Prolactin. For use on IMMULITE 2000 systems

Transcript

1 Prolactin For use on IMMULITE 2000 systems

2 IMMULITE 2000 Prolactin English Intended Use: For in vitro diagnostic use with the IMMULITE 2000 Systems Analyzers for the quantitative measurement of prolactin in serum, as an aid in the diagnosis and treatment of pituitary disorders. Catalog Number: L2KPR2 (200 tests), L2KPR6 (600 tests) Test Code: PRL Color: Dark Blue Summary and Explanation Human prolactin is a polypeptide hormone of the anterior pituitary with a molecular mass of about 22,800. It plays an essential role in the secretion of milk and has the ability to suppress gonadal function. The very existence of prolactin as a substance distinct from human growth hormone was established only in Since that time, determination of prolactin has become an important tool in the investigation of amenorrhea, galactorrhea and hypothalamic-pituitary disorders. As a reference range for circulating prolactin, the literature suggests concentrations up to approximately 20 ng/ml. Values are distinctly elevated at birth but decline to adult levels in less than three months. Women are reported to have slightly higher mean levels than men, with a slight rise at puberty apparently estrogen related and a corresponding fall at menopause. During pregnancy, the prolactin level climbs steadily to ten or twenty times its former value, then drops back down to normal after delivery within three weeks in nonnursing mothers. In those who breast-feed, the decline to normal is more gradual because of the prompt and dramatic surges in prolactin release induced by suckling. Women taking oral contraceptives or under estrogen treatment may have prolactin levels higher than normal. In assessing the significance of moderate elevations, it is important to keep in mind that prolactin is a stress hormone. Not only surgery, but events no more distressing than venipuncture or a clinical interview have been reported to occasion a transient rise. Moreover, the release of prolactin is inherently episodic, and day-to-day fluctuations with CVs as high as 30% have been encountered. Finally, there is a sleep-related diurnal variation: prolactin levels increase during sleep and reach their lowest a few hours after waking. The advice sometimes given to draw samples "between nine and noon" is based on the assumption that subjects observe reasonably normal waking hours. Principle of the Procedure IMMULITE 2000 Prolactin is a solid-phase, two-site chemiluminescent immunometric assay. Incubation Cycles: 1 30 minutes Time to first result: 35 minutes Specimen Collection The use of an ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples. Hemolyzed samples may indicate mistreatment of a specimen before receipt by the laboratory; hence the results should be interpreted with caution. Centrifuging serum samples before a complete clot forms may result in the presence of fibrin. To prevent erroneous results due to the presence of fibrin, ensure that complete clot formation has taken place prior to centrifugation of samples. Some samples, particularly those from patients receiving anticoagulant therapy, may require increased clotting time. Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE 2000 Prolactin has not been tested with all possible variations of tube types. Volume Required: 25 µl serum 2 IMMULITE 2000 Prolactin (PIEL2KPR-6 {22}, )

3 Storage: 7 days at 2 8 C, or 3 months at 20 C. Warnings and Precautions For in vitro diagnostic use. CAUTION: This device contains material of animal origin and should be handled as a potential carrier and transmitter of disease. H412 P273, P501 Harmful to aquatic life with long lasting effects. Avoid release to the environment. Dispose of contents and container in accordance with all local, regional, and national regulations. Contains: 2-methyl-2Hisothiazol-3-one; Prolactin Adjustors Reagents: Store at 2 8 C. Dispose of in accordance with applicable laws. Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C. Sodium azide, at concentrations less than 0.1 g/dl, has been added as a preservative. On disposal, flush with large volumes of water to prevent the buildup of potentially explosive metal azides in lead and copper plumbing. Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert.) Water: Use distilled or deionized water. Materials Supplied Components are a matched set. Labels on the inside box are needed for the assay. Prolactin Bead Pack (L2PR12) With barcode. 200 beads, coated with monoclonal murine anti-prolactin. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KPR2: 1 pack L2KPR6: 3 packs Prolactin Reagent Wedge (L2PRA2) With barcode ml alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to polyclonal goat anti-prolactin, with preservative. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KPR2: 1 wedge L2KPR6: 3 wedges Before use, tear off the top of the label at the perforations, without damaging the barcode. Remove the foil seal from the top of wedge; snap the sliding cover down into the ramps on the reagent lid. Prolactin Adjustors (LPRL, LPRH) Two vials (Low and High), of lyophilized human prolactin in a serum/buffer matrix. Reconstitute each vial with 2.0 ml distilled or deionized water, and mix by gentle inversion. Stable after reconstitution for 60 days (aliquotted) at 20 C. L2KPR2: 1 set L2KPR6: 2 sets Before making an adjustment, place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes so that the barcodes can be read by the on-board reader. Kit Components Supplied Separately Prolactin Sample Diluent (L2PRZ) For on-board dilution of high samples. 25 ml of concentrated (ready-to-use) processed, prolactin-free serum/buffer matrix. Storage: 30 days (after opening) at 2 8 C or 6 months (aliquotted) at 20 C. Barcode labels are provided for use with the diluent. Before use, place an appropriate label on a mm test tube, so that the barcodes can be read by the on-board reader. L2PRZ: 3 labels L2SUBM: Chemiluminescent Substrate L2PWSM: Probe Wash L2KPM: Probe Cleaning Kit LRXT: Reaction Tubes (disposable) L2ZT: 250 Sample Diluent Test Tubes ( mm) L2ZC: 250 Sample Diluent Tube Caps Also Required Distilled or deionized water; test tubes; controls Assay Procedure Note that for optimal performance, it is important to perform all routine maintenance procedures as defined in the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual. IMMULITE 2000 Prolactin (PIEL2KPR-6 {22}, ) 3

4 See the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual for preparation, setup, dilutions, adjustment, assay and quality control procedures. Recommended Adjustment Interval: 4 weeks Quality Control Samples: Follow government regulations or accreditation requirements for quality control frequency. Use controls or serum pools with at least two levels (low and high) of prolactin. Siemens Healthcare Diagnostics recommends the use of commercially available quality control materials with at least 2 levels (low and high). A satisfactory level of performance is achieved when the analyte values obtained are within the Acceptable Control Range for the system, or within an established range determined by an appropriate internal laboratory quality control scheme. Expected Values Based on its relationship to IMMULITE Prolactin (see Method Comparison), the assay can be expected to have essentially the same reference range. Group n Median 96% Range Adult Males ng/ml miu/l A study 17 performed with IMMULITE Prolactin yielded the following results. Group n Median 95% Range Adult Females ng/ml miu/l As summarized in technical report ZB157, 17 in a study which followed normal ovulating women on a daily basis throughout one complete cycle, somewhat higher values were obtained an outcome consistent with the increasingly stressful sample collection process entailed by the study design. A cross-sectional study of pediatric fertility values performed with IMMULITE Prolactin at a "wellness" clinic in the southwestern United States yielded the following results. Prolactin, ng/ml Group Age (yr) n Median Central 95% Females Cord Males Cord Combined Cord Prolactin, miu/l Group Age (yr) n Median Central 95% Females Cord , Males Cord , Combined Cord , Consider these limits as guidelines only. Each laboratory should establish its own reference ranges. Limitation Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: ] Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings. 4 IMMULITE 2000 Prolactin (PIEL2KPR-6 {22}, )

5 Performance Data See Tables and Graphs for data representative of the assay's performance. Results are expressed in ng/ml. (Unless otherwise noted, all were generated on serum samples collected in tubes without gel barriers or clot-promoting additives.) Conversion Factor: ng/ml 21.2 miu/l [3rd IS 84/500] Reportable Range: ng/ml ( miu/l) in terms of the 3 rd IS 84/500 Analytical Sensitivity: 0.5 ng/ml (10.6 miu/l) High-dose Hook Effect: None up to 20,500 ng/ml (434,600 miu/l) Precision: Samples were assayed in duplicate over the course of 20 days, two runs per day, for a total of 40 runs and 80 replicates. (See "Precision" table.) Linearity: Samples were assayed under various dilutions. (See "Linearity" table for representative data.) Recovery: Samples spiked 1 to 19 with four prolactin solutions (190, 356, 928 and 1740 ng/ml), were assayed. (See "Recovery" table for representative data.) Specificity: The antibody is highly specific for prolactin. (See "Specificity" table.) Alternate Sample Type: A limited study of matched samples from laboratory volunteers yielded comparable results for serum and heparinized plasma. Bilirubin: Presence of bilirubin in concentrations up to 200 mg/l has no effect on results, within the precision of the assay. Hemolysis: Presence of hemoglobin in concentrations up to 375 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Lipemia: Presence of triglycerides in concentrations up to 3000 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Method Comparison: The assay was compared to IMMULITE Prolactin on 148 samples. (Concentration range: approximately 1 to 140 ng/ml. See graph.) By linear regression: (IML 2000) = 1.00 (IML) 0.96 ng/ml r = Means: 44 ng/ml (IMMULITE 2000) 45 ng/ml (IMMULITE) References 1) Cowden E, et al. Laboratory assessment of prolactin status. Ann Clin Biochem 1979;16: ) Cowden E, et al. Tests of prolactin secretion. Lancet 1979; ) Djursing H. Short- and long-term fluctuations in plasma prolactin concentration in normal subjects. Acta Endocrinol 1981; 97:1 6. 4) Greer ME, et al. Prevalence of hyperprolactinemia in anovulatory women. Obstet Gynecol 1980;56: ) Harrington RA, et al. Metoclopramide: an updated review. Drugs 1983;25: ) Healy DL, et al. Pituitary autonomy in hyperprolactinemia secondary amenorrhea: results of hypothalamicpituitary testing. J Clin Endocrinol Metab 1977;44: ) Kleinberg DL, Noel GL, Frantz AG. Galactorrhea: a study of 235 cases. N Engl J Med 1977;296: ) Knuth UA, Friesen HG. Prolactin and pregnancy. Curr Top Exp Endocrinol 1983;4: ) Maxson WS, Hammond CB. Hyperprolactinemia. Contemp Ob/Gyn 1982 Jan;19(1):49 63, 19: ) Pepperell RJ. Prolactin and reproduction. Fertil Steril 1981;35: ) Babson, AL. The IMMULITE Automated Immunoassay System. J Clin Immunoassay 1991;14: ) Thorner MO. Prolactin: clinical physiology and management of hyperprolactinemia. In: Martini L, Besser GM, et al, editors. Clinical endocrinology. New York: Academic Press, 1977; ) Tolis G, Franks S. Physiology and pathology of prolactin secretion. In: Tolis G, et al, editors. Clinical endocrinology: a pathophysiological approach. New York: Raven Press, 1979; ) Tolis G, et al. Aspects of prolactin pathophysiology. Periodicum Biologorum 1983;85 Suppl 1: ) Yen SSC. Neuroendocrine regulation of gonadotropin and prolactin secretion in women: disorders in reproduction. In: Vaitukaitis J, editor. Clinical reproductive endocrinology. New York: Elsevier Biomedical, 1982; ) Zacur HA. Use of the human prolactin immunoassay. J Clin Immunoassay 1983 Spring;6(1): ) Vankrieken L. IMMULITE reproductive hormone assays: multicenter reference range data. Los Angeles: Diagnostic Products Corporation, Document No. ZB157-D. Technical Assistance For technical assistance, contact your National Distributor. The Quality System of Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. is certified to ISO 13485:2003. IMMULITE 2000 Prolactin (PIEL2KPR-6 {22}, ) 5

6 Tables and Graphs Precision (ng/ml) Within-Run 1 Total 2 Mean 3 SD 4 CV 5 SD CV % % % % % % % % % % % % Česky. 1 V rámci stanovení, 2 Celkem, 3 Střední hodnota, 4 Směrodatná odchylka, 5 Variační koeficient. Ελληνικά. 1 Κατά την ίδια περίοδο, 2 Συνολικά, 3 Μέσος όρος, 4 SD, 5 CV. Polski. 1 W serii, 2 Całość, 3 Średnie, 4 SD, 5 CV. Linearity (ng/ml) Dilution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E in in % 2 in % 1 in % 2 8 in in % 2 in % 1 in % 3 8 in in % 2 in % 1 in % 4 8 in in % 2 in % 1 in % Česky. 1 Ředění, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 % Naměřená / Očekávaná, 5 8 v 8. Ελληνικά. 1 Αραίωση, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E, 5 8 στα 8. Polski. 1 Rozcieńczenie, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O, 5 8 w 8. Specificity Amount Added 2 (ng/ml) % Cross- Compound 1 reactivity 3 FSH 1000 ND 200 ND HCG 1000 ND 100 ND hpl 200,000 ND LH 1000 ND 500 ND TSH % ND: Not detectable 4 Česky. 1 Sloučenina, 2 Přidané množství, 3 % Zkřížená reaktivita, 4 ND: nezjistitelné. Ελληνικά. 1 Μείγμα, 2 Προστέθηκαν, 3 % Διασταυρ.Αντίδραση, 4 ND: Μη ανιχνεύσιμη ποσότητα. Polski. 1 Składnik, 2 Ilość dodana, 3 % reaktywności Krzyżowej, 4 Nieoznaczlne. 6 IMMULITE 2000 Prolactin (PIEL2KPR-6 {22}, )

7 Recovery (ng/ml) Solution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E A % B % C % D % A % B % C % D % 3 19 A % B % C % D % 4 28 A % B % C % D % 5 47 A % B % C % D % Česky. 1 Roztok, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 Naměřená / Očekávaná. Ελληνικά. 1 Διάλυμα, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E. Polski. 1 Roztwór, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O. Method Comparison IMMULITE 2000 Prolactin IMMULITE Prolactin, ng/ml. (IML 2000) = 1.00 (IML) 0.96 ng/ml r = English. Prolactin Česky. Prolaktin. Ελληνικά. Προλακτίνη. Polski. Prolaktyna. Česky IMMULITE 2000 Prolaktin Použití : Pro in vitro diagnostické použití na analyzátorech IMMULITE 2000 ke stanovení koncentrace prolaktinu v séru, jakožto pomůcky při diagnostice a léčbě onemocnění hypofýzy. Katalogové číslo : L2KPR2 (200 stanovení), L2KPR6 (600 stanovení) Kód metody : PRL Barva : tmavě modrá Shrnutí a vysvětlení Lidský prolaktin je polypeptidický hormon přední hypofýzy s molekulovou hmotností kolem daltonů. Má nezastupitelnou roli při sekreci mléka a schopnost potlačovat funkci pohlavních žláz. Jako samostatná látka odlišená od lidského růstového hormonu je prolaktin znám teprve od roku Od té doby se stanovení prolaktinu stalo důležitým nástrojem při vyhledávání amenorrhei, galaktorhei a hypotalamickohypofyzárních poruch. Referenční rozmezí pro množství cirkulujícího prolaktinu uváděné v literatuře je přibližně do 20 ng/ml. Koncentrace prolaktinu je značně zvýšená při narození, ale do tří měsíců klesá na hodnotu obvyklou v dospělosti. IMMULITE 2000 Prolactin (PIEL2KPR-6 {22}, ) 7

8 Střední hodnota koncentrace prolaktinu je vyšší u žen než u mužů. U dívek se v pubertě ještě mírně zvyšuje podle všeho v souvislosti s estrogenem a v menopauze nastává odpovídající pokles. Během těhotenství hladina prolaktinu soustavně narůstá na 10-ti až 20-ti násobek původní hodnoty a po porodu klesá zpátky na normální úroveň u nekojících žen do tří týdnů. U kojících matek je návrat do normálu pozvolnější z důvodu okamžité a značné tvorby prolaktinu způsobené sáním dítěte. Ženy užívající orální antikoncepci nebo podstupujících léčbu estrogenem můžou mít množství prolaktinu zvýšené oproti normálu. Při hodnocení významu mírného nárůstu koncentrace prolaktinu je důležité vědět, že prolaktin je stresový hormon. Přechodný nárůst jeho koncentrace může způsobit nejen chirurgický zákrok, ale i takové výkony jako jsou odběr krve nebo lékařské vyšetření. Navíc se uvolňování prolaktinu mění i ze dne na den a výkyvy (vyjádřeno variačním koeficientem) můžou dosahovat až 30 %. Množství prolaktinu rovněž souvisí se spánkem: během spánku se zvyšuje a několik hodin po probuzení dosahuje minimálních hodnot. Někdy udílená rada odebírat vzorky "mezi devátou a polednem" předpokládá zachování rozumného času ranního vstávání. Princip stanovení Stanovení IMMULITE 2000 Prolaktin je oboustranná chemiluminiscenční imunochemická reakce v pevné fázi. Inkubační cykly : 1 30 minut Čas do prvního výsledku : 35 minut Odebírání vzorků K úpravě lipemických vzorků se doporučuje použití ultracentrifugy. Hemolyzované vzorky můžou být známkou nesprávného zacházení s preparátem ještě před přijetím do laboratoře ; proto by výsledky měly být interpretovány s obezřetností. Centrifugace vzorků séra ještě před úplným vysrážením může mít za následek přítomnost fibrinu. Chybným výsledkům způsobeným přítomností fibrinu lze zamezit úplným vysrážením vzorků před jejich centrifugací. Některé vzorky, zejména od pacientů podstupujících antikoagulační léčbu, může srážlivost vyžadovat více času. Použití zkumavek pro odběr krve od různých výrobců může poskytovat rozličné hodnoty v závislosti na materiálech a přísadách, včetně gelových nebo fyzických bariér, aktivátorů srážení a/nebo antikoagulačních činidel. Stanovení Prolaktin na analyzátorech IMMULITE 2000 nebylo testováno se všemi možnými varianty jednotlivých typů zkumavek. Potřebný objem vzorku : 25 μl séra Skladování : 7 dní při teplotě 2 8 C nebo 3 měsíce při teplotě 20 C. Upozornění a bezpečnostní opatření Pro in vitro diagnostické použití. UPOZORNĚNÍ : Souprava obsahuje material živočišného původu, se kterým je třeba zacházet jako s potenciálním nosičem a přenašečem nemocí. H412 P273, P501 Škodlivý pro vodní organismy, s dlouhodobými účinky. Zabraňte uvolnění do životního prostředí. Odstraňte obsah a obal v souladu se všemi místními, regionálními a národními předpisy. Obsahuje : 2-methyl-2Hisothiazol-3-jedna ; Prolaktin kalibrátory Reagencie : Skladujte při teplotě 2 8 C. Likvidujte v souladu s platnými předpisy. Řiďte se obecnými pravidly bezpečnosti práce a se všemi komponenty nakládejte, jako by byly potenciálně infekční. Zdrojové materiály získané z lidské krve byly testovány a shledány nereaktivní na syfilis, na protilátky proti HIV 1 a 2, na povrchový antigen hepatitidy typu B (HBsAg), a na protilátky proti hepatitidě typu C. Jako konzervační látka byl přidán azid sodný v koncentracích menších než 0,1 g/dl. Při likvidaci vypláchněte velkým množstvím vody, aby se zamezilo nahromadění potenciálně výbušných azidů kovů v olověném a měděném potrubí. 8 IMMULITE 2000 Prolactin (PIEL2KPR-6 {22}, )

9 Chemiluminiscenční substrát : Vyvarujte se kontaminace a nevystavujte přímému slunečnímu světlu. (Viz připojený letáček.) Voda : Použijte destilovanou nebo deionizovanou vodu. Dodaný materiál Komponenty představují ucelenou sadu. Pro stanovení jsou zapotřebí štítky na vnitřní krabici. Prolaktin zásobník s kuličkami (L2PR12) Opatřeno čárovým kódem. 200 kuliček potažených monoklonální myší protilátkou proti prolaktinu. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KPR2 : 1 balení L2KPR6 : 3 balení Prolaktin reagencie (L2PRA2) Opatřeno čárovým kódem. 11,5 ml alkalické fosfatázy (z telecího střeva) konjugované s polyklonální kozí protilátkou proti prolaktinu, s konzervačním prostředkem. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KPR2 : 1 nádobka L2KPR6 : 3 nádobky Před použitím utrhněte vršek štítku v perforovaném místě, ale nepoškoďte čárový kód. Z vrchu nádobky odstraňte uzavírací fólii ; posuvný uzávěr zaklapněte do ramp na víčku reagencie. Prolaktin kalibrátory (LPRL, LPRH) Dvě ampulky s vysokou a nízkou koncentrací lyofilizovaného lidského prolaktinu v sérové/pufrované matrici. Rekonstituujte každou ampulku přidáním 2,0 ml destilované nebo deionizované vody a zamíchejte mírným překlápěním. Stabilní rozdělené na alikvotní části 60 dní po rekonstituci při teplotě 20 C. L2KPR2 : 1 sada L2KPR6 : 2 sady Před adjustací nalepte na testovací zkumavky příslušné alikvotní štítky (dodané se soupravou) tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. Materiál dodávaný zvlášť Prolaktin diluent vzorků (L2PRZ) Pro automatické ředění koncentrovaných vzorků analyzátorem. 25 ml koncentrované (připravené k použití) zpracované sérové/pufrované matrice bez prolaktinu. Skladování : 30 dní po otevření při teplotě 2 8 C nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při teplotě 20 C. Štítky s čárovými kódy jsou určeny pro diluent. Před použitím nalepte příslušný štítek na testovací zkumavku mm tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. L2PRZ : 3 štítky L2SUBM : chemiluminiscenční substrát L2PWSM : promývací roztok L2KPM : čistící roztok na jehly LRXT : reakční zkumavky (na jedno použití) L2ZT : 250 testovacích zkumavek na diluent vzorků ( mm) L2ZC : 250 uzávěrů na testovací zkumavky na diluent vzorků Dále potřebujete Destilovanou nebo deionizovanou vodu; testovací zkumavky, kontroly Postup stanovení K dosažení optimálního výkonu je důležité provádět veškerou pravidelnou údržbu stanovenou v manuálu k analyzátorům IMMULITE V manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000 najdete postupy : přípravy, nastavení, ředění, adjustace, stanovení vzorků a kontrol. Doporučený interval mezi adjustacemi : 4 týdny Vzorky ke kontrole kvality : Pokud jde o četnost kontroly kvality, je třeba řídit se platnými předpisy a akreditačními požadavky. Použijte kontroly nebo směsné vzorky s alespoň dvěmi koncentracemi (vysokou a nízkou) prolaktinu. Společnost Siemens Healthcare Diagnostics doporučuje používat obchodně dostupné materiály kontroly kvality o přinejmenším dvou koncentracích vysoké a nízké. Vyhovující funkčnosti se dosahuje, pokud zjištěné hodnoty analytu leží uvnitř IMMULITE 2000 Prolactin (PIEL2KPR-6 {22}, ) 9

10 přijatelného kontrolního rozmezí analyzátoru nebo uvnitř rozmezí stanoveného příslušným interním systémem kontroly kvality dané laboratoře. Očekávané hodnoty Na základě příbuznosti tohoto stanovení s testem Prolaktin na analyzátoru IMMULITE (viz Srovnání metody) je možné očekávat prakticky stejné referenční rozmezí. Skupina n Medián 96% rozmezí Dospělí muži 19 6,2 ng/ml 2, miu/l Studie 17 provedená pomocí testu Prolaktin na analyzátoru IMMULITE poskytla následující hodnoty. Skupina n Medián 95% rozmezí Dospělé ženy 115 9,4 ng/ml 1, miu/l Jak již bylo shrnuto v technické zprávě ZB157 17, výzkum, v rámci kterého byly denně během jednoho celého cyklu sledovány normální ovulující ženy, přinesl poněkud vyšší hodnoty koncentrace prolaktinu. Tyto výsledky odpovídají stresující povaze odebírání vzorků způsobené rozvržením výzkumu. Průřezová studie dětské fertility provedená pomocí testu Prolaktin na analyzátoru IMMULITE na "wellness" klinice na jihozápadě Spojených států poskytla následující výsledky. Skupina Ženy Prolaktin ng/ml Středních Věk (roky) n Medián 95% Pupečníková krev 0,1 0, , Muži Pupečníková krev 0,1 0, , ,6 29 Ženy i muži Pupečníková krev 0,1 0, , Skupina Ženy Muži Ženy i muži Prolaktin miu/l Věk (roky) n Medián Středních 95% Pupečníkov á krev ,1 0, , Pupečníkov á krev 0,1 0, , Pupečníkov á krev ,1 0, , Uvedené hranice považujte pouze za orientační. Každá laboratoř by si měla stanovit svoje vlastní referenční rozmezí. Omezení Heterofilní protilátky v lidském séru můžou reagovat s imunoglobuliny obsaženými v komponentech soupravy a způsobit interference s in vitro imunologickým stanovením. [Viz Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all imunologickým stanovením. Clin Chem 1988:34:27-33.] Vzorky pacientů rutinně vystavené kontaktu se zvířaty nebo produkty zvířecího séra můžou vykázat tento typ interference a potenciálně způsobit anomální výsledky. Tyto reagencie byly vyvinuty tak, aby bylo riziko interference minimalizováno ; nicméně případné interakce mezi ojedinělými séry a komponenty testu se můžou vyskytnout. Pro diagnostické účely by se výsledky tohoto stanovení měly vždy používat v kombinaci s klinickými zkouškami, zdravotní historií pacienta a ostatními nálezy. Znaky metody Reprezentativní výsledky stanovení najdete v části Tabulky a grafy. Výsledky se udávají v ng/ml. (Pokud není uvedeno jinak, všechny výsledky byly získány na vzorcích séra odebraných do zkumavek bez gelových bariér nebo přísad podporujících srážlivost.) Konverzní faktor : ng/ml 21,2 miu/l [3rd IS 84/500] 10 IMMULITE 2000 Prolactin (PIEL2KPR-6 {22}, )

11 Rozsah měření : 0,5 150 ng/ml (10, miu/l) dle 3 rd IS 84/500 Analytická citlivost : 0,5 ng/ml (10,6 miu/l) High-dose Hook Effect : Do ng/ml ( miu/l) žádný Přesnost : Vzorky byly stanovovány dvojmo v průběhu 20 dní, dva testy denně, celkem 40 testů a 80 replikátů. (Viz tabulka "Přesnost".) Linearita : Stanovení vzorků bylo provedeno při rozličném ředění. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce "Linearita".) Zpětná výtěžnost : Stanoveny byly vzorky s přídavkem čtyř roztoků prolaktinu (190, 356, 928 a 1740 ng/ml) v poměru 1 : 19. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce "Zpětná výtěžnost".) Specificita : Protilátka je silně specifická vůči prolaktinu. (Viz tabulka "Specificita".) Alternativní typ vzorku : Omezená studie odpovídajících vzorků od dobrovolníků poskytla srovnatelné výsledky pro sérum a heparinizovanou plazmu. Bilirubin : Přítomnost bilirubinu v koncentracích do 200 mg/l nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Hemolýza : Přítomnost hemoglobinu v koncentracích do 375 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Lipémie : Přítomnost triglyceridů v koncentracích do 3000 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Srovnání metody : Stanovení bylo porovnáno s testem Prolaktin na analyzátoru IMMULITE na 148 vzorcích. (Koncentrační rozsah : přibližně 1 až 140 ng/ml. Viz graf.) Podle lineární regrese : (IML 2000) = 1,00 (IML) 0,96 ng/ml r = 0,988 Střední Hodnoty : 44 ng/ml (IMMULITE 2000) 45 ng/ml (IMMULITE) Technická Podpora Pro technickou podporu kontaktujte vašeho národního distributora. Systém kontroly jakosti společnosti Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. je certifikovaný podle ISO 13485:2003. Ελληνικά IMMULITE 2000 Προλακτίνη Ενδεδειγμένη χρήση: Για in vitro διαγνωστική χρήση με τα συστήματα αναλυτών IMMULITE 2000 για τον ποσοτικό προσδιορισμό της προλακτίνης στον ορό, ως βοήθημα στην διάγνωση και θεραπεία διαταραχών της υπόφυσης. Αριθμός καταλόγου: L2KPR2 (200 αναλύσεις), L2KPR6 (600 αναλύσεις) Κωδικός ανάλυσης: PRL Χρώμα: Σκούρο μπλε Περίληψη και Επεξήγηση Η ανθρώπινη προλακτίνη είναι μια πολυπεπτιδική ορμόνη του εμπρόσθιου τμήματος της υπόφυσης με μοριακή μάζα περίπου Η προλακτίνη παίζει σημαντικό ρόλο στην έκκριση γάλακτος και έχει την ικανότητα να καταστέλλει την λειτουργία των γεννητικών αδένων. Η προλακτίνη καθιερώθηκε ως διαφορετική ουσία από την ανθρώπινη αυξητική ορμόνη μόλις το Από τότε ο προσδιορισμός της προλακτίνης αποτελεί σημαντικό εργαλείο στην έρευνα για την αμηνόρροια, γαλακτόρροια και των διαταραχών της υπόφυσης και του υποθαλάμου. Σύμφωνα με την βιβλιογραφία το εύρος αναφοράς της κυκλοφορούσας προλακτίνης είναι περίπου μέχρι 20 ng/ml. Οι τιμές είναι χαρακτηριστικά ανεβασμένες κατά την γέννα αλλά μειώνονται στα επίπεδα ενηλίκων σε λιγότερους από τρεις μήνες. Έχει αναφερθεί ότι οι γυναίκες έχουν ελαφρώς μεγαλύτερα επίπεδα μέσων όρων από τους άνδρες, με μια μικρή αύξηση κατά την εφηβεία σχετιζόμενη με τα οιστρογόνα και μια αντίστοιχη IMMULITE 2000 Prolactin (PIEL2KPR-6 {22}, ) 11

12 μείωση κατά την εμμηνόπαυση. Κατά την διάρκεια της εγκυμοσύνης τα επίπεδα της προλακτίνης ανεβαίνουν σταθερά δέκα ή είκοσι φορές πάνω από την προγενέστερη τιμή και μετά τον τοκετό πέφτουν πάλι στα κανονικά επίπεδα μέσα σε τρεις εβδομάδες για τις μητέρες που δεν θηλάζουν. Στις γυναίκες που θηλάζουν, η επαναφορά των τιμών σε κανονικά επίπεδα είναι βαθμιαία λόγω των άμεσων και εντυπωσιακών διακυμάνσεων της απελευθέρωσης προλακτίνης που προκαλείται από τον θηλασμό. Οι γυναίκες που λαμβάνουν αντισυλληπτικά ή βρίσκονται σε θεραπεία με οιστρογόνα έχουν υψηλότερα από τα κανονικά επίπεδα προλακτίνης. Για να εκτιμήσουμε την βαρύτητα των μέτριων αυξήσεων των τιμών είναι σημαντικό να θυμόμαστε ότι η προλακτίνη είναι μια stress ορμόνη. Έχει αναφερθεί ότι όχι μόνο το χειρουργείο αλλά και άλλα γεγονότα λιγότερο στρεσογόνα όπως το χειρουργικό άνοιγμα φλέβας ή η κλινική συνέντευξη μπορεί να προκαλέσουν μια παροδική άνοδο των τιμών. Επιπρόσθετα, η έκκριση προλακτίνης είναι εγγενώς περιστασιακή και έχουν αναφερθεί καθημερινές διακυμάνσεις με συντελεστη διακύμανσης υψηλό ως 30%. Τέλος, έχει παρατηρηθεί μια ημερήσια διακύμανση των τιμών που σχετίζεται με τον ύπνο: τα επίπεδα της προλακτίνης αυξάνονται κατά την διάρκεια του ύπνου και αγγίζουν τα κατώτερα επίπεδα λίγες ώρες μετά το ξύπνημα. Συνεπώς η σύσταση σύμφωνα με την οποία είναι καλό η συλλογή δείγματος να γίνεται "μεταξύ εννέα και μεσημέρι" βασίζεται στην υπόθεση ότι τα άτομα ακολουθούν κανονικές ώρες έγερσης. Αρχή της Διαδικασίας Η IMMULITE 2000 Προλακτίνη είναι μια ξηρής φάσης, δύο βημάτων, χημειοφωταυγής ανοσομετρική εξέταση. Κύκλοι Επώασης: 1 30 λεπτά Χρόνος για το πρώτο αποτέλεσμα: 35 λεπτά Συλλογή δείγματος Συνιστάται η χρήση της υπερφυγοκέντρου για να καθαριστούν λιπιδαιμικά δείγματα. Αιμολυμένα δείγματα μπορεί να υποδηλώνουν κακή μεταχείριση του δείγματος πριν την παραλαβή του από το εργαστήριο και τα αποτελέσματα πρέπει να ερμηνεύονται με προσοχή. Η φυγοκέντρηση των δειγμάτων πριν την πλήρη πήξη μπορεί να έχει ως αποτέλεσμα την παρουσία θρόμβων. Για να αποφευχθούν λανθασμένα αποτελέσματα εξαιτίας της παρουσίας θρόμβων, βεβαιωθείτε ότι πριν την φυγοκέντρηση το αίμα έπηξε πλήρως. Κάποια δείγματα, ιδιαιτέρως αυτά των ασθενών που λαμβάνουν αντιπηκτική θεραπεία, ίσως χρειάζονται εκτεταμένο χρόνο πήξης. Οι σωλήνες συγκέντρωσης αίματος από διαφορετικές εταιρείες μπορεί να φέρουν διάφορες τιμές, ανάλογα με τα υλικά και τα συμπληρώματα, συμπεριλαμβανομένων των με τζελ ή φυσικών σωληναρίων, των ενεργοποιητών πήξεως και/ή των αντιπηκτικών. Η IMMULITE 2000 Προλακτίνη δεν έχει δοκιμαστεί με όλους τους τύπους σωληναρίων. Απαιτούμενος όγκος: 25 µl ορού Φύλαξη: 7 μέρες στους 2 8 C, ή 3 μήνες στους 20 C. Προειδοποιήσεις και Προφυλάξεις Για in vitro διαγνωστική χρήση. ΠΡΟΣΟXH: Η συσκευή αυτή περιέχει υλικό ζωικής προέλευσης και ο χειρισμός της πρέπει να γίνεται ως εάν επρόκειτο περί δυνητικού φορέα και παράγοντα μετάδοσης νόσου. H412 P273, P501 Επιβλαβές για τους υδρόβιους οργανισμούς, με μακροχρόνιες επιπτώσεις. Να αποφεύγεται η ελευθέρωση στο περιβάλλον. Απορρίψτε το περιεχόμενο και τον περιέκτη σε συμμόρφωση με όλους τους τοπικούς, περιφερειακούς και εθνικούς κανονισμούς. Περιέχει: 2-μεθυλ-2Hισοθειαζολ-3-όνη, Ρυθμιστές Προλακτίνης Αντιδραστήρια: Φύλαξη στους 2 8 C. Υπόκεινται στην ισχύουσα νομοθεσία. Ακολουθείστε τις γενικές προφυλάξεις και χειριστείτε όλα τα συστατικά σαν να ήταν φορείς μολυσματικών παραγόντων. Όλα τα υλικά της μεθόδου που προέρχονται από ανθρώπινο αίμα έχουν ελεγχθεί και 12 IMMULITE 2000 Prolactin (PIEL2KPR-6 {22}, )

13 βρέθηκαν αρνητικά για σύφιλη, για αντισώματα στον HIV 1 και 2, για τα επιφανειακά αντιγόνα της ηπατίτιδας B και για αντισώματα της ηπατίτιδας C. Αζίδιο του νατρίου σε συγκεντρώσεις μικρότερες από 0,1 g/dl, έχει προστεθεί ως συντηρητικό. Κατά την απόθεση, ξεπλύνετε με πολύ νερό προκειμένου να εμποδίσετε την δημιουργία εκρηκτικών αζιδίων στους χάλκινους ή μολύβδινους σωλήνες αποχέτευσης. Υπόστρωμα χημειοφωταύγειας: Δεν πρέπει να εκτίθεται σε απευθείας ηλιακό φως. Δεν πρέπει να μολυνθεί. Προσφύγετε στο ένθετο για λεπτομέρειες Νερό: Χρήση απεσταγμένου ή απιονισμένου νερού. Υλικά που διατίθενται Τα υλικά είναι μια ολοκληρωμένη ενότητα. Οι ετικέτες (με barcode) στο εσωτερικό του κουτιού είναι απαραίτητες για την ανάλυση. Συσκευασία σφαιριδίων προλακτίνης (L2PR12) Με γραμμογράφηση. 200 σφαιρίδια, επικαλυμμένα με μονοκλωνική αντι-προλακτίνη ποντικού. Σταθερά στους 2 8 C μέχρι την ημερομηνία λήξης. L2KPR2: 1 συσκευασία L2KPR6: 3 συσκευασίες Δοχείο αντιδραστηρίου προλακτίνης (L2PRA2) Με γραμμογράφηση. 11,5 ml αλκαλικής φωσφατάσης (βόειο έντερο) συνδεδεμένης με πολυκλωνική αντι-προλακτίνη κατσίκας, με συντηρητικό. Σταθερά στους 2 8 C μέχρι την ημερομηνία λήξης L2KPR2: 1 δοχείο L2KPR6: 3 δοχεία Πριν τη χρήση, σχίστε την πάνω ετικέτα, χωρίς να καταστρέψετε το barcode. Αφαιρέστε (ξεκολλήστε) προσεκτικά το κάλυμμα από την επάνω επιφάνεια του δοχείου, και πιέστε το κάλυμμα κάτω προς τους κεκλιμένους οδηγούς-ράγες. Ρυθμιστές Προλακτίνης (LPRL, LPRH) 2 φιαλίδια (χαμηλό και υψηλό) λυοφιλοποιημένης ανθρώπινης προλακτίνης σε μήτρα ορού/ρυθμιστικού διαλύματος. Κάντε ανασύσταση το περιεχόμενο κάθε φιαλιδίου με 2,0 ml απεσταγμένου ή απιονισμένου νερού και αναδεύστε με ελαφρά αναστροφή. Σταθερά στους 20 C για 60 μέρες (διαχωρισμένα) μετά την ανασύσταση. L2KPR2: 1 σετ L2KPR6: 2 σετ Πριν κάνετε τη ρύθμιση, τοποθετείστε τις κατάλληλες ετικέτες (παρέχονται με το kit) σε δοκιμαστικούς σωλήνες, έτσι, ώστε τα barcodes να μπορούν να διαβαστούν από κατάλληλο σύστημα. Συστατικά του Kit που παρέχονται ξεχωριστά Αραιωτικό δείγματος Προλακτίνης (L2PRZ) Για την αραίωση on-board υψηλών δειγμάτων. 25 ml μήτρας συμπυκνωμένου (έτοιμου για χρήση) επεξεργασμένου ορού/ρυθμιστικού διαλύματος χωρίς προλακτίνη. Φύλαξη: 30 ημέρες (μετά το άνοιγμα) στους 2 8 C ή 6 μήνες (διαχωρισμένα) στους 20 C. Ετικέτες με barcode παρέχονται για χρήση με το αραιωτικό. Πριν τη χρήση, τοποθετείστε μια κατάλληλη ετικέτα σε ένα δοκιμαστικό σωλήνα mm, έτσι ώστε τα barcodes να μπορούν να διαβαστούν από κατάλληλο σύστημα. L2PRZ: 3 ετικέτες L2SUBM: Χημειοφωταυγές υπόστρωμα L2PWSM: Πλυστικό του ανιχνευτή L2KPM: Kit καθαρισμού του ανιχνευτή LRXT: Σωλήνες αντίδρασης (μιας χρήσεως) L2ZT: 250 δοκιμαστικοί σωλήνες για αραίωση του δείγματος ( mm) L2ZC: 250 καπάκια για σωλήνες αραίωσης δείγματος Απαιτούνται επίσης απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό, δοκιμαστικοί σωλήνες, έλεγχοι. Διαδικασία της Ανάλυσης Σημειώστε ότι για το βέλτιστο αποτέλεσμα, είναι σημαντικό να ακολουθηθούν όλες οι τυπικές διαδικασίες όπως ορίζονται στο εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE Βλέπε το εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000 για προετοιμασία, στήσιμο, αραιώσεις, ρυθμίσεις, ανάλυση και διαδικασίες ποιοτικού έλέγχου. Συνιστώμενος χρόνος μεταξύ των ρυθμίσεων: 4 εβδομάδες IMMULITE 2000 Prolactin (PIEL2KPR-6 {22}, ) 13

14 Δείγματα ποιοτικού ελέγχου: Εφαρμόστε τους κρατικούς κανονισμούς ή τις απαιτήσεις πιστοποίησης για τη συχνότητα του ποιοτικού ελέγχου. Χρησιμοποιήστε δείγματα ελέγχου ή απλά δείγματα τουλάχιστον δύο επιπέδων (χαμηλό και υψηλό) προλακτίνης. Η Siemens Healthcare Diagnostics συνιστά τη χρήση εμπορικά διαθέσιμων υλικών ελέγχου ποιότητας με τουλάχιστον 2 επίπεδα (χαμηλό και υψηλό). Ένα ικανοποιητικό επίπεδο απόδοσης επιτυγχάνεται όταν οι τιμές που προκύπτουν βρίσκονται εντός του αποδεκτού εύρους των υλικών ελέγχου για τον αναλυτή ή εντός ενός καθορισμένου εύρους που καθορίστηκε με βάση ένα κατάλληλο πλαίσιο εσωτερικού εργαστηριακού ποιοτικού ελέγχου. Αναμενόμενες τιμές Βασιζόμενη στην σχέση με την IMMULITE Προλακτίνη (βλ. Σύγκριση Μεθόδων), η ανάλυση αναμένεται να έχει τις ίδιες τιμές αναφοράς. Ομάδα n Ενδιάμεση τιμή 96% εύρος Ενήλικοι άντρες 19 6,2 ng/ml 2, miu/l Μια μελέτη 17 που πραγματοποιήθηκε με την IMMULITE Προλακτίνη έδωσε τα ακόλουθα αποτελέσματα. Ομάδα n Ενδιάμεση τιμή 95% εύρος Ενήλικες γυναίκες 115 9,4 ng/ml 1, miu/l Όπως αναφέρεται στην τεχνική αναφορά ZB157, 17 σε μια μελέτη που παρακολουθούσε καθημερινά γυναίκες με κανονική ωορρηξία για έναν ολοκληρωμένο κύκλο, παρατηρήθηκαν υψηλότερες τιμές ένα αποτέλεσμα σύμφωνο με την αυξανόμενη στρεσογόνα διαδικασία συλλογής δείγματος ως συνέπεια του σχεδιασμού της μελέτης. Σε μία διατμηματική μελέτη τιμών γονιμότητας με IMMULITE Προλακτίνη σε παιδιά, εξετάστηκαν δείγματα ορού σε μία κλινική τύπου "wellness" των νοτιοδυτικών ΗΠΑ και έχουμε τα ακόλουθα αποτελέσματα. Προλακτίνη, ng/ml Ομάδα Ηλικία (χρ.) n Ενδιάμε ση τιμή Κεντρικό 95% Κορίτσια Λώρος ,1 0, , Αγόρια Λώρος ,1 0, , ,6 29 Μεικτά Λώρος ,1 0, , Προλακτίνη, miu/l Ομάδα Ηλικία (χρ.) n Ενδιάμε ση τιμή Κεντρικό 95% Κορίτσια Λώρος ,1 0, , Αγόρια Λώρος ,1 0, , Μεικτά Λώρος ,1 0, , Τα εργαστήρια πρέπει να θεωρούν αυτά στα όρια μόνο ως κατευθυντήριες γραμμές. Συνιστάται κάθε εργαστήριο να έχει τις δικές του τιμές αναφοράς. Περιορισμοί Ετεροφυλικά αντισώματα στον ανθρώπινο ορό μπορεί να αντιδράσουν με τις ανοσοσφαιρίνες που περιέχονται στα συστατικά της μεθόδου προκαλώντας δυσκολίες σε εργαστηριακές μεθόδους ανοσοανίχνευσης. [Bλ. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: ] Δείγματα ασθενών που, σαν ρουτίνα, εκτίθενται σε ζώα ή προϊόντα ζωικού ορού μπορούν να παρουσιάσουν αυτού του τύπου την αλληλοεπίδραση 14 IMMULITE 2000 Prolactin (PIEL2KPR-6 {22}, )

15 που προκαλεί δυνητικά ένα ανώμαλο αποτέλεσμα. Αυτά τα αντιδραστήρια έχουν μορφοποιηθεί έτσι, ώστε, να ελαχιστοποιούν τον κίνδυνο της αλληλοεπίδρασης παρόλ αυτά, πιθανές αλληλεπιδράσεις μεταξύ των σπάνιων ορών και των συστατικών της μεθόδου μπορεί να εμφανιστούν. Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα που λαμβάνονται από αυτή τη μέθοδο θα πρέπει πάντα να χρησιμοποιούνται σε συνδυασμό με τις κλινικές εξετάσεις, το ιατρικό ιστορικό του ασθενούς και άλλα ευρήματα. Απόδοση Οι παρακάτω πίνακες και τα γραφήματα περιέχουν δεδομένα αντιπροσωπευτικά της εκτέλεσης της μεθόδου. Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε ng/ml. (Εκτός αν κάτι σημειώνεται διαφορετικά, όλα πραγματοποιήθηκαν σε δείγματα ορών που συλλέχθηκαν σε σωλήνες χωρίς παρεμποδιστές πηκτών ή προσθετικών που προκαλούν θρόμβους.) Παράγοντας μετατροπής: ng/ml 21,2 miu/l [3rd IS 84/500] Εύρος μέτρησης: 0,5 150 ng/ml (10, miu/l) σύμφωνα με το 3 rd IS 84/500 Αναλυτική Ευαισθησία: 0,5 ng/ml (10,6 miu/l) Επίδραση υψηλής δόσης φαινομένου Hook: Καμιά μέχρι ng/ml ( miu/l) Ακρίβεια: Τα δείγματα υφίσταντο αναλύσεις εις διπλούν σε διάστημα 20 ημερών, δύο τρεξίματα την ημέρα, για ένα σύνολο 40 τρεξιμάτων και 80 επαναλήψεων. (Βλ. Πίνακα Precision.) Γραμμικότητα: Ελέγχθηκαν δείγματα με διάφορες αραιώσεις. (Βλ. Πίνακα Linearity για αντιπροσωπευτικά δεδομένα.) Ανάκτηση: Κάποια δείγματα (1 με 19) εμπλουτίστηκαν με τέσσερα διαλύματα προλακτίνης (190, 356, 928 και 1740 ng/ml) και αναλύθηκαν. (Βλ. Πίνακα Recovery για τα αντιπροσωπευτικά δείγματα.) Ειδικότητα: Το αντίσωμα είναι εξαιρετικά ειδικό για προλακτίνη. (Βλ. Πίνακα Specificity.) Εναλλακτικοί τύποι δείγματος: Μια περιορισμένη μελέτη αντίστοιχων δειγμάτων από εθελοντές εργαστηρίου έδωσε συγκρίσιμα αποτελέσματα για ορό και ηπαρινισμένο πλάσμα. Χολερυθρίνη: Παρουσία χολερυθρίνης σε συγκεντρώσεις μέχρι 200 mg/l δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Αιμόλυση: Παρουσία αιμοσφαιρίνης σε συγκεντρώσεις μέχρι 375 mg/dl δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Λιπιδαιμία: Παρουσία τριγλυκεριδίων σε συγκεντρώσεις μέχρι 3000 mg/dl δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης. (Δες Πίνακα Lipemia ) Σύγκριση της Μεθόδου: Η ανάλυση συγκρίθηκε με την IMMULITE Prolactin σε 148 δείγματα. (Εύρος συγκεντρώσεων: περίπου 1 ως 140 ng/ml. Βλ. Σχετικά γραφικά.) Η εξίσωση γραμμικής παλινδρόμησης είναι: (IML 2000) = 1,00 (IML) 0,96 ng/ml r = 0,988 Μέσοι όροι: 44 ng/ml (IMMULITE 2000) 45 ng/ml (IMMULITE) Τεχνική Υποστήριξη Για τεχνική υποστήριξη αποταθείτε στον αντιπρόσωπο της χώρας σας. Το Σύστημα Ποιότητας της Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. είναι επικυρωμένο με ISO 13485:2003. Polski IMMULITE 2000 Prolaktyna Przeznaczenie: Test diagnostyczny in vitro dla analizatorów systemów IMMULITE 2000 do ilościowego oznaczenia poziomu prolaktyny w surowicy, przydatny w diagnozowaniu i leczeniu chorób przysadki mózgowej. Numer Katalogowy: L2KPR2 (200 testów), L2KPR6 (600 testów) Kod testu: PRL Kolor: Ciemnoniebieski IMMULITE 2000 Prolactin (PIEL2KPR-6 {22}, ) 15

16 Wprowadzenie Ludzka prolaktyna jest polipeptydowym hormonem przedniego płata przysadki, o ciężarze cząsteczkowym około Odgrywa istotną rolę w procesie wydzielania mleka oraz wpływa hamująco na funkcje gonad. Istnienie prolaktyny, jako hormonu różnego od hormonu wzrostu, odkryto dopiero w roku Od tego czasu oznaczenie prolaktyny stało się ważnym narzędziem w diagnozowaniu braku miesiączki, mlekotoku a także chorób podwzgórzowo-przysadkowych. Jako wartości referencyjne dla poziomu krążącej prolaktyny literatura podaje stężenie do około 20 ng/ml. Wartości te są wyraźnie wyższe przy porodzie, ale po trzech miesiącach wracają do poziomu prawidłowego. U kobiet poziom prolaktyny jest nieznacznie wyższy niż u mężczyzn, z nieznacznie podniesionym stężeniem w okresie dojrzewania wyraźny wpływ estrogenów i obniżonym od okresu menopauzy. W czasie ciąży poziom prolaktyny podnosi się znacznie 10 do 20 razy ponad wartości poprzednie, spadek do normy następuje do trzech tygodni po porodzie u matek nie karmiących piersią. U kobiet karmiących piersią powrót do wartości prawidłowych jest stopniowy, ponieważ ssanie pobudza nagłe wyrzuty prolaktyny. U kobiet zażywających doustne środki antykoncepcyjne i poddanych estrogenowej terapii zastępczej poziom prolaktyny może być wyższy. Przy ocenie umiarkowanych stężeń prolaktyny należy pamiętać, że jest ona hormonem stresu. Nawet sytuacje mniej stresujące niż operacja przykładowo nakłucie żyły czy wywiad kliniczny, podnoszą okresowo stężenie prolaktyny. Ponadto wyrzuty prolaktyny są epizodyczne, a zmiany CV z dnia na dzień mogą wynosić nawet 30%. Prolaktyna podlega także wahaniom dziennym zależnym od snu jej stężenie wzrasta w czasie snu, a najniższy poziom osiąga w kilka godzin po przebudzeniu. Stosowane niekiedy zalecenie by próbki pobierać pomiędzy 9 a 12 w południe opiera się na założeniu, że nie zaburzy to normalnej pory wstawania badanej osoby. Zasada testu IMMULITE 2000 Prolaktyna jest immunoenzymatycznym, chemiluminescencyjnym, dwupunktowym testem fazy stałej. Czas inkubacji: 1 30 minut Czas do pierwszego wyniku: 35 minut Preparatyka próbek Zalecane jest klarowanie próbek lipemicznych przez ultrawirowanie. Hemoliza próbki może świadczyć o nieprawidłowym postępowaniu z próbką na etapie przedlaboratoryjnym. Fakt ten należy brać pod uwagę przy interpretacji wyników. Odwirowanie próbki krwi przed zakończeniem wykrzepiania może spowodować, że w supernatancie pozostanie fibryna stanowiąca przyczynę fałszywych wyników. Przed przystąpieniem do wirowania należy mieć pewność, że skrzep jest ostatecznie uformowany. Niektóre próbki, a zwłaszcza pochodzące od osób poddanych leczeniu antykoagulantami, wymagają dłuższego czasu na wytworzenie skrzepu. W zależności od producenta probówki do pobierania krwi mogą różnie wpływać na uzyskiwane wyniki. Istotne jest tworzywo i czynniki dodatkowe jak żel lub bariery oddzielające skrzep, aktywatory krzepnięcia oraz antykoagulanty. Wpływ wszystkich możliwych wariantów probówek na test IMMULITE 2000 Prolaktyna nie został określony. Informacje o przetestowanych wariantach podano w akapicie Wpływ materiału na oznaczenie. Wymagana objętość próbki: 25 µl surowicy Przechowywanie materiału: 7 dni w 2 8 C, lub 3 miesiące w 20 C. Ostrzeżenia i warunki wstępne Test diagnostyczny in vitro. PRZESTROGA: Materiał pochodzenia zwierzęcego. Postępować tak jak z materiałem potencjalnie zakaźnym. 16 IMMULITE 2000 Prolactin (PIEL2KPR-6 {22}, )

17 H412 P273, P501 Działa szkodliwie na organizmy wodne, powodując długotrwałe skutki. Unikać uwolnienia do środowiska. Pojemnik i zawartość usuwać zgodnie z wszystkimi lokalnymi, regionalnymi i krajowymi przepisami. Zawiera: 2-metylo-2Hizotiazolino-3-on; Prolaktyna Kalibratory Odczynniki: Przechowywać w 2 8 C. Usuwać zgodnie z instrukcją. Zachowywać środki ostrożności konieczne przy pracy z materiałem potencjalnie zakaźnym. W materiałach pochodzących z krwi ludzkiej wykluczono reaktywność w kierunku syfilisu, obecność przeciwciał anty-hiv1/2, HBsAg i przeciwciał anty-hcv. Niektóre składniki zestawu mogą zawierać jako konserwant azydek sodu w stężeniu mniejszym niż 0,1 g/dl. Wykorzystane odczynniki usuwać w dużej ilości wody, by zapobiec osadzaniu azydku sodu w rurach miedzianych lub ołowianych, co może doprowadzić do wytworzenia potencjalnie wybuchowych azydków tych metali. Substrat chemiluminescencyjny: Unikać zanieczyszczenia i chronić przed bezpośrednim światłem słonecznym (patrz ulotka). Woda: Dejonizowana lub destylowana. Elementy zestawu Elementy zestawu stanowią komplet. Zestaw działa w oparciu o kod kreskowy. Prolaktyna Pojemnik z Kulkami (L2PR12) Oznakowany kodem kreskowym. 200 kulek opłaszczonych mysim przeciwciałem monoklonalnym anty-prolaktyna. Stabilne w 2 8 C do daty ważności. L2KPR2: 1 opakowanie L2KPR6: 3 opakowania Prolaktyna Klin Odczynnikowy (L2PRA2) Z kodem kreskowym. 11,5 ml alkalicznej fosfatazy (izolowanej z jelita cieląt) sprzęgniętej z kozim przeciwciałem poliklonalnym anty-prolaktyna w buforowanym roztworze, z konserwantem. Przechowywać zamknięte w chłodziarce w 2 8 C. Stabilne do daty ważności. L2KPR2: 1 klin L2KPR6: 3 kliny Przed użyciem zerwać taśmę zabezpieczającą nie uszkadzając kodu kreskowego. Usunąć foliową uszczelką komór odczynnikowych. Wsunąć przesuwne zamknięcie komór w prowadnice w pokrywie klina. Prolaktyna Kalibratory (LPRL, LPRH) Dwie fiolki (niski i wysoki) liofilizatu ludzkiej prolaktyny w matrycy surowicy buforowanej. Zawartość każdej rekonstytuować 2,0 ml destylowanej lub dejonizowanej wody. Mieszać przez delikatne obracanie i odwracanie aż do całkowitego rozpuszczenia liofilizatu. Po rekonstytucji stabilne w 20 C przez 60 dni. L2KPR2: 1 zestaw L2KPR6: 2 zestawy Przed wykonaniem kalibracji umocować na probówkach odpowiednie nalepki z kodem kreskowym (dostarczane z zestawem) rozpoznawane przez czytnik kodów kreskowych aparatu. Materiały dostarczane oddzielnie Rozcieńczalnik próbek Prolaktyny (L2PRZ) Do automatycznego rozcieńczania badanych próbek. 25 ml pozbawionej prolaktyny buforowanej matrycy surowicy. Po otwarciu stabilny w 2 8 C przez 30 dni lub przez 6 miesięcy (rozpipetować) w 20 C. Wraz z rozcieńczalnikiem dostarczane są nalepki z kodami kreskowymi. Nalepkę umieścić na probówce ( mm), by umożliwić jej rozpoznanie przez czytnik kodów aparatu. L2PRZ: 3 nalepki L2SUBM: Substrat chemiluminescencyjny L2PWSM: Roztwór płuczący L2KPM: Zestaw czyszczący LRXT: Probówki reakcyjne (jednorazowe) L2ZT: 250 probówek do rozcieńczania próbek mm L2ZC: 250 korków do probówek na rozcieńczalnik Ponadto niezbędne woda destylowana lub dejonizowana, probówki, kontrole IMMULITE 2000 Prolactin (PIEL2KPR-6 {22}, ) 17

18 Procedura oznaczenia Przestrzeganie procedur dotyczących utrzymania aparatu, zawartych w Podręczniku operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000 poprawia charakterystykę uzyskiwanych wyników. Procedury: przygotowania aparatu, ustawień aparatu, przygotowania i rozcieńczania próbek, rekalibracji, oznaczenia i kontroli jakości zgodnie z Podręcznikiem operatora do obsługi systemów IMMULITE Zalecany odstęp pomiędzy rekalibracjami: 4 tygodnie Próbki kontrolne: Przestrzegać przepisów państwowych i wymogów kontrolnych w zakresie częstotliwości kontroli jakości. Stosować kontrole lub pule surowic co najmniej o niskim i wysokim poziomie prolaktyny. Siemens Healthcare Diagnostics zaleca stosowanie dostępnych w handlu próbek kontroli jakości o co najmniej 2 poziomach (niskim i wysokim). Uznaje się, że test przebiega prawidłowo, gdy uzyskane wartości analitu plasują się w przyjętym dla Kontroli zakresie dla danego analizatora lub w zakresie opracowanym w ramach wewnątrzlaboratoryjnego systemu zapewnienia jakości. Oczekiwane wartości Opierając się na podobieństwie z testem IMMULITE Prolaktyna można przyjąć wstępnie poniższe zakresy wartości referencyjnych dla mężczyzn: Grupa n Mediana 95% Zakres Dorośli mężczyźni 19 6,2 ng/ml 2, miu/l Na podstawie 17 badań wykonanych testem IMMULITE Prolaktyna u kobiet wyznaczono następujące zakresy referencyjne: Grupa n Mediana 95% Zakres Dorosłe kobiety 115 9,4 ng/ml 1, miu/l Jak podano w raporcie ZB w badaniach, którymi objęto prawidłowo owulujące kobiety, w oparciu o jeden pełny cykl, zaobserwowano nieco wyższe wartości poziomu prolaktyny. Był to wynik stresu związanego z reżimem pobierania krwi. Przesiewowe badania u dzieci przy zastosowaniu testu IMMULITE Prolaktyna przeprowadzone w Stanach Zjednoczonych przyniosły następujące wyniki: Prolaktyna, ng/ml Środkowe Grupa Wiek (lata) n Mediana 95% Dziewczynki Krew pępowinowa Chłopcy Grupa mieszana 0,1 0, , Krew pępowinowa ,1 0, , ,6 29 Krew pępowinowa ,1 0, , Prolaktyna, miu/l Grupa Wiek (lata) n Mediana Dziewczynki Chłopcy Grupa mieszana Krew pępowinowa Środkowe 95% ,1 0, , Krew pępowinowa ,1 0, , Krew pępowinowa ,1 0, , Powyższe wartości należy traktować jako orientacyjne. Każde laboratorium powinno wyznaczyć własne zakresy referencyjne. 18 IMMULITE 2000 Prolactin (PIEL2KPR-6 {22}, )

19 Ograniczenia Przeciwciała heterofilne obecne w surowicy ludzkiej mogą wchodzić w reakcję z immunoglobulinami będącymi reagentami testu immunologicznego, wpływając na przebieg oznaczenia in vitro. [Porównaj: Boscato L.M., Stuart M.C.: Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays Przeciwciała heterofilne - problem wszystkich testów immunologicznych. Clin Chem 1988:34: ] Wpływ przeciwciał heterofilnych może ujawnić się w oznaczeniach wykonywanych w surowicy osób mających ciągły kontakt ze zwierzętami lub zwierzęcymi produktami krwiopochodnymi, stanowiąc potencjalną przyczynę błędnych wyników. W teście ryzyko interferencji przeciwciał heterofilnych zostało zminimalizowane przez odpowiedni dobór proporcji odczynników, tym niemniej interferencja taka może potencjalnie nastąpić w rzadkich przypadkach. W postępowaniu diagnostycznym wyniki uzyskane tą metodą powinny być z zasady interpretowane w połączeniu z badaniem klinicznym pacjenta, jego historią choroby oraz innymi okolicznościami. Parametry testu Dane charakteryzujące test przedstawiono w tabelach i wykresach. Wyniki podano w ng/ml. (O ile nie podano inaczej, wszystkie wyniki dotyczą surowicy, a próbki pobierano do probówek bez bariery żelowej i substancji przyspieszających krzepnięcie.) Przelicznik: ng/ml 21,2 miu/l [3rd IS 84/500] Zakres raportowania: 0,5 150 ng/ml (10, miu/l) wobec 3 rd IS 84/500 Czułość analityczna: 0,5 ng/ml (10,6 miu/l) Efekt wysokiej dawki Hook Effect: Nie występuje do stężenia ng/ml ( miu/l) Precyzja: Próbki testowano przez okres 20 dni w duplikatach, dwa razy dziennie, co dało w sumie 40 serii i 80 powtórzeń (patrz Tabela Precyzji). Liniowość: Oznaczano próbki poddane kolejnym rozcieńczeniom (patrz: Tabela Liniowość). Odzysk: Oznaczano próbki surowic wzbogacane w stosunku objętościowym 1 do 19 roztworami prolaktyny o stężeniach, kolejno: 190, 356, 928 i 1740 ng/ml (patrz: Tabela Odzysk). Specyficzność: Przeciwciało jest wysoce specyficzne w stosunku do prolaktyny (patrz: Tabela Specyficzność). Rodzaje pobieranego materiału: Ograniczone porównanie przeprowadzono w grupie ochotników z laboratorium. Wyniki w surowicy i osoczu heparynowym były porównywalne. Bilirubina: Obecność bilirubiny w stężeniu do 200 mg/l nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Hemoliza: Obecność hemoglobiny w stężeniu do 375 mg/dl nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Lipemia: Obecność trójglicerydów w stężeniu do 3000 mg/dl nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Porównanie metod: Wyniki porównywano z wynikami uzyskanymi przy zastosowaniu testu Immulite Prolaktyna w grupie 148 próbek (zakres stężeń: ng/ml, porównaj wykres). Otrzymano następujące równanie regresji liniowej: (IML 2000) = 1,00 (IML) 0,96 ng/ml r = 0,988 Średnie: 44 ng/ml (IMMULITE 2000) 45 ng/ml (IMMULITE) Pomoc techniczna i konsultacje Krajowy Dystrybutor udziela wszechstronnej pomocy technicznej. System Kontroli Jakości Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. posiada Certyfikat Jakości ISO 13485:2003. IMMULITE 2000 Prolactin (PIEL2KPR-6 {22}, ) 19

20 IMMULITE is a trademark of Siemens Healthcare Diagnostics Siemens Healthcare Diagnostics. All rights reserved. Made in: UK Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. Glyn Rhonwy, Llanberis, Gwynedd LL55 4EL United Kingdom PIEL2KPR 6 {22} Changes in this Edition: cc#eu22593: 1) Under Warnings and Precautions, added caution statement, required GHS pictograms/signal words/hazard and precautionary codes and statements, offending chemicals and sources. 2) Changed Origin: UK to Made in: UK. 3) Updated the manufacturer address to include Glyn Rhonwy. 4) In Understanding the Symbols, revised the symbol for catalog number, added a GHS pictogram for health hazard, and updated existing symbols with GHS pictograms and terminology for exclamation mark, corrosion, skull and crossbones, and environment. Understanding the Symbols Understanding the Symbols En English Vysvětlivky symbolů Επεξήγηση των συμβόλων Znaczenie symboli Cz Česky El Ελληνικά Pl Polski The following symbols may appear on the product labeling: / Na štítku výrobku mohou být uvedeny následující symboly: / Τα ακόλουθα σύμβολα ενδέχεται να εμφανίζονται στην επισήμανση του προϊόντος: / Na etykietach produktu mogą pojawiać się poniższe symbole: Symbol Definition En: In vitro diagnostic medical device Cz: Zdravotnický prostředek pro in vitro diagnostiku El: In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή Pl: Sprzęt do medycznej diagnostyki in vitro En: Catalog Number Cz: Katalogové číslo El: Αριθμός καταλόγου Pl: Numer katalogowy En: Manufacturer Cz: Výrobce El: Κατασκευαστής Pl: Producent En: Authorized Representative in the European Community Cz: Autorizované zastoupení v Evropské unii El: Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα Pl: Autoryzowany przedstawiciel w Unii Europejskiej En: CE Mark Cz: CE značka El: Σήμανση CE Pl: Znak CE En: CE Mark with identification number of notified body Cz: CE značka s identifikačním číslem notifikovaného orgánu El: Σήμανση CE με αριθμό αναγνώρισης του φορέα πιστοποίησης Pl: Znak CE z numerem identyfikacyjnym jednostki notyfikowanej En: Consult instructions for use Cz: Postupujte podle návodu k použití El: Συμβουλευτείτε τις οδηγίες λειτουργίας Pl: Zapoznać się z instrukcją użycia En: Caution! Potential Biohazard Cz: Pozor! Potenciální biohazard El: Πρoσοχή! Δυνητικός βιολογικός κίνδυνος Pl: Uwaga! Potencjalne zagrożenie biologiczne 20 IMMULITE 2000 Prolactin (PIEL2KPR-6 {22}, )

21 Symbol Definition En: Temperature limitation (2 8 C) Cz: Teplotní rozsah (2 8 C) El: Περιορισμός θερμοκρασίας (2 8 C) Pl: Zakres temperatury (2 8 C) En: Upper limit of temperature ( -20 C) Cz: Horní teplotní limit ( -20 C) El: Ανώτερο όριο θερμοκρασίας ( -20 C) Pl: Górny zakres temperatury ( -20 C) En: Lower limit of temperature ( 2 C) Cz: Spodní teplotní limit ( 2 C) El: Κατώτερο όριο θερμοκρασίας ( 2 C) Pl: Dolny zakres temperatury ( 2 C) En: Do not freeze (> 0 C) Cz: Nezmrazovat (> 0 C) El: Μην καταψυχετε (> 0 C) Pl: Nie zamrażać (> 0 C) En: Do not reuse Cz: Pro jednorázové použití El: Μην κάνετε επαναληπτική χρήση Pl: Nie używać powtórnie Symbol Definition En: Use by Cz: Spotřebujte do El: Ημερομηνία λήξης Pl: Wykorzystać do En: Health Hazard Cz: Zdravotní riziko El: Κίνδυνος για την υγεία Pl: Zagrożenie dla zdrowia En: Exclamation Mark Cz: Vykřičník El: Θαυμαστικό Pl: Wykrzyknik En: Corrosion Cz: Koroze El: Διάβρωση Pl: Działanie żrące En: Skull and Crossbones Cz: Lebka se zkříženými hnáty El: Νεκροκεφαλή με διασταυρούμενα οστά Pl: Czaszka i skrzyżowane piszczele En: Environment Cz: Prostředí El: Περιβάλλον Pl: Środowisko En: Keep away from sunlight Cz: Chraňte před slunečním světlem El: Διατηρείτε μακριά από το ηλιακό φως Pl: Chronić przed światłem słonecznym BEAD PACK En: Bead Pack Cz: Zásobník s kuličkami El: Συσκευασία σφαιριδίων Pl: Pojemnik z kulkami LOT En: Batch code Cz: Šarže El: Κωδικός παρτίδας Pl: Kod serii TEST UNIT En: Test Unit Cz: Testovací Jednotky El: Μονάδες ανάλυσης Pl: Jednostki testowe En: Contains sufficient for (n) tests Cz: Dostatečné množství pro (n) testů El: Περιεχόμενο επαρκές για (n) εξετάσεις Pl: Zawartość wystarczająca na (n) testów REAG WEDGE REAG WEDGE A REAG WEDGE B REAG WEDGE D En: Reagent Wedge Cz: Reagencie El: Δοχείο Αντιδραστηρίων Pl: Klin odczynnikowy En: Date format (year-month) Cz: Formát data (rok-měsíc) El: Μορφή ημερομηνίας (έτος-μήνας) Pl: Zapis daty (rok-miesiąc) ADJUSTOR En: Adjustor Cz: Kalibrátor El: Ρυθμιστής Pl: Kalibrator IMMULITE 2000 Prolactin (PIEL2KPR-6 {22}, ) 21