TROMBOCITI ONTOGENEZA I STRUKTURA

Σχετικά έγγραφα
18. listopada listopada / 13

Cauchyjev teorem. Postoji više dokaza ovog teorema, a najjednostvniji je uz pomoć Greenove formule: dxdy. int C i Cauchy Riemannovih uvjeta.

ELEKTROTEHNIČKI ODJEL

TEČAJ: TROMBOCITI INTERDISCIPLINARNI PRISTUP

Eliminacijski zadatak iz Matematike 1 za kemičare

numeričkih deskriptivnih mera.

2 tg x ctg x 1 = =, cos 2x Zbog četvrtog kvadranta rješenje je: 2 ctg x

RIJEŠENI ZADACI I TEORIJA IZ

3.1 Granična vrednost funkcije u tački

Osnovni primer. (Z, +,,, 0, 1) je komutativan prsten sa jedinicom: množenje je distributivno prema sabiranju

Zadaci sa prethodnih prijemnih ispita iz matematike na Beogradskom univerzitetu

UNIVERZITET U NIŠU ELEKTRONSKI FAKULTET SIGNALI I SISTEMI. Zbirka zadataka

(P.I.) PRETPOSTAVKA INDUKCIJE - pretpostavimo da tvrdnja vrijedi za n = k.

Strukture podataka i algoritmi 1. kolokvij 16. studenog Zadatak 1

1.4 Tangenta i normala

SEMINAR IZ KOLEGIJA ANALITIČKA KEMIJA I. Studij Primijenjena kemija

( , 2. kolokvij)

Kontrolni zadatak (Tačka, prava, ravan, diedar, poliedar, ortogonalna projekcija), grupa A

III VEŽBA: FURIJEOVI REDOVI

Elementi spektralne teorije matrica

PRAVA. Prava je u prostoru određena jednom svojom tačkom i vektorom paralelnim sa tom pravom ( vektor paralelnosti).

10. STABILNOST KOSINA

PT ISPITIVANJE PENETRANTIMA

Računarska grafika. Rasterizacija linije

Izbor statističkih testova Ana-Maria Šimundić

SISTEMI NELINEARNIH JEDNAČINA

Ispitivanje toka i skiciranje grafika funkcija

Apsolutno neprekidne raspodele Raspodele apsolutno neprekidnih sluqajnih promenljivih nazivaju se apsolutno neprekidnim raspodelama.

Linearna algebra 2 prvi kolokvij,

OM2 V3 Ime i prezime: Index br: I SAVIJANJE SILAMA TANKOZIDNIH ŠTAPOVA

Matematičke metode u marketingumultidimenzionalno skaliranje. Lavoslav ČaklovićPMF-MO

DISKRETNA MATEMATIKA - PREDAVANJE 7 - Jovanka Pantović

M086 LA 1 M106 GRP. Tema: Baza vektorskog prostora. Koordinatni sustav. Norma. CSB nejednakost

IZVODI ZADACI (I deo)

Zavrxni ispit iz Matematiqke analize 1

HEMIJSKA VEZA TEORIJA VALENTNE VEZE

- pravac n je zadan s točkom T(2,0) i koeficijentom smjera k=2. (30 bodova)

PRIMJER 3. MATLAB filtdemo

Linearna algebra 2 prvi kolokvij,

SEKUNDARNE VEZE međumolekulske veze

IZVODI ZADACI ( IV deo) Rešenje: Najpre ćemo logaritmovati ovu jednakost sa ln ( to beše prirodni logaritam za osnovu e) a zatim ćemo

Matematička analiza 1 dodatni zadaci

Veleučilište u Rijeci Stručni studij sigurnosti na radu Akad. god. 2011/2012. Matematika. Monotonost i ekstremi. Katica Jurasić. Rijeka, 2011.

a M a A. Može se pokazati da je supremum (ako postoji) jedinstven pa uvodimo oznaku sup A.

Riješeni zadaci: Nizovi realnih brojeva

INTELIGENTNO UPRAVLJANJE

( ) ( ) 2 UNIVERZITET U ZENICI POLITEHNIČKI FAKULTET. Zadaci za pripremu polaganja kvalifikacionog ispita iz Matematike. 1. Riješiti jednačine: 4

3. razred gimnazije- opšti i prirodno-matematički smer ALKENI. Aciklični nezasićeni ugljovodonici koji imaju jednu dvostruku vezu.

I.13. Koliki je napon između neke tačke A čiji je potencijal 5 V i referentne tačke u odnosu na koju se taj potencijal računa?

Numerička matematika 2. kolokvij (1. srpnja 2009.)

Pismeni ispit iz matematike Riješiti sistem jednačina i diskutovati rješenja sistema u zavisnosti od parametra: ( ) + 1.

FTN Novi Sad Katedra za motore i vozila. Teorija kretanja drumskih vozila Vučno-dinamičke performanse vozila: MAKSIMALNA BRZINA

IZRAČUNAVANJE POKAZATELJA NAČINA RADA NAČINA RADA (ISKORIŠĆENOSTI KAPACITETA, STEPENA OTVORENOSTI RADNIH MESTA I NIVOA ORGANIZOVANOSTI)

TRIGONOMETRIJSKE FUNKCIJE I I.1.

1 UPUTSTVO ZA IZRADU GRAFIČKOG RADA IZ MEHANIKE II

Funkcije dviju varjabli (zadaci za vježbu)

41. Jednačine koje se svode na kvadratne

S t r a n a 1. 1.Povezati jonsku jačinu rastvora: a) MgCl 2 b) Al 2 (SO 4 ) 3 sa njihovim molalitetima, m. za so tipa: M p X q. pa je jonska jačina:

Trigonometrija 2. Adicijske formule. Formule dvostrukog kuta Formule polovičnog kuta Pretvaranje sume(razlike u produkt i obrnuto

Ĉetverokut - DOMAĆA ZADAĆA. Nakon odgledanih videa trebali biste biti u stanju samostalno riješiti sljedeće zadatke.

Sume kvadrata. mn = (ax + by) 2 + (ay bx) 2.

Periodičke izmjenične veličine

5. Karakteristične funkcije

Računarska grafika. Rasterizacija linije

21. ŠKOLSKO/OPĆINSKO/GRADSKO NATJECANJE IZ GEOGRAFIJE GODINE 8. RAZRED TOČNI ODGOVORI

Kaskadna kompenzacija SAU

Pošto pretvaramo iz veće u manju mjernu jedinicu broj 2.5 množimo s 1000,

4 INTEGRALI Neodredeni integral Integriranje supstitucijom Parcijalna integracija Odredeni integral i

POTPUNO RIJEŠENIH ZADATAKA PRIRUČNIK ZA SAMOSTALNO UČENJE

Implementacija HE4 i ROMA indeksa u Klinici za tumore Centru za maligne bolesti KBCSM

Konstruisanje. Dobro došli na... SREDNJA MAŠINSKA ŠKOLA NOVI SAD DEPARTMAN ZA PROJEKTOVANJE I KONSTRUISANJE

1. Pojam fazi skupa. 2. Pojam fazi skupa. 3. Funkcija pripadnosti, osobine i oblici. 4. Funkcija pripadnosti, osobine i oblici

PARNA POSTROJENJA ZA KOMBINIRANU PROIZVODNJU ELEKTRIČNE I TOPLINSKE ENERGIJE (ENERGANE)

TRIGONOMETRIJA TROKUTA

Obrada signala

DIMENZIONISANJE PRAVOUGAONIH POPREČNIH PRESEKA NAPREGNUTIH NA PRAVO SLOŽENO SAVIJANJE

MATRICE I DETERMINANTE - formule i zadaci - (Matrice i determinante) 1 / 15

Riješeni zadaci: Limes funkcije. Neprekidnost

Vrijedi relacija: Suma kvadrata cosinusa priklonih kutova sile prema koordinatnim osima jednaka je jedinici.

Vježba: Uklanjanje organskih bojila iz otpadne vode koagulacijom/flokulacijom

7 Algebarske jednadžbe

5. PARCIJALNE DERIVACIJE

( , treći kolokvij) 3. Na dite lokalne ekstreme funkcije z = x 4 + y 4 2x 2 + 2y 2 3. (20 bodova)

NOMENKLATURA ORGANSKIH SPOJEVA. Imenovanje aromatskih ugljikovodika

INTEGRALNI RAČUN. Teorije, metodike i povijest infinitezimalnih računa. Lucija Mijić 17. veljače 2011.

Operacije s matricama

Moguća i virtuelna pomjeranja

1 Promjena baze vektora

FUNKCIJE KRVI PLAZMA- ECM KRVI. KRV- analiza i hematokrit MEDICINARI K R V= tečno vezivno tkivo (5,5/6L) KRV = plazma i uobličeni elementi

Matematika 1 - vježbe. 11. prosinca 2015.

Iskazna logika 3. Matematička logika u računarstvu. novembar 2012

radni nerecenzirani materijal za predavanja

OBRTNA TELA. Vladimir Marinkov OBRTNA TELA VALJAK

IspitivaƬe funkcija: 1. Oblast definisanosti funkcije (ili domen funkcije) D f

POVRŠINA TANGENCIJALNO-TETIVNOG ČETVEROKUTA

KVADRATNA FUNKCIJA. Kvadratna funkcija je oblika: Kriva u ravni koja predstavlja grafik funkcije y = ax + bx + c. je parabola.

PARCIJALNI IZVODI I DIFERENCIJALI. Sama definicija parcijalnog izvoda i diferencijala je malo teža, mi se njome ovde nećemo baviti a vi ćete je,

VJEŽBE 3 BIPOLARNI TRANZISTORI. Slika 1. Postoje npn i pnp bipolarni tranziostori i njihovi simboli su dati na slici 2 i to npn lijevo i pnp desno.

FTN Novi Sad Katedra za motore i vozila. Teorija kretanja drumskih vozila Vučno-dinamičke performanse vozila: MAKSIMALNA BRZINA

OSNOVE TEHNOLOGIJE PROMETA

Transcript:

TROMBOCITI ONTOGENEZA I STRUKTURA Klinički zavod za kemiju KBC Sestre milosrdnice Biserka Getaldić Zagreb, 11.11.2017.

POVIJESNI PRAVAC P.G. Werlhof osobni liječnik Georga II identificirao Morbus maculosus haemoragicus opisom ITP J.J. Lister prvi upotrijebio akromatski mikroskop G. Bizzozero prvi identificirao trombocite kao krvne stanice i njihove hemostatske funkcije F. Brohm dijagnosticirao trombocitopeniju kao uzrok purpure P. Kaznelson student medicine u Pragu dokazao destrukciju trombocita u slezeni; započinje era splenektomije W.J.Harrington i P.S. Evans ITP je imunološki poremećaj; započinje era imunosupresiva Izoliran TPO Započinje era terapijske upotrebe TPO

LABORATORIJSKA DIJAGNOSTIKA 1910. Vrijeme krvarenja DUKE 1909. Bojenje razmaza po Wrightu indirekna metoda broja trombocita po Foni-u 1977. Direktne metode Riees Ecker 1980.Hematološki analizatori TROMBOCOUNTER 1980. S Plus Coulter 1982. David Bessman - inverzan odnos broja trombocita i MPV nomogram 1985. Technicon H*1- BROJ TROMBOCITA 1989. Coulter STKS 2006. Abbe Y. IPF na analizatorima

Naša povijest do 1985. direktna metoda Riess Ecker od 1989. automatsko brojenje

3 SPECIFIČNOSTI TROMBOCITA 1.MEGAKARIOPEZA 2.TROMBOPEZA 3. STANIČNA STRUKTURA

Klasični hijerarijski hematopoezni model - bifurkacija Produkcija u koštanoj srži iz iste progenitorske stanice kao za eritroidnu i mijeloidnu lozu CMP/CFU-GEMM Bipotencijal MEP (CFU-E/Mgk) konačno dovodi do prekursorskih stanica za razvoj Mgk Mgk prva morfološki moguća identificirana prekursorska stanica trombocita

MEGAKARIOPOEZA u adekvatnim uvjetima stanične kulture ovaj proces traje tjedan dana Mgk progenitorske stanice porast broja Mgk kao odgovor na hematopoetske citokine Hijerarhijski razvoj kroz stadije BFU-Mgk i CFU-Mgk (razlika u površinskim antigenima i karakteristikama rasta) Primitivnija progenitorska st. od BFU-Mgk megakariocitna st. s visokim proliferativnim potencijalom (HPPC-Mgk) Morfološki male neraspoznatljive st. nalik limfoidnima TPO kao glavni humoralni čimbenik regulacije razvoja trombocita

megakariocit trombopoeza trombocit CFU Meg je zrelija progenitorska stanica iz koje se razvija 3-50 zrelih megakariocita Megakariocit nema proliferacijskoi potencijal već u periodu od 4-10 sati može završiti transformaciju u protrombocite te njihovo sekvencioniranje u trombocite koje ulaze u cirkulaciju ( 4000-10000) Megakariociti mogu migrirati u pluća 250 000 megakariocita svakodnevno što rezultira sa novo formiranih 100 9 trombocita za usporedbu -u jednom satu 10 10 eritrocita ; 10⁹ granulocita Iz navedenog slijedi da je uski intraindividualni raspon od 14-25 X10 9 /L u cirkulaciji Laboratorijski uzorak

MIKROOKOLIŠ HEMATOPEZNIH STANICA U KOŠANOJ SRŽI TROMBOCITI ERITOCITI NEZRELE STANICE MIJELOIDENE LOZE

Trombopoietin 1994.izoliran Sintetizira se u stromi koštane srži, jetri, slezeni i bubregu Referentni interval koncentracije Tpo u serumu je 50-500pg/L, dobiven metodom ELISA. U bolesnika s kroničnim zatajenjem funkcije jetre nalaze se vrijednosti ispod donje granice detekcije svih metoda od 20pg/L - usporedba eritropoietin -3,0-16,6 IU /L- 1985. god. Upotreba rekombinantnog humanog Tpo (rhtpo) prije kemoterapije prema kliničkim studijama može smanjiti induciranost trombocitopenije te time i potrebu za transfuzijama trombocitnih pripravaka.

Mehanizam TPO

Protrombociti Otpuštanje trombocita s krajeva protrombocita slijedi niz nastanaka ruptura citoplazmatskih niti, nakon čega ostaje takozvana ogoljena jezgra megakariocita koja ulazi u proces apoptoze Trombociti ulaze u cirkulaciju pri čemu se odmah oko 30 % skladišti u slezeni Dijagnostika 1. Protrombocite nije moguće vidjeti svjetlosnim mikroskopijom 2. Formiranje protrombocita i ubrzavanje njihovog fragmentiranja od megakariocita i dalje je predmet istraživanja. Za sada je poznato da je povećanje / ubrzanje stvaranja protrombocita povezano sa povišenim tlakom smicanja

3.Laboratorijski dostupan pokazatelj ubrzane trombopoeze je udjel retikuliranih trombocita optička metoda uz fluorescenciju fluorokrom: oksazin dio fluorescentne analize trb. rezultat: %IPF (frakcija nezrelih trombocita) referentni intervali: 1,0-7,3%

Ultrastruktura trombocita pokazuje nekoliko zona ili regija s definiranom funkcionalnom aktivnosti : periferna i strukturna zona membranskog sustava citoplazmatska zona s organelama granule α i sive granule /dens /

Membranski sustav Površina trombocitne plazmatske membrane je glatka osim periodičnih invaginacija koje daju obrise kompleksnoj mreži intramembranskih cijevi koje su propusne do citoplazme i nazivaju se otvoreni kanikularni sustav Površina plazmatske membrane ili gilokaliks (često je nazivaju i pahuljasti omotač stanica) znatno je tanja od analognih površinskih slojeva Podražava više od 50 kategorija receptora koji sudjeluju u adheziji i inicijalizaciji agregacije vezujući specifične ligande ili agoniste Većina receptora poznata je po svojoj elektroforetskoj nomenklaturi

Shematski prikaz dijela glikoproteinskih receptora

Citoskeleton Membranski sustav trombocita predstavlja konglomerat lipidnih i proteinskih molekula i naziva se sol - zona ispod koje se nalazi mikrotubularni i filamentni skelet trombocita ili strukturna zona. Ova membrana trombocita je odvojena od intrastaničnog sadržaja mikroskopski nevidljivim slojem skeletom trombocita (na slici submembranski filamenti ). Ovaj citoskeleton je proteinska mreža koja pomaže plazmatskoj membrani da održi diskoidni oblik trombocita u mirovanju te omogućava ekstremno brze promjene oblika stanice tijekom aktivacije. Dva BITNA polimerna sustava postoje u megakariocitu: aktin i tubulin

citoskeleton

Strukturna zona osim otvorenog kanikularnog sustava trombociti imaju i gusti tubularni sustav (eng. DTS-dense tubular system) za koji se pretpostavlja da je analogija endoplazmatskom retikulumu i predominantni je sustav skladištenja kalcija i regulacije koncentracije kalcijevih iona, mjesto sinteze prostaglandina i tromboksana kao i enzima ciklooksigenaze ( samim tim ovaj je sustav izuzetno interesantan u razumijevanju mehanizma djelovanja antiagregacijskih lijekova).

Mikrograf elektronskim mikroskopom a. Visoko rezolutni mikrograf trombocita smještenog između eritrocita (lijevo) i endotelne stanice (desno). Vidljive organele: mitohondrij, mikrotubuli, jedinstveni profil površine vezane na otvoreni kanikularni sustav, profil gustog tubularnog sustava, poneka α- granula, jedna gusta granula i čestice glikogena. b. Dijagram trombocita koji prikazuje 4 strukturne zone.

Ključni proteini u α-granulama Koagulacijski proteini Ne-kogulacijski proteini α granule EGF - Endotelni faktor rasta, GMP - Gvanidinmonofosfat. GP Glikoprotein, HMWH Visoko molekularni kininogen, Ig Imunoglobulin, PAI-1 Inhibitor aktivatora plazminogena, PDCI trombocitni inhibitorkolagenaze, PDGF trombocitni faktor rasta PECAM-1 trombocitna molekula adhezije na endotel, PF4 trombocitni faktor 4, TGF β transformirajuči faktor rasta β, VEGF/VPF vaskularni endotelni faktor rasta i faktor permeabilnosti, VWF von Willebrandov Faktor, cap1 protein asociran s adenilciklazom Proteini prisutni u citoplazmi trombocita i α- granulama Unos endocitozom Fibronektin Albumini Fibrinogen Imunoglobulini Sintetizirani u megakariocitu Faktor V - Proteini prisutni u α-granulama, ali ne i u citoplazmi (sintetizirani u megakariocitu) Trombospondin - VWF - Β-tromboglobulin HMWK PAI-1 Plazminogen EGF Multimerin PDC1 PDGF PF4 Inhibitor proteina C TGF-β VEGF/VPF Proteini vezani na membranu trombocita Samo na membrani α-granula P-selektin GMP33 - Osteokalcin Na plazmatskoj membrani i α-granulama GP IIb-IIIa cap1 GP IV GP Ib-IX-V CD9 PECAM-1

Guste granule ADP Adenozindifosfat, ATP Adenozintrifosfat, P2Y1 I P2Y12 članovi porodice receptora na koje se vežu purini Serotonin Molekula Komentar ADP Nije metabolički, podržava agregaciju trombocita vezanjem na P2Y1 I P2Y12 ADP receptore ATP Nepoznata funkcija, otpuštanje ATP-a detektirano prilikom aktivacije trombocita Serotonin Vazokonstriktor, veže se za endotelne stanice i membranu trombocita Ca 2+ i Mg 2+ Važni za aktivaciju trombocita i koagulaciju

In vitro promjene Trajni problem u laboratorijskoj dijagnostici

Prikaz EDTA induciranih promjena- TEM A) Aktivirani trombociti sa značajnim morfološkim promjenama u membrani uključujući elongaciju B) Veliki aktivirani trombocit - potencijalne morfološke promjene u α granulama -priprema za kondenzaciju i fuziju C) Produžene projekcije trombocita i inicijacija PMP (trombocitne mikročestice) vezikulacije D) Intaktni aktivirani trombocit s fuzijom stanične membrane i PMP formacijom E) Projekcija stanične membrane i kondenzacija α organela F) Trombociti u naprednom stadiju aktivacije stanična membrana oštećena, PMP-ovi i druge stanične organele su otpuštene

Prikaz citrat induciranih promjena - TEM A) Križni presjek normalnog trombocita glatka stanična membrana -prikaz otvorenog kanalikularnog sustava i α granula B) Presjek kroz longutidinalnu ravninu C) Normalan presjek trombocita Ovoreni kanikularni sustav, Mitohondrij, granule i inatkna membarana D) Normalan trombocit intaktna stanična membrana i neke stanične organele - α granule, denzova tjelešca i produljene filamente denzovih tjelešaca E) Normalan trombocit sa depozitom glikogena F) Trombocit u ranom stadiju aktivacije, promjene stanične membrane

PRIMARNA HEMOSTAZA- in vivo ADHEZIJA SEKRECIJA AGREGACIJA

Potencijalno: Trombogram?! 1. Broj trombocita 2. MPV 3. Trombokrit 4. PDW 5. Trombociti fluorescencija 6. IPF 7. LPLTF 8. MPC Mean Platelet Component Concentration