PAPP-A. For use on IMMULITE 2000 systems

Transcript

1 PAPP-A For use on IMMULITE 2000 systems

2 IMMULITE 2000 PAPP-A English Intended Use: For in vitro diagnostic use with the IMMULITE 2000 Systems Analyzers for the quantitative measurement of pregnancy-associated plasma protein A (PAPP-A) in serum or heparinized plasma. Catalog Number: L2KPC2 (200 tests) Test Code: PAA Color: Brown Summary and Explanation Pregnancy-associated plasma protein (PAPP-A) is a large molecular weight placenta-derived glycoprotein. 1 During pregnancy it is produced in high concentrations by the trophoblast and released into maternal circulation. PAPP-A levels in maternal serum rise steadily with gestational age, most noticeably during the last part of pregancy. 2 The functional significance of PAPP-A is unclear. However, some studies suggest that reduced PAPP-A concentrations in pregnancy are associated with chromosomal abnormalities in the fetus. 3 Maternal serum PAPP-A assessment, between 11 and 14 weeks of pregnancy, is reported to have significant utility in screening for Down syndrome and other chromosomal anomalies. A combination of maternal age-related risk, free -HCG and fetal nuchal translucency (NT) measurements might substantially increase the efficiency of prenatal screening compared to second-trimester screening; using this approach, various investigators have reported detection rates for Down syndrome of 85 to 90 percent at a 5 percent false-positive rate. 6,7 Principle of the Procedure IMMULITE 2000 PAPP-A is a solid-phase, enzyme-labeled chemiluminescent immunometric assay. Incubation Cycles: 1 30 minutes. Specimen Collection The use of an ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples. Hemolyzed samples may indicate mistreatment of a specimen before receipt by the laboratory; hence the results should be interpreted with caution. EDTA plasma is not suitable for use. Centrifuging serum samples before a complete clot forms may result in the presence of fibrin. To prevent erroneous results due to the presence of fibrin, ensure that complete clot formation has taken place prior to centrifugation of samples. Some samples, particularly those from patients receiving anticoagulant therapy, may require increased clotting time. Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE 2000 PAPP-A has not been tested with all possible variations of tube types. Consult the section on Alternate Sample Types for details on tubes that have been tested. Volume Required: 10 µl serum or plasma. Storage: 24 hours at 2 8 C or 2 months at 20 C. 2 IMMULITE 2000 PAPP-A (PIEL2KPC-5 {29}, )

3 Warnings and Precautions For in vitro diagnostic use. CAUTION! POTENTIAL BIOHAZARD Contains human source material. Each donation of human blood or blood component was tested by FDA-approved methods for the presence of antibodies to human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) and type 2 (HIV-2) as well as for hepatitis B surface antigen (HBsAg) and antibody to hepatitis C virus (HCV). The test results were negative (not repeatedly reactive). No test offers complete assurance that these or other infectious agents are absent; this material should be handled using good laboratory practices and universal precautions CAUTION: This device contains material of animal origin and should be handled as a potential carrier and transmitter of disease. H412 P273, P501 Harmful to aquatic life with long lasting effects. Avoid release to the environment. Dispose of contents and container in accordance with all local, regional, and national regulations. Contains: 2-methyl-2Hisothiazol-3-one; PAPP-A Adjustors Reagents: Store at 2 8 C. Dispose of in accordance with applicable laws. Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C. Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert.) Water: Use distilled or deionized water. Materials Supplied Components are a matched set. Labels on the inside box are needed for the assay. PAPP-A Bead Pack (L2PC12) With barcode. 200 beads, coated with monoclonal murine anti-papp-a. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KPC2: 1 pack PAPP-A Reagent Wedge (L2PCA2) With barcode ml alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to monoclonal murine anti- PAPP-A in buffer. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KPC2: 1 wedge Before use, tear off the top of the label at the perforations, without damaging the barcode. Remove the foil seal from the top of wedge; snap the sliding cover down into the ramps on the reagent lid. PAPP-A Adjustors (LPCL, LPCH) Two vials (Low and High) of lyophilized PAPP-A, in a nonhuman serum matrix. Reconstitute each vial with 2.0 ml distilled or deionized water. Mix by gentle swirling or inversion until the lyophilized material is fully dissolved. Stable at 2 8 C for 30 days after reconstitution, or for 3 months (aliquotted) at 20 C. L2KPC2: 1 set Before making an adjustment, place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes so that the barcodes can be read by the on-board reader. Kit Components Supplied Separately Multi-Diluent 2 (L2M2Z, L2M2Z4) For the on-board dilution of patient samples. One vial, concentrated (ready-touse), nonhuman protein/buffer matrix, with preservative. Storage: 30 days (after opening) at 2 8 C or 6 months (aliquotted) at 20 C. L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml Barcode labels are provided for use with the diluent. Before use, place an appropriate label on a mm test tube, so that the barcodes can be read by the on-board reader. L2M2Z: 3 labels L2M2Z4: 5 labels L2SUBM: Chemiluminescent Substrate L2PWSM: Probe Wash L2KPM: Probe Cleaning Kit LRXT: Reaction Tubes (disposable) IMMULITE 2000 PAPP-A (PIEL2KPC-5 {29}, ) 3

4 L2ZT: 250 Sample Diluent Test Tubes ( mm) L2ZC: 250 Sample Diluent Tube Caps LPCCM: Bi-level control module in a nonhuman serum matrix. Also Required Distilled or deionized water; test tubes; controls. Assay Procedure Note that for optimal performance, it is important to perform all routine maintenance procedures as defined in the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual. See the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual for: preparation, setup, dilutions, adjustment, assay and quality control procedures. Recommended Adjustment Interval: 4 weeks. Quality Control Samples: Use controls or sample pools with at least two levels (low and high) of PAPP-A. Expected Values Each laboratory should establish its own reference ranges. Limitation Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings. Performance Data See Tables and Graphs for data representative of the assay's performance. Results are expressed in miu/ml. (Unless otherwise noted, all were generated on serum samples collected in tubes without gel barriers or clot-promoting additives.) Calibration Range: Up to 10 miu/ml The assay is traceable to an internal standard manufactured using qualified materials and measurement procedures. Analytical Sensitivity: miu/ml High-Dose Hook Effect: None up to 115 miu/ml. Precision: Samples were repeatedly assayed in duplicate over the course of several days, for a total of 40 runs and 80 replicates. (See "Precision" table.) Linearity: Samples were assayed under various dilutions. (See "Linearity" table for representative data.) Recovery: Samples spiked 1 to 19 with three PAPP-A solutions (20, 40 and 80 miu/ml) were assayed. (See "Recovery" table for representative data.) Specificity: The antibody is highly specific for PAPP-A. (See "Specificity" table.) Bilirubin: Presence of conjugated and unconjugated bilirubin in concentrations up to 200 mg/l has no effect on results, within the precision of the assay. Hemolysis: Effects of the presence of hemoglobin were evaluated by spiking 10, 20, and 30 µl of a red cell hemolysate (corresponding to 157, 314, and 550 mg/dl hemoglobin) into 1 ml alliquots of 5 patient samples. Hemoglobin in concentrations up to 157 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Higher levels of hemoglobin may cause slight elevations in results (See "Hemoglobin" table). Lipemia: Presence of triglycerides in concentrations up to 3,000 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Alternate Sample Type: To assess the effect of alternate sample types, blood was collected from 20 volunteers into plain and heparinized tubes. Equal volumes of the matched samples were spiked with various concentrations of PAPP-A, to obtain values throughout the calibration 4 IMMULITE 2000 PAPP-A (PIEL2KPC-5 {29}, )

5 range of the assay, and then assayed by the IMMULITE 2000 PAPP-A procedure. (Heparin) = 1.08 (Serum) miu/ml r = Means: 4.72 miu/ml (Serum) 5.18 miu/ml (Heparin) In another study, blood was collected from 24 volunteers into plain and EDTA tubes. Equal volumes of the matched samples were spiked with various concentrations of PAPP-A, to obtain values throughout the calibration range of the assay, and then assayed by the IMMULITE 2000 PAPP-A procedure. (EDTA) = 1.21 (Serum) miu/ml r = Means: 3.65 miu/ml (Serum) 4.43 miu/ml (EDTA) EDTA plasma is not suitable for use. Method Comparison 1: The assay was compared to a commercially available assay for PAPP-A (Kit A) on 152 patient samples. (Concentration range: approximately 0.3 to 10 miu/ml. See graph 1) By linear regression: (IML 2000) = 0.99 (Kit A) miu/ml r = Means: 3.82 miu/ml (IMMULITE 2000) 3.36 miu/ml (Kit A) Method Comparison 2: The assay was compared to IMMULITE PAPP-A on 283 samples. (Concentration range: approximately 0.3 to 10 miu/ml. See graph.2) By linear regression: (IML 2000) = 1.03 (IML) 0.06 miu/ml r = Means: 3.70 miu/ml (IMMULITE 2000) 3.64 miu/ml (IMMULITE) References 1) Lin, T-M, et al. Characterization of four human pregnancy-associated plasma proteins. Am J Obstet Gynecol 1974; 118: ). Lin, T- M, et al. Measurment of pregnancy-associated plasma proteins during human gestation. J Clin Invest 1974; 54: ) Pederson, J. F. et al. Serum levels of human placental lactogen, pregnancy-associated plasma protein A and endometrial secretory PP14 in first trimester of diabetic pregnancy. Acta Obstet Gynecol Scand 1998; 77: ) Wald NJ, et al. Serum screening for Down's syndrome between 8 and 14 weeks of pregnancy. Br J Obstet Gynaecol 1996; 103: ) National Committee for Clinical Laboratory Standards. Procedures for the collection of diagnostic blood specimens by venipuncture; approved standard. 4th ed. NCCLS Document H3-A4, Wayne, PA: NCCLS, ) Bindra R, et al. One-stop clinic for assessment of risk for trisomy 21 at weeks: a prospective study of 15,030 pregnancies. Ultrasound Obstet Gynecol 2002;3: ) Wald NJ, Hackshaw AK. Advances in antenatal screening for Down syndrome. Baillieres Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol 2000;14(4): ) Centers for Disease Control. Update: Universal precautions for prevention of transmission of human immunodeficiency virus, hepatitis B virus and other bloodborne pathogens in healthcare settings. MMWR, 1988;37:377 82, ) Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). Protection of Laboratory Workers From Occupationally Acquired Infections; Approved Guideline - Third Edition. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; NCCLS Document M29-A3. 10) Federal Occupational Safety and Health Administration, Bloodborne Pathogens Standard, 29 CFR Technical Assistance Available outside the United States only. For technical assistance, contact your National Distributor. The Quality System of Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. is certified to ISO 13485:2003. Tables and Graphs Precison (miu/ml) Within-Run 1 Total 2 Mean 3 SD 4 CV 5 SD CV % % % % % % % % % % % % Česky. 1 V rámci stanovení, 2 Celkem, 3 Střední hodnota, 4 Směrodatná odchylka, 5 Variační koeficient. Ελληνικά. 1 Κατά την ίδια περίοδο, 2 Συνολικά, 3 Μέσος όρος, 4 SD, 5 CV. Polski. 1 W serii, 2 Całość, 3 Średnie, 4 SD, 5 CV. IMMULITE 2000 PAPP-A (PIEL2KPC-5 {29}, ) 5

6 Linearity (miu/ml) Dilution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E in in % 2 in % 1 in % 2 8 in in % 2 in % 1 in % 3 8 in in % 2 in % 1 in % 4 8 in in % 2 in % 1 in % 5 8 in in % 2 in % 1 in % Česky. 1 Ředění, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 % Naměřená / Očekávaná, 5 8 v 8. Ελληνικά. 1 Αραίωση, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E, 5 8 στα 8. Polski. 1 Rozcieńczenie, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O, 5 8 w 8. Recovery (miu/ml) Solution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E 4 1 ND A % B % C % A % B % C % A % B % C % A % B % C % A % B % C % Česky. 1 Roztok, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 Naměřená / Očekávaná. Ελληνικά. 1 ιάλυμα, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E. Polski. 1 Roztwór, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O. Specificity Compound 1 Amount Added 2 % Cross reactivity 3 Alpha2-Macroglobulin 350 mg/dl ND Angiotensinogen 0.3 µmol/l ND Angiotensin pg/ml ND Angiotensin pg/ml ND SHBG 170 nmol/l ND HCG 60,000 miu/ml ND AFP 400 IU/mL ND Prolactin 200 ng/ml ND ND: Not detectable. 4 Česky. 1 Sloučenina, 2 Přidané množství, 3 % Zkřížená reaktivita, 4 ND: nezjistitelné. Ελληνικά. 1 Μείγμα, 2 Προστέθηκαν, 3 % ιασταυρ.αντίδραση, 4 ND: Μη ανιχνεύσιμη ποσότητα. Polski. 1 Składnik, 2 Ilość dodana, 3 % reaktywności Krzyżowej, 4 ND: Nieoznaczlne. 6 IMMULITE 2000 PAPP-A (PIEL2KPC-5 {29}, )

7 Hemolysis Hemoglobin Added mg/dl 1 Observed 2 Expected 3 % O/E % % % % % % % % % % % % % % % Česky. 1 Přidaný hemoglobin, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 Naměřená / Očekávaná. Ελληνικά. 1 Αιμοσφαιρίνη Προστέθηκαν, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E. Polski. 1 Hemoglobiny Ilość dodana, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O. Method Comparison 1 IMMULITE 2000 PAPP-A Kit A, miu/ml (IML 2000) = 0.99 (Kit A) miu/ml r = Method Comparison 2 IMMULITE 2000 PAPP-A IMMULITE PAPP-A, miu/ml (IML 2000) = 1.03 (IML) 0.06 miu/ml r = English. PAPP-A. Česky. PAPP-A. Ελληνικά. PAPP-A. Polski. PAPP-A. Česky IMMULITE 2000 PAPP-A Použití: Pro in vitro diagnostické použití na analyzátorech IMMULITE 2000 ke stanovení koncentrace těhotenského plazma proteinu A (PAPP-A) v séru nebo heparinizované plazmě. Katalogové číslo: L2KPC2 (200 stanovení) Kód metody: PAA Barva: Hnědá Shrnutí a vysvětlení Těhotenský plazmatický protein (PAPP-A) je glykoprotein o vysoké molekulové hmotnosti pocházející z placenty. 1 Během těhotenství je tvořen trofoblasty ve vysoké koncentraci a je uvolňován do oběhu matky. Hladina PAPP-A v séru matky během těhotenství roste, nejvíce pak v jeho závěru. 2 Funkční význam tohoto proteinu není znám, ale některé studie prokázaly, že pokles koncentrace PAPP-A během těhotenství souvisí s chromozomálními abnormalitami plodu. 3 Stanovení PAPP-A v séru matky mezi 11 a 14 týdnem těhotenství představuje významnou pomůcku při screeningu Downova syndromu a dalších chromozomálních abnormalit. V kombinací IMMULITE 2000 PAPP-A (PIEL2KPC-5 {29}, ) 7

8 s vyhodnocením rizika spojeného s věkem matky, stanovením volného -HCG a měřením šíjového projasnění u plodu (NT), může podstatně zvýšit účinnost prenatálního screeningu ve srovnání se screeningem v druhém trimestru. Různí badatelé uvádějí, že po aplikaci tohoto přístupu byl Downův syndrom odhalen v 85 až 90 procentech případů při 5% míře falešně pozitivních výsledků. 6,7 Princip Stanovení PAPP-A na analyzátorech IMMULITE 2000 je enzymem značené chemiluminiscenční imunometrické stanovení na pevné fázi. Inkubační cykly: 1 30 minut. Odebírání vzorků K úpravě lipemických vzorků se doporučuje použití ultracentrifugy. Hemolyzované vzorky můžou být známkou nesprávného zacházení se vzorkem ještě před přijetím do laboratoře; proto by výsledky měly být interpretovány s obezřetností. EDTA plazma není pro toto stanovení vhodná. Centrifugací vzorků séra ještě před úplným vysrážením může mít za následek přítomnost fibrinu. Chybným výsledkům způsobeným přítomností fibrinu lze zamezit úplným vysrážením vzorků před jejich centrifugací. Některé vzorky, zejména od pacientů podstupujících antikoagulační léčbu, může srážlivost vyžadovat více času. Použití zkumavek pro odběr krve od různých výrobců může přinášet rozličné hodnoty v závislosti na materiálech a přísadách včetně gelových nebo fyzických bariér, aktivátorů sraženin a/nebo antikoagulačních činidel. Stanovení PAPP-A na analyzátorech IMMULITE 2000 nebylo testováno se všemi možnými variantami jednotlivých typů zkumavek. Informace o testovaných zkumavkách najdete v části o alternativních typech vzorků Potřebný objem vzorku: 10 μl séra nebo plazmy. Skladování: 24 hodin při teplotě 2 8 C nebo 2 měsíce při 20 C. Upozornění a bezpečnostní opatření Určeno pro in vitro diagnostické použití. POZOR! POTENCIÁLNÍ BIOHAZARD Obsahuje materiál lidského původu. Každé darování krve nebo jejích složek bylo testováno metodami schválenými FDA na přítomnost protilátek proti viru lidské imunodeficience typu 1 (HIV-1) a typu 2 (HIV-2) a také na povrchový antigen viru hepatitidy B (HBsAg) a protilátky proti viru hepatitidy C (HCV). Výsledky testu byly negativní (opakovaně nereaktivní). Žádný test však není absolutní zárukou nepřítomnosti uvedených nebo jiných infekčních zárodků; s materiálem proto zacházejte podle zásad správné laboratorní praxe a dbejte obecných bezpečnostních opatření UPOZORNĚNÍ: Souprava obsahuje material živočišného původu, se kterým je třeba zacházet jako s potenciálním nosičem a přenašečem nemocí. H412 P273, P501 Škodlivý pro vodní organismy, s dlouhodobými účinky. Zabraňte uvolnění do životního prostředí. Odstraňte obsah a obal v souladu se všemi místními, regionálními a národními předpisy. Obsahuje: 2-methyl-2Hisothiazol-3-jedna; PAPP-A kalibrátory Reagencie: Skladujte při teplotě 2 8 C. Likvidujte v souladu s platnými předpisy. Řiďte se obecnými pravidly bezpečnosti práce a se všemi komponenty nakládejte, jako by byly potenciálně infekční. Zdrojové materiály získané z lidské krve byly testovány a shledány nereaktivní na syfilis, na protilátky proti HIV 1 a 2, na povrchový antigen hepatitidy typu B (HBsAg), a na protilátky proti hepatitidě typu C. Chemiluminiscenční substrát: Vyvarujte se kontaminace a nevystavujte přímému slunečnímu světlu. (Viz připojený letáček.) Voda: Použijte destilovanou nebo deionizovanou vodu. 8 IMMULITE 2000 PAPP-A (PIEL2KPC-5 {29}, )

9 Dodaný materiál Komponenty představují ucelenou sadu. Pro stanovení jsou zapotřebí štítky s čárovým kódem na krabici. PAPP-A zásobník s kuličkami (L2PC12) Opatřeno čárovým kódem. 200 kuliček potažených monoklonální myší anti- PAPP-A. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KPC2: 1 balení PAPP-A reagencie (L2PCA2) Opatřeno čárovým kódem. 11,5 ml alkalické fosfatázy (z telecího střeva) konjugované s monoklonální myší anti- PAPP-A v pufru. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KPC2: 1 nádobka Před použitím utrhněte vršek štítku v perforovaném místě, ale nepoškoďte čárový kód. Z vrchu nádobky odstraňte uzavírací fólii; posuvný uzávěr zaklapněte do ramp na víčku reagencie. PAPP-A kalibrátory (LPCL, LPCH) Dvě ampulky s nízkou a vysokou koncentrací lyofilizovaného PAPP-A v nehumánní sérové matrici. Každou ampuli rozpusťte přidáním 2,0 ml destilované nebo deionizované vody. Míchejte opatrným kroužením nebo překlápěním až do úplného rozpuštění lyofilizovaného materiálu. Stabilní po rozpuštění 30 dní při teplotě 2 8 C nebo 3 měsíce při 20 C rozdělené na alikvotní části. L2KPC2: 1 sada Před adjustací nalepte na testovací zkumavky příslušné alikvotní štítky (dodané se soupravou) tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. Materiál dodávaný zvlášť Multidiluent 2 (L2M2Z, L2M2Z4) Určeno k automatickému ředění vzorků pacientů analyzátorem. Jedna ampulka koncentrované (připravené k použití) bílkovinové/pufrované matrice nehumánního původu s konzervačním prostředkem. Stabilní při teplotě 2 8 C 30 dnů po otevření nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při 20 C. L2M2Z: 25 ml. L2M2Z4: 55 ml. Štítky s čárovými kódy jsou určeny pro diluent. Před použitím nalepte příslušný štítek na testovací zkumavku mm tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. L2M2Z: 3 štítky L2M2Z4: 5 štítků L2SUBM: Chemiluminiscenční substrát L2PWSM: Promývací roztok L2KPM: Čistící roztok na jehly LRXT: Reakční zkumavky (na jedno použití) L2ZT: 250 testovacích zkumavek na diluent vzorků ( mm) L2ZC: 250 uzávěrů na testovací zkumavky na diluent vzorků LPCCM: Dvojúrovňový kontrolní modul v sérové matrici nehumánního původu. Dále potřebujete: Destilovanou nebo deionizovanou vodu; testovací zkumavky, kontroly. Postup stanovení K dosažení optimálního výkonu je důležité provádět veškerou pravidelnou údržbu stanovenou v manuálu k analyzátorům IMMULITE V manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000 najdete postupy: přípravy, nastavení, ředění, adjustace, stanovení vzorků a kontrol. Doporučený interval mezi adjustacemi: 4 týdny. Vzorky ke kontrole kvality: Použijte kontrolní vzorky nebo směsný vzorek s alespoň dvěma koncentracemi PAPP-A (nízkou a vysokou). Očekávané hodnoty Každá laboratoř by si měla stanovit svoje vlastní referenční rozmezí. Omezení Heterofilní protilátky v lidském séru mohou reagovat s imunoglobuliny obsaženými v komponentech soupravy a způsobit interference s in vitro imunologickým stanovením. [Viz Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Vzorky pacientů rutinně vystavených kontaktu se zvířaty nebo produkty zvířecího séra mohou vykázat tento typ interference a potenciálně způsobit anomální výsledky. Tyto IMMULITE 2000 PAPP-A (PIEL2KPC-5 {29}, ) 9

10 reagencie byly vyvinuty tak, aby bylo riziko interference minimalizováno; nicméně případné interakce mezi ojedinělými séry a komponenty testu se můžou vyskytnout. Pro diagnostické účely by se výsledky tohoto stanovení měly vždy používat v kombinaci s klinickými zkouškami, anamnézou pacienta a ostatními nálezy. Znaky metody Reprezentativní výsledky stanovení najdete v části Tabulky a grafy. Výsledky se udávají v miu/ml. (Pokud není uvedeno jinak, všechny výsledky byly získány na vzorcích séra odebraných do zkumavek bez gelových separátorů nebo přísad podporujících srážlivost.) Kalibrační rozsah: Do 10 miu/ml Souprava má návaznost na mezinárodní standard vyrobený s použitím schválených materiálů a měřících procesů. Analytická citlivost: 0,025 miu/ml High-Dose Hook Effect: Do 115 miu/ml žádný. Přesnost: Vzorky byly opakovaně stanovovány dvojmo v průběhu několika dní, celkem 40 cyklů a 80 replikátů. (Viz tabulka Přesnost.) Linearita: Stanovení vzorků bylo provedeno při různém ředění. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce "Linearita".) Zpětná výtěžnost: Bylo provedeno stanovení vzorků s přídavkem tří roztoků PAPP-A (20, 40 a 80 miu/ml) v poměru 1:19. (Reprezentativní údaje najdete v tabulce "Zpětná výtěžnost".) Specificita: Protilátka je silně specifická proti PAPP-A. (Viz tabulka Specificita.) Bilirubin: Přítomnost konjugovaného a nekonjugovaného bilirubinu v koncentracích do 200 mg/l nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Hemolýza: Účinek přítomnosti hemoglobinu byl vyhodnocen přidáním 10, 20 a 30 µl hemolyzátu červených krvinek (odpovídající 157, 314 a 550 mg/dl hemoglobinu) do rozpipetovaných vzorků po 1 ml od 5 pacientů. Přítomnost hemoglobinu v koncentracích do 157 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Vyšší koncentrace hemoglobinu může způsobit mírně zvýšené výsledky. (Viz tabulka "Hemoglobin"). Lipémie: Přítomnost triglyceridů v koncentracích do mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Alternativní typ vzorku: K určení vlivu použití alternativních typů vzorků pro toto stanovení jsme odebrali krev 20 dobrovolníkům do obyčejných a heparinizovaných zkumavek. Abychom získali hodnoty v rámci celého kalibračního rozsahu tohoto stanovení, přidali jsme do úměrných objemů odpovídajících vzorků PAPP-A různých koncentrací. Vzorky jsme následně stanovili metodou PAPP-A na analyzátorech IMMULITE (Heparin) = 1,08 (Sérum) + 0,08 miu/ml r = 0,996 Střední hodnoty: 4,72 miu/ml (Sérum) 5,18 miu/ml (Heparin) V další studii byly odebrány vzorky od 24 dobrovolníků do obyčejných a EDTA zkumavek. Abychom získali hodnoty v rámci celého kalibračního rozsahu tohoto stanovení, přidali jsme do úměrných objemů odpovídajících vzorků PAPP-A různých koncentrací. Vzorky jsme následně stanovili metodou PAPP-A na analyzátorech IMMULITE (EDTA) = 1,21 (Sérum) + 0,02 miu/ml r = 0,995 Střední hodnoty: 3,65 miu/ml (Sérum) 4,43 miu/ml (EDTA) Použití EDTA plazmy není pro toto stanovení vhodné. Srovnání metody 1: Stanovení bylo porovnáno s komerčně dostupným stanovením PAPP-A (Kit A) na 152 vzorcích pacientů. (Koncentrační rozsah: přibližně 0,3 do 10 miu/ml. Viz graf.1) Podle lineární regrese: (IML 2000) = 0,99 (Kit A) + 0,5 miu/ml r = 0,973 Střední hodnoty: 3,82 miu/ml (IMMULITE 2000) 3,36 miu/ml (Kit A) 10 IMMULITE 2000 PAPP-A (PIEL2KPC-5 {29}, )

11 Srovnání metody 2: Stanovení bylo rovněž porovnáno se stanovením PAPP-A analyzátoru IMMULITE společnosti na 283 vzorcích pacientů. (Koncentrační rozsah: přibližně 0,3 do 10 miu/ml. Viz graf.2) Podle lineární regrese: (IML 2000) = 1,03 (IML) 0,06 miu/ml r = 0,995 Střední hodnoty: 3,70 miu/ml (IMMULITE 2000) 3,64 miu/ml (IMMULITE) Technická Podpora Pro technickou podporu kontaktujte vašeho národního distributora. Systém kontroly jakosti společnosti Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. je certifikovaný podle ISO 13485:2003. Ελληνικά IMMULITE 2000 PAPP-A Ενδεδειγμένη χρήση: Για in vitro διαγνωστική χρήση με τα συστήματα αναλυτών IMMULITE 2000 για τον ποσοτικό προσδιορισμό της σχετικής με την κύηση πρωτεΐνης πλάσματος Α (PAPP-A) στον ορό ή το ηπαρινισμένο πλάσμα. Αριθμός καταλόγου: L2KPC2 (200 εξετάσεις) Κωδικός εξέτασης: PAA Χρώμα: Καφέ Περίληψη και επεξήγηση Η σχετική με την κύηση πρωτεΐνη πλάσματος (PAPP-A) είναι μια γλυκοπρωτεΐνη με μεγάλο μοριακό βάρος που προέρχεται από τον πλακούντα. 1 Κατά την κύηση, παράγεται σε μεγάλες ποσότητες από την τροφοβλάστη και εκκρίνεται στο κυκλοφορικό σύστημα της μητέρας. Τα επίπεδα της PAPP-A στον ορό της μητέρας αυξάνονται συνεχώς κατά την κύηση και κυρίως κατά την τελευταία περίοδο αυτής. 2 Η λειτουργική σημασία της PAPP-A δεν είναι σαφής. Ωστόσο, ορισμένες μελέτες υποστηρίζουν ότι οι μειωμένες συγκεντρώσεις PAPP-A κατά την κύηση συνδέονται με χρωμοσωμικές ανωμαλίες στο έμβρυο. 3 Η μέτρηση της PAPP-A στον ορό της μητέρας μεταξύ της 11 ης και της 14 ης εβδομάδας της κύησης θεωρείται ιδιαίτερα χρήσιμη στη διάγνωση του συνδρόμου Down και άλλων χρωμοσωμικών ανωμαλιών. Ο συνδυασμός της ηλικίας της μητέρας, της ελεύθερης -HCG και των μετρήσεων αυχενικής ημιδιαφάνειας (NT) του εμβρύου μπορούν να αυξήσουν σημαντικά τις επιδόσεις της προγεννητικής εξέτασης σε σύγκριση με αυτή του δευτέρου τριμήνου. Με χρήση αυτής της προσέγγισης, διάφοροι ερευνητές έχουν αναφέρει τιμές εντοπισμού του συνδρόμου Down 85 έως 90 τοις εκατό με όριο λανθασμένου θετικού αποτελέσματος 5 τοις εκατό. 6,7 Αρχή της διαδικασίας Η IMMULITE 2000 PAPP-A είναι μια ξηρής φάσης, ενζυμική, χημειοφωταυγής, ανοσομετρική ανάλυση. Κύκλοι επώασης: 1 x 30 λεπτά. Συλλογή δειγμάτων Συνιστάται η χρήση της υπερφυγοκέντρου για να καθαριστούν τα λιπιδαιμικά δείγματα. Αιμολυμένα δείγματα μπορεί να υποδηλώνουν κακή μεταχείριση του δείγματος πριν την παραλαβή του από το εργαστήριο και τα αποτελέσματα πρέπει να ερμηνεύονται με προσοχή. Το EDTA πλάσμα δεν είναι κατάλληλο για χρήση. Η φυγοκέντριση των δειγμάτων ορού πριν την πλήρη πήξη μπορεί να έχει ως αποτέλεσμα τη δημιουργία θρόμβων. Για να αποφευχθούν λανθασμένα αποτελέσματα εξαιτίας της παρουσίας θρόμβων, βεβαιωθείτε ότι πριν τη φυγοκέντριση, το αίμα έχει πήξει πλήρως. Κάποια δείγματα, ιδιαιτέρως αυτά των ασθενών που λαμβάνουν αντιπηκτική θεραπεία, ίσως χρειάζονται μεγαλύτερο χρόνο πήξης. Οι σωλήνες συγκέντρωσης αίματος διαφορετικών εταιρειών μπορεί να δώσουν αποκλίνουσες τιμές, ανάλογα με τα υλικά και τα συμπληρώματα, συμπεριλαμβανομένων των με τζελ ή φυσικών σωληναρίων, των ενεργοποιητών πήξεως και/ή των αντιπηκτικών. Η IMMULITE 2000 PAPP-A δεν έχει δοκιμαστεί με όλους τους τύπους IMMULITE 2000 PAPP-A (PIEL2KPC-5 {29}, ) 11

12 σωληναρίων. Συμβουλευθείτε την παράγραφο για τους εναλλακτικούς τύπους δειγμάτων για περισσότερες πληροφορίες σχετικά με τα σωληνάρια που έχουν δοκιμαστεί. Απαιτούμενος όγκος: 10 µl ορού ή πλάσματος. Φύλαξη: 24 ώρες στους 2 8 C ή 2 μήνες στους 20 C. Προειδοποιήσεις και προφυλάξεις Για in vitro διαγνωστική χρήση. ΠΡΟΣΟΧΗ! ΥΝΗΤΙΚΟΣ ΒΙΟΛΟΓΙΚΟΣ ΚΙΝ ΥΝΟΣ Περιέχει υλικό ανθρώπινης προέλευσης. Κάθε δωρεά ανθρώπινου αίματος ή συστατικού αίματος ελέγχθηκε με μεθόδους εγκεκριμένες από τον FDA για την ύπαρξη αντισωμάτων ενάντια στους ιούς της ανοσοανεπάρκειας του ανθρώπου τύπου 1 (HIV-1) και τύπου 2 (HIV-2), καθώς και για επιφανειακό αντιγόνο της ηπατίτιδας Β (HBsAg) και για αντισώματα ενάντια στον ιό της ηπατίτιδας C (HCV). Τα αποτελέσματα των εξετάσεων ήταν αρνητικά (όχι επανειλημμένα αντιδραστικά). Επειδή καμία εξέταση δεν παρέχει πλήρη διασφάλιση για την απουσία αυτών ή άλλων μολυσματικών παραγόντων, ο χειρισμός αυτού του υλικού θα πρέπει να γίνεται σύμφωνα με τις ορθές εργαστηριακές πρακτικές και γενικές προφυλάξεις ΠΡΟΣΟΧΗ: Η συσκευή αυτή περιέχει υλικό ζωικής προέλευσης και ο χειρισμός της πρέπει να γίνεται ως εάν επρόκειτο περί δυνητικού φορέα και παράγοντα μετάδοσης νόσου. H412 P273, P501 Επιβλαβές για τους υδρόβιους οργανισμούς, με μακροχρόνιες επιπτώσεις. Να αποφεύγεται η ελευθέρωση στο περιβάλλον. Απορρίψτε το περιεχόμενο και τον περιέκτη σε συμμόρφωση με όλους τους τοπικούς, περιφερειακούς και εθνικούς κανονισμούς. Περιέχει: 2-μεθυλ-2Hισοθειαζολ-3-όνη, Ρυθμιστές PAPP-A Αντιδραστήρια: ιατήρηση στους 2 8 C. Απόρριψη σύμφωνα με την ισχύουσα νομοθεσία. Ακολουθήστε τις γενικές προφυλάξεις και χειριστείτε όλα τα συστατικά σαν να ήταν φορείς μολυσματικών παραγόντων. Όλα τα υλικά της μεθόδου που προέρχονται από ανθρώπινο αίμα έχουν ελεγχθεί και βρέθηκαν αρνητικά για σύφιλη, για αντισώματα στον HIV 1 και 2, για επιφανειακά αντιγόνα της ηπατίτιδας Β και για αντισώματα της ηπατίτιδας C. Χημειοφωταυγές υπόστρωμα: Αποφύγετε τη μόλυνση και την έκθεση στο άμεσο ηλιακό φως. (βλ. ένθετο). Νερό: Χρησιμοποιήστε απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό. Υλικά που διατίθενται Τα συστατικά αποτελούν ολοκληρωμένο σετ. Οι ετικέτες στο εσωτερικό του κουτιού είναι απαραίτητες για την ανάλυση. Συσκευασία σφαιριδίων PAPP-A (L2PC12) Με ραβδοκώδικα. 200 σφαιρίδια, με επικάλυψη μονοκλωνικού anti-papp-a ποντικού. Σταθερά στους 2 8 C έως την ημερομηνία λήξεως. L2KPC2: 1 συσκευασία οχείο αντιδραστηρίου PAPP-A (L2PCA2) Με ραβδοκώδικα. 11,5 ml αλκαλικής φωσφατάσης (από βόειο έντερο) συνδεδεμένης με μονοκλωνικά αντισώματα ποντικού anti-papp-a σε ρυθμιστικό διάλυμα. Σταθερό στους 2 8 C έως την ημερομηνία λήξεως. L2KPC2: 1 δοχείο Πριν τη χρήση, σχίστε την πάνω ετικέτα στο σημείο διάτρησης, χωρίς να καταστρέψετε το ραβδοκώδικα. Αφαιρέστε (ξεκολλήστε) προσεκτικά το κάλυμμα από την επάνω επιφάνεια του δοχείου, και πιέστε το κάλυμμα κάτω προς τους κεκλιμένους οδηγούς-ράγες. Ρυθμιστές PAPP-A (LPCL, LPCH) ύο φιαλίδια (χαμηλό και υψηλό), έκαστο, PAPP-A σε μήτρα μη ανθρώπινου ορού. Κάντε ανασύσταση κάθε φιαλίδιου με 2,0 ml απεσταγμένου ή απιονισμένου νερού. Αναμείξτε με απαλές κινήσεις ή με αναστροφή έως ότου το λυοφιλοποιημένο υλικό να διαλυθεί πλήρως. Σταθερά στους 12 IMMULITE 2000 PAPP-A (PIEL2KPC-5 {29}, )

13 2 8 C για 30 μέρες μετά την ανασύσταση ή για 3 μήνες (διαχωρισμένα) στους 20 C. L2KPC2: 1 σετ Πριν κάνετε κάποια ρύθμιση, τοποθετήστε τις κατάλληλες ετικέτες των διαλυμάτων (παρέχονται με το kit) σε δοκιμαστικούς σωλήνες, έτσι ώστε οι ραβδοκώδικες να μπορούν να διαβαστούν από σύστημα του αναλυτή. Συστατικά του Kit που προμηθεύονται ξεχωριστά Πολύ-αραιωτικό 2 (L2M2Z, L2M2Z4) Για την αραίωση των δειγμάτων των ασθενών στο μηχάνημα. Ένα φιαλίδιο, συμπυκνωμένης (έτοιμης για χρήση) μήτρας μη ανθρώπινης πρωτεΐνης/ ρυθμιστικού, με συντηρητικό. Φύλαξη: 30 μέρες (μετά το άνοιγμα) στους 2 8 C ή 6 μήνες (διαχωρισμένα) στους 20 C. L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml Ετικέτες με ραβδοκώδικες παρέχονται για χρήση με το αραιωτικό. Πριν από τη χρήση, τοποθετείστε μια κατάλληλη ετικέτα σε ένα δοκιμαστικό σωλήνα 16 x 100 mm, έτσι ώστε οι ραβδοκώδικες να μπορούν να διαβαστούν από το σύστημα του αναλυτή. L2M2Z: 3 ετικέτες L2M2Z4: 5 ετικέτες L2SUBM: Χημειοφωταυγές υπόστρωμα L2PWSM: Πλυστικό του ανιχνευτή L2KPM: Kit καθαρισμού του ανιχνευτή LRXT: Σωλήνες αντίδρασης (μιας χρήσεως) L2ZT: 250 δοκιμαστικοί σωλήνες για αραίωση του δείγματος (16? 100 mm) L2ZC: 250 καπάκια για σωλήνες αραίωσης δείγματος LPCCM: Μονάδα ελέγχου δύο επιπέδων σε μήτρα μη ανθρώπινου ορού. Απαιτούνται επίσης Απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό, δοκιμαστικοί σωλήνες, δείγματα ελέγχου. ιαδικασία της ανάλυσης Σημειώστε ότι για το βέλτιστο αποτέλεσμα, είναι σημαντικό να ακολουθηθούν όλες οι τυπικές διαδικασίες όπως ορίζονται στο εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE Βλέπε το εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000 για: προετοιμασία, στήσιμο, αραιώσεις, ρυθμίσεις, ανάλυση και διαδικασίες ποιοτικού έλέγχου. Συνιστώμενος χρόνος μεταξύ των ρυθμίσεων: 4 εβδομάδες. είγματα ποιοτικού ελέγχου: Χρησιμοποιήστε δείγματα ελέγχου τουλάχιστον δύο επιπέδων (χαμηλό και υψηλό) PAPP-A. Αναμενόμενες τιμές Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να έχει τις δικές του τιμές αναφοράς. Περιορισμός Ετεροφυλικά αντισώματα στον ανθρώπινο ορό μπορεί να αντιδράσουν με τις ανοσοσφαιρίνες που περιέχονται στα συστατικά της μεθόδου προκαλώντας δυσκολίες σε μεθόδους in vitro ανοσοανίχνευσης. [βλ. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] είγματα ασθενών που εκτίθενται συστηματικά σε ζώα ή προϊόντα ζωικού ορού μπορούν να παρουσιάσουν αυτού του τύπου την αλληλεπίδραση που προκαλεί δυνητικά ένα ανώμαλο αποτέλεσμα. Αυτά τα αντιδραστήρια έχουν μορφοποιηθεί έτσι, ώστε να ελαχιστοποιούν τον κίνδυνο της αλληλεπίδρασης. Παρόλ αυτά, μπορεί να εμφανιστούν πιθανές αλληλεπιδράσεις μεταξύ σπάνιων ορών και των συστατικών της μεθόδου. Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα που λαμβάνονται από αυτή τη μέθοδο θα πρέπει πάντα να χρησιμοποιούνται σε συνδυασμό με τις κλινικές εξετάσεις, το ιατρικό ιστορικό του ασθενούς και άλλα ευρήματα. Απόδοση Βλέπε Πίνακες και Γραφήματα για αντιπροσωπευτικά δεδομένα της απόδοσης της μεθόδου. Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε miu/ml. (Εκτός αν κάτι σημειώνεται διαφορετικά, όλα πραγματοποιήθηκαν σε δείγματα ορού, που συλλέχθηκαν σε σωλήνες χωρίς παρεμποδιστές πηκτών ή προσθετικών που προκαλούν θρόμβους.) Εύρος καμπύλης: Έως 10 miu/ml IMMULITE 2000 PAPP-A (PIEL2KPC-5 {29}, ) 13

14 Η εξέταση είναι ιχνηλάσιμη σε ένα εσωτερικό πρότυπο που κατασκευάστηκε χρησιμοποιώντας κατάλληλα υλικά και μετρήσιμες διαδικασίες. Αναλυτική ευαισθησία: 0,025 miu/ml Υψηλή δόση φαινομένου Hook: εν εμφανίζεται μέχρι τις 115 miu/ml. Ακρίβεια: Για αρκετές ημέρες κάποια δείγματα εξετάστηκαν επανειλημμένα εις διπλούν, συνολικά 40 φορές ή 80 επαναλήψεις. (Βλ. πίνακα Precision ) Γραμμικότητα: Τα δείγματα αναλύθηκαν σε διάφορα διαλύματα. (Βλ. πίνακα "Linearity" για αντιπροσωπευτικά δεδομένα). Ανάκτηση: Κάποια δείγματα (1 με 19) εμπλουτίστηκαν με τρία διαλύματα PAPP- A (20, 40 και 80 miu/ml) και αναλύθηκαν. (Βλ. πίνακα "Recovery" για αντιπροσωπευτικά δεδομένα.) Ειδικότητα: Το αντίσωμα έχει υψηλή ειδικότητα στην PAPP-A. (Βλ. Πίνακα "Specificity".) Χολερυθρίνη: Η παρουσία χολερυθρίνης (συνδεδεμένης και έμμεσης) σε συγκεντρώσεις έως 200 mg/l δεν επηρεάζει τα αποτελέσματα της εξέτασης μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Αιμόλυση: Τα αποτελέσματα της παρουσίας αιμοσφαιρίνης αξιολογήθηκαν με εμπλουτισμό 10, 20 και 30 µl αιμολυμένων ερυθρών κυττάρων (αντιστοιχεί σε 157, 314 και 550 mg/dl αιμοσφαιρίνης) σε 1 ml 5 διαχωρισμένων δειγμάτων ασθενών. Η παρουσία αιμοσφαιρίνης σε συγκεντρώσεις έως 157 mg/dl δεν επηρεάζει τα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Υψηλότερα επίπεδα αιμοσφαιρίνης μπορούν να προκαλέσουν ελαφρά αύξηση των τιμών αποτελεσμάτων (βλ. πίνακα "Hemoglobin"). Λιπιδαιμία: Η παρουσία τριγλυκεριδίων σε συγκεντρώσεις έως mg/dl δεν επηρεάζει τα αποτελέσματα της εξέτασης μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Εναλλακτικός τύπος δείγματος: Για να εκτιμηθεί το αποτέλεσμα των εναλλακτικών τύπων δείγματος, συλλέχθηκε αίμα απο 20 εθελοντές σε απλούς και ηπαρινισμένους δοκιμαστικούς σωλήνες. Ίσες ποσότητες των αντίστοιχων δειγμάτων εμπλουτίστηκαν με διάφορες συγκεντρώσεις PAPP-A, ώστε να ληφθούν τιμές καθ' όλο το εύρος καμπύλης της ανάλυσης και στη συνέχεια αναλύθηκαν σύμφωνα με τη διαδικασία IMMULITE 2000 PAPP-A. (Ηπαρίνη) = 1,08 (Ορός) + 0,08 miu/ml r = 0,996 Μέσοι όροι: 4,72 miu/ml (Ορός) 5,18 miu/ml (Ηπαρίνη) Σε μια άλλη μελέτη συλλέχθηκε αίμα από 24 εθελοντές σε απλούς και EDTA σωλήνες. Ίσες ποσότητες των αντίστοιχων δειγμάτων εμπλουτίστηκαν με διάφορες συγκεντρώσεις PAPP-A, ώστε να ληφθούν τιμές καθ' όλο το εύρος καμπύλης της ανάλυσης και στη συνέχεια αναλύθηκαν σύμφωνα με τη διαδικασία IMMULITE 2000 PAPP-A. (EDTA) = 1,21 (Ορός) + 0,02 miu/ml r = 0,995 Μέσοι όροι: 3,65 miu/ml (Ορός) 4,43 miu/ml (EDTA) Το EDTA πλάσμα δεν είναι κατάλληλο για χρήση. Σύγκριση της μεθόδου 1: Η μέθοδος συγκρίθηκε με μια διαθέσιμη στο εμπόριο ανάλυση PAPP-A (Kit A) σε 152 δείγματα ασθενών. (Εύρος συγκέντρωσης: περίπου 0,3 έως 10 miu/ml. Βλ. γράφ.) Η ανάλυση γραμμικής παλινδρόμησης έδωσε τα ακόλουθα αποτελέσματα: (IML 2000) = 0,99 (Kit A) + 0,5 miu/ml r = 0,973 Μέσοι όροι: 3,82 miu/ml (IMMULITE 2000) 3,36 miu/ml (Kit A) Σύγκριση της μεθόδου 2: Η μέθοδος συγκρίθηκε με τη μέθοδο IMMULITE PAPP-A σε 283 δείγματα. (Εύρος συγκέντρωσης: περίπου 0,3 έως 10 miu/ml. Βλ. γράφ.) Η ανάλυση γραμμικής παλινδρόμησης έδωσε τα ακόλουθα αποτελέσματα: (IML 2000) = 1,03 (IML) 0,06 miu/ml r = 0,995 Μέσοι όροι: 3,70 miu/ml (IMMULITE 2000) 3,64 miu/ml (IMMULITE) 14 IMMULITE 2000 PAPP-A (PIEL2KPC-5 {29}, )

15 Τεχνική Υποστήριξη Για τεχνική υποστήριξη αποταθείτε στον αντιπρόσωπο της χώρας σας. Το Σύστημα Ποιότητας της Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. είναι επικυρωμένο με ISO 13485:2003. Polski IMMULITE 2000 PAPP-A Przeznaczenie: Test diagnostyczny in vitro dla analizatorów systemów IMMULITE 2000 do ilościowego oznaczenia poziomu osoczowego białka ciążowego (PAPP-A) w surowicy lub osoczu heparynowym. Numer katalogowy: L2KPC2 (200 testów) Kod testu: PAA Kolor: Brązowy Wprowadzenie Osoczowe białko ciążowe (PAPP-A) jest wydzielaną przez łożysko glikoproteiną o dużym ciężarze molekularnym. 1 W trakcie ciąży produkowane jest w dużych ilościach przez trofoblast i uwalniane do krążenia matki. Stężenie PAPP-A w surowicy matki narasta stopniowo w miarę rozwoju płodu, bardziej znacząco w ostatnim okresie ciąży. 2 Znaczenie roli PAPP-A nie jest jasne. Niemniej jednak pewne badania wykazują, że obniżone stężenie tego białka w przebiegu ciąży odzwierciedla nieprawidłowości chromosomalne u płodu. 3 Zgodnie z piśmiennictwem, ocena poziomu PAPP-A w krwi matki pomiędzy 11 i 14 tygodniem ciąży ma istotne znaczenie jako test przesiewowy w kierunku zespołu Downa i innych chromosomalnych nienormalności płodu. Zestawienie szacunku ryzyka związanego z wiekiem matki oraz wynikającego z poziomu wolnej- -HCG i wartości pomiaru karkowej przeziernością u płodu (NT) znacząco poprawia skuteczność testu przesiewowego w tym okresie ciąży w stosunku do badań w drugim trymestrze. Wg autorów wykrywalność zespołu Downa w tych badaniach sięga 85 do 90% przy 5% wyników fałszywie dodatnich. 6,7 Zasada testu IMMULITE 2000 PAPP-A jest immunoenzymatycznym, chemiluminescencyjnym, testem immunometrycznym fazy stałej. Czas inkubacji: 1 30 minut. Preparatyka próbek Zalecane jest klarowanie próbek lipemicznych przez ultrawirowanie. Hemoliza próbki może świadczyć o nieprawidłowym postępowaniu z próbką na etapie przedlaboratoryjnym. Fakt ten należy brać pod uwagę przy interpretacji wyników. Osocze EDTA nie jest zalecane dla testu. Odwirowanie próbki krwi przed zakończeniem wykrzepiania może spowodować, że w supernatancie pozostanie fibryna stanowiąca przyczynę fałszywych wyników. Przed przystąpieniem do wirowania należy mieć pewność, że skrzep jest ostatecznie uformowany. Niektóre próbki, a zwłaszcza pochodzące od osób poddanych leczeniu antykoagulantami, wymagają dłuższego czasu na wytworzenie skrzepu. W zależności od producenta probówki do pobierania krwi mogą różnie wpływać na uzyskiwane wyniki. Istotne jest tworzywo i czynniki dodatkowe jak żel lub bariery oddzielające skrzep, aktywatory krzepnięcia oraz antykoagulanty. Wpływ wszystkich możliwych wariantów probówek na test IMMULITE 2000 PAPP- A nie został określony. Informacje o przetestowanych wariantach podano w akapicie Wpływ materiału na oznaczenie. Wymagana objętość próbki: 10 µl surowicy lub osocza. Przechowywanie: 24 godziny w 2 8 C lub 2 miesiące w 20 C. IMMULITE 2000 PAPP-A (PIEL2KPC-5 {29}, ) 15

16 Ostrzeżenia i warunki wstępne Test diagnostyczny in vitro. PRZESTROGA! POTENCJALNE ZAGROŻENIE BIOLOGICZNE Zawiera materiał pochodzenia ludzkiego. Każdą porcję ludzkiej krwi lub składnika krwi pochodzącą od dawców przetestowano metodami zaaprobowanymi przez FDA na obecność przeciwciał przeciwko ludzkiemu wirusowi nabytego niedoboru odporności typu 1 (HIV-1) i typu 2 (HIV-2), antygenu powierzchniowego zapalenia wątroby typu B (HBsAg) i przeciwciał przeciwko wirusowi zapalenia wątroby typu C (HCV). Wyniki tych badań były ujemne (nie wykazały powtarzalnej reaktywności). Jednak żadne badanie nie gwarantuje całkowitej pewności, że te lub inne czynniki chorobotwórcze nie są obecne w materiale; z tym materiałem należy postępować zgodnie z zasadami dobrej praktyki laboratoryjnej i stosować uniwersalne środki ostrożności PRZESTROGA: Materiał pochodzenia zwierzęcego. Postępować tak jak z materiałem potencjalnie zakaźnym. H412 P273, P501 Działa szkodliwie na organizmy wodne, powodując długotrwałe skutki. Unikać uwolnienia do środowiska. Pojemnik i zawartość usuwać zgodnie z wszystkimi lokalnymi, regionalnymi i krajowymi przepisami. Zawiera: 2-metylo-2Hizotiazolino-3-on; PAPP-A Kalibratory Odczynniki: Przechowywać w 2 8 C. Usuwać zgodnie z instrukcją. Zachowywać środki ostrożności konieczne przy pracy z materiałem potencjalnie zakaźnym. W materiałach pochodzących z krwi ludzkiej wykluczono reaktywność w kierunku syfilisu, obecność przeciwciał anty-hiv1/2, HBsAg i przeciwciał anty- HCV. Substrat chemiluminescencyjny: Unikać zanieczyszczenia i chronić przed bezpośrednim światłem słonecznym (patrz ulotka). Woda: Dejonizowana lub destylowana. Elementy zestawu Elementy zestawu tworzą całość. Kody na wewnętrznych pokrywach pudełka są niezbędne do wykonania oznaczenia. PAPP-A Pojemnik z kulkami (L2PC12) Z kodem kreskowym. 200 kulek opłaszczonych mysim przeciwciałem monoklonalnym anty-papp-a. Stabilne w 2 8 C do daty ważności. L2KPC2: 1 opakowanie PAPP-A Klin odczynnikowy (L2PCA2) Z kodem kreskowym. 11,5 ml fosfatazy alkalicznej (izolowanej z jelita cieląt) związanej z mysim przeciwciałem monoklonalnym anty-papp-a w buforze. Stabilne w 2 8 C do daty ważności. L2KPC2: 1 klin Przed użyciem zerwać taśmę zabezpieczającą nie uszkadzając kodu kreskowego. Usunąć foliową uszczelkę komór odczynnikowych. Wsunąć przesuwne zamknięcie komór w prowadnice w pokrywie klina. PAPP-A Kalibratory (LPCL, LPCH) Dwie fiolki (Niski i Wysoki) liofilizatu PAPP A w matrycy surowicy zwierzęcej. Zawartość każdej fiolki rekonstytuować 2,0 ml destylowanej lub dejonizowanej wody. Mieszać przez delikatne obracanie i odwracanie aż do całkowitego rozpuszczenia liofilizatu. Po rekonstytucji stabilny 30 dni w 2 8 C lub 3 miesiące (rozpipetowany) w 20 C. L2KPC2: 1 zestaw Przed wykonaniem kalibracji umocować na probówkach odpowiednie nalepki z kodem kreskowym (dostarczane z zestawem) rozpoznawane przez czytnik kodów kreskowych aparatu. Materiały dostarczane oddzielnie Multidiluent 2 (L2M2Z, L2M2Z4) Do automatycznego rozcieńczania wysokich próbek. Jedna fiolka koncentrowanej, gotowej do użycia, 16 IMMULITE 2000 PAPP-A (PIEL2KPC-5 {29}, )

17 buforowanej matrycy białka zwierzęcego, z konserwantem. Po otwarciu stabilny w 2 8 C przez 30 dni lub 6 miesięcy w 20 C (rozpipetowany). L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml Wraz z rozcieńczalnikiem dostarczane są nalepki z kodami kreskowymi. Nalepkę umieścić na probówce (16 x 100 mm), by umożliwić jej rozpoznanie przez czytnik kodów aparatu. L2M2Z: 3 nalepki L2M2Z4: 5 nalepek L2SUBM: Substrat chemiluminescencyjny L2PWSM: Roztwór płuczący L2KPM: Roztwór czyszczący LRXT: Probówki reakcyjne (jednorazowe) L2ZT: 250 probówek do rozcieńczania próbek ( mm) L2ZC: 250 korków do probówek na rozcieńczalnik LPCCM: Dwupoziomowa kontrola w surowicy zwierzęcej. Ponadto niezbędne: woda destylowana lub dejonizowana, probówki, kontrole. Procedura oznaczenia Przestrzeganie procedur dotyczących utrzymania aparatu, zawartych w Podręczniku operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000 poprawia charakterystykę uzyskiwanych wyników. Procedury: przygotowania aparatu, ustawień aparatu, przygotowania i rozcieńczania próbek, rekalibracji, oznaczenia i kontroli jakości zgodnie z Podręcznikiem operatora do obsługi systemów IMMULITE Zalecany odstęp pomiędzy rekalibracjami: 4 tygodnie. Próbki kontrolne: Stosować kontrole lub pule surowic, co najmniej o niskim i wysokim poziomie PAPP-A. Oczekiwane wartości Każde laboratorium powinno wyznaczyć własne zakresy referencyjne. Ograniczenia Przeciwciała heterofilne obecne w surowicy ludzkiej mogą wchodzić w reakcję z immunoglobulinami będącymi reagentami testu immunologicznego, wpływając na przebieg oznaczenia in vitro. [Porównaj: Boscato L.M., Stuart M.C.: Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays Przeciwciała heterofilne - problem wszystkich testów immunologicznych. Clin. Chem. 1988: 34: 27-33]. Wpływ przeciwciał heterofilnych może ujawnić się w oznaczeniach wykonywanych w surowicy osób mających ciągły kontakt ze zwierzętami lub zwierzęcymi produktami krwiopochodnymi, stanowiąc potencjalną przyczynę błędnych wyników. W teście ryzyko interferencji przeciwciał heterofilnych zostało zminimalizowane przez odpowiedni dobór proporcji odczynników, tym niemniej interferencja taka może potencjalnie nastąpić w rzadkich przypadkach. W postępowaniu diagnostycznym wyniki uzyskane tą metodą powinny być z zasady interpretowane w połączeniu z badaniem klinicznym pacjenta, jego historią choroby oraz innymi okolicznościami. Parametry testu Dane charakteryzujące test przedstawiono w tabelach i wykresach. Wyniki wyrażono w miu/ml. (O ile nie podano inaczej, wszystkie wyniki dotyczą surowicy, a próbki pobierano do probówek bez bariery żelowej i substancji przyspieszających krzepnięcie). Zakres kalibracji: Do 10 miu/ml Test wykazuje zgodność pomiarową z wewnętrznymi standardami wytwarzania dzięki zastosowaniu kwalifikowanych materiałów i metod pomiaru. Czułość analityczna: 0,025 miu/ml Efekt wysokiej dawki Hook Effect: Nie występuje do stężenia 115 miu/ml. Precyzja: Próbki oznaczano w duplikatach w ciągu 20 dni, dwie serie dziennie, uzyskując w sumie 40 serii i 80 powtórzeń (patrz: tabela Powtarzalność). Liniowość: Oznaczano próbki poddane kolejnym rozcieńczeniom (patrz: tabela Liniowość). Odzysk: Oznaczano próbki wzbogacane w stosunku objętościowym 1 do 19 roztworami PAPP-A o stężeniach, kolejno: 20, 40 i 80 miu/ml (patrz: tabela Odzysk). Specyficzność: Przeciwciało jest wysoce specyficzne w stosunku do PAPP-A (patrz: tabela Specyficzność). IMMULITE 2000 PAPP-A (PIEL2KPC-5 {29}, ) 17

18 Bilirubina: Obecność bilirubiny związanej i niezwiązanej w stężeniu do 200 mg/l nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Hemoliza: Wpływ hemoglobiny oceniano dodając hemolizat 10, 20 i 30 µl erytrocytów (odpowiadający 157, 314 i 550 mg/dl hemoglobiny) do 5 próbek badanych o objętości 1 ml. Hemoglobina w stężeniu do 157 mg/dl nie wywierała wpływu w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Wyższe stężenia hemoglobiny mogą powodować nieznaczne podniesienie wyników (patrz: tabela Hemoglobina). Lipemia: Obecność trójglicerydów w ilości do mg/dl nie ma wpływu na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Wpływ materiału na oznaczenie: W celu ustalenia wpływu rodzaju materiału na wynik krew od 20 ochotników pobierano do probówek zwykłych i heparynowych. Równe objętości porównywanych próbek wzbogacano różnymi stężeniami PAPP-A dla uzyskania wartości w całym zakresie kalibracji testu i oznaczano testem IMMULITE 2000 PAPP-A. (Heparyna) = 1,08 (Surowica) + 0,08 miu/ml r = 0,996 Średnie: 4,72 miu/ml (Surowica) 5,18 miu/ml (Heparyna) W innych badaniach krew od 24 ochotników pobierano do probówek zwykłych i EDTA. Równe objętości porównywanych próbek wzbogacano różnymi stężeniami PAPP-A dla uzyskania wartości w całym zakresie kalibracji testu i oznaczano testem IMMULITE 2000 PAPP-A. (EDTA) = 1,21 (Surowica) + 0,02 miu/ml r = 0,995 Średnie: 3,65 miu/ml (Surowica) 4,43 miu/ml (EDTA) Osocze EDTA nie nadaje się dla testu. Porównanie metod 1: Test porównywano z dostępnym na rynku testem PAPP-A (Kit A) w grupie 152 próbek (o zakresie stężeń od około 0,3 do 10 miu/ml. Porównaj wykres 1). Otrzymano następujące równanie regresji liniowej: (IML 2000) = 0,99 (Kit A) + 0,5 miu/ml r = 0,973 Średnie: 3,82 miu/ml (IMMULITE 2000) 3,36 miu/ml (Kit A) Porównanie metod 2: Test porównywano z testem IMMULITE PAPP-A w grupie 283 próbek. (Zakres stężeń od około 0,3 do 10 miu/ml. Porównaj wykres 2). Otrzymano następujące równanie regresji liniowej: (IML 2000) = 1,03 (IML) 0,06 miu/ml r = 0,995 Średnie: 3,70 miu/ml (IMMULITE 2000) 3,64 miu/ml (IMMULITE) Pomoc techniczna i konsultacje Krajowy Dystrybutor udziela wszechstronnej pomocy technicznej. System Kontroli Jakości Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. posiada Certyfikat Jakości ISO 13485:2003. IMMULITE is a trademark of Siemens Healthcare Diagnostics Siemens Healthcare Diagnostics. All rights reserved. Made in: UK Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. Glyn Rhonwy, Llanberis, Gwynedd LL55 4EL United Kingdom 0088 when used for Trisomy 21 testing pøi použití k testu Trizomie 21 Όταν χρησιμοποιείται για εξέταση Τρισωμίας 21 przy użyciu z testem Trisomy PIEL2KPC 5 {29} 18 IMMULITE 2000 PAPP-A (PIEL2KPC-5 {29}, )

19 Changes in this Edition: cc#eu22593: 1) Removed references to discontinued products. 2) Under Warnings and Precautions, added biohazard symbol and potential biohazard statement, caution statement, required GHS pictograms/signal words/hazard and precautionary codes and statements, offending chemicals and sources. 3) Under References, added citations from the potential biohazard statement. 4) Changed Origin: UK to Made in: UK. 5) Updated the manufacturer address to include Glyn Rhonwy. 6) In Understanding the Symbols, revised the symbol for catalog number, added a GHS pictogram for health hazard, and updated existing symbols with GHS pictograms and terminology for exclamation mark, corrosion, skull and crossbones, and environment. Understanding the Symbols Understanding the Symbols En English Vysvětlivky symbolů Επεξήγηση των συμβόλων Znaczenie symboli Cz Česky El Ελληνικά Pl Polski The following symbols may appear on the product labeling: / Na štítku výrobku mohou být uvedeny následující symboly: / Τα ακόλουθα σύμβολα ενδέχεται να εμφανίζονται στην επισήμανση του προϊόντος: / Na etykietach produktu mogą pojawiać się poniższe symbole: Symbol Definition En: In vitro diagnostic medical device Cz: Zdravotnický prostředek pro in vitro diagnostiku El: In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή Pl: Sprzęt do medycznej diagnostyki in vitro En: Catalog Number Cz: Katalogové číslo El: Αριθμός καταλόγου Pl: Numer katalogowy En: Manufacturer Cz: Výrobce El: Κατασκευαστής Pl: Producent En: Authorized Representative in the European Community Cz: Autorizované zastoupení v Evropské unii El: Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα Pl: Autoryzowany przedstawiciel w Unii Europejskiej Symbol Definition En: CE Mark Cz: CE značka El: Σήμανση CE Pl: Znak CE En: CE Mark with identification number of notified body Cz: CE značka s identifikačním číslem notifikovaného orgánu El: Σήμανση CE με αριθμό αναγνώρισης του φορέα πιστοποίησης Pl: Znak CE z numerem identyfikacyjnym jednostki notyfikowanej En: Consult instructions for use Cz: Postupujte podle návodu k použití El: Συμβουλευτείτε τις οδηγίες λειτουργίας Pl: Zapoznać się z instrukcją użycia En: Caution! Potential Biohazard Cz: Pozor! Potenciální biohazard El: Πρoσοχή! υνητικός βιολογικός κίνδυνος Pl: Uwaga! Potencjalne zagrożenie biologiczne En: Temperature limitation (2 8 C) Cz: Teplotní rozsah (2 8 C) El: Περιορισμός θερμοκρασίας (2 8 C) Pl: Zakres temperatury (2 8 C) En: Upper limit of temperature ( -20 C) Cz: Horní teplotní limit ( -20 C) El: Ανώτερο όριο θερμοκρασίας ( -20 C) Pl: Górny zakres temperatury ( -20 C) En: Lower limit of temperature ( 2 C) Cz: Spodní teplotní limit ( 2 C) El: Κατώτερο όριο θερμοκρασίας ( 2 C) Pl: Dolny zakres temperatury ( 2 C) En: Do not freeze (> 0 C) Cz: Nezmrazovat (> 0 C) El: Μην καταψυχετε (> 0 C) Pl: Nie zamrażać (> 0 C) En: Do not reuse Cz: Pro jednorázové použití El: Μην κάνετε επαναληπτική χρήση Pl: Nie używać powtórnie IMMULITE 2000 PAPP-A (PIEL2KPC-5 {29}, ) 19

20 Symbol Definition En: Keep away from sunlight Cz: Chraňte před slunečním světlem El: ιατηρείτε μακριά από το ηλιακό φως Pl: Chronić przed światłem słonecznym BEAD PACK Symbol Definition En: Bead Pack Cz: Zásobník s kuličkami El: Συσκευασία σφαιριδίων Pl: Pojemnik z kulkami LOT En: Batch code Cz: Šarže El: Κωδικός παρτίδας Pl: Kod serii TEST UNIT En: Test Unit Cz: Testovací Jednotky El: Μονάδες ανάλυσης Pl: Jednostki testowe En: Contains sufficient for (n) tests Cz: Dostatečné množství pro (n) testů El: Περιεχόμενο επαρκές για (n) εξετάσεις Pl: Zawartość wystarczająca na (n) testów REAG WEDGE REAG WEDGE A REAG WEDGE B REAG WEDGE D En: Reagent Wedge Cz: Reagencie El: οχείο Αντιδραστηρίων Pl: Klin odczynnikowy En: Date format (year-month) Cz: Formát data (rok-měsíc) El: Μορφή ημερομηνίας (έτος-μήνας) Pl: Zapis daty (rok-miesiąc) En: Use by Cz: Spotřebujte do El: Ημερομηνία λήξης Pl: Wykorzystać do En: Health Hazard Cz: Zdravotní riziko El: Κίνδυνος για την υγεία Pl: Zagrożenie dla zdrowia En: Exclamation Mark Cz: Vykřičník El: Θαυμαστικό Pl: Wykrzyknik En: Corrosion Cz: Koroze El: ιάβρωση Pl: Działanie żrące En: Skull and Crossbones Cz: Lebka se zkříženými hnáty El: Νεκροκεφαλή με διασταυρούμενα οστά Pl: Czaszka i skrzyżowane piszczele En: Environment Cz: Prostředí El: Περιβάλλον Pl: Środowisko ADJUSTOR ADJUSTOR L ADJUSTOR H ADJUSTOR AB DIL CONTROL CONTROL 1 CONTROL 2 CONTROL 3 En: Adjustor Cz: Kalibrátor El: Ρυθμιστής Pl: Kalibrator En: Adjustor, low Cz: Kalibrátor, nízký El: Ρυθμιστής, χαμηλό Pl: Kalibrator, niski En: Adjustor, high Cz: Kalibrátor, vysoký El: Ρυθμιστής, υψηλό Pl: Kalibrator, wysoki En: Adjustor Antibody Cz: Protilátka proti kalibrátoru El: Ρυθμιστής αντισώματος Pl: Przeciwciało Kalibratora En: Sample Diluent Cz: Diluent Vzorků El: Αραιωτικό δείγματος Pl: Rozcieńczalnik próbek En: Control Cz: Kontrola El: Έλεγχος Pl: Kontrola 20 IMMULITE 2000 PAPP-A (PIEL2KPC-5 {29}, )