Total IgE. For use on IMMULITE 2000 systems

Transcript

1 Total IgE For use on IMMULITE 2000 systems

2 IMMULITE 2000 Total IgE English Intended Use: For in vitro diagnostic use with the IMMULITE 2000 Systems Analyzers for the quantitative measurement of immunoglobulin type E (IgE) in serum. Catalog Number: L2KIE2 (200 tests) L2KIE6 (600 tests) Test Code: TIE Color: Violet Summary and Explanation Modern laboratory methods for allergy testing are based on the comparatively recent discovery that many allergies are mediated by immunoglobulins of the IgE class acting as points of contact between the allergen and specialized cells. 4,5,7,9,10 The IgE molecules, which have a molecular mass of approximately 200,000, bind to the surface of mast cells and basophilic granulocytes. 2,3 Subsequent binding of allergens to cell-bound IgE causes these cells to release histamines and other vasoactive substances, thereby initiating the events which we recognize as an allergic reaction. 10 In deciding on a course of therapy, it is important to distinguish between IgE-mediated and non-ige-mediated reactions. 4,7 Measurement of the total circulating IgE level, in conjunction with other supporting diagnostic information, can aid in making this diagnosis. The supporting information should include appropriate tests for allergen-specific IgE. Measurement of the total circulating IgE level may also be of value in the early detection of allergy in infants, and as a means for predicting future atopic manifestations. 4,6,7 IgE levels normally show a slow increase during childhood, reaching adult levels in the second decade of life. 1,8 In general, the total IgE level increases with the number of allergies which a person has and with the amount of exposure to relevant allergens. 5,7 Significant elevations may be encountered not only in sensitized individuals, but also in cases of IgE myeloma, pulmonary aspergillosis, and during the active stage of parasitic infestations. 4,5,7,9 Principle of the Procedure IMMULITE 2000 Total IgE is a solid-phase, chemiluminescent immunometric assay. Incubation Cycles: 1 30 minutes Time to First Result: 35 minutes Specimen Collection The use of an ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples. Hemolyzed samples may indicate mistreatment of a specimen before receipt by the laboratory; hence the results should be interpreted with caution. Centrifuging serum samples before a complete clot forms may result in the presence of fibrin. To prevent erroneous results due to the presence of fibrin, ensure that complete clot formation has taken place prior to centrifugation of samples. Some samples, particularly those from patients receiving anticoagulant therapy, may require increased clotting time. Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE 2000 Total IgE has not been tested with all possible variations of tube types. Volume Required: 5 µl serum Storage: 3 days at 2 8 C, 13,15 or 6 months at 20 C. 15 Warnings and Precautions For in vitro diagnostic use. Reagents: Store at 2 8 C. Dispose of in accordance with applicable laws. Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for 2 IMMULITE 2000 Total IgE (PIEL2KIE-5 {22}, )

3 hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C. Sodium azide, at concentrations less than 0.1 g/dl, has been added as a preservative. On disposal, flush with large volumes of water to prevent the buildup of potentially explosive metal azides in lead and copper plumbing. Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert.) Water: Use distilled or deionized water. Materials Supplied Components are a matched set. Labels on the inside box are needed for the assay. Total IgE Bead Pack (L2IE12) With barcode. 200 beads, coated with monoclonal mouse anti-ige. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KIE2: 1 pack L2KIE6: 3 packs Total IgE Reagent Wedge (L2IEA2) With barcode ml alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to polyclonal goat anti-ige antibody in buffer, with preservative. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KIE2: 1 wedge L2KIE6: 3 wedges Before use, tear off the top of the label at the perforations, without damaging the barcode. Remove the foil seal from the top of wedge; snap the sliding cover down into the ramps on the reagent lid. Total IgE Adjustors (LIEL, LIEH) Two vials (Low and High), 2.5 ml each, of IgE in a nonhuman serum/buffer matrix, with preservative. Stable at 2 8 C for 30 days after opening, or for 6 months (aliquotted) at 20 C. L2KIE2: 1 set L2KIE6: 2 sets Before making an adjustment, place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes so that the barcodes can be read by the on-board reader. Storage: 30 days (after opening) at 2 8 C or 6 months (aliquotted) at 20 C. Dispose of in accordance with applicable laws. L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml Barcode labels are provided for use with the diluent. Before use, place an appropriate label on a mm test tube, so that the barcodes can be read by the on-board reader. L2M2Z: 3 labels L2M2Z4: 5 labels L2SUBM: Chemiluminescent Substrate L2PWSM: Probe Wash L2KPM: Probe Cleaning Kit LRXT: Reaction Tubes (disposable) L2ZT: 250 Sample Diluent Test Tubes ( mm) L2ZC: 250 Sample Diluent Tube Caps IECM: Bi-level, human serum-based control module containing IgE Also Required Distilled or deionized water; test tubes; controls Assay Procedure Note that for optimal performance, it is important to perform all routine maintenance procedures as defined in the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual. See the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual for preparation, setup, dilutions, adjustment, assay and quality control procedures. Recommended Adjustment Interval: 2 weeks Quality Control Samples: Use controls or serum pools with at least two levels (low and high) of total IgE. Expected Values Based on its relationship to IMMULITE Total IgE (see Method Comparison), the assay can be expected to have essentially the same reference ranges for nonatopic individuals. Kit Components Supplied Separately Multi-Diluent 2 (L2M2Z, L2M2Z4) For on-board dilution of samples. One vial, concentrated (ready-to-use), nonhuman protein/buffer matrix, with preservative. IMMULITE 2000 Total IgE (PIEL2KIE-5 {22}, ) 3

4 Age (years) Median (IU/mL) 95%ile (IU/mL) Adult Consider these limits as guidelines only. Each laboratory should establish its own reference ranges. Limitations Serum total IgE levels for the majority of individuals with IgE-mediated disease can be expected to be elevated compared to the reference range for healthy adults. However, not all allergic patients exhibit elevated serum total IgE levels. 11 Since not all atopic reactions are IgE-mediated, a total IgE result in the reference range should always be interpreted in light of other clinical observations. Tests for allergen-specific IgE may clarify the finding of an elevated total IgE result. Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: ] Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings. Performance Data See Tables and Graphs for data representative of the assay's performance. Results are expressed in IU/mL. (Unless otherwise noted, all were generated on serum samples collected in tubes without gel barriers or clot-promoting additives.) Conversion Factor: IU/mL 2.4 ng/ml IU/mL 1 kiu/l Calibration Range: up to 2000 IU/mL. Standardized in reference to WHO 2nd IRP 75/502. Analytical Sensitivity: 1.0 IU/mL High-dose Hook: No effect up to 13,000 IU/mL Precision: Samples were assayed in duplicate over the course of 20 days, two runs per day, for a total of 40 runs and 80 replicates. (See Precision table.) Linearity: Samples were assayed under various dilutions. The results show that the IMMULITE 2000 Total IgE kit maintains good linearity throughout its calibration range; but due to the heterogeneity of circulating IgE with different affinities, there may be a loss of dilutional parallelism in certain patients. (See "Linearity" table for representative data.) Recovery: Samples spiked 1 to 19 with three total IgE solutions (1750, 3500 and 7000 IU/mL) were assayed. (See "Recovery" table for representative data.) Specificity: The assay is highly specific for human IgE and exhibits no crossreactivity to other human immunoglobulin classes. Bilirubin: Presence of bilirubin in concentrations up to 200 mg/l has no effect on results, within the precision of the assay. Hemolysis: Presence of hemoglobin in concentrations up to 384 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Lipemia: Presence of triglycerides in concentrations up to 5000 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Method Comparison: The assay was compared to IMMULITE Total IgE on 175 samples. (Concentration range: approximately 2 to 1600 IU/mL. See graph.) By linear regression: (IML 2000) = 0.96 (IML) IU/mL r = Means: 225 IU/mL (IMMULITE 2000) 223 IU/mL (IMMULITE) 4 IMMULITE 2000 Total IgE (PIEL2KIE-5 {22}, )

5 References 1) Barbee RA, et al. Distribution of IgE in a community population sample: correlation with age, sex and allergen skin test reactivity. J Allergy Clin Immunol 1981;68: ) Geha RS. Human IgE. J Allergy Clin Immunol 1984;74: ) Gordon RR, et al. Immunoglobulin E and the eczema-asthma syndrome in early childhood. Lancet 1982;1: ) Halpern GM. Markers of human allergic disease. J Clin Immunoassay 1983 Jun;6(2): ) Hamilton RG, Adkinson NF. Clinical laboratory methods in allergic disease. Lab Management 1983 Dec;21(12): ) Hamilton RG, Adkinson NF. Quantitation of allergen-specific IgE in serum using the radioallergosorbent test. J Clin Immunoassay 1983 Jun;6(12): ) Homberger HA, Yunginger JW. Laboratory testing in the diagnosis and management of allergic diseases. Clin Lab Annual 1983;2: ) Kjellman N-IM, Johansson SGO, Roth A. Serum IgE levels in healthy children. Clin Allergy 1976;6: ) Mandy FF, Perelmutter L. Laboratory measurement of total human serum IgE. J Clin Immunoassay 1983 Jun;6(2): ) Norman PS. The clinical significance of IgE. Hosp Pract 1975 Aug;10(8): ) Yunginger JW. Clinical significance of IgE. In: Middleton E, et al, editors. Allergy principles and practice. Vol 2. 3rd ed. St. Louis: C.V. Mosby, 1988: ) National Committee for Clinical Laboratory Standards. Procedures for the collection of diagnostic blood specimens by venipuncture; approved standard. 4th ed. NCCLS Document H3-A4, Wayne, PA: NCCLS, ) Bazaral M, Hamburger RN. Standardization and stability of immunoglobulin E (IgE). J Allerg Clin Immunol 1972;49: ) Nye L, Merrett TG, Landon J, White RJ. A detailed investigation of circulating IgE levels in a normal population. Clin Allergy 1975;1: ) Tietz NW, editor. Clinical guide to laboratory tests. 3rd ed. Philadelphia: WB Saunders, 1995:358. Technical Assistance For technical assistance, contact your National Distributor. The Quality System of Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. is certified to ISO 13485:2003. Tables and Graphs Precision (IU/mL) Within-Run 1 Total 2 Mean 3 SD 4 CV 5 SD CV % % % % % % % % Česky. 1 V rámci stanovení, 2 Celkem, 3 Střední hodnota, 4 Směrodatná odchylka, 5 Variační koeficient. Ελληνικά. 1 Κατά την ίδια περίοδο, 2 Συνολικά, 3 Μέσος όρος, 4 SD, 5 CV. Polski. 1 Wewnątrz serii, 2 Całość, 3 Średnie, 4 SD, 5 CV. Recovery (IU/mL) Solution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E A % B % C % A % B % C % A % B % C % A % B % C % A % B % C % A % B % C % Česky. 1 Roztok, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 Naměřená / Očekávaná. Ελληνικά. 1 Διάλυμα, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E. Polski. 1 Roztwór, 2 Zmierzone (Z), IMMULITE 2000 Total IgE (PIEL2KIE-5 {22}, ) 5

6 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O. Method Comparison Linearity (IU/mL) Dilution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E in in % 2 in % 1 in % 2 8 in in % 2 in % 1 in % 3 8 in in % 2 in % 1 in % 4 8 in in % 2 in % 1 in % 5 8 in in % 2 in % 1 in % 6 8 in in % 2 in % 1 in % 7 8 in in % 2 in % 1 in % 8 8 in in % 2 in % 1 in % Česky. 1 Ředění, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 % Naměřená / Očekávaná, 5 8 v 8. Ελληνικά. 1 Αραίωση, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E, 5 8 στα 8. Polski. 1 Rozcieńczenie, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O, 5 8 w 8. (IML 2000) = 0.96 (IML) IU/mL r = English. Total IgE. Česky. Celkový IgE. Ελληνικά. Ολική Ανοσοσφαιρίνη E (IgE). Polski. IgE Całkowite. Česky IMMULITE 2000 Celkový IgE Použití: Pro in vitro diagnostické použití na analyzátorech IMMULITE 2000 ke stanovení koncentrace imunoglobulinů typu E (IgE) v séru. Katalogové číslo : L2KIE2 (200 stanovení) L2KIE6 (600 stanovení) Kód metody : TIE Barva : Fialová Shrnutí a vysvětlení Moderní laboratorní metody k testování alergií jsou založeny na relativně nedávném objevu, že mnoho alergií zprostředkovávají imunoglobuliny třídy IgE, které představují místa, kde dochází ke kontaktu mezi alergenem a specializovanými buňkami. 4,5,7,9,10 Molekuly IgE s molekulovou hmotností přibližně daltonů se vážou na povrch žírných buněk a bazofilních granulocytů. 2,3 Následné navázání alergenů na IgE navázaný na tyto buňky způsobuje uvolňování histaminů a jiných vázoaktivních látek, a tím spouští proces, které známe jako alergickou reakci. 10 Při rozhodování o průběhu léčby je důležité rozlišit mezi reakcemi zprostředkovanými IgE a reakcemi 6 IMMULITE 2000 Total IgE (PIEL2KIE-5 {22}, )

7 nezprostředkovanými IgE. 4,7 Diagnózu může pomoci stanovit měření celkového cirkulujícího IgE ve spojení s dalšími podpůrnými diagnostickými informacemi. Tyto informace by měly zahrnovat odpovídající testy na alergen specifický IgE. Měření celkového množství IgE v cirkulaci může být rovněž užitečné při včasné detekci alergií u dětí a jako prostředek k předpovědi budoucích projevů atopického ekzému. 4,6,7 Množství IgE normálně vykazuje mírný nárůst během dětství a hodnot dospělého jedince je dosaženo ve druhé dekádě života. 1,8 Obecně řečeno, množství celkového IgE roste s počtem alergií toho kterého člověka a s četností kontaktu s příslušnými alergeny. 5,7 Podstatný nárůst koncentrace se může vyskytnou nejen u citlivých osob, ale i v případech IgE myelomů, plicní aspergilózy a během aktivní fáze zamoření parazity. 4,5,7,9 Princip stanovení Stanovení IMMULITE 2000 Celkový IgE je chemuluminiscenční imunochemická reakce v pevné fázi. Inkubační cykly : 1 30 minut Čas do prvního výsledku : 35 minut Odebírání vzorků K úpravě lipemických vzorků se doporučuje použití ultracentrifugy. Hemolyzované vzorky můžou být známkou nesprávného zacházení s preparátem ještě před přijetím do laboratoře; proto by výsledky měly být interpretovány s obezřetností. Centrifugace vzorků séra ještě před úplným vysrážením může mít za následek přítomnost fibrinu. Chybným výsledkům způsobeným přítomností fibrinu lze zamezit úplným vysrážením vzorků před jejich centrifugací. U některých vzorků, zejména od pacientů podstupujících antikoagulační léčbu, může srážlivost vyžadovat více času. Použití zkumavek pro odběr krve od různých výrobců může přinášet rozličné hodnoty v závislosti na materiálech a přísadách včetně gelových nebo fyzických bariér, aktivátorů sraženin a/nebo antikoagulačních činidel. Stanovení Celkový IgE na přístroji IMMULITE 2000 nebylo testováno se všemi možnými varianty jednotlivých typů zkumavek. Potřebný Objem Vzorku : 5 μl séra Skladování : 3 dny při teplotě 2 8 C, 13,15 nebo 6 měsíců při teplotě 20 C. 15 Upozornění a bezpečnostní opatření Pro in vitro diagnostické použití. Reagencie : Skladujte při teplotě 2 8 C. Likvidujte v souladu s platnými předpisy. Řiďte se obecnými pravidly bezpečnosti práce a se všemi komponenty nakládejte, jako by byly potenciálně infekční. Zdrojové materiály získané z lidské krve byly testovány a shledány nereaktivní na syfilis, na protilátky proti HIV 1 a 2, na povrchový antigen hepatitidy typu B (HBsAg), a na protilátky proti hepatitidě typu C. Jako konzervační látka byl přidán azid sodný v koncentracích menších než 0,1 g/dl. Při likvidaci vypláchněte velkým množstvím vody, by se zamezilo nahromadění potenciálně výbušných azidů kovů v olověném a měděném potrubí. Chemiluminiscenční substrát : Vyvarujte se kontaminace a nevystavujte přímému slunečnímu světlu. (Viz připojený letáček.) Voda : Použijte destilovanou nebo deionizovanou vodu. Dodaný materiál Komponenty představují ucelenou sadu. Pro stanovení jsou zapotřebí štítky na vnitřní krabici. Celkový IgE zásobník s kuličkami (L2IE12) Opatřeno čárovým kódem. 200 kuliček potažených monoklonální myší protilátkou proti IgE. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KIE2 : 1 balení L2KIE6 : 3 balení Celkový IgE reagencie (L2IEA2) Opatřeno čárovým kódem. 11,5 ml alkalické fosfatázy (z telecího střeva) konjugované s polyklonální kozí protilátkou proti IgE, v pufru, s konzervačním prostředkem. Stabilní při IMMULITE 2000 Total IgE (PIEL2KIE-5 {22}, ) 7

8 teplotě 2 8 C do expirace. L2KIE2 : 1 nádobka L2KIE6 : 3 nádobky Před použitím utrhněte vršek štítku v perforovaném místě, ale nepoškoďte čárový kód. Z vrchu nádobky odstraňte uzavírací fólii ; posuvný uzávěr zaklapněte do ramp na víčku reagencie. Celkový IgE kalibrátory (LIEL, LIEH) Dvě ampulky po 2,5 ml s vysokou a nízkou koncentrací IgE v nehumánní sérové/pufrové matrici, s konzervačním prostředkem. Stabilní 30 dní po otevření při teplotě 2 8 C nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při 20 C. L2KIE2 : 1 sada L2KIE6 : 2 sady Před adjustací nalepte na testovací zkumavky příslušné alikvotní štítky (dodané se soupravou) tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. Materiál dodávaný zvlášť Multidiluent 2 (L2M2Z, L2M2Z4) Pro automatické ředění vzorků. Jedna ampulka koncentrované (připravené k použití), nehumánní sérové/pufrové matrice, s konzervačním prostředkem. Skladování : 30 dní po otevření při teplotě 2 8 C nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při 20 C. Likvidujte v souladu s platnými předpisy. L2M2Z : 25 ml L2M2Z4 : 55 ml Štítky s čárovými kódy jsou určeny pro diluent. Před použitím nalepte příslušný štítek na testovací zkumavku mm tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. L2M2Z : 3 štítky L2M2Z4 : 5 štítků L2SUBM : chemiluminiscenční substrát L2PWSM : promývací roztok L2KPM : čistící roztok na jehly LRXT : reakční zkumavky (na jedno použití) L2ZT : 250 testovacích zkumavek na diluent vzorků ( mm) L2ZC : 250 uzávěrů na testovací zkumavky na diluent vzorků IECM : Dvojúrovňový kontrolní modul na bázi lidského séra s obsahem IgE Dále potřebujete Destilovanou nebo deionizovanou vodu ; testovací zkumavky, kontroly Postup stanovení K dosažení optimálního výkonu je důležité provádět veškerou pravidelnou údržbu stanovenou v manuálu k analyzátorům IMMULITE V manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000 najdete postupy : přípravy, nastavení, ředění, adjustace, stanovení vzorků a kontrol. Doporučený interval mezi adjustacemi : 2 týdny Vzorky ke kontrole kvality : Použijte kontroly nebo směsné vzorky s alespoň dvěmi koncentracemi (vysokou a nízkou) celkového IgE. Očekávané hodnoty Na základě příbuznosti s testem Celkový IgE na analyzátoru IMMULITE (viz Srovnání metody) je u tohoto stanovení možné očekávat v podstatě stejná referenční rozmezí pro neatopické jedince. Věk (roky) Medián (IU/ml) 95%. percentil (IU/ml) 0 1 6, , , ,4 52 Dospělý 20,4 87 Uvedené hranice považujte pouze za orientační. Každá laboratoř by si měla stanovit svoje vlastní referenční rozmezí. Omezení Koncentrace celkového IgE v séru u většiny jedinců s onemocněním zprostředkovaným IgE může být zvýšená ve srovnání s referenčním rozmezím zdravých osob. Ne všichni pacienti s alergií ale vykazují zvýšené množství celkového IgE v séru. 11 Protože ne všechny atopické reakce jsou zprostředkované IgE a hodnota celkového IgE v rámci referenčního rozmezí by měla vždycky být interpretována ve světle ostatních klinických nálezů. Stanovení alergen specifického IgE může objasnit nález zvýšeného množství celkového IgE. 8 IMMULITE 2000 Total IgE (PIEL2KIE-5 {22}, )

9 Heterofilní protilátky v lidském séru můžou reagovat s imunoglobuliny obsaženými v komponentech soupravy a způsobit interference s in vitro imunologickým stanovením. [Viz Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: ] Vzorky pacientů rutinně vystavené kontaktu se zvířaty nebo produkty zvířecího séra můžou vykázat tento typ interference a potenciálně způsobit anomální výsledky. Tyto reagencie byly vyvinuty tak, aby bylo riziko interference minimalizováno ; nicméně případné interakce mezi ojedinělými séry a komponenty testu se můžou vyskytnout. Pro diagnostické účely by se výsledky tohoto stanovení měly vždy používat v kombinaci s klinickými zkouškami, zdravotní historií pacienta a ostatními nálezy. Znaky metody Reprezentativní výsledky stanovení najdete v části Tabulky a grafy. Výsledky se udávají v IU/ml. (Pokud není uvedeno jinak, všechny výsledky byly získány na vzorcích séra odebraných do zkumavek bez gelových bariér nebo přísad podporujících srážlivost.) Konverzní faktor : IU/ml 2,4 ng/ml IU/ml 1 kiu/l Kalibrační rozsah : Do 2000 IU/ml. Standardizováno s odkazem na 2. WHO IRP 75/502. Analytická citlivost : 1,0 IU/ml High-dose Hook : Do IU/ml žádný Přesnost : Vzorky byly stanovovány dvojmo v průběhu 20 dní, dva testy denně, celkem 40 testů a 80 replikátů. (Viz tabulka Přesnost.) Linearita : Stanovení vzorků bylo provedeno při rozličném ředění. Výsledky ukazují, že souprava pro stanovení Celkový IgE na analyzátorech IMMULITE 2000 si udržuje značnou linearitu napříč celým kalibračním rozsahem. U některých pacientů ale může dojít ke ztrátě paralelizmu při ředění, a to z důvodu heterogenity cirkulujícího IgE s rozdílnými afinitami. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce Linearita.) Zpětná výtěžnost : Bylo provedeno stanovení vzorků séra s přídavkem tří roztoků celkového IgE (1750, 3500 a 7000 IU/ml) v poměru 1 : 19. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce Zpětná výtěžnost.) Specificita : Stanovení je silně specifické vůči lidskému IgE a nevykazuje žádnou zkříženou reaktivitu s ostatními třídami lidského imunoglobulinu. Bilirubin : Přítomnost bilirubinu v koncentracích do 200 mg/l nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Hemolýza : Přítomnost hemoglobinu v koncentracích do 384 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Lipémie : Přítomnost triglyceridů v koncentracích do 5000 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Srovnání metody : Stanovení bylo porovnáno s testem Celkový IgE na analyzátoru IMMULITE na 175 vzorcích. (Koncentrační rozsah : přibližně 2 až 1600 IU/ml. Viz graf.) Podle lineární regrese : (IML 2000) = 0,96 (IML) + 10,0 IU/ml r = 0,988 Střední Hodnoty : 225 IU/ml (IMMULITE 2000) 223 IU/ml (IMMULITE) Technická Podpora Pro technickou podporu kontaktujte vašeho národního distributora. Systém kontroly jakosti společnosti Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. je certifikovaný podle ISO 13485:2003. Ελληνικά IMMULITE 2000 Ολική Ανοσοσφαιρίνη E (IgE) Ενδεδειγμένη χρήση: Για εργαστηριακή διαγνωστική χρήση με τα συστήματα αναλυτών IMMULITE 2000 για την IMMULITE 2000 Total IgE (PIEL2KIE-5 {22}, ) 9

10 ποσοτική μέτρηση της ανοσοσφαιρίνης τύπου E (IgE) στον ορό. Αριθμός Καταλόγου: L2KIE2 (200 αναλύσεις) L2KIE6 (600 αναλύσεις) Κωδικός Ανάλυσης: TIE Χρώμα: Βιολετί Περίληψη και Επεξήγηση Σύγχρονες εργαστηριακές μέθοδοι για τον έλεγχο της αλλεργίας βασίζονται στην σχετικά πρόσφατη ανακάλυψη ότι πολλές αλλεργίες σχετίζονται με τις ανοσοσφαιρίνες της τάξης της IgE, οι οποίες λειτουργούν σαν σημεία επαφής μεταξύ των αλλεργιογόνων και των ειδικευμένων κυττάρων. 4,5,7,9,10 Τα μόρια της IgE, που έχουν μοριακή μάζα περίπου , συνδέονται στην επιφάνεια των λεμφοκυττάρων και των βασεόφιλων πολυμορφοπύρηνων. 2,3 Η επακόλουθη σύνδεση των αλλεργιογόνων στην συνδεδεμένη με τα κύτταρα IgE προάγει την παραγωγή ισταμίνης και άλλων βασεοδραστικών συστατικών από αυτά δημιουργώντας περαιτέρω τα φαινόμενα που αναγνωρίζουμε σαν αλλεργική αντίδραση. 10 Για να αποφασιστεί ο τρόπος θεραπείας, είναι σημαντικό να διευκρινιστούν οι αντιδράσεις που σχετίζονται με την IgE από αυτές που δεν σχετίζονται. 4,7 Μέτρηση του επιπέδου της ολικής IgE στην κυκλοφορία, σε συνδυασμό με άλλες διαγνωστικές πληροφορίες, μπορεί να βοηθήσει στο να γίνει αυτή η διάγνωση. Οι πληροφορίες θα πρέπει να περιλαμβάνουν κατάλληλες εξετάσεις για την IgE που είναι ειδική για την αλλεργία. Μέτρηση του επιπέδου της ολικής IgE στην κυκλοφορία μπορεί να είναι επίσης μια εκτίμηση για έγκαιρη ανίχνευση αλλεργίας στα νεογνά και ένα μέσο για την πρόβλεψη μελλοντικών αλλεργικών καταστάσεων. 4,6,7 Τα επίπεδα της IgE κανονικά εμφανίζουν μια μικρή αύξηση κατά την παιδική ηλικία, φτάνοντας στα επίπεδα των ενηλίκων, στη δεύτερη δεκαετία της ζωής. 1,8 Γενικά, το επίπεδο της ολικής IgE αυξάνει με τον αριθμό των αλλεργιών που έχει ένα άτομο και με το ποσό έκθεσης στα σχετικά αλλεργιογόνα. 5,7 Σημαντικές αυξήσεις μπορεί να παρατηρηθούν όχι μόνο σε ευαισθητοποιημένα άτομα, αλλά και σε περιπτώσεις μυελώματος IgE, αναπνευστικών μυκητιάσεων και κατά τη διάρκεια της ενεργής φάσης παρασιτικών μολύνσεων. 4,5,7,9 Αρχή της Διαδικασίας Η IMMULITE 2000 Ολική Ανοσοσφαιρίνη E (IgE) είναι μία ξηρής φάσης χημειοφωταυγής ανοσομετρική ανάλυση. Κύκλοι Επώασης: 1 30 λεπτά Χρόνος για το πρώτο αποτέλεσμα: 35 λεπτά Συλλογή δείγματος Συνιστάται η χρήση της υπερφυγοκέντρου για να καθαριστούν λιπιδαιμικά δείγματα. Αιμολυμένα δείγματα μπορεί να υποδηλώνουν κακή μεταχείριση του δείγματος πριν την παραλαβή του από το εργαστήριο και τα αποτελέσματα πρέπει να ερμηνεύονται με προσοχή. Η φυγοκέντρηση των δειγμάτων πριν την πλήρη πήξη μπορεί να έχει ως αποτέλεσμα την παρουσία θρόμβων. Για να αποφευχθούν λανθασμένα αποτελέσματα εξαιτίας της παρουσίας θρόμβων, βεβαιωθείτε ότι πριν την φυγοκέντρηση το αίμα έπηξε πλήρως. Κάποια δείγματα, ιδιαιτέρως αυτά των ασθενών που λαμβάνουν αντιπηκτική θεραπεία, ίσως χρειάζονται εκτεταμένο χρόνο πήξης Οι σωλήνες συγκέντρωσης αίματος από διαφορετικές εταιρείες μπορεί να φέρουν διάφορες τιμές, ανάλογα με τα υλικά και τα συμπληρώματα, συμπεριλαμβανομένων των με τζελ ή φυσικών σωληναρίων, των ενεργοποιητών πήξεως και/ή των αντιπηκτικών. Η IMMULITE 2000 Ολική Ανοσοσφαιρίνη E (IgE) δεν έχει δοκιμαστεί με όλους τους τύπους σωληναρίων. Απαιτούμενος όγκος: 5 µl ορού Φύλαξη: 3 ημέρες στους 2 8 C, 13,15 ή 6 μήνες στους 20 C. 15 Προειδοποιήσεις και Προφυλάξεις Για in vitro διαγνωστική χρήση. Αντιδραστήρια: Διατήρηση στους 2 8 C. Υπόκεινται στην ισχύουσα νομοθεσία. Ακολουθείστε τις γενικές προφυλάξεις και χειριστείτε όλα τα συστατικά σαν να ήταν φορείς μολυσματικών παραγόντων. Όλα τα 10 IMMULITE 2000 Total IgE (PIEL2KIE-5 {22}, )

11 υλικά της μεθόδου που προέρχονται από ανθρώπινο αίμα έχουν ελεγχθεί και βρέθηκαν αρνητικά για σύφιλη, για αντισώματα στον HIV 1 και 2, για τα επιφανειακά αντιγόνα της ηπατίτιδας B και για αντισώματα της ηπατίτιδας C. Αζίδιο του νατρίου σε συγκεντρώσεις μικρότερες από 0,1 g/dl, έχει προστεθεί ως συντηρητικό. Κατά την απόθεση, ξεπλύνετε με πολύ νερό προκειμένου να εμποδίσετε την δημιουργία εκρηκτικών μεταλλικών αζιδίων στους χάλκινους ή μολύβδινους σωλήνες αποχέτευσης. Υπόστρωμα χημειοφωταύγειας: Δεν πρέπει να μολυνθεί και δεν πρέπει να εκτίθεται σε απευθείας ηλιακό φως. Προσφύγετε στο ένθετο για λεπτομέρειες Νερό: Χρήση απεσταγμένου ή απιονισμένου νερού. Υλικά που διατίθενται Τα υλικά είναι μια ολοκληρωμένη ενότητα. Οι ετικέτες στο εσωτερικό του κουτιού είναι απαραίτητες για την ανάλυση. Συσκευασία σφαιριδίων Ολική Ανοσοσφαιρίνη E (IgE) (L2IE12) Με γραμμογράφηση. 200 σφαιρίδια, επικαλυμμένα με μονοκλωνικά αντισώματα ποντικού αντί-ige. Σταθερά στους 2 8 C μέχρι την ημερομηνία λήξης. L2KIE2: 1 συσκευασία L2KIE6: 3 συσκευασίες Δοχείο Αντιδραστηρίου Ολική Ανοσοσφαιρίνη E (IgE) (L2IEA2) Με γραμμογράφηση. 11,5 ml αλκαλική φωσφατάση (έντερο μόσχου) συνδεδεμένη με πολυκλωνικά αντισώματα κατσίκας αντί- IgE σε ρυθμιστικό διάλυμα, με συντηρητικό. Σταθερό στους 2 8 C μέχρι την ημερομηνία λήξης. L2KIE2: 1 δοχείο L2KIE6: 3 δοχεία Πριν τη χρήση, σχίστε την πάνω ετικέτα, χωρίς να καταστρέψετε το barcode. Αφαιρέστε (ξεκολλήστε) προσεκτικά το κάλυμμα από την επάνω επιφάνεια του δοχείου, και πιέστε το κάλυμμα κάτω προς τους κεκλιμένους οδηγούς-ράγες. Ρυθμιστές Ολική Ανοσοσφαιρίνη E (IgE) (LIEL, LIEH) Δύο φιαλίδια (χαμηλό και υψηλό), 2,5 ml το καθένα, της IgE σε μήτρα μη ανθρώπινου ορού και ρυθμιστικού διαλύματος, με συντηρητικό. Σταθεροί στους 2 8 C για 30 ημέρες μετά το άνοιγμα ή για 6 μήνες (διαχωρισμένα) στους 20 C. L2KIE2: 1 σετ L2KIE6: 2 σετ Πριν κάνετε τη ρύθμιση, τοποθετείστε τις κατάλληλες ετικέτες των διαλυμάτων (παρέχονται με το kit) σε δοκιμαστικούς σωλήνες, έτσι, ώστε τα barcodes να μπορούν να διαβαστούν από το κατάλληλο σύστημα. Συστατικά του Kit που παρέχονται ξεχωριστά Πολύ-αραιωτικό 2 (L2M2Z, L2M2Z4) Με barcode. Για την on-board αραίωση των δειγμάτων. Ένα φιαλίδιο συμπυκνωμένης (έτοιμης για χρήση), μήτρας μη ανθρώπινης πρωτεΐνης/ι ρυθμιστικού διαλύματος, με συντηρητικό. Διατήρηση: 30 ημέρες (μετά το άνοιγμα) στους 2 8 C ή 6 μήνες (διαχωρισμένα) στους 20 C. Η ανάλωση να γίνεται σύμφωνα με την ισχύουσα νομοθεσία. L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml Ετικέτες με barcode χορηγούνται για χρήση με το διάλυμα. Πριν την χρήση, τοποθετείστε μια κατάλληλη ετικέτα mm στο δοκιμαστικό σωλήνα, έτσι ώστε τα barcodes να μπορούν να διαβαστούν από κατάλληλο σύστημα. L2M2Z: 3 ετικέτες L2M2Z4: 5 ετικέτες L2SUBM: Χημειοφωταυγές υπόστρωμα L2PWSM: Πλυστικό του ανιχνευτή L2KPM: Kit καθαρισμού του ανιχνευτή LRXT: Σωλήνες αντίδρασης (μιας χρήσεως) L2ZT: 250 δοκιμαστικοί σωλήνες για διάλυση του δείγματος ( mm) L2ZC: 250 καπάκια για σωλήνες αραίωσης δείγματος IECM: Δύο επιπέδων, δείγματα ελέγχου βασισμένα σε ανθρώπινο ορό που περιέχουν IgE Απαιτούνται επίσης Απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό, δοκιμαστικοί σωλήνες, δείγματα ελέγχου Διαδικασία της Ανάλυσης Σημειώστε ότι για το βέλτιστο αποτέλεσμα, είναι σημαντικό να ακολουθηθούν όλες οι τυπικές διαδικασίες όπως ορίζονται στο εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE IMMULITE 2000 Total IgE (PIEL2KIE-5 {22}, ) 11

12 Βλέπε το εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000 για προετοιμασία, στήσιμο, αραιώσεις, ρυθμίσεις, ανάλυση και διαδικασίες ποιοτικού έλέγχου. Συνιστώμενος χρόνος μεταξύ των ρυθμίσεων: 2 εβδομάδες Δείγματα ποιοτικού ελέγχου: Χρησιμοποιήστε δείγματα ελέγχου η δείγματα ορού τουλάχιστον δύο επιπέδων (χαμηλό και υψηλό) ολικής IgE. Αναμενόμενες Τιμές Βασισμένη στη σχέση της με τη μέθοδο IMMULITE Ολική Ανοσοσφαιρίνη E (IgE) (βλ. Σύγκριση της Μεθόδου), η μέθοδος αναμένεται να έχει ουσιαστικά τις ίδιες τιμές αναφοράς για μη αλλεργικά άτομα. Ηλικία (έτη)) Μέση Τιμή (IU/mL) 95% επίπεδο εμπιστο-σύνης (IU/mL) 0 1 6, , , ,4 52 Ενήλικας 20,4 87 Θεωρείστε αυτά τα όρια μόνο σαν οδηγούς. Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να θεσπίσει τις δικές του τιμές αναφοράς. Περιορισμοί Τα επίπεδα της ολικής IgE στον ορό για την πλειονότητα των ατόμων με ασθένειες σχετιζόμενες με την IgE αναμένεται να είναι ανεβασμένα συγκρινόμενα με τα αντίστοιχα εύρη αναφοράς για τους υγιείς ενήλικες. Παρόλ αυτά, όλοι οι αλλεργικοί ασθενείς δεν εμφανίζουν αυξημένα επίπεδα ολικής IgE στον ορό. 11 Από τη στιγμή που δεν σχετίζονται όλες οι αλλεργικές αντιδράσεις με την IgE, ένα αποτέλεσμα ολικής IgE στο εύρος αναφοράς θα πρέπει πάντα να χειρίζεται υπό το φως και άλλων κλινικών παρατηρήσεων. Τεστ για αλλεργίες που σχετίζονται με την IgE μπορεί να διαφωτίσουν τα ευρήματα των ανεβασμένων αποτελεσμάτων της ολικής IgE. Ετεροφυλικά αντισώματα στον ανθρώπινο ορό μπορεί να αντιδράσουν με τις ανοσοσφαιρίνες που περιέχονται στα συστατικά της μεθόδου προκαλώντας δυσκολίες σε εργαστηριακές μεθόδους ανοσοανίχνευσης. [Bλ. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: ] Δείγματα ασθενών που, σαν ρουτίνα, εκτίθενται σε ζώα ή προϊόντα ζωικού ορού μπορούν να παρουσιάσουν αυτού του τύπου την αλληλοεπίδραση που προκαλεί δυνητικά ένα ανώμαλο αποτέλεσμα. Αυτά τα αντιδραστήρια έχουν μορφοποιηθεί έτσι, ώστε, να ελαχιστοποιούν τον κίνδυνο της αλληλοεπίδρασης παρόλ αυτά, πιθανές αλληλεπιδράσεις μεταξύ των σπάνιων ορών και των συστατικών της μεθόδου μπορεί να εμφανιστούν. Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα που λαμβάνονται από αυτή τη μέθοδο θα πρέπει πάντα να χρησιμοποιούνται σε συνδυασμό με τις κλινικές εξετάσεις, το ιατρικό ιστορικό του ασθενούς και άλλα ευρήματα. Απόδοση Βλέπε Πίνακες και Γραφήματα για δεδομένα αντιπροσωπευτικά της εκτέλεσης της μεθόδου. Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε IU/mL. (Εκτός αν κάτι σημειώνεται διαφορετικά, όλα πραγματοποιήθηκαν σε δείγματα ορών που συλλέχθηκαν σε σωλήνες χωρίς παρεμποδιστές πηκτών ή προσθετικών που προκαλούν θρόμβους.) Παράγοντας μετατροπής: IU/mL 2,4 ng/ml IU/mL 1 kiu/l Εύρος καμπύλης: μέχρι τα 2000 IU/mL. Ρυθμίστηκε με βάση το WHO 2nd IRP 75/502. Αναλυτική Ευαισθησία: 1,0 IU/mL Υψηλή-δόση Hook: Καμία επίδραση μέχρι τα IU/mL Ακρίβεια: Τα δείγματα υφίσταντο αναλύσεις εις διπλούν σε διάστημα 20 ημερών, δύο τρεξίματα την ημέρα, για σε σύνολο 40 τρεξιμάτων και 80 επαναλήψεων. (Bλ. Πίνακα Precision.) Γραμμικότητα: Τα δείγματα υφίσταντο αναλύσεις σε διαφορετικά διαλύματα. Τα αποτελέσματα δείχνουν ότι το kit IMMULITE 2000 Ολική Ανοσοσφαιρίνη E (IgE) διατηρεί καλή γραμμικότητα σε όλο το εύρος μέτρησης της καμπύλης, αλλά λόγω των ετερογενών μορίων της IgE 12 IMMULITE 2000 Total IgE (PIEL2KIE-5 {22}, )

13 στην κυκλοφορία, μπορεί να υπάρχει μια απώλεια του παραλληλισμού αραίωσης σε ορισμένους ασθενείς. (Bλ. Πίνακα "Linearity" για αντιπροσωπευτικά δεδομένα.) Ανάκτηση: Τα δείγματα 1 με 19 εμπλουτίστηκαν με τρία διαλύματα Ολικής Ανοσοσφαιρίνης E (IgE) (1750, 3500 και 7000 IU/mL). (Bλ. Πίνακα "Recovery" για αντιπροσωπευτικά δεδομένα.) Ειδικότητα: Η μέθοδος έχει υψηλή εξειδίκευση για την ανθρώπινη IgE και δεν παρουσιάζει διασταυρούμενη αντίδραση με καμιά άλλη τάξη ανθρώπινων ανοσοσφαιρινών. Χολερυθρίνη: Παρουσία χολερυθρίνης σε συγκεντρώσεις μέχρι 200 mg/l δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Αιμόλυση: Παρουσία αιμοσφαιρίνης σε συγκεντρώσεις μέχρι 384 mg/dl δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Λιπιδαιμία: Παρουσία τριγλυκεριδίων σε συγκεντρώσεις μέχρι 5000 mg/dl δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Σύγκριση της Μεθόδου: Η μέθοδος συγκρίθηκε με την αντίστοιχη IMMULITE Ολική Ανοσοσφαιρίνη E (IgE) σε 175 δείγματα. (Εύρος συγκέντρωσης: περίπου 2 με 1600 IU/mL. Βλ. Γράφημα.) Η ανάλυση γραμμικής παλινδρόμησης έδωσε τα ακόλουθα αποτελέσματα: (IML 2000) = 0,96 (IML) + 10,0 IU/mL r = 0,988 Μέσοι Όροι: 225 IU/mL (IMMULITE 2000) 223 IU/mL (IMMULITE) Τεχνική Υποστήριξη Για τεχνική υποστήριξη αποταθείτε στον αντιπρόσωπο της χώρας σας. Το Σύστημα Ποιότητας της Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. είναι επικυρωμένο με ISO 13485:2003. Polski IMMULITE 2000 IgE Całkowite Przeznaczenie: Test diagnostyczny in vitro dla analizatorów systemów IMMULITE 2000 do ilościowego oznaczenia poziomu przeciwciał klasy IgE w surowicy. Numer Katalogowy: L2KIE2 (200 testów) L2KIE6 (600 testów) Kod testu: TIE Kolor: Fioletowy Wprowadzenie Współczesne laboratoryjne metody diagnostyki alergologicznej opierają się na stosunkowo nowym odkryciu, że w wielu rodzajach alergii uczestniczą immunoglobuliny klasy IgE, stanowiąc miejsce kontaktu alergenu i wyspecjalizowanej komórki. 4,5,7,9,10 Cząsteczka IgE, o ciężarze molekularnym około wiążę się z powierzchnią mastocytów i granulocytów zasadochłonnych. 2,3 Związanie alergenu przez cząsteczkę powierzchniowej IgE stanowi bodziec dla komórki do uwolnienia histaminy i innych substancji naczyniowoczynnych, rozpoczynając w ten sposób ciąg zdarzeń rozpoznawanych jako reakcja alergiczna. 10 Dla decyzji o wyborze leczenia istotne jest rozróżnienie alergii IgE-zależnej od IgE niezależnej. 4,7 Oznaczenie poziomu całkowitej krążącej IgE wraz z innymi wspierającymi danymi diagnostycznymi, jest przydatne dla postawienia odpowiedniej diagnozy. Wspierające informacje diagnostyczne powinny dotyczyć badań w kierunku alergenowospecyficznych IgE. Pomiary poziomu całkowitej IgE w krążeniu mogą być istotne również dla wczesnego rozpoznania alergii u dzieci oraz dla prognozowania objawów atopii w przyszłości. 4,6,7 Prawidłowo poziom IgE wzrasta wraz z wiekiem i osiąga poziom charakterystyczny dla dorosłych w drugiej dekadzie życia. 1,8 W zasadzie, poziom całkowitej IgE u danej osoby wzrasta wraz z ilością kolejnych alergii i natężeniem ekspozycji na istotne alergeny. 5,7 IMMULITE 2000 Total IgE (PIEL2KIE-5 {22}, ) 13

14 Podniesiony istotnie poziom IgE poza przypadkami uczulenia, może wiązać się ze szpiczakiem, grzybicą kropidlakową płuc i aktywną fazą chorób pasożytniczych. 4,5,7,9 Zasada testu IMMULITE 2000 IgE Całkowite jest immunoenzymatycznym, chemiluminescencyjnym testem fazy stałej. Czas inkubacji: 1 30 minut Czas do pierwszego wyniku: 35 minut Preparatyka próbek Zalecane jest klarowanie próbek lipemicznych przez ultrawirowanie. Hemoliza próbki może świadczyć o nieprawidłowym postępowaniu z próbką na etapie przedlaboratoryjnym. Fakt ten należy brać pod uwagę przy interpretacji wyników. Odwirowanie próbki krwi przed zakończeniem wykrzepiania może spowodować, że w supernatancie pozostanie fibryna stanowiąca przyczynę fałszywych wyników. Przed przystąpieniem do wirowania należy mieć pewność, że skrzep jest ostatecznie uformowany. Niektóre próbki, a zwłaszcza pochodzące od osób poddanych leczeniu antykoagulantami, wymagają dłuższego czasu na wytworzenie skrzepu. W zależności od producenta probówki do pobierania krwi mogą różnie wpływać na uzyskiwane wyniki. Istotne jest tworzywo i czynniki dodatkowe jak żel lub bariery oddzielające skrzep, aktywatory krzepnięcia oraz antykoagulanty. Wpływ wszystkich możliwych wariantów probówek na test IMMULITE 2000 Całkowite IgE nie został określony. Wymagana objętość próbki: 5 µl surowicy Przechowywanie materiału: 3 dni w 2 8 C 13,15 lub 6 miesięcy w 20 C. 15 Ostrzeżenia i warunki wstępne Test diagnostyczny in vitro. Odczynniki: Przechowywać w 2 8 C. Usuwać zgodnie z instrukcją. Zachowywać środki ostrożności konieczne przy pracy z materiałem potencjalnie zakaźnym. W materiałach pochodzących z krwi ludzkiej wykluczono reaktywność w kierunku syfilisu, obecność przeciwciał anty-hiv1/2, HBsAg i przeciwciał anty-hcv. Niektóre składniki zestawu mogą zawierać jako konserwant azydek sodu w stężeniu mniejszym niż 0,1 g/dl. Wykorzystane odczynniki usuwać w dużej ilości wody, by zapobiec osadzaniu azydku sodu w rurach miedzianych lub ołowianych, co może doprowadzić do wytworzenia potencjalnie wybuchowych azydków tych metali. Substrat chemiluminescencyjny: Unikać zanieczyszczenia i chronić przed bezpośrednim światłem słonecznym (patrz ulotka). Woda: Dejonizowana lub destylowana. Elementy zestawu Elementy zestawu stanowią komplet. Zestaw działa w oparciu o kod kreskowy. IgE Całkowite Pojemnik z Kulkami (L2IE12) Oznakowany kodem kreskowym. 200 kulek opłaszczonych mysim przeciwciałem monoklonalnym anty-ige. Stabilne w 2 8 C do daty ważności. L2KIE2: 1 opakowanie L2KIE6: 3 opakowania IgE Całkowite Klin Odczynnikowy (L2IEA2) Z kodem kreskowym. 11,5 ml alkalicznej fosfatazy (izolowanej z jelita cieląt) sprzęgniętej z poliklonalnym kozim przeciwciałem anty-ige w buforze z konserwantem. Stabilny w 2 8 C do daty ważności. L2KIE2: 1 klin L2KIE6: 3 kliny Przed użyciem zerwać taśmę zabezpieczającą nie uszkadzając kodu kreskowego. Usunąć foliową uszczelką komór odczynnikowych. Wsunąć przesuwne zamknięcie komór w prowadnice w pokrywie klina. IgE Całkowite Kalibratory (LIEL, LIEH) Dwie fiolki (niski i wysoki), po 2,5 ml IgE w matrycy buforowanej surowicy zwierzęcej, z konserwantem. Po otwarciu stabilne przez 30 dni w 2 8 C lub 6 miesięcy w 20 C (rozpipetować). L2KIE2: 1 zestaw L2KIE6: 2 zestawy 14 IMMULITE 2000 Total IgE (PIEL2KIE-5 {22}, )

15 Przed wykonaniem kalibracji umocować na probówkach odpowiednie nalepki z kodem kreskowym (dostarczane z zestawem) rozpoznawane przez czytnik kodów kreskowych aparatu. Materiały dostarczane oddzielnie Multi-Diluent 2 (L2M2Z, L2M2Z4) Do automatycznego rozcieńczania badanych próbek. Jedna fiolka koncentrowanej, gotowej do użycia zwierzęcej matrycy białkowej w buforze z konserwantem. Po otwarciu stabilny w 2 8 C przez 30 dni lub przez 6 miesięcy (rozpipetować) w 20 C. Usuwać zgodnie z instrukcją. L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml Wraz z rozcieńczalnikiem dostarczane są nalepki z kodami kreskowymi. Nalepkę umieścić na probówce (16 x 100 mm), by umożliwić jej rozpoznanie przez czytnik kodów aparatu. L2M2Z: 3 nalepki L2M2Z4: 5 nalepek L2SUBM: Substrat chemiluminescencyjny L2PWSM: Roztwór płuczący L2KPM: Zestaw czyszczący LRXT: Probówki reakcyjne (jednorazowe) L2ZT: 250 probówek do rozcieńczania próbek mm L2ZC: 250 korków do probówek na rozcieńczalnik IECM: IgE Całkowite dwupoziomowa kontrola Ponadto niezbędne woda destylowana lub dejonizowana, probówki, kontrole Procedura oznaczenia Przestrzeganie procedur dotyczących utrzymania aparatu, zawartych w Podręczniku operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000 poprawia charakterystykę uzyskiwanych wyników. Procedury: przygotowania aparatu, ustawień aparatu, przygotowania i rozcieńczania próbek, rekalibracji, oznaczenia i kontroli jakości zgodnie z Podręcznikiem operatora do obsługi systemów IMMULITE Zalecany odstęp pomiędzy rekalibracjami: 2 tygodnie Próbki kontrolne: stosować kontrole lub pule surowic co najmniej o niskim i wysokim poziomie IgE całkowitego. Oczekiwane wartości Opierając się na pokrewieństwie z testem IMMULITE IgE Całkowite (patrz porównanie metod), można oczekiwać, że zakresy wartości referencyjnych dla tych testów dla osób bez alergii będą identyczne. Wiek (lata) Mediana (IU/mL) 95% (IU/mL) 0 1 6, , , ,4 52 Dorośli 20,4 87 Powyższe wartości należy traktować jako orientacyjne. Każde laboratorium powinno wyznaczyć własne zakresy referencyjne. Ograniczenia Poziom IgE całkowitych u większości osób chorych na choroby IgE-zależne może być podniesiony w stosunku do wartości referencyjnych. Wzrost całkowitej IgE nie jest jednakże regułą dla alergików. 11 Ponieważ nie we wszystkich reakcjach atopowych pośredniczy IgE, interpretacji wyników poziomu całkowitej IgE pozostających w zakresie należy dokonywać w kontekście innych obserwacji klinicznych. Interpretacja wyników IgE całkowitego może być klarowniejsza dzięki zastosowaniu oznaczeń IgE specyficznych. Przeciwciała heterofilne obecne w surowicy ludzkiej mogą wchodzić w reakcję z immunoglobulinami będącymi reagentami testu immunologicznego, wpływając na przebieg oznaczenia in vitro. [Porównaj: Boscato L.M., Stuart M.C.: Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays Przeciwciała heterofilne problem wszystkich testów immunologicznych. Clin Chem 1988:34: 27-33]. Wpływ przeciwciał heterofilnych może ujawnić się w oznaczeniach wykonywanych w surowicy osób mających IMMULITE 2000 Total IgE (PIEL2KIE-5 {22}, ) 15

16 ciągły kontakt ze zwierzętami lub zwierzęcymi produktami krwiopochodnymi, stanowiąc potencjalną przyczynę błędnych wyników. W teście ryzyko interferencji przeciwciał heterofilnych zostało zminimalizowane przez odpowiedni dobór proporcji odczynników, tym niemniej interferencja taka może potencjalnie nastąpić w rzadkich przypadkach. W postępowaniu diagnostycznym wyniki uzyskane tą metodą powinny być z zasady interpretowane w połączeniu z badaniem klinicznym pacjenta, jego historią choroby oraz innymi okolicznościami. Parametry testu Dane charakteryzujące test przedstawiono w tabelach i wykresach. Wyniki podano w IU/mL. (O ile nie podano inaczej, wszystkie wyniki dotyczą surowicy, a próbki pobierano do probówek bez bariery żelowej i substancji przyspieszających krzepnięcie.) Przelicznik: IU/mL 2.4 ng/ml IU/mL 1 kiu/l Zakres kalibracji: do 2000 IU/mL. Standaryzacja według WHO 2nd IRP 75/502. Czułość analityczna: 1,0 IU/mL Efekt wysokiej dawki Hook Effect: Nie występuje do stężenia IU/mL Precyzja: Próbki oznaczano przez okres 20 dni w duplikatach, dwa razy dziennie, co dało w sumie 40 serii i 80 powtórzeń. (Patrz: Tabela Precyzja.) Liniowość: Oznaczano próbki poddane kolejnym rozcieńczeniom Wykazano dobrą liniowość testu w obrębie zakresu kalibracji. Ze względu na różnice powinowactwa związane z różnorodnością krążących IgE w pewnych osób można oczekiwać odstępstw od liniowości. (Patrz: Tabela Liniowość.) Odzysk: Oznaczano próbki surowic wzbogacane w stosunku objętościowym 1 do 19 roztworami IgE całkowitego o stężeniach, kolejno: 1750, 3500 i 7000 IU/mL. (Patrz: Tabela Odzysk.) Specyficzność: Przeciwciało jest wysoce specyficzne w stosunku do ludzkich IgE, i nie wykazuje reakcji krzyżowych z przeciwciałami ludzkimi innych podklas. Bilirubina: Obecność bilirubiny w stężeniu do 200 mg/l nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Hemoliza: Obecność hemoglobiny w stężeniu do 384 mg/dl nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Lipemia: Obecność trójglicerydów w ilości do 5000 mg/dl nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Porównanie metod: Wyniki porównywano z wynikami uzyskanymi przy użyciu testu IMMULITE IgE Całkowite w grupie 175 próbek. (Zakres stężeń: od około 2 do 1600 IU/mL. Porównaj wykres.) Otrzymano następujące równanie regresji liniowej: (IML 2000) = 0,96 (IML) + 10,0 IU/mL r = 0,988 Średnie: 225 IU/mL (IMMULITE 2000) 223 IU/mL (IMMULITE) Pomoc techniczna i konsultacje Krajowy Dystrybutor udziela wszechstronnej pomocy technicznej. System Kontroli Jakości Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. posiada Certyfikat Jakości ISO 13485:2003. IMMULITE is a trademark of Siemens Healthcare Diagnostics Siemens Healthcare Diagnostics. All rights reserved. Origin: UK Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. Llanberis, Gwynedd LL55 4EL United Kingdom PIEL2KIE 5 {22} Changes in this Edition: cc#eu21882: Added Time to First Result to the Principle of the Procedure section. 16 IMMULITE 2000 Total IgE (PIEL2KIE-5 {22}, )

17 Understanding the Symbols Understanding the Symbols En English Vysvětlivky symbolů Επεξήγηση των συμβόλων Znaczenie symboli Cz Česky El Ελληνικά Pl Polski The following symbols may appear on the product labeling: / Na štítku výrobku mohou být uvedeny následující symboly: / Τα ακόλουθα σύμβολα ενδέχεται να εμφανίζονται στην επισήμανση του προϊόντος: / Na etykietach produktu mogą pojawiać się poniższe symbole: Symbol Definition En: In vitro diagnostic medical device Cz: Zdravotnický prostředek pro in vitro diagnostiku El: In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή Pl: Sprzęt do medycznej diagnostyki in vitro En: Catalog Number Cz: Katalogové číslo El: Αριθμός καταλόγου Pl: Numer katalogowy En: Manufacturer Cz: Výrobce El: Κατασκευαστής Pl: Producent En: Authorized Representative in the European Community Cz: Autorizované zastoupení v Evropské unii El: Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα Pl: Autoryzowany przedstawiciel w Unii Europejskiej En: CE Mark Cz: CE značka El: Σήμανση CE Pl: Znak CE En: CE Mark with identification number of notified body Cz: CE značka s identifikačním číslem notifikovaného orgánu El: Σήμανση CE με αριθμό αναγνώρισης του φορέα πιστοποίησης Pl: Znak CE z numerem identyfikacyjnym jednostki notyfikowanej LOT Symbol Definition En: Consult instructions for use Cz: Postupujte podle návodu k použití El: Συμβουλευτείτε τις οδηγίες λειτουργίας Pl: Zapoznać się z instrukcją użycia En: Caution! Potential Biohazard Cz: Pozor! Potenciální biohazard El: Πρoσοχή! Δυνητικός βιολογικός κίνδυνος Pl: Uwaga! Potencjalne zagrożenie biologiczne En: Temperature limitation (2 8 C) Cz: Teplotní rozsah (2 8 C) El: Περιορισμός θερμοκρασίας (2 8 C) Pl: Zakres temperatury (2 8 C) En: Upper limit of temperature ( -20 C) Cz: Horní teplotní limit ( -20 C) El: Ανώτερο όριο θερμοκρασίας ( -20 C) Pl: Górny zakres temperatury ( -20 C) En: Lower limit of temperature ( 2 C) Cz: Spodní teplotní limit ( 2 C) El: Κατώτερο όριο θερμοκρασίας ( 2 C) Pl: Dolny zakres temperatury ( 2 C) En: Do not freeze (> 0 C) Cz: Nezmrazovat (> 0 C) El: Μην καταψυχετε (> 0 C) Pl: Nie zamrażać (> 0 C) En: Do not reuse Cz: Pro jednorázové použití El: Μην κάνετε επαναληπτική χρήση Pl: Nie używać powtórnie En: Keep away from sunlight Cz: Chraňte před slunečním světlem El: Διατηρείτε μακριά από το ηλιακό φως Pl: Chronić przed światłem słonecznym En: Batch code Cz: Šarže El: Κωδικός παρτίδας Pl: Kod serii IMMULITE 2000 Total IgE (PIEL2KIE-5 {22}, ) 17