Myoglobin. For use on the IMMULITE and IMMULITE 1000 systems

Transcript

1 Myoglobin For use on the IMMULITE and IMMULITE 1000 systems

2 IMMULITE /IMMULITE 1000 Myoglobin English Intended Use: For in vitro diagnostic use with the IMMULITE and IMMULITE 1000 Analyzers for the quantitative measurement of myoglobin in serum and heparinized plasma, as an aid in the diagnosis of acute myocardial infarction (AMI). Catalog Number: LKMY1 (100 tests) Test Code: MYO Color: Brown Summary and Explanation Acute myocardial infarction (AMI) disrupts cardiac cell membranes, releasing intracellular cardiac proteins into the vascular system. Some of the proteins, including myoglobin, creatine kinase-mb (CK-MB), lactate dehydrogenase type 1 (LD1), and cardiac troponin subunits I and T, have proven useful in diagnosing AMI. 1,2 The optimal clinical utility of each marker depends on specific protein characteristics. Myoglobin, the smallest of the markers, diffuses rapidly throughout the vascular system and provides the earliest indication of AMI. Myoglobin levels become elevated hours after chest pain onset and peak within 5 12 hours. 1 The kidneys rapidly eliminate the 17.8 kda protein from the system, restoring normal circulating concentrations within hours. 1 Since the protein rapidly clears from the system, myoglobin concentrations can reliably indicate reinfarction. 3 Additionally, myoglobin measurements can preclude AMI: two consecutive low measurements, the first upon patient admission and the second 1 2 hours later, negatively predict AMI in nearly all cases. 3-5 Myoglobin measurements provide early detection of reperfusion after thrombolytic treatment as well. 6 Some unrelated patient conditions produce high myoglobin levels, decreasing test specificity. Myoglobin participates in aerobic metabolism in both skeletal and cardiac muscle cells, and high levels accompany various muscle traumas. Renal failure and other kidney problems produce high myoglobin levels as well. Most of the complications have distinct clinical symptoms that allow reliable differential diagnosis. 1,2 Principle of the Procedure IMMULITE/IMMULITE 1000 Myoglobin is a solid-phase, chemiluminescent immunometric assay. Incubation Cycles: 1 30 minutes Specimen Collection The use of an ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples. Hemolyzed samples may indicate mistreatment of a specimen before receipt by the laboratory; hence the results should be interpreted with caution. Centrifuging serum samples before a complete clot forms may result in the presence of fibrin. To prevent erroneous results due to the presence of fibrin, ensure that complete clot formation has taken place prior to centrifugation of samples. Some samples, particularly those from patients receiving anticoagulant therapy, may require increased clotting time. Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE/IMMULITE 1000 Myoglobin has not been tested with all possible variations of tube types. Consult the section on Alternate Sample Types for details on tubes that have been tested. Volume Required: 10 µl serum or heparinized plasma. (Sample cup must contain at least 100 µl more than the total volume required.) Storage: 10 days at 2 8 C or 2 months at 20 C. 8 2 IMMULITE/IMMULITE 1000 Myoglobin (PIELKMY-6 {16}, )

3 Warnings and Precautions For in vitro diagnostic use. CAUTION! POTENTIAL BIOHAZARD Contains human source material. Each donation of human blood or blood component was tested by FDA-approved methods for the presence of antibodies to human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) and type 2 (HIV-2) as well as for hepatitis B surface antigen (HBsAg) and antibody to hepatitis C virus (HCV). The test results were negative (not repeatedly reactive). No test offers complete assurance that these or other infectious agents are absent; this material should be handled using good laboratory practices and universal precautions CAUTION: This device contains material of animal origin and should be handled as a potential carrier and transmitter of disease. H412 P273, P501 Harmful to aquatic life with long lasting effects. Avoid release to the environment. Dispose of contents and container in accordance with all local, regional, and national regulations. Contains: sodium azide; Myoglobin Adjustors Reagents: Store at 2 8 C. Dispose of in accordance with applicable laws. Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C. Sodium azide, at concentrations less than 0.1 g/dl, has been added as a preservative. On disposal, flush with large volumes of water to prevent the buildup of potentially explosive metal azides in lead and copper plumbing. Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert.) Water: Use distilled or deionized water. Materials Supplied Components are a matched set. The barcode labels are needed for the assay. Myoglobin Test Units (LMY1) Each barcode-labeled unit contains one bead coated with monoclonal murine anti-myoglobin antibody. Stable at 2 8 C until expiration date. LKMY1: 100 units Allow the Test Unit bags to come to room temperature before opening. Open by cutting along the top edge, leaving the ziplock ridge intact. Reseal the bags to protect from moisture. Myoglobin Reagent Wedge (LMY2) With barcode. 7.5 ml alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to polyclonal goat anti-myoglobin antibody in buffer, with preservative. Store capped and refrigerated: stable at 2 8 C until expiration date. Recommended usage is within 30 days after opening when stored as indicated. LKMY1: 1 wedge Myoglobin Adjustors (LMYL, LMYH) Two vials (Low and High) of lyophilized myoglobin in nonhuman serum matrix, with preservative. At least 30 minutes before use: Reconstitute each vial with 2.0 ml distilled or deionized water. Mix by gentle swirling or inversion until the lyophilized material is fully dissolved. Stable at 2 8 C for 30 days after reconstitution, or for 6 months (aliquotted) at 20 C. LKMY1: 1 set Kit Components Supplied Separately LSUBX: Chemiluminescent Substrate LPWS2: Probe Wash Module LKPM: Probe Cleaning Kit LCHx-y: Sample Cup Holders (barcoded) LSCP: Sample Cups (disposable) LSCC: Sample Cup Caps (optional) Also Required Sample transfer pipets, distilled or deionized water, controls IMMULITE/IMMULITE 1000 Myoglobin (PIELKMY-6 {16}, ) 3

4 Assay Procedure Note that for optimal performance, it is important to perform all routine maintenance procedures as defined in the IMMULITE or IMMULITE 1000 Operator's Manual. See the IMMULITE or IMMULITE 1000 Operator's Manual for preparation, setup, dilutions, adjustment, assay and quality control procedures. Visually inspect each Test Unit for the presence of a bead before loading it onto the system. Recommended Adjustment Interval: 2 weeks Quality Control Samples: Follow government regulations or accreditation requirements for quality control frequency. Use controls or sample pools with at least two levels (low and high) of myoglobin. Siemens Healthcare Diagnostics recommends the use of commercially available quality control materials with at least 2 levels (low and high). A satisfactory level of performance is achieved when the analyte values obtained are within the Acceptable Control Range for the system, or within an established range determined by an appropriate internal laboratory quality control scheme. Expected Values Samples from healthy laboratory volunteers and from hospitalized patients (n = 258), that had been shown to yield myoglobin values within the normal reference range of another immunometric method, were analyzed using the IMMULITE Myoglobin assay. The median value for these samples was 25 ng/ml; 97.5% of the values were below 70 ng/ml. Consider these limits as guidelines only. Each laboratory should establish its own reference ranges. Limitation Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: ] Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings. Performance Data See Tables and Graphs for data representative of the assay's performance. Results are expressed in ng/ml. Calibration Range: Up to 1000 ng/ml The assay is traceable to an internal standard manufactured using qualified materials and measurement procedures. Analytical Sensitivity: 0.5 ng/ml High-dose Hook Effect: None up to 18,000 ng/ml Precision: Using a study design comparable to NCCLS EP5 A, a representative spectrum of samples was processed in quadruplicate, one run per day (alternating between morning and afternoon shifts), for a total of at least 20 runs per sample. Results were analyzed using one-way analysis of variance. (See "Precision" table.) Linearity: Samples were assayed under various dilutions. (See "Linearity" table for representative data.) Recovery: Samples spiked 1 to 19 with three myoglobin solutions (384, 3648 and 13,950 ng/ml) were assayed. (See "Recovery" table for representative data.) Specificity: The antibody is highly specific for myoglobin. Bilirubin: Presence of bilirubin in concentrations up to 200 mg/l has no effect on results, within the precision of the assay. Hemolysis: Presence of hemoglobin in concentrations up to 570 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. 4 IMMULITE/IMMULITE 1000 Myoglobin (PIELKMY-6 {16}, )

5 Lipemia: Presence of triglycerides in concentrations up to 5000 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Alternate Sample Type: To assess the effect of alternate sample types, blood was collected from 15 volunteers into plain, heparinized and EDTA tubes. Equal volumes of the matched samples were spiked with various concentrations of myoglobin, to obtain values throughout the calibration range of the assay, and then assayed by the IMMULITE Myoglobin procedure. (Heparin) = 0.99 (Serum) 2.8 ng/ml r = 0.99 (EDTA) = 0.93 (Serum) ng/ml r = 0.99 Means: 334 ng/ml (Serum) 328 ng/ml (Heparin) 317 ng/ml (EDTA) Method Comparison: The assay was compared to a commercially available immunoassay for myoglobin (Kit A) on 172 patient samples. (Concentration range: approximately 13 to 831 ng/ml. See graph.) By linear regression: (IMMULITE) = 0.87 (Kit A) 5.7 ng/ml r =0.981 Means: 61 ng/ml (IMMULITE) 76 ng/ml (Kit A) References 1) Wong SS. Strategic Utilization of cardiac markers for the diagnosis of acute myocardial infarction. Ann Clin Lab Sci 1996;26(4): ) Wu AH. Use of cardiac markers as assessed by outcomes analysis. Clin Biochem 1997;30(4): ) Gornall DA, Roth SN. Serial myoglobin quantitation in the early assessment of myocardial damage: a clinical study. Clin Biochem 1996;29(4): ) Wu AH, Feng YJ, Contois JH, Pervaiz S. Comparison of myoglobin, creatine kinase-mb, and cardiac troponin I for diagnosis of acute myocardial infarction. Ann Clin Lab Sci 1996;26(4): ) Woo J, Lacbawan FL, Sunheimer R, LeFever D, McCabe JB. Is myoglobin useful in the diagnosis of acute myocardial infarction in the emergency department setting? Am J Clin Pathol 1995;103(6): ) Lavin F, Kane M, Forde A, Gannon F, Daly K. Comparison of five cardiac markers in the detection of reperfusion after thrombolysis in acute myocardial infarction. British Heart Journal 1995;73(5): ) National Committee for Clinical Laboratory Standards. Procedures for the collection of diagnostic blood specimens by venipuncture; approved standard. 4th ed. NCCLS Document H3-A4, Wayne, PA: NCCLS, ) Tietz NW, editor. Clinical guide to laboratory tests. 3rd ed. Philadelphia: W.B. Saunders, 1995:442. 9) Centers for Disease Control. Update: Universal precautions for prevention of transmission of human immunodeficiency virus, hepatitis B virus and other bloodborne pathogens in healthcare settings. MMWR, 1988;37:377 82, ) Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). Protection of Laboratory Workers From Occupationally Acquired Infections; Approved Guideline - Third Edition. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; NCCLS Document M29-A3. 11) Federal Occupational Safety and Health Administration, Bloodborne Pathogens Standard, 29 CFR Technical Assistance For technical assistance, contact your National Distributor. The Quality System of Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. is certified to ISO 13485:2003. Tables and Graphs Precision (ng/ml) Within-Run 1 Total 2 Mean 3 SD 4 CV 5 SD CV % % % % % % % % % % % % % % Česky. 1 V rámci stanovení, 2 Celkem, 3 Střední hodnota, 4 Směrodatná odchylka, 5 Variační koeficient. Ελληνικά. 1 Κατά την ίδια περίοδο, 2 Συνολικά, 3 Μέσος όρος, 4 SD, 5 CV. Polski. 1 W serii, 2 Całość, 3 Średnie, 4 SD, 5 CV. IMMULITE/IMMULITE 1000 Myoglobin (PIELKMY-6 {16}, ) 5

6 Linearity (ng/ml) Dilution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E in in % 2 in % 1 in % 2 8 in in % 2 in % 1 in % 3 8 in in % 2 in % 1 in % 4 8 in in % 2 in % 1 in % 5 8 in in % 2 in % 1 in % Česky. 1 Ředění, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 % Naměřená / Očekávaná, 5 8 v 8. Ελληνικά. 1 Αραίωση, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E, 5 8 στα 8. Polski. 1 Rozcieńczenie, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O, 5 8 w 8. Recovery (ng/ml) Solution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E A % B % C % 2 23 A % B % C % 3 38 A % B % C % 4 45 A % B % C % 5 53 A % B % C % Česky. 1 Roztok, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 Naměřená / Očekávaná. Ελληνικά. 1 ιάλυμα, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E. Polski. 1 Roztwór, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O. Method Comparison 800 IMMULITE Myoglobin Kit A, ng/ml 8 (IMMULITE) = 0.87 (Kit A) 5.7 ng/ml r =0.981 English. Myoglobin Česky. Myoglobin. Ελληνικά. Μυοσφαιρίνη. Polski. Mioglobina. 6 IMMULITE/IMMULITE 1000 Myoglobin (PIELKMY-6 {16}, )

7 Česky IMMULITE/IMMULITE 1000 Myoglobin Použití : Pro in vitro diagnostické použití na analyzátorech IMMULITE a IMMULITE 1000 ke stanovení koncentrace myoglobinu v séru a heparinizované plazmě, jakožto pomůcky při diagnostice akutního infarktu myokardu (AMI). Katalogové číslo : LKMY1 (100 stanovení) Kód metody : MYO Barva : hnědá Shrnutí a vysvětlení Akutní infarkt myokardu (AMI) poškozuje membrány srdečních buněk a do krevního oběhu vylučuje intracelulární proteiny srdečních buněk. Některé z těchto proteinů včetně myoglobinu, kreatin kinázy-mb (CK-MB), laktát dehydrogenázy typu 1 (LD1) a podjednotky srdečního troponinu I a T se osvědčily jako vhodné při stanovení diagnózy AMI. 1,2 Optimální klinické využití toho kterého markeru závisí na charakteristikách jednotlivých proteinů. Myoglobin, jako nejmenší z těchto markerů, se krevním oběhem šíří rychle a poskytuje tak nejrychlejší indikaci AMI. Koncentrace myoglobinu se zvyšuje 0,5 2 hodiny po nástupu bolesti na prsou a vrcholí za 5 12 hodin. 1 Ledviny tento protein s molekulovou hmotností 17,8 kda rychle vylučují ze systému a jeho množství v cirkulaci se normalizuje do hodin. 1 Protože se myoglobin ze systému odbourává velmi rychle, jeho koncentrace může spolehlivě odhalit reinfarkt. 3 Stanovení myoglobinu může navíc pomoci AMI předem vyloučit: dvě po sobě jdoucí měření s nízkou koncentrací myoglobinu, první při příjmu pacienta a druhé po přibližně 1 2 hodinách, spolehlivě vyloučí AMI téměř ve všech případech. 3-5 Stanovení myoglobinu také umožňuje časné zjištění reperfuze po trombolytické léčbě. 6 Specificitu tohoto testu snižují některé nesouvisející stavy pacienta, které způsobují nárůst koncentrace myoglobinu. Myoglobin se podílí na aerobním metabolizmu svalových buněk kosterního svalstva a srdce a jeho vysoká koncentrace provází různá traumata svalů. Selhání ledvin a další ledvinové obtíže rovněž zvyšují množství myoglobinu. Většina z těchto komplikací se vyznačuje rozdílnými klinickými příznaky, což umožňuje spolehlivé stanovení diagnózy. 1,2 Princip Stanovení Myoglobin IMMULITE/IMMULITE 1000 je chemiluminiscenční imunochemická reakce v pevné fázi. Inkubační cykly : 1 30 minut Odebírání vzorků K úpravě lipemických vzorků se doporučuje použití ultracentrifugy. Hemolyzované vzorky můžou být známkou nesprávného zacházení s preparátem ještě před přijetím do laboratoře; proto by výsledky měly být interpretovány s obezřetností. Centrifugace vzorků séra ještě před úplným vysrážením může mít za následek přítomnost fibrinu. Chybným výsledkům způsobeným přítomností fibrinu lze zamezit úplným vysrážením vzorků před jejich centrifugací. U některých vzorků, zejména od pacientů podstupujících antikoagulační léčbu, může srážlivost vyžadovat více času. Použití zkumavek pro odběr krve od různých výrobců může přinášet rozličné hodnoty v závislosti na materiálech a přísadách včetně gelových nebo fyzických bariér, aktivátorů sraženin a/nebo antikoagulačních činidel. Stanovení Myoglobin na analyzátoru IMMULITE/IMMULITE 1000 nebylo testováno se všemi možnými variantami jednotlivých typů zkumavek. Informace o testovaných zkumavkách najdete v části o alternativních typech vzorků. Potřebný objem vzorku : 10 μl séra nebo heparinizované plazmy. (Zkumavka na vzorky musí obsahovat alespoň 100 μl navíc nad celkové požadované množství vzorku.) Skladování : 10 dní při teplotě 2 8 C nebo 2 měsíce při teplotě 20 C. 8 IMMULITE/IMMULITE 1000 Myoglobin (PIELKMY-6 {16}, ) 7

8 Upozornění a bezpečnostní opatření Pro in vitro diagnostické použití. POZOR! POTENCIÁLNÍ BIOHAZARD Obsahuje materiál lidského původu. Každé darování krve nebo jejích složek bylo testováno metodami schválenými FDA na přítomnost protilátek proti viru lidské imunodeficience typu 1 (HIV-1) a typu 2 (HIV-2) a také na povrchový antigen viru hepatitidy B (HBsAg) a protilátky proti viru hepatitidy C (HCV). Výsledky testu byly negativní (opakovaně nereaktivní). Žádný test však není absolutní zárukou nepřítomnosti uvedených nebo jiných infekčních zárodků ; s materiálem proto zacházejte podle zásad správné laboratorní praxe a dbejte obecných bezpečnostních opatření UPOZORNĚNÍ : Souprava obsahuje material živočišného původu, se kterým je třeba zacházet jako s potenciálním nosičem a přenašečem nemocí. H412 P273, P501 Škodlivý pro vodní organismy, s dlouhodobými účinky. Zabraňte uvolnění do životního prostředí. Odstraňte obsah a obal v souladu se všemi místními, regionálními a národními předpisy. Obsahuje : azid sodný ; Myoglobin kalibrátory Reagencie : Skladujte při teplotě 2 8 C. Likvidujte v souladu s platnými předpisy. Řiďte se obecnými pravidly bezpečnosti práce a se všemi komponenty nakládejte, jako by byly potenciálně infekční. Zdrojové materiály získané z lidské krve byly testovány a shledány nereaktivní na syfilis, na protilátky proti HIV 1 a 2, na povrchový antigen hepatitidy typu B (HBsAg) a na protilátky proti hepatitidě typu C. Jako konzervační látka byl přidán azid sodný v koncentracích menších než 0,1 g/dl. Při likvidaci vypláchněte velkým množstvím vody, aby se zamezilo nahromadění potenciálně výbušných azidů kovů v olověném a měděném potrubí. Chemiluminiscenční substrát : Vyvarujte se kontaminace a nevystavujte přímému slunečnímu světlu. (Viz připojený letáček.) Voda : Použijte destilovanou nebo deionizovanou vodu. Dodaný materiál Komponenty představují ucelenou sadu. Pro stanovení jsou zapotřebí štítky s čárovým kódem. Myoglobin testovací jednotky (LMY1) Každá jednotka s čárovým kódem obsahuje jednu kuličku potaženou myší monoklonální protilátkou proti myoglobinu. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. LKMY1 : 100 jednotek Před otevřením ponechte sáčky s testovacími jednotkami při pokojové teplotě vytemperovat. Sáčky rozstřihněte podél vrchního okraje; nepoškoďte uzavírací proužek. Obsah chraňte před vlhkostí opětovným uzavřením sáčku. Myoglobin reagencie (LMY2) Opatřeno čárovým kódem. 7,5 ml alkalické fosfatázy (z telecího střeva) konjugované s polyklonální kozí protilátkou proti myoglobinu v pufru, s konzervačním prostředkem. Skladujte uzavřené a v chladu: stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. Při dodržení uvedených skladovacích podmínek spotřebovat nejlépe do 30 dní po otevření. LKMY1 : 1 nádobka Myoglobin kalibrátory (LMYL, LMYH) Dvě ampulky s vysokou a nízkou koncentrací lyofilizovaného myoglobinu v nehumánní sérové matrici, s konzervačním prostředkem. Alespoň 30 minut před použitím rekonstituujte každou ampulku přidáním 2,0 ml destilované nebo deionizované vody. Míchejte mírným kroužením nebo překlápěním až do úplného rozpuštění lyofilizovaného materiálu. Stabilní 30 dní po rekonstituci při teplotě 2 8 C nebo 6 měsíců rozdělené na alikvotní části při 20 C. LKMY1 : 1 sada 8 IMMULITE/IMMULITE 1000 Myoglobin (PIELKMY-6 {16}, )

9 Materiál dodávaný zvlášť LSUBX : Chemiluminiscenční substrát LPWS2 : Promývací roztok LKPM : Čistící roztok na jehly LCHx-y : Zásobník na zkumavky na vzorky (s čárovým kódem) LSCP : Zkumavky na vzorky (na jedno použití) LSCC : Uzávěry na zkumavky na vzorky (volitelné) Dále potřebujete Pipety na přenos vzorků, destilovanou nebo deionizovanou vodu, kontroly Postup stanovení K dosažení optimálního výkonu je důležité provádět veškerou pravidelnou údržbu stanovenou v manuálu k přístroji IMMULITE nebo IMMULITE V manuálu k přístroji IMMULITE nebo IMMULITE 1000 najdete postupy přípravy, nastavení, ředění, adjustace, stanovení vzorků a kontrol. Před vložením do systému pohledem zkontrolujte, zda je v každé testovací jednotce kulička. Doporučený interval mezi adjustacemi : 2 týdny Vzorky ke kontrole kvality : Pokud jde o četnost kontroly kvality, je třeba řídit se platnými předpisy a akreditačními požadavky. Použijte kontroly nebo směsné vzorky s alespoň dvěma koncentracemi (vysokou a nízkou) myoglobinu. Společnost Siemens Healthcare Diagnostics doporučuje používat obchodně dostupné materiály kontroly kvality o přinejmenším dvou koncentracích vysoké a nízké. Vyhovující funkčnosti se dosahuje, pokud zjištěné hodnoty analytu leží uvnitř přijatelného kontrolního rozmezí analyzátoru nebo uvnitř rozmezí stanoveného příslušným interním systémem kontroly kvality dané laboratoře. Očekávané hodnoty Pomocí testu Myoglobin na analyzátoru IMMULITE byly stanoveny vzorky od zdravých dobrovolníků a hospitalizovaných pacientů (n = 258), kteří měli hodnoty koncentrace myoglobinu (naměřené pomocí jiné metody) v rámci referenčního rozmezí příslušné metody. Hodnota mediánu pro tyto vzorky byla 25 ng/ml, 97,5% hodnot bylo pod 70 ng/ml. Uvedené hranice považujte pouze za orientační. Každá laboratoř by si měla stanovit svoje vlastní referenční rozmezí. Omezení Heterofilní protilátky v lidském séru můžou reagovat s imunoglobuliny obsaženými v komponentech soupravy a způsobit interference s in vitro imunologickým stanovením. [Viz Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: ] Vzorky pacientů rutinně vystavených kontaktu se zvířaty nebo produkty zvířecího séra můžou vykázat tento typ interference a potenciálně způsobit anomální výsledky. Tyto reagencie byly vyvinuty tak, aby bylo riziko interference minimalizováno; nicméně případné interakce mezi ojedinělými séry a komponenty testu se můžou vyskytnout. Pro diagnostické účely by se výsledky tohoto stanovení měly vždy používat v kombinaci s klinickými zkouškami, zdravotní historií pacienta a ostatními nálezy. Znaky metody Reprezentativní výsledky stanovení najdete v části Tabulky a grafy. Výsledky se udávají v ng/ml. Kalibrační rozsah : Do 1000 ng/ml Souprava má návaznost na mezinárodní standard vyrobený s použitím schválených materiálů a měřících procesů. Analytická citlivost : 0,5 ng/ml High-dose Hook Effect : Do ng/ml žádný Přesnost : Pomocí rozvržení výzkumu srovnatelného s NCCLS EP5 A bylo reprezentativní spektrum vzorků zpracováno čtvermo, jeden test denně, (střídavě na ranní a odpolední směně), celkem alespoň 20 testů na jeden vzorek. Výsledky byly analyzovány pomocí jednostranné analýzy rozptylu. (Viz tabulka Přesnost.) IMMULITE/IMMULITE 1000 Myoglobin (PIELKMY-6 {16}, ) 9

10 Linearity : Stanovení vzorků bylo provedeno při rozličném ředění. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce Linearita.) Zpětná výtěžnost : Bylo provedeno stanovení vzorků séra s přídavkem tří roztoků myoglobinu (384, 3648 a ng/ml) v poměru 1 : 19. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce Zpětná výtěžnost.) Specificita : Protilátka je silně specifická vůči myoglobinu. Bilirubin : Přítomnost bilirubinu v koncentracích do 200 mg/l nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Hemolýza : Přítomnost hemoglobinu v koncentracích do 570 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Lipémie : Přítomnost triglyceridů v koncentracích do 5000 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Alternativní typ vzorku : Ke zhodnocení vlivu alternativních typů vzorku byla odebrána krev od 15 dobrovolníků do obyčejných, heparinizovaných a EDTA zkumavek. Do stejných objemů odpovídajících vzorků byl přidán roztok myoglobinu různých koncentrací, aby byly získány hodnoty napříč celým kalibračním rozsahem stanovení. Ke stanovení byl použit test Myoglobin na analyzátoru IMMULITE. (Heparin) = 0,99 (Sérum) 2,8 ng/ml r = 0,99 (EDTA) = 0,93 (Sérum) + 3,9 ng/ml r = 0,99 Střední hodnoty : 334 ng/ml (Sérum) 328 ng/ml (Heparin) 317 ng/ml (EDTA) Srovnání metody : Stanovení bylo porovnáno s komerčně dostupným imunologickým testem na myoglobin (Kit A) na 172 vzorcích od pacientů. (Koncentrační rozsah : přibližně 13 až 831 ng/ml. Viz graf.) Podle lineární regrese : (IMMULITE) = 0,87 (Kit A) 5,7 ng/ml r =0,981 Střední hodnoty : 61 ng/ml (IMMULITE) 76 ng/ml (Kit A) Technická Podpora Pro technickou podporu kontaktujte vašeho národního distributora. Systém kontroly jakosti společnosti Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. je certifikovaný podle ISO 13485:2003. Ελληνικά IMMULITE 1000 Μυοσφαιρίνη Ενδεδειγμένη χρήση: Για in vitro διαγνωστική χρήση με τον αναλυτή IMMULITE και IMMULITE 1000 για τον ποσοτικό προσδιορισμό της μυοσφαιρίνης στον ορό και το ηπαρινισμένο πλάσμα, ως βοήθημα στη διάγνωση του οξέος εμφράγματος του μυοκαρδίου (ΟΕΜ). Αριθμός καταλόγου: LKMY1 (100 εξετάσεις) Κωδικός εξέτασης: MYO Χρώμα: Καφέ Περίληψη και επεξήγηση Κατά το οξύ έμφραγμα του μυοκαρδίου (ΟΕΜ) παρατηρείται διάρρηξη της μεμβράνης των καρδιακών κυττάρων με έκκριση ενδοκυτταρικών καρδιακών πρωτεϊνών στο κυκλοφορικό σύστημα. Ορισμένες πρωτεΐνες, όπως για παράδειγμα η κρεατινινική κινάση MB (CK-MB), η γαλακτική αφυδρογενάση 1 (LD1) και οι υπομονάδες της καρδιακής τροπονίνης I και Τ έχουν αποδειχθεί χρήσιμες στη διάγνωση του ΟΕΜ. 1,2 Η άριστη κλινική αξιοποίηση κάθε δείκτη εξαρτάται από συγκεκριμένα χαρακτηριστικά της κάθε πρωτεΐνης. Η μυοσφαιρίνη, ο μικρότερος από αυτούς τους δείκτες, διαχέεται ταχέως σε ολόκληρο το κυκλοφορικό σύστημα και παρέχει την πιο έγκαιρη ένδειξη εκδήλωσης του ΟΕΜ. Τα επίπεδα μυοσφαιρίνης αυξάνονται 0,5 2 ώρες μετά την έναρξη του οπισθοστερνικού πόνου και κορυφώνονται εντός 5 12 ωρών. 1 Οι νεφροί καθαίρουν ταχέως την πρωτεΐνη αυτή, μοριακού βάρους 17,8 kda από το σύστημα, επαναφέροντας τις φυσιολογικές τιμές συγκέντρωσης στην κυκλοφορία εντός ωρών. 1 Εφόσον η πρωτεΐνη αποβάλλεται ταχέως από το σύστημα, οι συγκεντρώσεις μυοσφαιρίνης αποτελούν 10 IMMULITE/IMMULITE 1000 Myoglobin (PIELKMY-6 {16}, )

11 αξιόπιστη ένδειξη νέου εμφράγματος. 3 Επιπλέον, οι μετρήσεις της μυοσφαιρίνης είναι δυνατόν να αποκλείσουν το ενδεχόμενο ΟΕΜ: δύο διαδοχικές χαμηλές μετρήσεις, η πρώτη κατά την εισαγωγή του ασθενούς και η δεύτερη 1 2 ώρες αργότερα, αποκλείουν το ενδεχόμενο ΟΕΜ σε όλες σχεδόν τις περιπτώσεις. 3-5 Επιπλέον, οι μετρήσεις της μυοσφαιρίνης παρέχουν μια έγκαιρη ένδειξη επαναιμάτωσης μετά τη θρομβολυτική θεραπεία. 6 Ορισμένες μη σχετικές νόσοι είναι δυνατόν να προκαλέσουν αυξημένα επίπεδα μυοσφαιρίνης, μειώνοντας έτσι την ειδικότητα της εξέτασης. Η μυοσφαιρίνη συμμετέχει στον αερόβιο μεταβολισμό τόσο των σκελετικών όσο και των μυοκαρδιακών κυττάρων, ενώ υψηλά επίπεδα της πρωτεΐνης συναντώνται σε περιπτώσεις διαφόρων μυϊκών τραυματισμών. Επίσης, η νεφρική ανεπάρκεια και άλλα προβλήματα στους νεφρούς είναι δυνατό να έχουν ως αποτέλεσμα αυξημένα επίπεδα μυοσφαιρίνης. Οι περισσότερες επιπλοκές έχουν σαφή κλινικά συμπτώματα, τα οποία επιτρέπουν μια αξιόπιστη διαφορική διάγνωση. 1,2 Αρχή της διαδικασίας Η IMMULITE/IMMULITE 1000 Μυοσφαιρίνη είναι μια ξηρής φάσης, χημειοφωταυγής ανοσομετρική ανάλυση. Κύκλοι επώασης: 1 30 λεπτά Συλλογή δειγμάτων Συνιστάται η χρήση της υπερφυγοκέντρου για να καθαριστούν τα λιπιδαιμικά δείγματα. Αιμολυμένα δείγματα μπορεί να υποδηλώνουν κακή μεταχείριση του δείγματος πριν την παραλαβή του από το εργαστήριο και τα αποτελέσματα πρέπει να ερμηνεύονται με προσοχή. Η φυγοκέντριση των δειγμάτων ορού πριν την πλήρη πήξη μπορεί να έχει ως αποτέλεσμα τη δημιουργία θρόμβων. Για να αποφευχθούν λανθασμένα αποτελέσματα εξαιτίας της παρουσίας θρόμβων, βεβαιωθείτε ότι πριν τη φυγοκέντριση, το αίμα έχει πήξει πλήρως. Κάποια δείγματα, ιδιαιτέρως αυτά των ασθενών που λαμβάνουν αντιπηκτική θεραπεία, ίσως χρειάζονται μεγαλύτερο χρόνο πήξης. Οι σωλήνες συγκέντρωσης αίματος διαφορετικών εταιρειών μπορεί να δώσουν αποκλίνουσες τιμές, ανάλογα με τα υλικά και τα συμπληρώματα, συμπεριλαμβανομένων των με τζελ ή φυσικών σωληναρίων, των ενεργοποιητών πήξεως και/ή των αντιπηκτικών. Η IMMULITE/ IMMULITE 1000 Μυοσφαιρίνη δεν έχει δοκιμαστεί με όλους τους τύπους σωληναρίων. Συμβουλευθείτε την παράγραφο για τους εναλλακτικούς τύπους δειγμάτων για περισσότερες πληροφορίες σχετικά με τα σωληνάρια που έχουν δοκιμαστεί. Απαιτούμενος όγκος: 10 µl ορού ή ηπαρινισμένου πλάσματος. (Το δοχείο δείγματος θα πρέπει να περιέχει τουλάχιστον 100 µl μεγαλύτερη ποσότητα από το συνολικό απαιτούμενο όγκο.) Φύλαξη: 10 μέρες στους 2 8 C ή 2 μήνες στους 20 C. 8 Προειδοποιήσεις και προφυλάξεις Για in vitro διαγνωστική χρήση. ΠΡΟΣΟΧΗ! ΥΝΗΤΙΚΟΣ ΒΙΟΛΟΓΙΚΟΣ ΚΙΝ ΥΝΟΣ Περιέχει υλικό ανθρώπινης προέλευσης. Κάθε δωρεά ανθρώπινου αίματος ή συστατικού αίματος ελέγχθηκε με μεθόδους εγκεκριμένες από τον FDA για την ύπαρξη αντισωμάτων ενάντια στους ιούς της ανοσοανεπάρκειας του ανθρώπου τύπου 1 (HIV-1) και τύπου 2 (HIV-2), καθώς και για επιφανειακό αντιγόνο της ηπατίτιδας Β (HBsAg) και για αντισώματα ενάντια στον ιό της ηπατίτιδας C (HCV). Τα αποτελέσματα των εξετάσεων ήταν αρνητικά (όχι επανειλημμένα αντιδραστικά). Επειδή καμία εξέταση δεν παρέχει πλήρη διασφάλιση για την απουσία αυτών ή άλλων μολυσματικών παραγόντων, ο χειρισμός αυτού του υλικού θα πρέπει να γίνεται σύμφωνα με τις ορθές εργαστηριακές πρακτικές και γενικές προφυλάξεις ΠΡΟΣΟΧΗ: Η συσκευή αυτή περιέχει υλικό ζωικής προέλευσης και ο χειρισμός της πρέπει να γίνεται ως εάν επρόκειτο περί δυνητικού φορέα και παράγοντα μετάδοσης νόσου. IMMULITE/IMMULITE 1000 Myoglobin (PIELKMY-6 {16}, ) 11

12 H412 P273, P501 Επιβλαβές για τους υδρόβιους οργανισμούς, με μακροχρόνιες επιπτώσεις. Να αποφεύγεται η ελευθέρωση στο περιβάλλον. Απορρίψτε το περιεχόμενο και τον περιέκτη σε συμμόρφωση με όλους τους τοπικούς, περιφερειακούς και εθνικούς κανονισμούς. Περιέχει: αζίδιο νατρίου, Ρυθμιστές μυοσφαιρίνης Αντιδραστήρια: ιατήρηση στους 2 8 C. Απόρριψη σύμφωνα με την ισχύουσα νομοθεσία. Ακολουθήστε τις γενικές προφυλάξεις και χειριστείτε όλα τα συστατικά σαν να ήταν φορείς μολυσματικών παραγόντων. Όλα τα υλικά της μεθόδου που προέρχονται από ανθρώπινο αίμα έχουν ελεγχθεί και βρέθηκαν αρνητικά για σύφιλη, για αντισώματα στον HIV 1 και 2, για επιφανειακά αντιγόνα της ηπατίτιδας Β και για αντισώματα της ηπατίτιδας C. Αζίδιο του νατρίου σε συγκεντρώσεις μικρότερες από 0,1 g/dl έχει προστεθεί ως συντηρητικό. Κατά την απόρριψη, ξεπλύνετε με άφθονο νερό για την αποφυγή σχηματισμού πιθανών εκρηξιογόνων μεταλλικών αζιδίων στις αποχετεύσεις από μόλυβδο και χαλκό. Χημειοφωταυγές υπόστρωμα: Αποφύγετε τη μόλυνση και την έκθεση στο άμεσο ηλιακό φως. (Bλ. Ένθετο.) Νερό: Χρησιμοποιήστε απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό. Υλικά που διατίθενται Τα συστατικά αποτελούν ολοκληρωμένο σετ. Οι ετικέτες με ραβδοκώδικα είναι απαραίτητες για την ανάλυση. Μονάδες εξέτασης μυοσφαιρίνης (LMY1) Κάθε μονάδα που φέρει ετικέτα με ραβδοκώδικα περιέχει ένα σφαιρίδιο με επικάλυψη μονοκλωνικού αντισώματος αντί-μυοσφαιρίνης ποντικού. Σταθερό στους 2 8 C έως την ημερομηνία λήξεως. LKMY1: 100 μονάδες Αφήστε τις συσκευασίες των μονάδων εξέτασης να επανέλθουν στη θερμοκρασία δωματίου πριν το άνοιγμα. Ανοίξτε, κόβοντας κατά μήκος του άνω άκρου, αφήνοντας ανέπαφη τη λωρίδα σφράγισης. Επανασφραγίστε τις συσκευασίες για να τις προστατέψετε από την υγρασία. οχείο αντιδραστηρίου μυοσφαιρίνης (LMY2) Με ραβδοκώδικα. 7,5 ml αλκαλικής φωσφατάσης (από βόειο έντερο) συνδεδεμένης με πολυκλωνικό αντίσωμα αντί-μυοσφαιρίνης κατσίκας σε ρυθμιστικό διάλυμα, με συντηρητικό. Φυλάσσονται κλεισμένα στο ψυγείο: σταθερά στους 2 8 C έως την ημερομηνία λήξεως. Συνιστώμενη χρήση εντός 30 ημερών από το άνοιγμα, εφόσον τηρηθούν οι οδηγίες φύλαξης. LKMY1: 1 δοχείο Ρυθμιστές μυοσφαιρίνης (LMYL, LMYH) ύο φιαλίδια (χαμηλό και υψηλό) λυοφιλοποιημένης μυοσφαιρίνης σε μήτρα μη ανθρώπινου ορού, με συντηρητικό. Τουλάχιστον 30 λεπτά πριν τη χρήση: Κάντε ανασύσταση κάθε φιαλιδίου με 2,0 ml απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό. Αναμείξτε με απαλές κινήσεις ή με αναστροφή έως ότου το λυοφιλοποιημένο υλικό διαλυθεί πλήρως. Σταθερά στους 2 8 C για 30 ημέρες μετά την ανασύσταση ή για 6 μήνες (διαχωρισμένα) στους 20 C. LKMY1: 1 σετ Συστατικά του Kit που προμηθεύονται ξεχωριστά LSUBX: Χημειοφωταυγές υπόστρωμα LPWS2: Μονάδα πλυστικού του ανιχνευτή LKPM: Kit καθαρισμού του ανιχνευτή LCHx-y: Στηρίγματα δοχείων δειγμάτων (με ραβδοκώδικα) LSCP: οχεία δειγμάτων (μιας χρήσεως) LSCC: Καπάκια δοχείων δειγμάτων (προαιρετικά) Απαιτούνται επίσης Πιπέτες μεταφοράς δειγμάτων, απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό, δείγματα ελέγχου ιαδικασία της ανάλυσης Για άριστη λειτουργία, είναι σημαντικό να εκτελούνται όλες οι εργασίες τακτικής συντήρησης, όπως ορίζεται στο εγχειρίδιο χρήστη (Operator's Manual) του IMMULITE ή IMMULITE IMMULITE/IMMULITE 1000 Myoglobin (PIELKMY-6 {16}, )

13 Ανατρέξτε στο εγχειρίδιο χρήστη του IMMULITE ή του IMMULITE 1000 για προετοιμασία, στήσιμο, διαλύματα, ρυθμίσεις, ανάλυση και διαδικασίες ποιοτικού ελέγχου. Εκτελέστε οπτική επιθεώρηση κάθε μονάδας ανάλυσης για την παρουσία σφαιριδίου, πριν την τοποθετήσετε στο σύστημα. Συνιστώμενος χρόνος μεταξύ των ρυθμίσεων: 2 εβδομάδες είγματα ποιοτικού ελέγχου: Εφαρμόστε τους κρατικούς κανονισμούς ή τις απαιτήσεις πιστοποίησης για τη συχνότητα του ποιοτικού ελέγχου. Χρησιμοποιήστε δείγματα ελέγχου τουλάχιστον δύο επιπέδων (χαμηλό και υψηλό) μυοσφαιρίνης. Η Siemens Healthcare Diagnostics συνιστά τη χρήση εμπορικά διαθέσιμων υλικών ελέγχου ποιότητας με τουλάχιστον 2 επίπεδα (χαμηλό και υψηλό). Ένα ικανοποιητικό επίπεδο απόδοσης επιτυγχάνεται όταν οι τιμές που προκύπτουν βρίσκονται εντός του αποδεκτού εύρους των υλικών ελέγχου για τον αναλυτή ή εντός ενός καθορισμένου εύρους που καθορίστηκε με βάση ένα κατάλληλο πλαίσιο εσωτερικού εργαστηριακού ποιοτικού ελέγχου. Αναμενόμενες τιμές είγματα υγιών εθελοντών εργαστηρίου και νοσηλευόμενων ασθενών (n = 258), τα οποία έδωσαν τιμές μυοσφαιρίνης εντός του φυσιολογικού εύρους αναφοράς μιας άλλης ανοσομετρικής μεθόδου, αναλύθηκαν με χρήση της μεθόδου IMMULITE Μυοσφαιρίνη. Η ενδιάμεση τιμή αυτών των δειγμάτων ήταν 25 ng/ml. Το 97,5% των τιμών ήταν κάτω από 70 ng/ml. Θεωρήστε αυτά τα όρια μόνο ως κατευθυντήριες γραμμές. Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να έχει τις δικές του τιμές αναφοράς. Περιορισμός Ετεροφυλικά αντισώματα στον ανθρώπινο ορό μπορεί να αντιδράσουν με τις ανοσοσφαιρίνες που περιέχονται στα συστατικά της μεθόδου προκαλώντας δυσκολίες σε μεθόδους in vitro ανοσοανίχνευσης. [Bλ. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: ] είγματα ασθενών που εκτίθενται συστηματικά σε ζώα ή προϊόντα ζωικού ορού μπορούν να παρουσιάσουν αυτού του τύπου την αλληλεπίδραση που προκαλεί δυνητικά ένα ανώμαλο αποτέλεσμα. Αυτά τα αντιδραστήρια έχουν μορφοποιηθεί έτσι, ώστε να ελαχιστοποιούν τον κίνδυνο της αλληλεπίδρασης. Παρόλ αυτά, μπορεί να εμφανιστούν πιθανές αλληλεπιδράσεις μεταξύ σπάνιων ορών και των συστατικών της μεθόδου. Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα που λαμβάνονται από αυτή τη μέθοδο θα πρέπει πάντα να χρησιμοποιούνται σε συνδυασμό με τις κλινικές εξετάσεις, το ιατρικό ιστορικό του ασθενούς και άλλα ευρήματα. Απόδοση Βλέπε Πίνακες και Γραφήματα για αντιπροσωπευτικά δεδομένα της εκτέλεσης της μεθόδου. Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε ng/ml. Εύρος καμπύλης: Έως 1000 ng/ml Η εξέταση είναι ιχνηλάσιμη σε ένα εσωτερικό πρότυπο που κατασκευάστηκε χρησιμοποιώντας κατάλληλα υλικά και μετρήσιμες διαδικασίες. Αναλυτική ευαισθησία: 0,5 ng/ml High-dose επίδραση φαινομένου Hook: εν εμφανίζεται μέχρι τις ng/ml Ακρίβεια: Με χρήση ενούς σχεδίου μελέτης συγκρίσιμου με το NCCLS EP5 A, έγινε τετραπλή επεξεργασία ενός αντιπροσωπευτικού εύρους δειγμάτων, μια επανάληψη ανά ημέρα (σε εναλλασσόμενες πρωινές και απογευματινές βάρδιες) για συνολικά τουλάχιστον 20 εκτελέσεις ανά δείγμα. Τα αποτελέσματα αναλύθηκαν με χρήση μονόδρομης ανάλυσης διαφοροποίησης. (Βλ. πίνακα "Precision".) Γραμμικότητα: Τα δείγματα αναλύθηκαν σε διάφορα διαλύματα. (Βλ. πίνακα "Linearity" για αντιπροσωπευτικά δεδομένα.) Ανάκτηση: Κάποια δείγματα (1 με 19) εμπλουτίστηκαν με τρία διαλύματα μυοσφαιρίνης (384, 3648 και ng/ml) και αναλύθηκαν. (Βλ. πίνακα "Recovery" για αντιπροσωπευτικά δεδομένα.) IMMULITE/IMMULITE 1000 Myoglobin (PIELKMY-6 {16}, ) 13

14 Ειδικότητα: Το αντίσωμα έχει υψηλή εξειδίκευση στην μυοσφαιρίνη. Χολερυθρίνη: Η παρουσία χολερυθρίνης σε συγκεντρώσεις μέχρι 200 mg/l δεν επηρεάζει τα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Αιμόλυση: Η παρουσία αιμοσφαιρίνης σε συγκεντρώσεις έως 570 mg/dl δεν επηρεάζει τα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Λιπιδαιμία: Η παρουσία τριγλυκεριδίων σε συγκεντρώσεις έως 5000 mg/dl δεν επηρεάζει τα αποτελέσματα της εξέτασης μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Εναλλακτικός τύπος δείγματος: Για να εκτιμηθεί το αποτέλεσμα των εναλλακτικών τύπων δείγματος, συλλέχθηκε αίμα απο 15 εθελοντές σε απλούς, ηπαρινισμένους και ΕDTA δοκιμαστικούς σωλήνες. Ίσες ποσότητες των αντίστοιχων δειγμάτων εμπλουτίστηκαν με διάφορες συγκεντρώσεις μυοσφαιρίνης, ώστε να ληφθούν τιμές καθ' όλο το εύρος καμπύλης της ανάλυσης και στη συνέχεια αναλύθηκαν σύμφωνα με τη διαδικασία του IMMULITE Μυοσφαιρίνη. (Ηπαρίνη) = 0,99 (Ορός) 2,8 ng/ml r = 0,99 (EDTA) = 0,93 (Serum) +3,9 ng/ml r = 0,99 Μέσοι όροι: 334 ng/ml (Ορός) 328 ng/ml (Ηπαρίνη) 317 ng/ml (EDTA) Σύγκριση της μεθόδου: Η μέθοδος συγκρίθηκε με μια διαθέσιμη στο εμπόριο ανοσομετρική ανάλυση μυοσφαιρίνης (Kit A) σε 172 δείγματα ασθενών. (Εύρος συγκέντρωσης: περίπου 13 έως 831 ng/ml, βλ. γράφ.) Η ανάλυση γραμμικής παλινδρόμησης έδωσε τα ακόλουθα αποτελέσματα: (IMMULITE) = 0,87 (Kit A) 5,7 ng/ml r = 0,981 Μέσοι όροι: 61 ng/ml (IMMULITE) 76 ng/ml (Kit A) Τεχνική Υποστήριξη Για τεχνική υποστήριξη αποταθείτε στον αντιπρόσωπο της χώρας σας. Το Σύστημα Ποιότητας της Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. είναι επικυρωμένο με ISO 13485:2003. Polski IMMULITE/IMMULITE 1000 Mioglobina Przeznaczenie: Test diagnostyczny in vitro dla analizatorów IMMULITE i IMMULITE 1000 do ilościowego oznaczenia poziomu mioglobiny w surowicy i osoczu heparynowym, przydatny w diagnostyce ostrego zawału mięśnia sercowego (AMI). Numery katalogowe: LKMY1 (100 testów) Kod testu: MYO Kolor: Brązowy Wprowadzenie Ostry zawał serca (AMI) uszkadza błony komórkowe sercowych komórek mięśniowych (kardiomiocytów) prowadząc do uwolnienia do systemu krążenia sercowych białek wewnątrzkomórkowych. Niektóre z tych białek, w tym: mioglobina, kinaza kreatynowa-mb (CK-MB), dehydrogenaza mleczanowa typu 1 (LD1) oraz podjednostki sercowej troponiny T i I posiadają udowodnione znaczenie w diagnostyce AMI. 1,2 Optymalna użyteczność diagnostyczna każdego markera zależy od właściwości jego białka. Mioglobina, najmniejszy z markerów, rozprzestrzenia się szybko w systemie naczyniowym, stanowiąc dzięki temu najwcześniejszy sygnał o AMI. Poziom mioglobiny wzrasta od 30 minut do 2 godzin po wystąpieniu bólu w klatce piersiowej i osiąga maksimum pomiędzy 5 i 12 godziną. 1 Białko markera o ciężarze 17,8 kda jest szybko eliminowane z krążenia przez nerki i normalny poziom mioglobiny przywracany jest po upływie godzin. 1 Fakt ten implikuje wiarygodność mioglobiny także jako markera powtórnego zawału. 3 Ponadto oznaczenia mioglobiny pozwalają na 14 IMMULITE/IMMULITE 1000 Myoglobin (PIELKMY-6 {16}, )

15 wykluczenie AMI: dwa kolejne niskie wyniki, jeden w próbce pobranej w momencie przyjęcia i drugi w próbce o 1 lub 2 godziny późniejszej, pozwalają na wykluczenie AMI prawie we wszystkich przypadkach. 3-5 Pomiary mioglobiny pozwalają również na wczesne stwierdzenie przywrócenia perfuzji po zastosowaniu leków trombolitycznych. 6 Na obniżenie specyficzności testu wpływają pewne stany nie wiążące się z incydentem sercowo-naczyniowym lecz wywołujące wzrost poziomu mioglobiny. Mioglobina uczestniczy w metabolizmie tlenowym komórek mięśni szkieletowych i mięśnia sercowego a jej wysoki poziom towarzyszy różnym urazom tych mięśni. Do podniesienia poziomu mioglobiny przyczyniają się również dysfunkcje i choroby nerek. Większość takich komplikacji wykazuje jednak charakterystyczne dla siebie objawy kliniczne i pozwala na niezawodne rozpoznanie różnicowe. 1,2 Zasada testu IMMULITE/IMMULITE 1000 Mioglobina jest immunoenzymatycznym, chemiluminescencyjnym immunometrycznym testem fazy stałej. Czas inkubacji: 1 30 minut Preparatyka próbek Zalecane jest klarowanie próbek lipemicznych przez ultrawirowanie. Hemoliza próbki może świadczyć o nieprawidłowym postępowaniu z próbką na etapie przedlaboratoryjnym. Fakt ten należy brać pod uwagę przy interpretacji wyników. Odwirowanie próbki krwi przed zakończeniem wykrzepiania może spowodować, że w supernatancie pozostanie fibryna stanowiąca przyczynę fałszywych wyników. Przed przystąpieniem do wirowania należy mieć pewność, że skrzep jest ostatecznie uformowany. Niektóre próbki, a zwłaszcza pochodzące od osób poddanych leczeniu antykoagulantami, wymagają dłuższego czasu na wytworzenie skrzepu. Stosowane przy pobieraniu krwi probówki różnych producentów mogą różnie wpływać na uzyskiwane wyniki. Istotny jest materiał i czynniki dodatkowe jak żel lub bariery oddzielające skrzep, aktywatory krzepnięcia oraz antykoagulanty. Wpływ wszystkich możliwych wariantów probówek na test IMMULITE/IMMULITE 1000 Mioglobina nie został określony. Informacje o przetestowanych wariantach podano w akapicie Wpływ rodzaju materiału na oznaczenie. Wymagana objętość próbki: 10 µl surowicy lub heparynowego osocza. (Próbka musi zawierać co najmniej 100 µl materiału więcej niż wynosi objętość niezbędna do przeprowadzenia oznaczenia.) Przechowywanie materiału: 10 dni w 2 8 C lub 2 miesiące w 20 C. 8 Ostrzeżenia i warunki wstępne Test diagnostyczny in vitro. PRZESTROGA! POTENCJALNE ZAGROŻENIE BIOLOGICZNE Zawiera materiał pochodzenia ludzkiego. Każdą porcję ludzkiej krwi lub składnika krwi pochodzącą od dawców przetestowano metodami zaaprobowanymi przez FDA na obecność przeciwciał przeciwko ludzkiemu wirusowi nabytego niedoboru odporności typu 1 (HIV-1) i typu 2 (HIV-2), antygenu powierzchniowego zapalenia wątroby typu B (HBsAg) i przeciwciał przeciwko wirusowi zapalenia wątroby typu C (HCV). Wyniki tych badań były ujemne (nie wykazały powtarzalnej reaktywności). Jednak żadne badanie nie gwarantuje całkowitej pewności, że te lub inne czynniki chorobotwórcze nie są obecne w materiale; z tym materiałem należy postępować zgodnie z zasadami dobrej praktyki laboratoryjnej i stosować uniwersalne środki ostrożności PRZESTROGA: Materiał pochodzenia zwierzęcego. Postępować tak jak z materiałem potencjalnie zakaźnym. IMMULITE/IMMULITE 1000 Myoglobin (PIELKMY-6 {16}, ) 15

16 H412 P273, P501 Działa szkodliwie na organizmy wodne, powodując długotrwałe skutki. Unikać uwolnienia do środowiska. Pojemnik i zawartość usuwać zgodnie z wszystkimi lokalnymi, regionalnymi i krajowymi przepisami. Zawiera: azydek sodu; Mioglobina Kalibratory Odczynniki: Przechowywać w 2 8 C. Usuwać zgodnie z instrukcją. Zachowywać środki ostrożności konieczne przy pracy z materiałem potencjalnie zakaźnym. W materiałach pochodzących z krwi ludzkiej wykluczono reaktywność w kierunku syfilisu, obecność przeciwciał anty-hiv1/2, HBsAg i przeciwciał anty-hcv. Azydek sodu w stężeniu mniejszym niż 0,1 g/dl dodawany jest jako konserwant. Wykorzystane odczynniki usuwać w dużej ilości wody, by zapobiec osadzaniu azydku sodu w rurach miedzianych lub ołowianych, co może doprowadzić do wytworzenia potencjalnie wybuchowych azydków tych metali. Substrat chemiluminescencyjny: Unikać zanieczyszczenia i chronić przed bezpośrednim światłem słonecznym. (Patrz ulotka.) Woda: Dejonizowana lub destylowana. Elementy zestawu Elementy zestawu stanowią komplet. Zestaw działa w oparciu o kod kreskowy. Mioglobina Jednostki Testowe (LMY1) Oznakowana nalepką z kodem jednostka testowa zawiera kulkę opłaszczoną mysim przeciwciałem monoklonalnym anty-mioglobina. Stabilne w 2 8 C do daty ważności. LKMY1: 100 jednostek Przed otwarciem doprowadzić torebkę z jednostkami testowymi do temperatury pokojowej. Otwierać przez przecięcie górnej krawędzi nie uszkadzając hermetycznego zamknięcia. Torebkę szczelnie zamknąć by nie dopuścić do zawilgocenia pozostałych jednostek. Mioglobina Klin Odczynnikowy (LMY2) Oznaczony kodem kreskowym. 7,5 ml alkalicznej fosfatazy (izolowanej z jelita cieląt) sprzęgniętej z kozim przeciwciałem poliklonalnym anty-mioglobina w buforze z konserwantem. Zamknięty przechowywać w chłodni. Stabilny w 2 8 C do daty ważności. Zalecane zużycie w ciągu 30 dni od otwarcia przy przechowywaniu jak wyżej. LKMY1: 1 klin Mioglobina Kalibratory (LMYL, LMYH) Dwie fiolki (Niski i Wysoki) zawierające liofilizowaną mioglobinę w matrycy surowicy zwierzęcej z konserwantem. Co najmniej 30 minut przed użyciem zawartość każdej z fiolek rekonstytuować w 2,0 ml destylowanej lub dejonizowanej wody. Mieszać przez delikatne obracanie i odwracanie aż do pełnego rozpuszczenia materiału. Po rekonstytucji stabilne 30 dni w 2 8 C lub 6 miesięcy w 20 C (rozporcjować). LKMY1: 1 zestaw Materiały dostarczane oddzielnie LSUBX: Substrat chemiluminescencyjny LPWS2: Roztwór płuczący LKPM: Zestaw czyszczący LCHx-y: Stojaki na kuwety (z kodem kreskowym) LSCP: Kuwety (jednorazowe) LSCC: Kapturki na kuwety (opcjonalne) Ponadto niezbędne Pipety pasterowskie, woda destylowana lub dejonizowana, kontrole Procedura oznaczenia Przestrzeganie procedur dotyczących utrzymania aparatu, zawartych w Instrukcji obsługi zautomatyzowanego systemu chemiluminescencyjnego IMMULITE/IMMULITE 1000 poprawia charakterystykę uzyskiwanych wyników. Procedury: przygotowania i rozcieńczania próbek, ustawień aparatu, rekalibracji, oznaczenia i kontroli jakości zgodnie Instrukcjami obsługi zautomatyzowanych systemów chemiluminescencyjnych: odpowiednio IMMULITE lub IMMULITE IMMULITE/IMMULITE 1000 Myoglobin (PIELKMY-6 {16}, )

17 Należy sprawdzić czy jednostka testowa przeznaczona do wykonania oznaczenia zawiera kulkę. Zalecany odstęp pomiędzy rekalibracjami: 2 tygodnie Próbki kontrolne: Przestrzegać przepisów państwowych i wymogów kontrolnych w zakresie częstotliwości kontroli jakości. Stosować kontrole lub pule surowic zawierające mioglobinę co najmniej w dwóch stężeniach (niskim i wysokim). Siemens Healthcare Diagnostics zaleca stosowanie dostępnych w handlu próbek kontroli jakości o co najmniej 2 poziomach (niskim i wysokim). Uznaje się, że test przebiega prawidłowo, gdy uzyskane wartości analitu plasują się w przyjętym dla Kontroli zakresie dla danego analizatora lub w zakresie opracowanym w ramach wewnątrzlaboratoryjnego systemu zapewnienia jakości. Oczekiwane wartości Obliczenia wykonywano dla wyników testu IMMULITE Mioglobina w grupie 258 próbek pochodzących od ochotników z laboratorium i osób hospitalizowanych, u których poziom mioglobiny pozostawał w zakresie normy przyjętej dla innego testu immunometrycznego. Wartość mediany dla grupy wyniosła 25 ng/ml, 97,5 procent wyników plasowało się poniżej 70 ng/ml. Powyższe wartości należy traktować jako orientacyjne. Każde laboratorium powinno wyznaczyć własne zakresy referencyjne. Ograniczenia Przeciwciała heterofilne obecne w surowicy ludzkiej mogą wchodzić w reakcję z immunoglobulinami będącymi reagentami testu immunologicznego, wpływając na przebieg oznaczenia in vitro. [Porównaj: Boscato L.M., Stuart M.C.: Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays Przeciwciała heterofilne - problem wszystkich testów immunologicznych. Clin Chem 1988:34: 27-33]. Wpływ przeciwciał heterofilnych może ujawnić się w oznaczeniach wykonywanych w surowicy osób mających ciągły kontakt ze zwierzętami lub zwierzęcymi produktami krwiopochodnymi, stanowiąc potencjalną przyczynę błędnych wyników. W teście ryzyko interferencji przeciwciał heterofilnych zostało zminimalizowane przez odpowiedni dobór proporcji odczynników, tym niemniej interferencja taka może potencjalnie nastąpić w rzadkich przypadkach. W postępowaniu diagnostycznym wyniki uzyskane tą metodą powinny być z zasady interpretowane w połączeniu z badaniem klinicznym pacjenta, jego historią choroby oraz innymi okolicznościami. Parametry testu Dane charakteryzujące test przedstawiono w tabelach i na wykresach. Wyniki podano w ng/ml. Zakres kalibracji: Do 1000 ng/ml Test wykazuje zgodność pomiarową z wewnętrznymi standardami wytwarzania dzięki zastosowaniu kwalifikowanych materiałów i metod pomiaru. Czułość analityczna: 0,5 ng/ml Efekt wysokiej dawki Hook Effect: Nie występuje do stężenia ng/ml Precyzja: Oznaczenia wykonywano zgodnie z zaleceniami NCCLS EP5-A: reprezentatywną grupę próbek oznaczano w czterech powtórzeniach, w jednej serii dziennie (naprzemiennie rano i po południu), uzyskując co najmniej 20 serii dla próbki. Wyniki opracowywano jednokrokową analizą wariancji. (Patrz: tabela Precyzja.) Liniowość: Oznaczano próbki poddane kolejnym rozcieńczeniom. (Patrz: tabela Liniowość.) Odzysk: Badano próbki wzbogacane w stosunku objętościowym 1 do 19 roztworami mioglobiny o stężeniach (384, 3648 i ng/ml). (Patrz: tabela Odzysk.) Specyficzność: Przeciwciało jest wysoce specyficzne w stosunku do mioglobiy. Bilirubina: Obecność bilirubiny w stężeniu do 200 mg/l nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Hemoliza: Obecność hemoglobiny w stężeniu do 570 mg/dl nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. IMMULITE/IMMULITE 1000 Myoglobin (PIELKMY-6 {16}, ) 17

18 Lipemia: Trójglicerydy w stężeniu do 5000 mg/dl nie wpływają na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Wpływ rodzaju materiału na oznaczenie: W celu ustalenia wpływu rodzaju materiału na wynik krew od 15 ochotników pobierano do probówek zwykłych oraz heparynowych i EDTA. Równe objętości porównywanych próbek wzbogacano różnymi stężeniami mioglobiny dla uzyskania wartości w całym zakresie kalibracji testu, po czym oznaczano testem IMMULITE Mioglobina. (Heparyna) = 0,99 (Surowica) 2,8 ng/ml r = 0,99 (EDTA) = 0,93 (Surowica) + 3,9 ng/ml r = 0,99 Średnie: 334 ng/ml (Surowica) 328 ng/ml ( Heparyna) 317 ng/ml (EDTA) Porównanie metod: Test porównywano z dostępnym w handlu zestawem immunoenzymatycznym dla mioglobiny (Kit A) w grupie 172 próbek. (Zakres stężeń: od około 13 do 831 ng/ml. Patrz wykres.) Otrzymano następujące równanie regresji liniowej: (IMMULITE) = 0,87 (Kit A) 5,7 ng/ml r = 0,981 Średnie: 61 ng/ml (IMMULITE) 76 ng/ml (Kit A) Pomoc techniczna i konsultacje Krajowy Dystrybutor udziela wszechstronnej pomocy technicznej. System Kontroli Jakości Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. posiada Certyfikat Jakości ISO 13485:2003. IMMULITE is a trademark of Siemens Healthcare Diagnostics Siemens Healthcare Diagnostics. All rights reserved. Made in: UK PIELKMY 6 {16} Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. Glyn Rhonwy, Llanberis, Gwynedd LL55 4EL United Kingdom Changes in this Edition: cc#eu22593: 1) Removed references to discontinued products. 2) Under Warnings and Precautions, added biohazard symbol and potential biohazard statement, caution statement, required GHS pictograms/signal words/hazard and precautionary codes and statements, offending chemicals and sources. 3) Under References, added citations from the potential biohazard statement. 4) Changed Origin: UK to Made in: UK. 5) Updated the manufacturer address to include Glyn Rhonwy. 6) In Understanding the Symbols, revised the symbol for catalog number, added a GHS pictogram for health hazard, and updated existing symbols with GHS pictograms and terminology for exclamation mark, corrosion, skull and crossbones, and environment. Understanding the Symbols Understanding the Symbols En English Vysvětlivky symbolů Επεξήγηση των συμβόλων Znaczenie symboli Cz Česky El Ελληνικά Pl Polski The following symbols may appear on the product labeling: / Na štítku výrobku mohou být uvedeny následující symboly: / Τα ακόλουθα σύμβολα ενδέχεται να εμφανίζονται στην επισήμανση του προϊόντος: / Na etykietach produktu mogą pojawiać się poniższe symbole: Symbol Definition En: In vitro diagnostic medical device Cz: Zdravotnický prostředek pro in vitro diagnostiku El: In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή Pl: Sprzęt do medycznej diagnostyki in vitro 18 IMMULITE/IMMULITE 1000 Myoglobin (PIELKMY-6 {16}, )

19 Symbol Definition En: Catalog Number Cz: Katalogové číslo El: Αριθμός καταλόγου Pl: Numer katalogowy En: Manufacturer Cz: Výrobce El: Κατασκευαστής Pl: Producent En: Authorized Representative in the European Community Cz: Autorizované zastoupení v Evropské unii El: Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα Pl: Autoryzowany przedstawiciel w Unii Europejskiej En: CE Mark Cz: CE značka El: Σήμανση CE Pl: Znak CE En: CE Mark with identification number of notified body Cz: CE značka s identifikačním číslem notifikovaného orgánu El: Σήμανση CE με αριθμό αναγνώρισης του φορέα πιστοποίησης Pl: Znak CE z numerem identyfikacyjnym jednostki notyfikowanej En: Consult instructions for use Cz: Postupujte podle návodu k použití El: Συμβουλευτείτε τις οδηγίες λειτουργίας Pl: Zapoznać się z instrukcją użycia En: Caution! Potential Biohazard Cz: Pozor! Potenciální biohazard El: Πρoσοχή! υνητικός βιολογικός κίνδυνος Pl: Uwaga! Potencjalne zagrożenie biologiczne En: Temperature limitation (2 8 C) Cz: Teplotní rozsah (2 8 C) El: Περιορισμός θερμοκρασίας (2 8 C) Pl: Zakres temperatury (2 8 C) LOT Symbol Definition En: Upper limit of temperature ( -20 C) Cz: Horní teplotní limit ( -20 C) El: Ανώτερο όριο θερμοκρασίας ( -20 C) Pl: Górny zakres temperatury ( -20 C) En: Lower limit of temperature ( 2 C) Cz: Spodní teplotní limit ( 2 C) El: Κατώτερο όριο θερμοκρασίας ( 2 C) Pl: Dolny zakres temperatury ( 2 C) En: Do not freeze (> 0 C) Cz: Nezmrazovat (> 0 C) El: Μην καταψυχετε (> 0 C) Pl: Nie zamrażać (> 0 C) En: Do not reuse Cz: Pro jednorázové použití El: Μην κάνετε επαναληπτική χρήση Pl: Nie używać powtórnie En: Keep away from sunlight Cz: Chraňte před slunečním světlem El: ιατηρείτε μακριά από το ηλιακό φως Pl: Chronić przed światłem słonecznym En: Batch code Cz: Šarže El: Κωδικός παρτίδας Pl: Kod serii En: Contains sufficient for (n) tests Cz: Dostatečné množství pro (n) testů El: Περιεχόμενο επαρκές για (n) εξετάσεις Pl: Zawartość wystarczająca na (n) testów En: Date format (year-month) Cz: Formát data (rok-měsíc) El: Μορφή ημερομηνίας (έτος-μήνας) Pl: Zapis daty (rok-miesiąc) En: Use by Cz: Spotřebujte do El: Ημερομηνία λήξης Pl: Wykorzystać do IMMULITE/IMMULITE 1000 Myoglobin (PIELKMY-6 {16}, ) 19

20 Symbol Definition En: Health Hazard Cz: Zdravotní riziko El: Κίνδυνος για την υγεία Pl: Zagrożenie dla zdrowia ADJUSTOR H Symbol Definition En: Adjustor, high Cz: Kalibrátor, vysoký El: Ρυθμιστής, υψηλό Pl: Kalibrator, wysoki En: Exclamation Mark Cz: Vykřičník El: Θαυμαστικό Pl: Wykrzyknik En: Corrosion Cz: Koroze El: ιάβρωση Pl: Działanie żrące En: Skull and Crossbones Cz: Lebka se zkříženými hnáty El: Νεκροκεφαλή με διασταυρούμενα οστά Pl: Czaszka i skrzyżowane piszczele En: Environment Cz: Prostředí El: Περιβάλλον Pl: Środowisko ADJUSTOR AB DIL CONTROL CONTROL 1 CONTROL 2 CONTROL 3 En: Adjustor Antibody Cz: Protilátka proti kalibrátoru El: Ρυθμιστής αντισώματος Pl: Przeciwciało Kalibratora En: Sample Diluent Cz: Diluent Vzorků El: Αραιωτικό δείγματος Pl: Rozcieńczalnik próbek En: Control Cz: Kontrola El: Έλεγχος Pl: Kontrola BEAD PACK TEST UNIT REAG WEDGE REAG WEDGE A REAG WEDGE B REAG WEDGE D ADJUSTOR En: Bead Pack Cz: Zásobník s kuličkami El: Συσκευασία σφαιριδίων Pl: Pojemnik z kulkami En: Test Unit Cz: Testovací Jednotky El: Μονάδες ανάλυσης Pl: Jednostki testowe En: Reagent Wedge Cz: Reagencie El: οχείο Αντιδραστηρίων Pl: Klin odczynnikowy En: Adjustor Cz: Kalibrátor El: Ρυθμιστής Pl: Kalibrator CONTROL + CONTROL + L CONTROL CONTROL AB En: Positive Control Cz: Pozitivní kontrola El: Θετικός Έλεγχος Pl: Kontrola dodatnia En: Low Positive Control Cz: Mírně pozitivní kontrola El: Χαμηλός Θετικός Έλεγχος Pl: Kontrola nisko dodatnia En: Negative Control Cz: Negativní kontrola El: Αρνητικός Έλεγχος Pl: Kontrola ujemna En: Control Antibody Cz: Protilátka proti kontrole El: Έλεγχος αντισώματος Pl: Przeciwciało Kontrolne ADJUSTOR L En: Adjustor, low Cz: Kalibrátor, nízký El: Ρυθμιστής, χαμηλό Pl: Kalibrator, niski 20 IMMULITE/IMMULITE 1000 Myoglobin (PIELKMY-6 {16}, )