Total T4. For use on IMMULITE 2000 systems

Transcript

1 Total T4 For use on IMMULITE 2000 systems

2 IMMULITE 2000 Total T4 English Intended Use: For in vitro diagnostic use with the IMMULITE 2000 Systems Analyzers for the quantitative measurement of total circulating thyroxine (T4) in serum, as an aid in the clinical assessment of thyroid status. Catalog Numbers: L2KT42 (200 tests), L2KT43M (3000 tests), L2KT46 (600 tests), L2KT46M (6000 tests) Test Code: TT4 Color: Light Blue Summary and Explanation Thyroxine (T4), the principal thyroid hormone, normally circulates at a level of approximately 4.5 to 12.5 µg/dl (58 to 161 nmol/l), largely bound to transport proteins, especially TBG. Given normal levels of thyroid hormone-binding proteins, hyperthyroidism is characterized by increased levels of circulating T4, hypothyroidism by decreased levels. Exceptions to this parallelism between thyroid status and total T4 concentration are found, however, in patients with abnormal levels of thyroid-binding proteins. Levels of TBG are known to be altered under various physiological, pharmacological and genetic conditions. Thus, elevated T4 levels may be obtained when TBG levels are high, as in pregnancy, acute intermittent porphyria, hyperproteinemia, hereditary TBG elevation and in patients undergoing estrogen therapy or taking oral contraceptives. Total T4 levels may be depressed when TBG levels are low, as in nephrotic, hepatic, gastrointestinal and neoplastic disorders; in acromegaly, hypoproteinemia and hereditary TBG deficiency; and in patients undergoing androgen, testosterone or anabolic steroid therapy. Diphenylhydantoin and large doses of salicylates and liothyronine may also cause low T4 values (not reflective of thyroid status) due to their competition for binding sites on TBG. Because the total T4 level is often abnormal in euthyroid subjects and because it may be normal in subjects with abnormal thyroid function, an estimate of the level of circulating TBG is desirable, as given for example by a T3 Uptake assay. In disorders of thyroid function, the total T4 and the T3 Uptake values will deviate from normal in the same direction, whereas in euthyroid patients with the TBG alterations they will deviate in opposite directions. The product of the T4 and the T3 Uptake values, divided by 100, is known as the Free Thyroxine Index (FT4I), a widely used indicator of thyroid status. Principle of the Procedure IMMULITE 2000 Total T4 is a solid-phase, competitive chemiluminescent enzyme immunoassay. Incubation Cycles: 1 30 minutes Specimen Collection EDTA plasma should not be used as a sample type. The use of an ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples. Hemolyzed samples may indicate mistreatment of a specimen before receipt by the laboratory; hence the results should be interpreted with caution. Centrifuging serum samples before a complete clot forms may result in the presence of fibrin. To prevent erroneous results due to the presence of fibrin, ensure that complete clot formation has taken place prior to centrifugation of samples. Some samples, particularly those from patients receiving anticoagulant therapy, may require increased clotting time. Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE 2000 Total T4 has not been tested with all possible variations of tube types. Consult the section on Alternate Sample Types for details on tubes that have been tested. Volume Required: 15 µl serum 2 IMMULITE 2000 Total T4 (PIEL2KT4-7 {23}, )

3 Storage: 7 days at 2 8 C, or 2 months at 20 C. Warnings and Precautions For in vitro diagnostic use. Reagents: Store at 2 8 C. Dispose of in accordance with applicable laws. Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C. Sodium azide, at concentrations less than 0.1 g/dl, has been added as a preservative. On disposal, flush with large volumes of water to prevent the buildup of potentially explosive metal azides in lead and copper plumbing. Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert.) Water: Use distilled or deionized water. Materials Supplied Components are a matched set. Labels on the inside box are needed for the assay. Total T4 Bead Pack (L2T412) With barcode. 200 beads, coated with monoclonal murine anti-t4. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KT42: 1 pack L2KT43M: 15 packs L2KT46: 3 packs L2KT46M: 30 packs Total T4 Reagent Wedge (L2T4A2) With barcode. 21 ml alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to T4, with preservative, dispensed equally into chambers A and B. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KT42: 1 wedge L2KT46: 3 wedges L2KT43M: 15 wedges L2KT46M: 30 wedges Before use, tear off the top of the label at the perforations, without damaging the barcode. Remove the foil seal from the top of wedge; snap the sliding cover down into the ramps on the reagent lid. Total T4 Adjustors (LT4L, LT4H) Two vials (Low and High), 2 ml each, of T4 in processed human serum, with preservative. Stable at 2 8 C for 30 days after opening, or for 6 months (aliquotted) at 20 C. L2KT42: 1 set L2KT43M: 3 sets L2KT46: 2 sets L2KT46M: 4 sets Before making an adjustment, place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes so that the barcodes can be read by the on-board reader. Kit Components Supplied Separately Multi-Diluent 1 (L2M1Z) For the on-board dilution of high samples. One vial of concentrated (ready-to-use) processed, normal human serum, containing undetectable to low levels of total T4, with preservative. Stable at 2 8 C for 30 days after opening, or for 6 months (aliquotted) at 20 C. L2M1Z: 25 ml Barcode labels are provided for use with the diluent. Before use, place an appropriate label on a mm test tube, so that the barcodes can be read by the on-board reader. L2M1Z: 3 labels L2SUBM: Chemiluminescent Substrate L2PWSM: Probe Wash L2KPM: Probe Cleaning Kit LRXT: Reaction Tubes (disposable) L2ZT: 250 Sample Diluent Test Tubes ( mm) L2ZC: 250 Sample Diluent Tube Caps Also Required Distilled or deionized water; test tubes; controls. Assay Procedure Note that for optimal performance, it is important to perform all routine maintenance procedures as defined in the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual. See the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual for preparation, setup, dilutions, adjustment, assay and quality control procedures. Recommended Adjustment Interval: 2 weeks IMMULITE 2000 Total T4 (PIEL2KT4-7 {23}, ) 3

4 Quality Control Samples: Follow government regulations or accreditation requirements for quality control frequency. Use controls or serum pools with at least two levels (low and high) of T4. Siemens Healthcare Diagnostics recommends the use of commercially available quality control materials with at least 2 levels (low and high). A satisfactory level of performance is achieved when the analyte values obtained are within the Acceptable Control Range for the system, or within an established range determined by an appropriate internal laboratory quality control scheme. Expected Values Based on its relationship to IMMULITE Total T4 (see Method Comparison), the assay can be expected to have essentially the same reference ranges for adults: µg/dl ( nmol/l) Reference ranges were generated using serum samples collected in glass tubes without gel barriers or clot-promoting additives. A cross-sectional study of pediatric values performed with IMMULITE Total T4 at a "wellness" clinic in the southwestern United States yielded the following results. (The blood collection tubes used have not been identified.) Age (years) Median (µg/dl) Central 95% Range Consider these limits as guidelines only. Each laboratory should establish its own reference ranges. Limitations Many physiological, pharmacological, pathological, and genetic factors affect the interpretation of total T4 results. (Refer to the Summary and Explanation section.) More than 20% of patients with non-thyroidal disease who are critically ill have low serum T4 levels. Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: ] Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings. Performance Data See Tables and Graphs for data representative of the assay's performance. Results are expressed in µg/dl. (Unless otherwise noted, all were generated on serum samples collected in tubes without gel barriers or clot-promoting additives.) Conversion Factor: µg/dl nmol/l Calibration Range: 1.0 to 24 µg/dl (13 to 309 nmol/l) The assay is traceable to an internal standard manufactured using qualified materials and measurement procedures. Analytical Sensitivity: 0.3 µg/dl (3.9 nmol/l) Precision: Samples were assayed in duplicate over the course of 20 days, two runs per day, for a total of 40 runs and 80 replicates. (See "Precision" table.) Linearity: Samples were assayed under various dilutions. (See "Linearity" table for representative data.) 4 IMMULITE 2000 Total T4 (PIEL2KT4-7 {23}, )

5 Recovery: Samples spiked 1 to 19 with three T4 solutions (42, 90 and 150 µg/dl), were assayed. (See "Recovery" table for representative data.) Specificity: The antibody is highly specific for T4. (See "Specificity" table.) Bilirubin: Presence of bilirubin in concentrations up to 200 mg/l has no effect on results, within the precision of the assay. Hemolysis: Presence of hemoglobin in concentrations up to 512 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Lipemia: Presence of triglycerides in concentrations up to 5000 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Alternate Sample Type: To assess the effect of alternate sample types, blood was collected from 20 volunteers into plain, heparinized and Becton Dickinson SST vacutainer tubes. Equal volumes of the matched samples were spiked with various concentrations of Total T4, to obtain values throughout the calibration range of the assay, and then assayed by the IMMULITE 2000 Total T4 procedure. (Heparin) = 0.89 (Serum) µg/dl r = (SST) = 1.01 (Plain Tubes) µg/dl r = Means: 7.72 µg/dl (Serum) 7.51 µg/dl (Heparin) 8.21 µg/dl (SST) Method Comparison: The assay was compared to IMMULITE Total T4 on 276 samples. (Concentration range: approximately 3 to 24 µg/dl. See graph.) By linear regression: (IML 2000) = 0.93 (IML) µg/dl r = Means: 9.2 µg/dl (IMMULITE 2000) 9.3 µg/dl (IMMULITE) References 1) Albertini A, Ekins RP, editors. Free hormones in blood. Amsterdam: Elsevier Biomedical Press, ) Britton KE, Quinn V, Brown BL, Ekins RP. A strategy for thyroid function tests. Br Med J 1975; iii: ) Ekins RP, editor. Free thyroid hormones. Amsterdam: Excerpta Medica, ) Gershengorn MC, Glinoer D, Robbins J. Transport and metabolism of thyroid hormones. In: Visscher M De, editor. The thyroid gland. New York: Raven Press, 1980: ) Prince HP, Ramsden DB. A new theoretical description of the binding of thyroid hormones by serum proteins. Clin Endocrinol 1977;7: ) Refetoff S. Thyroid hormone transport. In: DeGroot LJ, editor. Endocrinology. Philadelphia: Grune and Stratton, 1979;1: ) Refetoff S. Thyroid function tests. In: DeGroot LJ, editor. Endocrinology, Philadelphia: Grune and Stratton, 1979;1: ) Robbins J, Johnson ml. Theoretical considerations in the transport of thyroid hormones in blood. In: Ekins RP, editor. Free thyroid hormones. Amsterdam: Excerpta Medica, 1979: ) Robbins J, Rall JE. The iodine-containing hormones. In: Gray CH, James VHT, editors. Hormones in blood. London: Academic Press, 1979: ) Slag MF, Morley JE, Elson MK, et al. Hypothyroxinemia in critically ill patients as a predictor of high mortality. JAMA 1981;245: ) Walfish PG. Thyroid physiology and pathology. In: Collu R Jr, Ducharme H, Guyda, editors. Pediatric endocrinology. New York: Raven Press, 1981: )Wenzel KW. Pharmacological interference with in vitro tests of thyroid function. Metabolism 1981;30: Technical Assistance For technical assistance, contact your National Distributor. The Quality System of Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. is certified to ISO 13485:2003. Tables and Graphs Precision (µg/dl) Within-Run 1 Total 2 Mean 3 SD 4 CV 5 SD CV % % % % % % % % % % % % % % Česky. 1 V rámci stanovení, 2 Celkem, 3 Střední hodnota, 4 Směrodatná odchylka, 5 Variační koeficient. Ελληνικά. 1 Κατά την ίδια περίοδο, 2 Συνολικά, 3 Μέσος όρος, 4 SD, 5 CV. Polski. 1 W serii, 2 Całość, 3 Średnie, 4 SD, 5 CV. IMMULITE 2000 Total T4 (PIEL2KT4-7 {23}, ) 5

6 Recovery (µg/dl) Solution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E A % B % C % A % B % C % A % B % C % Česky. 1 Roztok, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 Naměřená / Očekávaná. Ελληνικά. 1 Διάλυμα, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E. Polski. 1 Roztwór, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O. Linearity (µg/dl) Dilution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E in in % 2 in % 1 in % 2 8 in in % 2 in % 1 in % 3 8 in in % 2 in % 1 in % 4 8 in in % 2 in % 1 in % Česky. 1 Ředění, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 % Naměřená / Očekávaná, 5 8 v 8. Ελληνικά. 1 Αραίωση, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E, 5 8 στα 8. Polski 1 Rozcieńczenie, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O, 5 8 w 8. Specificity (µg/dl) Compound 1 Amount Added 2 % Cross reactivity 3 L-Thyroxine (T4) 100% D-Thyroxine 10 74% Tetraiodothyroacetic acid 10 50% Triiodo-L-thyronine (T3) % Reverse T3 25 ND Triiodo-D-thyronine 1 ND Triiodothyroacetic acid % ND Monoiodotyrosine 1000 ND Diiodo-L-tyrosine 1000 ND Methimazole 1000 ND 5,5'-Diphenylhydantoin 1000 ND Phenylbutazone 1000 ND 6-n-Propyl-2-thiouracil 1000 ND ND: Not detectable. 4 Česky. 1 Sloučenina, 2 Přidané množství, 3 % Zkřížená reaktivita, 4 ND: nezjistitelné. Ελληνικά. 1 Μείγμα, 2 Προστέθηκαν, 3 % Διασταυρ.Αντίδραση, 4 ND: Μη ανιχνεύσιμη ποσότητα. Polski. 1 Składnik, 2 Ilość dodana, 3 % Reaktywności krzyżowej, 4 ND: nieoznaczalne. Method Comparison IMMULITE 2000 Total T IMMULITE Total T4, µg/dl (IML 2000) = 0.93 (IML) µg/dl r = English. Total T4 Česky. Celkový T4. Ελληνικά. Ολική Θυροξίνη (T4). Polski. Całkowita T4. 6 IMMULITE 2000 Total T4 (PIEL2KT4-7 {23}, )

7 Česky IMMULITE 2000 Celkový T4 Použití : Pro in vitro diagnostické použití na analyzátorech IMMULITE 2000 ke stanovení koncentrace cirkulujícího thyroxinu (T4) v séru, jakožto pomůcky při sledování stavu štítné žlázy. Katalogová čísla : L2KT42 (200 stanovení) L2KT46 (600 stanovení) L2KT43M (3000 stanovení) L2KT46M (6000 stanovení) Kód metody : TT4 Barva : Světle modrá Shrnutí a vysvětlení Tyroxin (T4) je základní hormon štítné žlázy, který normálně cirkuluje v množství přibližně 4,5 až 12,5 µg/dl (58 až 161 nmol/l), povětšině vázaný na transportní bílkoviny, zejména TBG. Při normální koncentraci bílkovin vázajících hormony štítné žlázy je hypertyroidizmus charakterizovaný zvýšenou hladinou T4 v cirkulaci a hypotyroidizmus jeho sníženou hladinou. Existují však i výjimky této paralely mezi stavem štítné žlázy a koncentrací celkového T4, a to u pacientů s abnormálními hladinami vazebných bílkovin štítné žlázy. Jsou známé změny koncentrace TBG za různých fyziologických, farmakologických a genetických podmínek. Proto je koncentrace T4 zvýšená při vysoké hladině TBG, např. v těhotenství, při akutní intermitentní porfyrii, hyperproteinémii, dědičně zvýšené hladině TBG a u pacientů podstupujících léčbu estrogenem nebo osob užívajících orální antikoncepci. Hladina celkového T4 může klesnout při nízké koncentraci TBG, např. při ledvinových, jaterních, GIT a nádorových onemocněních, při akromegalii, hypoproteinémii a při dědičném nedostatku TBG, a rovněž u pacientů podstupujících léčbu androgenem, testosteronem nebo anabolickými steroidy. Difenylhydantoin a velké dávky salicylátů a liotyroninu můžou rovněž způsobit nízkou hladinu T4 (neodráží stav štítné žlázy) kvůli jejich konkurování si při obsazování vazebných míst na TBG. Protože koncentrace celkového T4 je často abnormální u eutyroidních pacientů a naopak může být normální u pacientů s abnormální funkcí štítné žlázy, je žádoucí určit množství TBG v cirkulaci. To umožňuje například test T3 Uptake. Při poruchách funkce štítné žlázy se hodnoty celkového T4 a T3 Uptake budou lišit od normálu stejným směrem, zatímco u eutyroidních pacientů se změnami TBG budou odchylky od normálu navzájem opačné. Výsledek hodnot T4 a T3 Uptake vydělený 100 je známý jako index volného tyroxinu (Free Thyroxine Index FT4I), obecně používaný ukazatel stavu štítné žlázy. Princip stanovení Stanovení Celkový T4 na analyzátorech IMMULITE 2000 je konkurenční chemiluminiscenční imunochemická reakce v pevné fázi. Inkubační cykly : 1 30 minut Odebírání vzorků Použití EDTA plazmy se nedoporučuje. K úpravě lipemických vzorků se doporučuje použití ultracentrifugy. Hemolyzované vzorky můžou být známkou nesprávného zacházení s preparátem ještě před přijetím do laboratoře ; proto by výsledky měly být interpretovány s obezřetností. Centrifugace vzorků séra ještě před úplným vysrážením může mít za následek přítomnost fibrinu. Chybným výsledkům způsobeným přítomností fibrinu lze zamezit úplným vysrážením vzorků před jejich centrifugací. Některé vzorky, zejména od pacientů podstupujících antikoagulační léčbu, může srážlivost vyžadovat více času. Použití zkumavek pro odběr krve od různých výrobců může poskytovat rozličné hodnoty v závislosti na materiálech a přísadách, včetně gelových nebo fyzických bariér, aktivátorů srážení a/nebo antikoagulačních činidel. Stanovení Celkový T4 na analyzátorech IMMULITE 2000 nebylo testováno se všemi možnými varianty jednotlivých typů zkumavek. Informace o testovaných IMMULITE 2000 Total T4 (PIEL2KT4-7 {23}, ) 7

8 zkumavkách najdete v části o alternativních typech vzorků. Potřebný objem vzorku : 15 μl séra Skladování : 7 dní při teplotě 2 8 C nebo 2 měsíce při teplotě 20 C. Upozornění a bezpečnostní opatření Pro in vitro diagnostické použití. Reagencie : Skladujte při teplotě 2 8 C. Likvidujte v souladu s platnými předpisy. Řiďte se obecnými pravidly bezpečnosti práce a se všemi komponenty nakládejte, jako by byly potenciálně infekční. Zdrojové materiály získané z lidské krve byly testovány a shledány nereaktivní na syfilis, na protilátky proti HIV 1 a 2, na povrchový antigen hepatitidy typu B (HbsAg), a na protilátky proti hepatitidě typu C. Jako konzervační látka byl přidán d sodný v koncentracích menších než 0,1 g/dl. Při likvidaci vypláchněte velkým množstvím vody, aby se zamezilo nahromadění potenciálně výbušných azidů kovů v olověném a měděném potrubí. Chemiluminiscenční substrát : Vyvarujte se kontaminace a nevystavujte přímému slunečnímu světlu. (Viz připojený letáček.) Voda : Použijte destilovanou nebo deionizovanou vodu. Dodaný materiál Komponenty představují ucelenou sadu. Pro stanovení jsou zapotřebí štítky na vnitřní krabici. Celkový T4 zásobník s kuličkami (L2T412) Opatřeno čárovým kódem. 200 kuliček potažených monoklonální myší protilátkou proti T4. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KT42 : 1 balení L2KT43M : 15 balení L2KT46 : 3 balení L2KT46M : 30 balení Celkový T4 reagencie (L2T4A2) Opatřeno čárovým kódem. 21 ml alkalické fosfatázy (z telecího střeva) konjugované s T4, s konzervačním prostředkem, rovnoměrně rozdělené do komor A a B. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KT42 : 1 nádobka L2KT46 : 3 nádobky L2KT43M : 15 nádobek L2KT46M : 30 nádobek Před použitím utrhněte vršek štítku v perforovaném místě, ale nepoškoďte čárový kód. Z vrchu nádobky odstraňte uzavírací fólii; posuvný uzávěr zaklapněte do ramp na víčku reagencie. Celkový T4 kalibrátory (LT4L, LT4H) Dvě ampulky, každá 2 ml, s vysokou a nízkou koncentrací T4 ve zpracovaném lidském séru, s konzervačním prostředkem. Stabilní 30 dní po otevření při teplotě 2 8 C nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při 20 C. L2KT42 : 1 sada L2KT43M : 3 sady L2KT46 : 2 sady L2KT46M : 4 sady Před adjustací nalepte na testovací zkumavky příslušné alikvotní štítky (dodané se soupravou) tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. Materiál dodávaný zvlášť Multidiluent 1 (L2M1Z) Pro automatické ředění koncentrovaných vzorků. Jedna ampulka koncentrovaného (připraveného k použití) zpracovaného normálního lidského séra obsahujícího nezjistitelné až malé množství celkového T4, s konzervačním prostředkem. Stabilní 30 dní po otevření při teplotě 2 8 C nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při teplotě 20 C. L2M1Z : 25 ml Štítky s čárovými kódy jsou určeny pro diluent. Před použitím nalepte příslušný štítek na testovací zkumavku mm tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. L2M1Z : 3 štítky L2SUBM : Chemiluminiscenční substrát L2PWSM : Promývací roztok L2KPM : Čistící roztok na jehly LRXT : Reakční zkumavky (na jedno použití) L2ZT : 250 testovacích zkumavek na diluent vzorků ( mm) L2ZC : 250 uzávěrů na testovací zkumavky na diluent vzorků Dále potřebujete Destilovanou nebo deionizovanou vodu ; testovací zkumavky, kontroly. 8 IMMULITE 2000 Total T4 (PIEL2KT4-7 {23}, )

9 Postup stanovení K dosažení optimálního výkonu je důležité provádět veškerou pravidelnou údržbu stanovenou v manuálu k analyzátorům IMMULITE V manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000 najdete postupy : přípravy, nastavení, ředění, adjustace, stanovení vzorků a kontrol. Doporučený interval mezi adjustacemi : 2 týdny Vzorky ke kontrole kvality : Pokud jde o četnost kontroly kvality, je třeba řídit se platnými předpisy a akreditačními požadavky. Použijte kontroly nebo směsné vzorky s alespoň dvěmi koncentracemi T4 (vysokou a nízkou). Společnost Siemens Healthcare Diagnostics doporučuje používat obchodně dostupné materiály kontroly kvality o přinejmenším dvou koncentracích vysoké a nízké. Vyhovující funkčnosti se dosahuje, pokud zjištěné hodnoty analytu leží uvnitř přijatelného kontrolního rozmezí analyzátoru nebo uvnitř rozmezí stanoveného příslušným interním systémem kontroly kvality dané laboratoře. Očekávané hodnoty Vzhledem k příbuznosti s testem Celkový T4 na analyzátoru IMMULITE (viz Srovnání metody) se dá předpokládat, že toto stanovení bude mít prakticky stejná referenční rozmezí pro dospělou populaci : 4,5 12,5 µg/dl ( nmol/l) Pro stanovení referenčního rozmezí byly použity skleněné odběrové zkumavky bez gelových bariér a srážedel. Průřezová studie pediatrických hodnot určených testem Celkový T4 na analyzátoru IMMULITE na "wellness" klinice na jihozápadě Spojených států přinesla následující výsledky. (Typ odběrových zkumavek nebyl uveden). Věk (roky) Medián (µg/dl) Rozmezí středních 95 % 1,0 9,2 3,52 17,4 2,0 8,9 3,53 16,8 3,0 8,6 3,70 15,7 4,0 8,3 3,91 14,4 5,0 8,2 3,97 13,8 6,0 8,0 4,02 13,3 7,0 7,8 4,06 12,9 8,0 7,7 4,09 12,5 9,0 7,6 4,12 12,1 10,0 7,5 4,15 11,8 11,0 7,4 4,17 11,5 12,0 7,3 4,19 11,2 Uvedené hranice považujte pouze za orientační. Každá laboratoř by si měla stanovit svoje vlastní referenční rozmezí. Omezení Interpretaci hodnot celkového T4 ovlivňují mnohé fyziologické, farmakologické, patologické a genetické faktory. (Viz část Shrnutí a vysvětlení.) Více než 20 % pacientů s těžkou chorobou jinou než onemocnění štítné žlázy má nízkou hladinu T4 v séru. Heterofilní protilátky v lidském séru můžou reagovat s imunoglobuliny obsaženými v komponentech soupravy a způsobit interference s in vitro imunologickým stanovením. [Viz Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all imunologickým stanovením. Clin Chem 1988:34:27-33.] Vzorky pacientů rutinně vystavené kontaktu se zvířaty nebo produkty zvířecího séra můžou vykázat tento typ interference a potenciálně způsobit anomální výsledky. Tyto reagencie byly vyvinuty tak, aby bylo riziko interference minimalizováno; nicméně případné interakce mezi ojedinělými séry a komponenty testu se můžou vyskytnout. Pro diagnostické účely by se výsledky tohoto stanovení měly vždy používat v kombinaci s klinickými zkouškami, zdravotní historií pacienta a ostatními nálezy. IMMULITE 2000 Total T4 (PIEL2KT4-7 {23}, ) 9

10 Znaky metody Reprezentativní výsledky stanovení najdete v části Tabulky a grafy. Výsledky se udávají v µg/dl. (Pokud není uvedeno jinak, všechny výsledky byly získány na vzorcích séra odebraných do zkumavek bez gelových bariér nebo přísad podporujících srážlivost.) Konverzní faktor : µg/dl 12,87 nmol/l Kalibrační rozsah : 1,0 až 24 µg/dl (13 až 309 nmol/l) Souprava má návaznost na mezinárodní standard vyrobený s použitím schválených materiálů a měřících procesů. Analytická citlivost : 0,3 µg/dl (3,9 nmol/l) Přesnost : Vzorky byly stanovovány dvojmo v průběhu 20 dní, dva testy denně, celkem 40 testů a 80 replikátů. (Viz tabulka "Precision".) Linearita : Stanovení vzorků bylo provedeno při rozličném ředění. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce "Linearity".) Zpětná výtěžnost : Bylo provedeno stanovení vzorků séra s přídavkem tří roztoků T4 (42, 90 a 150 µg/dl) v poměru 1 : 19. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce "Recovery".) Specificita : Protilátka je silně specifická vůči T4. (Viz tabulka "Specificity".) Bilirubin : Přítomnost bilirubinu v koncentracích do 200 mg/l nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Hemolýza : Přítomnost hemoglobinu v koncentracích do 512 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Lipémie : Přítomnost lipémie v koncentracích do 5000 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Alternativní typ vzorku : K určení vlivu alternativního typy vzorku jsme metodou Celkový T4 na analyzátorech IMMULITE 2000 stanovili vzorky od 20 dobrovolníků odebrané do obyčejných, heparinizovaných a Becton Dickinson SST vacutainer zkumavek. Do úměrných objemů odpovídajících vzorků byly přidány roztoky s různou koncentrací celkového T4, abychom získali hodnoty z celého kalibračního rozsahu stanovení. Vzorky byly následně stanoveny uvedenou metodou (Heparin) = 0,89 (Sérum) + 0,61 µg/dl r = 0,987 (SST) = 1,01 (obyčejné zkumavky) + 0,42 µg/dl r = 0,971 Střední hodnoty : 7,72 µg/dl (Sérum) 7,51 µg/dl (Heparin) 8,21 µg/dl (SST) Srovnání metody : Stanovení bylo porovnáno s testem Celkový T4 na analyzátoru IMMULITE na 276 vzorcích. (Koncentrační rozsah : přibližně 3 až 24 µg/dl. Viz graf.) Podle lineární regrese : (IML 2000) = 0,93 (IML) + 0,56 µg/dl r = 0,978 Střední hodnoty : 9,2 µg/dl (IMMULITE 2000) 9,3 µg/dl (IMMULITE) Technická Podpora Pro technickou podporu kontaktujte vašeho národního distributora. Systém kontroly jakosti společnosti Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. je certifikovaný podle ISO 13485:2003. Ελληνικά IMMULITE 2000 Ολική Θυροξίνη (T4) Ενδεδειγμένη χρήση: Για in vitro διαγνωστική χρήση με τα συστήματα αναλυτών IMMULITE 2000 για την ποσοτική μέτρηση της ολικής θυροξίνης που κυκλοφορεί (total T4) στον ορό, ως βοήθημα στην κλινική αποτίμηση της κατάστασης του θυρεοειδούς. Αριθμοί Καταλόγου: L2KT42 (200 αναλύσεις) L2KT46 (600 αναλύσεις) L2KT43M (3000 αναλύσεις) L2KT46M (6000 αναλύσεις) Κωδικός ανάλυσης: TT4 Χρώμα: Ανοικτό μπλε 10 IMMULITE 2000 Total T4 (PIEL2KT4-7 {23}, )

11 Περίληψη και Επεξήγηση Η θυροξίνη (T4), η βασική θυρεοειδής ορμόνη, κυκλοφορεί κανονικά σε επίπεδο περίπου 4,5 με 12,5 µg/dl (58 με 161 nmol/l), κατά μεγάλο ποσοστό συνδεδεμένη με μεταφορικές πρωτεΐνες, κυρίως τις TBG. Με δεδομένα κανονικά επίπεδα των πρωτεϊνών που είναι συνδεδεμένες με τις θυρεοειδείς ορμόνες, ο υπερθυρεοειδισμός χαρακτηρίζεται από αυξημένα επίπεδα της T4 στην κυκλοφορία, ενώ ο υποθυρεοειδισμός από μειωμένα επίπεδα. Εξαιρέσεις σ αυτόν τον παραλληλισμό ανάμεσα στην κατάσταση του θυρεοειδούς και τη συγκέντρωση της Ολικής Θυροξίνης (T4) έχουν βρεθεί, παρόλ αυτά, σε ασθενείς με ανώμαλα επίπεδα των πρωτεϊνών που συνδέονται με τις ορμόνες του θυρεοειδούς. Τα επίπεδα των TBG είναι γνωστό ότι μεταβάλλονται κάτω από ποικίλους φυσιολογικούς, φαρμακολογικούς και γενετικούς παράγοντες. Έτσι, ανεβασμένα επίπεδα της T4 μπορεί να σημειωθούν όταν τα επίπεδα των TBG είναι υψηλά, όπως στην εγκυμοσύνη, την οξεία σποραδική πορφυρία, την υπερπρωτεϊναιμία, την κληρονομική αύξηση των TBG και σε ασθενείς που υφίστανται θεραπεία με οιστρογόνα ή παίρνουν από το στόμα αντισυλληπτικά. Τα ολικά επίπεδα της T4 μπορεί να μειωθούν όταν τα επίπεδα των TBG είναι χαμηλά, όπως στις νεφρικές, ηπατικές, γαστρεντερικές και νεοπλαστικές δυσλειτουργίες, στην ακρομεγαλία, την υπερπρωτεϊναιμία και την κληρονομική ανεπάρκεια των TBG και, σε ασθενείς που χρησιμοποιούν ανδρογόνα, θεραπεία τεστοστερόνης ή άλλων αναβολικών στεροειδών. Η διφαινυλυδαντοΐνη και μεγάλες δόσεις σαλικυλικών και λιοθυρονίνης μπορούν επίσης να προκαλέσουν χαμηλές τιμές T4 (όχι ενδεικτικές της κατάστασης του θυρεοειδούς) εξαιτίας του ανταγωνισμού για τις θέσεις συνδέσεις στις TBG. Εξαιτίας του ότι το επίπεδο της Ολικής Θυροξίνης (T4) είναι συχνά μη φυσιολογικό σε περιπτώσεις φυσιολογικής λειτουργίας του θυρεοειδούς, ενώ μπορεί να είναι φυσιολογικό σε περιπτώσεις με ανώμαλη λειτουργία του θυρεοειδούς, μια εκτίμηση του επιπέδου των TBG στην κυκλοφορία είναι επιθυμητή, όπως δίνεται για παράδειγμα από μια μέθοδο ανίχνευσης της προσληψης της Τ3. Σε δυσλειτουργίες του θυρεοειδούς, η ολική T4 και οι τιμές προσληψης της T3 θα αποκλίνουν από το φυσιολογικό προς την ίδια κατεύθυνση, ενώ σε ασθενείς με κανονική κατάσταση του θυρεοειδούς με μεταβολές στις TBG θα αποκλίνουν προς αντίθετες κατευθύνσεις. Το προϊόν της Τ4 και των τιμών προσληψης της Τ3, διαιρούμενο με το 100, είναι γνωστό ως δείκτης Ελεύθερης Θυροξίνης (FT4I), ένας ευρέως χρησιμοποιούμενος δείκτης για την κατάσταση του θυρεοειδούς. Αρχή της Διαδικασίας Η IMMULITE 2000 Ολική Θυροξίνη (T4) είναι μία ξηρής φάσης, χημειοφωταυγής, ανταγωνιστική ενζυμική ανοσοεξέταση Κύκλοι Επώασης: 1 30 λεπτά Συλλογή δείγματος Το EDTA πλάσμα να μην χρησιμοποιείται ως τύπος δείγματος. Συνιστάται η χρήση της υπερφυγοκέντρου για να καθαριστούν λιπιδαιμικά δείγματα. Αιμολυμένα δείγματα μπορεί να υποδηλώνουν κακή μεταχείριση του δείγματος πριν την παραλαβή του από το εργαστήριο και τα αποτελέσματα πρέπει να ερμηνεύονται με προσοχή. Η φυγοκέντρηση των δειγμάτων πριν την πλήρη πήξη μπορεί να έχει ως αποτέλεσμα την παρουσία θρόμβων. Για να αποφευχθούν λανθασμένα αποτελέσματα εξαιτίας της παρουσίας θρόμβων, βεβαιωθείτε ότι πριν την φυγοκέντρηση το αίμα έπηξε πλήρως. Κάποια δείγματα, ιδιαιτέρως αυτά των ασθενών που λαμβάνουν αντιπηκτική θεραπεία, ίσως χρειάζονται εκτεταμένο χρόνο πήξης. Οι σωλήνες συγκέντρωσης αίματος από διαφορετικές εταιρείες μπορεί να φέρουν διάφορες τιμές, ανάλογα με τα υλικά και τα συμπληρώματα, συμπεριλαμβανομένων των με τζελ ή φυσικών σωληναρίων, των ενεργοποιητών πήξεως και/ή των αντιπηκτικών. Η IMMULITE 2000 Ολική Θυροξίνη (T4) δεν έχει δοκιμαστεί με όλους τους τύπους σωληναρίων. Συμβουλευτείτε την παράγραφο για τους εναλλακτικούς τύπους δειγμάτων για περισσότερες πληροφορίες σχετικά με τα σωληνάρια που έχουν δοκιμαστεί. Απαιτούμενος όγκος: 15 µl ορού IMMULITE 2000 Total T4 (PIEL2KT4-7 {23}, ) 11

12 Φύλαξη: 7 μέρες στους 2 8 C, ή 2 μήνες στους 20 C. Προφυλάξεις Για in vitro διαγνωστική χρήση. Αντιδραστήρια: Φύλαξη στους 2 8 C. Υπόκεινται στην ισχύουσα νομοθεσία. Ακολουθείστε τις γενικές προφυλάξεις και χειριστείτε όλα τα συστατικά σαν να ήταν φορείς μολυσματικών παραγόντων. Όλα τα υλικά της μεθόδου που προέρχονται από ανθρώπινο αίμα έχουν ελεγχθεί και βρέθηκαν αρνητικά για σύφιλη, για αντισώματα στον HIV 1 και 2, για τα επιφανειακά αντιγόνα της ηπατίτιδας B και για αντισώματα της ηπατίτιδας C. Αζίδιο του νατρίου σε συγκεντρώσεις μικρότερες από 0,1 g/dl, έχει προστεθεί ως συντηρητικό. Κατά την απόθεση, ξεπλύνετε με πολύ νερό προκειμένου να εμποδίσετε την δημιουργία εκρηκτικών μεταλλικών αζιδίων στους χάλκινους ή μολύβδινους σωλήνες αποχέτευσης. Υπόστρωμα χημειοφωταύγειας: Το υπόστρωμα χημειοφωταύγειας δεν πρέπει να εκτίθεται σε απευθείας ηλιακό φως. Δεν πρέπει να μολυνθεί. (Δες ένθετο). Νερό: Χρήση απεσταγμένου ή απιονισμένου νερού. Υλικά που διατίθενται Τα υλικά είναι μια ολοκληρωμένη ενότητα. Οι ετικέτες στο εσωτερικό του κουτιού είναι απαραίτητες για την ανάλυση. Ολική Θυροξίνη (T4) σε συσκευασία σφαιριδίων (L2T412) Με barcode. 200 σφαιρίδια, επικαλυμμένα με μονοκλωνική anti-t4 ποντικού. Σταθερά στους 2 8 C μέχρι την ημερομηνία λήξεως. L2KT42: 1 συσκευασία L2KT46: 3 συσκευασίες L2KT43M: 15 συσκευασίες L2KT46M: 30 συσκευασίες Δοχείο αντιδραστηρίου Ολική Θυροξίνη (T4) (L2T4A2) Με barcode. 21 ml αλκαλικής φωσφατάσης (βόειο έντερο) συνδεδεμένης με T4, με συντηρητικό, διανεμημένη ισότιμα στους θαλάμους Α και Β. Σταθερά στους 2 8 C μέχρι την ημερομηνία λήξεως. L2KT42: 1 δοχείο L2KT43M: 15 δοχεία L2KT46: 3 δοχεία L2KT46M: 30 δοχεία Πριν την χρήση, αφαιρέστε την διαφανή ταινία προσέχοντας να μην καταστραφεί ή γραμμογράφηση. Αφαιρέστε (ξεκολλήστε) προσεκτικά το κάλυμμα από την επάνω επιφάνεια του δοχείου, και πιέστε το κάλυμμα κάτω προς τους κεκλιμένους οδηγούς-ράγες. Ρυθμιστές Ολική Θυροξίνη (T4) (LT4L, LT4H) Δύο φιαλίδια (χαμηλό και υψηλό), 2 ml το καθένα, της T4 σε επεξεργασμένο ανθρώπινο ορό, με συντηρητικό. Σταθερά στους 2 8 C για 30 ημέρες ή για 6 μήνες (διαχωρισμένα) στους 20 C. L2KT42: 1 σετ L2KT43M: 3 σετ L2KT46: 2 σετ L2KT46M: 4 σετ Πριν κάνετε τη ρύθμιση, τοποθετείστε τις κατάλληλες ετικέτες (παρέχονται με το kit) στους δοκιμαστικούς σωλήνες, έτσι, ώστε τα barcodes να μπορούν να διαβαστούν από το κατάλληλο σύστημα. Συστατικά του Kit που παρέχονται ξεχωριστά Πολυ-αραιωτικό 1(L2M1Z) Για την επι-του-αναλυτή αραίωση δειγμάτων. Ένα φιαλίδιο συμπυκνωμένου (έτοιμου για χρήση) επεξεργασμένου φυσιολογικού ανθρώπινου ορού, που περιέχει από μη ανιχνεύσιμα έως χαμηλά επίπεδα Ολικής Θυροξίνης (T4), με συντηρητικό. Σταθερό στους 2 8 C για 30 ημέρες μετά το άνοιγμα ή για 6 μήνες (διαχωρισμένο) στους 20 C. L2M1Z: 25 ml Ετικέτες με barcode χορηγούνται για χρήση με το διάλυμα. Πριν την χρήση, τοποθετείστε μια κατάλληλη ετικέτα mm στο δοκιμαστικό σωλήνα, έτσι ώστε τα barcodes να μπορούν να διαβαστούν από κατάλληλο σύστημα. L2M1Z: 3 ετικέτες L2SUBM: Χημειοφωταυγές υπόστρωμα L2PWSM: Πλυστικό του ανιχνευτή L2KPM: Kit καθαρισμού του ανιχνευτή LRXT: Σωλήνες αντίδρασης (μιας χρήσεως) L2ZT: 250 δοκιμαστικοί σωλήνες για αραίωση του δείγματος ( mm) L2ZC: 250 καπάκια για σωλήνες αραίωσης δείγματος 12 IMMULITE 2000 Total T4 (PIEL2KT4-7 {23}, )

13 Επίσης απαιτούνται Απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό, δοκιμαστικοί σωλήνες, έλεγχοι. Διαδικασία της ανάλυσης Σημειώστε ότι για το βέλτιστο αποτέλεσμα, είναι σημαντικό να ακολουθηθούν όλες οι τυπικές διαδικασίες όπως ορίζονται στο εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE Βλέπε το εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000 για προετοιμασία, στήσιμο, αραιώσεις, ρυθμίσεις, ανάλυση και διαδικασίες ποιοτικού έλέγχου. Προτεινομένος χρόνος μεταξύ των ρυθμίσεων: 2 εβδομάδες Δείγματα ποιοτικού ελέγχου: Εφαρμόστε τους κρατικούς κανονισμούς ή τις απαιτήσεις πιστοποίησης για τη συχνότητα του ποιοτικού ελέγχου. Χρησιμοποιήστε δείγματα ελέγχου ή δείγματα ορού τουλάχιστον δύο επιπέδων (χαμηλό και υψηλό) T4. Η Siemens Healthcare Diagnostics συνιστά τη χρήση εμπορικά διαθέσιμων υλικών ελέγχου ποιότητας με τουλάχιστον 2 επίπεδα (χαμηλό και υψηλό). Ένα ικανοποιητικό επίπεδο απόδοσης επιτυγχάνεται όταν οι τιμές που προκύπτουν βρίσκονται εντός του αποδεκτού εύρους των υλικών ελέγχου για τον αναλυτή ή εντός ενός καθορισμένου εύρους που καθορίστηκε με βάση ένα κατάλληλο πλαίσιο εσωτερικού εργαστηριακού ποιοτικού ελέγχου. Αναμενόμενες τιμές Βασισμένη στη σχέση της με τη μέθοδο IMMULITE Ολική Θυροξίνη (T4) (βλ. Σύγκριση της Μεθόδου), η ανάλυση αναμένεται να έχει βασικά τα ίδια εύρη αναφοράς για τους ενήλικες: 4,5 12,5 µg/dl ( nmol/l) Τα εύρη αναφοράς προσδιορίστηκαν μετά την χρήση δειγμάτων ορού που συλλέχθηκαν σε γυάλινους σωλήνες χωρίς παρεμποδιστές πηκτών ή προσθετικών που προκαλούν θρόμβους. Μια διατμηματική μελέτη για παιδιατρικές τιμές που πραγματοποιήθηκε με τη μέθοδο IMMULITE Ολική Θυροξίνη (T4) σε μία κλινική τύπου "wellness" στις Νοτιοδυτικές Η.Π.Α. έδωσε τα ακόλουθα αποτελέσματα (ο τύπος των σωλήνων για την συλλογή του αίματος δεν έχει προσδιοριστεί). Ηλικία (έτη) Μέση τιμή (µg/dl) Κεντρικό 95% Εύρος 1,0 9,2 3,52 17,4 2,0 8,9 3,53 16,8 3,0 8,6 3,70 15,7 4,0 8,3 3,91 14,4 5,0 8,2 3,97 13,8 6,0 8,0 4,02 13,3 7,0 7,8 4,06 12,9 8,0 7,7 4,09 12,5 9,0 7,6 4,12 12,1 10,0 7,5 4,15 11,8 11,0 7,4 4,17 11,5 12,0 7,3 4,19 11,2 Θεωρείστε αυτά τα όρια μόνο σαν οδηγούς. Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να θεσπίσει τα δικά του εύρη αναφοράς. Περιορισμοί Πολλοί φυσιολογικοί, φαρμακολογικοί, παθολογικοί και γενετικοί παράγοντες μπορεί να επηρεάσουν την επεξεργασία των αποτελεσμάτων της Ολικής Θυροξίνης (T4). (βλ. Περίληψη και Επεξήγηση.) Περισσότεροι από 20% των ασθενών με μη θυρεοειδική ασθένεια που είναι σοβαρά άρρωστοι έχουν χαμηλά επίπεδα Τ4 στον ορό. Ετεροφυλικά αντισώματα στον ανθρώπινο ορό μπορούν να αντιδράσουν με τις ανοσοσφαιρίνες που χρησιμοποιούνται στην ανάλυση επιδρώντας στις in vitro μεθόδους ανοσοανάλυσης. [βλ. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Δείγματα από ασθενείς που εκτίθενται σε ζώα ή σε προϊόντα ζωικού ορού μπορεί να εμφανίσουν αυτού του τύπου την επίδραση που προκαλεί δυνητικά ανώμαλα αποτελέσματα. Αυτά τα αντιδραστήρια έχουν σχεδιαστεί έτσι ώστε να ελαχιστοποιείται ο κίνδυνος της επίδρασης, παρόλ αυτά, δυνητικές επιδράσεις ανάμεσα σε σπάνιους ορούς και συστατικά της ανάλυσης μπορεί να παρατηρηθούν. Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα που παίρνονται από αυτή τη μέθοδο θα πρέπει IMMULITE 2000 Total T4 (PIEL2KT4-7 {23}, ) 13

14 πάντα να χρησιμοποιούνται σε συνδυασμό με την κλινική εξέταση, το ιατρικό ιστορικό του ασθενούς και άλλα ευρήματα. Απόδοση Βλέπε Πίνακες και Γραφήματα για δεδομένα αντιπροσωπευτικά της εκτέλεσης της μεθόδου. Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε μg/dl. (Εκτός αν κάτι σημειώνεται διαφορετικά, όλα πραγματοποιήθηκαν σε δείγματα ορών που συλλέχθηκαν σε σωλήνες χωρίς παρεμποδιστές πηκτών ή προσθετικών που προκαλούν θρόμβους.) Παράγοντας μετατροπής: µg/dl 12,87 nmol/l Εύρος καμπύλης: 1,0 με 24 µg/dl (13 με 309 nmol/l) Η εξέταση είναι ιχνηλάσιμη σε ένα εσωτερικό πρότυπο που κατασκευάστηκε χρησιμοποιώντας κατάλληλα υλικά και μετρήσιμες διαδικασίες. Αναλυτική Ευαισθησία: 0,3 µg/dl (3,9 nmol/l) Ακρίβεια: Τα δείγματα υφίσταντο αναλύσεις εις διπλούν σε διάστημα 20 ημερών, δύο τρεξίματα την ημέρα, σε σύνολο 40 τρεξιμάτων και 80 επαναλήψεων. (Bλ. Πίνακα "Precision".) Γραμμικότητα: Τα δείγματα υφίσταντο αναλύσεις σε διαφορετικά διαλύματα. (Bλ.Πίνακα "Linearity" για αντιπροσωπευτικά δεδομένα.) Ανάκτηση: Τα δείγματα εμπλουτίστηκαν 1 με 19 με τρία διαλύματα T4 (42, 90 και 150 µg/dl. (Bλ. πίνακα "Recovery" για αντιπροσωπευτικά δεδομένα.) Ειδικότητα: Το αντίσωμα έχει υψηλή ειδικότητα για την T4. (Βλ. Πίνακα "Specificity".) Χολερυθρίνη: Παρουσία χολερυθρίνης σε συγκεντρώσεις μέχρι 200 mg/l δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Αιμόλυση: Παρουσία αιμοσφαιρίνης σε συγκεντρώσεις μέχρι 512 mg/dl δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Λιπιδαιμία: Παρουσία τριγλυκεριδίων σε συγκεντρώσεις μέχρι 5000 mg/dl δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Εναλλακτικοί Τύποι Δείγματος: Για να αναλυθεί η επίδραση των εναλλακτικών τύπων δείγματος, συλλέχθηκε αίμα 20 εθελοντών σε απλούς, ηπαρινισμένους και Becton Dickinson SST δοκιμαστικούς σωλήνες (vacutainer). Ίδιες ποσότητες αντίστοιχων δειγμάτων εμπλουτίστηκαν (spiked) με διαφορετικές ποσότητες Ολική Θυροξίνη (T4), ώστε να υπάρχουν τιμές από όλο το εύρος καμπύλης, και όλα τα δείγματα μετά εξετάστηκαν σύμφωνα με τη διαδικασία της Ολική Θυροξίνη (T4) IMMULITE 2000: (Ηπαρίνη) = 0,89 (Ορός) + 0,61 µg/dl r = 0,987 (SST) = 1,01 (Απλοί σωλήνες) + 0,42 µg/dl r = 0,971 Μέσοι όροι: 7,72 µg/dl (Ορός) 7,51 µg/dl (Ηπαρίνη) 8,21 µg/dl (SST) Σύγκριση της μεθόδου: Η μέθοδος συγκρίθηκε με την μέθοδο IMMULITE Ολική Θυροξίνη (T4) σε 276 δείγματα (Εύρος συγκέντρωσης: περίπου 3 με 24 µg/dl. Βλ. Γράφημα). Η ανάλυση γραμμικής παλινδρόμησης έδωσε τα ακόλουθα αποτελέσματα: (IML 2000) = 0,93 (IML) + 0,56 µg/dl r = 0,978 Μέσοι Οροι: 9,2 µg/dl (IMMULITE 2000) 9,3 µg/dl (IMMULITE) Τεχνική Υποστήριξη Για τεχνική υποστήριξη αποταθείτε στον αντιπρόσωπο της χώρας σας. Το Σύστημα Ποιότητας της Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. είναι επικυρωμένο με ISO 13485:2003. Polski IMMULITE 2000 Całkowita T4 Przeznaczenie: Test diagnostyczny in vitro dla analizatorów systemów IMMULITE 2000 do ilościowego oznaczenia poziomu tyroksyny T4 w surowicy, przydatny w klinicznej ocenie stanu czynności tarczycy. 14 IMMULITE 2000 Total T4 (PIEL2KT4-7 {23}, )

15 Numery katalogowe: L2KT42 (200 testów), L2KT43M (3000 testów), L2KT46 (600 testów), L2KT46M (6000 testów) Kod testu: TT4 Kolor: Jasno niebieski Wprowadzenie Główny hormon tarczycy tyroksyna (T4), krąży w organizmie na fizjologicznych poziomie 4,5 do 12,5 μg/dl (58 do 161 nmol/l), przeważnie w postaci związanej z białkami transportującymi, głównie z TBG. Przy prawidłowym poziomie białek wiążących hormony tarczycy hypertyreoza charakteryzuje się wzrostem, a hypotyreoza spadkiem poziomu krążącej T4. Wyjątki od takiej zależności pomiędzy stanem tarczycy, a poziomem całkowitej T4 spotykane są u pacjentów z nieprawidłowym poziomem białek wiążących hormony tarczycy. Poziom TBG ulega zmianie w zależności od stanu fizjologicznego, przyjmowanych środków farmakologicznych oraz od mechanizmów genetycznych. Tak więc wzrost stężenia T4 może nastąpić w sytuacji wysokiego poziomu TBG, na przykład w czasie ciąży, ostrej przerywanej porfirii, hyperproteinemii, dziedzicznie podwyższonym poziomie TBG, u pacjentów poddanych terapii estrogenowej, w trakcie stosowania doustnych środków antykoncepcyjnych. Poziom całkowitej T4 może być obniżony przy niskim poziomie TBG jak w schorzeniach nefrotycznych, chorobach wątroby, jelit, nowotworach, w akromegalii, hypoproteinemii i dziedzicznym deficycie TBG, a także u pacjentów w trakcie terapii androgenowej, leczenia anabolikami sterydowymi lub testosteronem. Również difenylhydantoina i duże dawki salicylanów i soli sodowej L-tyroksyny (levothyroxinum natrium) mogą również być powodem niskich wartości T4 (bez związku ze stanem tarczycy) współzawodnicząc o miejsca wiążące na TBG. Ponieważ poziom całkowitej T4 często wykracza poza zakres norm w stanach eutyreozy, pozostając w normie w schorzeniach tarczycy, przydatna jest równoczesna ocena poziomu krążących TBG, na przykład poprzez test wychwytu T3. W schorzeniach tarczycy poziom T4 i wychwyt T3 będzie odbiegał od norm w tym samym kierunku, podczas gdy w przypadkach eutyreozy i zmian poziomu TBG zmiany pójdą w rozbieżnych kierunkach. Wartość stężenia T4 i wychwytu T3 podzielona przez 100 określana jest jako Indeks Wolnej Tyroksyny (FT4I), powszechnie stosowany jako wskaźnik schorzeń tarczycy. Zasada testu Test IMMULITE 2000 Całkowita T4 jest immunoenzymatycznym, kompetycyjnym testem chemiluminescencyjnym. Czas inkubacji: 1 30 minut Preparatyka próbek EDTA nie jest zalecany jako antykoagulant ze względu na możliwy wpływ na oznaczenie. Zalecane jest klarowanie próbek lipemicznych przez ultrawirowanie. Hemoliza próbki może świadczyć o nieprawidłowym postępowaniu z próbką na etapie przedlaboratoryjnym. Fakt ten należy brać pod uwagę przy interpretacji wyników. Odwirowanie próbki krwi przed zakończeniem wykrzepiania może spowodować, że w supernatancie pozostanie fibryna stanowiąca przyczynę fałszywych wyników. Przed przystąpieniem do wirowania należy mieć pewność, że skrzep jest ostatecznie uformowany. Niektóre próbki, a zwłaszcza pochodzące od osób poddanych leczeniu antykoagulantami, wymagają dłuższego czasu na wytworzenie skrzepu. W zależności od producenta probówki do pobierania krwi mogą różnie wpływać na uzyskiwane wyniki. Istotne jest tworzywo i czynniki dodatkowe jak żel lub bariery oddzielające skrzep, aktywatory krzepnięcia oraz antykoagulanty. Wpływ wszystkich możliwych wariantów probówek na test Immulite 2000 Całkowita T4 nie został określony. Informacje o przetestowanych wariantach podano w akapicie Wpływ materiału na oznaczenie. Wymagana objętość próbki: 15 µl surowicy Przechowywanie materiału: 7 dni w 2 8 C, lub 2 miesiące w 20 C. IMMULITE 2000 Total T4 (PIEL2KT4-7 {23}, ) 15

16 Ostrzeżenia i warunki wstępne Test diagnostyczny in vitro. Odczynniki: Przechowywać w 2 8 C. Usuwać zgodnie z instrukcją. Zachowywać środki ostrożności konieczne przy pracy z materiałem potencjalnie zakaźnym. W materiałach pochodzących z krwi ludzkiej wykluczono reaktywność w kierunku syfilisu, obecność przeciwciał anty-hiv1/2, HBsAg i przeciwciał anty-hcv. Niektóre składniki zestawu mogą zawierać jako konserwant azydek sodu w stężeniu mniejszym niż 0,1 g/dl. Wykorzystane odczynniki usuwać w dużej ilości wody, by zapobiec osadzaniu azydku sodu w rurach miedzianych lub ołowianych, co może doprowadzić do wytworzenia potencjalnie wybuchowych azydków tych metali. Substrat chemiluminescencyjny: Unikać zanieczyszczenia i chronić przed bezpośrednim światłem słonecznym (patrz ulotka). Woda: Dejonizowana lub destylowana Elementy zestawu Elementy zestawu stanowią komplet. Zestaw działa w oparciu o kod kreskowy. Całkowita T4 Pojemnik z Kulkami (L2T412) Oznakowany kodem kreskowym. 200 kulek opłaszczonych mysim przeciwciałem monoklonalnym anty-t4. Stabilne w 2 8 C do daty ważności. L2KT42: 1 opakowanie L2KT46: 3 opakowań L2KT43M: 15 opakowań L2KT46M: 30 opakowań Total T4 Klin odczynnikowy (L2T4A2) Z kodem kreskowym. 21 ml alkalicznej fosfatazy (izolowanej z jelita cieląt) sprzęgniętej z T4, z konserwantem, rozdzielonej równo do dwóch komór A i B. Stabilne w 2 8 C do daty ważności. L2KT42: 1 klin L2KT46: 3 kliny L2KT43M: 15 klinów L2KT46M: 30 klinów Przed użyciem zerwać taśmę zabezpieczającą nie uszkadzając kodu kreskowego. Usunąć foliową uszczelką komór odczynnikowych. Wsunąć przesuwne zamknięcie komór w prowadnice w pokrywie klina. Całkowita T4 Kalibratory (LT4L, LT4H) Dwie fiolki (Niski i wysoki), po 2 ml każda, z T4 w preparowanej surowicy ludzkiej, z konserwantem. Po otwarciu stabilne przez 30 dni w 2 8 C lub 6 miesięcy w 20 C (rozpipetować). L2KT42: 1 zestaw L2KT46: 2 zestawy L2KT43M: 3 zestawy L2KT46M: 4 zestawy Przed wykonaniem kalibracji umocować na probówkach odpowiednie nalepki z kodem kreskowym (dostarczane z zestawem) rozpoznawane przez czytnik kodów kreskowych aparatu. Materiały dostarczane oddzielnie Multi-Diluent 1 (L2M1Z) Do automatycznego rozcieńczania wysokich próbek. Fiolka koncentrowanej, gotowej do użycia, preparowanej surowicy ludzkiej zawierającej T4 w stężeniach nieoznaczalnych lub niskich, z konserwantem. Po otwarciu stabilny w 2 8 C przez 30 dni lub 6 miesięcy w 20 C (rozpipetować). L2M1Z: 25 ml Wraz z rozcieńczalnikiem dostarczane są nalepki z kodami kreskowymi. Nalepkę umieścić na probówce ( mm), by umożliwić jej rozpoznanie przez czytnik kodów aparatu. L2M1Z: 3 nalepki L2SUBM: Substrat chemiluminescencyjny L2PWSM: Roztwór płuczący L2KPM: Roztwór czyszczący igłę pipetora LRXT: Probówki reakcyjne (jednorazowe) L2ZT: 250 probówek do rozcieńczania próbek mm L2ZC: 250 korków do probówek na rozcieńczalnik Ponadto niezbędne woda destylowana lub dejonizowana, probówki, kontrole. Procedura oznaczenia Przestrzeganie procedur dotyczących utrzymania aparatu, zawartych w Podręczniku operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000 poprawia charakterystykę uzyskiwanych wyników. Procedury: przygotowania aparatu, ustawień aparatu, przygotowania i rozcieńczania próbek, rekalibracji, oznaczenia i kontroli jakości zgodnie z 16 IMMULITE 2000 Total T4 (PIEL2KT4-7 {23}, )

17 Podręcznikiem operatora do obsługi systemów IMMULITE Zalecany odstęp pomiędzy rekalibracjami: 2 tygodnie Próbki kontrolne: Przestrzegać przepisów państwowych i wymogów kontrolnych w zakresie częstotliwości kontroli jakości. Stosować kontrole lub pule surowic co najmniej o niskim i wysokim poziomie T4. Siemens Healthcare Diagnostics zaleca stosowanie dostępnych w handlu próbek kontroli jakości o co najmniej 2 poziomach (niskim i wysokim). Uznaje się, że test przebiega prawidłowo, gdy uzyskane wartości analitu plasują się w przyjętym dla Kontroli zakresie dla danego analizatora lub w zakresie opracowanym w ramach wewnątrzlaboratoryjnego systemu zapewnienia jakości. Oczekiwane wartości Opierając się na pokrewieństwie z testem IMMULITE Całkowita T4 (Porównanie metod ) można oczekiwać, że zakresy wartości referencyjnych testów u dorosłych będą identyczne: 4,5 12,5 µg/dl ( nmol/l) Powyższe wartości uzyskano w próbkach surowicy pobranych do szklanych probówek bez bariery żelowej i substancji ułatwiających krzepnięcie. Zakresy pediatryczne dla Testu IMMULITE Całkowita T4 opracowano w ramach przekrojowych badań hormonów tarczycy przeprowadzonych w klinice Zdrowego dziecka na południowym zachodzie Stanów Zjednoczonych. (Nie określano stosowanych probówek.) Wiek (lata) Mediana (µg/dl) Zakres Środkowych 95% 1,0 9,2 3,52 17,4 2,0 8,9 3,53 16,8 3,0 8,6 3,70 15,7 4,0 8,3 3,91 14,4 5,0 8,2 3,97 13,8 6,0 8,0 4,02 13,3 7,0 7,8 4,06 12,9 8,0 7,7 4,09 12,5 9,0 7,6 4,12 12,1 10,0 7,5 4,15 11,8 11,0 7,4 4,17 11,5 12,0 7,3 4,19 11,2 Powyższe wartości należy traktować jako orientacyjne. Każde laboratorium powinno wyznaczyć własne zakresy referencyjne. Ograniczenia Wiele czynników o podłożu fizjologicznym, farmakologicznym, patologicznym i genetycznym ma wpływ na interpretację wyniku całkowitej T4 (patrz: Znaczenie diagnostyczne). U ponad 20% chorych na choroby nie związane z tarczycą pozostających w stanie krytycznym obserwuje się niskie stężenia całkowitej T4. Przeciwciała heterofilne obecne w surowicy ludzkiej mogą wchodzić w reakcję z immunoglobulinami będącymi reagentami testu immunologicznego, wpływając na przebieg oznaczenia in vitro. [Porównaj: Boscato L.M., Stuart M.C.: Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays Przeciwciała heterofilne problem wszystkich testów immunologicznych. Clin Chem 1988: 34: 27-33]. Wpływ przeciwciał heterofilnych może ujawnić się w oznaczeniach wykonywanych w surowicy osób mających ciągły kontakt ze zwierzętami lub zwierzęcymi produktami krwiopochodnymi, stanowiąc potencjalną przyczynę błędnych wyników. W teście ryzyko interferencji przeciwciał heterofilnych zostało zminimalizowane przez odpowiedni dobór proporcji odczynników, tym niemniej interferencja taka może potencjalnie nastąpić w rzadkich przypadkach. IMMULITE 2000 Total T4 (PIEL2KT4-7 {23}, ) 17

18 Parametry testu Dane charakteryzujące test przedstawiono w tabelach i wykresach. Wyniki podano w µg/dl. (O ile nie podano inaczej, wszystkie wyniki dotyczą surowicy, a próbki pobierano do probówek bez bariery żelowej i substancji przyspieszających krzepnięcie.) Przelicznik: µg/dl 12,87 nmol/l Zakres kalibracji: 1,0 do 24 µg/dl (13 do 309 nmol/l) Test wykazuje zgodność pomiarową z wewnętrznymi standardami wytwarzania dzięki zastosowaniu kwalifikowanych materiałów i metod pomiaru. Czułość analityczna: 0,3 µg/dl (3,9 nmol/l) Precyzja: Próbki testowano przez okres 20 dni w duplikatach, dwa razy dziennie, co dało w sumie 40 serii i 80 powtórzeń (patrz: tabela Precyzja). Liniowość: Próbki poddawano kolejnym rozcieńczeniem (patrz: Tabela Liniowość). Odzysk: Badano próbki wzbogacone Badano próbki wzbogacone w stosunku 1 do 19 roztworami roztworami T4 o stężeniach 42, 90 i 150 μg/dl (patrz: tabela Odzysk). Specyficzność: Przeciwciało jest wysoce specyficzne w stosunku do T4 (patrz: tabela Specyficzność). Bilirubina: Obecność bilirubiny w stężeniu do 200 mg/l nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Hemoliza: Obecność hemoglobiny w ilości do 512 mg/dl nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Lipemia: Obecność trójglicerydów w stężeniu do 5000 mg/dl nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Rodzaje pobieranego materiału: Wpływ rodzaju próbki na oznaczenie określano w próbkach krwi pobieranych od 20 wolontariuszy do probówek zwykłych, heparynowych oraz probówek z barierą żelową SST, systemu próżniowego Becton Dickinson. Porównywane próbki wzbogacano różnymi stężeniami T4 dobieranymi tak, by pokryć zakres liniowości testu i oznaczano w teście IMMULITE Całkowita T4. (Heparyna) = 0,89 (Surowica) + 0,61 µg/dl r = 0,987 (SST) = 1,01 (Zwykłe probówki) + 0,42 µg/dl r = 0,971 Średnie: 7,72 µg/dl (Surowica) 7,51 µg/dl (Heparyna) 8,21 µg/dl (SST) Porównanie metod: Test porównywano z testem IMMULITE Całkowita T4 w grupie 276 próbek (Zakres stężęń od około 3 do 24 µg/dl, porównaj wykres). Otrzymano następujące równanie regresji liniowej: (IML 2000) = 0,93 (IML) + 0,56 µg/dl r = 0,978 Średnie: 9,2 µg/dl (IMMULITE 2000) 9,3 µg/dl (IMMULITE) Pomoc techniczna i konsultacje Krajowy Dystrybutor udziela wszechstronnej pomocy technicznej. System Kontroli Jakości Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. posiada Certyfikat Jakości ISO 13485:2003. IMMULITE is a trademark of Siemens Healthcare Diagnostics Siemens Healthcare Diagnostics. All rights reserved. Origin: UK Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. Llanberis, Gwynedd LL55 4EL United Kingdom PIEL2KT4 7 {23} Changes in this Edition: cc#eu21838: Removed Siemens control (CON6) from the Kit Components Supplied Separately section. Under Quality Control Samples, added information for quality control frequency, materials, and performance. 18 IMMULITE 2000 Total T4 (PIEL2KT4-7 {23}, )

19 Understanding the Symbols Understanding the Symbols En English Vysvětlivky symbolů Επεξήγηση των συμβόλων Znaczenie symboli Cz Česky El Ελληνικά Pl Polski The following symbols may appear on the product labeling: / Na štítku výrobku mohou být uvedeny následující symboly: / Τα ακόλουθα σύμβολα ενδέχεται να εμφανίζονται στην επισήμανση του προϊόντος: / Na etykietach produktu mogą pojawiać się poniższe symbole: Symbol Definition En: In vitro diagnostic medical device Cz: Zdravotnický prostředek pro in vitro diagnostiku El: In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή Pl: Sprzęt do medycznej diagnostyki in vitro En: Catalog Number Cz: Katalogové číslo El: Αριθμός καταλόγου Pl: Numer katalogowy En: Manufacturer Cz: Výrobce El: Κατασκευαστής Pl: Producent En: Authorized Representative in the European Community Cz: Autorizované zastoupení v Evropské unii El: Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα Pl: Autoryzowany przedstawiciel w Unii Europejskiej En: CE Mark Cz: CE značka El: Σήμανση CE Pl: Znak CE En: CE Mark with identification number of notified body Cz: CE značka s identifikačním číslem notifikovaného orgánu El: Σήμανση CE με αριθμό αναγνώρισης του φορέα πιστοποίησης Pl: Znak CE z numerem identyfikacyjnym jednostki notyfikowanej LOT Symbol Definition En: Consult instructions for use Cz: Postupujte podle návodu k použití El: Συμβουλευτείτε τις οδηγίες λειτουργίας Pl: Zapoznać się z instrukcją użycia En: Caution! Potential Biohazard Cz: Pozor! Potenciální biohazard El: Πρoσοχή! Δυνητικός βιολογικός κίνδυνος Pl: Uwaga! Potencjalne zagrożenie biologiczne En: Temperature limitation (2 8 C) Cz: Teplotní rozsah (2 8 C) El: Περιορισμός θερμοκρασίας (2 8 C) Pl: Zakres temperatury (2 8 C) En: Upper limit of temperature ( -20 C) Cz: Horní teplotní limit ( -20 C) El: Ανώτερο όριο θερμοκρασίας ( -20 C) Pl: Górny zakres temperatury ( -20 C) En: Lower limit of temperature ( 2 C) Cz: Spodní teplotní limit ( 2 C) El: Κατώτερο όριο θερμοκρασίας ( 2 C) Pl: Dolny zakres temperatury ( 2 C) En: Do not freeze (> 0 C) Cz: Nezmrazovat (> 0 C) El: Μην καταψυχετε (> 0 C) Pl: Nie zamrażać (> 0 C) En: Do not reuse Cz: Pro jednorázové použití El: Μην κάνετε επαναληπτική χρήση Pl: Nie używać powtórnie En: Keep away from sunlight Cz: Chraňte před slunečním světlem El: Διατηρείτε μακριά από το ηλιακό φως Pl: Chronić przed światłem słonecznym En: Batch code Cz: Šarže El: Κωδικός παρτίδας Pl: Kod serii IMMULITE 2000 Total T4 (PIEL2KT4-7 {23}, ) 19