medical device Cz: Zdravotnický prostředek pro in vitro diagnostiku El: In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή Pl: Sprzęt do medycznej diagnostyki in vitro En: Catalog Number Cz: Katalogové číslo El: Αριθμός καταλόγου Pl: Numer katalogowy En: Manufacturer Cz: Výrobce El: Κατασκευαστής Pl: Producent En: Authorized Representative in the European Community Cz: Autorizované zastoupení v Evropské unii El: Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα Pl: Autoryzowany przedstawiciel w Unii Europejskiej En: CE Mark Cz: CE značka El: Σήμανση CE Pl: Znak CE En: CE Mark with identification number of notified body Cz: CE značka s identifikačním číslem notifikovaného orgánu El: Σήμανση CE με αριθμό αναγνώρισης του φορέα πιστοποίησης Pl: Znak CE z numerem identyfikacyjnym jednostki notyfikowanej En: Consult instructions for use Cz: Postupujte podle návodu k použití El: Συμβουλευτείτε τις οδηγίες λειτουργίας Pl: Zapoznać się z instrukcją użycia LOT Symbol Definition En: Caution! Potential Biohazard Cz: Pozor! Potenciální biohazard El: Πρoσοχή! Δυνητικός βιολογικός κίνδυνος Pl: Uwaga! Potencjalne zagrożenie biologiczne En: Temperature limitation (2 8 C) Cz: Teplotní rozsah (2 8 C) El: Περιορισμός θερμοκρασίας (2 8 C) Pl: Zakres temperatury (2 8 C) En: Upper limit of temperature ( -20 C) Cz: Horní teplotní limit ( -20 C) El: Ανώτερο όριο θερμοκρασίας ( -20 C) Pl: Górny zakres temperatury ( -20 C) En: Lower limit of temperature ( 2 C) Cz: Spodní teplotní limit ( 2 C) El: Κατώτερο όριο θερμοκρασίας ( 2 C) Pl: Dolny zakres temperatury ( 2 C) En: Do not freeze (> 0 C) Cz: Nezmrazovat (> 0 C) El: Μην καταψυχετε (> 0 C) Pl: Nie zamrażać (> 0 C) En: Do not reuse Cz: Pro jednorázové použití El: Μην κάνετε επαναληπτική χρήση Pl: Nie używać powtórnie En: Keep away from sunlight Cz: Chraňte před slunečním světlem El: Διατηρείτε μακριά από το ηλιακό φως Pl: Chronić przed światłem słonecznym En: Batch code Cz: Šarže El: Κωδικός παρτίδας Pl: Kod serii En: Contains sufficient for (n) tests Cz: Dostatečné množství pro (n) testů El: Περιεχόμενο επαρκές για (n) εξετάσεις Pl: Zawartość wystarczająca na (n) testów 20 IMMULITE 2000 Calcitonin (PIEL2KCL-2 {17}, )