D-Dimer. For use on IMMULITE 2000 systems

Transcript

1 D-Dimer For use on IMMULITE 2000 systems

2 IMMULITE 2000 D-Dimer English Intended Use: For in vitro diagnostic use with the IMMULITE 2000 Systems Analyzers for the quantitative measurement of cross-linked fibrin degradation products (XL-FDP) containing D-dimer in human plasma (heparinized or sodium citrate). Catalog Numbers: L2KDD2 (200 tests) Test Code: DDI Color: Dark Blue Summary and Explanation The formation of D-Dimer requires three hemostatic stages: formation of clot (coagulation), Factor XIIIa crosslinking, and clot breakdown of fibrin (fibrinolysis). 1 Several studies have shown a correlation of increased D-dimer levels with clinical conditions that relate to the formation of fibrin, mirroring an in vivo lysis of formed cross-linked fibrin. 2 These conditions include deep venous thrombosis (DVT), disseminated intravascular coagulation (DIC), pulmonary embolism (PE), postoperative states, malignancy, trauma, and pre-eclampsia. 2 Signs and symptoms of DVT are non-specific and present in a myriad of non-thrombotic disorders 3 ; hence, timely, accurate, and fast D-dimer assay could provide significant utility for managing and monitoring patients with suspected DVT. Pulmonary embolism may result from deep vein thrombosis; hence, stressing an essential need of early diagnosis and treatment of DVT. 4 Principle of the Procedure IMMULITE 2000 D-Dimer is a solid-phase, two-site, chemiluminescent enzyme immunometric assay. The solid phase (bead) is coated with murine monoclonal anti-d-dimer antibody. The reagent contains alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to murine monoclonal anti-d-dimer antibody. Solid phase, reagent, and sample are incubated together for 30 minutes. D-dimer in the sample binds to the solid phase antibody and reagent antibody forming a sandwich complex on the bead. Unbound enzyme conjugate is then removed by a centrifugal wash. Finally, chemiluminescent substrate is added to the bead and a signal is generated in proportion to the bound enzyme. Incubation Cycles: 1 30 minutes Time to first result : 35 minutes Specimen Collection Lipemic or grossly contaminated samples may give erroneous results. The use of an ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples. Hemolyzed samples may indicate mistreatment of a specimen before receipt by the laboratory; hence the results should be interpreted with caution. Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE 2000 D-Dimer has not been tested with all possible variations of tube types. Consult the section on Alternate Sample Types for details on tubes that have been tested. Volume Required: 10 µl plasma (heparinized or sodium citrate) Storage: 2 days at 2 8 C, or 2 weeks at 20 C. Warnings and Precautions For in vitro diagnostic use. 2 IMMULITE 2000 D-Dimer (PIEL2KDD-3 {16}, )

3 CAUTION! POTENTIAL BIOHAZARD Contains human source material. Each donation of human blood or blood component was tested by FDA-approved methods for the presence of antibodies to human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) and type 2 (HIV-2) as well as for hepatitis B surface antigen (HBsAg) and antibody to hepatitis C virus (HCV). The test results were negative (not repeatedly reactive). No test offers complete assurance that these or other infectious agents are absent; this material should be handled using good laboratory practices and universal precautions. 5 7 CAUTION: This device contains material of animal origin and should be handled as a potential carrier and transmitter of disease. H412 P273, P501 Harmful to aquatic life with long lasting effects. Avoid release to the environment. Dispose of contents and container in accordance with all local, regional, and national regulations. Contains: 2-methyl-2H-isothiazol-3-one; D-Dimer Adjustors Reagents: Store at 2 8 C. Dispose of in accordance with applicable laws. Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C. Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert.) Water: Use distilled or deionized water. Materials Supplied Components are a matched set. Labels on the inside box are needed for the assay. D-Dimer Bead Pack (L2DD12) With barcode. 200 beads, coated with murine monoclonal anti-d-dimer. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KDD2: 1 pack D-Dimer Reagent Wedge (L2DDA2) With barcode ml alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to murine monoclonal anti-d-dimer, in buffer. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KDD2: 1 wedge Before use, tear off the top of the label at the perforations, without damaging the barcode. Remove the foil seal from the top of wedge; snap the sliding cover down into the ramps on the reagent lid. D-Dimer Adjustors (L2DDJ3, L2DDJ4) Two vials of lyophilized D-dimer in a protein/buffer matrix. Reconstitute each vial by adding 2.0 ml distilled or deionized water. Mix by gentle swirling or inversion. Stable at 2 8 C for 30 days after reconstitution, or for 6 months (aliquotted) at 20 C. L2KDD2: 1 set Before making an adjustment, place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes so that the barcodes can be read by the on-board reader. Kit Components Supplied Separately L2SUBM: Chemiluminescent Substrate L2PWSM: Probe Wash L2KPM: Probe Cleaning Kit LRXT: Reaction Tubes (disposable) LDDCM: D-Dimer Control Module (Tri-level, protein/buffer-based) Also Required Distilled or deionized water; test tubes; controls. Assay Procedure Note that for optimal performance, it is important to perform all routine maintenance procedures as defined in the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual. See the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual for preparation, setup, dilutions, adjustment, assay and quality control procedures. Recommended Adjustment Interval: 4 weeks IMMULITE 2000 D-Dimer (PIEL2KDD-3 {16}, ) 3

4 Quality Control Samples: Use controls or sample pools with at least two levels (low and high) of D-dimer. Expected Values A reference range study was performed in which 126 heparinized plasma samples from healthy laboratory volunteers with no history of cardiovascular disease were analyzed using the IMMULITE 2000 D-Dimer procedure. Results from these samples suggest a median of 260 ng FEU/mL and a nonparametric 95 th percentile of 885 ng FEU/mL. Consider these limits as guidelines only. Each laboratory should establish its own reference ranges. See also Method Comparison section (IMMULITE 2000 D-Dimer vs. VIDAS D-Dimer Exclusion ) using a cutoff value of 500 ng FEU/mL. Limitations Because D-dimer is a degradation product of fibrinolysis, sample cannot maintain strict linearity under dilution. Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings. Performance Data See Tables and Graphs for data representative of the assay's performance. Results are expressed in ng FEU/mL (FEU fibrinogen equivalent units). (Unless otherwise noted, all were generated on lithium-heparin plasma samples.) Conversion Factor: ng FEU/mL 0.5 ng/ml Reportable Range: ,000 ng FEU/mL The assay is traceable to an internal standard manufactured using qualified materials and measurement procedures. Analytical Sensitivity: 100 ng FEU/mL High-dose Hook Effect: None up to 350,000 ng FEU/mL Precision: Samples were assayed in duplicate over the course of 20 days, two runs per day, for a total of 40 runs and 80 replicates. (See Precision table.) Recovery: Samples spiked 1 to 39 with three D-dimer solutions (57,798, 115,595 and 231,190 ng FEU/mL) were assayed. (See Recovery table for representative data.) Specificity: The antibody is highly specific for D-dimer. (See Specificity table.) Bilirubin: Presence of conjugated and unconjugated bilirubin in concentrations up to 200 mg/l has no effect on results, within the precision of the assay. Hemolysis: Presence of hemoglobin in concentrations up to 600 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Lipemia: Presence of triglycerides in concentrations up to 3,000 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Alternate Sample Types: To assess the effect of alternate sample types, blood was collected from 42 volunteers into plastic lithium-heparin, sodium citrate and plasma gel barrier tubes (PST ). All tubes were from Becton Dickinson. Equal volumes of the matched samples were spiked with various concentrations of D-dimer, to obtain values throughout the reportable range of the assay, and then assayed by the IMMULITE 2000 D-Dimer procedure. (NaCitrate) = 1.01 (Li-Heparin) ng FEU/mL r = (PST) = 0.94 (Li-Heparin) ng FEU/mL r = Means: 7,004 ng FEU/mL (Lithium Heparin) 7,150 ng FEU/mL (NaCitrate) 6,722 ng FEU/mL (PST) 4 IMMULITE 2000 D-Dimer (PIEL2KDD-3 {16}, )

5 Method Comparison: The assay was compared to VIDAS D-Dimer Exclusion kit on 315 patient samples. VIDAS Cutoff at 500 ng FEU/mL Pos Neg Positive Negative Total Agreement: 91% References IMMULITE 2000 D-Dimer Cutoff at 500 ng FEU/mL Relative Sensitivity Relative Specificity 97% 87% 1) Marlar RA. D-Dimer: Establishing a laboratory assay for ruling out venous thrombosis. Medical Laboratory Observer 2002, Nov; ) Graaf FVD, et al. Exclusion of deep vein thrombosis with D-Dimer testing. Thrombosis and Haemostasis 2000;83: ) Anderson DA, et al. Management of patients with suspected deep vein thrombosis in the emergency department: combining use of a clinical diagnosis model with D-Dimer testing. The Journal of Emergency Medicine 2000;19(3): ) Shitrit D. et al. Diagnostic value of the D-Dimer test in deep vein thrombosis: improved results by a new assay method and by using discriminate levels. Thrombosis Research 2001;102: ) Centers for Disease Control. Update: Universal precautions for prevention of transmission of human immunodeficiency virus, hepatitis B virus and other bloodborne pathogens in healthcare settings. MMWR, 1988;37:377 82, ) Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). Protection of Laboratory Workers From Occupationally Acquired Infections; Approved Guideline - Third Edition. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; NCCLS Document M29-A3. 7) Federal Occupational Safety and Health Administration, Bloodborne Pathogens Standard, 29 CFR Technical Assistance Available outside the United States only. For technical assistance, contact your National Distributor. The Quality System of Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. is certified to ISO 13485:2003. Tables and Graphs Precision (ng FEU/mL) Within-Run 1 Total 2 Mean 3 SD 4 CV 5 SD CV % % % % % % 4 1, % % 5 2, % % 6 7, % % 7 14, % 1, % Česky. 1 V rámci stanovení, 2 Celkem, 3 Střední hodnota, 4 Směrodatná odchylka, 5 Variační koeficient. Ελληνικά. 1 Κατά την ίδια περίοδο, 2 Συνολικά, 3 Μέσος όρος, 4 SD, 5 CV. Polski. 1 W serii, 2 Całość, 3 Średnie, 4 SD, 5 CV. Recovery (ng FEU/mL) Solution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E A 1,939 1, % B 3,314 3, % C 6,563 6, % 2 1,069 A 2,417 2,488 97% B 3,878 3,933 99% C 6,335 6,822 93% 3 2,177 A 3,676 3, % B 4,828 5,012 96% C 7,570 7,902 96% 4 3,483 A 4,677 4,841 97% B 6,084 6,286 97% C 8,660 9,176 94% 5 11,356 A 12,722 12, % B 13,670 13,962 98% C >15,000 >15,000 Česky. 1 Roztok, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 Naměřená / Očekávaná. Ελληνικά. 1 ιάλυμα, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E. Polski. 1 Roztwór, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O. IMMULITE 2000 D-Dimer (PIEL2KDD-3 {16}, ) 5

6 Specificity Compound 1 mg/ml Added 2 Apparent ng FEU/mL 3 % Crossreactivity Fibrinogen 2 < 100 ND Fibrinogen 4 < 100 ND ND: not detectable. 5 Česky. 1 Sloučenina, 2 Přidané množství, 3 Zjevná koncentrace, 4 % Zkřížená reaktivita, 5 ND: nezjistitelné. Ελληνικά. 1 Μείγμα, 2 Προστέθηκαν, 3 Εμφανής συγκέντρωση, 4 % ιασταυρ.αντίδραση, 5 ND: Μη ανιχνεύσιμη ποσότητα. Polski. 1 Składnik, 2 Ilość dodana, 3 Ilość stwierdzona, 4 % reaktywności krzyżowej, 5 Nieoznaczlne. Česky IMMULITE 2000 D-Dimer Použití: Pro in vitro diagnostické použití na analyzátorech IMMULITE 2000 ke kvantitativnímu stanovení zesíťovaných fibrin degradačních produktů (XL-FDP) obsahhující D-dimer v lidské plazmě (heparinizované nebo s citrátem sodným). Katalogové číslo: L2KDD2 (200 stanovení) Kód metody: DDI Barva: Tmavě Modrá Shrnutí a vysvětlení Vznik D-Dimeru zahrnuje tři hemostatická stádia: tvorbu sraženiny (koagulaci), zesíťování Faktorem XIIIa a rozpad sraženiny fibrinu (fibrinolýzu). 1 Několik studií prokázalo korelaci vzrůstající hladiny D-dimeru s klinickými stavy, které jsou ve vtavu k tvorbě fibrinu a odrážejí in vivo lýzu vytvořeného zesíťovaného fibrinu. 2 K těmto stavům patří rozsáhlé žilní trombózy (DVT deep venous trombosis), deseminované intravaskulární koagulace (DIC disseminated intravascular coagulation) plicní embolie (PE pulmonary embolism), pooperační stavy, malignity, traumata a preeklampsie. 2 Znaky a symptomy DVT jsou nespecifické a přítomné u mnoha netrombotických chorob; 3 a tak by včasné, přesné a rychlé stanovení D-dimeru mohlo poskytnout významnou pomoc při péči a monitorování pacientů s podezřením na DVT. Jelikož může být plicní embolie následkem rozsáhlé žilní trombózy, vyplývá z toho důraz na nutnost včasné diagnózy a léčby DVT. 4 Princip Stanovení Stanovení IMMULITE 2000 D-Dimer je oboustranná oboustranná chemiluminiscenční imunochemická reakce v pevné fázi. Pevná fáze (kulička) je potažena myší monoklonální protilátkou proti D-dimeru. Reagencie obsahuje alkalickou fosfatázu (z telecího střeva) konjugovanou s myší monoklonální protilátkou proti D-dimeru. Pevná fáze, reagencie a vzorek jsou společně inkubovány 30 minut. D-dimer obsažený ve vzorku se váže na protilátku na kuličce a s protilátlou z reagencie tvoří sendvičový komplex na kuličce. Nenavázaný enzymový konjugát je poté odstraněń centrifugačním mytím. Na závěr je ke kuličce přidán chemiluminiscenční substrát a vzniklý signál odpovídá množství navázaného enzymu. Inkubační cykly: 1 30 minut Čas do prvního výsledku: 35 minut Odebírání vzorků Žloutenkové nebo značně kontaminované vzorky můžou dávat chybné výsledky. K úpravě lipemických vzorků se doporučuje použití ultracentrifugy. Hemolyzované vzorky můžou být známkou nesprávného zacházení s preparátem ještě před přijetím do laboratoře; proto by výsledky měly být interpretovány s obezřetností. Použití zkumavek pro odběr krve od různých výrobců může přinášet rozličné hodnoty v závislosti na materiálech a přísadách včetně gelových nebo fyzických bariér, aktivátorů sraženin a/nebo antikoagulačních činidel. Stanovení D-dimeru na analyzátorech IMMULITE 2000 nebylo testováno se všemi možnými varianty jednotlivých typů zkumavek. Informace o testovaných zkumavkách najdete v části o alternativních typech vzorků. Potřebný objem vzorku: 10 µl plasma (heparinovaná nebo citran sodný) 6 IMMULITE 2000 D-Dimer (PIEL2KDD-3 {16}, )

7 Skladování: 2 dny při teplotě 2 8 C nebo 2 týdny při teplotě 20 C. Upozornění a bezpečnostní opatření Určeno pro in vitro diagnostické použití. POZOR! POTENCIÁLNÍ BIOHAZARD Obsahuje materiál lidského původu. Každé darování krve nebo jejích složek bylo testováno metodami schválenými FDA na přítomnost protilátek proti viru lidské imunodeficience typu 1 (HIV-1) a typu 2 (HIV-2) a také na povrchový antigen viru hepatitidy B (HBsAg) a protilátky proti viru hepatitidy C (HCV). Výsledky testu byly negativní (opakovaně nereaktivní). Žádný test však není absolutní zárukou nepřítomnosti uvedených nebo jiných infekčních zárodků; s materiálem proto zacházejte podle zásad správné laboratorní praxe a dbejte obecných bezpečnostních opatření. 5 7 UPOZORNĚNÍ: Souprava obsahuje material živočišného původu, se kterým je třeba zacházet jako s potenciálním nosičem a přenašečem nemocí. H412 P273, P501 Škodlivý pro vodní organismy, s dlouhodobými účinky. Zabraňte uvolnění do životního prostředí. Odstraňte obsah a obal v souladu se všemi místními, regionálními a národními předpisy. Obsahuje: 2-methyl-2Hisothiazol-3-jedna; D-Dimer kalibrátory Reagencie: Skladujte při teplotě 2 8 C. Likvidujte v souladu s platnými předpisy. Řiďte se obecnými pravidly bezpečnosti práce a se všemi komponenty nakládejte, jako by byly potenciálně infekční. Zdrojové materiály získané z lidské krve byly testovány a shledány nereaktivní na syfylis, na protilátky proti HIV 1 a 2, na povrchový antigen hepatitidy typu B (HbsAg), a na protilátky proti hepatitidě typu C. Chemiluminiscenční substrát: Vyvarujte se kontaminace a nevystavujte přímému slunečnímu světlu. (Viz připojený letáček.) Voda: Použijte destilovanou nebo deionizovanou vodu. Dodaný materiál Komponenty představují ucelenou sadu. Pro stanovení jsou zapotřebí štítky uvnitř krabice. D-Dimer zásobník s kuličkami (L2DD12) Opatřeno čárovým kódem. 200 kuliček potažených monoklonální protilátkou proti D-dimeru. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KDD2: 1 nádobka D-Dimer Reagencie (L2DDA2) Opatřeno čárovým kódem. 11,5 ml alkalické fosfatázy (z telecího střeva) konjugované s myší monoklonální protilátkou proti D-dimeru, v pufru. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KDD2: 1 nádobka Před použitím utrhněte vršek štítku v perforovaném místě, ale nepoškoďte čárový kód. Z vrchu nádobky odstraňte uzavírací fólii; posuvný uzávěr zaklapněte do ramp na víčku reagencie. D-Dimer Kalibrátory (L2DDJ3, L2DDJ4) Dvě ampulky lyofilizovaného D-dimeru v bílkovino/pufrové matrici. Každou ampulku rekonstituujte přidáním 2,0 ml destilované nebo deionizované vody. Míchejte jemným kroužením nebo překlápěním. Po rozpuštění stabilní 30 dní při 2 8 C nebo 6 měsíců při teplotě 20 C (rozdělené na alikvotní části). L2KDD2: 1 sada Před adjustací nalepte na testovací zkumavky příslušné alikvotní štítky (dodané se soupravou) tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. Materiál dodávaný zvlášť L2SUBM: Chemiluminiscenční substrát L2PWSM: Promývací roztok L2KPM: Čistící roztok na jehly LRXT: Reakční zkumavky (na jedno použití) LDDCM: D-Dimer Kontrolní modul (Trojúrovňový, založený na bílkovino/pufrové matrici) IMMULITE 2000 D-Dimer (PIEL2KDD-3 {16}, ) 7

8 Dále potřebujete: Destilovanou nebo deionizovanou vodu; testovací zkumavky, kontroly. Postup stanovení K dosažení optimálního výkonu je důležité provádět veškerou pravidelnou údržbu stanovenou v manuálu k analyzátorům IMMULITE V manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000 najdete postupy: přípravy, nastavení, ředění, adjustace, stanovení vzorků a kontrol. Doporučený interval mezi adjustacemi: 4 týdny Vzorky ke kontrole kvality: Použijte kontroly nebo směsné vzorky s alespoň dvěmi koncentracemi (vysokou a nízkou) D-dimeru. Očekávané hodnoty Výzkum referenčního rozmezí byl proveden na vzorcích heparinizované plazmy, ze 126 zjevně zdravých dobrovolníků bez anamnézy kardiovaskulárního onemocnění, které byly měřeny pomocí IMMULITE 2000 D-Dimer. Výsledky z těchto vzorků naznačují střední hodnotu 260 ng FEU/ml a neparametrický percentil byl 95 z 885 ng FEU/ml. Uvedené hranice považujte pouze za orientační. Každá laboratoř by si měla stanovit svoje vlastní referenční rozmezí. Viz také srovnávací metody (IMMULITE 2000 D-Dimer vs. Vidas D-Dimer Exclusion ) kde je užita mezní hodnota (cut-off) 500 ng FEU/ml. Omezení Protože D-dimer je degradační produkt fibrinolýzy, vzorek při ředění nemusí být lineární. Heterofilní protilátky v lidském séru můžou reagovat s imunoglobuliny obsaženými v komponentech soupravy a způsobit interference s in vitro imunologickým stanovením. [Viz Boscato LM, Stuart MC. Heterofilní protilátky: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Vzorky pacientů rutinně vystavených kontaktu se zvířaty nebo produkty zvířecího séra můžou vykázat tento typ interference a potenciálně způsobit anomální výsledky. Tyto reagencie byly vyvinuty tak, aby bylo riziko interference minimalizováno; nicméně případné interakce mezi ojedinělými séry a komponenty testu se můžou vyskytnout. Pro diagnostické účely by se výsledky tohoto stanovení měly vždy používat v kombinaci s klinickými zkouškami, zdravotní historií pacienta a ostatními nálezy. Znaky metody Reprezentativní výsledky stanovení najdete v části Tabulky a grafy. Výsledky se udávají v ng FEU/ml (FEU fibrinogen ekvivalentní jednotky). (Pokud není uvedeno jinak, všechny výsledky získané prostřednictvím vzorků plazmy odebíraných do lithium heparinátu.) Konverzní faktor: ng FEU/ml 0,5 ng/ml Kalibrační rozsah: ng FEU/ml Souprava má návaznost na mezinárodní standard vyrobený s použitím schválených materiálů a měřících procesů. Analytická citlivost: 100 ng FEU/ml High-dose Hook Effect: Do ng FEU/ml žádný Přesnost: Vzorky byly stanovovány dvojmo v průběhu 20 dní, dva testy denně, celkem 40 testů a 80 replikátů. (Viz tabulka Precision.) Zpětná Výtěžnost: Bylo provedeno stanovení vzorků séra s přídavkem tří roztoků D-dimeru (57 798, a ng FEU/ml) v poměru 1:39. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce Zpětná výtěžnost.) Specificita: Protilátka je silně specifická pro D-Dimer. (Viz tabulka Specificita".) Bilirubin: Přítomnost konjugovaného a nekonjugovaného bilirubinu v koncentracích do 200 mg/l nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky stanovení. Hemolýza: Přítomnost hemoglobinu v koncentracích do 600 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. 8 IMMULITE 2000 D-Dimer (PIEL2KDD-3 {16}, )

9 Lipémie: Přítomnost triglyceridů v koncentracích do mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Alternativní typ vzorku: K zhodnocení vlivu alternativního typu vzorku byly odebrány vzorky krve 42 dobrovolníků do plastových lithium-heparinových, s citratem sodných a do zkumavek s plasmovými gelovými bariérami (PST). Všechny zkumavky byly od firmy Becton Dickinson. Do všech vzorků byl přidán D-dimer, tak abychom získali koncentrace napříč celým kalibračním rozsahem a následně byly vzorky vyšetřeny metodou IMMULITE 2000 D-Dimer. (NaCitrát) = 1,01 (Li-Heparin) + 95,6 ng FEU/ml r = 0,993 (PST) = 0,94 (Li-Heparin) ng FEU/ml r = 0,987 Střední hodnoty: ng FEU/ml (Lithium Heparin) ng FEU/ml (NaCitrát) ng FEU/ml (PST) Srovnání metody: Stanovení bylo porovnáno se soupravou VIDAS D-Dimer Exclusion na 315 vzorcích od pacientů. VIDAS mezní hodnota 500 ng FEU/ml Poz Neg Pozitivní Negativní Celková shoda 91% IMMULITE 2000 D-Dimer mezní hodnota 500 ng FEU/ml Relativní citlivost Relativní specificita 97% 87% Technická Podpora Pro technickou podporu kontaktujte vašeho národního distributora. Systém kontroly jakosti společnosti Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. je certifikovaný podle ISO 13485:2003. Ελληνικά IMMULITE 2000 D- ιμερές Ενδεδειγμένη χρήση: Για in vitro διαγνωστική χρήση με τα συστήματα αναλυτών IMMULITE 2000 για την ποσοτική μέτρηση των χιαστί συνδεδεμένων προϊόντων αποδόμησης του ινώδους (XL-FDP) που περιέχουν D-διμερές στο ανθρώπινο πλάσμα (ηπαρινισμένο ή κιτρικό νάτριο). Αριθμός Καταλόγου: L2KDD2 (200 εξετάσεις) Κωδικός εξέτασης: DDI Χρώμα: Σκούρο μπλε Περίληψη και Επεξήγηση Ο σχηματισμός του D-διμερούς απαιτεί τρία αιμοστατικά στάδια: τον σχηματισμό θρόμβου (πήξη), χιαστί σύνδεση του Παράγοντα XIIIa και αποικοδόμηση του θρόμβου του ινώδους (ινωδόλυση) (fibrinolysis). 1 Πολλές μελέτες έδειξαν κάποια συσχέτιση των αυξηθέντων επιπέδων D-διμερούς με κλινικές καταστάσεις που συνδέονται στον σχηματισμό ινώδους, αντικατοπτρίζοντας μια λύση του σχηματισθέντος χιαστί ινώδους. 2 Αυτές οι καταστάσεις συμπεριλαμβάνουν βαθεία φλεβική θρόμβωση (DVT), διάχυτη ενδοαγγειακή πήξη (DIC), πνευμονική εμβολή (PE), μετεγχειρητικές καταστάσεις, κακοήθεια, τραύμα και προεκλαμψία. 2 Οι ενδείξεις και τα συμπτώματα της DVT είναι μη ειδικά και παρουσιάζονται σε αναρίθμητες περιπτώσεις μη θρομβωτικών παθήσεων, 3 συμεπώς, η έγκαιρη, ακριβής και ταχεία ανάλυση του D-διμερούς θα μπορούσε να απβεί ιδιαίτερα χρήσιμη στην αγωγή και παρακολούθηση ασθενών για τους οποίους υπάρχει υποψία ότι πάσχουν από DVT. Η πνευμονική εμβολή μπορεί να προκύψει από βαθεία φλεβική θρόμβωση, υπογραμμίζοντας συνεπώς, την θεμελιώδη ανάγκη ταχείας διάγνωσης και θεραπείας της DVT. 4 IMMULITE 2000 D-Dimer (PIEL2KDD-3 {16}, ) 9

10 Αρχή της ιαδικασίας Η IMMULITE 2000 D- ιμερές είναι μια στερεής φάσης, δύο θέσεων, χημειοφωταυγής, ενζυμική, ανοσομετρική ανάλυση. Η στερεή φάση (σφαιρίδιο) επικαλύπτεται από μονοκλωνικό αντίσωμα αντι-lbp ποντικού. Το αντιδραστήριο περιέχει αλκαλικής φωσφατάση (από βόειο έντερο) συζευγμένης με μονοκλωνικό αντί- D-διμερές αντίσωμα ποντικού. Η στερεή φάση, το αντιδραστήριο και το δείγμα επωάζονται μαζί για 30 λεπτά. Το D- διμερές στο δείγμα συνδέεται με με το αντίσωμα της στερεής φάσης και το αντίσωμα του αντιδραστηρίου, συγκροτώντας έτσι ένα σύμπλεγμα sandwich στο σφαιρίδιο. Το ελεύθερο από χημικό δεσμό ενζυμικό παράγωγο απομακρύνεται με φυγόκεντρη πλύση. Τέλος, το χημειοφωταυγές υπόστρωμα προστίθεται στο σφαιρίδιο και παράγεται σήμα σε αναλογία με το δεσμευμένο ένζυμο. Κύκλοι επώασης: 1 30 λεπτά Χρόνος για το πρώτο αποτέλεσμα: 35 λεπτά Συλλογή είγματος Τα λιιπιδαιμικα ή τα πολύ μολυσμένα δείγματα μπορεί να δώσουν λάθος αποτελέσματα. Συνίσταται η χρήση της υπερφυγοκέντρου για να καθαριστούν τα λιπιδαιμικά δείγματα Τα αιμολυμένα δείγματα μπορεί να υποδηλώνουν κακή μεταχείριση του δείγματος πριν την παραλαβή του από το εργαστήριο και τα αποτελέσματα πρέπει να ερμηνεύονται με προσοχή. Οι σωλήνες συγκέντρωσης αίματος από διαφορετικές εταιρείες μπορεί να φέρουν διάφορες τιμές, ανάλογα με τα υλικά και τα συμπληρώματα, συμπεριλαμβανομένων των με τζελ ή φυσικών σωληναρίων, των ενεργοποιητών πήξεως και/ή των αντιπηκτικών. Η IMMULITE 2000 D- ιμερές δεν έχει δοκιμαστεί με όλους τους τύπους σωληναρίων. Συμβουλευθείτε την παράγραφο για τους εναλλακτικούς τύπους δειγμάτων για περισσότερες πληροφορίες σχετικά με τα σωληνάρια που έχουν δοκιμαστεί. Απαιτούμενος Όγκος: 10 µl πλάσματος (ηπαρινισμένου ή κιτρικού νατρίου). Φύλαξη: 2 ημέρες στους 2 8 C ή 2 εβδομάδες στους 20 C. Προειδοποιήσεις και Προφυλάξεις Για in vitro διαγνωστική χρήση. ΠΡΟΣΟΧΗ! ΥΝΗΤΙΚΟΣ ΒΙΟΛΟΓΙΚΟΣ ΚΙΝ ΥΝΟΣ Περιέχει υλικό ανθρώπινης προέλευσης. Κάθε δωρεά ανθρώπινου αίματος ή συστατικού αίματος ελέγχθηκε με μεθόδους εγκεκριμένες από τον FDA για την ύπαρξη αντισωμάτων ενάντια στους ιούς της ανοσοανεπάρκειας του ανθρώπου τύπου 1 (HIV-1) και τύπου 2 (HIV-2), καθώς και για επιφανειακό αντιγόνο της ηπατίτιδας Β (HBsAg) και για αντισώματα ενάντια στον ιό της ηπατίτιδας C (HCV). Τα αποτελέσματα των εξετάσεων ήταν αρνητικά (όχι επανειλημμένα αντιδραστικά). Επειδή καμία εξέταση δεν παρέχει πλήρη διασφάλιση για την απουσία αυτών ή άλλων μολυσματικών παραγόντων, ο χειρισμός αυτού του υλικού θα πρέπει να γίνεται σύμφωνα με τις ορθές εργαστηριακές πρακτικές και γενικές προφυλάξεις. 5 7 ΠΡΟΣΟΧΗ: Η συσκευή αυτή περιέχει υλικό ζωικής προέλευσης και ο χειρισμός της πρέπει να γίνεται ως εάν επρόκειτο περί δυνητικού φορέα και παράγοντα μετάδοσης νόσου. H412 P273, P501 Επιβλαβές για τους υδρόβιους οργανισμούς, με μακροχρόνιες επιπτώσεις. Να αποφεύγεται η ελευθέρωση στο περιβάλλον. Απορρίψτε το περιεχόμενο και τον περιέκτη σε συμμόρφωση με όλους τους τοπικούς, περιφερειακούς και εθνικούς κανονισμούς. Περιέχει: 2-μεθυλ-2Hισοθειαζολ-3-όνη, ρυθμιστές D-διμερούς Αντιδραστήρια: ιατήρηση στους 2 8 C. Απόρριψη σύμφωνα με την ισχύουσα νομοθεσία. Ακολουθείστε τις γενικές προφυλάξεις και χειριστείτε όλα τα συστατικά σαν να ήταν φορείς μολυσματικών παραγόντων. Όλα τα υλικά της μεθόδου που προέρχονται 10 IMMULITE 2000 D-Dimer (PIEL2KDD-3 {16}, )

11 από ανθρώπινο αίμα έχουν ελεγχθεί και βρέθηκαν αρνητικά για σύφιλη, για αντισώματα στον HIV 1 και 2, για επιφανειακά αντιγόνα της ηπατίτιδας Β και για αντισώματα της ηπατίτιδας C. Χημειοφωταυγές υπόστρωμα: Αποφύγετε την μόλυνση και την έκθεση στο άμεσο ηλιακό φως. (Βλέπε ένθετο). Νερό: Χρησιμοποιείτε απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό. Υλικά που διατίθενται Τα συστατικά αποτελούν ένα ολοκληρωμένο σετ. Οι ετικέτες στο εσωτερικό κουτί είναι απαραίτητες για την ανάλυση. Συσκευασία σφαιριδίων D- ιμερούς (L2DD12) Με ραβδοκώδικα. 200 σφαιρίδια, επικαλυμμένα με μονοκλωνικό αντίσωμα ποντικού anti-d-διμερές. Σταθερό στους 2 8 C έως την ημερομηνία λήξης. L2KDD2: 1 συσκευασία οχείο Αντιδραστηρίων D- ιμερούς (L2DDA2) Με ραβδοκώδικα. 11,5 ml αλκαλικής φωσφατάσης (από βόειο έντερο) συνδεδεμένης με μονοκλωνικό αντί-d-διμερές ποντικού σε ρυθμιστικό διάλυμα. Σταθερό στους 2 8 C έως την ημερομηνία λήξης. L2KDD2: 1 δοχείο Πριν τη χρήση, σχίστε την πάνω ετικέτα, χωρίς να καταστρέψετε τον ραβδοκώδικα. Αφαιρέστε (ξεκολλήστε) προσεκτικά το κάλυμμα από την επάνω επιφάνεια του δοχείου, και πιέστε το κάλυμμα κάτω προς τους κεκλιμένους οδηγούς-ράγες. Ρυθμιστές D- ιμερούς (L2DDJ3, L2DDJ4) ύο φιαλίδια (χαμηλό και ψηλό) που περιέχουν λυοφιλοποιημένο D-διμερές σε μήτρα πρωτεΐνης/ ρυθμιστικού διαλύματος. Κάντε ανασύσταση κάθε φιαλιδίου με προσθήκη 2,0 ml απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό. Αναμείξτε με απαλές κινήσεις ή αναστροφή. Σταθεροί στους 2 8 C για 30 μέρες μετά την ανασύσταση ή για 6 μήνες (διαχωρισμένοι) στους 20 C. L2KDD2: 1 σετ Πριν κάνετε τη ρύθμιση, τοποθετείστε τις κατάλληλες ετικέτες (παρέχονται με το kit) σε δοκιμαστικούς σωλήνες, έτσι, ώστε οι ραβδοκώδικες να μπορούν να διαβαστούν από το κατάλληλο σύστημα. Συστατικά του Kit που παρέχονται ξεχωριστά L2SUBM: Χημειοφωταυγές υπόστρωμα L2PWSM: Πλυστικό του ανιχνευτή L2KPM: Kit καθαρισμού του ανιχνευτή LRXT: Σωλήνες εξέτασης μιας χρήσης LDDCM: Μονάδα ελέγχου D- ιμερούς (Τριών επιπέδων, με πρωτεϊνική βάση) Απαιτούνται επίσης: Απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό, δείγματα ελέγχου ποιότητας, γυάλινα σωληνάρια. ιαδικασία της Ανάλυσης Σημειώστε ότι για το βέλτιστο αποτέλεσμα, είναι σημαντικό να ακολουθηθούν όλες οι τυπικές διαδικασίες όπως ορίζονται στο εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE Βλέπε το εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000 για: προετοιμασία, στήσιμο, αραιώσεις, ρυθμίσεις, ανάλυση και διαδικασίες ποιοτικού έλέγχου. Συνιστώμενος χρόνος μεταξύ των ρυθμίσεων: 4 εβδομάδες είγματα ποιοτικού ελέγχου: Χρησιμοποιήστε δείγματα ελέγχου ή απλά δείγματα τουλάχιστον δύο επιπέδων (χαμηλό και ψηλό) D- ιμερές. Αναμενόμενες τιμές ιενεργήθηκε μελέτη εύρους αναφοράς στην οποία 126 ηπαρινισμένα δείγματα πλάσματος από υγιείς εθελοντές εργαστηρίου χωρίς ιστορικό καρδιοαγγειακής ασθένειας αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας την διαδικασία IMMULITE 2000 D- ιμερούς. Τα αποτελέσματα αυτών των δειγμάτων προτείνουν διάμεση τιμή 260 ng FEU/mL και μη παραμετρικό 95 ο εκατοστημόριο 885 ng FEU/mL. Θεωρείστε αυτά τα όρια μόνο ως κατευθυντήριες γραμμές. Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να θεσπίσει τα δικά του εύρη αναφοράς. IMMULITE 2000 D-Dimer (PIEL2KDD-3 {16}, ) 11

12 Βλέπε επίσης την παράγραφο Method Comparison (Σύγκριση της Μεθόδου) (IMMULITE 2000 D- ιμερές ως προς το Vidas D-Dimer Exclusion ) χρησιμοποιώντας μια τιμή αποκοπής (cutoff) 500 ng FEU/mL. Περιορισμοί Επειδή το D-διμερές είναι ένα προϊόν αποικοδόμησης ινωδόλυσης, το δείγμα δεν μπορεί να διατηρήσει αυστηρά την γραμμικότητά του κάτω από αραίωση. Ετεροφυλικά αντισώματα στον ανθρώπινο ορό μπορεί να αντιδράσουν με τις ανοσοσφαιρίνες που περιέχονται στα συστατικά της μεθόδου προκαλώντας αλληλεπιδράσεις με in vitro ανοσοαναλύσεις. (Βλέπε Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] είγματα ασθενών που εκτίθενται συστηματικά σε ζώα ή προϊόντα ζωικού ορού μπορούν να παρουσιάσουν αυτού του τύπου την αλληλοεπίδραση που προκαλεί δυνητικά ένα ανώμαλο αποτέλεσμα. Αυτά τα αντιδραστήρια έχουν μορφοποιηθεί έτσι, ώστε, να ελαχιστοποιούν τον κίνδυνο της αλληλοεπίδρασης παρόλ αυτά, πιθανές αλληλεπιδράσεις μεταξύ των σπάνιων ορών και των συστατικών της μεθόδου μπορεί να εμφανιστούν. Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα που λαμβάνονται από αυτή τη μέθοδο θα πρέπει πάντα να χρησιμοποιούνται σε συνδυασμό με τις κλινικές εξετάσεις, το ιατρικό ιστορικό του ασθενούς και άλλα ευρήματα. Απόδοση Βλέπε Πίνακες και Γραφήματα για αντιπροσωπευτικά δεδομένα της εκτέλεσης της μεθόδου. Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε ng/ml FEU/mL (FEU ισοδύναμες μονάδες ινωδογόνο). (Εκτός αν κάτι σημειώνεται διαφορετικά, όλα τα αποτελέσματα παρήχθησαν σε δείγματα λιθίου-ηπαρίνης.) Παράγοντας μετατροπής: ng FEU/mL 0,5 ng/ml Εύρος αναφοράς: ng FEU/mL Η εξέταση είναι ιχνηλάσιμη σε ένα εσωτερικό πρότυπο που κατασκευάστηκε χρησιμοποιώντας κατάλληλα υλικά και μετρήσιμες διαδικασίες. Αναλυτική ευαισθησία: 100 ng FEU/mL Υψηλή δόση φαινομένου Hook: Καμία επίδραση έως τα ng FEU/mL Ακρίβεια: Για 20 μέρες κάποια δείγματα εξετάστηκαν εις διπλούν, δις ημερησίως, συνολικά 40 φορές ή 80 επαναλήψεις. (Βλέπε Πίνακα Precision.) Ανάκτηση: Κάποια δείγματα (1 με 39) εμπλουτίστηκαν με τρία διαλύματα D- ιμερούς (57 798, και ng FEU/mL) και αναλύθηκαν. (Βλέπε Πίνακα Recovery για αντιπροσωπευτικά δεδομένα.) Ειδικότητα: Το αντίσωμα έχει υψηλή ειδικότητα στο D- ιμερές. (Βλέπε Πίνακα Specificity.) Χολερυθρίνη: Η παρουσία χολερυθρίνης (συνδεδεμένης και έμμεσης) σε συγκεντρώσεις έως 200 mg/l δεν επηρεάζει τα αποτελέσματα της εξέτασης μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Αιμόλυση: Η παρουσία αιμοσφαιρίνης σε συγκεντρώσεις μέχρι 600 mg/dl δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Λιπιδαιμία: Η παρουσία τριγλυκεριδίων σε συγκεντρώσεις μέχρι mg/dl δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Εναλλακτικοί τύποι δείγματος: Για να εκτιμηθεί το αποτέλεσμα των εναλλακτικών τύπων δειγμάτων, συλλέχθηκε αίμα από 42 εθελοντές σε πλαστικούς, λιθίου-ηπαρίνης, κιτρικού νατρίου και σωλήνων ράβδου πλάσματος γέλης (PST). Όλοι οι σωλήνες ήταν από την Becton Dickinson. Ίσες ποσότητες των αντίστοιχων δειγμάτων εμπλουτίστηκαν με διάφορες συγκεντρώσεις D-διμερούς, ώστε να ληφθούν τιμές καθ' όλο το εύρος αναφοράς της ανάλυσης, και στη συνέχεια αναλύθηκαν σύμφωνα με τη διαδικασία της IMMULITE 2000 D- ιμερούς. (Κιτρικό Na) = 1,01 (Li-Ηπαρίνη) + 95,6 ng FEU/mL r = 0,993 (PST) = 0,94 (Li-Ηπαρίνη) ng FEU/mL r = 0,987 Μέσοι Όροι ng FEU/mL (Λίτιο-Ηπαρίνη) ng FEU/mL (Κιτρικό Na) ng FEU/mL (PST) 12 IMMULITE 2000 D-Dimer (PIEL2KDD-3 {16}, )

13 Σύγκριση της Μεθόδου: Η μέθοδος συγκρίθηκε με το κιτ VIDAS D-Dimer Exclusion σε 315 δείγματα ασθενών. IMMULITE 2000 D- ιμερές Αποκοπή (Cutoff) στα 500 ng FEU/mL VIDAS Αποκοπή (Cutoff) στα Σχετική Σχετική 500 ng FEU/mL Θετ. Αρν. Ευαισθησία Ειδικότητα Θετικά Αρνητικά Συνολική συμφωνία: 91% 97% 87% Τεχνική Υποστήριξη Για τεχνική υποστήριξη αποταθείτε στον αντιπρόσωπο της χώρας σας. Το Σύστημα Ποιότητας της Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. είναι επικυρωμένο με ISO 13485:2003. Polski IMMULITE 2000 D-Dimer Przeznaczenie: Test diagnostyczny in vitro dla analizatorów systemów IMMULITE 2000 przeznaczony do ilościowego oznaczania usieciowanych produktów degradacji fibryny (XL-FDP) zawierających D-dimer w osoczu ludzkim (heparynizowanym lub z cytrynianem sodowym). Numery katalogowe: L2KDD2 (200 testów) Kod testu: DDI Kolor: ciemnoniebieski Wprowadzenie Tworzenie się D-dimeru wymaga trzech etapów hemostazy: tworzenia się skrzepu (koagulacji), usieciowania pod wpływem czynnika XIIIa i rozpadu proteolitycznego fibrynogenu (fibrynolizy). 1 Kilka badań wykazało korelację pomiędzy podwyższonymi poziomami D-dimeru a stanami klinicznymi, które wiążą się z powstawaniem fibryny, odzwierciedleniem lizy in vivo powstałej fibryny usieciowanej. 2 Stany te dotyczą zakrzepicy żył głębokich (ang. DVT), rozsianego wykrzepiania wewnątrznaczyniowego (ang. DIC), zatorowości płucnej (ang. PE), stanów pooperacyjnych, zmian złośliwych, urazów i stanu przedrzucawkowego. 2 Oznaki i objawy zakrzepicy żył głębokich są nieswoiste i występują przy wielu zaburzeniach niezakrzepowych, 3 skutkiem tego w odpowiednim czasie, dokładne i szybkie oznaczenie D-dimeru może stanowić istotną pomoc przy prowadzeniu i monitorowaniu pacjentów z podejrzeniem zakrzepicy żył głębokich. Zatorowość płucna może spowodowana być zakrzepicą żył głębokich; dlatego też tak ważne jest wczesne rozpoznanie i leczenie zakrzepicy żył głębokich. 4 Zasada testu IMMULITE 2000 D-Dimer jest chemiluminescencyjnym, dwupunktowym testem immunometrycznym w fazie stałej. Faza stała (perła) opłaszczona jest mysim przeciwciałem monoklonalnym przeciwko anty-d-dimerowi. Reagent zawiera fosfatazę alkaliczną (z jelita cielęcia) sprzężoną z mysim przeciwciałem monoklonalnym przeciwko anty-d-dimerowi. Fazę stałą, reagent oraz próbkę inkubuje się razem przez 30 minut. D-dimer w próbce wiąże się z przeciwciałem w fazie stałej oraz przeciwciałem reagentu, tworząc na perle kompleks zwany kanapką. Niezwiązana część koniugatu enzymu jest następnie odplukiwana i usuwana przez wirowanie. Na koniec do perły dodawany jest substrat chemiluminescencyjny i generowany jest sygnał, który jest proporcjonalny do ilości związanego enzymu. Cykle inkubacji: 1 30 minut Czas do pierwszego wyniku: 35 minut Preparatyka próbek Próbki lipemiczne lub silnie zanieczyszczone mogą dawać błędne wyniki. Zalecane jest klarowanie próbek lipemicznych przez ultrawirowanie. Hemoliza próbki może świadczyć o nieprawidłowym postępowaniu z próbką na etapie przedlaboratoryjnym. Fakt ten należy brać pod uwagę przy interpretacji wyników. IMMULITE 2000 D-Dimer (PIEL2KDD-3 {16}, ) 13

14 Stosowane przy pobieraniu krwi probówki różnych producentów mogą dawać różne wyniki w zależności od materiałów i dodatków, w tym żel lub bariery fizjologiczne, aktywatory krzepnięcia i/lub antykoagulanty. Test IMMULITE 2000 D-Dimer nie został przebadany przy użyciu wszystkich możliwych wariantów probówek. Szczegółowe informacje o przetestowanych typach probówek podano w dziale Alternatywne typy probówek. Wymagana objętość: 10 µl osocza (heparynizowanego lub z cytrynianem sodowym) Przechowywanie: 2 dni w temp. 2 8 C lub 2 tygodnie w temp. 20 C. Ostrzeżenia i środki ostrożności Do użytku diagnostycznego in vitro. PRZESTROGA! POTENCJALNE ZAGROŻENIE BIOLOGICZNE Zawiera materiał pochodzenia ludzkiego. Każdą porcję ludzkiej krwi lub składnika krwi pochodzącą od dawców przetestowano metodami zaaprobowanymi przez FDA na obecność przeciwciał przeciwko ludzkiemu wirusowi nabytego niedoboru odporności typu 1 (HIV-1) i typu 2 (HIV-2), antygenu powierzchniowego zapalenia wątroby typu B (HBsAg) i przeciwciał przeciwko wirusowi zapalenia wątroby typu C (HCV). Wyniki tych badań były ujemne (nie wykazały powtarzalnej reaktywności). Jednak żadne badanie nie gwarantuje całkowitej pewności, że te lub inne czynniki chorobotwórcze nie są obecne w materiale; z tym materiałem należy postępować zgodnie z zasadami dobrej praktyki laboratoryjnej i stosować uniwersalne środki ostrożności. 5 7 PRZESTROGA: Materiał pochodzenia zwierzęcego. Postępować tak jak z materiałem potencjalnie zakaźnym. H412 P273, P501 Działa szkodliwie na organizmy wodne, powodując długotrwałe skutki. Unikać uwolnienia do środowiska. Pojemnik i zawartość usuwać zgodnie z wszystkimi lokalnymi, regionalnymi i krajowymi przepisami. Zawiera: 2-metylo-2Hizotiazolino-3-on; D-Dimer kalibratory zestawu Odczynniki: Przechowywać w temp. 2 8 C. Utylizować zgodnie z mającymi zastosowanie przepisami. Zachować ogólne środki ostrożności i obchodzić się ze wszystkimi składnikami, zakładając, że mogą one stanowić źródło zakażenia. Materiał źródłowy pochodzący z ludzkiej krwi został przetestowany i uznany za niereaktywny w przypadku syfilisu, przeciwciał HIV 1 i 2, antygenu powierzchniowego żółtaczki typu B oraz przeciwciał żółtaczki typu C. Substrat chemiluminescencyjny: Unikać zanieczyszczenia i chronić przed bezpośrednim działaniem światła słonecznego. (Patrz ulotka.) Woda: Używać wody destylowanej lub dejonizowanej. Elementy zestawu Elementy zestawu tworzą całość. Kody na wewnętrznych pokrywach pudełka są niezbędne do wykonania oznaczenia. D-Dimer Pojemnik z perłami (L2DD12) Z kodem kreskowym. 200 pereł opłaszczonych mysim przeciwciałem monoklonalnym przeciwko D-dimerowi. Stabilne w temp. 2 8 C do upływu daty ważności. L2KDD2: 1 opakowanie D-Dimer klin z odczynnikiem (L2DDA2) Z kodem kreskowym. 11,5 ml fosfatazy alkalicznej (wyizolowanej z jelit cieląt) sprzęgnietej z mysim przeciwciałem monoklonalnym przeciwko D-dimerowi w buforze. Stabilny w temp. 2 8 C do upływu daty ważności. L2KDD2: 1 klin Przed użyciem zerwać taśmę zabezpieczającą nie uszkadzając kodu kreskowego. Usunąć foliową uszczelką komór odczynnikowych. Wsunąć 14 IMMULITE 2000 D-Dimer (PIEL2KDD-3 {16}, )

15 przesuwne zamknięcie komór w prowadnice w pokrywie klina. D-Dimer kalibratory zestawu (L2DDJ3, L2DDJ4) Dwie fiolki liofilizowanego D-dimeru w matrycy białkowej/buforze. Zawartość każdej fiolki rekonstytuować poprzez dodanie 2,0 ml wody destylowanej lub dejonizowanej. Mieszać delikatnie obracając lub odwracając. Po rekonstutucji stabilne w 2 8 C przez 30 dni lub przez 6 miesięcy (po rozpipetowaniu) w temp. 20 C. L2KDD2: 1 zestaw Przed wykonaniem kalibracji na probówki nakleić odpowiednie nalepki z kodem kreskowym (znajdujące się w zestawie) rozpoznawane przez czytnik kodów kreskowych aparatu. Materiały nie znajdujące się w zestawie L2SUBM: Substrat chemiluminescencyjny L2PWSM: Roztwór płuczący L2KPM: Roztwór czyszczący igłę pipetora LRXT: Probówki reakcyjne (jednorazowe) LDDCM: Moduł kontrolny D-dimeru (trójpoziomowy, białkowo-buforowy) Ponadto niezbędne: woda destylowana lub dejonizowana, probówki, kontrole. Procedura oznaczenia Przestrzeganie procedur dotyczących utrzymania aparatu, zawartych w Podręczniku operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000 poprawia charakterystykę uzyskiwanych wyników. Procedury: przygotowania aparatu, ustawień aparatu, przygotowania i rozcieńczania próbek, rekalibracji, oznaczenia i kontroli jakości zgodnie z Podręcznikiem operatora do obsługi systemów IMMULITE Zalecany odstęp pomiędzy rekalibracjami: 4 tygodnie Próbki kontrolne: Stosować kontrole lub zestawy próbek o co najmniej dwu poziomach stężeń (niskim i wysokim) D-dimeru. Wartości spodziewane Badanie zakresu wartości referencyjnych przeprowadzono w grupie 126 próbek z osoczem heparynizowanym pochodzących od zdrowych ochotników nie chorujących na chorobę krążenia wykorzystując procedurę IMMULITE 2000 D-dimer. Wyniki z tych próbek sugerują średnią 260 ng FEU/mL; 95. percentyl wyniósł 885 ng FEU/mL. Powyższe wartości należy traktować jedynie jako orientacyjne. Każde laboratorium powinno wyznaczyć własne zakresy referencyjne. Patrz również akapit Porównanie metod (IMMULITE 2000 D-dimer w stosunku do testu VIDAS D-Dimer Exclusion ) posługując się wartością odcięcia 500 ng FEU/mL. Ograniczenia Jako, że D-dimer jest produktem degradacji fibryny, to w próbkach nie daje się zachować ściśle liniowości po rozcieńczeniu. Przeciwciała heterofilne obecne w surowicy ludzkiej mogą wchodzić w reakcję z immunoglobulinami będącymi reagentami testu immunologicznego, wpływając na przebieg oznaczenia in vitro. [Porównaj: Boscato L.M., Stuart M.C.: Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays Przeciwciała heterofilne - problem wszystkich testów immunologicznych. Clin Chem 1988:34: 27-33]. Wpływ przeciwciał heterofilnych może ujawnić się w oznaczeniach wykonywanych w surowicy osób mających ciągły kontakt ze zwierzętami lub zwierzęcymi produktami krwiopochodnymi, stanowiąc potencjalną przyczynę błędnych wyników. W teście ryzyko interferencji przeciwciał heterofilnych zostało zminimalizowane przez odpowiedni dobór proporcji odczynników, tym niemniej interferencja taka może potencjalnie nastąpić w rzadkich przypadkach. W postępowaniu diagnostycznym wyniki uzyskane tą metodą powinny być z zasady interpretowane w połączeniu z badaniem klinicznym pacjenta, jego historią choroby oraz innymi stanami. IMMULITE 2000 D-Dimer (PIEL2KDD-3 {16}, ) 15

16 Parametry testu Dane charakteryzują test przedstawiono w tabelach i na wykresach. Wyniki wyrażono w ng FEU/mL (FEU jednostki równoważnika fibrynogenu). (O ile nie podano inaczej, wszystkie wyniki dotyczą osocza pobranego na heparynę litową.) Przelicznik: ng FEU/mL 0,5 ng/ml Odnotowywany zakres: ng FEU/mL Test wykazuje zgodność pomiarową z zewnętrznymi standardami wypracowanymi przy zastosowaniu jakościowych materiałów i sprawdzonych metod pomiaru. Czułość analityczna: 100 ng FEU/mL Efekt wysokiej dawki (High-Dose Hook Effect): Niestwierdzany do ng FEU/mL Precyzja: róbki oznaczano w duplikatach w ciągu 20 dni, po dwie serie dziennie, otrzymując 40 serii i 80 powtórzeń. (Patrz tabela Precyzja.) Odzysk: Oznaczano próbki wzbogacane w stosunku objętościowym od 1 do 39 trzema roztworami D-dimeru o stężeniach: , i ng FEU/mL. (Aby porównać reprezentatywne wyniki, patrz tabela Odzysk.) Swoistość: Przeciwciało jest wysoce swoiste dla D-dimeru. (Patrz tabela Swoistość.) Bilirubina: Obecność bilirubiny związanej i niezwiązanej w stężeniu do 200 mg/l nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Hemoliza: Obecność hemoglobiny w ilości do 600 mg/dl nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Lipemia: Obecność trójglicerydów w stężeniu do mg/dl nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Różnorodne typy próbek: W celu określenia wpływu różnorodnych typów próbek na oznaczenia pobrano krew od 42 ochotników do probówek plastikowych z heparyną litową, cytrynianem sodu oraz probówek z barierą żelową (PST), Wszystkie probówki wyprodukowała firma Becton Dickinson. Równe objętości pogrupowanych próbek wzbogacono kalcytoniną o różnych stężeniach tak, aby uzyskać wartości pokrywające cały odnotowywany zakres kalibracji testu. Próbki oznaczono następnie zgodnie z procedurą testu IMMULITE 2000 D-Dimer. (NaCitrate) = 1,01 (Li-Heparyna) + 95,6 ng FEU/mL r = 0,993 (PST) = 0,94 (Li-Heparyna) ng FEU/mL r = 0,987 Ĺšrednie: ng FEU/mL (Lit Heparyna) ng FEU/mL (NaCitrate) ng FEU/mL (PST) Porównanie metod: Test porównano z zestawem VIDAS D-Dimer Exclusion w grupie 315 próbek pacjentów. IMMULITE 2000 D-dimer w. odcięcia przy 500 ng FEU/mL VIDAS w. odcięcia przy Względna Względna 500 ng FEU/mL Poz. Neg. czułość swoistość Pozytywne Negatywne Zgodność całkowita: 91% 97% 87% Pomoc techniczna i konsultacje Krajowy Dystrybutor udziela wszechstronnej pomocy technicznej. System Kontroli Jakości Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. posiada Certyfikat Jakości ISO 13485:2003. IMMULITE is a trademark of Siemens Healthcare Diagnostics Siemens Healthcare Diagnostics. All rights reserved. Made in: UK Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. Glyn Rhonwy, Llanberis, Gwynedd LL55 4EL United Kingdom PIEL2KDD 3 {16} 16 IMMULITE 2000 D-Dimer (PIEL2KDD-3 {16}, )

17 Changes in this Edition: cc#eu22516: 1) Under Warnings and Precautions, added biohazard symbol and potential biohazard statement, caution statement, required GHS pictograms/signal words/hazard and precautionary codes and statements, offending chemicals and sources. 2) Under References, added citations from the potential biohazard statement. 3) Changed Origin: UK to Made in: UK. 4) Updated the manufacturer address to include Glyn Rhonwy. 5) In Understanding the Symbols, revised the symbol for catalog number, added a GHS pictogram for health hazard, and updated existing symbols with GHS pictograms and terminology for exclamation mark, corrosion, skull and crossbones, and environment. Understanding the Symbols Understanding the Symbols En English Vysvětlivky symbolů Επεξήγηση των συμβόλων Znaczenie symboli Cz Česky El Ελληνικά Pl Polski The following symbols may appear on the product labeling: / Na štítku výrobku mohou být uvedeny následující symboly: / Τα ακόλουθα σύμβολα ενδέχεται να εμφανίζονται στην επισήμανση του προϊόντος: / Na etykietach produktu mogą pojawiać się poniższe symbole: Symbol Definition En: In vitro diagnostic medical device Cz: Zdravotnický prostředek pro in vitro diagnostiku El: In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή Pl: Sprzęt do medycznej diagnostyki in vitro En: Catalog Number Cz: Katalogové číslo El: Αριθμός καταλόγου Pl: Numer katalogowy En: Manufacturer Cz: Výrobce El: Κατασκευαστής Pl: Producent En: Authorized Representative in the European Community Cz: Autorizované zastoupení v Evropské unii El: Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα Pl: Autoryzowany przedstawiciel w Unii Europejskiej Symbol Definition En: CE Mark Cz: CE značka El: Σήμανση CE Pl: Znak CE En: CE Mark with identification number of notified body Cz: CE značka s identifikačním číslem notifikovaného orgánu El: Σήμανση CE με αριθμό αναγνώρισης του φορέα πιστοποίησης Pl: Znak CE z numerem identyfikacyjnym jednostki notyfikowanej En: Consult instructions for use Cz: Postupujte podle návodu k použití El: Συμβουλευτείτε τις οδηγίες λειτουργίας Pl: Zapoznać się z instrukcją użycia En: Caution! Potential Biohazard Cz: Pozor! Potenciální biohazard El: Πρoσοχή! υνητικός βιολογικός κίνδυνος Pl: Uwaga! Potencjalne zagrożenie biologiczne En: Temperature limitation (2 8 C) Cz: Teplotní rozsah (2 8 C) El: Περιορισμός θερμοκρασίας (2 8 C) Pl: Zakres temperatury (2 8 C) En: Upper limit of temperature ( -20 C) Cz: Horní teplotní limit ( -20 C) El: Ανώτερο όριο θερμοκρασίας ( -20 C) Pl: Górny zakres temperatury ( -20 C) En: Lower limit of temperature ( 2 C) Cz: Spodní teplotní limit ( 2 C) El: Κατώτερο όριο θερμοκρασίας ( 2 C) Pl: Dolny zakres temperatury ( 2 C) En: Do not freeze (> 0 C) Cz: Nezmrazovat (> 0 C) El: Μην καταψυχετε (> 0 C) Pl: Nie zamrażać (> 0 C) En: Do not reuse Cz: Pro jednorázové použití El: Μην κάνετε επαναληπτική χρήση Pl: Nie używać powtórnie IMMULITE 2000 D-Dimer (PIEL2KDD-3 {16}, ) 17

18 Symbol Definition En: Keep away from sunlight Cz: Chraňte před slunečním světlem El: ιατηρείτε μακριά από το ηλιακό φως Pl: Chronić przed światłem słonecznym BEAD PACK Symbol Definition En: Bead Pack Cz: Zásobník s kuličkami El: Συσκευασία σφαιριδίων Pl: Pojemnik z kulkami LOT En: Batch code Cz: Šarže El: Κωδικός παρτίδας Pl: Kod serii TEST UNIT En: Test Unit Cz: Testovací Jednotky El: Μονάδες ανάλυσης Pl: Jednostki testowe En: Contains sufficient for (n) tests Cz: Dostatečné množství pro (n) testů El: Περιεχόμενο επαρκές για (n) εξετάσεις Pl: Zawartość wystarczająca na (n) testów REAG WEDGE REAG WEDGE A REAG WEDGE B REAG WEDGE D En: Reagent Wedge Cz: Reagencie El: οχείο Αντιδραστηρίων Pl: Klin odczynnikowy En: Date format (year-month) Cz: Formát data (rok-měsíc) El: Μορφή ημερομηνίας (έτος-μήνας) Pl: Zapis daty (rok-miesiąc) En: Use by Cz: Spotřebujte do El: Ημερομηνία λήξης Pl: Wykorzystać do En: Health Hazard Cz: Zdravotní riziko El: Κίνδυνος για την υγεία Pl: Zagrożenie dla zdrowia En: Exclamation Mark Cz: Vykřičník El: Θαυμαστικό Pl: Wykrzyknik En: Corrosion Cz: Koroze El: ιάβρωση Pl: Działanie żrące En: Skull and Crossbones Cz: Lebka se zkříženými hnáty El: Νεκροκεφαλή με διασταυρούμενα οστά Pl: Czaszka i skrzyżowane piszczele En: Environment Cz: Prostředí El: Περιβάλλον Pl: Środowisko ADJUSTOR ADJUSTOR L ADJUSTOR H ADJUSTOR AB DIL CONTROL CONTROL 1 CONTROL 2 CONTROL 3 En: Adjustor Cz: Kalibrátor El: Ρυθμιστής Pl: Kalibrator En: Adjustor, low Cz: Kalibrátor, nízký El: Ρυθμιστής, χαμηλό Pl: Kalibrator, niski En: Adjustor, high Cz: Kalibrátor, vysoký El: Ρυθμιστής, υψηλό Pl: Kalibrator, wysoki En: Adjustor Antibody Cz: Protilátka proti kalibrátoru El: Ρυθμιστής αντισώματος Pl: Przeciwciało Kalibratora En: Sample Diluent Cz: Diluent Vzorků El: Αραιωτικό δείγματος Pl: Rozcieńczalnik próbek En: Control Cz: Kontrola El: Έλεγχος Pl: Kontrola 18 IMMULITE 2000 D-Dimer (PIEL2KDD-3 {16}, )