NT-proBNP. For use on IMMULITE 2000 systems

Transcript

1 NT-proBNP For use on IMMULITE 2000 systems

2 IMMULITE 2000 NT-proBNP English Intended Use: For in vitro diagnostic use with the IMMULITE 2000 Systems Analyzers for the quantitative measurement of N-terminal pro-brain natriuretic peptide (NT-proBNP) in heparinized plasma, as an aid in the diagnosis of individuals suspected of having congestive heart failure. The test is further indicated for the risk stratification of patients with acute coronary syndrome and congestive heart failure. Catalog Numbers: L2KNT2 (200 tests) Test Code: NTP Color: Red Summary and Explanation Chronic heart failure, most commonly caused by left ventricular dysfunction, is a clinical syndrome resulting from reduced heart pumping capacity. It currently affects about 5 million Americans and is the leading cause of hospitalization for patients older than age Studies have shown that B-type natriuretic peptide (BNP), a member of the natriuretic peptide family, is useful in assisting the diagnosis of heart failure. 2 ProBNP, the 108 amino acid precursor of BNP, is synthesized and released by ventricular myocytes in response to increased ventricular wall tension. ProBNP is cleaved to release a 32 amino acid active hormone (BNP), and the N-terminal 76 amino acid inactive peptide NT-proBNP. BNP antagonizes the renin-angiotensinaldosterone (RAAS) system by causing natriuresis, diuresis and vasodilation inhibiting renin excretion and aldosterone production. 3 The plasma levels of both BNP and NT-proBNP are markedly increased in subjects with left ventricular dysfunction, and correlate well with the New York Heart Association functional classification of heart failure. 5,6 NT-proBNP has shown advantages over BNP as a biochemical marker because of its longer half-life, better in vitro stability, reduced intra-individual fluctuation, and higher circulating concentration. 4 Determination of NT-proBNP levels in plasma can be useful in identifying patients with chronic heart failure, assessing the severity, predicting increased morbidity, and monitoring the therapeutic response. 1,4,7 Principle of the Procedure IMMULITE 2000 NT-proBNP is a solidphase, two-site chemiluminescent immunometric assay. Incubation Cycles: 1 30 minutes. Specimen Collection Serum is not suitable for use. The use of an ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples. Hemolyzed samples may indicate mistreatment of a specimen before receipt by the laboratory; hence the results should be interpreted with caution. Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE 2000 NT-proBNP has not been tested with all possible variations of tube types. Consult the section on Alternate Sample Types for details on tubes that have been tested. Volume Required: 50 µl heparinized plasma. Storage: 3 days at 2 8 C or 6 months at 20 C. Warnings and Precautions For in vitro diagnostic use. CAUTION: This device contains material of animal origin and should be handled as a potential carrier and transmitter of disease. H412 P273, P501 Harmful to aquatic life with long lasting effects. Avoid release to the environment. Dispose of contents and container in accordance with all local, regional, and national regulations. Contains: sodium azide; NT-proBNP Adjustors 2 IMMULITE 2000 NT-proBNP (PIEL2KNT-2 {16}, )

3 Reagents: Store at 2 8 C. Dispose of in accordance with applicable laws. Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C. Sodium azide, at concentrations less than 0.1 g/dl, has been added as a preservative. On disposal, flush with large volumes of water to prevent the buildup of potentially explosive metal azides in lead and copper plumbing. Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert.) Water: Use distilled or deionized water. Materials Supplied Components are a matched set. Labels on the inside box are needed for the assay. NT-proBNP Bead Pack (L2NT12) With barcode. 200 beads, coated with polyclonal sheep anti-nt-probnp. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KNT2: 1 pack. NT-proBNP Reagent Wedge (L2NTA2) With barcode ml alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to polyclonal sheep anti-nt-probnp in buffer. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KNT2: 1 wedge. Before use, tear off the top of the label at the perforations, without damaging the barcode. Remove the foil seal from the top of wedge; snap the sliding cover down into the ramps on the reagent lid. NT-proBNP Adjustors (LNTL, LNTH) Two vials (Low and High) of lyophilized NT-proBNP in a nonhuman serum matrix, with preservative. Reconstitute each vial by adding 3.0 ml distilled or deionized water. Mix by gentle swirling or inversion. Stable at 20 C for 3 months (aliquotted) after reconstitution. L2KNT2: 1 set. Before making an adjustment, place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes so that the barcodes can be read by the on-board reader. Kit Components Supplied Separately NT-proBNP Sample Diluent (L2NTZ) For the on-board dilution of patient samples. One vial of concentrated (readyto-use) processed, NT-proBNP-free nonhuman serum matrix, with preservative. Stable at 2 8 C for 30 days after opening, or for 6 months (aliquotted) at 20 C. L2NTZ: 25 ml. Barcode labels are provided for use with the diluent. Before use, place an appropriate label on a mm test tube, so that the barcodes can be read by the on-board reader. L2NTZ: 3 labels. L2SUBM: Chemiluminescent Substrate L2PWSM: Probe Wash L2KPM: Probe Cleaning Kit LRXT: Reaction Tubes (disposable) L2ZT: 250 Sample Diluent Test Tubes (16 x 100 mm) L2ZC: 250 Sample Diluent Tube Caps LNTCM: A bi-level, nonhuman serum-based NT-proBNP Control Module. Also Required Distilled or deionized water; test tubes; controls. Assay Procedure Note that for optimal performance, it is important to perform all routine maintenance procedures as defined in the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual. See the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual for: preparation, setup, dilutions, adjustment, assay and quality control procedures. Recommended Adjustment Interval: 2 weeks. Quality Control Samples: Use controls or sample pools with at least two levels (low and high) of NT-proBNP. IMMULITE 2000 NT-proBNP (PIEL2KNT-2 {16}, ) 3

4 Expected Values The reference range values were generated on the IMMULITE 2500 analyzer. Based on its relationship to IMMULITE 2500 NT-proBNP (See Method Comparison 2), IMMULITE 2000 NT-proBNP can be expected to have essentially the same reference range. A reference range study was performed in which 217 heparinized plasma samples 124 from apparently healthy laboratory volunteers and 93 from presumed normal specimens from a large reference laboratory, both with no known cardiac disease history were assayed by the IMMULITE 2500 NT-proBNP procedure. Medians and 95th percentiles for relevant age groups are tabulated below. The most appropriate decision thresholds are 125 pg/ml for patients younger than 75 years old, and 450 pg/ml for patients 75 years or older. 4 <75 yrs (n = 124) Reference Group 75+ yrs (n = 93) Median 28.5 pg/ml 172 pg/ml 95 th Percentile 110 pg/ml 589 pg/ml Consider these limits as guidelines only. Each laboratory should establish its own reference ranges. Limitations Heterophilic antibodies in human serum/plasma can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings. Performance Data See Tables and Graphs for data representative of the assay's performance. Results are expressed in pg/ml. (Unless otherwise noted, all were generated on heparinized plasma samples collected in tubes without gel barriers.) Conversion Factor: pg/ml pmol/l Reportable Range: 20 35,000 pg/ml (2.4 4,130 pmol/l). Analytical Sensitivity: 10 pg/ml (1.2 pmol/l). High-dose Hook Effect: None up to 385,000 pg/ml. Precision: Samples were assayed in duplicate over the course of 10 days, four runs per day, for a total of 40 runs and 80 replicates. (See "Precision" table.) Linearity: It is recommended that only samples above the assay's upper limit (> 35,000 pg/ml or > 4,130 pmol/l) should be diluted. Samples were assayed under various dilutions. (See "Linearity" table for representative data.) Recovery: Samples spiked 1 to 19 with three NT-proBNP solutions (26,500, 53,000, and 106,000 pg/ml) were assayed. (See "Recovery" table for representative data.) Specificity: The antibody is highly specific for NT-proBNP. (See "Specificity" table.) Bilirubin: May interfere with the assay in NT-proBNP samples below 500 pg/ml, causing degradation of values. (See Bilirubin table for representative data.) Hemolysis: Presence of hemoglobin in concentrations up to 600 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Lipemia: Presence of triglycerides in concentrations up to 3,000 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Alternate Sample Type: To assess the effect of alternate sample types, blood was collected from 25 volunteers into plastic lithium-heparin and plastic plasma gel barrier tubes (PST ). All tubes were from Becton Dickinson. In 17 sets of the matched samples, equal volumes were spiked with various concentrations of 4 IMMULITE 2000 NT-proBNP (PIEL2KNT-2 {16}, )

5 NT-proBNP, to obtain values throughout the calibration range of the assay, and then assayed by the IMMULITE 2000 NT-proBNP procedure. (PST plasma) = (Li-Heparin plasma) pg/ml r = Means: 5,457 pg/ml (Li-Heparin plasma) 5,548 pg/ml (PST plasma) Method Comparison 1: The assay was compared to a commercially available Elecsys 2010 probnp kit on 366 patient samples. (Concentration range: approximately 7.9 to 34,468 pg/ml. See graph 1.) By linear regression: (IML 2000) = 0.97 (Elecsys 2010) 9.9 pg/ml r = Means: 1,978 pg/ml (IMMULITE 2000) 2,029 pg/ml (Elecsys 2010) Method Comparison 2: The assay was compared to IMMULITE 2500 NT-proBNP on 366 patient samples. (Concentration range: 21.3 to 32,855 pg/ml. See graph 2.) By linear regression: (IML 2000) = 1.01 (IML 2500) 35.8 pg/ml r = Means: 2,231 pg/ml (IMMULITE 2000) 2,246 pg/ml (IMMULITE 2500) References 1) Cardarelli R, et al. B-type Natriuretic Peptide: a review of its diagnostic, prognostic, and therapeutic monitoring value in heart failure for primary care physicians. J Am Board Fam Pract. 2003,16(4): ) Richarde AM, et al. Plasma N-terminal pro-brain natriuretic peptide and adrenomedullin: new neurohormonal predictors of left ventricular function and prognosis after myocardial infarction. Circulation 1998;97: ) De Lemos JA, et al. B-type natriuretic peptide in cardiovascular disease. The Lancet 2003;362: ) McCullough PA, et al. Sorting out the evidence on natriuretic peptides. Rev Cardiovasc Med. 2003;4:S13- S19. 5) Hunt PJ, et al. Immunoreactive aminoterminal pro-brain natriuretic peptide (NTproBNP): a new marker for cardiac impairment. Clin Endocrinol 1997;47: ) Talwar S, et al. Plasma N-terminal pro-brain natriuretic peptide and the ECG in the assessment of leftventricular systolic dysfunction in a high risk population. Eur Heart J 1999;20: ) Gardner RS, et al. N-terminal pro-brain natriuretic peptide: a new gold standard in predicting mortality in patients with advanced heart failure. Eur Heart J 2003;24: Technical Assistance Available outside the United States only. For technical assistance, contact your National Distributor. The Quality System of Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. is certified to ISO 13485:2003. Manufactured under license from Roche Diagnostics GmbH. Tables and Graphs Precision (pg/ml) Within-Run 1 Total 2 Mean 3 SD 4 CV 5 SD CV % % % % % % 4 1, % % 5 8, % % 6 15, % % 7 29,725 1, % 1, % Česky. 1 V rámci stanovení, 2 Celkem, 3 Střední hodnota, 4 Směrodatná odchylka, 5 Variační koeficient. Ελληνικά. 1 Κατά την ίδια περίοδο, 2 Συνολικά, 3 Μέσος όρος, 4 SD, 5 CV. Polski. 1 W serii, 2 Całość, 3 Średnie, 4 SD, 5 CV. Bilirubin Unspiked mg/l Conjugated 1 Unconjugated mg/l 100 mg/l 200 mg/l ,427 1,372 1,378 1,331 1, ,095 8,986 9,014 8,831 9, ,803 16,565 15,895 16,108 17,043 Česky. 1 Konjugovaný, 2 Nekonjugovaný, 3 Bez přídavku. Ελληνικά. 1 εσμευμένη (άμεση), 2 Αδέσμευτη (έμμεση), 3 Χωρίς εμπλουτισμό. Polski. 1 Związana, 2 Niezwiązana, 3 Wyjściowa. IMMULITE 2000 NT-proBNP (PIEL2KNT-2 {16}, ) 5

6 Linearity (pg/ml) Dilution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E in ,015 4 in 8 18,327 15, % 2 in 8 9,418 7, % 1 in 8 4,326 3, % 2 8 in 8 30,139 4 in 8 17,650 15, % 2 in 8 8,769 7, % 1 in 8 4,103 3, % 3 8 in 8 28,681 4 in 8 16,041 14, % 2 in 8 7,848 7, % 1 in 8 3,566 3,585 99% 4 8 in 8 26,741 4 in 8 15,628 13, % 2 in 8 7,861 6, % 1 in 8 3,547 3, % 5 8 in 8 25,288 4 in 8 13,787 12, % 2 in 8 6,503 6, % 1 in 8 3,063 3,161 97% 6 8 in 8 24,542 4 in 8 14,246 12, % 2 in 8 6,956 6, % 1 in 8 3,169 3, % Česky. 1 Ředění, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 % Naměřená / Očekávaná, 5 8 v 8. Ελληνικά. 1 Αραίωση, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E, 5 8 στα 8. Polski. 1 Rozcieńczenie, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O, 5 8 w 8. Recovery (pg/ml) Solution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E A 1,256 1,365 92% B 2,474 2,690 92% C 5,036 5,340 94% A 1,972 1, % B 3,414 3, % C 6,016 5, % 3 2,147 A 3,460 3, % B 4,932 4, % C 7,839 7, % 4 4,102 A 6,845 5, % B 8,402 6, % C 8,848 9,197 96% 5 11,749 A 12,406 12,486 99% B 14,185 13, % C 16,302 16,461 99% 6 15,521 A 15,913 16,070 99% B 16,403 17,395 94% C 19,744 20,045 98% Česky. 1 Roztok, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 Naměřená / Očekávaná. Ελληνικά. 1 ιάλυμα, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E. Polski. 1 Roztwór, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O. 6 IMMULITE 2000 NT-proBNP (PIEL2KNT-2 {16}, )

7 Specificity Compound 1 Amount Added 2 (pg/ml) Apparent 3 pg/ml % Cross reactivity 4 ANP 3,100,000 <20 pg/ml ND NT-proANP (1-30) 3,500,000 <20 pg/ml ND NT-proANP (31-67) 1,000 <20 pg/ml ND NT-proANP (79-98) 1,000 <20 pg/ml ND BNP32 3,500,000 <20 pg/ml ND CNP32 2,200,000 <20 pg/ml ND Adrenomedullin 1,000 <20 pg/ml ND Aldosterone 600 <20 pg/ml ND Angiotensin I 600 <20 pg/ml ND Angiotensin II 600 <20 pg/ml ND Angiotensin III 1,000 <20 pg/ml ND Endothelin 20 <20 pg/ml ND Renin 50,000 <20 pg/ml ND Urodilatin 3,500,000 <20 pg/ml ND Arg-Vasopressin 1,000 <20 pg/ml ND ND: not detectable. 5 Česky. 1 Sloučenina, 2 Přidané množství, 3 Zjevná koncentrace, 4 % Zkřížená reaktivita, 5 ND: nezjistitelné. Ελληνικά. 1 Μείγμα, 2 Προστέθηκαν, 3 Εμφανής συγκέντρωση, 4 % ιασταυρ.αντίδραση, 5 ND: Μη ανιχνεύσιμη ποσότητα. Polski. 1 Składnik, 2 Ilość dodana, 3 Zmierzona, 4 % reaktywności Krzyżowej, 5 ND: Nieoznaczlne. Method Comparison 1 IMMULITE 2000 NT-proBNP Elecsys 2010, pg/ml (IML 2000) = 0.97 (Elecsys 2010) 9.9 pg/ml r = Method Comparison 2 IMMULITE 2000 NT-proBNP IMMULITE 2500 NT-proBNP, pg/ml (IML 2000) = 1.01 (IML 2500) 35.8 pg/ml r = English. NT-proBNP. Česky. NT-proBNP. Ελληνικά. NT-proBNP. Polski. NT-proBNP. Česky IMMULITE 2000 NT-proBNP Použití: Pro in vitro diagnostické použití na analyzátorech IMMULITE 2000 ke kvantitativnímu stanovení N-terminálního pro-brain natriuretického peptidu (NTproBNP) v heparinizované plazmě, jakožto pomůcky pro diagnózu městnavého srdečního selhání. Test je dále určen pro stratifikaci rizika u pacientů s akutním koronárním syndromem a s městnavým srdečním selháním. Katalogové číslo: L2KNT2 (200 stanovení) Kód metody: NTP Barva: červená Shrnutí a vysvětlení Chronické srdeční selhání, často způsobené dysfunkcí levé komory, je klinickým syndromem vyplývajícím ze snížené kapacity srdce jako pumpy. V současné době je postiženo přibližně 5 miliónů Američanů a je to hlavní důvod hospitalizace pacientů starších 65-ti let. 1 Studie ukazují, že B-typ natriuretického peptidu (BNP), člena natriuretické peptidové skupiny, je užitečným pomocníkem při určení diagnózy srdečního selhání. 2 ProBNP, je prekurzor BNP složený ze 108 aminokyselin, je syntetizován a uvolňován ventrikulárními myocyty v odezvě na vzrůstající IMMULITE 2000 NT-proBNP (PIEL2KNT-2 {16}, ) 7

8 ventrikulární tlak stěn. ProBNP je štěpen za vzniku 32 aminokyselinového aktivního hormonu (BNP) a N-terminálního 76 aminokyselinového neaktivního peptidu NT-proBNP. BNP působí jako antagonista renin-angiotensin-aldosteronového (RAAS) systému a inhibuje uvolňování reninu a tvorbu aldosteronu. 3 Jeho účinek je natriuretický, diuretický a vazodilatační. Hladiny obou BNP a NT-proBNP v plazmě jsou výrazně zvýšené u pacientů s poruchou levé srdeční komory a dobře korelují s klasifikací srdečních poruch podle New York Heart Association. 5,6 NT-proBNP se ukazuje jako vhodnější biochemický ukazatel než BNP, protože má delší poločas rozpadu, lepší in vitro stabilitu, nižší intra-individuální kolísání a vyšší koncentraci v oběhu. 4 Stanovení NTproBNP hladin v plazmě může být užitečné při identifikaci pacientů s chronickou srdeční poruchou, určení závažnosti, předpokladu nárůstu onemocnění a sledování terapeutické odezvy. 1,4,7 Princip stanoveni Stanovení NT-proBNP na analyzátorech IMMULITE 2000 představuje oboustrannou chemiluminiscenční imunometrickou reakci v pevné fázi. Inkubační cykly: 1 30 minut. Odebírání vzorků Sérum není vhodné pro toto použití. K úpravě lipemických vzorků se doporučuje použití ultracentrifugy. Hemolyzované vzorky můžou být známkou nesprávného zacházení s preparátem ještě před přijetím do laboratoře; proto by výsledky měly být interpretovány s obezřetností. Použití zkumavek pro odběr krve od různých výrobců může přinášet rozličné hodnoty v závislosti na materiálech a přísadách včetně gelových nebo fyzických bariér, aktivátorů sraženin a/nebo antikoagulačních činidel. Stanovení NTproBNP na analyzátorech IMMULITE 2000 nebylo testováno se všemi možnými varianty jednotlivých typů zkumavek. Informace o testovaných zkumavkách najdete v části o alternativních typech vzorků. Potřebný objem vzorku: 50 μl heparinizované plazmy. Skladování: 3 dny při teplotě 2 8 C nebo 6 měsíců při 20 C. Upozornění a bezpečnostní opatření Určeno pro in vitro diagnostické použití. UPOZORNĚNÍ: Souprava obsahuje material živočišného původu, se kterým je třeba zacházet jako s potenciálním nosičem a přenašečem nemocí. H412 P273, P501 Škodlivý pro vodní organismy, s dlouhodobými účinky. Zabraňte uvolnění do životního prostředí. Odstraňte obsah a obal v souladu se všemi místními, regionálními a národními předpisy. Obsahuje: azid sodný; NT-proBNP kalibrátory Reagencie: Skladujte při teplotě 2 8 C. Likvidujte v souladu s platnými předpisy. Řiďte se obecnými pravidly bezpečnosti práce a se všemi komponenty nakládejte, jako by byly potenciálně infekční. Zdrojové materiály získané z lidské krve byly testovány a shledány nereaktivní na syfilis, na protilátky proti HIV 1 a 2, na povrchový antigen hepatitidy typu B (HBsAg), a na protilátky proti hepatitidě typu C. Jako konzervační látka byl přidán azid sodný v koncentracích menších než 1 g/l. Při likvidaci vypláchněte velkým množstvím vody, by se zamezilo nahromadění potenciálně výbušných azidů kovů v olověném a měděném potrubí. Chemiluminiscenční substrát: Vyvarujte se kontaminace a nevystavujte přímému slunečnímu světlu. (Viz připojený letáček.) Voda: Použijte destilovanou nebo deionizovanou vodu. Dodaný materiál Komponenty představují ucelenou sadu. Pro stanovení jsou zapotřebí štítky s čárovými kódy na krabici. 8 IMMULITE 2000 NT-proBNP (PIEL2KNT-2 {16}, )

9 NT-proBNP zásobník s kuličkami (L2NT12) Opatřeno čárovým kódem. 200 kuliček potažených polyklonální ovčí anti-ntprobnp. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KNT2: 1 balení. NT-proBNP reagencie (L2NTA2) Opatřeno čárovým kódem. 11,5 ml alkalické fosfatázy (z telecího střeva) konjugované s polyklonální ovčí anti-ntprobnp protilátkou v pufru. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KNT2: 1 nádobka. Před použitím utrhněte vršek štítku v perforovaném místě, ale nepoškoďte čárový kód. Z vrchu nádobky odstraňte uzavírací fólii; posuvný uzávěr zaklapněte do ramp na víčku reagencie. NT-proBNP kalibrátory (LNTL, LNTH) Dvě ampulky s nízkou a vysokou koncentrací lyofilizovaného NT-proBNP v nehumánní sérové matrici, s konzervačním prostředkem. K rekonstituci každé ampule použijte 3,0 ml destilované nebo deionizované vody. Promíchejte jemnými krouživými pohyby nebo převracením. Stabilní po rozpuštění rozdělené na alikvotní části 3 měsíce při 20 C. L2KNT2: 1 sada. Před adjustací nalepte na testovací zkumavky příslušné alikvotní štítky (dodané se soupravou) tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. Materiál dodávaný zvlášť NT-proBNP diluent vzorků (L2NTZ) Určeno k automatickému ředění vzorků pacientů analyzátorem. Jedna ampulka koncentrované (připravené k použití) zpracované nehumánní sérové matrice bez NT-proBNP, s konzervačním prostředkem. Stabilní při teplotě 2 8 C 30 dnů po otevření nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při 20 C. L2NTZ: 25 ml. Štítky s čárovými kódy jsou určeny pro diluent. Před použitím nalepte příslušný štítek na testovací zkumavku mm tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. L2NTZ: 3 štítky. L2SUBM: Chemiluminiscenční substrát L2PWSM: Promývací roztok L2KPM: Čistící roztok na jehly LRXT: Reakční zkumavky (na jedno použití) L2ZT: 250 Testovací zkumavky na diluent vzorků ( mm) L2ZC: 250 Uzávěru na testovací zkumavky na diluent vzorků LNTCM: Dvojúrovňový NT-proBNP kontrolní modul založený na nehumánní matrici. Dále potřebujete: Destilovanou nebo deionizovanou vodu; testovací zkumavky, kontroly. Postup stanovení K dosažení optimálního výkonu je důležité provádět veškerou pravidelnou údržbu stanovenou v manuálu k analyzátorům IMMULITE V manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000 najdete postupy: přípravy, nastavení, ředění, adjustace, stanovení vzorků a kontrol. Doporučený interval mezi adjustacemi: 2 týdny. Vzorky ke kontrole kvality: Použijte kontrolní vzorky nebo směsný vzorek s alespoň dvěma koncentracemi NTproBNP (vysokou a nízkou). Očekávané hodnoty Referenční rozmezí hodnot bylo naměřeno na na analyzátoru IMMULITE Na základě příbuznosti se stanovením IMMULITE 2500 NT-proBNP (viz Srovnání metody 2), lze pro stanovení IMMULITE 2000 NT-proBNP očekávat stejné referenční rozmezí. Studie referenčních rozmezí byla provedena na 217 vzorcích heparinizované plazmy 124 vzorků bylo od laboratorně zdravých dobrovolníků a 93 vzorků bylo předpokládáno za normální na základě odkazů z laboratoří, v obou případech to byly vzorky lidí bez známých srdečních poruch. Tyto vzorky byly analyzovány pomocí stanovení NTproBNP na analyzátoru IMMULITE Medián a 95. percentil pro významné věkové skupiny jsou uvedeny v tabulce. Nejvhodnější rozhodovací limit je IMMULITE 2000 NT-proBNP (PIEL2KNT-2 {16}, ) 9

10 125 pg/ml pro pacienty mladší než 75 let a 450 pg/ml pro pacienty starší než 75 let. 4 <75 let (n = 124) Srovnávací skupina 75+ let (n = 93) Medián 28,5 pg/ml 172 pg/ml 95. percentil 110 pg/ml 589 pg/ml Tyto hodnoty považujte pouze za orientační. Každá laboratoř by si měla stanovit svoje vlastní referenční rozmezí. Omezení Heterofilní protilátky v lidském séru/plazmě můžou reagovat s imunoglobuliny obsaženými v komponentech soupravy a způsobit interference s in vitro imunologickým stanovením. [Viz Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: ] Vzorky pacientů rutinně vystavené kontaktu se zvířaty nebo produkty zvířecího séra můžou vykázat tento typ interference a potenciálně způsobit anomální výsledky. Tyto reagencie byly vyvinuty tak, aby bylo riziko interference minimalizováno; nicméně případné interakce mezi ojedinělými séry a komponenty testu se můžou vyskytnout. Pro diagnostické účely by se výsledky tohoto stanovení měly vždy používat v kombinaci s klinickými zkouškami, anamnézou pacienta a ostatními nálezy. Znaky metody Reprezentativní výsledky stanovení najdete v části Tabulky a grafy. Výsledky se udávají v pg/ml. (Pokud není uvedeno jinak, všechny výsledky byly získány na vzorcích heparinizované plazmy odebraných do zkumavek bez gelových separátorů nebo přísad podporujících srážlivost.) Konverzní faktor: pg/ml 0,118 pmol/l Kalibrační rozsah: pg/ml (2, pmol/l). Analytická citlivost: 10 pg/ml (1,2 pmol/l). High-dose Hook Effect: Do pg/ml žádný. Přesnost metody: Vzorky byly opakovaně stanovovány dvojmo v průběhu 10 dnů, celkem 40 cyklů a 80 replikátů. (Viz tabulka Přesnost.) Linearita: Doporučuje se vzorky přesahující horní limit stanovení (> pg/ml nebo > pmol/l) ředit. Stanovení vzorků bylo provedeno při rozličném ředění. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce "Linearita".) Zpětná výtěžnost: Bylo provedeno stanovení vzorků s přídavkem tří roztoků NT-proBNP (26 500, a pg/ml) v poměru 1:19. (Reprezentativní údaje najdete v tabulce "Zpětná výtěžnost".) Specificita: Protilátka je silně specifická pro NT-proBNP. (Viz tabulka Specificita.) Bilirubin: Může interferovat se stanovením NT-pro BNP u vzorků nižších než 500 pg/ml. Způsobuje snížení hodnot. (Reprezentativní údaje najdete v tabulce "Bilirubin".) Hemolýza: Přítomnost hemoglobinu v koncentracích do 600 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Lipémie: Přítomnost triglyceridů v koncentracích do mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Alternativní typ vzorku: K určení dopadu použití alternativních typů vzorků pro toto stanovení jsme odebrali krev 25 dobrovolníkům do plastových lithiumheparinových a plastových plazmových zkumavek s gelovou bariérou (PST ). Všechny zkumavky pocházely od firmy Becton Dickinson. Abychom získali hodnoty v rámci celého kalibračního rozsahu tohoto stanovení, přidali jsme do úměrných objemů 17 sad odpovídajících vzorků NT-proBNP různých koncentrací. Vzorky jsme následně stanovili metodou NT-proBNP na analyzátorech IMMULITE (PST plazma) = 0,991 (Li-Heparinová plazma) pg/ml r = 0,994 Střední hodnoty: pg/ml (Li-Heparinová plazma) pg/ml (PST plazma) 10 IMMULITE 2000 NT-proBNP (PIEL2KNT-2 {16}, )

11 Srovnání metody 1: Stanovení bylo porovnáno s komerčně dostupným stanovením Elecsys 2010 probnp na 366 vzorcích pacientů. (Koncentrační rozsah: přibližně 7,9 až pg/ml. Viz graf Srovnání metody 1.) Podle lineární regrese: (IML 2000) = 0,97 (Elecsys 2010) 9,9 pg/ml r = 0,992 Střední hodnoty: pg/ml (IMMULITE 2000) pg/ml (Elecsys 2010) Srovnání metody 2: Stanovení bylo rovněž porovnáno se stanovením NTproBNP na analyzátoru IMMULITE 2500 společnosti na 366 vzorcích pacientů. (Koncentrační rozsah: přibližně 21,3 až pg/ml. Viz graf Srovnání metody 2.) Podle lineární regrese: (IML 2000) = 1,01 (IML 2500) 35,8 pg/ml r = 0,996 Střední hodnoty: pg/ml (IMMULITE 2000) pg/ml (IMMULITE 2500) Technická Podpora Pro technickou podporu kontaktujte vašeho národního distributora. Systém kontroly jakosti společnosti Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. je certifikovaný podle ISO 13485:2003. Vyrobeno v licenci firmy Roche Diagnostics GmbH. Ελληνικά IMMULITE 2000 NT-proBNP Ενδεδειγμένη χρήση: Για in vitro διαγνωστική χρήση με τα συστήματα αναλυτών IMMULITE 2000 για την ποσοτική μέτρηση του N-τελικού pro-brain natriuretic peptide (NT-proBNP) σε ηπαρινισμένο πλάσμα, ως βοήθημα στη διάγνωση σε άτομα με υποψία συσσωρευτικής καρδιακής βλάβης. Η εξέταση ενδείκνυται περαιτέρω για τον προσδιορισμό κινδύνου σε ασθενείς με οξύ σύνδρομο στεφανιαίας αρτηρίας και συσσωρευτική καρδιακή ανεπάρκεια. Αριθμοί καταλόγου: L2KNT2 (200 αναλύσεις) Κωδικός ανάλυσης: NTP Χρώμα: Κόκκινο Περίληψη και επεξήγηση Η χρόνια καρδιακή ανεπάρκεια, που οφείλεται συνήθως σε δυσλειτουργία της αριστερής κοιλίας, είναι ένα κλινικό σύνδρομο που προκαλείται από μειωμένη καρδιακή αντλιακή ικανότητα. Προσβάλλει περίπου 5 εκατομμύρια Αμερικανούς στις μέρες μας και είναι η κύρια αιτία εισαγωγής για ασθενείς πάνω από 65 χρονών. 1 Μελέτες έχουν δείξει ότι το B-type natriuretic peptide (BNP), ένα μέλος της οικογένειας των νατριουρετικών πεπτιδίων, είναι χρήσιμο στη βοήθεια της διάγνωσης της καρδιακής ανεπάρκειας. 2 Το ProBNP, το πρόδρομο μόριο του BNP των 108 αμινοξέων, συντίθεται και απελευθερώνεται από τα μυοκύτταρα της κοιλίας ε απόκριση της αυξημένης τάσης στα τοιχώματα της κοιλίας. Το ProBNP κόβεται και απελευθερώνεται μια ενεργή ορμόνη 32 αμινοξέων (BNP) και το N-τελικό ανενεργό πεπτίδιο των 76 αμινοξέων, NT-proBNP. Το BNP ανταγωνίζεται το σύστημα ρενίνηςαγγειοτενσίνης-αλδοστερόνης (RAAS) προκαλώντας νατριουρία, διούρηση και αγγειοδιαστολή εμποδίζοντας την έκκριση ρενίνης και την παραγωγή αλδοστερόνης. 3 Τα επίπεδα του πλάσματος τόσο του BNP, όσο και του NT-proBNP αυξάνονται χαρακτηριστικά σε δείγματα σε δυσλειτουργία της αριστερής κοιλίας και έχει καλή συσχέτιση με τη λειτουργική κατηγοριοποίηση του New York Heart Association της καρδιακής ανεπάρκειας. 5,6 Το NT-proBNP έχει εμφανίσει πλεονεκτήματα έναντι του BNP ως βιοχημικός δείκτης εξαιτίας της μακρύτερης ημίσειας ζωής του, της καλύτερης in vitro σταθερότητας, της μειωμένης ενδοατομικής διακύμανσης και της υψηλότερης συγκέντρωσης στην κυκλοφορία. 4 Ο προσδιορισμός των επιπέδων του NT-proBNP στο πλάσμα μπορεί να είναι χρήσιμος στην ταυτοποίηση ασθενών με χρόνια καρδιακή ανεπάρκεια, στην αξιολόγηση της σοβαρότητας, στην πρόβλεψη υψηλής θνησιμότητας και στον έλεγχο της θεραπευτικής απόκρισης. 1,4,7 IMMULITE 2000 NT-proBNP (PIEL2KNT-2 {16}, ) 11

12 Αρχή της διαδικασίας Η IMMULITE 2000 NT-proBNP είναι μια στερεής φάσης, δύο θέσεων, χημειοφωταυγής ανοσομετρική ανάλυση. Κύκλοι επώασης: 1 30 λεπτά. Συλλογή δειγμάτων Ο ορός δεν είναι κατάλληλος για χρήση. Συνίσταται η χρήση της υπερφυγοκέντρου για να καθαριστούν τα λιπιδαιμικά δείγματα. Τα αιμολυμένα δείγματα μπορεί να υποδηλώνουν κακή μεταχείριση του δείγματος πριν την παραλαβή του από το εργαστήριο και τα αποτελέσματα πρέπει να ερμηνεύονται με προσοχή. Οι σωλήνες συγκέντρωσης αίματος από διαφορετικές εταιρείες μπορεί να φέρουν διάφορες τιμές, ανάλογα με τα υλικά και τα συμπληρώματα, συμπεριλαμβανομένων των με τζελ ή φυσικών σωληναρίων, των ενεργοποιητών πήξεως και/ή των αντιπηκτικών. Η IMMULITE 2000 NTproBNP δεν έχει δοκιμαστεί με όλους τους τύπους σωληναρίων. Συμβουλευτείτε την παράγραφο για τους εναλλακτικούς τύπους δειγμάτων για περισσότερες πληροφορίες σχετικά με τα σωληνάρια που έχουν δοκιμαστεί. Απαιτούμενος όγκος: 50 µl ηπαρινισμένου πλάσματος. Φύλαξη: 3 ημέρες στους 2 8 C ή 6 μήνες στους 20 C. Προειδοποιήσεις και Προφυλάξεις Για in vitro διαγνωστική χρήση. ΠΡΟΣΟΧΗ: Η συσκευή αυτή περιέχει υλικό ζωικής προέλευσης και ο χειρισμός της πρέπει να γίνεται ως εάν επρόκειτο περί δυνητικού φορέα και παράγοντα μετάδοσης νόσου. H412 P273, P501 Επιβλαβές για τους υδρόβιους οργανισμούς, με μακροχρόνιες επιπτώσεις. Να αποφεύγεται η ελευθέρωση στο περιβάλλον. Απορρίψτε το περιεχόμενο και τον περιέκτη σε συμμόρφωση με όλους τους τοπικούς, περιφερειακούς και εθνικούς κανονισμούς. Περιέχει: αζίδιο νατρίου, Ρυθμιστές NT-proBNP Αντιδραστήρια: ιατήρηση στους 2 8 C. Απόρριψη σύμφωνα με την ισχύουσα νομοθεσία. Ακολουθείστε τις γενικές προφυλάξεις και χειριστείτε όλα τα συστατικά σαν να ήταν φορείς μολυσματικών παραγόντων. Όλα τα υλικά της μεθόδου που προέρχονται από ανθρώπινο αίμα έχουν ελεγχθεί και βρέθηκαν αρνητικά για σύφιλη, για αντισώματα στον HIV 1 και 2, για τα επιφανειακά αντιγόνα της ηπατίτιδας B και για αντισώματα της ηπατίτιδας C. Αζίδιο του νατρίου σε συγκεντρώσεις μικρότερες από 0,1 g/dl, έχει προστεθεί ως συντηρητικό. Κατά την απόρριψη, ξεπλύντε με άφθονο νερό για την αποφυγή σχηματισμού πιθανόν εκρηξιογόνων μεταλλικών αζιδίων στις αποχετεύσεις από μόλυβδο και χαλκό. Χημειοφωταυγές υπόστρωμα: Αποφύγετε την μόλυνση και την έκθεση στο άμεσο ηλιακό φως. Προσφύγετε στο ένθετο για λεπτομέρειες Νερό: Χρησιμοποιείτε απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό. Υλικά που ιατίθενται Τα συστατικά αποτελούν ένα ολοκληρωμένο σετ. Οι ετικέτες στο εσωτερικό κουτί είναι απαραίτητες για την ανάλυση. NT-proBNP Πακέτο σφαιριδίων (L2NT12) Με ραβδοκώδικα. 200 σφαιρίδια, επικαλυμμένα με πολυκλωνικά αντι-nt-probnp αντισώματα προβάτου. Σταθερά στους 2 8 C μέχρι την ημερομηνία λήξης. L2KNT2: 1 πακέτο. οχείο αντιδραστηρίου NT-proBNP (L2NTA2) Με ραβδοκώδικα. 11,5 ml αλκαλικής φωσφατάσης (από βόειο έντερο) συνδεδεμένης με πολυκλωνικό αντίσωμα αντι -NT-proBNP προβάτου σε ρυθμιστικό διάλυμα. Σταθερό στους 2 8 C μέχρι την ημερομηνία λήξης. L2KNT2: 1 δοχείο. Πριν τη χρήση, σχίστε την πάνω ετικέτα στο σημείο διάτρησης, χωρίς να καταστρέψετε τον ραβδοκώδικα. Αφαιρέστε (ξεκολλήστε) προσεκτικά το κάλυμμα από την επάνω επιφάνεια του 12 IMMULITE 2000 NT-proBNP (PIEL2KNT-2 {16}, )

13 δοχείου, και πιέστε το κάλυμμα κάτω προς τους κεκλιμένους οδηγούς-ράγες. Ρυθμιστές NT-proBNP (LNTL, LNTH) ύο φιαλίδια (χαμηλό και υψηλό) λυοφιλοποιημένου NT-proBNP σε μήτρα μη ανθρώπινου ορού, με συντηρητικό. Κάντε ανασύσταση σε κάθε φιαλίδιο προσθέτοντας 3,0 ml απεσταγμένου ή απιονισμένου νερού. Αναμίξτε με ήπια αναστροφή ή περιστροφή. Σταθεροί στους 20 C για 3 μήνες (μοιρασμένοι σε σωληνάκια) μετά την ανασύσταση. L2KNT2: 1 σετ. Πριν κάνετε κάποια ρύθμιση, τοποθετήστε τις κατάλληλες ετικέτες των διαλυμάτων (παρέχονται με το kit) σε δοκιμαστικούς σωλήνες, έτσι ώστε οι ραβδοκώδικες να μπορούν να διαβαστούν από το σύστημα του αναλυτή. Συστατικά του Kit που παρέχονται ξεχωριστά Αραιωτικό δείγματος NT-proBNP (L2NTZ) Για την αραίωση των δειγμάτων των ασθενών στο μηχάνημα. Ένα φιαλίδιο που περιέχει συμπυκνωμένη (έτοιμη για χρήση), μήτρα ελεύθερης NT-proBNP μη ανθρώπινης πρωτεΐνης/ ρυθμιστικού, με συντηρητικό. Σταθερό στους 2 8 C για 30 ημέρες μετά το άνοιγμα ή για 6 μήνες (μοιρασμένο σε σωληνάκια) στους 20 C. L2NTZ: 25 ml. Ετικέτες με ραβδοκώδικα παρέχονται για χρήση με το αραιωτικό. Πριν από τη χρήση, τοποθετείστε μια κατάλληλη ετικέτα σε ένα δοκιμαστικό σωλήνα 16 x 100 mm, έτσι ώστε οι ραβδοκώδικες να μπορούν να διαβαστούν από το σύστημα του αναλυτή. L2NTZ: 3 ετικέτες. L2SUBM: Χημειοφωταυγές υπόστρωμα L2PWSM: Πλυστικό του ανιχνευτή L2KPM: Kit καθαρισμού του ανιχνευτή LRXT: Σωλήνες αντίδρασης (μιας χρήσεως) L2ZT: 250 δοκιμαστικοί σωλήνες για αραίωση του δείγματος ( mm) L2ZC: 250 καπάκια για σωλήνες αραίωσης δείγματος LNTCM: ύο επιπέδων, μονάδα ελέγχου βασισμένη σε μη ανθρώπινο ορό με NTproBNP. Απαιτούνται επίσης: Απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό, δοκιμαστικοί σωλήνες, δείγματα ελέγχου. ιαδικασία της Ανάλυσης Σημειώστε ότι για το βέλτιστο αποτέλεσμα, είναι σημαντικό να ακολουθηθούν όλες οι τυπικές διαδικασίες όπως ορίζονται στο εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE Βλέπε το εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000 για: προετοιμασία, στήσιμο, αραιώσεις, ρυθμίσεις, ανάλυση και διαδικασίες ποιοτικού έλέγχου. Συνιστώμενος χρόνος μεταξύ των ρυθμίσεων: 2 εβδομάδες. είγματα ποιοτικού ελέγχου: Χρήση δειγμάτων ελέγχου ή αναμίξεις δειγμάτων με τουλάχιστον δύο επιπέδων (χαμηλό και υψηλό) NT-proBNP. Αναμενόμενες τιμές Το εύρος αναμενόμενων τιμών προέκυψε από τον αναλυτή IMMULITE Με βάση τη σχέση της IMMULITE 2500 NTproBNP (Βλ. Σύγκριση Μεθόδου 2) με την IMMULITE 2000 NT-proBNP μπορεί να αναμένεται να έχουν ουσιαστικά τια ίδια εύρη αναφοράς. Μια μελέτη του εύρους αναφοράς πραγματοποιήθηκε σε 217 δείγματα ηπαρινισμένου πλάσματος 124 από φαινομενικά υγιείς εργαστηριακούς εθελοντές και 93 από υποτιθέμενα φυσιολογικά δείγματα από ένα μεγάλο εργαστήριο αναφοράς και τα δύο χωρίς γνωστό ιστορικό καρδιακής ανεπάρκειας που αναλύθηκε από τη διαδικασία IMMULITE 2500 NT-proBNP. Οι διάμεσες τιμές και τα 95 α εκατοστημόρια για τις ηλικιακές ομάδες φαίνονται στον κατωτέρω πίνακα. Η πιο κρίσιμη τιμή ήταν 125 pg/ml νεότερους από 75 χρονών και 450 pg/ml για ασθενείς 75 χρονών και μεγαλύτερους. 4 <75 ετών (n = 124) Ομάδα αναφοράς 75+ έτη (n = 93) ιάμεσος 28,5 pg/ml 172 pg/ml 95 ο εκατοστημόριο 110 pg/ml 589 pg/ml IMMULITE 2000 NT-proBNP (PIEL2KNT-2 {16}, ) 13

14 Τα εργαστήρια πρέπει να θεωρούν αυτά τα όρια μόνο ως κατευθυντήριες γραμμές. Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να θεσπίσει τα δικά του εύρη αναφοράς. Περιορισμοί Ετεροφυλικά αντισώματα στον ανθρώπινο ορό μπορεί να αντιδράσουν με τις ανοσοσφαιρίνες που περιέχονται στα συστατικά της μεθόδου προκαλώντας αλληλεπιδράσεις με in vitro ανοσοαναλύσεις. [Βλ. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] είγματα ασθενών που εκτίθενται συστηματικά σε ζώα ή προϊόντα ζωικού ορού μπορούν να παρουσιάσουν αυτού του τύπου την αλληλοεπίδραση που προκαλεί δυνητικά ένα ανώμαλο αποτέλεσμα. Αυτά τα αντιδραστήρια έχουν μορφοποιηθεί έτσι, ώστε, να ελαχιστοποιούν τον κίνδυνο της αλληλοεπίδρασης παρόλ αυτά, πιθανές αλληλεπιδράσεις μεταξύ των σπάνιων ορών και των συστατικών της μεθόδου μπορεί να εμφανιστούν. Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα που λαμβάνονται από αυτή τη μέθοδο θα πρέπει πάντα να χρησιμοποιούνται σε συνδυασμό με τις κλινικές εξετάσεις, το ιατρικό ιστορικό του ασθενούς και άλλα ευρήματα. Απόδοση Βλέπε Πίνακες και Γραφήματα για δεδομένα αντιπροσωπευτικά της εκτέλεσης της μεθόδου. Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε pg/ml. (Εκτός αν κάτι σημειώνεται διαφορετικά, όλα πραγματοποιήθηκαν σε δείγματα ορών που συλλέχθηκαν σε σωλήνες χωρίς παρεμποδιστές πηκτών). Παράγοντας μετατροπής: pg/ml 0,118 pmol/l Εύρος αναφοράς: pg/ml (2,4 4,130 pmol/l). Αναλυτική ευαισθησία: 10 pg/ml (1,2 pmol/l). Υψηλή δόση φαινομένου Hook: Καμία επίδραση έως τα pg/ml. Ακρίβεια: Για 10 μέρες κάποια δείγματα αναλύθηκαν εις διπλούν, τέσσερις φορές ημερησίως, συνολικά 40 φορές ή 80 επαναλήψεις. (βλ. Πίνακα Precision ). Γραμμικότητα: Συστήνεται ότι πρέπει να αραιώνονται μόνο τα δείγματα που είναι πάνω από τα όρια των τιμών της ανάλυσης (> pg/ml ή > pmol/l). Τα δείγματα αναλύθηκαν σε διάφορες αραιώσεις. (βλ. Πίνακα "Linearity" για αντιπροσωπευτικά δεδομένα). Ανάκτηση: : Κάποια δείγματα (1 με 19) εμπλουτίστηκαν με τρία διαλύματα NTproBNP (26 500, , και pg/ml) και αναλύθηκαν (Βλ. Πίνακα Recovery για τα αντιπροσωπευτικά δείγματα). Ειδικότητα: Το αντίσωμα είναι εξαιρετικά ειδικό στην NT-proBNP. (βλ. Πίνακας "Specificity"). Χολερυθρίνη: Μπορεί να επηρεάσει την εξέταση σε δείγματα NT-proBNP κάτω από 500 pg/ml, προκαλώντας μείωση των τιμών. (βλ. Πίνακα Χολερυθρίνη για αντιπροσωπευτικά δεδομένα). Αιμόλυση: Παρουσία αιμοσφαιρίνης σε συγκεντρώσεις μέχρι 600 mg/dl δεν επηρεάζουν τα αποτελέσματα, μέσα στα όρια ευαισθησίας της μεθόδου. Λιπιδαιμία: Παρουσία τριγλυκεριδίων σε συγκεντρώσεις μέχρι mg/dl δεν επιδρούν στα αποτελέσματα, μέσα στα όρια ευαισθησίας της μεθόδου. Εναλλακτικός τύπος δείγματος: Για να αξιολογηθεί η επίδραση διαφορετικών τύπων δειγμάτων, συλλέχθηκε αίμα από 25 εθελοντές σε πλαστικούς, σε σωλήνες με λίθιο-ηπαρίνη και σε πλαστικούς σωλήνες σε παρεμποδιστές πήξης (PST ). Όλοι οι σωλήνες ήταν από την Becton Dickinson. Σε 17 σετ αντίστοιχων δειγμάτων, ίσοι όγκοι αραιώθηκαν σε διάφορες συγκεντρώσεις NT-proBNP, ώστε να υπάρχουν τιμές σε όλο το εύρος της καμπύλης αναφοράς της εξέτασης και στη συνέχεια αναλύθηκαν με τη διαδικασία IMMULITE 2000 NT-proBNP. (PST πλάσμα) = 0,991 (Li-ηπαρινισμένο πλάσμα) pg/ml r = 0,994 Μέσοι όροι: pg/ml (Li-Ηπαρινισμένο πλάσμα) pg/ml (PST πλάσμα) 14 IMMULITE 2000 NT-proBNP (PIEL2KNT-2 {16}, )

15 Σύγκριση μεθόδου 1: Η ανάλυση συγκρίθηκε με ένα εμπορικά διαθέσιμο kit το Elecsys 2010 probnp σε 366 δείγματα ασθενών. (Εύρος αυγκέντρωσης: περίπου 7,9 με pg/ml. βλ. graph 1.) Με γραμμική παλινδρόμιση: (IML 2000) = 0,97 (Elecsys 2010) 9,9 pg/ml r = 0,992 Μέσοι όροι: pg/ml (IMMULITE 2000) pg/ml (Elecsys 2010) Σύγκριση μεθόδου 2: Η ανάλυση συγκρίθηκε με την IMMULITE 2500 NT-proBNP σε 366 δείγματα ασθενών. (Εύρος συγκέντρωσης: 21,3 με pg/ml. βλ. graph 2.) Με γραμμική παλινδρόμιση: (IML 2000) = 1,01 (IML 2500) 35,8 pg/ml r = 0,996 Μέσοι όροι: pg/ml (IMMULITE 2000) pg/ml (IMMULITE 2500) Τεχνική Υποστήριξη Για τεχνική υποστήριξη αποταθείτε στον αντιπρόσωπο της χώρας σας. Το Σύστημα Ποιότητας της Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. είναι επικυρωμένο με ISO 13485:2003 Κατασκευάστηκε µε την άδεια της εταιρείας Roche Diagnostics GmbH. Polski IMMULITE 2000 NT probnp Przeznaczenie: Test diagnostyczny in vitro dla analizatorów systemów IMMULITE 2000 przeznaczony do ilościowego pomiaru fragmentu N-końcowego mózgowego pro-peptytydu natriuretycznego (NT-proBNP) w heparynowym osoczu, przydatny w diagnostyce osób z podejrzeniem zastoinowej niewydolności serca. Test ponadto zalecany jest do oceny zagrożenia chorych z ostrym zespołem wieńcowym i zastoinową niewydolnością serca. Numer katalogowy: L2KNT2 (200 testów) Kod testu: NTP Kolor: Czerwony Wprowadzenie Przewlekła niewydolność serca, najczęściej spowodowana przez dysfunkcję lewej komory jest klinicznym zespołem wynikającym z obniżonej wydolności tłoczenia serca. Przypadłość ta dotyka około 5 milionów Amerykanów i stanowi główne wskazanie do hospitalizacji osób w wieku powyżej 65 lat. 1 W piśmiennictwie wykazano przydatność netriuretycznego peptydu typu B (BNP), należącego do rodziny peptydów natriuretycznych, do diagnostyki niewydolności serca. 2 ProBNP, prekursor BNP o długości 108 aminokwasów jest syntetyzowany i uwalniany przez miocyty w odpowiedzi na wzrost napięcia ściany komory. ProBNP jest rozszczepiany na 32 aminokwasowy aktywny hormon (BNP) i N-końcowy, liczący 76 reszt aminokwasów nieaktywny peptyd NT-proBNP. BNP działa przeciwstawnie do systemu reninaangiotensyna-aldosteron (RAAS) powodując zwiększone wydalanie sodu z moczem, nasilone wydalanie moczu i rozszerzenie naczyń hamując wydalanie reniny i produkcję aldosteronu. 3 Poziom w osoczu obu: BNP i NT-proBNP, jest znacznie podniesiony u osób z zaburzeniami lewej komory, pozostając w dobrej korelacji z funkcjonalną klasyfikacją niewydolności serca podawaną przez New York Heart Association. 5,6 NT-proBNP wykazuje przewagą w stosunku do BNP jako marker biochemiczny ze względu na dłuższy okres połowicznego rozpadu, lepszą stabilność in vitro, mniejsze wahania u danej osoby i wyższe stężenie w krążeniu. 4 Określenie poziomu NTproBNP w osoczu może być użyteczne w diagnozowaniu osób z chroniczną niewydolnością serca, w ocenie nasilenia, możliwości pogorszenia i w monitorowaniu podatności na leczenie. 1,4,7 Zasada testu IMMULITE 2000 NT-proBNP jest dwupunktowym, chemiluminescencyjnym testem immunometrycznym fazy stałej. Czas inkubacji: 1 30 minut. IMMULITE 2000 NT-proBNP (PIEL2KNT-2 {16}, ) 15

16 Preparatyka próbek Surowica nie jest odpowiednim materiałem. Zalecane jest klarowanie próbek lipemicznych przez ultrawirowanie. Hemoliza próbki może świadczyć o nieprawidłowym postępowaniu z próbką na etapie przedlaboratoryjnym. Fakt ten należy brać pod uwagę przy interpretacji wyników. W zależności od producenta probówki do pobierania krwi mogą różnie wpływać na uzyskiwane wyniki. Istotne jest tworzywo i czynniki dodatkowe jak żel lub bariery oddzielające skrzep, aktywatory krzepnięcia oraz antykoagulanty. Wpływ wszystkich możliwych wariantów probówek na test Immulite 2000 NTproBNP nie został określony. Informacje o przetestowanych wariantach podano w akapicie Wpływ materiału na oznaczenie. Wymagana objętość próbki: 50 µl osocza heparynowego. Przechowywanie materiału: 3 dni w 2 8 C lub 6 miesięcy w -20 C. Ostrzeżenia i warunki wstępne Test diagnostyczny in vitro. PRZESTROGA: Materiał pochodzenia zwierzęcego. Postępować tak jak z materiałem potencjalnie zakaźnym. H412 P273, P501 Działa szkodliwie na organizmy wodne, powodując długotrwałe skutki. Unikać uwolnienia do środowiska. Pojemnik i zawartość usuwać zgodnie z wszystkimi lokalnymi, regionalnymi i krajowymi przepisami. Zawiera: azydek sodu; NT-proBNP Kalibratory Odczynniki: Przechowywać w 2 8 C. Usuwać zgodnie z instrukcją. Zachowywać środki ostrożności konieczne przy pracy z materiałem potencjalnie zakaźnym. W materiałach pochodzących z krwi ludzkiej wykluczono reaktywność w kierunku syfilisu, obecność przeciwciał anty-hiv1/2, HBsAg i przeciwciał anty- HCV. Azydek sodu w stężeniu mniejszym niż 0,1 g/dl dodawany jest jako konserwant. Wykorzystane odczynniki usuwać w dużej ilości wody, by zapobiec osadzaniu azydku sodu w rurach miedzianych lub ołowianych, co może doprowadzić do wytworzenia potencjalnie wybuchowych azydków tych metali. Substrat chemiluminescencyjny: Unikać zanieczyszczenia i chronić przed bezpośrednim światłem słonecznym (patrz ulotka). Woda: Dejonizowana lub destylowana. Elementy zestawu Elementy zestawu tworzą całość. Kody na wewnętrznych pokrywach pudełka są niezbędne do wykonania oznaczenia. NT-proBNP Pojemnik z kulkami (L2NT12) Z kodem kreskowym. 200 kulek opłaszczonych owczym przeciwciałem poliklonalnym anty-nt-probnp. Stabilne w 2 8 C do daty ważności. L2KNT2: 1 opakowanie NT-proBNP Klin Odczynnikowy (L2NTA2) Z kodem kreskowym. 11,5 ml alkaicznej fosfatazy (izolowanej z jelita cieląt) związanej z owczym przeciwciałem poliklonalnym anty-nt-probnp w buforze. Stabilny w 2 8 C do daty ważności. L2KNT2: 1 klin Przed użyciem zerwać taśmę zabezpieczającą nie uszkadzając kodu kreskowego. Usunąć foliową uszczelką komór odczynnikowych. Wsunąć przesuwne zamknięcie komór w prowadnice w pokrywie klina. 16 IMMULITE 2000 NT-proBNP (PIEL2KNT-2 {16}, )

17 NT-proBNP Kalibratory (LNTL, LNTH) Dwie fiolki (Niski i Wysoki) zawierające liofilizat NT-proBNP w matrycy surowicy zwierzęcej, z konserwantem. Zawartość każdej fiolki rekonstytuować w 3,0 ml wody destylowanej lub dejonizowanej. Mieszać delikatnie przez toczenie lub odwracanie. Po rekonstytucji stabilne 3 miesiące w 20 C (rozpipetować). L2KNT2: 1 zestaw Przed wykonaniem kalibracji umocować na probówkach odpowiednie nalepki z kodem kreskowym (dostarczane z zestawem) rozpoznawane przez czytnik kodów kreskowych aparatu. Materiały dostarczane oddzielnie NT-proBNP rozcieńczalnik próbek (L2NTZ) Do automatycznego rozcieńczania próbek badanych. Jedna fiolka koncentrowanej, gotowej do użycia, preparowanej, pozbawionej NT-proBNP matrycy białka zwierzęcego, z konserwantem. Po otwarciu stabilny w 2 8 C przez 30 dni lub 6 miesięcy w 20 C (rozpipetować). L2NTZ: 25 ml Wraz z rozcieńczalnikiem dostarczane są nalepki z kodami kreskowymi. Nalepkę umieścić na probówce (16 x 100 mm), by umożliwić jej rozpoznanie przez czytnik kodów aparatu. L2NTZ: 3 nalepki L2SUBM: Substrat chemiluminescencyjny L2PWSM: Roztwór płuczący L2KPM: Roztwór czyszczący LRXT: Probówki reakcyjne (jednorazowe) L2ZT: 250 probówek do rozcieńczania próbek (16 100mm) L2ZC: 250 korków do probówek na rozcieńczalnik LNTCM: Zestaw dwupoziomowej kontroli NT-proBNP w surowicy zwierzęcej. Ponadto niezbędne: woda destylowana lub dejonizowana, probówki, kontrole. Procedura oznaczenia Przestrzeganie procedur dotyczących utrzymania aparatu, zawartych w Podręczniku operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000 poprawia charakterystykę uzyskiwanych wyników. Procedury: przygotowania aparatu, ustawień aparatu, przygotowania i rozcieńczania próbek, rekalibracji, oznaczenia i kontroli jakości zgodnie z Podręcznikiem operatora do obsługi systemów IMMULITE Zalecany odstęp pomiędzy rekalibracjami: 2 tygodnie. Próbki kontrolne: stosować kontrole lub pule surowic, co najmniej o niskim i wysokim poziomie NT-proBNP. Oczekiwane wartości Dane dla wartości referencyjnych uzyskano w analizatorze IMMULITE Opierając się na pokrewieństwie testów IMMULITE 2500 NT-proBNP i IMMULITE 2000 NT-proBNP (Porównanie metod 2), można oczekiwać, że zakresy wartości referencyjnych tych testów będą identyczne. Badania referencyjne przeprowadzono IMMULITE 2500 NT-proBNP w grupie 217 próbek heparynowego osocza od 124 widocznie zdrowych ochotników z laboratorium i w 93 prawdopodobnie prawidłowych próbkach z dużego laboratorium referencyjnego, w obu przypadkach badani nie podawali w wywiadzie chorób serca. W tabeli poniżej zestawiono mediany i wartości 95 centyla dla istotnych grup wiekowych. Najodpowiedniejsza wartość decyzyjna wynosi 125 pg/ml dla osób poniżej 75 roku życia i 450 pg/ml dla osób 75 letnich i starszych. 4 <75 yrs (n = 124) Grupa referencyjna 75+ yrs (n = 93) Mediana 28,5 pg/ml 172 pg/ml 95-ty centyl 110 pg/ml 589 pg/ml Powyższe wartości należy traktować jako orientacyjne. Każde laboratorium powinno wyznaczyć własne zakresy referencyjne. Ograniczenia Przeciwciała heterofilne obecne w surowicy/osocza ludzkiej mogą wchodzić w reakcję z immunoglobulinami będącymi reagentami testu immunologicznego, wpływając na przebieg oznaczenia in vitro. IMMULITE 2000 NT-proBNP (PIEL2KNT-2 {16}, ) 17

18 [Porównaj: Boscato L.M., Stuart M.C.: Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays Przeciwciała heterofilne - problem wszystkich testów immunologicznych. Clin. Chem. 1988: 34: 27-33]. Wpływ przeciwciał heterofilnych może ujawnić się w oznaczeniach wykonywanych w surowicy osób mających ciągły kontakt ze zwierzętami lub zwierzęcymi produktami krwiopochodnymi, stanowiąc potencjalną przyczynę błędnych wyników. W teście ryzyko interferencji przeciwciał heterofilnych zostało zminimalizowane przez odpowiedni dobór proporcji odczynników, tym niemniej interferencja taka może potencjalnie nastąpić w rzadkich przypadkach. W postępowaniu diagnostycznym wyniki uzyskane tą metodą powinny być z zasady interpretowane w połączeniu z badaniem klinicznym pacjenta, jego historią choroby oraz innymi okolicznościami. Parametry testu Dane charakteryzujące test przedstawiono w tabelach i wykresach. Wyniki podano w pg/ml. (O ile nie podano inaczej, wszystkie wyniki dotyczą osocza heparynowego, a próbki pobierano do probówek bez bariery żelowej). Przelicznik: pg/ml x 0,118 pmol/l Raportowany zakres: pg/ml (2, pmol/l) Czułość analityczna: 10 pg/ml (1,2 pmol/l) Efekt wysokiej dawki Hook Effect: Nie występuje do stężenia pg/ml. Precyzja: Próbki oznaczano w duplikatach w ciągu 10 dni, po 4 serie dziennie, co dało 40 serii i 80 powtórzeń (patrz: Tabela Precyzja). Liniowość: Zaleca się rozcieńczać wyłącznie próbki przekraczające górny zakres testu (> pg/ml lub > pmol/l). Oznaczano próbki poddane kolejnym rozcieńczeniem (Patrz: Tabela Liniowość). Odzysk: Oznaczano próbki wzbogacane w stosunku objętościowym 1 do 19 roztworami NT-proBNP o stężeniach, kolejno: , i pg/ml (Patrz: Tabela Odzysk). Specyficzność: Przeciwciało jest wysoce specyficzne w stosunku do NT-proBNP (patrz: Tabela Specyficzność). Bilirubina: Może wpływać na oznaczenia NT-proBNP w próbkach o stężeniu NT-proBNP mniejszym niż 500 pg/ml, powodując obniżenie wartości (patrz: Tabela Bilirubina). Hemoliza: Obecność hemoglobiny w stężeniu do 600 mg/dl nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Lipemia: Obecność trójglicerydów w ilości do mg/dl nie ma wpływu na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Wpływ materiału na oznaczenie: Wpływ rodzaju materiału na oznaczenie określano w próbkach pobieranych od 25 ochotników do plastikowych probówek z heparyną litową i plastikowych probówek z barierą żelową (PST ), wszystkie produkcji Becton Dickinson). Do 17 zestawów porównywanych próbek zawierających tą samą objętość dodawano różne ilości NT-proBNP dla uzyskania wartości wzdłuż całego zakresu liniowości testu i oznaczano w IMMULITE 2000 NT-proBNP. (PST osocze) = 0,991 (Osocze Li-heparyna) pg/ml r = 0,994 Średnie: pg/ml (Osocze Li-heparyna) pg/ml (PST osocze) Porównanie metod 1: Test porównywano z dostępnym na rynku testem Elecsys 2010 probnp w grupie 366 próbek (zakres stężeń od około 7,9 do pg/ml. Wykres 1). Otrzymano następujące równanie regresji liniowej: (IML 2000) = 0,97 (Elecsys 2010) 9,9 pg/ml r = 0,992 Średnie: pg/ml (IMMULITE 2000) pg/ml (Elecsys 2010) Porównanie metod 2: Test porównywano z testem IMMULITE 2500 probnp w grupie 366 próbek (zakres stężeń od około 21,3 do pg/ml. Wykres 2). Otrzymano następujące równanie regresji liniowej: (IML 2000) = 1,01 (IML 2500) 35,8 pg/ml r = 0, IMMULITE 2000 NT-proBNP (PIEL2KNT-2 {16}, )

19 Średnie: pg/ml (IMMULITE 2000) pg/ml (IMMULITE 2500) Pomoc techniczna i konsultacje Krajowy Dystrybutor udziela wszechstronnej pomocy technicznej. System Kontroli Jakości Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. posiada Certyfikat Jakości ISO 13485:2003. Wyprodukowano na licencji Roche Diagnostics GmbH. IMMULITE is a trademark of Siemens Healthcare Diagnostics Siemens Healthcare Diagnostics. All rights reserved. Made in: UK Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. Glyn Rhonwy, Llanberis, Gwynedd LL55 4EL United Kingdom PIEL2KNT 2 {16} Changes in this Edition: cc#eu22565: 1) Removed references to discontinued products. 2) Under Warnings and Precautions, added caution statement, required GHS pictograms/signal words/hazard and precautionary codes and statements, offending chemicals and sources. 3) Changed Origin: UK to Made in: UK. 4) Updated the manufacturer address to include Glyn Rhonwy. 5) In Understanding the Symbols, revised the symbol for catalog number, added a GHS pictogram for health hazard, and updated existing symbols with GHS pictograms and terminology for exclamation mark, corrosion, skull and crossbones, and environment. Understanding the Symbols Understanding the Symbols En English Vysvětlivky symbolů Επεξήγηση των συμβόλων Znaczenie symboli Cz Česky El Ελληνικά Pl Polski The following symbols may appear on the product labeling: / Na štítku výrobku mohou být uvedeny následující symboly: / Τα ακόλουθα σύμβολα ενδέχεται να εμφανίζονται στην επισήμανση του προϊόντος: / Na etykietach produktu mogą pojawiać się poniższe symbole: Symbol Definition En: In vitro diagnostic medical device Cz: Zdravotnický prostředek pro in vitro diagnostiku El: In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή Pl: Sprzęt do medycznej diagnostyki in vitro En: Catalog Number Cz: Katalogové číslo El: Αριθμός καταλόγου Pl: Numer katalogowy En: Manufacturer Cz: Výrobce El: Κατασκευαστής Pl: Producent En: Authorized Representative in the European Community Cz: Autorizované zastoupení v Evropské unii El: Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα Pl: Autoryzowany przedstawiciel w Unii Europejskiej En: CE Mark Cz: CE značka El: Σήμανση CE Pl: Znak CE En: CE Mark with identification number of notified body Cz: CE značka s identifikačním číslem notifikovaného orgánu El: Σήμανση CE με αριθμό αναγνώρισης του φορέα πιστοποίησης Pl: Znak CE z numerem identyfikacyjnym jednostki notyfikowanej IMMULITE 2000 NT-proBNP (PIEL2KNT-2 {16}, ) 19

20 Symbol Definition En: Consult instructions for use Cz: Postupujte podle návodu k použití El: Συμβουλευτείτε τις οδηγίες λειτουργίας Pl: Zapoznać się z instrukcją użycia En: Caution! Potential Biohazard Cz: Pozor! Potenciální biohazard El: Πρoσοχή! υνητικός βιολογικός κίνδυνος Pl: Uwaga! Potencjalne zagrożenie biologiczne En: Temperature limitation (2 8 C) Cz: Teplotní rozsah (2 8 C) El: Περιορισμός θερμοκρασίας (2 8 C) Pl: Zakres temperatury (2 8 C) En: Upper limit of temperature ( -20 C) Cz: Horní teplotní limit ( -20 C) El: Ανώτερο όριο θερμοκρασίας ( -20 C) Pl: Górny zakres temperatury ( -20 C) En: Lower limit of temperature ( 2 C) Cz: Spodní teplotní limit ( 2 C) El: Κατώτερο όριο θερμοκρασίας ( 2 C) Pl: Dolny zakres temperatury ( 2 C) En: Do not freeze (> 0 C) Cz: Nezmrazovat (> 0 C) El: Μην καταψυχετε (> 0 C) Pl: Nie zamrażać (> 0 C) En: Do not reuse Cz: Pro jednorázové použití El: Μην κάνετε επαναληπτική χρήση Pl: Nie używać powtórnie Symbol Definition En: Contains sufficient for (n) tests Cz: Dostatečné množství pro (n) testů El: Περιεχόμενο επαρκές για (n) εξετάσεις Pl: Zawartość wystarczająca na (n) testów En: Date format (year-month) Cz: Formát data (rok-měsíc) El: Μορφή ημερομηνίας (έτος-μήνας) Pl: Zapis daty (rok-miesiąc) En: Use by Cz: Spotřebujte do El: Ημερομηνία λήξης Pl: Wykorzystać do En: Health Hazard Cz: Zdravotní riziko El: Κίνδυνος για την υγεία Pl: Zagrożenie dla zdrowia En: Exclamation Mark Cz: Vykřičník El: Θαυμαστικό Pl: Wykrzyknik En: Corrosion Cz: Koroze El: ιάβρωση Pl: Działanie żrące En: Skull and Crossbones Cz: Lebka se zkříženými hnáty El: Νεκροκεφαλή με διασταυρούμενα οστά Pl: Czaszka i skrzyżowane piszczele En: Environment Cz: Prostředí El: Περιβάλλον Pl: Środowisko En: Keep away from sunlight Cz: Chraňte před slunečním světlem El: ιατηρείτε μακριά από το ηλιακό φως Pl: Chronić przed światłem słonecznym BEAD PACK En: Bead Pack Cz: Zásobník s kuličkami El: Συσκευασία σφαιριδίων Pl: Pojemnik z kulkami LOT En: Batch code Cz: Šarže El: Κωδικός παρτίδας Pl: Kod serii TEST UNIT En: Test Unit Cz: Testovací Jednotky El: Μονάδες ανάλυσης Pl: Jednostki testowe 20 IMMULITE 2000 NT-proBNP (PIEL2KNT-2 {16}, )