For use on IMMULITE 2000 systems

Transcript

1 LH For use on IMMULITE 2000 systems

2 IMMULITE 2000 LH English Intended Use: For in vitro diagnostic use with the IMMULITE 2000 Systems Analyzers for the quantitative measurement of LH in serum, as an aid in clinical diagnosis. Catalog Number: L2KLH2 (200 tests), L2KLH6 (600 tests) Test Code: LH Color: Red Summary and Explanation Luteinizing hormone (lutropin, LH), a glycoprotein of 28,000 daltons, is secreted by the β-cells of the anterior pituitary under the control of the hypothalamic gonadotropin releasing hormone (GnRH). LH consists of two polypeptide chains, alpha and beta. The alpha chains of LH, FSH, TSH and HCG are biochemically identical, whereas the beta chains are biochemically unique, conferring bioactivity and biological and immunological specificity. In females, LH causes ovulation and steroid (estrogen and progesterone) production by the corpus luteum. Small quantities of LH are also necessary to promote estrogen production by the maturing follicle. In males, it stimulates interstitial (Leydig) cells to produce androgens and estrogens. Circulating levels of LH are controlled by a negative feedback effect on the hypothalamus by the steroid hormones. LH secretion, different for the two sexes and required for normal sexual function, occurs in pulses with rapid fluctuations over the entire reference range. Values for samples obtained in a single day from the same patient may therefore vary widely. LH measurements are used to define the hypothalamic-pituitary-gonadal axis. Serum gonadotropin determinations permit distinguishing between primary gonadal failure and deficient gonadal stimulation. If LH and FSH levels are elevated, primary gonadal failure is present, whereas if gonadotropin levels are low, deficient gonadal stimulation has resulted in the hypogonadal state. LH measurement is also clinically important because LH and growth hormone are frequently the first hormones to be affected by pituitary disease. Serum LH determinations have been very useful in the diagnosis and treatment of infertility in women. A midcycle rise is a good indication that ovulation will occur approximately 24 hours later. Subfertile couples, and women being treated with gonadotropins for infertility, can be informed that ovulation is imminent. Principle of the Procedure IMMULITE 2000 LH is a solid-phase, two-site chemiluminescent immunometric assay. Incubation Cycles: 1 30 minutes Specimen Collection The use of an ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples. Hemolyzed samples may indicate mistreatment of a specimen before receipt by the laboratory; hence the results should be interpreted with caution. Centrifuging serum samples before a complete clot forms may result in the presence of fibrin. To prevent erroneous results due to the presence of fibrin, ensure that complete clot formation has taken place prior to centrifugation of samples. Some samples, particularly those from patients receiving anticoagulant therapy, may require increased clotting time. Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE 2000 LH has not been tested with all possible variations of tube types. Volume Required: 75 µl serum Storage: 2 weeks at 2 8 C, or 2 months at 20 C. 11 Since LH is known to exhibit a small circadian rhythm, the time of collection should be noted. 2 IMMULITE 2000 LH (PIEL2KLH-5 {21}, )

3 Warnings and Precautions For in vitro diagnostic use. CAUTION: This device contains material of animal origin and should be handled as a potential carrier and transmitter of disease. H412 P273, P501 Harmful to aquatic life with long lasting effects. Avoid release to the environment. Dispose of contents and container in accordance with all local, regional, and national regulations. Contains: sodium azide; LH Adjustors Reagents: Store at 2 8 C. Dispose of in accordance with applicable laws. Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C. Sodium azide, at concentrations less than 0.1 g/dl, has been added as a preservative. On disposal, flush with large volumes of water to prevent the buildup of potentially explosive metal azides in lead and copper plumbing. Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert.) Water: Use distilled or deionized water. Materials Supplied Components are a matched set. Labels on the inside box are needed for the assay. LH Bead Pack (L2LH12) With barcode. 200 beads, coated with monoclonal murine anti-lh. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KLH2: 1 pack L2KLH6: 3 packs LH Reagent Wedge (L2LHA2) With barcode ml alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to polyclonal goat anti-lh in buffer. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KLH2: 1 wedge L2KLH6: 3 wedges Before use, tear off the top of the label at the perforations, without damaging the barcode. Remove the foil seal from the top of wedge; snap the sliding cover down into the ramps on the reagent lid. LH Adjustors (LLHL, LLHH) Two vials (Low and High) of lyophilized LH in a nonhuman serum matrix. Reconstitute each vial with 4.0 ml distilled or deionized water. Stable at 2 8 C for 30 days after reconstitution, or for 6 months (aliquotted) at 20 C. L2KLH2: 1 set L2KLH6: 2 sets Before making an adjustment, place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes so that the barcodes can be read by the on-board reader. Kit Components Supplied Separately L2SUBM: Chemiluminescent Substrate L2PWSM: Probe Wash L2KPM: Probe Cleaning Kit LRXT: Reaction Tubes (disposable) Also Required Distilled or deionized water; test tubes; controls Assay Procedure Note that for optimal performance, it is important to perform all routine maintenance procedures as defined in the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual. See the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual for preparation, setup, dilutions, adjustment, assay and quality control procedures. Recommended Adjustment Interval: 4 weeks Quality Control Samples: Follow government regulations or accreditation requirements for quality control frequency. Use controls or serum pools with at least two levels (low and high) of LH. IMMULITE 2000 LH (PIEL2KLH-5 {21}, ) 3

4 Siemens Healthcare Diagnostics recommends the use of commercially available quality control materials with at least 2 levels (low and high). A satisfactory level of performance is achieved when the analyte values obtained are within the Acceptable Control Range for the system, or within an established range determined by an appropriate internal laboratory quality control scheme. Expected Values Based on its relationship to IMMULITE LH (see Method Comparison), the assay can be expected to have essentially the same reference ranges. Reference ranges were generated using IMMULITE LH in a multi-national study involving women in apparent good health (age: years), who volunteered to have blood samples drawn, on a daily basis, throughout one complete ovulatory cycle. LH, miu/ml Ovulatory Cycles n* Median Central 95% Follicular Phase 54 (762) Midcycle 54 (54) Luteal Phase 54 (658) 4.3 ND 14.7 Perimenstrual, ± 8 days 54 (959) 3.9 ND 12.0 *Number of subjects (total number of results) LH, miu/ml Group n Median Central 95% Adult Males Adult Females: Postmenopausal* Oral Contraceptives ND 8.0 *Preliminary ND: Not detectable See Menstrual Cycle Graph (Tables and Graphs section). A cross-sectional study of pediatric fertility values performed with IMMULITE LH at a "wellness" clinic in the southwestern United States yielded the following results. LH, miu/ml Group Age (yr) n Median Central 95% Females Cord 31 ND ND ND ND 1.3 Males Cord 36 ND ND ND ND ND 3.8 Combined Cord 67 ND ND ND ND ND 3.2 ND: Not detectable Consider these limits as guidelines only. Each laboratory should establish its own reference ranges. Limitations Because of pulsatile secretion, samples obtained within the same day from the same patient may fluctuate widely within the reference range, reflecting physiological variation rather than errors in technique or methodology. The assay's crossreactivity to HCG is low and will not have impact under normal circumstances. However, for samples with very high levels of HCG, such as pregnancy samples, samples from trophoblastic disease or testicular cancer patients, LH may be falsely elevated due to crossreactivity to HCG. Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: ] Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings. 4 IMMULITE 2000 LH (PIEL2KLH-5 {21}, )

5 Performance Data See Tables and Graphs for data representative of the assay's performance. Results are expressed in miu/ml. (Unless otherwise noted, all were generated on serum samples collected in tubes without gel barriers or clot-promoting additives.) Calibration Range: up to 200 miu/ml (WHO 1st IRP 68/40 and 2nd IS 80/552) Analytical Sensitivity: 0.05 miu/ml High-dose Hook Effect: None up to 85,000 miu/ml Precision: Samples were assayed in duplicate over the course of 20 days, two runs per day, for a total of 40 runs and 80 replicates. (See "Precision" table.) Linearity: Samples were assayed under various dilutions. (See "Linearity" table for representative data.) Recovery: Samples spiked 1 to 19 with four LH solutions (200, 400, 1000 and 2000 miu/ml) were assayed. (See "Recovery" table for representative data.) Specificity: The antibody is highly specific for LH. (See "Specificity" table.) Bilirubin: Presence of bilirubin in concentrations up to 200 mg/l has no effect on results, within the precision of the assay. Hemolysis: Presence of hemoglobin in concentrations up to 188 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Lipemia: Presence of triglycerides in concentrations up to 3000 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Method Comparison: The assay was compared to IMMULITE LH on 105 samples. (Concentration range: approximately 1 to 140 miu/ml.) By linear regression: (IML 2000) = 1.04 (IML) 0.25 miu/ml r = Means: 26 miu/ml (IMMULITE 2000) 26 miu/ml (IMMULITE) References 1) Beitens I, et al. Gonadotropin determinations in timed 3-hour urine collections during the menstrual cycle and lhrh testing. J Clin Endo Metab 1976;43: ) Chipman J, et al. Interrelationship of plasma and urinary gonadotropins: correlations for 24 hours, for sleep/wake periods, and for 3 hours after luteinizing hormone-releasing hormone stimulation. Clin Endo Metab 1981;52: ) Davidsohn I, Henry J, editors. Clinical diagnosis by laboratory methods. 15th ed. Philadelphia: W.B. Saunders, 1974:704. 4) Kulin H, et al. Integration of pulsatile gonadotropin secretion by timed urinary measurements: an accurate and sensitive 3-hour test. J Clin Endo Metab 1975;40: ) Kulin H, Santner S. Timed urinary gonadotropin measurements in normal infants, children, and adults, and in patients with disorders of sexual maturation. J Pediatrics 1977;90: ) Nankin H, et al. Repetitive luteinizing hormone elevations in serum of normal men. J Clin Endo Metab 1972;33: ) Odell W, et al. Radioimmunoassay for luteinizing hormone in human plasma or serum. J Clin Invest 1967;46:248. 8) Rebar R, Yen S. In: Dorothy Krieger, editor. Endocrine rhythms. New York: Raven Press, ) Santner S, Santen R, Kulin H, Demers L. A model for validation of radioimmunoassay kit reagents: measurement of follitropin and lutropin in blood and urine. Clin Chem 1981;27: ) Urban M, et al. Comparison of estimates of gonadotropin levels by isolated blood samples, integrated blood concentrations, and timed urinary fractions. J Clin Endo Metab 1979;48: ) Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz textbook of clinical chemistry. 2nd ed. Philadelphia: W.B. Saunders, 1994: 920 Technical Assistance For technical assistance, contact your National Distributor. The Quality System of Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. is certified to ISO 13485:2003. IMMULITE 2000 LH (PIEL2KLH-5 {21}, ) 5

6 Tables and Graphs Linearity (miu/ml) Dilution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E in in % 2 in % 1 in % 2 8 in in % 2 in % 1 in % 3 8 in in % 2 in % 1 in % 4 8 in in % 2 in % 1 in % 5 8 in in % 2 in % 1 in % 6 8 in in % 2 in % 1 in % Česky. 1 Ředění, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 % Naměřená / Očekávaná, 5 8 v 8. Ελληνικά. 1 Αραίωση, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E, 5 8 στα 8. Polski. 1 Rozcieńczenie, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O, 5 8 w 8. Precision (miu/ml) Within-Run 1 Total 2 Mean 3 SD 4 CV 5 SD CV % % % % % % % % % % % % % % Česky. 1 V rámci stanovení, 2 Celkem, 3 Střední hodnota, 4 Směrodatná odchylka, 5 Variační koeficient. Ελληνικά. 1 Κατά την ίδια περίοδο, 2 Συνολικά, 3 Μέσος όρος, 4 SD, 5 CV. Polski. 1 W serii, 2 Całość, 3 Średnie, 4 SD, 5 CV. Specificity Compound 1 TSH FSH HCG Amount Added 2 32 ng/ml (158 µiu/ml) 18 ng/ml (345 miu/ml) Apparent LH 3 ND ND 104 ng/ml ng/ml (970 miu/ml) (2.44 miu/ml)* % Cross reactivity 4 ND ND 0.20% * The crossreactivity to multiple levels of HCG is shown below. 5 Compound HCG miu/ml Added ND: Not detectable. 6 Apparent LH miu/ml % Cross reactivity % % % Česky. 1 Sloučenina, 2 Přidané množství, 3 Zjevná koncentrace, 4 % Zkřížená reaktivita, 5 Zkřížená reaktivita vůči několikanásobnému množství HCG je uvedena níže, 6 ND: nezjistitelné. Ελληνικά. 1 Μείγμα, 2 Προστέθηκαν, 3 Εμφανής συγκέντρωση, 4 % Διασταυρ.Αντίδραση, 5 Η διαντίδραση σε πολλαπά επίπεδα της hcg φαίνεται παρακάτω, 6 ND: Μη ανιχνεύσιμη ποσότητα. Polski. 1 Składnik, 2 Ilość dodana, 3 Ilość stwierdzona, 4 % reaktywności krzyżowej, 5 Reaktywność krzyżowa dla wielokrotnych poziomów hcg jest pokazana poniżej, 6 Nieoznaczlne. 6 IMMULITE 2000 LH (PIEL2KLH-5 {21}, )

7 Recovery (miu/ml) Solution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E A % B % C % D % 2 14 A % B % C % D % 3 26 A % B % C % D % 4 54 A % B % C % D % A % B % C % D % Česky. 1 Roztok, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 Naměřená / Očekávaná. Ελληνικά. 1 Διάλυμα, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E. Polski. 1 Roztwór, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O. Method Comparison (IML 2000) = 1.04 (IML) 0.25 miu/ml r = English. LH Česky. LH. Ελληνικά. LH. Polski. LH. Menstrual Cycle Graph Lutropin, miu/ml [68/40] IMMULITE LH (LKLH) Cycle Day: Normalized to LH Peak English. Lutropin 1, Cycle Day: Normalized to LH Peak 2 Česky. 1 Lutropin, 2 Den cyklu: Normalizován k LH píku. Ελληνικά. 1 Λουτροπίνη, 2 Μέρα του κύκλου: Ομαλοποιημένη στην κορυφή του LH. Polski. 1 Lutropina, 2 Dzień cyklu: Odniesiony do piku LH. IMMULITE 2000 LH (PIEL2KLH-5 {21}, ) 7

8 Česky IMMULITE 2000 LH Použití : Pro in vitro diagnostické použití na analyzátorech IMMULITE 2000 ke stanovení koncentrace LH v séru, jakožto pomůcky při klinické diagnostice. Katalogové číslo : L2KLH2 (200 stanovení), L2KLH6 (600 stanovení) Kód metody : LH Barva : Červená Shrnutí a vysvětlení Luteinizační hormon (lutropin, LH) je glykoprotein s molekulovou hmotností daltonů. Je vylučován bazofilními beta buňkami adenohypofýzy a stimulován luliberinem hypotalamickým gonadotropin uvolňujícím hormonem (GnRH). LH sestává ze dvou polypeptidických řetězců, alfa a beta. Alfa řetězce hormonů LH, FSH, TSH a HCG jsou biochemicky shodné, zatímco beta řetězce jsou biochemicky jedinečné a vyznačují se bioaktivitou a biologickou a imunologickou specificitou. U žen způsobuje LH ovulaci a tvorbu steroidů (estrogenu a progesteronu) ve žlutém tělísku. Malé množství LH je rovněž nezbytné pro podporu tvorby estrogenu ve zrajícím folikulu. U mužů stimuluje produkci androgenů a estrogenů intersticiálními (Leydigovými) buňkami. Hladina LH v cirkulaci je regulována steroidními hormony prostřednictvím negativní zpětné vazby na hypotalamus. Sekrece LH, u obou pohlaví různá a nezbytná pro normální pohlavní funkci, se děje v impulsech s rychlými výkyvy koncentrace napříč celým referenčním rozmezím. Proto se hodnoty naměřené ve vzorcích od jednoho pacienta odebraných v průběhu jediného dne mohou podstatně lišit. Stanovení LH slouží k definování osy hypotalamus-hypofýza-gonády. Měření gonadotropinu v séru umožňuje rozlišit mezi primárním selháním gonád a jejich nedostatečnou stimulací. Při zvýšení koncentrace LH a FSH se jedná o primárním selháním gonád, zatímco při nízké koncentraci gonadotropinu je hypogonadální stav způsoben nedostatečnou stimulací gonád. Stanovení LH je klinicky významné i proto, že LH a růstový hormon jsou často prvními hormony, na kterých se projeví onemocnění hypofýzy. Stanovení LH v séru je velmi užitečným nástrojem při diagnostice a léčbě ženské neplodnosti. Nárůst jeho koncentrace uprostřed cyklu je známkou toho, že ovulace nastane přibližně za 24 hodin. Páry se sníženou plodností a ženy podstupující léčbu neplodnosti gonadotropiny tak můžou být spraveni o blížící se ovulaci. Princip Stanovení LH na analyzátorech IMMULITE 2000 je oboustranná chemiluminiscenční imunochemická reakce v pevné fázi. Inkubační cykly : 1 30 minut Odebírání vzorků K úpravě lipemických vzorků se doporučuje použití ultracentrifugy. Hemolyzované vzorky můžou být známkou nesprávného zacházení s preparátem ještě před přijetím do laboratoře; proto by výsledky měly být interpretovány s obezřetností. Centrifugace vzorků séra ještě před úplným vysrážením může mít za následek přítomnost fibrinu. Chybným výsledkům způsobeným přítomností fibrinu lze zamezit úplným vysrážením vzorků před jejich centrifugací U některých vzorků, zejména od pacientů podstupujících antikoagulační léčbu, může srážlivost vyžadovat více času. Použití zkumavek pro odběr krve od různých výrobců může poskytovat rozličné hodnoty v závislosti na materiálech a přísadách, včetně gelových nebo fyzických bariér, aktivátorů srážení a/nebo antikoagulačních činidel. Stanovení LH na analyzátorech IMMULITE 2000 nebylo testováno se všemi možnými varianty jednotlivých typů zkumavek Potřebný objem vzorku : 75 μl séra Skladování : 2 týdny při teplotě 2 8 C nebo 2 měsíce při teplotě 20 C. 11 Protože koncentrace LH se v průběhu dne mění, je třeba poznamenat čas odběru. 8 IMMULITE 2000 LH (PIEL2KLH-5 {21}, )

9 Upozornění a bezpečnostní opatření Pro in vitro diagnostické použití. UPOZORNĚNÍ : Souprava obsahuje material živočišného původu, se kterým je třeba zacházet jako s potenciálním nosičem a přenašečem nemocí. H412 P273, P501 Škodlivý pro vodní organismy, s dlouhodobými účinky. Zabraňte uvolnění do životního prostředí. Odstraňte obsah a obal v souladu se všemi místními, regionálními a národními předpisy. Obsahuje : azid sodný ; LH kalibrátory Reagencie : Skladujte při teplotě 2 8 C. Likvidujte v souladu s platnými předpisy. Řiďte se obecnými pravidly bezpečnosti práce a se všemi komponenty nakládejte, jako by byly potenciálně infekční. Zdrojové materiály získané z lidské krve byly testovány a shledány nereaktivní na syfilis, na protilátky proti HIV 1 a 2, na povrchový antigen hepatitidy typu B (HbsAg), a na protilátky proti hepatitidě typu C. Jako konzervační látka byl přidán azid sodný v koncentracích menších než 0,1 g/dl. Při likvidaci vypláchněte velkým množstvím vody, aby se zamezilo nahromadění potenciálně výbušných azidů kovů v olověném a měděném potrubí. Chemiluminiscenční substrát : Vyvarujte se kontaminace a nevystavujte přímému slunečnímu světlu. (Viz připojený letáček.) Voda : Použijte destilovanou nebo deionizovanou vodu. Dodaný materiál Komponenty představují ucelenou sadu. Pro stanovení jsou zapotřebí štítky na vnitřní krabici. LH zásobník s kuličkami (L2LH12) Opatřeno čárovým kódem. 200 kuliček potažených monoklonální myší protilátkou proti LH. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KLH2 : 1 balení L2KLH6 : 3 balení LH reagencie (L2LHA2) Opatřeno čárovým kódem. 11,5 ml alkalické fosfatázy (z telecího střeva) konjugované s polyklonální kozí protilátkou proti LH, v pufru. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KLH2 : 1 nádobka L2KLH6 : 3 nádobky Před použitím utrhněte vršek štítku v perforovaném místě, ale nepoškoďte čárový kód. Z vrchu nádobky odstraňte uzavírací fólii ; posuvný uzávěr zaklapněte do ramp na víčku reagencie. LH kalibrátory (LLHL, LLHH) Dvě ampulky s vysokou a nízkou koncentrací lyofilizovaného LH v nehumánním sérovém matrixu. Rekonstituujte každou ampulku přidáním 4,0 ml destilované nebo deionizované vody. Stabilní 30 dní po rekonstituci při teplotě 2 8 C nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při 20 C. L2KLH2 : 1 sada L2KLH6 : 2 sady Před adjustací nalepte na testovací zkumavky příslušné alikvotní štítky (dodané se soupravou) tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. Materiál dodávaný zvlášť L2SUBM : Chemiluminiscenční substrát L2PWSM : Promývací roztok L2KPM : Čistící roztok na jehly LRXT : Reakční zkumavky (na jedno použití) Dále potřebujete Destilovanou nebo deionizovanou vodu; testovací zkumavky, kontroly Postup stanovení K dosažení optimálního výkonu je důležité provádět veškerou pravidelnou údržbu stanovenou v manuálu k analyzátorům IMMULITE V manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000 najdete postupy: přípravy, nastavení, ředění, adjustace, stanovení vzorků a kontrol. Doporučený interval mezi adjustacemi : 4 týdny Vzorky ke kontrole kvality : Pokud jde o četnost kontroly kvality, je třeba řídit se IMMULITE 2000 LH (PIEL2KLH-5 {21}, ) 9

10 platnými předpisy a akreditačními požadavky. Použijte kontroly nebo směsné vzorky s alespoň dvěmi koncentracemi (vysokou a nízkou) LH. Společnost Siemens Healthcare Diagnostics doporučuje používat obchodně dostupné materiály kontroly kvality o přinejmenším dvou koncentracích vysoké a nízké. Vyhovující funkčnosti se dosahuje, pokud zjištěné hodnoty analytu leží uvnitř přijatelného kontrolního rozmezí analyzátoru nebo uvnitř rozmezí stanoveného příslušným interním systémem kontroly kvality dané laboratoře. Očekávané hodnoty Na základě příbuznosti tohoto stanovení s testem LH na analyzátoru IMMULITE (viz Srovnání metody) je možné očekávat prakticky stejná referenční rozmezí. Referenční rozmezí byla získána pomocí stanovení LH na analyzátoru IMMULITE v rámci nadnárodního výzkumu zjevně zdravých žen ve věku roků, které umožnily denní odběr vzorků své krve během jednoho celého ovulačního cyklu. LH, miu/ml Ovulační cyklus n* Medián Středních 95% Folikulární fáze 54 (762) 4,6 1,1 11,6 Střed cyklu 54 (54) Luteální fáze 54 (658) 4,3 ND 14,7 Perimenstruální, ± 8 dní 54 (959) 3,9 ND 12,0 *Počet jedinců (celkový počet výsledků) LH, miu/ml Středních Skupina n Medián 95% Dospělí muži 135 2,4 0,8 7,6 Dospělé ženy Menopauza* 75 24,9 11,3 39,8 Orální antikoncepce 104 3,1 ND 8,0 *Předběžně ND : nezjistitelné Viz graf Menstruační cyklus (v části Tabulky a grafy). Průřezová studie dětské fertility uskutečněná pomocí testu LH na analyzátoru IMMULITE na "wellness" klinice na jihozápadě Spojených států poskytla následující výsledky. Skupina Věk (roky) n Medián Ženy Pupečníko 31 ND vá krev Muži Ženy a muži ND : nezjistitelné LH, miu/ml Středních 95% 0,1 1,5 46 0,7 ND 2,3 1, ND ND 1,3 Pupečníko vá krev 36 ND ND 3,6 0,1 1,5 54 1,0 ND 4,1 1, ND ND 3,8 Pupečníko vá krev 67 ND ND 3,5 0,1 1, ,7 ND 3,7 1, ND ND 3,2 Uvedené hranice považujte pouze za orientační. Každá laboratoř by si měla stanovit svoje vlastní referenční rozmezí. Omezení Z důvodu sekrece LH v impulsech můžou hodnoty naměřené ve vzorcích od jednoho pacienta odebraných v průběhu jediného dne značně kolísat napříč celým referenčním rozmezím. Tato skutečnost odráží spíše fyziologické výkyvy než chybu v metodě nebo jejím provedení. Zkřížená reaktivita tohoto testu s HCG je nízká a za normálních okolností se její vliv neprojeví. Ale u vzorků s vysokou koncentrací HCG jako jsou vzorky od těhotných žen, pacientů s trofoblastickým onemocněním nebo rakovinou varlete může být stanovené množství LH falešně zvýšené z důvodu zkřížené reaktivity s HCG. Heterofilní protilátky v lidském séru můžou reagovat s imunoglobuliny obsaženými v komponentech soupravy a způsobit interference s in vitro imunologickým stanovením. [Viz Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: ] Vzorky pacientů rutinně vystavené kontaktu se zvířaty nebo produkty zvířecího séra můžou vykázat tento typ interference a potenciálně způsobit anomální výsledky. Tyto 10 IMMULITE 2000 LH (PIEL2KLH-5 {21}, )

11 reagencie byly vyvinuty tak, aby bylo riziko interference minimalizováno ; nicméně případné interakce mezi ojedinělými séry a komponenty testu se můžou vyskytnout. Pro diagnostické účely by se výsledky tohoto stanovení měly vždy používat v kombinaci s klinickými zkouškami, zdravotní historií pacienta a ostatními nálezy. Znaky metody Reprezentativní výsledky stanovení najdete v části Tabulky a grafy. Výsledky se udávají v miu/ml. (Pokud není uvedeno jinak, všechny výsledky byly získány na vzorcích séra odebraných do zkumavek bez gelových bariér nebo přísad podporujících srážlivost.) Kalibrační rozsah : Do 200 miu/ml (WHO 1st IRP 68/40 a 2nd IS 80/552) Analytická citlivost : 0,05 miu/ml High-dose Hook Effect : Do miu/ml žádný Přesnost : Vzorky byly stanovovány dvojmo v průběhu 20 dní, dva testy denně, celkem 40 testů a 80 replikátů. (Viz tabulka "Precision".) Linearita : Stanovení vzorků bylo provedeno při rozličném ředění. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce "Linearity".) Zpětná výtěžnost : Bylo provedeno stanovení vzorků séra s přídavkem čtyř roztoků LH (200, 400, 1000 a 2000 miu/ml) v poměru 1 : 19. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce "Recovery".) Specificita : Protilátka je silně specifická vůči LH. (Viz tabulka "Specificity".) Bilirubin : Přítomnost bilirubinu v koncentracích do 200 mg/l nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Hemolýza : Přítomnost hemoglobinu v koncentracích do 188 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Lipémie : Přítomnost triglyceridů v koncentracích do 3000 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Srovnání metody : Stanovení bylo porovnáno s testem LH na analyzátoru IMMULITE na 105 vzorcích. (Koncentrační rozsah: přibližně 1 až 140 miu/ml.) Podle lineární regrese: (IML 2000) = 1,04 (IML) 0,25 miu/ml r = 0,972 Střední hodnoty: 26 miu/ml (IMMULITE 2000) 26 miu/ml (IMMULITE) Technická Podpora Pro technickou podporu kontaktujte vašeho národního distributora. Systém kontroly jakosti společnosti Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. je certifikovaný podle ISO 13485:2003. Ελληνικά IMMULITE 2000 LH Ενδεδειγμένη χρήση: Για in vitro διαγνωστική χρήση με τα συστήματα αναλυτών IMMULITE 2000 για την ποσοτική μέτρηση της LH στον ορό, ως βοήθημα στην κλινική διάγνωση. Αριθμός καταλόγου: L2KLH2 (200 αναλύσεις), L2KLH6 (600 αναλύσεις) Κωδικός ανάλυσης: LH Χρώμα: Κόκκινο Περίληψη και Επεξήγηση Η ωχρινοτρόπος ορμόνη (λουτροπίνη, LH), μια γλυκοπρωτεϊνη daltons, εκκρίνεται από τα β-κύτταρα του πρόσθιου λοβού της υποφύσεως υπό τον έλεγχο της υποθαλαμικής ορμόνης απελευθερώσεως γοναδοτροπίνης (GnRH). Η LH αποτελείται από δύο πολυπεπτιδικές αλυσίδες, άλφα και βήτα. Οι άλφα αλυσίδες των LH, FSH, TSH και HCG είναι βιοχημικά ταυτόσημες, ενώ οι αλυσίδες βήτα είναι βιοχημικά μοναδικές, μεταδίδοντας βιολογική και ανοσολογική ειδικότητα. Στις γυναίκες, η LH προκαλεί ωορρηξία και παραγωγή στεροειδών (οιστρογόνα και προγεστερόνη) από το ωχρό σωμάτιο. Μικρές ποσότητες LH είναι επίσης αναγκαίες για την προώθηση της παραγωγής οιστρογόνων από το ώριμο ωοθυλάκιο. Στους άνδρες, διεγείρει τα ενδιάμεσα κύτταρα (Leydig) ώστε να IMMULITE 2000 LH (PIEL2KLH-5 {21}, ) 11

12 παραχθούν ανδρογόνα και οιστρογόνα. Τα επίπεδα της κυκλοφορούσας LH ελέγχονται με το αποτέλεσμα της αρνητικής ανάδρασης στον υποθάλαμο από τις στεροειδείς ορμόνες. Η έκκριση LH -που είναι διαφορετική στα δύο φύλα και χρειάζεται για την κανονική σεξουαλική λειτουργία- συμβαίνει σε παλμούς με γρήγορες διακυμάνσεις καθ όλο το μήκος του εύρους αναφοράς. Συνεπώς, οι τιμές των δειγμάτων που αποκτώνται σε μια μέρα από τον ίδιο ασθενή μπορεί να διαφέρουν πολύ. Οι μετρήσεις LH χρειάζονται για τον καθορισμό του υποθαλαμικούυποφυσιακού-γοναδικού άξονα. Οι προσδιορισμοί της γοναδοτροπίνης στον ορό επιτρέπουν την διάκριση μεταξύ πρωτογενούς γοναδικής ανεπάρκειας και ελλιπούς γοναδικής διέγερσης. Αν τα επίπεδα των LH και FSH είναι ανεβασμένα τότε υπάρχει πρωτογενής γοναδική ανεπάρκεια, ενώ όταν τα επίπεδα της γοναδοτροπίνης είναι χαμηλά τότε υπάρχει ελλιπής γοναδική διέγερση που έχει ως αποτέλεσμα υπογοναδική κατάσταση. Η μέτρηση της LH είναι επίσης κλινικά σημαντική γιατί η LH και η ορμόνη ανάπτυξης είναι συνήθως οι πρώτες ορμόνες που επηρεάζονται από τις ασθένειες της υπόφυσης. Οι προσδιορισμοί της LH στον ορό είναι πολύ χρήσιμες για την διάγνωση και την θεραπεία της στειρότητας στις γυναίκες. Μια αύξηση των τιμών στα μέσα του κύκλου είναι μια καλή ένδειξη ότι η ωορρηξία θα συμβεί περίπου 24 ώρες αργότερα. Υπογόνιμα ζευγάρια και γυναίκες που υποβάλλονται σε θεραπεία με γοναδοτροπίνες για υπογονιμότητα μπορούν να πληροφορηθούν ότι η ωορρηξία είναι επικείμενη. Αρχή της Διαδικασίας Η IMMULITE 2000 LH είναι μια ξηρής φάσης, δι-φασική (two-site) χημειοφωταυγής ανοσομετρική εξέταση. Κύκλοι επώασης: 1 30 λεπτά Συλλογή δείγματος Συνιστάται η χρήση της υπερφυγοκέντρου για να καθαριστούν λιπιδαιμικά δείγματα. Αιμολυμένα δείγματα ορού είναι ακατάλληλα για την ανάλυση. Η φυγοκέντρηση των δειγμάτων πριν την πλήρη πήξη μπορεί να έχει ως αποτέλεσμα την παρουσία θρόμβων. Για να αποφευχθούν λανθασμένα αποτελέσματα εξαιτίας της παρουσίας θρόμβων, βεβαιωθείτε ότι πριν την φυγοκέντρηση το αίμα έπηξε πλήρως. Κάποια δείγματα, ιδιαιτέρως αυτά των ασθενών που λαμβάνουν αντιπηκτική θεραπεία, ίσως χρειάζονται εκτεταμένο χρόνο πήξης. Οι σωλήνες συγκέντρωσης αίματος από διαφορετικές εταιρείες μπορεί να φέρουν διάφορες τιμές, ανάλογα με τα υλικά και τα συμπληρώματα, συμπεριλαμβανομένων των με τζελ ή φυσικών σωληναρίων, των ενεργοποιητών πήξεως και/ή των αντιπηκτικών. Η IMMULITE 2000 LH δεν έχει δοκιμαστεί με όλους τους τύπους σωληναρίων. Απαιτούμενος όγκος: 75 µl ορού Φύλαξη: 2 εβδομάδες στους 2 8 C, ή 2 μήνες στους 20 C. 11 Επειδή η LH παρουσιάζει μικρό κιρκάδιο ρυθμό, πρέπει να σημειώνεται η ώρα της συλλογής. Προειδοποιήσεις και Προφυλάξεις Για in vitro διαγνωστική χρήση. ΠΡΟΣΟΧΗ: Η συσκευή αυτή περιέχει υλικό ζωικής προέλευσης και ο χειρισμός της πρέπει να γίνεται ως εάν επρόκειτο περί δυνητικού φορέα και παράγοντα μετάδοσης νόσου. H412 P273, P501 Επιβλαβές για τους υδρόβιους οργανισμούς, με μακροχρόνιες επιπτώσεις. Να αποφεύγεται η ελευθέρωση στο περιβάλλον. Απορρίψτε το περιεχόμενο και τον περιέκτη σε συμμόρφωση με όλους τους τοπικούς, περιφερειακούς και εθνικούς κανονισμούς. Περιέχει: αζίδιο νατρίου, Ρυθμιστές LH Αντιδραστήρια: Φύλαξη στους 2 8 C. Υπόκεινται στην ισχύουσα νομοθεσία. Ακολουθείστε τις γενικές προφυλάξεις και χειριστείτε όλα τα συστατικά σαν να ήταν φορείς μολυσματικών παραγόντων. Όλα τα υλικά της μεθόδου που προέρχονται από ανθρώπινο αίμα έχουν ελεγχθεί και 12 IMMULITE 2000 LH (PIEL2KLH-5 {21}, )

13 βρέθηκαν αρνητικά για σύφιλη, για αντισώματα στον HIV 1 και 2, για τα επιφανειακά αντιγόνα της ηπατίτιδας B και για αντισώματα της ηπατίτιδας C. Αζίδιο του νατρίου σε συγκεντρώσεις μικρότερες από 0,1 g/dl, έχει προστεθεί ως συντηρητικό. Κατά την απόθεση, ξεπλύνετε με πολύ νερό προκειμένου να εμποδίσετε την δημιουργία εκρηκτικών μεταλλικών αζιδίων στους χάλκινους ή μολύβδινους σωλήνες αποχέτευσης. Υπόστρωμα χημειοφωταύγειας: Το υπόστρωμα χημειοφωταύγειας δεν πρέπει να εκτίθεται σε απευθείας ηλιακό φως. Δεν πρέπει να μολυνθεί. (Δες ένθετο.) Νερό: Χρήση απεσταγμένου ή απιονισμένου νερού. Υλικά που διατίθενται Τα υλικά είναι μια ολοκληρωμένη ενότητα. Οι ετικέτες στο εσωτερικό του κουτιού είναι απαραίτητες για την ανάλυση. LH σε συσκευασία σφαιριδίων (L2LH12) Με γραμμογράφηση. 200 σφαιρίδια, επικαλυμμένα με μονοκλωνικά αντισώματα anti-lh ποντικού. Σταθερά στους 2 8 C μέχρι την ημερομηνία λήξεως. L2KLH2: 1 συσκευασία L2KLH6: 3 συσκευασίες Δοχείο αντιδραστηρίου LH (L2LHA2) Με γραμμογράφηση. 11,5 ml αλκαλικής φωσφατάσης (βόειο έντερο) συνδεδεμένης με πολυκλωνικό anti-lh κατσίκας σε ρυθμιστικό διάλυμα. Σταθερά στους 2 8 C μέχρι την ημερομηνία λήξεως. L2KLH2: 1 δοχείο L2KLH6: 3 δοχεία Πριν την χρήση, αφαιρέστε την διαφανή ταινία προσέχοντας να μην καταστραφεί ή γραμμογράφηση. Αφαιρέστε (ξεκολλήστε) προσεκτικά το κάλυμμα από την επάνω επιφάνεια του δοχείου, και πιέστε το κάλυμμα κάτω προς τους κεκλιμένους οδηγούς-ράγες. Ρυθμιστές LH (LLHL, LLHH) Δύο φιαλίδια (χαμηλό και υψηλό) λυοφιλοποιημένης LH σε μήτρα μη ανθρώπινου ορού. Κάντε ανασύσταση κάθε φιαλιδίου με 4,0 ml απεσταγμένου ή απιονισμένου νερού και ανακινήστε με απαλή αναστροφή. Σταθερά στους 2 8 C για 30 μέρες μετά την ανασύσταση ή για 6 μήνες (διαχωρισμένα) στους 20 C. L2KLH2: 1 σετ L2KLH6: 2 σετ Πριν κάνετε τη ρύθμιση, τοποθετείστε τις κατάλληλες ετικέτες (παρέχονται με το kit) στους δοκιμαστικούς σωλήνες, έτσι, ώστε τα barcodes να μπορούν να διαβαστούν από το κατάλληλο σύστημα. Συστατικά του Kit που προμηθεύονται ξεχωριστά L2SUBM: Χημειοφωταυγές υπόστρωμα L2PWSM: Πλυστικό του ανιχνευτή L2KPM: Kit καθαρισμού του ανιχνευτή LRXT: Σωλήνες εξέτασης μιας χρήσης Χρειάζονται επίσης Απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό, σωληνάρια, έλεγχοι Διαδικασία της ανάλυσης Σημειώστε ότι για το βέλτιστο αποτέλεσμα, είναι σημαντικό να ακολουθηθούν όλες οι τυπικές διαδικασίες όπως ορίζονται στο εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE Βλέπε το εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000 για προετοιμασία, στήσιμο, αραιώσεις, ρυθμίσεις, ανάλυση και διαδικασίες ποιοτικού έλέγχου. Συνιστώμενος χρόνος μεταξύ των ρυθμίσεων: 4 εβδομάδες Δείγματα ελέγχου ποιότητας: Εφαρμόστε τους κρατικούς κανονισμούς ή τις απαιτήσεις πιστοποίησης για τη συχνότητα του ποιοτικού ελέγχου. Χρησιμοποιείτε δείγματα ελέγχου ποιότητας σε δύο τουλάχιστον επίπεδα(χαμηλό και υψηλό) συγκέντρωσης της LH. Η Siemens Healthcare Diagnostics συνιστά τη χρήση εμπορικά διαθέσιμων υλικών ελέγχου ποιότητας με τουλάχιστον 2 επίπεδα (χαμηλό και υψηλό). Ένα ικανοποιητικό επίπεδο απόδοσης επιτυγχάνεται όταν οι τιμές που προκύπτουν βρίσκονται εντός του αποδεκτού εύρους των υλικών ελέγχου για τον αναλυτή ή εντός ενός καθορισμένου εύρους που καθορίστηκε με βάση ένα κατάλληλο πλαίσιο εσωτερικού εργαστηριακού ποιοτικού ελέγχου. IMMULITE 2000 LH (PIEL2KLH-5 {21}, ) 13

14 Αναμενόμενες τιμές Βασισμένη στην σχέση της με την ανάλυση IMMULITE LH Προγεστερόνη (δες Σύγκριση της Μεθόδου), η εξέταση αναμένεται να έχει ουσιαστικά τα ίδια εύρη αναφοράς. Τα εύρη αναφοράς δημιουργήθηκαν έπειτα από μια διεθνική μελέτη με την IMMULITE LH σε γυναίκες με καλή υγεία (ηλικία χρονών) που προσφέρθηκαν να δίνουν αίμα σε καθημερινή βάση, ακολουθώντας έναν πλήρη κύκλο ωορρηξίας. Κύκλοι ωορρηξίας n* Θυλακοειδής φάση LH, miu/ml Ενδιάμεση τιμή Κεντρική τιμή 95% 54 (762) 4,6 1,1 11,6 Μέσο του κύκλου 54 (54) Ωχρινική φάση 54 (658) 4,3 ND 14,7 Περί την έμμηνο 54 (959) 3,9 ND 12,0 ρύση, ± 8 μέρες * Αριθμός υποκειμένων (ολικός αριθμός των αποτελεσμάτων) LH, miu/ml Ενδιάμεση Κεντρική Ομάδα n τιμή τιμή 95% Ενήλικοι άνδρες 135 2,4 0,8 7,6 Ενήλικες γυναίκες: Εμμηνόπαυση* 75 24,9 11,3 39,8 Αντισυλληπτικά 104 3,1 ND 8,0 *Προκαταρκτικά ND: μη ανιχνεύσιμη Δες γράφημα Menstrual Cycle (Ενότητα Πινάκων και Γραφημάτων). Σε μία διατμηματική μελέτη τιμών γονιμότητας με IMMULITE LH σε παιδιά, εξετάστηκαν δείγματα ορού σε μία κλινική τύπου wellness των νοτιοδυτικών ΗΠΑ. Ηλικία (χρ.) Ενδιάμε Ομάδα n ση τιμή Κορίτσια Λώρος 31 ND LH, miu/ml Κεντρική τιμή 95% 0,1 1,5 46 0,7 ND 2,3 1, ND ND 1,3 Αγόρια Λώρος 36 ND ND 3,6 0,1 1,5 54 1,0 ND 4,1 1, ND ND 3,8 Μεικτά Λώρος 67 ND ND 3,5 ND: Μη ανιχνεύσιμη 0,1 1, ,7 ND 3,7 1, ND ND 3,2 Τα εργαστήρια πρέπει να θεωρούν αυτά στα όρια μόνο ως κατευθυντήριες γραμμές. Συνιστάται κάθε εργαστήριο να έχει τα δικά του εύρη αναφοράς. Περιορισμοί Λόγω της παλμικής έκκρισης, τα δείγματα που συλλέγονται από τον ίδιο ασθενή την ίδια μέρα μπορεί να αυξομειώνονται ευρέως μέσα στο εύρος αναφοράς, αντανακλώντας φυσιολογική διακύμανση παρά λάθη στην τεχνική ή στην μεθοδολογία. Η διασταυρούμενη αντίδραση της ανάλυσης με την HCG είναι χαμηλή και δεν έχει επίπτωση υπό κανονικές συνθήκες. Όμως, σε δείγματα με πολύ υψηλά επίπεδα HCG, όπως τα δείγματα εγκύων και τα δείγματα πασχόντων από τροφοβλαστική ασθένεια ή από καρκίνο των όρχεων, η LH μπορεί να είναι ψευδώς ανεβασμένη λόγω της διασταυρούμενης αντίδρασης της με την HCG. Τα ετεροφυλικά αντισώματα που περιέχονται στον ανθρώπινο ορό μπορεί να αντιδράσουν με τις ανοσοσφαιρίνες που περιλαμβάνονται στα συστατικά της εξέτασης έχοντας ως αποτέλεσμα την παρεμβολή τους στις ανοσομετρικές εξετάσεις in vitro. [Βλ. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: ] Δείγματα από ανθρώπους που εκτίθενται συχνά σε ζώα ή σε προϊόντα ορού ζώων μπορεί να έχουν τέτοια παρεμβολή και ως εκ τούτου λανθασμένο αποτέλεσμα. Τα αντιδραστήρια σχεδιάστηκαν έτσι ώστε να ελαχιστοποιείται αυτός ο κίνδυνος, 14 IMMULITE 2000 LH (PIEL2KLH-5 {21}, )

15 παρόλα αυτά ενδεχόμενες αλληλεπιδράσεις μεταξύ κάποιων σπάνιων ορών και των συστατικών της εξέτασης μπορεί να συμβούν. Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα αυτής της εξέτασης πρέπει πάντοτε να συνδυάζονται με την κλινική εξέταση, το ιστορικό του ασθενούς και άλλα ευρήματα. Απόδοση Δείτε παρακάτω τους πίνακες και τα γραφικά που αναπαριστούν την απόδοση της εξέτασης. Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε miu/ml. (Εκτός αν κάτι σημειώνεται διαφορετικά, όλα πραγματοποιήθηκαν σε δείγματα ορών που συλλέχθηκαν σε σωλήνες χωρίς παρεμποδιστές πηκτών ή προσθετικών που προκαλούν θρόμβους.) Εύρος καμπύλης: μέχρι 200 miu/ml (WHO 1st IRP 68/40 και 2nd IS 80/552) Αναλυτική Ευαισθησία: 0,05 miu/ml Επίδραση υψηλής δόσης φαινομένου Hook: Κανένα μέχρι miu/ml Ακρίβεια: Για 20 μέρες κάποια δείγματα εξετάστηκαν εις διπλούν, δις ημερησίως, συνολικά 40 φορές ή 80 επαναλήψεις. (Βλ. Πίνακα Precision.) Γραμμικότητα: Ελέγχθηκαν δείγματα με διάφορες αραιώσεις. (Βλ. Πίνακα Linearity για τα αντιπροσωπευτικά δεδομένα.) Ανάκτηση: Κάποια δείγματα (1 με 19) εμπλουτίστηκαν με τέσσερα διαλύματα LH (200, 400, 1000 and 2000 miu/ml) και αναλύθηκαν. (Βλ. Πίνακα Recovery για τα αντιπροσωπευτικά δεδομένα.) Ειδικότητα: Το αντίσωμα είναι εξαιρετικά ειδικό για LH. (Βλ. Πίνακα Specificity.) Χολερυθρίνη: Παρουσία χολερυθρίνης σε συγκεντρώσεις μέχρι 200 mg/l δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης. Αιμόλυση: Παρουσία αιμοσφαιρίνης σε συγκεντρώσεις μέχρι 188 mg/dl δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Λιπιδαιμία: Παρουσία τριγλυκεριδίων σε συγκεντρώσεις μέχρι 3000 mg/dl δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης Σύγκριση της Μεθόδου: Η ανάλυση συγκρίθηκε με την IMMULITE LH σε 105 δείγματα. (Εύρος συγκέντρωσης: περίπου 1 με 140 miu/ml.) Η ανάλυση γραμμικής παλινδρόμησης έδωσε τα ακόλουθα αποτελέσματα: (IML 2000) = 1,04 (IML) 0,25 miu/ml r = 0,972 Μέσοι όροι: 26 miu/ml (IMMULITE 2000) 26 miu/ml (IMMULITE) Τεχνική Υποστήριξη Για τεχνική υποστήριξη αποταθείτε στον αντιπρόσωπο της χώρας σας. Το Σύστημα Ποιότητας της Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. είναι επικυρωμένο με ISO 13485:2003. Polski IMMULITE 2000 LH Przeznaczenie: Test diagnostyczny in vitro dla analizatorów systemów IMMULITE 2000 do ilościowego oznaczenia poziomu LH w surowicy, przydatny w diagnostyce klinicznej. Numery katalogowe: L2KLH2 (200 testów), L2KLH6 (600 testów) Kod testu: LH Kolor: Czerwony Wprowadzenie Hormon luteinizujący (lutropina, LH), glikoproteina o masie cząsteczkowej D, jest wydzielana przez komórki β przedniej części przysadki mózgowej, pod ścisłą kontrolą podwzgórzowej gonadoliberyny (GnRH). LH składa się z dwóch podjednostek: łańcuchów polipeptydowych: α i β. Podjednostka α cząsteczki LH nie różni się od odpowiedników w FSH, TSH i HCG. Podjednostka β natomiast, jest biochemicznie różna i decyduje o biologicznej aktywności LH oraz jej immunologicznej i biologicznej swoistości. U kobiet LH powoduje owulację oraz produkcję hormonów steroidowych (progesteron i estrogeny) przez ciałko żółte. Małe ilości LH są również niezbędne do zapoczątkowania produkcji estrogenów przez dojrzały pęcherzyk jajnika. U mężczyzn LH stymuluje komórki IMMULITE 2000 LH (PIEL2KLH-5 {21}, ) 15

16 śródmiąższowe (komórki Leydiga) do produkcji androgenów i estrogenów. Poziom krążącej LH regulowany jest przez podwzgórze na drodze ujemnego sprzężenia zwrotnego z poziomem krążących steroidów. Wydzielanie LH, zależne od płci i niezbędne dla prawidłowych funkcji płciowych, ma charakter pulsacyjny, co wpływa na szybkie zmiany jej poziomu, mieszczące się jednak w zakresach wartości referencyjnych. Powoduje to, że wyniki w kolejnych próbkach od badanego w ciągu doby mogą się znacznie różnić. Pomiar stężenia LH jest pomocny w ocenie aktywności osi podwzgórzeprzysadka mózgowa-gonady. Poziom gonadotropin w surowicy pozwala na rozróżnienie pierwotnej niedoczynności gonad od ich upośledzonej stymulacji. Podwyższony poziom LH i FSH wskazuje na pierwotną niedoczynność gonad, natomiast ich niedobór jest wynikiem niedoczynności wtórnej. Ponadto pomiar stężenia LH ma istotne znaczenie w rozpoznawaniu chorób przysadki mózgowej, w których jako pierwsze następują zmiany stężenia LH i hormonu wzrostu. Oznaczenie poziomu LH w surowicy jest bardzo przydatne w diagnozowaniu i leczeniu niepłodności u kobiet. Wzrost stężenia LH w czasie trwania cyklu wskazuje, że owulacja nastąpi w przybliżeniu 24 godziny później. Informacja taka jest istotna dla par o obniżonej płodności i kobiet leczących bezpłodność przy pomocy gonadotropin. Zasada Testu IMMULITE 2000 LH jest immunoenzymatycznym, chemiluminescencyjnym, dwupunktowym testem imunometrycznym fazy stałej. Czas inkubacji: 1 30 minut Preparatyka Próbek Zalecane jest ultrawirowanie próbek lipemicznych. Hemoliza próbki może świadczyć o nieprawidłowym postępowaniu z próbką na etapie przedlaboratoryjnym. Fakt ten należy brać pod uwagę przy interpretacji wyników. Odwirowanie próbki krwi przed zakończeniem wykrzepiania może spowodować, że w supernatancie pozostanie fibryna stanowiąca przyczynę fałszywych wyników. Przed przystąpieniem do wirowania należy mieć pewność, że skrzep jest ostatecznie uformowany. Niektóre próbki, a zwłaszcza pochodzące od osób poddanych leczeniu antykoagulantami, wymagają dłuższego czasu na wytworzenie skrzepu. W zależności od producenta probówki do pobierania krwi mogą różnie wpływać na uzyskiwane wyniki. Istotne jest tworzywo i czynniki dodatkowe jak żel lub bariery oddzielające skrzep, aktywatory krzepnięcia oraz antykoagulanty. Wpływ wszystkich możliwych wariantów probówek na test IMMULITE 2000 LH nie został określony. Wymagana objętość próbki: 75 µl surowicy Przechowywanie materiału: 2 tygodnie w 2 8 C lub 2 miesiące w 20 C. 11 Ze względu na cykliczność wydzielania LH należy zanotować czas pobrania materiału do badania. Ostrzeżenia I Warunki Wstępne Test diagnostyczny in vitro. PRZESTROGA: Materiał pochodzenia zwierzęcego. Postępować tak jak z materiałem potencjalnie zakaźnym. H412 P273, P501 Działa szkodliwie na organizmy wodne, powodując długotrwałe skutki. Unikać uwolnienia do środowiska. Pojemnik i zawartość usuwać zgodnie z wszystkimi lokalnymi, regionalnymi i krajowymi przepisami. Zawiera: azydek sodu; LH Kalibratory Odczynniki: Przechowywać w 2 8 C. Usuwać zgodnie z instrukcją. Zachowywać środki ostrożności konieczne przy pracy z materiałem potencjalnie zakaźnym. W materiałach pochodzących z krwi ludzkiej wykluczono reaktywność w kierunku syfilisu, obecność przeciwciał anty-hiv1/2, HBsAg i przeciwciał anty-hcv. 16 IMMULITE 2000 LH (PIEL2KLH-5 {21}, )

17 Niektóre składniki zestawu mogą zawierać azydek sodu w stężeniu mniejszym niż 0,1 g/dl, użyty jako konserwant. Wykorzystane odczynniki usuwać w dużej ilości wody, by zapobiec osadzaniu azydku sodu w rurach miedzianych lub ołowianych, co może doprowadzić do wytworzenia potencjalnie wybuchowych azydków tych metali. Substrat chemiluminescencyjny: Unikać zanieczyszczenia i chronić przed bezpośrednim światłem słonecznym (patrz ulotka). Woda: Dejonizowana lub destylowana. Elementy Zestawu Elementy zestawu tworzą całość. Kody na wewnętrznych pokrywach pudełka są niezbędne do wykonania oznaczenia. LH - Pojemnik z Kulkami (L2LH12) Oznakowany kodem kreskowym. 200 kulek opłaszczonych mysim przeciwciałem monoklonalnym anty-lh. Stabilne w 2 8 C do daty ważności. L2KLH2: 1 opakowanie L2KLH6: 3 opakowania LH - Klin z Odczynnikiem (L2LHA2) Z kodem kreskowym. 11,5 ml alkalicznej fosfatazy (izolowanej z jelita cieląt) sprzęgniętej z kozim przeciwciałem anty-lh w buforowanym roztworze. Stabilny w 2 8 C do daty ważności. LSKLH2: 1 klin L2KLH6: 3 kliny Nie uszkadzając kodu kreskowego klina zerwij taśmę zabezpieczającą w okresie transportu przesuwne zamknięcie komór z odczynnikiem. Usuń tymczasowe foliowe uszczelnienie komór i wsuń zamknięcie komór na prowadnice w pokrywie klina. LH - Kalibratory Zestawu (LLHL, LLHH) Dwie fiolki (kalibrator niski i wysoki) zawierające liofilizat LH w matrycy surowicy zwierzęcej. Zawartość każdej fiolki rekonstytuować 4,0 ml wody destylowanej. Stabilne po rozpuszczeniu w 2 8 C przez 30 dni lub 6 miesięcy w 20 C (rozpipetowane). L2KLH2: 1 zestaw L2KLH6: 2 zestawy Przed przystąpieniem do kalibracji umocuj na probówkach odpowiednie nalepki z kodem kreskowym (dostarczane z zestawem) rozpoznawane przez czytnik kodów kreskowych aparatu. Materiały Dostarczane Oddzielnie L2SUBM: Substrat Chemiluminescencyjny L2PWSM: Roztwór Płuczący L2KPM: Roztwór Czyszczący LRXT: Probówki Reakcyjne (jednorazowe) Ponadto niezbędne woda destylowana lub dejonizowana, probówki, kontrole Procedura Oznaczenia Przestrzeganie procedur dotyczących utrzymania aparatu, zawartych w Podręczniku operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000 poprawia charakterystykę uzyskiwanych wyników. Procedury: przygotowania aparatu, ustawień aparatu, przygotowania i rozcieńczania próbek, rekalibracji, oznaczenia i kontroli jakości zgodnie z Podręcznikiem operatora do obsługi systemów IMMULITE Zalecany odstęp pomiędzy rekalibracjami: 4 tygodnie Próbki kontrolne: Przestrzegać przepisów państwowych i wymogów kontrolnych w zakresie częstotliwości kontroli jakości. Stosować kontrole lub pule surowic co najmniej o niskim i wysokim poziomie LH. Siemens Healthcare Diagnostics zaleca stosowanie dostępnych w handlu próbek kontroli jakości o co najmniej 2 poziomach (niskim i wysokim). Uznaje się, że test przebiega prawidłowo, gdy uzyskane wartości analitu plasują się w przyjętym dla Kontroli zakresie dla danego analizatora lub w zakresie opracowanym w ramach wewnątrzlaboratoryjnego systemu zapewnienia jakości. Oczekiwane Wartości Opierając się na podobieństwie z testem IMMULITE LH (patrz: Porównanie metod) można oczekiwać, że zakresy wartości referencyjnych dla obu testów będą identyczne. Zakresy referencyjne opracowano przy użyciu zestawów IMMULITE LH w ramach współpracy międzynarodowej. Badanie objęło zdrowe kobiety w wieku od 16 do IMMULITE 2000 LH (PIEL2KLH-5 {21}, ) 17

18 44 lat, u których LH oznaczano codziennie przez okres pełnego cyklu owulacyjnego. Faza cyklu Folikularna Środek cyklu Lutealna Menstruacyjna ±8 dni n* Mediana LH, miu/ml Środkowe 95% 54 (762) 4,6 1,1 11,6 54 (54) (658) 4,3 NO 14,7 54 (959) 3,9 NO 12,0 *Liczba badanych (całkowita liczba wyników) LH, miu/ml Środkowe Grupa n Mediana 95% Dorośli mężczyźni 135 2,4 0,8 7,6 Dorosłe Kobiety: Po menopauzie* 75 24,9 11,3 39,8 Zażywające środki 104 3,1 NO 8,0 antykoncepcyjne *Nie poddane leczeniu NO: Poniżej poziomu oznaczalności Patrz: Wykres dla cyklu menstruacyjnego w sekcji Tabele i Wykresy. Przekrojowe zakresy pediatryczne oznaczono w grupie dzieci klinicznie zdrowych testem IMMULITE LH na południowym zachodzie USA. Grupa Dziewczynki Chłopcy Grupa mieszana Wiek (lata) n Mediana Krew pępowinow a 31 NO LH, miu/ml Środkowe 95% 0,1 1,5 46 0,7 NO 2,3 1, NO NO 1,3 Krew pępowinow a 36 NO NO 3,6 0,1 1,5 54 1,0 NO 4,1 1, NO NO 3,8 Krew pępowinow a 67 NO NO 3,5 0,1 1, ,7 NO 3,7 1, NO NO 3,2 NO: Poniżej poziomu oznaczalności Powyższe wartości należy traktować jako orientacyjne. Każde laboratorium powinno wyznaczyć własne zakresy referencyjne. Ograniczenia Ze względu na pulsacyjne wydzielanie poziom LH oznaczany w kolejnych próbkach od danej osoby pobieranych w ciągu doby może fluktuować w obrębie wartości prawidłowego zakresu. Fluktuacja taka wynika z fizjologiczne wahań poziomu LH, a nie błędów metody. Reakcja krzyżowa testu z HCG jest niewielka i w niskich stężeniach HCG nie wpływa na wynik. Jednak wysokie stężenia HCG spotykane u kobiety ciężarnych, pacjentów z chorobą trofoblastyczną lub rakiem jąder mogą fałszywie zawyżać wynik LH. Przeciwciała heterofilne obecne w surowicy ludzkiej mogą wchodzić w reakcję z immunoglobulinami będącymi reagentami testu immunologicznego, wpływając na przebieg oznaczenia in vitro. [Porównaj: Boscato LM, Stuart MC: Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays Przeciwciała heterofilne - problem wszystkich testów immunologicznych. Clin Chem 1988:34:27-33.]. Wpływ przeciwciał heterofilnych może ujawnić się w oznaczeniach wykonywanych w surowicy osób mających ciągły kontakt ze zwierzętami lub zwierzęcymi produktami krwiopochodnymi, stanowiąc potencjalną przyczynę błędnych wyników. W teście ryzyko interferencji przeciwciał heterofilnych zostało zminimalizowane przez odpowiedni dobór proporcji odczynników, tym niemniej interferencja taka może potencjalnie nastąpić w rzadkich przypadkach. W postępowaniu diagnostycznym wyniki uzyskane tą metodą powinny być z zasady interpretowane w połączeniu z badaniem klinicznym pacjenta, jego historią choroby oraz innymi okolicznościami. Parametry Testu Dane charakteryzujące test przedstawiono w tabelach. Wyniki podano w miu/ml. O ile nie podano inaczej, wszystkie wyniki dotyczą próbek surowicy pobranych bez bariery żelowej i substancji przyspieszających krzepnięcie. 18 IMMULITE 2000 LH (PIEL2KLH-5 {21}, )

19 Zakres kalibracji: Do 200 miu/ml (WHO 1 nd IRP 68/40 i 2 nd IS 80/552) Czułość analityczna: 0,05 miu/ml Efekt wysokiej dawki Hook Effect: Nie występuje do stężenia miu/ml Precyzja: Próbki testowano przez okres 20 dni w duplikatach, dwa razy dziennie, co dało w sumie 40 serii i 80 powtórzeń (patrz: tabela Precyzji). Liniowość: Oznaczano próbki poddane kolejnym rozcieńczeniem (patrz: tabela Liniowość). Odzysk: Badano próbki wzbogacane w stosunku objętościowym 1 do 19 roztworami LH o stężeniach, kolejno: 200, 400, 1000 i 2000 miu/ml (patrz: tabela Odzysk). Specyficzność: Przeciwciało jest wysoce specyficzne w stosunku do LH (patrz: tabela Specyficzności). Bilirubina: Obecność bilirubiny związanej lub wolnej w stężeniu do 200 mg/l nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Hemoliza: Obecność hemoglobiny w ilości do 188 mg/dl nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Lipemia: Obecność trójglicerydów w ilości do 3000 mg/dl nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Porównanie metod: Wyniki porównywano z wynikami uzyskanymi przy zastosowaniu testu IMMULITE LH w grupie 105 surowic (1 140 miu/ml). Otrzymano następujące równanie regresji liniowej: (IML 2000) = 1,04 (IML) 0,25 miu/ml r = 0,972 Średnie: 26,0 miu/ml (IMMULITE 2000) 26,0 miu/ml (IMMULITE) Pomoc techniczna i konsultacje Krajowy Dystrybutor udziela wszechstronnej pomocy technicznej. System Kontroli Jakości Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. posiada Certyfikat Jakości ISO 13485:2003. IMMULITE is a trademark of Siemens Healthcare Diagnostics Siemens Healthcare Diagnostics. All rights reserved. Made in: UK Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. Glyn Rhonwy, Llanberis, Gwynedd LL55 4EL United Kingdom PIEL2KLH 5 {21} Changes in this Edition: cc#eu22565: 1) Under Warnings and Precautions, added caution statement, required GHS pictograms/signal words/hazard and precautionary codes and statements, offending chemicals and sources. 2) Changed Origin: UK to Made in: UK. 3) Updated the manufacturer address to include Glyn Rhonwy. 4) In Understanding the Symbols, revised the symbol for catalog number, added a GHS pictogram for health hazard, and updated existing symbols with GHS pictograms and terminology for exclamation mark, corrosion, skull and crossbones, and environment. Understanding the Symbols Understanding the Symbols En English Vysvětlivky symbolů Επεξήγηση των συμβόλων Znaczenie symboli Cz Česky El Ελληνικά Pl Polski The following symbols may appear on the product labeling: / Na štítku výrobku mohou být uvedeny následující symboly: / Τα ακόλουθα σύμβολα ενδέχεται να εμφανίζονται στην επισήμανση του προϊόντος: / Na etykietach produktu mogą pojawiać się poniższe symbole: Symbol Definition En: In vitro diagnostic medical device Cz: Zdravotnický prostředek pro in vitro diagnostiku El: In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή Pl: Sprzęt do medycznej diagnostyki in vitro IMMULITE 2000 LH (PIEL2KLH-5 {21}, ) 19

20 Symbol Definition En: Catalog Number Cz: Katalogové číslo El: Αριθμός καταλόγου Pl: Numer katalogowy En: Manufacturer Cz: Výrobce El: Κατασκευαστής Pl: Producent En: Authorized Representative in the European Community Cz: Autorizované zastoupení v Evropské unii El: Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα Pl: Autoryzowany przedstawiciel w Unii Europejskiej En: CE Mark Cz: CE značka El: Σήμανση CE Pl: Znak CE En: CE Mark with identification number of notified body Cz: CE značka s identifikačním číslem notifikovaného orgánu El: Σήμανση CE με αριθμό αναγνώρισης του φορέα πιστοποίησης Pl: Znak CE z numerem identyfikacyjnym jednostki notyfikowanej En: Consult instructions for use Cz: Postupujte podle návodu k použití El: Συμβουλευτείτε τις οδηγίες λειτουργίας Pl: Zapoznać się z instrukcją użycia En: Caution! Potential Biohazard Cz: Pozor! Potenciální biohazard El: Πρoσοχή! Δυνητικός βιολογικός κίνδυνος Pl: Uwaga! Potencjalne zagrożenie biologiczne En: Temperature limitation (2 8 C) Cz: Teplotní rozsah (2 8 C) El: Περιορισμός θερμοκρασίας (2 8 C) Pl: Zakres temperatury (2 8 C) LOT Symbol Definition En: Upper limit of temperature ( -20 C) Cz: Horní teplotní limit ( -20 C) El: Ανώτερο όριο θερμοκρασίας ( -20 C) Pl: Górny zakres temperatury ( -20 C) En: Lower limit of temperature ( 2 C) Cz: Spodní teplotní limit ( 2 C) El: Κατώτερο όριο θερμοκρασίας ( 2 C) Pl: Dolny zakres temperatury ( 2 C) En: Do not freeze (> 0 C) Cz: Nezmrazovat (> 0 C) El: Μην καταψυχετε (> 0 C) Pl: Nie zamrażać (> 0 C) En: Do not reuse Cz: Pro jednorázové použití El: Μην κάνετε επαναληπτική χρήση Pl: Nie używać powtórnie En: Keep away from sunlight Cz: Chraňte před slunečním světlem El: Διατηρείτε μακριά από το ηλιακό φως Pl: Chronić przed światłem słonecznym En: Batch code Cz: Šarže El: Κωδικός παρτίδας Pl: Kod serii En: Contains sufficient for (n) tests Cz: Dostatečné množství pro (n) testů El: Περιεχόμενο επαρκές για (n) εξετάσεις Pl: Zawartość wystarczająca na (n) testów En: Date format (year-month) Cz: Formát data (rok-měsíc) El: Μορφή ημερομηνίας (έτος-μήνας) Pl: Zapis daty (rok-miesiąc) En: Use by Cz: Spotřebujte do El: Ημερομηνία λήξης Pl: Wykorzystać do 20 IMMULITE 2000 LH (PIEL2KLH-5 {21}, )

21 Symbol Definition En: Health Hazard Cz: Zdravotní riziko El: Κίνδυνος για την υγεία Pl: Zagrożenie dla zdrowia ADJUSTOR H Symbol Definition En: Adjustor, high Cz: Kalibrátor, vysoký El: Ρυθμιστής, υψηλό Pl: Kalibrator, wysoki En: Exclamation Mark Cz: Vykřičník El: Θαυμαστικό Pl: Wykrzyknik En: Corrosion Cz: Koroze El: Διάβρωση Pl: Działanie żrące En: Skull and Crossbones Cz: Lebka se zkříženými hnáty El: Νεκροκεφαλή με διασταυρούμενα οστά Pl: Czaszka i skrzyżowane piszczele En: Environment Cz: Prostředí El: Περιβάλλον Pl: Środowisko ADJUSTOR AB DIL CONTROL CONTROL 1 CONTROL 2 CONTROL 3 En: Adjustor Antibody Cz: Protilátka proti kalibrátoru El: Ρυθμιστής αντισώματος Pl: Przeciwciało Kalibratora En: Sample Diluent Cz: Diluent Vzorků El: Αραιωτικό δείγματος Pl: Rozcieńczalnik próbek En: Control Cz: Kontrola El: Έλεγχος Pl: Kontrola BEAD PACK TEST UNIT REAG WEDGE REAG WEDGE A REAG WEDGE B REAG WEDGE D ADJUSTOR En: Bead Pack Cz: Zásobník s kuličkami El: Συσκευασία σφαιριδίων Pl: Pojemnik z kulkami En: Test Unit Cz: Testovací Jednotky El: Μονάδες ανάλυσης Pl: Jednostki testowe En: Reagent Wedge Cz: Reagencie El: Δοχείο Αντιδραστηρίων Pl: Klin odczynnikowy En: Adjustor Cz: Kalibrátor El: Ρυθμιστής Pl: Kalibrator CONTROL + CONTROL + L CONTROL CONTROL AB En: Positive Control Cz: Pozitivní kontrola El: Θετικός Έλεγχος Pl: Kontrola dodatnia En: Low Positive Control Cz: Mírně pozitivní kontrola El: Χαμηλός Θετικός Έλεγχος Pl: Kontrola nisko dodatnia En: Negative Control Cz: Negativní kontrola El: Αρνητικός Έλεγχος Pl: Kontrola ujemna En: Control Antibody Cz: Protilátka proti kontrole El: Έλεγχος αντισώματος Pl: Przeciwciało Kontrolne ADJUSTOR L En: Adjustor, low Cz: Kalibrátor, nízký El: Ρυθμιστής, χαμηλό Pl: Kalibrator, niski IMMULITE 2000 LH (PIEL2KLH-5 {21}, ) 21