Thyroid Uptake. For use on IMMULITE 2000 systems

Transcript

1 Thyroid Uptake For use on IMMULITE 2000 systems

2 IMMULITE 2000 Thyroid Uptake English Intended Use: For in vitro diagnostic use with the IMMULITE 2000 Systems Analyzers yields an index of thyroid hormone carrier protein levels in serum, to aid in the clinical assessment of thyroid status. Catalog Numbers: L2KTU2 (200 tests) L2KTU3M (3000 tests) L2KTU6 (600 tests) L2KTU6M (6000 tests) Test Code: TU Color: Dark Pink Summary and Explanation The thyroid uptake test is ordinarily used in conjunction with an immunoassay for total T4 to correct for the influence which alterations in the levels of circulating thyroid hormone-binding proteins have on the total T4 level. These proteins reversibly bind both T4 and T3, but have an affinity up to six times greater for T4. It is the unbound or free hormones that are believed to be physiologically active. A patient's Percent Uptake (%TU) level is determined both by the concentration of thyroid hormone-binding proteins, principally TBG, and by the degree to which these proteins are saturated with thyroid hormones, principally T4. Increased hormone production by the thyroid gland will cause an increase in the saturation of TBG by T4, which will be reflected in a decreased Percent Uptake level. Similarly, decreased hormone production will be reflected in an increased Percent Uptake level. The impression of hyperthyroidism, hypothyroidism or euthyroidism created by a T4 result that is (respectively) elevated, depressed or within euthyroid reference limits is confirmed if the thyroid uptake result is likewise elevated, depressed or within euthyroid reference limits. Where the two tests disagree, it is desirable to calculate a Free T4 Index (FT4I) from the total T4 and Percent Uptake results, to determine how far they are influenced by alterations in thyroid hormone production and how far by alterations in circulating thyroid hormone carrier proteins. A high T4 level accompanied by a low Percent Uptake level suggests an increase in the concentration of thyroid hormone-binding proteins. This situation typically occurs in women who are either pregnant or on oral contraceptives, because of the increase in TBG levels caused by rising estrogen levels. The situation can also occur in cases of feminizing tumors, hyperproteinemia, acute intermittent porphyria, acute liver disease and hereditary TBG increase. A low T4 level accompanied by a high Percent Uptake level suggests a lower than normal concentration of thyroid hormone-binding proteins. Such a condition can be caused by an elevated level of androgens (glucocorticoids, androgenic steroids, synthetic androgens, virilizing tumors, acromegaly), by hypoproteinemia (nephrotic renal disease, chronic debilitating disease), or by stress (surgical trauma, acute infection, supraventricular tachycardia, congestive heart failure). It can also be caused by the administration of certain drugs, for example, hydantoins or large doses of salicylates. Principle of the Procedure IMMULITE 2000 Thyroid Uptake is a solid-phase, competitive chemiluminescent enzyme immunoassay. Incubation Cycles: 1 30 minutes Specimen Collection The use of an ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples. Hemolyzed samples may indicate mistreatment of a specimen before receipt by the laboratory; hence the results should be interpreted with caution. Centrifuging serum samples before a complete clot forms may result in the presence of fibrin. To prevent erroneous results due to the presence of fibrin, ensure that complete clot formation has taken place prior to centrifugation of samples. Some samples, particularly those from patients receiving 2 IMMULITE 2000 Thyroid Uptake (PIEL2KTU-2 {15}, )

3 anticoagulant therapy, may require increased clotting time. Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE 2000 Thyroid Uptake has not been tested with all possible variations of tube types. Volume Required: 20 µl serum Storage: 7 days at 2 8 C, or 3 months at 20 C. Warnings and Precautions For in vitro diagnostic use. Reagents: Store at 2 8 C. Dispose of in accordance with applicable laws. Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C. Sodium azide, at concentrations less than 0.1 g/dl, has been added as a preservative. On disposal, flush with large volumes of water to prevent the buildup of potentially explosive metal azides in lead and copper plumbing. Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert.) Water: Use distilled or deionized water. Materials Supplied Components are a matched set. Labels on the inside box are needed for the assay. Thyroid Uptake Bead Pack (L2TU12) With barcode. 200 beads, coated with monoclonal murine anti-t3. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KTU2: 1 pack L2KTU3M: 15 packs L2KTU6: 3 packs L2KTU6M: 30 packs Thyroid Uptake Reagent Wedge (L2TUA2) With barcode ml alkaline phosphatase (bovine calf intestine)- labeled T3 and unlabeled T3 in buffer. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KTU2: 1 wedge L2KTU6: 3 wedges L2KTU3M: 15 wedges L2KTU6M: 30 wedges Before use, tear off the top of the label at the perforations, without damaging the barcode. Remove the foil seal from the top of wedge; snap the sliding cover down into the ramps on the reagent lid. Thyroid Uptake Adjustor (LTUL) One vial, 2 ml, of processed human serum, with preservative. Stable at 2 8 C for 30 days after opening, or for 6 months (aliquotted) at 20 C. L2KTU2: 1 vial L2KTU3M: 3 vials L2KTU6: 2 vials L2KTU6M: 4 vials Before making an adjustment, place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes so that the barcodes can be read by the on-board reader. Kit Components Supplied Separately L2SUBM: Chemiluminescent Substrate L2PWSM: Probe Wash L2KPM: Probe Cleaning Kit LRXT: Reaction Tubes (disposable) Also Required Distilled or deionized water; test tubes; controls Assay Procedure Note that for optimal performance, it is important to perform all routine maintenance procedures as defined in the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual. See the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual for preparation, setup, adjustment, assay and quality control procedures. Recommended Adjustment Interval: 4 weeks Quality Control Samples: Follow government regulations or accreditation requirements for quality control frequency. Use controls or serum pools with at least two Percent Uptake levels (low and high). IMMULITE 2000 Thyroid Uptake (PIEL2KTU-2 {15}, ) 3

4 Siemens Healthcare Diagnostics recommends the use of commercially available quality control materials with at least 2 levels (low and high). A satisfactory level of performance is achieved when the analyte values obtained are within the Acceptable Control Range for the system, or within an established range determined by an appropriate internal laboratory quality control scheme. Free T4 Index Calculation To calculate a sample's Free T4 Index (FT4I), it is first necessary to determine its total T4 concentration by a reliable immunoassay, for example, the IMMULITE 2000 Total T4 assay. The FT4 Index can be calculated using Thyroid Hormone-Binding Ratio (THBR) or directly from % T-uptake. Calculations using THBR are preferred because the values can be evaluated by comparison to total T4 normal values. Calculation with THBR: FT4I = [T4] µg/dl THBR THBR = %TU (patient serum) %TU (reference serum) The %TU (reference serum) may be a value from a reference serum pool obtained from euthyroid patients who have normal quantities of thyroid hormone binding proteins. The mean value from a reference study may also be used as a substitute. Calculating directly using the %TU: FT4I = [T4] µg/dl %TU / 100 A reference range for the Free T4 Index parameter can be derived in two ways: directly from matched total T4 and Percent Uptake results obtained from a sufficiently large number of euthyroid individuals (that is, subjects with no known thyroid disease); or by calculation, from reference range limits for total T4 concentrations and Percent Uptake values. Note that the estimate based on the second approach may yield a broader reference interval for Free T4 Index values than the first approach. Other methods of calculating the Free T4 Index are also acceptable. In particular, total T4 concentration units other than µg/dl may be employed. Expected Values Based on its relationship to IMMULITE Thyroid Uptake (see Method Comparison), the assay can be expected to have essentially the same reference range: Fifty-eight samples from adult laboratory volunteers with no known thyroid dysfunction were assayed by the IMMULITE Thyroid Uptake procedure. The IMMULITE Thyroid Uptake assay yielded a mean of 28.5% and a central 95% range of 24 to 35%TU, which is in good agreement with the literature. 1,10 Consider these limits as guidelines only. Each laboratory should establish its own reference ranges. Limitations Abnormal albumin levels can cause anomalous thyroid uptake results. Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: ] Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings. Performance Data See Tables and Graphs for data representative of the assay's performance. Results are expressed in %TU. (Unless otherwise noted, all were generated on serum samples collected in tubes without gel barriers or clot-promoting additives.) 4 IMMULITE 2000 Thyroid Uptake (PIEL2KTU-2 {15}, )

5 Calibration Range: 10 to 70%TU Precision: Samples were assayed in duplicate over the course of 20 days, two runs per day, for a total of 40 runs and 80 replicates. (See Precision table.) Bilirubin: Presence of bilirubin in concentrations up to 200 mg/l has no effect on results, within the precision of the assay. Hemolysis: Presence of hemoglobin in concentrations up to 381 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Method Comparison: The assay was compared to IMMULITE Thyroid Uptake on 205 samples. (See graph.) Distribution of results yielded the following statistics: IMMULITE Mean: 30.7%TU Central 95% ( 2SD) Range: %TU IMMULITE 2000 Mean: 31.0%TU Central 95% ( 2SD) Range: %TU References 1) Bakerman S. ABC's of interpretive laboratory data. 2nd ed. N.C., 1986: ) Britton KE, Quinn V, Brown BL, Ekins RP. A strategy for thyroid function tests. Br Med J 1975;ii: ) Gershengorn MC, Glinoer D, Robbins J. Transport and metabolism of thryoid hormones. In: De Visscher M, editor. The Thyroid Gland. New York: Raven Press, 1980: ) Lorman J. J Clin Endocrinol Metab 1953;13: ) Prince HP, Ramsden DB. A new theoretical description of the binding of thyroid hormones by serum proteins. Clin Endocrinol 1977;7: ) Refetoff S. Thyroid hormone transport. In: DeGroot LJ, editor. Endocrinology. Philadelphia: Grune and Stratton, 1979;1: ) Refetoff S. Thyroid function tests. In: DeGroot LJ, editor. Endocrinology. Philadelphia: Grune and Stratton, 1979;1: ) Robbins J, Johnson ML. Theoretical considerations in the transport of thyroid hormones in blood. In: Ekins RP, editor. Free Thyroid Hormones. Amsterdam: Excerpta Medica 1979: ) Selenkow HA, Robins NI. J Maine Med Assoc 1970;61: ) Tietz NW, editor. Textbook of clinical chemistry. Philadelphia: Saunders, 1986: 1116, ) Walfish PG. Thyroid physiology and pathology. In: Collu R, Ducharme JR, Guyda H, editors. Pediatric Endocrinology. New York: Raven Press, 1981: ) Wenzel KW. Pharmacological interference with in vitro tests of thyroid function. Metabolism 1981;30: Technical Assistance For technical assistance, contact your National Distributor. The Quality System of Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. is certified to ISO 13485:2003. Tables and Graphs Precision (%TU) Within-Run 1 Total 2 Mean 3 SD 4 CV 5 SD CV % % % % % % % % % % % % % % % % % % % % Česky. 1 V rámci stanovení, 2 Celkem, 3 Střední hodnota, 4 Směrodatná odchylka, 5 Variační koeficient. Ελληνικά. 1 Κατά την ίδια περίοδο, 2 Συνολικά, 3 Μέσος όρος, 4 SD, 5 CV. Polski. 1 W serii, 2 Całość, 3 Średnie, 4 SD, 5 CV. Method Comparison English. Thyroid Uptake Česky. Tyroidní vazebná kapacita. Ελληνικά. Πρόσληψη Θυρεοειδικής ορμόνης. Polski. Wychwyt Tarczycy. IMMULITE 2000 Thyroid Uptake (PIEL2KTU-2 {15}, ) 5

6 Česky IMMULITE 2000 Tyroidní vazebná kapacita Použití : Pro in vitro diagnostické použití na analyzátorech IMMULITE 2000 poskytuje index množství transportních proteinů hormonů štítné žlázy v séru, jakožto pomůcku při klinickém hodnocení stavu štítné žlázy. Katalogová čísla : L2KTU2 (200 stanovení) L2KTU6 (600 stanovení) L2KTU3M (3000 stanovení) L2KTU6M (6000 stanovení) Kód metody : TU Barva : Tmavě růžová Shrnutí a vysvětlení Test tyroidní vazebné kapacity se ve spojení s imunologickým stanovením celkového T4 obyčejně používá ke korekci vlivu, který má změna množství cirkulujících vazebných proteinů na koncentraci celkového T4. Tyto proteiny reverzibilně vážou T4 i T3, ale afinita k T4 je asi šestkrát vyšší. Má se za to, že právě nevázané neboli volné hormony vykazují fyziologickou aktivitu. Hodnota vazebné kapacity vyjádřená v procentech (Percent Uptake - %TU) je dána jednak koncentrací vazebných proteinů hormonů štítné žlázy, v podstatě TBG, a také stupněm nasycení těchto proteinů hormony štítné žlázy, zejména T4. Zvýšení tvorby hormonů v štítné žláze způsobí růst nasycení TBG hormonem T4, což se odrazí v poklesu hodnoty %TU. Obdobně, snížená tvorba hormonů se projeví v nárůstu %TU. Diagnóza hypertyreózy, hypotyreózy nebo eutyreózy založená na stanovení množství T4, které je (v uvedeném pořadí) zvýšené, snížené nebo v rámci eutyroidního referenčního rozmezí, je potvrzena příslušným zvýšením, snížením nebo normální hodnotou TU. V případě rozporu mezi těmito dvěma testy je vhodné spočítat index volného T4 (FT4I) z hodnot celkového T4 a %TU. Tím se dá určit, do jaké míry jsou výsledky ovlivněny změnami tvorby hormonů štítné žlázy a do jaké míry změnami v hladině cirkulujících vazebných proteinů hormonů štítné žlázy. Vysoká hladina T4 a nízké %TU svědčí o zvýšení koncentrace vazebních proteinů hormonů štítné žlázy. Tento stav je typický pro těhotné ženy nebo ženy užívající orální antikoncepci, protože nárůst hladiny estrogenu způsobí zvýšení množství TBG. Příčinou těchto stavů můžou rovněž být feminizující nádory, hyperproteinémie, akutní intermitentní porfyrie, akutní onemocnění jater a dědičné zvýšení TBG. Nízká hladina T4 a současně vysoká %TU svědčí o abnormálně nízké koncentraci vazebních proteinů hormonů štítné žlázy. Tento stav může být způsoben zvýšeným množstvím androgenů (glukokortikoidů, androgenních steroidů, syntetických androgenů, virilizujícími nádory, akromegalií), hypoproteinémií, (nefrotickým ledvinovým onemocněním, chronickým vysilujícím onemocněním), nebo stresem (operačním traumatem, akutní infekcí, supraventrikulární tachykardií, selháním činnosti srdce). Příčinou může rovněž být podávání některých léků, například hydantoinů nebo vysokých dávek salicylátů. Princip Stanovení IMMULITE 2000 Tyroidní vazebná kapacita je konkurenční chemiluminiscenční enzymová imunochemická reakce v pevné fázi. Inkubační cykly : 1 30 minut Odebírání vzorků K úpravě lipemických vzorků se doporučuje použití ultracentrifugy. Hemolyzované vzorky můžou být známkou nesprávného zacházení s preparátem ještě před přijetím do laboratoře; proto by výsledky měly být interpretovány s obezřetností. Centrifugace vzorků séra ještě před úplným vysrážením může mít za následek přítomnost fibrinu. Chybným výsledkům způsobeným přítomností fibrinu lze zamezit úplným vysrážením vzorků před jejich centrifugací. U některých vzorků, zejména od pacientů podstupujících antikoagulační léčbu, může srážlivost vyžadovat více času. Použití zkumavek pro odběr krve od různých výrobců může poskytovat rozličné hodnoty v závislosti na materiálech a přísadách, včetně gelových nebo 6 IMMULITE 2000 Thyroid Uptake (PIEL2KTU-2 {15}, )

7 fyzických bariér, aktivátorů srážení a/nebo antikoagulačních činidel. Stanovení Tyroidní vazebná kapacita na analyzátorech IMMULITE 2000 nebylo testováno se všemi možnými variantami jednotlivých typů zkumavek. Potřebný objem vzorku : 20 μl séra Skladování : 7 dní při teplotě 2 8 C nebo 3 měsíce při teplotě 20 C. Upozornění a bezpečnostní opatření Pro in vitro diagnostické použití. Reagencie : Skladujte při teplotě 2 8 C. Likvidujte v souladu s platnými předpisy. Řiďte se obecnými pravidly bezpečnosti práce a se všemi komponenty nakládejte, jako by byly potenciálně infekční. Zdrojové materiály získané z lidské krve byly testovány a shledány nereaktivní na syfilis, na protilátky proti HIV 1 a 2, na povrchový antigen hepatitidy typu B (HBsAg) a na protilátky proti hepatitidě typu C. Jako konzervační látka byl přidán azid sodný v koncentracích menších než 0,1 g/dl. Při likvidaci vypláchněte velkým množstvím vody, aby se zamezilo nahromadění potenciálně výbušných azidů kovů v olověném a měděném potrubí. Chemiluminiscenční substrát : Vyvarujte se kontaminace a nevystavujte přímému slunečnímu světlu. (Viz připojený letáček.) Voda : Použijte destilovanou nebo deionizovanou vodu. Dodaný materiál Komponenty představují ucelenou sadu. Pro stanovení jsou zapotřebí štítky s čárovým kódem na krabici. Tyroidní vazebná kapacita zásobník s kuličkami (L2TU12) Opatřeno čárovým kódem. 200 kuliček potažených monoklonální myší protilátkou proti T3. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KTU2 : 1 balení L2KTU3M : 15 balení L2KTU6 : 3 balení L2KTU6M : 30 balení Tyroidní vazebná kapacita reagencie (L2TUA2) Opatřeno čárovým kódem. 11,5 ml alkalické fosfatázy (z telecího střeva) značené T3 a neznačené T3 v pufru. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KTU2 : 1 nádobka L2KTU6 : 3 nádobky L2KTU3M : 15 nádobek L2KTU6M : 30 nádobek Před použitím utrhněte vršek štítku v perforovaném místě, ale nepoškoďte čárový kód. Z vrchu nádobky odstraňte uzavírací fólii ; posuvný uzávěr zaklapněte do ramp na víčku reagencie. Tyroidní vazebná kapacita kalibrátor (LTUL) Jedna ampulka, 2 ml, zpracovaného lidského séra, s konzervačním prostředkem. Stabilní 30 dní po otevření při teplotě 2 8 C nebo 6 měsíců rozdělené na alikvotní části při 20 C. L2KTU2 : 1 ampulka L2KTU6 : 2 ampulky L2KTU3M : 3 ampulky L2KTU6M : 4 ampulky Před adjustací nalepte na testovací zkumavky příslušné alikvotní štítky (dodané se soupravou) tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. Materiál dodávaný zvlášť L2SUBM : Chemiluminiscenční substrát L2PWSM : Promývací roztok L2KPM : Čistící roztok na jehly LRXT : Reakční zkumavky (na jedno použití) Dále potřebujete Destilovanou nebo deionizovanou vodu ; testovací zkumavky, kontroly Postup stanovení K dosažení optimálního výkonu je důležité provádět veškerou pravidelnou údržbu stanovenou v manuálu k analyzátorům IMMULITE V manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000 najdete postupy : přípravy, nastavení, adjustace, stanovení vzorků a kontrol. Doporučený interval mezi adjustacemi : 4 týdny Vzorky ke kontrole kvality : Pokud jde o četnost kontroly kvality, je třeba řídit se platnými předpisy a akreditačními požadavky. IMMULITE 2000 Thyroid Uptake (PIEL2KTU-2 {15}, ) 7

8 Použijte kontroly nebo směsné vzorky s alespoň dvěma hodnotami podílu TU (vysokou a nízkou). Společnost Siemens Healthcare Diagnostics doporučuje používat obchodně dostupné materiály kontroly kvality o přinejmenším dvou koncentracích vysoké a nízké. Vyhovující funkčnosti se dosahuje, pokud zjištěné hodnoty analytu leží uvnitř přijatelného kontrolního rozmezí analyzátoru nebo uvnitř rozmezí stanoveného příslušným interním systémem kontroly kvality dané laboratoře. Výpočet indexu volného T4 (FT4I) K výpočtu indexu volného T4 (FT4I) vzorku nejdříve potřebujeme určit koncentraci celkového T4 spolehlivou imunologickou metodou, například pomocí stanovení Celkový T4 na analyzátorech IMMULITE Index FT4 je možné vypočítat buď pomocí vazebního poměru hormonů štítné žlázy (Thyroid Hormone-Binding Ratio THBR) nebo přímo z % tyroidní vazebné kapacity (T-uptake). Dáváme přednost výpočtu pomocí THBR, protože výsledky se dají vyhodnotit porovnáním s normálními hodnotami celkového T4. Výpočet pomocí THBR : FT4I = [T4] µg/dl THBR THBR = % TU (sérum pacienta) % TU (referenční sérum) Hodnota % TU (v referenčním séru) může být hodnota směsného vzorku referenčního séra získaného od eutyroidních pacientů, kteří mají normální množství vazebných proteinů hormonů štítné žlázy. Jako náhradu můžeme rovněž použít střední hodnotu z referenční studie. Přímý výpočet pomocí % TU : FT4I = [T4] µg/dl %TU / 100 Referenční rozmezí pro parametr indexu volného T4 se dá odvodit dvěma způsoby : přímo z odpovídajících hodnot celkového T4 a vazební kapacity v procentech od dostatečně velkého počtu eutyroidních jedinců (tedy od osob bez známé choroby štítné žlázy, nebo výpočtem z hranic referenčního rozmezí pro koncentraci celkového T4 a hodnoty vazební kapacity v procentech. Uvědomte si, že výpočet podle druhého přístupu může poskytnout širší referenční interval pro hodnoty indexu volného T4 než první přístup. Jiné metody výpočtu indexu volného T4 jsou rovněž přijatelné. Zejména je možné použít jiné jednotky koncentrace celkového T4 než je µg/dl. Očekávané hodnoty Vzhledem k příbuznosti se stanovením Tyroidní vazebné kapacity na analyzátoru IMMULITE (viz Srovnání metody) se dá předpokládat, že toto stanovení bude mít prakticky stejná referenční rozmezí. 58 vzorků od dospělých dobrovolníků bez poruchy funkce štítné žlázy bylo stanoveno pomocí metody IMMULITE Tyroidní vazebná kapacita. Stanovení Tyroidní vazebná kapacita na analyzátoru IMMULITE poskytlo střední hodnotu 28,5 % a střední 95 % rozmezí 24 až 35 %TU, což představuje značnou shodu s literaturou. 1,10 Uvedené hranice považujte pouze za orientační. Každá laboratoř by si měla stanovit svoje vlastní referenční rozmezí. Omezení Abnormální množství albuminu může zapříčinit anomální výsledky vazebné kapacity vazebných proteinů hormonů štítné žlázy. Heterofilní protilátky v lidském séru můžou reagovat s imunoglobuliny obsaženými v komponentech soupravy a způsobit interference s in vitro imunologickým stanovením. [Viz Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: ] Vzorky pacientů rutinně vystavených kontaktu se zvířaty nebo produkty zvířecího séra můžou vykázat tento typ interference a potenciálně způsobit anomální výsledky. Tyto reagencie byly vyvinuty tak, aby bylo riziko interference minimalizováno ; nicméně případné interakce mezi ojedinělými séry a komponenty testu se můžou vyskytnout. Pro diagnostické účely by se výsledky tohoto stanovení měly vždy používat 8 IMMULITE 2000 Thyroid Uptake (PIEL2KTU-2 {15}, )

9 v kombinaci s klinickými zkouškami, zdravotní historií pacienta a ostatními nálezy. Znaky metody Reprezentativní výsledky stanovení najdete v části Tabulky a grafy. Výsledky se udávají v %TU. (Pokud není uvedeno jinak, všechny výsledky byly získány na vzorcích séra odebraných do zkumavek bez gelových bariér nebo přísad podporujících srážlivost.) Kalibrační rozsah : 10 až 70 %TU Přesnost : Vzorky byly stanovovány dvojmo v průběhu 20 dní, dva testy denně, celkem 40 testů a 80 replikátů. (Viz tabulka Přesnost.) Bilirubin : Přítomnost bilirubinu v koncentracích do 200 mg/l nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Hemolýza : Přítomnost hemoglobinu v koncentracích do 381 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Srovnání metody : Stanovení bylo porovnáno s testem Tyroidní vazebná kapacita na analyzátoru IMMULITE na 205 vzorcích. (Viz graf.) Rozložení výsledků přineslo následující statistické údaje : IMMULITE Střední hodnota : 30,7 %TU Střední 95 % ( 2Stand. odch.) rozmezí : 20,7 40,7 %TU IMMULITE 2000 Střední hodnota : 31,0 %TU Střední 95 % ( 2Stand. odch.) rozmezí : 20,9 41,1 %TU Technická Podpora Pro technickou podporu kontaktujte vašeho národního distributora. Systém kontroly jakosti společnosti Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. je certifikovaný podle ISO 13485:2003. Ελληνικά IMMULITE 2000 Πρόσληψη Θυροειδικής Ορμόνης Ενδεδειγμένη χρήση: Για in vitro διαγνωστική χρήση με τα συστήματα αναλυτών IMMULITE 2000 παρέχει ένα δείκτη των επιπέδων των πρωτεϊνώνφορέων της θυρεοειδικής ορμόνης στον ορό, ως βοήθημα για την κλινική εκτίμηση της λειτουργίας του θυρεοειδούς. Αριθμοί καταλόγου: L2KTU2 (200 αναλύσεις) L2KTU6 (600 αναλύσεις) L2KTU3M (3000 αναλύσεις) L2KTU6M (6000 αναλύσεις) Κωδικός ανάλυσης: TU Χρώμα: Σκούρο Ροζ Περίληψη και επεξήγηση Η εξέταση πρόσληψης της θυρεοειδικής ορμόνης χρησιμοποιείται συστηματικά σε συνδυασμό με μια ανοσοεξέταση της ολικής Τ4, για την διόρθωση των επιδράσεων που ασκούν οι μεταβολές των επιπέδων των κυκλοφορουσών πρωτεϊνών δέσμευσης θυρεοειδικής ορμόνης στα επίπεδα της ολικής Τ4. Αυτές οι πρωτεΐνες δεσμεύουν τόσο την Τ4 όσο και την Τ3 με αναστρέψιμο τρόπο, ωστόσο, έχουν έως έξι φορές μεγαλύτερη συγγένεια με την Τ4. Ενεργές θεωρούνται οι μη δεσμευμένες ή ελεύθερες ορμόνες. Το επίπεδο πρόσληψης επί τοις εκατό (%TU) προσδιορίζεται τόσο από τη συγκέντρωση πρωτεϊνών δέσμευσης θυρεοειδικής ορμόνης, κατά κύριο λόγο της TBG, όσο και από το βαθμό κορεσμού αυτών των πρωτεϊνών με θυρεοειδική ορμόνη, κατά κύριο λόγο της Τ4. Η αυξημένη παραγωγή ορμόνης από τον θυρεοειδή προκαλεί αυξημένο κορεσμό της TBG από την Τ4, η οποία αντανακλάται στο μειωμένο επίπεδο πρόσληψης επί τοις εκατό. Παρομοίως, η μειωμένη παραγωγή ορμονών αντανακλάται σε αυξημένο επίπεδο πρόσληψης επί τοις εκατό. Η ένδειξη υπερθυρεοειδισμού, υποθυρεοειδισμού ή ευθυρεοειδισμού, η οποία διαπιστώνεται με βάση τα αποτελέσματα της Τ4, που είναι (αντίστοιχα) αυξημένα, μειωμένα ή εντός IMMULITE 2000 Thyroid Uptake (PIEL2KTU-2 {15}, ) 9

10 των ορίων αναφοράς ευθυρεοειδισμού, επιβεβαιώνεται εάν τα αποτελέσματα πρόσληψης θυρεοειδικής ορμόνης είναι εξίσου αυξημένα, μειωμένα ή εντός των ορίων αναφοράς ευθυρεοειδισμού. Εάν οι δύο εξετάσεις παρουσιάσουν απόκλιση, συνιστάται να υπολογιστεί ο Δείκτης ελεύθερης Τ4 (FT4I) από τη συνολική Τ4 και τα αποτελέσματα της επί τοις εκατό πρόσληψης, ώστε να προσδιοριστεί ο βαθμός επίδρασης των μεταβολών στην παραγωγή θυρεοειδικής ορμόνης, καθώς και των μεταβολών στις κυκλοφορούσες πρωτεΐνες που δεσμεύουν τη θυρεοειδική ορμόνη. Τα υψηλά επίπεδα Τ4 συνοδευόμενα από χαμηλά επίπεδα πρόσληψης υποδηλώνουν αυξημένη συγκέντρωση πρωτεϊνών δέσμευσης της θυρεοειδικής ορμόνης. Αυτή η κατάσταση παρατηρείτα σε γυναίκες, οι οποίες είναι είτε σε κατάσταση εγκυμοσύνης είτε λαμβάνουν αντισυλληπτικά από του στόματος, καθώς η αύξηση στα επίπεδα TBG προκαλείται από αυξημένα επίπεδα οιστρογόνων. Επίσης, η κατάσταση αυτή εμφανίζεται σε περιπτώσεις όγκων που προκαλούν παραγωγή οιστρογόνων, υπερπρωτεϊναιμία, οξεία διαλείπουσα πορφυρία, οξεία ηπατική νόσο και κληρονομική αύξηση TBG. Τα χαμηλά επίπεδα Τ4 συνοδευόμενα από υψηλά επίπεδα πρόσληψης υποδηλώνουν χαμηλότερες του φυσιολογικού συγκεντρώσεις πρωτεϊνών δέσμευσης της θυρεοειδικής ορμόνης. Αυτή η κατάσταση ενδέχεται να οφείλεται σε αυξημένα επίπεδα ανδρογόνων (γλυκοκορτικοειδή, ανδρογόνα στεροειδή, συνθετικά ανδρογόνα, όγκοι που προκαλούν παραγωγή ανδρογόνων, ακρομεγαλία), σε υποπρωτεϊναιμία (νεφροπάθεια, χρόνια εκφυλιστική νόσο) ή σε άγχος (χειρουργικό τραύμα, οξεία μόλυνση, υπερκοιλιακή ταχυκαρδία, συμφορητική καρδιακή ανεπάρκεια). Επίσης, μπορεί να προκληθεί από τη χορήγηση ορισμένων φαρμακευτικών σκευασμάτων, για παράδειγμα υδαντοΐνες ή μεγάλες δόσεις σαλικυλικών. Αρχή της διαδικασίας Η IMMULITE 2000 Πρόσληψη Θυρεοειδικής Ορμόνης είναι μια ξηρής φάσης ανταγωνιστική, χημειοφωταυγής, ενζυμική ανοσοανάλυση. Κύκλοι επώασης: 1 30 λεπτά Συλλογή δειγμάτων Συνιστάται η χρήση της υπερφυγοκέντρου για να καθαριστούν τα λιπιδαιμικά δείγματα. Αιμολυμένα δείγματα μπορεί να υποδηλώνουν κακή μεταχείριση του δείγματος πριν την παραλαβή του από το εργαστήριο και τα αποτελέσματα πρέπει να ερμηνεύονται με προσοχή. Η φυγοκέντριση των δειγμάτων ορού πριν την πλήρη πήξη μπορεί να έχει ως αποτέλεσμα τη δημιουργία θρόμβων. Για να αποφευχθούν λανθασμένα αποτελέσματα εξαιτίας της παρουσίας θρόμβων, βεβαιωθείτε ότι πριν τη φυγοκέντριση, το αίμα έχει πήξει πλήρως. Κάποια δείγματα, ιδιαιτέρως αυτά των ασθενών που λαμβάνουν αντιπηκτική θεραπεία, ίσως χρειάζονται μεγαλύτερο χρόνο πήξης. Οι σωλήνες συγκέντρωσης αίματος διαφορετικών εταιρειών μπορεί να δώσουν αποκλίνουσες τιμές, ανάλογα με τα υλικά και τα συμπληρώματα, συμπεριλαμβανομένων των με τζελ ή φυσικών σωληναρίων, των ενεργοποιητών πήξεως και/ή των αντιπηκτικών. Η IMMULITE 2000 Πρόσληψη Θυρεοειδικής Ορμόνης δεν έχει δοκιμαστεί με όλους τους τύπους σωληναρίων. Απαιτούμενος όγκος: 20 µl ορού Φύλαξη: 7 μέρες στους 2 8 C, ή 3 μήνες στους 20 C. Προειδοποιήσεις και προφυλάξεις Για in vitro διαγνωστική χρήση. Αντιδραστήρια: Διατήρηση στους 2 8 C. Απόρριψη σύμφωνα με την ισχύουσα νομοθεσία. Ακολουθήστε τις γενικές προφυλάξεις και χειριστείτε όλα τα συστατικά σαν να ήταν φορείς μολυσματικών παραγόντων. Όλα τα υλικά της μεθόδου που προέρχονται από ανθρώπινο αίμα έχουν ελεγχθεί και βρέθηκαν αρνητικά για σύφιλη, για αντισώματα στον HIV 1 και 2, για επιφανειακά αντιγόνα της ηπατίτιδας Β και για αντισώματα της ηπατίτιδας C. 10 IMMULITE 2000 Thyroid Uptake (PIEL2KTU-2 {15}, )

11 Αζίδιο του νατρίου σε συγκεντρώσεις μικρότερες από 0,1 g/dl έχει προστεθεί ως συντηρητικό. Κατά την απόρριψη, ξεπλύνετε με άφθονο νερό για την αποφυγή σχηματισμού πιθανών εκρηξιογόνων μεταλλικών αζιδίων στις αποχετεύσεις από μόλυβδο και χαλκό. Χημειοφωταυγές υπόστρωμα: Αποφύγετε τη μόλυνση και την έκθεση στο άμεσο ηλιακό φως. (Bλ. Ένθετο.) Νερό: Χρησιμοποιήστε απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό. Υλικά που διατίθενται Τα συστατικά αποτελούν ολοκληρωμένο σετ. Οι ετικέτες στο εσωτερικό του κουτιού είναι απαραίτητες για την ανάλυση. Συσκευασία σφαιριδίων πρόσληψης θυρεοειδικής ορμόνης (L2TU12) Με ραβδοκώδικα. 200 σφαιρίδια, επικαλυμμένα με μονοκλωνικό αντι-t3 ποντικού. Σταθερά στους 2 8 C έως την ημερομηνία λήξεως. L2KTU2: 1 συσκευασία L2KTU6: 3 συσκευασίες L2KTU3M: 15 συσκευασίες L2KTU6M: 30 συσκευασίες Δοχείο αντιδραστηρίου πρόσληψης θυρεοειδικής ορμόνης (L2TUA2) Με ραβδοκώδικα. 11,5 ml αλκαλικής φωσφατάσης (βόειο έντερο) σημασμένης Τ3 και μη σημασμένης Τ3 σε ρυθμιστικό διάλυμα. Σταθερά στους 2 8 C έως την ημερομηνία λήξεως. L2KTU2: 1 δοχείο L2KTU3M: 15 δοχεία L2KTU6: 3 δοχεία L2KTU6M: 30 δοχεία Πριν τη χρήση, σχίστε την πάνω ετικέτα στο σημείο διάτρησης, χωρίς να καταστρέψετε το ραβδοκώδικα. Αφαιρέστε (ξεκολλήστε) προσεκτικά το κάλυμμα από την επάνω επιφάνεια του δοχείου, και πιέστε το κάλυμμα κάτω προς τους κεκλιμένους οδηγούς-ράγες. Ρυθμιστής πρόσληψης θυρεοειδικής ορμόνης (LTUL) Ένα φιαλίδιο, 2 ml, επεξεργασμένου ανθρώπινου ορού, με συντηρητικό. Σταθερά στους 2 8 C για 30 μέρες μετά το άνοιγμα ή για 6 μήνες (διαχωρισμένα) στους 20 C. L2KTU2: 1 φιαλίδιο L2KTU6: 2 φιαλίδια L2KTU3M: 3 φιαλίδια L2KTU6M: 4 φιαλίδια Πριν κάνετε κάποια ρύθμιση, τοποθετήστε τις κατάλληλες ετικέτες των διαλυμάτων (παρέχονται με το kit) σε δοκιμαστικούς σωλήνες, έτσι, ώστε οι ραβδοκώδικες να μπορούν να διαβαστούν από σύστημα του αναλυτή. Συστατικά του Kit που προμηθεύονται ξεχωριστά L2SUBM: Χημειοφωταυγές υπόστρωμα L2PWSM: Πλυστικό του ανιχνευτή L2KPM: Kit καθαρισμού του ανιχνευτή LRXT: Σωλήνες αντίδρασης (μιας χρήσεως) Απαιτούνται επίσης Απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό, δοκιμαστικοί σωλήνες, δείγματα ελέγχου Διαδικασία της ανάλυσης Σημειώστε ότι για το βέλτιστο αποτέλεσμα, είναι σημαντικό να ακολουθηθούν όλες οι τυπικές διαδικασίες όπως ορίζονται στο εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE Βλέπε το εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000 για: προετοιμασία, στήσιμο, ρυθμίσεις, ανάλυση και διαδικασίες ποιοτικού ελέγχου. Συνιστώμενος χρόνος μεταξύ των ρυθμίσεων: 4 εβδομάδες Δείγματα ποιοτικού ελέγχου: Εφαρμόστε τους κρατικούς κανονισμούς ή τις απαιτήσεις πιστοποίησης για τη συχνότητα του ποιοτικού ελέγχου. Χρησιμοποιήστε δείγματα ελέγχου ή δείγματα ορού με τουλάχιστον δύο τοις εκατό επίπεδο πρόσληψης (χαμηλό και υψηλό). Η Siemens Healthcare Diagnostics συνιστά τη χρήση εμπορικά διαθέσιμων υλικών ελέγχου ποιότητας με τουλάχιστον 2 επίπεδα (χαμηλό και υψηλό). Ένα ικανοποιητικό επίπεδο απόδοσης επιτυγχάνεται όταν οι τιμές που προκύπτουν βρίσκονται εντός του αποδεκτού εύρους των υλικών ελέγχου για τον αναλυτή ή εντός ενός καθορισμένου εύρους που καθορίστηκε με βάση ένα κατάλληλο πλαίσιο εσωτερικού εργαστηριακού ποιοτικού ελέγχου. IMMULITE 2000 Thyroid Uptake (PIEL2KTU-2 {15}, ) 11

12 Υπολογισμοί δείκτη ελεύθερης T4 Για τον υπολογισμό του δείκτη ελεύθερης T4 (FT4I), είναι απαραίτητος ο προσδιορισμός της συγκέντρωσης ολικής Τ4 με μια αξιόπιστη ανοσοεξέταση, π.χ. την εξέταση IMMULITE 2000 Ολική T4. Ο δείκτης FT4 υπολογίζεται με χρήση της Αναλογίας δέσμευσης Θυρεοειδικής Ορμόνης (ΤΗBR) άμεσα από το ποσοστό % πρόσληψης της ορμόνης. Οι υπολογισμοί με βάση την THBR προτιμώνται, καθώς οι τιμές είναι δυνατό να αξιολογηθούν με σύγκριση προς τις φυσιολογικές τιμές της ολικής Τ4. Υπολογισμός με THBR: FT4I = [T4] µg/dl x THBR THBR = %TU (ορός ασθενούς) %TU (ορός αναφοράς) Tο %TU (ορός αναφοράς) μπορεί να είναι τιμή δείγματος αναφοράς από ευθυρεοειδικούς ασθενείς, οι οποίοι διαθέτουν φυσιολογικές ποσότητες πρωτεϊνών δέσμευσης θυρεοειδικής ορμόνης. Επίσης, ως υποκατάστατο μπορεί να χρησιμοποιηθεί η μέση τιμή μιας μελέτης αναφοράς. Άμεσος υπολογισμός με χρήση του %TU: FT4I = [T4] µg/dl x %TU / 100 Το εύρος αναφοράς για την παράμετρο δείκτη ελεύθερης Τ4 μπορεί να εξασφαλίστεί με δύο τρόπους: άμεσα, από αντιστοίχιση ολικής Τ4 και αποτελεσμάτων πρόσληψης επί τοις εκατό, τα οποία λαμβάνονται από επαρκή αριθμό ευθυρεοειδικών ατόμων (δηλαδή, ατόμων χωρίς γνωστή νόσο του θυρεοειδούς) ή με υπολογισμό, από τα όρια εύρους αναφοράς για τις συγκεντρώσεις ολικής Τ4 και τις τιμές πρόσληψης επί τοις εκατό. Σημειώστε ότι η εκτίμηση με βάση τη δεύτερη προσέγγιση μπορεί να δώσει ευρύτερο διάστημα αναφοράς για τις τιμές δείκτη ελεύθερης Τ4 από ότι η πρώτη προσέγγιση. Αποδεκτές γίνονται επίσης και άλλες μέθοδοι υπολογισμού του δείκτη ελεύθερης Τ4: Συγκεκριμένα, μπορούν να χρησιοποιηθούν διαφορετικές μονάδες μέτρησης των συγκεντρώσεων T4 αντί της µg/dl. Αναμενόμενες τιμές Με βάση τη σχέση της με την εξέταση IMMULITE Πρόσληψη θυρεοειδικής ορμόνης (βλ. Σύγκριση της μεθόδου), η εξέταση αναμένεται να παρουσιάσει το ίδιο εύρος αναφοράς: Πενήντα οκτώ δείγματα ενηλίκων εθελοντών εργαστηρίου χωρίς γνωστή δυσλειτουργία του θυρεοειδούς αναλύθηκαν με τη διαδικασία IMMULITE Πρόσληψη θυρεοειδικής ορμόνης. Η εξέταση IMMULITE Πρόσληψη θυρεοειδικής ορμόνης έδωσε μέσο όρο 28,5% και κεντρικό εύρος 95% 24 έως 35%TU, το οποίο συμφωνεί με τη βιβλιογραφία. 1,10 Θεωρήστε αυτά τα όρια μόνο ως κατευθυντήριες γραμμές. Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να έχει τις δικές του τιμές αναφοράς. Περιορισμοί Η λευκωματίνη σε μη φυσιολογικά επίπεδα μπορεί να προκαλέσει ανώμαλα αποτελέσματα στην εξέταση πρόσληψης θυρεοειδικής ορμόνης. Ετεροφυλικά αντισώματα στον ανθρώπινο ορό μπορεί να αντιδράσουν με τις ανοσοσφαιρίνες που περιέχονται στα συστατικά της μεθόδου προκαλώντας δυσκολίες σε μεθόδους in vitro ανοσοανίχνευσης. [Bλ. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Δείγματα ασθενών που εκτίθενται συστηματικά σε ζώα ή προϊόντα ζωικού ορού μπορούν να παρουσιάσουν αυτού του τύπου την αλληλεπίδραση που προκαλεί δυνητικά ένα ανώμαλο αποτέλεσμα. Αυτά τα αντιδραστήρια έχουν μορφοποιηθεί έτσι, ώστε να ελαχιστοποιούν τον κίνδυνο της αλληλεπίδρασης. Παρόλ αυτά, πιθανές αλληλεπιδράσεις μεταξύ σπάνιων ορών και των συστατικών της μεθόδου μπορεί να εμφανιστούν. Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα που λαμβάνονται από αυτή τη μέθοδο θα πρέπει πάντα να χρησιμοποιούνται σε συνδυασμό με τις κλινικές εξετάσεις, το ιατρικό ιστορικό του ασθενούς και άλλα ευρήματα. 12 IMMULITE 2000 Thyroid Uptake (PIEL2KTU-2 {15}, )

13 Απόδοση Βλέπε Πίνακες και Γραφήματα για αντιπροσωπευτικά δεδομένα της απόδοσης της μεθόδου. Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε %TU. (Εκτός αν κάτι σημειώνεται διαφορετικά, όλα πραγματοποιήθηκαν σε δείγματα ορού, που συλλέχθηκαν σε σωλήνες χωρίς παρεμποδιστές πηκτών ή προσθετικών που προκαλούν θρόμβους.) Εύρος καμπύλης: 10 έως 70%TU Ακρίβεια: Για 20 μέρες κάποια δείγματα εξετάστηκαν εις διπλούν, δις ημερησίως, συνολικά 40 φορές ή 80 επαναλήψεις. (Βλ. Πίνακα "Precision".) Χολερυθρίνη: Η παρουσία χολερυθρίνης σε συγκεντρώσεις μέχρι 200 mg/l δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Αιμόλυση: Η παρουσία αιμοσφαιρίνης σε συγκεντρώσεις έως 381 mg/dl δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Σύγκριση της μεθόδου: Η μέθοδος συγκρίθηκε με τη μέθοδο IMMULITE Πρόσληψη Θυρεοειδικής Ορμόνης σε 205 δείγματα ασθενών. (Δες γράφημα.) Η κατανομή των αποτελεσμάτων έδωσε τα ακόλουθα στατιστικά στοιχεία: IMMULITE Μέση τιμή: 30,7%TU Κεντρικό εύρος 95% ( 2SD): 20,7 40,7%TU IMMULITE 2000 Μέση τιμή: 31,0%TU Κεντρικό εύρος 95% ( 2SD): 20,9 41,1%TU Τεχνική Υποστήριξη Για τεχνική υποστήριξη αποταθείτε στον αντιπρόσωπο της χώρας σας. Το Σύστημα Ποιότητας της Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. είναι επικυρωμένο με ISO 13485:2003. Polski IMMULITE 2000 Wychwyt tarczycowy Przeznaczenie: Test diagnostyczny in vitro dla analizatorów systemów IMMULITE 2000 do wyznaczenia wskaźnika poziomu białek transportujących hormony tarczycy w surowicy. Test stanowi pomoc w klinicznej ocenie stanu tarczycy. Numery katalogowe: L2KTU2 (200 testów) L2KTU3M (3000 testów) L2KTU6 (600 testów) L2KTU6M (6000 testów) Kod testu: TU Kolor: Ciemnoróżowy Wprowadzenie Test wychwytu tarczycowego stosowany jest, w połączeniu z immunoenzymatycznym testem oznaczania całkowitej T4, do korygowania wpływu krążących białek nośnikowych dla hormonów tarczycy na poziom całkowitej T4. Białka te wiążą odwracalnie zarówno T4 jak i T3, ich powinowactwo do T4 jest jednak do sześciu razy większe niż do T3. Formą aktywną fizjologicznie jest postać niezwiązana hormonu, czyli frakcja wolna. Na poziom wychwytu tarczycowego (%TU) u osób badanych ma wpływ zarówno stężenie białek nośnikowych dla hormonów tarczycy, głównie TBG, jak również stopień ich nasycenia tymi hormonami, głównie T4. Nasilona produkcja hormonów przez gruczoł tarczycy powoduje wzrost nasycenia TBG przez T4, co w rezultacie obniża procent wychwytu tarczycowego; i odwrotnie, spadek produkcji hormonów wpływa na wzrost %TU. Diagnoza stwierdzająca nadczynność, niedoczynność lub prawidłowe funkcjonowanie tarczycy postawiona na podstawie pomiaru stężenia T4 (poziom podwyższony, obniżony lub w granicach normy) jest potwierdzona, gdy %TU jest odpowiednio podniesiony, obniżony lub w granicach wartości prawidłowych. Gdy te dwa testy wykluczają się niezbędne jest wyliczenie indeksu wolnej T4 (FT4I) ze stężenia całkowitej T4 i %TU w celu określenia w jak dużym stopniu ulegają one wpływowi produkcji hormonów IMMULITE 2000 Thyroid Uptake (PIEL2KTU-2 {15}, ) 13

14 tarczycy, a w jak dużym różnicom w poziomie krążących białek nośnikowych. Wysoki poziom T4 równocześnie z niskim %TU sugeruje wzrost stężenia białek transportujących hormony tarczycy. Do sytuacji takiej dochodzi zazwyczaj u kobiet w ciąży i zażywających doustną antykoncepcję, na skutek podniesionego poziomu estrogenu. Ponadto sytuacja taka ma miejsce przy guzach feminizujących, hiperproteinemii, ostrej przerywanej porfirii, ostrym schorzeniu wątroby oraz dziedzicznej nadprodukcji TBG. Niskie stężenie T4 w połączeniu z wysokim %TU sugeruje obniżone stężenie białek nośnikowych hormonów tarczycy. Może to być spowodowane podniesionym poziomem androgenów (glukokortykoidy, sterydy androgenne, syntetyczne androgeny, przez nowotwory wirylizujące, akromegalia), hipoproteinemię (martwica nerek, przewlekłe schorzenia wyniszczające) lub stres (uraz pooperacyjny, ostra infekcja, tachykardia nadkomorowa, zastoinowa niewydolność serca). Wśród innych przyczyn wymienić należy podawanie niektórych leków, np. hydantoiny lub dużych dawek salicylanów. Zasada testu IMMULITE 2000 Wychwyt tarczycowy jest kompetycyjnym, chemiluminescencyjnym testem fazy stałej. Czas inkubacji: 1 30 minut Preparatyka próbek Zalecane jest klarowanie próbek lipemicznych przez ultrawirowanie. Hemoliza próbki może świadczyć o nieprawidłowym postępowaniu z próbką na etapie przedlaboratoryjnym. Fakt ten należy brać pod uwagę przy interpretacji wyników. Odwirowanie próbki krwi przed zakończeniem wykrzepiania może spowodować, że w supernatancie pozostanie fibryna stanowiąca przyczynę fałszywych wyników. Przed przystąpieniem do wirowania należy mieć pewność, że skrzep jest ostatecznie uformowany. Niektóre próbki, a zwłaszcza pochodzące od osób poddanych leczeniu antykoagulantami, wymagają dłuższego czasu na wytworzenie skrzepu. W zależności od producenta probówki do pobierania krwi mogą różnie wpływać na uzyskiwane wyniki. Istotne jest tworzywo i czynniki dodatkowe jak żel lub bariery oddzielające skrzep, aktywatory krzepnięcia oraz antykoagulanty. Wpływ wszystkich możliwych wariantów probówek na test IMMULITE 2000 Wychwyt tarczycowy nie został określony. Wymagana objętość próbki: 20 µl surowicy Przechowywanie: 7 dni w 2 8 C lub 3 miesiące w 20 C. Ostrzeżenia i warunki wstępne Test diagnostyczny in vitro. Odczynniki: Przechowywać w 2 8 C. Usuwać zgodnie z instrukcją. Zachowywać środki ostrożności konieczne przy pracy z materiałem potencjalnie zakaźnym. W materiałach pochodzących z krwi ludzkiej wykluczono reaktywność w kierunku syfilisu, obecność przeciwciał anty-hiv1/2, HBsAg i przeciwciał anty-hcv. Azydek sodu w stężeniu mniejszym niż 0,1 g/dl jest dodawany jako konserwant. Wykorzystane odczynniki usuwać w dużej ilości wody, by zapobiec osadzaniu azydku sodu w rurach miedzianych lub ołowianych, co może doprowadzić do wytworzenia potencjalnie wybuchowych azydków tych metali. Substrat chemiluminescencyjny: Unikać zanieczyszczenia i chronić przed bezpośrednim światłem słonecznym (patrz ulotka). Woda: Dejonizowana lub destylowana. Elementy zestawu Elementy zestawu tworzą całość. Kody na wewnętrznych pokrywach pudełka są niezbędne do wykonania oznaczenia. Wychwyt tarczycowy Pojemnik z kulkami (L2TU12) Z kodem kreskowym. 200 kulek opłaszczonych monoklonalnym mysim przeciwciałem anty-t3. Stabilne w 2 8 C do daty ważności. 14 IMMULITE 2000 Thyroid Uptake (PIEL2KTU-2 {15}, )

15 L2KTU2: 1 pojemnik L2KTU6: 3 pojemniki L2KTU3M: 15 pojemników L2KTU6M: 30 pojemników Wychwyt tarczycowy Klin odczynnikowy (L2TUA2) Z kodem kreskowym. 11,5 ml alkalicznej fosfatazy (izolowanej z jelita cieląt) - sprzęgniętej z T3 oraz wolna T3 w buforze. Stabilny w 2 8 C do daty ważności. L2KTU2: 1 klin L2KTU3M: 15 klinów L2KTU6: 3 kliny L2KTU6M: 30 klinów Przed użyciem zerwać taśmę zabezpieczającą nie uszkadzając kodu kreskowego. Usunąć foliową uszczelkę komór odczynnikowych. Wsunąć przesuwne zamknięcie komór w prowadnice w pokrywie klina. Wychwyt tarczycowy Kalibrator (LTUL) Jedna fiolka zawierająca 2 ml spreparowanej surowicy ludzkiej, z konserwantem. Po otwarciu stabilny przez 30 dni w 2 8 C lub 6 miesięcy w 20 C (rozpipetować). L2KTU2: 1 fiolka L2KTU3M: 3 fiolki L2KTU6: 2 fiolka L2KTU6M: 4 fiolki Przed wykonaniem kalibracji umocować na probówkach odpowiednie nalepki z kodem kreskowym (dostarczane z zestawem) rozpoznawane przez czytnik kodów kreskowych aparatu. Materiały dostarczane oddzielnie L2SUBM: Substrat chemiluminescencyjny L2PWSM: Roztwór płuczący L2KPM: Roztwór czyszczący LRXT: Probówki reakcyjne (jednorazowe) Ponadto niezbędne Woda destylowana lub dejonizowana, probówki testowe, kontrole Procedura oznaczenia Przestrzeganie procedur dotyczących utrzymania aparatu, zawartych w Podręczniku operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000 poprawia charakterystykę uzyskiwanych wyników. Procedury: przygotowania aparatu, ustawień aparatu, przygotowania próbek, rekalibracji, oznaczenia i kontroli jakości zgodnie z Podręcznikiem operatora do obsługi systemów IMMULITE Zalecany odstęp pomiędzy rekalibracjami: 4 tygodnie Próbki kontrolne: Przestrzegać przepisów państwowych i wymogów kontrolnych w zakresie częstotliwości kontroli jakości. Stosować kontrole lub pule surowic co najmniej o niskim i wysokim procencie wychwytu tarczycy. Siemens Healthcare Diagnostics zaleca stosowanie dostępnych w handlu próbek kontroli jakości o co najmniej 2 poziomach (niskim i wysokim). Uznaje się, że test przebiega prawidłowo, gdy uzyskane wartości analitu plasują się w przyjętym dla Kontroli zakresie dla danego analizatora lub w zakresie opracowanym w ramach wewnątrzlaboratoryjnego systemu zapewnienia jakości. Wyliczanie indeksu wolnej T4 Aby wyliczyć indeks wolnej T4 (FT4I) należy uprzednio wyznaczyć stężenie całkowitej T4 przy użyciu pokrewnej metody, np. testem IMMULITE 2000 Całkowita T4. FT4I może być wyliczony przy użyciu wskaźnika wiązania hormonów tarczycy (THBR) lub bezpośrednio z %TU. Preferowany jest pierwszy sposób ze względu na możliwość oszacowania wartości w porównaniu do całkowitego poziomu T4. Obliczenie z użyciem THBR: FT4I = [T4] µg/dl THBR THBR = %TU (surowica badana) %TU (surowica referencyjna) %TU surowicy referencyjnej może być wartością uzyskaną z puli surowic referencyjnych od osób z eutyreozą, u których stwierdzono prawidłowy poziom białek nośnikowych dla hormonów tarczycy. Można także wykorzystać wartość średnią z badań referencyjnych. Obliczenie bezpośrednio z %TU: FT4I = [T4] µg/dl %TU / 100 IMMULITE 2000 Thyroid Uptake (PIEL2KTU-2 {15}, ) 15

16 Wartości referencyjne dla FT4I można uzyskać na dwa sposoby: bezpośrednio z oznaczonego stężenia T4 i %TU od wystarczająco dużej liczby osób z eutyreozą (tzn. osób, u których nie wykryto chorób tarczycy); lub z wyliczenia z zakresów referencyjnych dla T4 oraz %TU. Należy zauważyć, że obliczenia według drugiego sposobu dają szerszy zakres wartości referencyjnych do wyliczenia FT4I. Akceptowane są także inne metody obliczania FT4I. Można również stosować inną jednostkę niż μg/dl. Oczekiwane wartości Opierając się na podobieństwie z testem IMMULITE Wychwyt tarczycowy (patrz: Porównanie metod) można oczekiwać, że zakresy wartości referencyjnych dla obu testów będą identyczne: Przy użyciu testu IMMULITE Wychwyt tarczycowy przebadano 58 surowic od dorosłych ochotników, u których nie stwierdzono chorób tarczycy. Wartość środkowych 95% ustalano na 24 do 35% TU, z wartością średnią 28,5%. Odpowiada to normom podawanym w literaturze. 1,10 Powyższe wartości należy traktować jako orientacyjne. Każde laboratorium powinno wyznaczyć własne zakresy referencyjne. Ograniczenia Na wynik oznaczenia może wpływać nieprawidłowy poziom albumin. Przeciwciała heterofilne obecne w surowicy ludzkiej mogą wchodzić w reakcję z immunoglobulinami będącymi reagentami testu immunologicznego, wpływając na przebieg oznaczenia in vitro. [Porównaj: Boscato L.M., Stuart M.C.: Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays Przeciwciała heterofilne - problem wszystkich testów immunologicznych. Clin Chem 1988:34:27-33.] Wpływ przeciwciał heterofilnych może ujawnić się w oznaczeniach wykonywanych w surowicy osób mających ciągły kontakt ze zwierzętami lub zwierzęcymi produktami krwiopochodnymi, stanowiąc potencjalną przyczynę błędnych wyników. W teście ryzyko interferencji przeciwciał heterofilnych zostało zminimalizowane przez odpowiedni dobór proporcji odczynników, tym niemniej interferencja taka może potencjalnie nastąpić w rzadkich przypadkach. W postępowaniu diagnostycznym wyniki uzyskane tą metodą powinny być z zasady interpretowane w połączeniu z badaniem klinicznym pacjenta, jego historią choroby oraz innymi okolicznościami. Parametry testu Dane charakteryzujące test przedstawiono w tabelach i rysunkach. Wyniki wyrażano w %TU. (O ile nie podano inaczej, wszystkie wyniki dotyczą próbek pobranych bez bariery żelowej i substancji przyspieszających krzepnięcie.) Zakres kalibracji: 10 do 70%TU Precyzja: Próbki testowano przez okres 20 dni w duplikatach, dwa razy dziennie, co dało w sumie 40 serii i 80 powtórzeń. (Patrz: tabela Precyzja.) Bilirubina: Obecność bilirubiny w stężeniu do 200 mg/l nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Hemoliza: Obecność hemoglobiny w stężeniu do 381 mg/dl nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Porównanie metod: Wyniki porównano z wynikami uzyskanymi przy zastosowaniu testu IMMULITE Wychwyt tarczycowy w grupie 205 próbek. (Patrz wykres.) Uzyskano następujące dane statystyczne: IMMULITE Średnia: 30,7%TU Środkowe 95% ( 2SD) Zakres: 20,7 40,7 %TU IMMULITE 2000 Średnia: 31,0%TU Środkowe 95% ( 2SD) Zakres: 20,9 41,1%TU Pomoc techniczna i konsultacje Krajowy Dystrybutor udziela wszechstronnej pomocy technicznej. System Kontroli Jakości Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. posiada Certyfikat Jakości ISO 13485: IMMULITE 2000 Thyroid Uptake (PIEL2KTU-2 {15}, )

17 IMMULITE is a trademark of Siemens Healthcare Diagnostics Siemens Healthcare Diagnostics. All rights reserved. Origin: UK Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. Llanberis, Gwynedd LL55 4EL United Kingdom PIEL2KTU 2 {15} Changes in this Edition: cc#eu21838: Removed Siemens control (CON6) from the Kit Components Supplied Separately section. Under Quality Control Samples, added information for quality control frequency, materials, and performance. Understanding the Symbols Understanding the Symbols En English Vysvětlivky symbolů Επεξήγηση των συμβόλων Znaczenie symboli Cz Česky El Ελληνικά Pl Polski The following symbols may appear on the product labeling: / Na štítku výrobku mohou být uvedeny následující symboly: / Τα ακόλουθα σύμβολα ενδέχεται να εμφανίζονται στην επισήμανση του προϊόντος: / Na etykietach produktu mogą pojawiać się poniższe symbole: Symbol Definition En: In vitro diagnostic medical device Cz: Zdravotnický prostředek pro in vitro diagnostiku El: In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή Pl: Sprzęt do medycznej diagnostyki in vitro En: Catalog Number Cz: Katalogové číslo El: Αριθμός καταλόγου Pl: Numer katalogowy En: Manufacturer Cz: Výrobce El: Κατασκευαστής Pl: Producent Symbol Definition En: Authorized Representative in the European Community Cz: Autorizované zastoupení v Evropské unii El: Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα Pl: Autoryzowany przedstawiciel w Unii Europejskiej En: CE Mark Cz: CE značka El: Σήμανση CE Pl: Znak CE En: CE Mark with identification number of notified body Cz: CE značka s identifikačním číslem notifikovaného orgánu El: Σήμανση CE με αριθμό αναγνώρισης του φορέα πιστοποίησης Pl: Znak CE z numerem identyfikacyjnym jednostki notyfikowanej En: Consult instructions for use Cz: Postupujte podle návodu k použití El: Συμβουλευτείτε τις οδηγίες λειτουργίας Pl: Zapoznać się z instrukcją użycia En: Caution! Potential Biohazard Cz: Pozor! Potenciální biohazard El: Πρoσοχή! Δυνητικός βιολογικός κίνδυνος Pl: Uwaga! Potencjalne zagrożenie biologiczne En: Temperature limitation (2 8 C) Cz: Teplotní rozsah (2 8 C) El: Περιορισμός θερμοκρασίας (2 8 C) Pl: Zakres temperatury (2 8 C) En: Upper limit of temperature ( -20 C) Cz: Horní teplotní limit ( -20 C) El: Ανώτερο όριο θερμοκρασίας ( -20 C) Pl: Górny zakres temperatury ( -20 C) En: Lower limit of temperature ( 2 C) Cz: Spodní teplotní limit ( 2 C) El: Κατώτερο όριο θερμοκρασίας ( 2 C) Pl: Dolny zakres temperatury ( 2 C) IMMULITE 2000 Thyroid Uptake (PIEL2KTU-2 {15}, ) 17

18 LOT Symbol Definition En: Do not freeze (> 0 C) Cz: Nezmrazovat (> 0 C) El: Μην καταψυχετε (> 0 C) Pl: Nie zamrażać (> 0 C) En: Do not reuse Cz: Pro jednorázové použití El: Μην κάνετε επαναληπτική χρήση Pl: Nie używać powtórnie En: Keep away from sunlight Cz: Chraňte před slunečním světlem El: Διατηρείτε μακριά από το ηλιακό φως Pl: Chronić przed światłem słonecznym En: Batch code Cz: Šarže El: Κωδικός παρτίδας Pl: Kod serii En: Contains sufficient for (n) tests Cz: Dostatečné množství pro (n) testů El: Περιεχόμενο επαρκές για (n) εξετάσεις Pl: Zawartość wystarczająca na (n) testów En: Date format (year-month) Cz: Formát data (rok-měsíc) El: Μορφή ημερομηνίας (έτος-μήνας) Pl: Zapis daty (rok-miesiąc) En: Use by Cz: Spotřebujte do El: Ημερομηνία λήξης Pl: Wykorzystać do En: Harmful Cz: Škodlivé El: Επιβλαβές Pl: Szkodliwy lub drażniący En: Corrosive Cz: Korozivní El: Διαβρωτικό Pl: Żrący BEAD PACK TEST UNIT REAG WEDGE REAG WEDGE A REAG WEDGE B REAG WEDGE D ADJUSTOR ADJUSTOR L ADJUSTOR H ADJUSTOR AB Symbol Definition En: Dangerous for the environment Cz: Nebezpečné pro životní prostředí El: Επικίνδυνο για το περιβάλλον Pl: Niebezpieczny dla środowiska En: Bead Pack Cz: Zásobník s kuličkami El: Συσκευασία σφαιριδίων Pl: Pojemnik z kulkami En: Test Unit Cz: Testovací Jednotky El: Μονάδες ανάλυσης Pl: Jednostki testowe En: Reagent Wedge Cz: Reagencie El: Δοχείο Αντιδραστηρίων Pl: Klin odczynnikowy En: Adjustor Cz: Kalibrátor El: Ρυθμιστής Pl: Kalibrator En: Adjustor, low Cz: Kalibrátor, nízký El: Ρυθμιστής, χαμηλό Pl: Kalibrator, niski En: Adjustor, high Cz: Kalibrátor, vysoký El: Ρυθμιστής, υψηλό Pl: Kalibrator, wysoki En: Adjustor Antibody Cz: Protilátka proti kalibrátoru El: Ρυθμιστής αντισώματος Pl: Przeciwciało Kalibratora En: Toxic Cz: Toxické El: Τοξικό Pl: Toksyczny DIL En: Sample Diluent Cz: Diluent Vzorků El: Αραιωτικό δείγματος Pl: Rozcieńczalnik próbek 18 IMMULITE 2000 Thyroid Uptake (PIEL2KTU-2 {15}, )