Assessment of anticancer properties of Rosmarinus officinalis L extract and gamma rays on cell viability of MCF-7, SKBR3, and HU02 cell lines

Transcript

1 Original Article Assessment of anticancer properties of Rosmarinus officinalis L extract and gamma rays on cell viability of MCF-7, SKBR3, and HU02 cell lines Nazanin Abdolmaleki 1, Fatemeh Javani Jouni 2, Parviz Abdolmaleki 3*, Zohreh Abdolmaleki 4 1- M.Sc. Student, Department of Biophysics, Islamic Azad University, Tehran North Branch, Tehran, Iran 2- Ph.D., Department of Microbiology, Islamic Azad University, Tehran North Branch, Tehran, Iran 3- Associated Professor, Department of Biophysics, Faculty of Biological Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran 4- Assistant Professor, Department of Pharmacology, Faculty of Veterinary Medicine, Islamic Azad University, Karaj Branch, Karaj, Iran *Corresponding Address: Postal Code: , Department of Biophysics, Faculty of Biological Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran Parviz@modares.ac.ir Received: 17/Jun/2017, Accepted: 23/Aug/2017 Abstract Objective: Despite significant advances in radiation therapy and cancer treatments in the past 30 years, resistance to chemotherapy is a major obstacle in the recovery of patients with cancer. Resistance to chemotherapy drugs inhibits the recovery process. This study aims to evaluate the anticancer activity of the methanolic extract of rosemary alone and in conjunction with gamma rays on growth inhibition of MCF-7, SKBR3 and Huo2 cell lines. Methods: We examined cytotoxicity of different concentrations (1, 5, 10, 50, 100, 500 μg/ml) of rosemary extract and various doses of gamma rays (1.5, 3, and 7.5 Gy) on MCF- 7, SKBR3, and fibroblast (HU02) cell lines. All three cell lines were obtained from the Iranian Biological and Genetics Reserve Center. The cell lines were grown in DMEM supplemented with 10% FBS, 1% penicillin and streptomycin. The cells were allowed to incubate at 37ºC in an atmosphere that contained 5% CO2 and 100% humidity. The standard MTT assay was performed to estimate cell viability after treatment with gamma rays and rosemary extract. Results: The results of the MTT assay showed that rosemary extract had time- and concentration-dependent anticancer activities on the MCF-7 and SKBR3 cell lines (p<0.01). Rosemary extract had no remarkable cytotoxicity on the normal HU02 cell line. Gamma rays along with rosemary extract had more cytotoxic activity in a time-dependent manner on viability in the cancer call lines (p<0.03). Conclusion: Our results, along with results from other studies, have suggested that rosemary extract is a potential candidate, either alone at pre-determined doses or in combination with gamma rays, for the treatment of chemotherapy resistant breast cancer. Keywords: Rosemary extract, Gamma rays, Cytotoxicity Pathobiology Research, Vol. 20 (2017), No.2, Pages: Pathobiology Research, Vol. 20 (2017), No. 2 32

2 ک ر اصیل مقاله بر گاما اشعه تابش و رزماری گیاه عصاره سرطانی ضد فعالیت یب ارزیا یا سلوله و SKBR3 MCF7 پستان سرطان یا سلوله یا ردهه HU02 فیبروبالست 4 *3 2 1 عبدالملکی زهره عبدالمالکی پرویس جونی جوانی فاطمه عبدالملکی نازنین ایزان تهزان شمبل تهزان واحذ اسالمی آساد دانشگبه بیوفیشیک گزوه ارشذ کبرشنبسی دانشجوی 1- ایزان تهزان اسالمی آساد دانشگبه شمبل تهزان واحذ مولکولی و سلولی شنبسی سیست گزوه تخصصی دکتزی 2- ی ت سیس علوم دانشکذه بیوفیشیک گزوه دانشیبر 3- ایزان تهزان مذرس تزبیت دانشگبه ایزان کزج کزج واحذ اسالمی آساد دانشگبه دامپششکی دانشکذه فبرمبکولوصی گزوه استبدیبر 4- بیوفیشیک گزوه سیستی علوم دانشکذه مذرس تزبیت دانشگبه کذپستی: تهزان ایزان مسئول: نویسنذه *آدرس parviz@modares.ac.ir چكيده 61/33/21 مقبله: دریبفت 61/31/31 مقبله: پذیزش غرا 30 دز غرسياى دزهاى دزها پست شه دز پ ؿسفت ج د با دف: عود گرؾره دزهرا ؾر و بر هقا هرت هرا ت را بر زشهراز الکلر عكاز غسيا ند آثاز بسزغ تحق ق ا ي اش دف اغت. غسياى ب هبهال ب وازاى ب ب د دز غل ل زد زؾد ه از بس گاها اؾع تابؽ زشهاز عكاز ت أم بسزغ روشها: و مواد غسياى دزهاى ب ب د بسا ه الع ا ي دز اغت. SKBR3 MCF-7 هتهلر للترت را برا زشهراز الکل عكاز اش ( 500 هتهل د ش ا رص HU02 ف بس بالغرت را غرل SKBR3 MCF-7 پػرهاى غسياى غل ل زد ا بس ه کس گسم/ه ل ل هس( ؾرد با گاها اؾع 3 1/5 ترابؽ را دزقد 1 FBS دزقد 10 با DMEM دزقد 5 حا ؾد د گ داز زي بت دزقد 100 CO 2 ؾد. اغهااد گاها اؾع تابؽ زشهاز عكاز با دزهاى اش غرل گسد رد. اغرهااد گرس 7/5 هحر ى دز غرل ل زد غر را اتوػراس دز غرا ه گرساد دزجر 37 دها دز کسد د زؾد اغهسپه ها ػ ي پ غ ل ي پرع را غرل بر دى ش رد بسآ زد بسا MTT اغها دازد ز ؼ غرسياى غرل ل زد را برس شهراى بر ابػره للتت ب ابػه غسيا ند اثس زشهاز الکل عكاز داد ؿاى ها ج نتایج: SKBR3 MCF-7 پػهاى را غرل ز زا تر ج اابرت غرل ل غرو ت زشهراز عكاز حال ک دز )0/01>P( دازد غرو ت اثرس شهراى بر ابػره بر قر ز گاهرا اؾع تابؽ زشهاز الکل عكاز ت أم تسک ب داد. ؿاى ف بس بالغت يب ع )0/03>P(. دازد ت ا ب سکدام اش اغهااد با هقا ػ دز غسيا غل زد ا ز ب ؿهس نتيجهگيری: ت را بر برالق کا د رد ب ع اى ه ت ا د زشهاز عكاز ک کسد پ ؿ اد ه ت اى ه الع ا ي ها ج ب ت ج با دزهراى بر هقرا م کر پػرها غرسياى دزهراى دز بر ر اغرهساتط رک ع اى ب گاها اؾع تابؽ با وسا ا ه اغب د ش با ؾ د. اغهااد اغت کليدواشگان: گاها تابؽ زشهاز عكاز غو ت پژي ش ایآسیبشىاسیزیستی دير 02 شمار 0 تابستان 9316 صفحات: آسیبشىاسیزیستی دير 02 شمار 0 تابستان پژي ش ای 46

3 ی ا ی ا مقدمه هرس غسياى ب هبهال اى آهاز ز شافص ى افصا ؽ در يتابشاشع گامابر رزماری فعالیتضدسرطاویعصار گیا ارزیابی ه رس توام دز غالهت تام بس اه ز صاى بسا ب س ش گ آى اش اؾ پط ؽ ک ا ت داه گػهسؼ اغاظ و ي بس کؿ ز اغت. غسياى دزهاى تؿت ك پ ؿگ س ز ؼ ا بك دز غا دز ه زغد. ب تس نس ز ز ش رس دز اهس کا دز 2012 هس 1500 هرس 4 س اش اغت ؾد گصازؼ غسياى اثس دز 2>. =1 اغت ب د غسياى علت ب آى ا اش ک ؾا اش ک پػهاى غسياى س ک اغت غسياى ا اع تس ي با ه ؾ د هسداى ش اى ب ي دز فسا ا ه س هس باعث غال گام ش د تؿت ف ه زد دز ک بػ از پ ؿسفت ا ج د ق ز ب واز ا ي ه اغب دزهاى اش ک کواکاى اغت گسفه با 4>. =3 اغت ش اى ب ي دز غسياى علت ب هس علت ه نتس ي پػهاى غسياى با بسب زد دز جد دتس زا کاز ا ز ش س ا يک دز زا ش اد عد جاى ب واز ا ي ن ش ل ه ؾ د هعسف غرابهاز بر ب ؿرهس ت جر ؾا د اغت. داد اساز ب س هعسل ترا ؾ د باعث ب واز ا ي ش ػتؾ اغ اغاظ ز صه لک ل ا ي پ دا ؽ چگ گ ه زد دز ب ؿهس دا ػه ا با به اى بلک غل غ ح اش ب واز ا جاد ه زد دز گػهسد تس ايالعا ا =5>. آ زد ب دغت ه لک ب واز ا ي ب واز شا زؾد دز ههأغاا ص ا ساى کؿ ز دز پػهاى غسياى ب واز آهاز جر اىترس ش راى دز پػهاى غسياى ا ساى دز اغت. افصا ؽ حا د رد پ ؿسفه ( کؿ ز ا دز ش اى اش ش دتس د ک )حداات ه ک د. هساجع پ ؿسفه هساحت دز ب وازاى ههأغاا ه ؾ د غرا دز ب ؾربتها حرا ا ي با پ ؿرسفت را اب رس را حاقت ب واز ا ي دزهاى ش دزظ تؿت ف دز چؿنگ س ش راى اش تر ج اابرت دزقد اهس ش ک ب ي ز اغت ؾد ب زاحه ب ا غا الشم هساابه دزها تداب س اتتاذ با هبهال =6>. ه د د اداه ب د ش دگ باعث ه ت ا د زشهاز ت س گ ا عكاز ا اش اغهااد سل ل سرطانپستان نرد باق ت زشهاز عكاز ک ه د د ؿاى آشها ؽ ا اش حافتر ب بر د غسيا ند اکػ دا آ ه ه کس ب زا آى کر دازد زا بر ى ا رد آ زدى پرا ي باق ت وچ ي انراف ا ػراى را ح ا را لرا ب ها د افص د ب ع اى.<8 7= ه ک د بس ب ههعلق Rosmarinus officinalis علو ام با زشهاز دز اغرا ع ب ؿرهس ي اغرت. )Lamiaceae( ع اع اى با اد هقاد س حا ص گت غاا اها دازد ج د گ ا ا ي ا تا ي اغا ع زا گ ا ا ي هؤثس ه اد =9>. ػه د اغا ع کو بس دز اغا ع هقداز ه د د. تؿک ت تلخ ه اد =10>. اغت دزقد 1/5 تا 0/5 ب ي بؿک ا زشهراز گ ررا اش اغرهااد کر ه د د ؿاى بسزغر را تسک برا علت ب ب ؿهس ا اکػ داى آ ه ک ب ع اى ه ؾ د هررستبى گ را دز ه ج د تسپ رد ف لر پلر ه اد ا ي کاز غرر )Rosmarinic acid( اغر د زشهاز رک ؾراهت کاز غر ک )Caffeic acid( کافی رک اغررر د )Carnosol( )Carnosic acid( اغ د ک زشهاز )Rosmarinic acid( اغ د -غررر ی 8 1 )Polegone( پ لگررر ى )Camphor( کررراها ز )Isobornyl acetate( اغرها ا ص ب ز ت )1, 8-cineole( اکػر داى آ هر ب ع رر اى آشاد ا زاد کا ه از دز ک ػه د تسک برا =14-11>. اغت ه سح ت رس هر اد زا گ را د گرس ل تی ل ي )Rutin( ز ت ي )Apigenin( آپ ض ي فال د ا Umbelliferone ( آهبلر فرس ى ک هاز ي ا )Luteolin( )coumarins بس دز کر ه د د تؿک ت )Herniarin( س از ي =10>. دازد ج د گ ا غاا دز حد تا ا زاد کا اش بػ از عاهت اک ؽگس اکػ طى ا ا آشاد ا اغت. غسياىشا اله ار پ س جول اش ش ػه پد د ا دز زا زشهراز هه ر ع داز ر ب ا زشهاز غاش د جصء هالحت ا اابت ؾ ا د =15>. ه د د ؿاى غسياى اش جل گ س آهد ب دغت غل کؿت تحق قا ؾ و ا ه العا اش ک تب ب ؾ و ا داز ا د ش کا ؽ غسياى زؾد جل گ س بػ از ها ج ؾ د. داز ا ا ي جا ب آثاز زغا دى حداات ب آى دز اغرت هوکري اکػر داى را آ هر کر ه د رد ؿاى اغت بس ش اش احهواال ا وا د ک د زا غسياى بس ش ا ل پ ؿگ س ا 25 Pathobiology Research, Vol. 20 (2017), N

4 ز ي مکاران عبدالملکی وازویه هتهل آثاز =16>. وا د جل گ س آى اب رت اش ت ه ز ند نرد )Apoptosis( ؾرد بس اهر ز رص غل ل هس القا اکػ دا آ ه ب ا وچ ي غل ل توا ص القا شا زشهاز گ ا عكاز دز غسياىشا ههاب ل ػن تغ س اله اب ند زشهاز تام عكاز تکث س ند باق ت اغت. ؾد هؿا د اغر د کاز غر ک وچر ى آى دز ه جر د ف ل رک هر اد غل زد چ د ي بس اغ د زشهاز ک جول اش ا ػاى غسياى ا هر ؼ بس آشها ؿگا ؾسا ى دز ص ب ى پػهاى غسياى =20-17>. اغت ؾد داد ؿاى ع ازل بس عال غسياى دزهاى غ ه ز ؼ ا اش اغهااد دازا ص تجسب عول تس اش دازد د با ب ک ؾد د جا ب هؿکال ؾردى هقرا م برسا هکا ػرن چ د ي اغت. بػ از هقا هرت ا ري دازد. جر د دزهرا ؾ و ب غسيا غل کرا ؽ برازک بر داز ا هؿراز يس ق اش اغت هوکي غل ل ه لک تعداد افصا ؽ داز جرر غل دز دف ا تغ رس DNA ترسه ن فسآ رد ا تغ رس را داز ههاب ل ػرو هػ س غل هقا هت ؾ د. حاقت غسياى ند ع اهت ب غسيا ا بر ب ورازاى اش بػ از ب ابسا ي اغت. دزهاى عود هؿکل ک ب اهد اتااق هس اغت هوکي و د د پاغخ داز دزهاى.<1= بسدى ب ي اش بسا ىغاش پست ا اش اغهااد دزها پست اثس دز ز ؼ ا ي دز اغت. غسيا بافت ا کسدى ک چک ا زؾرد اداه تتس ب دزهاى اح ا غل DNA آغ ب را غرل برس عال پست اگسچ ه ؾ د. هوکي ل س تقػ ن اکثرس لر هر زغرا د آغر ب ص غالن ا غل ب غسيا غل دف ه آ ز د. ب دغت د باز زا ب د ب ب د غالن ا برا غرسيا را غرل حداکثس بسدى ب ي اش دزها پست اش بسا هتهلا ز ؼ ا اغت. غالن بافت ا ب آغ ب حداات دازد. جر د ههارا ار ذ ادز با اؾع ا هقا پست د بر ير ز ه ت ا د پست د ز ؼ ا اش تعداد ا ي بس عال برد ى بافرت اش ک چک اح دزهاى بسا ؾد ک هس دا ق حرال کر دز ؾ د اغهااد ايساف ا دام ا بافت ب آغ ب بصز اح دزهاى بسا ه ؾ د. اغهااد پست د گس ا اع اش تس ت هر ز کاهت تتس ب دزهاى اش دف ب وازاى اش تعداد دز رس دز اغت. آى عال ن کا ؽ ا ت ه ز کسدى ک چک بعه ب واز اهکاى حد تا غالن بافت ا هحافتت بسا دزهاى يساح ه ؾ د. دزها پست غسيا ب وازاى اش و ه ؾ د. ا جام د گرس برا ورسا را ه اسد ب ق ز اغت هوکي دزها پست ؾ و ؾاهت غسياى دزهاى ز ؼ ا ؾ د اغهااد جساح ا دزها ز ؼ رک اش بر ؽ اغرت هوکي ه ازد بعه دز حه =23-21>. ؾ د گسفه ب کاز دزها پست اؾع تابؽ زشهاز عكاز غو ت آثاز حانس تحق ق دز هتهل للتت ا با گاها زد ا دز هتهل شهاى ا ي يب عر را غرل SKBR3 MCF-7 پػرهاى غرسيا عكراز ت وراز وصهراى آثراز وچ ي HU02 ف بس بالغت ؾد بسزغ غل ل زد ا بس گاها اؾع تابؽ زشهاز الکل اش پع غاعت شهاى ا دز آى ا IC50 للتت ا ؾد. هحاغب ت واز روشها و مواد گياهي نمونه علور رام برا زشهراز گ را ؾرد بؿرک و را ج اد داز گ ا اى پط ؿکد اش Rosmarinus officinalis برس غپع ؾد. ت دا ؿگا ؾد. حاقت دغه ک پ دز تا ؾد لسبا خيساندن روش به عصاره تهيه بررس اش گرسم 10 ز ؼ ا ي دز هد ي ههرا ه لر ل هرس آغر ار زشهراز بؿرک 50 بررا گ ررا بؿررک وصى دغهگا ب غ ل غاعت 24 فرراش بعررد ز ش ؾرد. هتل و هح ى دهرا دز هغ اي ػر ا رري ؾرد. اناف جد د حال هجددا جردا ) )ههرا آلر حداکثس ب اغهتساک عوت تا ؾرد تکساز براز غر برسا عورت برا آهرد بر دغرت هتل و غپع پر سد. ق ز هوکي ؾکت قاف را ب غ ل د باز ؾد ف لهس قاف کالر اش اغهااد آسیبشىاسیزیستی دير 02 شمار 0 تابستان پژي ش ای 48

5 ی ا ی ا قراف ه کس ازگا ػن را اش ؾدى عاز بسا ه کس 0/45 دغرهگا ت غررى آلر حرال هجو عر آبس هسحل دز ؾد دز آهد ب دغت عكاز غپع ؾد حرف چسباى ک د تبت س ر ز اش د ز جرا دز ز تهر ؾ ؿر ا دزداز ظرسف ک ؾد. گ داز سلول کطت پػهاى غسياى ا غل زد پط ؽ ا ي ا جام ب ه ت ز MCF-7 در يتابشاشع گامابر رزماری فعالیتضدسرطاویعصار گیا ارزیابی ا ػره ه اش )HU02( ا ػا ف بس بالغت SKBR3 کؿرت هحر ى دز غل ل زد ا ؾد. بس داز ا ساى پاغه ز )Dulbecco s modified Eagle s medium( DMEM )Fetal bovine serum: FBS( گا غسم دزقد 10 حا هحل ب يالولل /ه ل ل هس احد 100 L -گل تاه ي ه الز ه ل 2 ه لررر ل هرررس ه کس گرررسم/ 100 )Penicillin( پ ررر غررر ل ي دز غرپع ؾد د. داد کؿت )Streptomycin( اغهسپه ها ػ ي برا غا ه گرساد دزج 37 دها دز دزقد 5 CO 2 ا ک بات ز آى ا کؿت هح ى کباز ز ش 3 س گ داز ه اغب زي بت ؾد. تع م گاما پرتو مولد دستگاه زاد تساپ بتؽ ب غل ل و ا پست د ب ه ت ز دغرهگا ت غرى افه رد ا هقرا )ز ( بو ر اهام ب وازغهاى چؿو حا ک اهس کا کؿ ز غابت 780E هد Theratron پست د ؾد د. پست د ب د کا ادا کؿ ز غابت کبالت- 60 با )Source to Surface Distance( SSD ز ؼ ب و ا د ش آ گ ا جاد بسا ؾد. ا جام دا ق دز گس 0/4 دش آ گ غا ه ههس 100 تقس با فاقل دز و ا دا ق دز گس 0/4 ؾد د. داد اساز کبالت- 60 چؿو سلولي سميت بررسي 4,5)-3 = MTT آشهرا ؽ اش غرل ل غو ت ازش اب بسا <dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide ادز غ جؽ پا بس سل ل سرطانپستان )Tetrazolium( تهساش ل م ز گ اح ا فقى ک ه ه ک دز ا د دز ض اش آ ص ن ا اثس دز ؾد. اغهااد غل دز هحلر MTT حلقر دز ػره د فعرا ش رد ا ف زهراشاى ز رگ آبر بل ز را بر ؾرد ا جراد ؾکػره ز ؼ اش اغهااد با ب ابس ي ؾد. تبد ت ل سهحل )Formazan( غ لا کػرا د هه رت د ت غرى ک ف زهاشاى ه صاى زغ ج ؾکت ب د گس ا حال ا )Dimethyl sulfoxide :DMSO( غرل کرسدى جردا اش پع ؾد. ا داش گ س آهد دز هحل را Trypsin ( تس پررػ ي- EDTA ت غررى فالغررک غرر ح اش بررسا ؾررد جرردا )Ethylenediaminetetraacetic acid غل ش ػه ت ا ا ازش اب Trypan ( بل تس پاى آشه ى اش ا ی براز الم اش اغرهااد با ا غل ؾوازؼ ؾد. اغهااد )blue غا د( ا گلب ؾوازؼ ب ههعلق با ا )دز )Neobar( هسد ا غل ب ع اى ز رگ آبر ا غل گسفت. ا جام غل غل بر ع ر اى ب ز گ ا ا غل 10 4 تعداد MTT آشه ى ا جررام بسا ؾد. گسفه تس دز ش د غل ل زد غ اش بر هرد کؿت با 96 پل ت چا ک س دز جداگا ب ي ز غراعت 24 اش بعرد ؾرد داد ارساز ا ک برات ز دز غاعت 24 هقداز تأث س تع ي ب ه ت ز 10 5 ؾد با گاها )1 للتت 5 زشهاز عكاز شهاى اؾرع تابؽ د ش ه ل ل هس( دز ه کس گسم ههاا شهاى د گس 7/5 3 1/5 ا د شهاى ا يک ب ت ج با شهاى ا ا ي ؾد. ا هتار غاعت 48 غراعت 24 ش رس HU02 SKBR3 MCF-7 ا غل بسابس وصهاى آثاز بسزغ بسا بعد هسجل دز ؾد د. ا هتار اغت را غرل گاهرا اؾع تابؽ زشهاز الکل عكاز ت واز عكرراز هر ثس IC50 اثرس تحرت HU02 SKBR3 MCF-7 ؾد زشهاز الکل اش ؾد. داد اساز گاها اؾع هؤثس تابؽ بررسا هثبت ک هس ب ع اى )Doxorubicin( د کػ ز ب ػ ي هراد بر را غل حػاغ ت عدم ا حػاغ ت ؾدى هؿتف دزقد 0/5 حا کرؿت هحر ى ؾد اغهااد غل ل غو ت DMSO ه ار ک هرس بر ع رر اى عكراز ا چگ بد ى برس DMSO ع ر عكراز را حرال اثرس بسزغر بر ه تر ز 27 Pathobiology Research, Vol. 20 (2017), N

6 ي مکاران عبدالملکی وازویه غل هحل ه کس ل هس 10 چا ک س ب غپع ؾد. اغهااد را کؿرت هحر ى ه کس ل هرس 90 ه ل ل هس( ه ل گسم/ )5 MTT دزجر 37 دهرا دز غاعت 3 ب هد ؾد اناف DMEM بازک چا ک س ز هح ى غپع ؾد د. ا ک ب غا ه گساد ؾرد انراف DMSO ه کس ل هرس 100 چا رک رس ب ؾد )ELISA reader( اال صا اسائتگس دغهگا ت غى ز جرر ؾد. ب ا د ه ک ي دز آماری تحليل و تجسیه Graphpad آهاز سمافصاز اش آهاز هحاغبا ا جام بسا برا سمافرصاز ب ز د اش پع ايالعا ؾد اغهااد prism 6.0 one way ( يسفر رک از را ع آ رال ص آشهر ى اش اغرهااد ؾرد تحل ت تجص )Analysis of variance: ANNOVA آثاز هقا ػ بسا )Tukey( ت ک تکو ل آشه ى اش آى د با ب زشهراز عكراز با ت واز هتهل گس ا ک هس گس ا حساف ± ه ا گ ي ب ق ز ها ج ؾد. اغهااد گاها پست تابؽ ؾرد. ب راى هػهقت تکساز باز 3 اش حاقت )Mean± SD( هع از دزقرد 95 ايو راى حرد د برا گس ا ب ي ها هع داز تاا ؾد. گصازؼ )0/05>P( نتایج SKBR3 MCF-7 را غل زد غ پط ؽ ا ي دز برر ع رر اى HU02 يب عرر زد اش ؾررد د. ا هتررار HU02 زد ا هتار علت ؾد اغهااد آشها ؽ دز يب ع ا غل بر دى her2± طگ SKBR3 MCF-7 غسيا ا غل ررا غررل her2- MCF-7 ررا غررل اغررت آى ررا 24 ت واز را شهاى را ا هتار ػه د her2+ SKBR3 هرد اغراظ برس گسفه ق ز تحق قا يبق غاعت 48 اغت. ؾد ا هتار ا غل ؾدى بسابس د شهاى سلولهاای رده بر رزماری عصاره سميت اثر SKBR3 MCF-7 و HU02 للترت را دز زشهاز الکل عكاز غل ل غو ت اثس يب عر غرل غرسيا را غرل بس هتهل شهاى ا زد غ بس زشهاز عكاز تأث س ؾکت ا ؾد. بسزغ عكاز با ت واز اش حاقت IC50 هقداز ه د د. ؿاى زا غل ل 1 جرد دز غراعت هتهل شهاى ا دز زشهاز اغت. آهد هتهل للتت ا با ت واز اش پع HU02 غل ل زد بقا دزقد 1 ؾکت عكاز هتهل شهاى د دز زشهاز گ ا.)n;3( اغت )SD ± Mean( ب ا گس Error bar آسیبشىاسیزیستی دير 02 شمار 0 تابستان پژي ش ای 4:

7 ی ا ی ا در يتابشاشع گامابر رزماری فعالیتضدسرطاویعصار گیا ارزیابی سل ل سرطانپستان هتهل للتت ا با ت واز اش پع MCF-7 غل ل زد بقا دزقد 2 ؾکت عكاز هتهل شهاى د دز زشهاز گ ا.)n;3( اغت )SD ± Mean( ب ا گس Error bar هتهل للتت ا با ت واز اش پع SKBR3 غل ل زد بقا دزقد 3 ؾکت عكاز هتهل شهاى د دز زشهاز گ ا.)n;3( اغت )SD ± Mean( ب ا گس Error bar )IC50( للتت 1 جد هتهل شهاى د دز ه کس گسم/ه ل ل هس بسحػب زشهاز عكاز ساعت 24 18/36 25/21 89/86 ساعت 42 24/64 33/9 111/5 سلولي رده MCF-7 SKBR3 HU02 29 Pathobiology Research, Vol. 20 (2017), N0. 2 4;

8 ي مکاران عبدالملکی وازویه MCF-7 ا غل بس زشهاز عكاز اثس اش حاقت ها ج دزقرد عكاز ا للتت افرصا ؽ برا ک داد ؿاى SKBR3 بقرا کوهرس ي کر بر ير ز هر ابرد کا ؽ غل ل بقا دز ؾرد. هؿا د ه ل ل هس بس ه کس گسم 500 للتت دز غل ل سه ه ل ل ه کس گسم/ للتت ا ب زشهاز عكاز ا غل ها ش د دزقد کا ؽ غبب ت واز اش پع تست ب 12 18/7 غراعت 24 ت واز اش پع 14 26/2 تا MCF-7 للتت را دز ه صاى ا ي ؾد غاعت 48 اشت واز پع دزقد غراعت 24 دز ه ل ل هس ه کس گسم/ 10 5 پرا يترس دزقد ؾد. هؿا د دزقد 63/5 81 غاعت 48 دز دزقد غرل ها ش د للترت را دز SKBR3 را دزقد 25/1 41 ه صاى ب زشهاز عكاز ه کس گسم/ه ل ل هس ت واز اش پع غاعت 48 دز دزقد 15/3 29 غاعت 24 دز 10 5 پررا يتررس للتت ا بسا هقداز ا ي ؾد گصازؼ 48 دز دزقد 75/5 90/2 غاعت 24 دز ه کس گسم/ه ل ل هس آهد. ب دغت دزقد 64/2 86 غاعت بس زشهاز عكاز ت واز اش ک IC50 هقداز يبق وچ ي IC50 کرر ؾرد هؿرتف آهرد بر دغررت غرل ل زد را ت وراز اش حاقت IC50 هقاد س اش ب ؿهس ف بس بالغت ا غل اغرت. SKBR3 MCF-7 غسيا غل زد ا بس زشهاز هقا ػ دز SKBR3 MCF-7 غسيا ا غل ه ج دز حػراظترس زشهراز عكراز ب ػبت ف بس بالغت غل با ػه د. سلولهاای رده بر گاما اضعه تابص سميت اثر SKBR3 MCF-7 و HU02 کر گاهرا اؾرع تابؽ ؾد ؾکت ا يبق غسيا ا غل ها ش د دزقد کا ؽ دز زا تأث س ب ؿهس ي غرل ل زد برس غل ل غو ت کوهس ي با SKBR3 MCF-7 24 دز گرس 3 ترابؽ ؾرد داؾت. وسا ب HU02 يب ع ب د. ت واز اش پع غاعت ؾد با ت واز اش پع HU02 غل ل زد بقا دزقد 4 ؾکت هتهل ا گاها اؾع تابؽ هتهل شهاى د دز.)n;3( اغت )SD ± Mean( ب ا گس Error bar آسیبشىاسیزیستی دير 02 شمار 0 تابستان پژي ش ای 53

9 ی ا ی ا در يتابشاشع گامابر رزماری فعالیتضدسرطاویعصار گیا ارزیابی سل ل سرطانپستان ؾد با ت واز اش پع MCF-7 غل ل زد بقا دزقد 5 ؾکت هتهل ا دز گاها اؾع تابؽ هتهل شهاى د.)n;3( اغت )SD ± Mean( ب ا گس Error bar ؾد با ت واز اش پع SKBR3 غل ل زد بقا دزقد 6 ؾکت هتهل ا هتهل شهاى د دز گاها اؾع تابؽ.)n;3( اغت )SD ± Mean( ب ا گس Error bar اثر 31 Pathobiology Research, Vol. 20 (2017), N اضاعه تابص و رزماری عصاره توأم سميت سالولي رده سه بر گاما SKBR3 MCF-7 و HU02 IC50 حػب بس زشهاز عكاز ت أم تأث س آبس هسحل دز گاها اؾع غل ل زد ا بس زشهاز عكاز ت واز اش حاقت ؾد با غرل غرسيا غرل ل زد ا بس گس 3 تابؽ ؿاى ها ج 7 ؾکت ؾد. آشها ؽ هتهل شهاى ا دز يب ع ؾد با گاها اؾع اثس ه د د IC50 للترت برا تر أم گس 3

10 ي مکاران عبدالملکی وازویه غرسيا را غل ها ش د ه صاى بس زشهاز گ ا عكاز 48 ت وراز دز دزقرد 74 49/2 37/5 بر تست رب ت وراز اش )0/03>P(. اغرت ب د دزقد 47 22/6 12 ب تست ب غاعت پرع غاعت 24 دز HU02 يب ع غل SKBR3 MCF-7 ؾکت MCF-7 غل ل زد بقا دزقد 7 غل SKBR3 ا )3;n(. اغت )SD ± Mean( ب ا گس Error bar هتهل شهاى د دز گاها ؾد با غل ل زد س زشهاز عكاز IC50 للتت ت أم ت واز اش پع HU02 اؾرع گرس 3 ترابؽ بحث زا ررج گ ا راى اش تعرداد کر ؾد هؿتف اهس ش ب تا غسياى بسابرس دز ک د هحااظت باق ت دازا ػه د غرسياى ند Allium گ ر اعها ب ه ت اى گ ا اى ا ي جول اش )ز حراى ع اع راى برا اد اعهرا ه غ س( پ اش )غ س Zingiberaceae با اد اعهرا زشهاز ( آ ؿي ع اع ا ري وا رد زشهاز گ ا و د. اؾاز شزدچ ب ( )ش جب ت تسک با اش ل ه ابع گ ا اى ف ه اغهس ل ا قؽ ه اد ا ي ک جو ها د غسياى ند گ ا ؾ و ا دازاغت زا تسپ د ا کاز ت د ا فال د ا داز د اکػ دا آ ه زاد کا زا آشاد را بردى ا و ر غ ػرهن تحس رک ه جرب ه ک رد آ ز )adducts DNA( اناف DNA تؿرک ت وچ ي هر ؾر د هستبى ههاب ل ک هػ س ا ا ي بس عال ه از زا غسياىشا برا =11 ه ک د ه از زا غسياى گػهسؼ با هر د رد ؿاى تحق قا دز آهد ب دغت ها ج يسف اش غل ز گاها اؾع تابؽ ت ا غبب گاها اؾع تابؽ دازد. تکث س ند اثس غ غسياى ا G2/M فاش دز غل ل چسب ؾرد بس اهر ز رص غل ل هس ا دک القا باعث ه ؾ د ص غل ل چسب دز ه ؾ د. ت ا دز ت ج اابت اثس گاها اؾرع زشهاز عكاز تسک ب غل زؾد ص غل ل چسب دز اغت. داد ؿاى ت ا دز ت ج اابت اثس گاها اؾع تابؽ =25>. اغت داد ؿاى ب د اش غسيا ص ه الع ا ي دز ب د اش غسيا ا زشهاز عكاز تسک ب غرل زؾرد را غرسيا را غل بس هؿاب ه ج ا تارا ا ري برا اغرت ؾد حاقت SKBR3 MCF-7 کر هع داز ب ي ز گاها اؾع ب وسا زشهاز عكاز اش اغهااد زشهاز عكاز گاها اؾع با ت واز ب ػبت زا ب ؿهس تأث س هؿرا د آهرد ب دغت ها ج ب ت ج با اغت. داؾه ت ا ب.< آسیبشىاسیزیستی دير 02 شمار 0 تابستان پژي ش ای 54

11 ی ا ی ا ب ق ز زشهاز عكاز ک ؾد در يتابشاشع گامابر رزماری فعالیتضدسرطاویعصار گیا ارزیابی ب ابػه للتت ب ابػه MCF-7 غسيا ش د ا غل دزقد کا ؽ باعث شهاى ي ب تست ب زشهاز عكاز IC50 ه ؿ د. SKBR3 24/64 18/36 هقاد س با MCF-7 غل ل زد دز ت واز غاعت ه کس گرسم 25/21 33/9 هقاد س با SKBR3 غل ل زد بس HU02 يب عر را غرل دز اهرا آهرد. ب دغرت ه ل ل هس بس زد بس عكاز IC50 هقاد س ؿد هؿا د ت ج اابت غو ت 111/5 بر تست رب ت وراز غاعت ي يب ع غل ل ه العر ا ري هرا ج ؾد. هحاغب ه ل ل هس بس ه کس گسم 89/86 للترت ب ابػه کؿ دگ اثس زشهاز عكاز ک داد ؿاى للتررت ررا دز کرررر برر يرر ز دازد. شهرراى کرا ؽ غربب بر تست رب زشهاز عكاز ه کس گسم/ه ل ل هس غل ها ش د دزقد ي دزقد 14 26/2 تا MCF-7 ا پع غاعت 48 دز دزقد 12 18/7 ت واز اش پع غاعت پررا يتررس للترت را دز ه صاى ا ي ؾد ت واز اش 48 دز دزقرد غراعت 24 دز ه کس گسم/ه ل ل هرس هرا ش رد دزقرد ؾرد. هؿرا د دزقد 63/5 81 غاعت غرررل للترررررت رررا دز SKBR3 رررا دزقد 25/1 41 ه صاى ب زشهاز عكاز ه کس گسم/ه ل ل هس ت واز اش پع غاعت 48 دز دزقد 15/3 29 غاعت 24 دز 10 5 پررا يتررس للتت ا بسا ه صاى ا ي ؾد گصازؼ 48 دز دزقد 75/5 90/2 غاعت 24 دز ه کس گسم/ه ل ل هس آهد. ب دغت دزقد 64/2 86 غاعت کا ؽ دز زا تأث س ب ؿهس ي گس 3 تابؽ ؾد ک آىجا اش غل ها ش د دزقد برا SKBR3 MCF-7 غرسيا ا ورسا بر HU02 يب ع غل ل زد بس غل ل غو ت کوهس ي ؾرد ؾد آشها ؽ پست ا ب ي دز داؾت 3 ترابؽ پستر ؾد. ا هتار زشهاز عكاز با وصهاى آثاز بسزغ بسا گس ؾرد با گاها اؾع اثس ها ج IC50 للترت برا تر أم گرس 3 غرسيا را غل ها ش د ه صاى بس زشهاز گ ا عكاز پرع غاعت 24 دز HU02 يب ع غل SKBR3 MCF-7 48 ت وراز دز دزقرد 74 49/2 37/5 بر تست رب ت وراز اش سل ل سرطانپستان هقا ػ اش آهد ب دغت دزقد 47 22/6 12 ب تست ب غاعت ؾد زشهاز عكاز وصهاى اثس اش س رک برس گاهرا پست زشهاز عكاز ت واز ک گسفت ه ج ه ت اى غل ل زد ا ها ش د دزقد کا ؽ غبب هع داز ب ق ز گاها اؾع يب عر غرل SKBR3 MCF-7 غرسيا غرل زد غ اش حاقت ها ج هقا ػ اش وچ ي )0/01>P( ه ؾ د HU02 گس را ک و د اغه باو ه ت اى ص غاعت ت واز شهراى بر ابػره ب قر ز کد گس با غاعه ت واز )0/03>P(. داؾه د هع داز ابهالف بررا وکررازا ؽ )Yesil-Celiktas( غررل کهاش ػررل - فعرا هر اد زشهراز گ را عكراز کؿر دگ آثاز بسزغ هتهلر زد را برس اغر د زشهاز رک اغر د کاز غ ک غل IC50 ک کسد د گصازؼ غسيا ا دز زشهاز عكاز دازا ه ل ل هرس بس ه کس گسم 47/55 تا 12/50 للتت هحد د غل بس ت ج اابت غو آثاز حال ک دز ب د د غسيا ا حػاغر ت ب بػه اغ د کاز غ ک فعا هاد بسا هقاد س ا ي عكراز IC50 اش کوهرس دزقرد 30 ترا 10 غرل ل را زد کؿر دگ بر ا کر زغ د د ه ج ا ي ب ک ب د زشهاز =18>. اغت زشهاز عكاز اش ب ؿهس اغ د کاز غ ک )Kantogianni( کا ه ج را ت غرى ک ه الع ا دز گسفت ق ز وکازاى اغرا ع را تکث رس نرد فعال ت را غرل برس Salvia officinalis اغا ع را زشهاز هؿتكا با فعال ت ا ي وا گ غسيا ي اش اغهااد با ف ه ؾ و ا ؾاى س ؾد هؿتف ک ؾد بسزغ جسه غ ج کرا ؽ ب د رد. للتت ب ابػه غو ت آثاز دازا عكاز د غل بس اه ز رص غل ل هس يس ق اش RINm5F ش د ا زشهراز عكراز ؾرد. تعرد ت اکػر د هس رک اش اؾ ؾد بسجػه ترس ا و اقالح غو ت اکػ داى آ ه فعال ت ا ب ه ل رک اغر د حهر ز علرت بر احهوراال ک کسد ا جاد زا دز کاز غرر ک اغرر د برراالتس للتررت )Betulinic acid( هؿتكا =26>. اغت ف ه ؾ و ا اؼ ب د فسه غ اکػ دا ه آ ه تکث س ند فعال ت ا 33 Pathobiology Research, Vol. 20 (2017), N

12 ي مکاران عبدالملکی وازویه برا )Inolens 50 VivOX 40 VivOX )20 زشهاز عكاز ت غرى کاز غرت هه ت کاز غ ک اغ د هتهل هحه ا )Dilas( د الظ زشهاز عكاز ا ؾد. بسزغ وکازا ؽ ا غل ز زا ت ج اابت تکث س ند تاث س ؾد آشها ؽ غررل ل زد ررسد دز داد. ؿراى HT-29 MCF-7 HeLa ؿاى زا IC50 پا ي بػ از هقاد س عكاز ا MCF-7 HeLa ؾرد آشها ؽ عكاز ا اش اغهااد آهد ب دغت ها ج داد د. =27>. ه ک د حوا ت گ ا داز ب ع اى زا زشهاز قر ز وکازا ؽ )Tai( تا ت غى ک ه الع ا دز را غرل بسابس دز زشهاز عكاز کؿ دگ فعال ت گسفت جرصء غر عكاز آ ا ا يک A2780 ا ػاى زحن غسيا کازغر آى اقرل فعا )Carcenol( اغر د کاز غر ک زا پالت ي غ ع غسيا ند فعال ت ه ت ا د اغ د زشهاز ک د د افصا ؽ ؾد داد ؿاى ه الع ا ي دز اغت. ؾد ازش اب غرسيا ا غل بس ه و کؿ دگ اثس زشهاز عكاز ک دازد. پالتر ي غ ع ب هقا م ا غل A2780 ا ػاى زحن غل تسک با ب A2780 ا کازغر ف ل غل اش حػاظتس اغ د زشهاز ک اغ د غل ؾد بس اه ز ص هس ه الع ب د د. پالت ي کاز غر ک غ ع ب هقا م ا A2780 ا ت تر ن ضى ا ب اى ک داد ؿاى زشهاز عكاز با ؾد ت واز تغ س زشهاز ت واز تحت ؾد بس اه ز ص غل ل هس ک د تکث رس زشهراز عكراز ک داد ؿاى ه الع ا ي اغت. کسد چسبر برس تأث سگرراز برا زا ا ػاى زحن غسيا ا غل ب اى تغ س با زا عوت ا ي ه ک د ه از ههعدد فاش ا دز غل القرا ؾرد بس اه ز ص غل ل هس ک د ت ت ن ههعدد ضى ا =28>. اغت کسد زد ش د ا غل دزقد ک داد ؿاى بسزغ ا ي ها ج ترر أم ت وراز کر SKBR3 MCF-7 غرسيا را غرل ؾرکت بر کرسد ا رد دز افرت گاهرا اؾرع زشهاز عكاز را غرل اش کوهرس شهراى بر ابػه ق ز ب هع داز بر گاها اؾع تابؽ ا زشهاز عكاز با ت واز تحت ک اغت ب د ا د. ت ا قدرداني و تطكر زؾه ازؾد کازؾ اغ هق پا اى اه اش بتؿ تحق ق ا ي اغرت ؾروا ت رساى احرد اغراله آشاد دا ؿرگا ب ف ص ک شحورا اش هر دا رد الشم بر د برس هقالر ا ري ػر د پط ؽ ا ي زغ دى ثوس ب دز ک عص صا و ا هػاعد وا د. تؿکس و د د از منابع [1] Holohan C, Van Schaeybroeck S, Longley DB, Johnston PG. Cancer drug resistance: an evolving paradigm. Nat Rev Cancer 2013; 13(10): [2] Siegel R, Naishadham D, Jemal A. Cancer statistics, CA Cancer J Clin 2013; 63(1): [3] Howell A, Sims AH, Ong KR, Harvie MN, Evans DG, Clarke RB. Mechanisms of Disease: prediction and prevention of breast cancer-- cellular and molecular interactions. Nat Clin Pract Oncol 2005; 2(12): [4] Varangot M, Barrios E, Sóñora C, Aizen B, Pressa C, Estrugo R, Lavigna R, Musé I, Osinaga E, Berois N. Clinical evaluation of a panel of mrna markers in the detection of disseminated tumor cells in patients with operable breast cancer. Oncol Rep 2005; 14(2): [5] Futreal PA, Wooster R, Stratton MR. Somatic mutations in human cancer: insights from resequencing the protein kinase gene family آسیبشىاسیزیستی دير 02 شمار 0 تابستان پژي ش ای 56

13 ی ا ی ا سرطانپستان سل ل در يتابشاشع گامابر رزماری فعالیتضدسرطاویعصار گیا ارزیابی Cold Spring Harb Symp Quant Biol 2005; 70: emulsion. J Agric Food Chem 1996; 44(1): [6] Karimoi HM, Pourdehghan M, Faghihzadeh S, Montazeri A, Milani JM. The Eeffects of Group Counseling on Symptom Scales of Life Quality in Patients with Breast Cancer Treated by Chemotherapy. Journal of Kermanshah University of Medical Sciences (Behbood) 2006; 10(1): [7] Rižnar K, Ĉelan Š, Knez Ž, ŠKerget M, Bauman D, Glaser R. Antioxidant and Antimicrobial Activity of Rosemary Extract in Chicken Frankfurters. Journal of Food Science 2006; 71: C [8] Forouzandeh F, Salimi S, Naghsh N, Zamani N, Jahani S. Evaluation of anti-cancer effect of Peganum harmala L hydroalcholic extract on human cervical carcinoma epithelial cell line. J Shahrekord Univ Med Sci 2014; 16(4): 1-8. [9] al-sereiti MR, Abu-Amer KM, Sen P. Pharmacology of rosemary (Rosmarinus officinalis Linn.) and its therapeutic potentials. Indian J Exp Biol 1999; 37(2): [10] Skoula M, Abbes JE, Johnson CB. Genetic variation of volatiles and rosmarinic acid in populations of Salvia fruticosa mill growing in Crete. Biochem Syst Ecol 2000; 28(6): [11] Erkan N, Ayranci G, Ayranci E. Antioxidant activities of rosemary (Rosmarinus Officinalis L.) extract, blackseed (Nigella sativa L.) essential oil, carnosic acid, rosmarinic acid and sesamol. Food Chemistry 2008; 110(1): [12] Frankel EN, Huang SW, Aeschbach R, Prior E. Antioxidant activity of a rosemary extract and its constituents, carnosic acid, carnosol, and rosmarinic acid, in bulk oil and oil-in-water Pathobiology Research, Vol. 20 (2017), N0. 2 [13] Roomiani L, Soltani M, Akhondzadeh Basti A, Mahmoodi A, Taheri; Mirghaed A, Yadollahi F. Evaluation of the chemical composition and in vitro antimicrobial activity of Rosmarinus officinalis, Zataria multiflora, Anethum graveolens and Eucalyptus globulus against Streptococcus iniae the cause of zoonotic disease in farmed fish. IJFS 2013; 12(3): [14] Terpinc P, Bezjak M, Abramoviĉ H. A kinetic model for evaluation of the antioxidant activity of several rosemary extracts. Food Chemistry 2009; 115(2): [15] Gofman JW. Radiation and human health. San Francisco, CA: Sierra Club Books, 1981; p: [16] Sakr SA, Lamfon HA. Protective effect of rosemary (Rosmarinus officinalis) leaves extract on carbon tetrachloride-induced nephrotoxicity in albino rats. Life Science Journal 2012; 9(1): [17] Howell PM, Liu Z, Khong HT. Demethylating agents in the treatment of cancer. Pharmaceuticals (Basel) 2010; 3(7): [18] Yesil-Celiktas O, Sevimli C, Bedir E, Vardar-Sukan F. Inhibitory effects of rosemary extracts, carnosic acid and rosmarinic acid on the growth of various human cancer cell lines. Plant Foods Hum Nutr 2010; 65(2): [19] Petiwala SM, Puthenveetil AG, Johnson JJ. Polyphenols from the Mediterranean herb rosemary (Rosmarinus officinalis) for prostate cancer. Front Pharmacol 2013; 4: 29. [20] González-Vallinas M, Reglero G, Ramírez de Molina A. Rosemary (Rosmarinus officinalis 57

14 L.) Extract as a Potential Complementary Agent in Anticancer Therapy. Nutr Cancer 2015; 67(8): [21] Delaney G, Jacob S, Featherstone C, Barton M. The role of radiotherapy in cancer treatment: estimating optimal utilization from a review of evidence-based clinical guidelines. Cancer 2005; 104(6): [22] El Ghissassi F, Baan R, Straif K, Grosse Y, Secretan B, Bouvard V, Benbrahim-Tallaa L, Guha N, Freeman C, Galichet L, Cogliano V; WHO International Agency for Research on Cancer Monograph Working Group. A review of human carcinogens--part D: radiation. Lancet Oncol 2009; 10(8): [23] Hendrick RE. Radiation doses and cancer risks from breast imaging studies. Radiology 2010; 257(1): [24] Craig WJ. Health-promoting properties of common herbs. Am J Clin Nutr 1999; 70(3 Suppl): 491S-499S. [25] Chen P, Mrkobrada M, Vallis KA, Cameron R, Sandhu J, Hendler A, Reilly RM. ي مکاران عبدالملکی وازویه Comparative antiproliferative effects of (111)In- DTPA-hEGF, chemotherapeutic agents and gamma-radiation on EGFR-positive breast cancer cells. Nucl Med Biol 2002; 29(6): [26] Kontogianni VG, Tomic G, Nikolic I, Nerantzaki AA, Sayyad N, Stosic-Grujicic S, Stojanovic I, Gerothanassis IP, Tzakos AG. Phytochemical profile of Rosmarinus officinalis and Salvia officinalis extracts and correlation to their antioxidant and anti-proliferative activity. Food Chem 2013; 136(1): [27] Đilas S, Knez Ž, Ĉetojević-Simin D, Tumbas V, Škerget M, Ĉanadanović-Brunet J, Ćetković G. In vitro antioxidant and antiproliferative activity of three rosemary (Rosmarinus officinalis L.) extract formulations. International Journal of Food Science & Technology 2012; 47: [28] Tai J, Cheung S, Wu M, Hasman D. Antiproliferation effect of Rosemary (Rosmarinus officinalis) on human ovarian cancer cells in vitro. Phytomedicine 2012; 19(5): آسیبشىاسیزیستی دير 02 شمار 0 تابستان پژي ش ای 58