د ا ز ز ا ب ه ش ر و ال د ن

Transcript

1 ه د ا ز ز ا ب ه ش ر و ال د ن ا ر م ا ک م و د ه ر ا م ش م ه د ه ر و د / ی ک ش ز پ م ا د ی ژ و ل و ی ب ر ک ی م ه ی ر ش ن : 9 2 ی پ ا ی پ ی ا ه ه ی و س ی و ر ی ن ا ر ی ا ل س ع ر و ب ن ز ر ه ز ز ا ه د ش ج ا ر خ ت س ا ن ی ت ی ل م ر ث ا ی س ر ر ب ا ز و ن ی ژ و ر ئ آ س ا ن و م و د و س ی ک ی ن ی ل ک ه ی ض ر م 2 1 ت ا ی ب ر و ص ن م ی ی ا ض ر ی ر ب ک ا ا ض ر ه د ا ز ن م و م ن س ح م گ ن ش و پ 3 * ی ر ق ا ب 1 2 ه- و ر گ ه- و ر گ ر ا ی ش ن ا د ن ا ر ی ا تهران ن ا ر ه ت ت ا ق ی ق ح ت و م و ل ع د ح ا و ی م ال س ا د ا ز آ ه ا گ ش ن ا د ه ی ا پ م و ل ع ه د ک ش ن ا د ی س ا ن ش ت س ی ز ن ا ر ی ا تهران ن ا ر ه ت ت ا ق ی ق ح ت و م و ل ع د ح ا و ی م ال س ا د ا ز آ ه ا گ ش ن ا د ی ک ش ز پ م ا د ی ص ص خ ت م و ل ع ه د ک ش ن ا د ی ژ و ل و ی ب و ت ا پ ن ا ر ی ا تهران ن ا ر ی ا ر و ت س ا پ و ت ی ت س ن ا بیوتکنولوژی ت ا ق ی ق ح ت ز ک ر م ی ژ و ل و ن ک ت و ی ب ه و ر گ ی ن ا م ر د ی ا ه ل و ک ل و م و ی ب و م و ن و ه ا گ ش ی ا م ز آ د ا د ر م 1 1 : ت ف ا ی ر د خ ی ر ا ت ر ه م 1 : ش ر ی ذ پ خ ی ر ا ت ه د ی ک چ ی ا ر ا د د ا ر ف ا ن آ ن د و ب ب ل ط ت ص ر ف ت ع ی ب ط ه ب ه ج و ت ا ب و ه د ش ش ر ا ز گ ی د ا ی ز ی ا ه ن ا ت س ر ا م ی ب ز ا ا ز و ن ی ژ و ر ئ آ س ا ن و م و د و س ز ا ی ش ا ن ی ا ه ت ن و ف ع ب ب س س ا ن و م و د و س س ن ج ر د ه د ی چ ی پ جهش مکانیسمهای ه ا ر م ه ه ب ا ه ک ی ت و ی ب ی ت ن آ ز ا ا ج ب ا ن ه د ا ف ت س ا د ن ت س ه خطر درمعرض ی ن م ی ا م ت س ی س ف ع ض د ر و م ر ت ش ی ب ی ع ی ب ط ی د ی ت پ پ ی ا ه ک ی ت و ی ب ی ت ن آ ن ت ف ا ی ت ه ج و ج ت س ج ه ت ش ذ گ ه ه د ل ال خ ر د ت س ا شده بیوتیک ی ت ن آ ه ب م و ا ق م گونههای آمدن د و ج و ب ن ی د ب د و ب ا ز و ن ی ژ و ر ئ آ س ا ن و م و د و س ی ن ی ل ا ب ی ا ه ه ی و س ر ب ن ی ت ی ل م د ی ت پ پ ی گ د ن ش ک و ی ر ا ه م ر ث ا ی س ر ر ب ه ع ل ا ط م ن ی ا ز ا ف د ه ت س ا ه ت ف ر گ ر ا ر ق ه ج و ت ی و س ه 8 4 ر و ظ ن م SDS-PAGE ت س ت ا ب ر ه ز کیفیت آن ی ز ا س ه د ا م آ و ر و ب ن ز ر ه ز ه ی ه ت ز ا س پ د ن د و ب س ر ت س د ر د ی ل ب ق ه ع ل ا ط م ک ی ز ا ی س ر ر ب د ر و م ت ی ف ی ک س پ س د ی د ر گ ی ز ا س ا د ج ن ی ت ی ل م د ی ت پ پ ) RP-HPLC( س و ک ع م ز ا ف ر د ال ا ب ی ی ا ر ا ک ا ب ع ی ا م ی ف ا ر گ و ت ا م و ر ک ز ا ه د ا ف ت س ا ا ب س پ س د ش ی س ر ر ب و ث ا ر ب ن ش و ل ی ا د و ر ک ی م ش و ر ا ب ن ی ت ی ل م ی گ د ن ش ک و ی ر ا ه م ت ظ ل غ ل ق ا د ح د ی د ر گ ی س ر ر ب SDS-PAGE ز ا ه د ا ف ت س ا ا ب ه د ش ج ا ر خ ت س ا ن ی ت ی ل م ل ک MIC 50 د و ب ر ه ز ن ش ک ا ر ف ن ی ر ت ی ل ص ا ن ی ت ی ل م د ی ت پ پ که گردید تخلیص ل س ع ر و ب ن ز ر ه ز ز ا ن ش ک ا ر ف ت س ی ب د و د ح د ی د ر گ ن ی ی ع ت کلنی شمارش 4 9 3/ 7 د م آ ت س د ب م ر گ و ر ک ی م 2 1 5/ و 6/ / ب ی ت ر ت ه ب ن ی ت ی ل م ه ب س ا س ح ی د ی ئ و ک و م ر ی غ و ی د ی ئ و ک و م ی ا ه ه ی و س س ا س ح ی ا ه ه ی و س س ا س ح ی ا ه ه ن و م ن ل ک ر د MBC 50 د ن د و ب س ا س ح ن ی ت ی ل م ه ب ت ب س ن ی د ی ئ و ک و م ر ی غ ی ا ه ه ی و س د ص ر د 6 8 2/ و ی د ی ئ و ک و م ی ا ه ه ی و س د ص ر د ه ب حساس سویهها ز ا د ص ر د 9 8 8/ 5 د م آ ت س د ب م ر گ و ر ک ی م 0 5 و 7 3 5/ 0 5 ب ی ت ر ت ه ب ن ی ت ی ل م ه ب حساس غیرموکوئیدی و ی د ی ئ و ک و م ی ا ه ه ی و س ل ب ا ق ر ث ا ن ی ت ی ل م ه ک د ش ص خ ش م MBC و MIC ت س ت ج ی ا ت ن ز ا ه د ا ف ت س ا ا ب د ی د ر گ ن ر ا ه م ن ی ت ی ل م حضور در ا ه ن آ ز ا د ص ر د 0 1 1/ 4 د ش ر و ه د و ب ن ی ت ی ل م ی ا ه ه ی و س د ش ر ه ک د ا د ن ا ش ن ج ی ا ت ن ز ی ل ا ن آ ت س ا ه ت ش ا د ف ل ت خ م ن ا ر ا م ی ب ز ا جداشده آئروژینوزاهای سودوموناس رشد ر ب کشندگی و ی ر ا ه م ه ج و ت ه ب ی ر ت م ک ی ر ی ذ پ ذ و ف ن خود اطراف ر د ی د ی ر ا ک ا س ی ل پ الیههای وجود ل ی ل د ب ا ه ه ی و س ن ی ا د د ر گ ی م ر ا ه م ن ی ت ی ل م ز ا ی ر ت م ک ر ا د ق م ا ب ی د ی ئ و ک و م ی ا ه ت ن و ف ع ن ا م ر د جهت امید ه ک ت س ا ش ز ر ا ا ب ظ ا ح ل ن ی ا ز ا ش ه و ژ پ ن ی ا ج ی ا ت ن د ن ه د ی م ن ا ش ن د و خ ز ا ی ر ت ش ی ب ت م و ا ق م و ه ت ش ا د کها ی ت و ی ب ی ت ن آ د ه د ی م ش ی ا ز ف ا ا ر س ی ز و ر ب ی ا ف ک ی ت س ی س ی ر ا م ی ب ه ب ن ا ی ال ت ب م ر د ی س ا ن و م و د و س MBC و MIC ت س ت س و ک ع م ز ا ف ر د ال ا ب ی ی ا ر ا ک ا ب ع ی ا م ی ف ا ر گ و ت ا م و ر ک ا ز و ن ی ژ و ر ئ آ س ا ن و م و د و س ن ی ت ی ل م ر و ب ن ز ر ه ز : ی د ی ل ک ت ا م ل ک ی ر ق ا ب گ ن ش و پ ن ا ر م ا ک : ل و ئ س م ه د ن س ی و ن : ن ف ل ت : ن ا ر ی ا ان ر ه ت ی ن ا م ر د ی ا ه ل و ک ل و م و ی ب و م و ن و ه ا گ ش ی ا م ز آ ی- ژ و ل و ن ک ت و ی ب ه و ر گ ژی- و ل و ن ک ت و ی ب ت ا ق ی ق ح ت ز ک ر م - ن ا ر ی ا ر و ت س ا پ و ت ی ت س ن ا : س ر د آ k_bagheri@pasteuracir : ک ی ن و ر ت ک ل ا ت س پ

2 م ه د ه ر و د / ی ک ش ز پ م ا د ی ژ و ل و ی ب و ر ک ی م ه ی ر ش ن م و د ه ر ا م ش 9 2 ی پ ا ی پ و ن ا ن ت م ر ن ن ا ی ا پ د ن ب ن ا ت س و پ سخت جانوران گیاهان ه م د ق م ت ن و ف ع علت شایعترین آئروژینوزااااا سودوموناس ه د و ب ی ج ر ا خ ش و گ و ی گ ت خ و س د ر ا و م ی ص ا خ د ن ا و ت ی م ن ی ن چ م ه و ر د ن ی ن چ م ه ) 1 1 ( د د د د د د د د د و ش ی ن و م و ن پ ث ع ا ب ر د م س ی ن ا گ ر ا و ر ک ی م ن ی ا ط س و ت ا ه ه ی و ه ت ا ب ط ب ت ر م ی ن و م و ن پ ز ا ری ا ی س ب ) )9 ت تت ت ت ت ت ت ت س ا ه د ش ش ر ا ز زز ز ز ز ز ز ز زز ز ز گ ت ا ع ل ا ط م ا د ج ی ک ی ن ی ل ک ی ا اا هه ه ن و م ن ز ا آئروژینوزااااا سودوموناس ز ا ی ا ه ط ق ن یا بافت ر ه ا ب ی ر ق ت و د و ش ی م ه ل م ج ز ا ن د ب ا ب د ن ا و ت ی ی م ا ه ه ی ر و ی ر ا ر د ا م ت س ی س و ن د ب م ر ن ی ا ه ت ف ا ب ی ع ض و م ت ا ع ی ا ض ر ث ا ر د ی ت ح و د ن و ش ه د و ل آ ی ر ت ک ا ب ن ی ا ز و ر ب ب ج و م و ه د ش ن و خ ش د ر گ د ر ا و د ن ا و ت ی م ی ر ت ک ا ب ر ی م و گ ر م د ص ر د صورت این ر د که گردد سمی سپتی س ی ز و ر ب ی ف ک ی ت س ی س ن ا ر ا م ی ب ر د ت س ال ا ب ر ا ی س ب ث ع ا ب ی س ا ن و م و د و س ب ی ر تخ ه ری ت ف ا ب ده ن و ر ش ی پ ی ن و م و ن پ ن ی ا که دارویی ت م و ا ق م ت ل ع ه ب ه ز و ر م ا ) 8 1 ( د د ر گ ی م ه ب ن آ ز ا ناشی عفونت د ه د ی ی م ن ا ش ن د و خ ز ا ی ر ت ک ا ب ب ل غ ا ) )5 د د ر گ ی م ی ق ل ت ی د ج و م ه م ه ل ئ س م ک ی ن ا و ن ع ی اا ا ا ته ت ت ت ت ت ت ت ن و ف ع ن ا م ر د در رایج بیوتیککککککهااای آنتی و ر ت م و ا ق م ن ا ز ی م و د ن ت س ی ن ر ث ؤ م ا ز و ن ی ژ و ر ئ آ س ا ن و م و د و س ه ج و ت ا ب ) 5 1 )13 ت س ا ش ی ا ز ف ا ه ب ت م و ا ق م ه ب ییییییی- یی ی ی ت ن آ چ ی ه ز و ن ه شده ایجاد جهشهای و ی ر ت ک ا ب ن ی ا ی ک ی ت و ی ب ن ی م ض ت بیوتیکی آنتی ن ا م ر د ه د ن ن ک ت س ی ن ا ا ا ز و ن ی ژ و ر ئ آ س ا ن و م و د و و س د ی د ج ی ا ه ک ی ت و ی ب ت س ا ن ک م م د ر و آ د ی د پ ا ه ت ن و ف ع ی ا ا ا تتتتتتته ت تتتتت ت تت ت ن و ف ع ی ت ن آ ی و ج ت س ج ا ذ ل ) Natural Source( ))) ( ی ع ی ب ط ع ب ن م ا ب ا ر ی د ی د ج افق بتواند ن ا م ر د ر د ه ن و گ ن ی ا ز ک ا ر م ه ج و ت د ر و م ضدمیکروبی پپتیدهای ن ا ی م ن ی ا ر د ر ی خ ا ه ه د ر د و ه ت ف ر گ ر ا ر ق ی ی و ر ا د و ی ت ا ق ی ق ح ت ف ل ت خ م ا ه ن آ شناسایی جهت ر د ه ن ی م ز ن ی ا ر د ی د ا ی ز ت ا ع ل ا ط م ت ر و ص ت س ا ه ت ف ر گ ه ل م ج ز ا بیوتیکککککککککککککککهااا اینآنتی ل م ا ش ف ل ت خ م ع ب ا ن م ز ا ه ک د ن ت س ه ل ا ی ر ت ک ا ب ی ت ن آ ی ا ه د ی ت پ پ تتتتتی- تت ت نت آ ت ی ل ا ع ف ا ب ا ه ن آ ) 9 1 و 3 1 ( گردیدهاند استخراج ی ک ی ت و ی ب ی چ ر ا ق ق ق ق د ض و ه ی عل ر ب ی س و ر ی و د ض و ص خ ش م میکروارگانیسمممممهااا مختلفیاز ت ا ب ا ه ت ل ا ه و ال ع ع وا ن ا د ن و ش ی ی ی م و م خ ز م ی م ر ت ک ی ت پ س ر ی غ و ک ی ت پ س ش ق ن م ه ی ب ا تس ک ا ی ن م ی ا م ت س ی س یم ظ ن ت ه ب ) 4 3 ( ( ( ( ( ( ( ( ( ( ( ( ( د رن ا د ه ز ا د ن ا ت ب ث م شارژ دارای ضدمیکروبی پپتیدددهااای و ن ی ن ژ ر آ د ن ت س ه ه ن ی م آ د ی س ا ی ا ر ا د و ک چ و ک ا ه ن آ ی ک ی ت ا پ ی ف م آ ر ا ت خ ا س و ه د و ب ت ب ث م ر ا ب ل و ئ س م ن ی ز ی ل ) )8 د د ز ا س ی ی م ا ن ا و ت ی ب و ر ک ی م ی ا ه ا ش غ ا ب ط ا ب ت ر ا ی ا ر ب ا ر ز ا ی ع ی س و ف ی ط ه ی ل ع ر ب ی ی ی ب و ر ک ی م د ض ی ا ا ا ده د د ی ت پ پ ی ف ن م م ر گ و ت ب ث م گرم باکتریهای ) 7 2 ( د ن ت س ه ر ث و م Apis ( لللل ل ل سل ع ر و ب ن ز ر ه ز ر د ی ب و ر ک ی م د ض ی ا ه د ی ت پ پ م ه م ع ب ن م یک میتواند و ه ت ش ا دد د د و ج و ز ی ن )melifera ی ا ا ته ت ت ت ت ت ت ن و ف ع برعلیه طبیعی ش ز ر ا ا ب ی ا ه ه د ر و آ ر ف ر و ب ن ز ل س ع ز ا ر ه ز باشند مختلف ز ا و ت س ا ز ا ب ر ی د ل ص ا ف م م ر و ه ل م ج ز ا ف ل ت خ م ی ا ه ی ر ا م ی ب ن ا م ر د ی ا ر ب ر ی ا س و م س ی ت ا م و ر س ر ق ن ی ا ه ی ی ر ا م ی ب و ی ن م ی ا م ت س ی س ن ی ت ی ل م ) 8 2 و 6 1 ( تتت ت ت ت ت ت ت ت ت ت ت ت ت ت س ا میرفته کار ه ب ی ب ا ه ت ل ا د ص ر د 0 6 ا ت 0 5 و ه د و ب ر ه ز ر د د و ج و م د ی ت پ پ ن ی ر ت ک چ و ک ر ه ز ک ش خ ن ز و ت م س ق و 9 سیتارام را ل م ا ش ل ا س ر د ) 3 و )2 د د د و ش ی ی م ی ک ی ژ و ل و ی ب ی ا اا ته ت ت ت ت ت ی ل ا ع ف ز ا ن ا ر ا ک م ه ن ی ت ی ل م ی ه ع ط ق 5 1 ی ه ه ه ه ه د ن ا م ی ق ا ب ل ا ن ی م ر ت C- ت ی ل ا ع ف ر د آنالوگی عنوان ه ب آآآآآن از و د ن د ر ک ه د ا ف ت س ا ل ا س ر د 9( 2 ( ند ن ن ن ن ن ن د ر ک ه د ا ف ت س ا ی ی ا ی ر ت ک ا ب د د د ض ف ر ا ز ال ی ب و ر ک ی م د ض ر ث ا In vivo ط ی ح م ر د ن ا ر ا ک م ه و ز ا ی ش ا ن عفونتتتتتتتتتتتهاااای روی ر ب ن ی ت ی ل م ا ی د ی م ال ک کردند بررسی ا ر س ی ن ی م و ه ا م س ال پ و ک ی ا م و س ی ت ا م و ک ا ر ت ن ت ف ر گ ر ا ک ه ب ا ب ش ن ا ر ا ک م ه و ن و ی ل ا س ر د ) 0 2 ( ی ک ی ن ا و ن ع ه ب د ا ح ت ی ت ا ر ک ن ا پ ز ا ن ی ت ی ل م ) 3 3 ( د ن د ر ک ی ر ی گ و ل ج ی ن و ف ع ز ا ی ا ه ی ی ی ر ا م ی ب

3 3 3 1 ل س ع ر و ب ن ز ر ه ز ز ا ه د ش ج ا ر خ ت س ا ن ی ت ی ل م ر ث ا ی س ر ر ب ف د ه ی گ د ن ش ک اثر بررسی ق ی ق ح ت ن ی ا ی ل ص ا ر ب ن ی ت ی ل م ف ل ت خ م ی ا ه ی ر ا م ی ب ه ی و س ه د و ب ی ن ی ل ا ب ی ا و ی ر ا ه م ز ا ه د ش ا د ج ل ا ح ب ا ت ت س ا ر د ی ا ه ع ل ا ط م ق ی ق ح ت و ه ت ف ر گ ن م ا ج ن ا ی ن ی ل ا ب ی ا ه ه ی و س ر ب ن ی ت ی ل م ر ث ا د ر و م اظ ح ل ن ی ا ز ا د ر و م ن ی ا ر د ه ک ت س ا ت ی م ه ا ز ئ ا ح ن ی ت ی ل م د ی ت پ پ ه ک د ن ا س ر ی م خاطر اطمینان ن ی ا ه ب ا ر ن ی ق ق ح م ا ی و د د ر گ ی ی م ی ن ی ل ا ب ی ا ه ه ی و س ر ث ک ا ن د ر ک د و ب ا ن ه ب ر د ا ق ص ا خ ی ر ا م ی ب ک ی ز ا ه د ش ا د ج ی ا ه س ا ن و م و د و س د ن ا و ت ی م د ن ک د و ب ا ن ا ر ر ا ک ش و ر و د ا و م ر ه ز ه ی ه ت ی ن ا ر ی ا ل س ع ی ا ه ر و ب ن ز ر ه ز ه ع ل ا ط م ن ی ا ر د Apis ( ر د ع ق ا و ) Melifera meda د ر ک ر ه ش ه ق ط ن م ه ب ش و ر دستگاه توسط ا ه ر و ب ن ز ر ه ز د ش ه ی ه ت ی ک ی ر ت ک ل ا ک و ش ق ی ر ط ز ا ر ه ز ه د ن ن ک ی ر و آ ع م ج پروتکل اساس ن و ت بن ت ا ر ی ی تغ ی م ک ا ب الکتریکی تحریک کهدارای ای ه یش ش م و ی ر ا و ک آ ک ی ) )1 د د د ی د ر گ کشی سیم صفحات ه د ش ر ب ی ر و آ ع ع ع م ج یی اال و ب ت م و س ق ی و ر ی و ر ر ب د و ب ه ب ع و ر ش ه ک ب ش ن ی ا ی و ر ر ب ا ه ر و ب ن ز د ش ه د ا د ر ا ر ق و د ن ک و ت ی ل ا ع ف شدند تحریک ه د ر ک ن ت ف ر ه ا ر ی ا ه ر و ب ن ز ی یک ر ت ک ل ا ن ا ی ر ج ر ث ا ر د و ر د ل س ع ر ث ا ح ط س و کرده خطر احساس ی ک ی ر ت ک ل ا سپس میزدند ش ی ن ه ک ب ش ه ا گ ت س د ز ا ی ی ی ی م ی س ی ک ی ر ت ک ل ا ن ا ی ر ج ک ی ر ح ت ه ک ب ش ده ن ن ک ی ر و آ ع ع ع م ج گردید قطع ا ر ی م ی س ر ه ز و ا جد ر ه ز ت ی ا ه ن ر د د ش ه د ا د ر ا ر ق ا و ه ض ر ع م ر د و د ی د ر گ ش ا ر خ ش و ر ط س و ت ه د ش ک ش خ و د ی د ر گ ی ر و آ ع ع ع ع م ج ر د و پ اسکالپل بایک ه ب ه د ش ی ر و آ ع ع ع ع م ج ی ن ا م ر د ی اا ا له ل ل ل و ک ل و م و ی ب و م و ن و ه ا گ ش ی ا م ز آ و د ش ه د ا د ل ا ق ت ن ا ر و ت س ا پ ر و ظ ن م ه ب گردید نگهداری ه ج ر د 0-2 ر د دمای در ش ی ا م ز آ و ت ی ت س ن ا ر ه ز ی ز ا س ه د ا م آ ی ل ی م ک ی ر د ا ر م و ن و ز ا م ر گ ی ل ی م 0 5 ه گا ت س د ا ب ه ق ي دق و د ت د م ه ب و ه د ر ک ل ح دیونیزه آب ر ت ی ل Vortex ا ب و ه ق ي ق د ه د ت د م ه ب ل ص ا ح ط و ل خ م گرديد مخلوط ع ی ا م شد سانتريفیوژ اتاق ی ا م د ر د ه ق ي ق د ر د ر و د ر ت ل ی ف ی ا ه پ و ی ت و ر ک ی م ر د و ه د ش ه ت ش ا د ر ب ی م ا ر آ ه ب ی ئ و ر ي ي ا غش ر ت ل ي ف ا ب ر ا د ع ای م د ی د گر ر ت ل ی ف ر ت م و ر ك ي م 0/2 ي د ع ب ت ا ش ي ا م ز آ ت ه ج ه د م آ ت س د ه ب ف ا ف ش ر د ر ز ي ر ف ت ظ ل غ ن ی ی ع ت ت ه ج د ش ی ر ا د ه گ ن د ا ر گ ي ت ن ا س ه ج ر د 0-2 ده ش ص ی ل خ ت ن ی ت ی ل م ش رو ز ا ج و م ل و ط ر د UV ت ی ل پ و ر ک ی م ه ا گ ت س د ز ا ه د ا ف ت س ا ا ب nm Microplate( ( ( ر ت م و ت ف و ر ت ک پ س ا Spectrophotometer, گردید استفاده ) Epoch-Biotek Instruments, USA SDS-PAGE ش و ر ه ب ر ه ز ز ر و ف و ر ت ک ل ا ی ر ا د ق م شده جمعآوری زهر کیفیت بررسی ت ه ج ب آ ر ت ی ل و ر ک ی م 0 5 ر د ر ه ز ز ا ی ق ی ر ز ت ر ط ق م و ه د ش ل ح ن ا م ز ت د م ر د % 5 1 5/ د ی م آ ل ی ر ک آ ی ل پ ل ژ ر د س پ س 3 گ ن ر گردید الکتروفورز ر پ م آ ی ل ی م 0 2 جریان با ت ع ا س ب ش ک ی ت د م ه ب R250 و ل ب ت ن ا ی ل ر ب ی س ا م و ک ا ب ی ز ی م آ ی ر ب گ ن ر و گرفته صورت ل ژ ا ب ک ی ت س ا % 0 3 ی ز ا س د ن ت س م م ت س ی س ا ب ج ی ا ت ن گردید انجام ل ن ا ت م % 0 1 و د ی س ا ت ب ث )Gel Documentation System, BioRad( د ی د ر گ ل ل ل ژ ز ا ف HPLC ش ش ش و ر ه ب ر ه ز ز ا ن ی ت ی ل م ج ا ر خ ت س ا س و ک ع م زززززز ز ز زز ز زز زز زز ا عسل زنبور زهر ز ا ن ی ت ی ل م جداسازی جهت ی ف ا ر وگ ت ا م و ر ک ک ی ن ک ت س و ک ع م م م م م م م م م ت س ی س از ف ر د ال ا وو ب ی ی ا ر ا وو ا ب یی ا ر ا ک با ع ی ا م Knauer GmbH, ( HPLC ك ر ح ت م ز ا ف گردید استفاده C18 ن و ت س و )Germany ص ل ا خ يل ر ت ي ن و ت س ا ل م ا ش ی و ا ح ی ر ت % 0/5 0

4 م ه د ه ر و د / ی ک ش ز پ م ا د ی ژ و ل و ی ب و ر ک ی م ه ی ر ش ن م و د ه ر ا م ش 9 2 ی پ ا ی پ ل و ل ح م ( ی ل ص ا ه د ا م ن ا و ن ع ه ب د ی س ا ک ی ت س ا و ر و ئ و ل ف حاوی کروماتوگرافی خلوص درجه ا ب ب آ حللا عنوان ه ب ) B ل و ل ح م ( د ی س ا ک ی ت س ا و ر و ئ و ل ف و ) A ی ر ت %0/5 0 ی ع ر ف ا ب ه د ن ب ا ی ش ی ا ز ف ا ی ط خ ت ن ی د ا ر گ ک ی ه ت ف ر ر ا ک ب د ت م د و ب ق ی ر ز ت ز ا ل ب ق د و ب ل ی ر ت ی ن و ت س ا ل و ل ح م ل و ل ح م ا ب ن و ت س ی ز ا س ل د ا ع ت م ا د ت ب ا ه ن و م ن م ت س ی س ه ب د ی د ر گ م ا ج ن ا B ه د ش ق ی ر ز ت ن و ت س ه ب ر ت ی ل و ر ک ی م 0 5 م ج ح ر د ه ن و م ن س پ س ه د ش ل ا م ع ا د ت م گردید اعمال شده گرفته نظر ر د د ت م و 5 5 ه ق ی ق د 5 ت د م ه ب B ل و ل ح م ا ب ستون شستشوی شامل ل و ل ح م ل ا م ع ا ه ق ی ق د ل و ل ح م ل ا م ع ا س پ س ت ظ ل غ ب ی ش ا ت A و د د ص ر د 0 6 ه ب د د ص ر د 0 9 ت ظ ل غ ب ی ش ا ت A ل و ل ح م ا ب ه ر ا ب و د ن و ت س ا ه ت ن ا ر د د و ب ه ق ی ق د 5 ت د م ه ب B ی ا ه ک ی پ ش ی ا م ز آ ی ط ر د گردید متعادل ه ق ی ق د 5 ت د م د ن د ی د ر گ ی ر و آ ع م ج ه د ش ه د ه ا ش م ا ه ن ش ک ا ر ف ن د ر ک ه ز ی ل ی ف و ی ل ر ا ش ف ده ش ی ر و آ ع ع ع م ج ی ا اا نه ن ن ش ک ا ر ف ه ا گ ت س د ط س و ت ر ف س م ت ا 0/4 0 ر د ی ا م د 6 5 C و- Freeze Dryer 2 ت د م ر د ) Christ, 2 alpha - Germany( شدند لیوفیلیزه SDS-PAGE ش و ر ه ب ن ی ت ی ل م ز ر و ف و ر ت ک ل ا ن ی ت ی ل م ص و ل خ ج ا ر خ ت س اا ا ه د ش ش و ر ا ب ت 4 ع ا س ز ر و ف و ر ت ک ل ا SDS-( ( ( ( ( ( ( ت ا ف ل و س ل ی س د و د م ی د س د- د د د د د ی آم ل ی ر ک ا ی ل پ ر د ملیتین فراکشن ت ف ر گ ر ا ر ق ی س ر ر ب د ر و م ) PAGE ی ق ی ر ز ت ر ط ق م ب آ ر ت ی ل و ر ک ی م 0 5 ح ی ض و ت ط ی ا ر ش د ی د ر گ ا ب س پ س و ه د ش ل ح ز ر و ف و ر ت ک ل ا ی ل ب ق ت م س ق ر د ه د ش ه د ا د ی ن ی ل ا ب ی ا ه ه ن و م ن ی ر و آ ع م ج سودوموناس ی اا ا هه ی و س ک ی ز ا اا ا ز و ن ی ژ و ر ئ آ ه ع ل ا ط م د ن د و ب د و ج و م ه ا گ ش ی ا م ز آ ر د و شده جمعآوری قبلی ز ا د د ر و م 8 4 ی س ر ر ب د ر و م ی ا ه ه ن و م ن د ا د ع ت ی ا ه ی ی ر ا م ی ب ک ی ت س ی س ی ر ا ر د ا ی ا اا ا ته ت ت ت ت ت ت ت ت ون ف ع ه ل م ج ز ا ف ل ت خ م د ن د و ب ه ه ه ر ی غ و س س س س ی ز و ر ب ی ف ه ی و س Pseudomonas ه ی و س ن ا و ن ع ه ب aeruginosa ATCC27853 د د د ر ا د ن ا ت س ا گرفت قرار ش ی ا م ز آ د ر و م ی ن ی ل ا ب ی ا ه ه ی و س ه ا ر م ه ه ب ن ی ت ی ل م ی ی ا ی ر ت ک ا ب د ض ر ث ا ی س ر ر ب ی م ک ش و ر ه ب د ر ا د ن ا ت س ا ن و ی س ن ا پ س و س ه ی ه ت ل ک ت و ر پ ن ی ت ی ل م ل ا ی ر ت ک ا ب ی ت ن آ ت ی ص ا خ ن ی ی ع ت ت ه ج ت ف ر گ ر ا ر ق ه د ا ف ت س ا د ر و م CLSI د ر ا د ن ا ت س ا ی ل ل م ل ا ن ی ب د لن ر ا ف ک م ه یم ن ل ک ت و پر ن ی ا اس س ا ر ب ه ک ل د ا ع م CFU/ml ت ش ک ط ی ح م ر د 3 ی ا م د ر د ت 7 ش ک ر ظ ن د ر و م ی ا ه ی ر ت ک ا ب ت س ا 1/ ه ب ث ا ر ب ن و ت ن ی ه ر ل و م ت د م سوسپانسیون شدند داده ب ش ک ی ی ی ا ی ر ت ک ا ب ب و س ر و ه د ش ژ و ی ف ی ر ت ن ا س ه ق ی ق د 5 ت د م ه ب ر و د ر د و ه د ش ه ن و ی س ن ا پ س و س ی ژ و ل و ی ز ی ف م ر س ر د ه د م آ ت س د ب ز ی م ت ب و س ر د ی د ر گ ژ و ی ف ی ر ت ن ا س ی ل ب ق ط ی ا ر ش ا ب ا د د ج م م ر س ر د عنوان به و شده سوسپانسیونه فیزیولوژی ه د ا ف ت س ا د ر و م د ن ل ر ا ف ک م م ی ن ه ی ه ت ر د ظ ی ل غ ن و ی س ن ا پ س و س ک م م ی ن ه ی ه ت ر د ر ت ش ی ب ت ق د جهت گرفت قرار وش ر ا ب ش ی ما ز آ د ر مو ن و ی س ن ا پ س سو ک ی ت پ ا ه یت س ن ا د ر ت م و ت ف و ر ت ک پ س ا ه ا گ ت س د ا ب ی ر ت م و ت و ف و ر ت ک پ س ا د ن ل ر ا ف CT-5000, ( ر ت م و ن ا ن ج و م ل و ط ر د ) Chrom TECH, Thailand ه د ن ا و خ ه ت ی س ن ا د د ش ن ی ب ک ی ت پ ا ل ل ل د ا ع م 0/8 0 0/1-1/ CFU/ml ک ی ت پ ا ه ت ی س ن ا د ه د ش ه ی ه ت ی ا ه ی ر ت ک ا ب گردید انتخاب د ن ل ر ا ف ک م م ی ن غلظت حداقل ی ر ا ه م د ا د ع ت ن د ش ر ت ی م ک ک ت ه ج ت س ا 9/ 0 ت 0 ه ج ی گ د ن ش ک و ) MIC( ( ( ( ( ( ن ی ت ی ل م ) MBC( ت ه ج آوردن بدست ش و ر MIC ه ی ه ت Microdilution 9 ی ا ه ک ه ا چ ر د broth ه 6 ن ا خ گرفته بکار ت ه ج د ش

5 ل) ک ش ل) ک ش ل) د ا ع م ل س ع ر و ب ن ز ر ه ز ز ا ه د ش ج ا ر خ ت س ا ن ی ت ی ل م ر ث ا ی س ر ر ب ت س ت م ا ج ن ا ن یو س ن ا پ س و س ز ا MIC ده م آ ت دس ه ب ی گردید برداشت ر ت ی ل و ر ک ی م 0 1 ی ل ب ق ه ل ح ر م ر د ی ر ت ک ا ب ث ا ر ب ن و ت ن ی ه ر ل و م ت ش ک ط ی ح م ا ب ن ی ا ر د د ش رسانده لیتر CFU/ml م ج ح ه ب ی ل ی م ک ی و ا ا ییییییه ییی یی ی ی ی ی ی یی ری ت ک ا ب د ا د ع ت ت ل ا ح م ا م ت ر د ا د ت ب ا د ش ا ب ی م 1/ ن و ت ن ی ه ر ل و م کشت محیط ر ت ی ل و ر ک ی م اا ا که ک ک ک ک ه ا چ ریخته براث ه ب ث ا ر ب ن و ت ن ی ه ر ل و م ا ب ن ی ت ی ل م م ر گ و ر ک ی م سپس شد م ج ح ل او ک ه ا چ ه ب و و و و و ه د ش ه د ن ا س ر ر ر ت ی ل و ر ک ی م ط و ل خ م ز ا د ع ب گردید اضافه ول ا چاهک از ر ت ی ل و ر ک ی م ن د ر ک ت ش ا د ر ب ک م ک ه ب ر ل پ م س ه ب و ه ه ه ه ه ه ه ه ه ه د ش ه ب ر خ آ چاهک تا ل م ع ن ی ا گردید اضافه م و د ک ه ا چ ر ا ر ک ت ت ر و ص ن ی م ه د ی د ر گ از ز ی ن ر ت ی ل و ر ک ی م سپس شد ریخته ر و د و شده برداشت ر خ آ ک ه ا چ ه ف ا ض ا اا ا که ک ک ه ا چ م ا م ت ه ب ) 0 1/5 1 5 ( ی ر ت ک ا ب ر ت ی ل و ر ک ی م ت ی ل پ و ر ک ی م د ش ر و ت ا ب و ک ن ا ش ی ا م ز آ ر د ی ا م د ت د م ه ب 2 ا ت 6 1 ت 0 ع ا س ر د ه ج تی ن س پ س د ی د ر گ ه ب و ک ن ا کشت 4 ساعت هک ا چ ن ی خر آ شد ت ب ث و ه د اه ش م MIC ل خ ا د د ش ه ت ف ر گ ر ظ ن ر د ی ر ا ه م ت ظ ل غ ل ق ا د ح ن ا و ن ع ه ب ف ا ف ش م ا م ت ز ا کشندگی غلظت حداقل آوردن ت س د ب ت ه ج و شده برداشت ه ن و م ن ر ت ی ل و ر ک ی م 0 5 شفاف چاهکهای ت د م ه ب 7 3 ی ا م د ر د ر ا گ آ ن و ت ن ی ه ر ل و م کشت محیط ر د شمارش یافته د ش و د ن د ش ه د ا ا ا ا ا د ر ا د ق م د ش ر ی ا اا یه ی ی ی ی ی ن ل ک د ا د ع ت د ی د ر گ ه ب س ا ح م MBC ن آ ر د ه ک ت س ا ی ت ظ ل غ کشندگی غلظت ل ق ا د ح د ن ش ا ب ه ت ف ر ن ی ب ز ا ا ه ی ر ت ک ا ب د ص ر د ج ی ا ت ن 9 9 /9 9 SDS-PAGE ش و ر ه ب ن ی ت ی ل م و ر ه ز ز ر و ف و ر ت ک ل ا ن ی ب ا د و د ح ر ه ز ی اا ا نه ن ن ی ئ ت و ر پ ی ل و ک ل و م ن ز و ف ی ط 8 1 ی ل ا 2/8 ه ک ن 0 و ت ل ا د و ل ی ک ن ز و با پپتیدهای د ا د ن ا ش ن ز ر و ف و ر ت ک ل ا ه ج ی ت ن د و ب ه د و ب ص خ ا ش ر ت م ک ی ل و ک ل و م و ل ی ک ش ت ا ر ر ه ز ه د ن ه د ل ی ک ش ت ی ا ز ج ا ن ی ر ت ش ی ب د ن ه د ی ی ی م ص ل ا خ ا ب ی ر ق ت ص ی ل خ ت ز ا د ع ب ن ي ت ي ل م ن ش ك ا ر ف ) 1 د و ب گرفته قرار ن و ت ل ا د و ل ي ك 2/8 ه د و د ح م ر د د ن ا ب ك ت و ) 1 ز ا ف HPLC ش و ر ه ه ه ب ر ه ز ز ا ن ی ت ی ل م ج ا ر خ ت س ا س و ک ع م ص ی خ ش ت ل ب ا ق ن ش ک ا ر ف 0 2 ر ت م و ن ا ن ج و م ل و ط ر د ن ش ک ا ر ف ن ی ا د و ب ن ی ت ی ل م ه ب ط و ب ر م ی ل ص ا ن ش ک ا ر ف و ه د و ب ه د ا د ل ی ک ش ت ا ر ا ه ن ش ک ا ر ف ل ک ت ح ا س م ز ا % 3 5 8/ ا" ب ی ر ق ت حدود در و 2 5 5/ ا ت 7 4 5/ ه ق ی ق د ن ی ا د ش ج ر ا خ C18 ن و ت س ت د م ا ب ز ا ) ه ق ی ق د 4 د ص ر ددددد د د د د ل د ا ع م ن ا م ز ل ک ش ( د ش ا ب ی م د ص ر د 7 4 5/ ا ت 24 5/ میزان ز ا ل ی ر ت ی ن و ت س ا ) 2 ی ی ا ی ر ت ک ا ب د ض ر ث ا ی س ر ر ب اا ا هه ه ه ن و م ن % 2 2 1/ 9 ه ش ا ر ت ز ا % 5 2 و ر ا ر د ا ز ا % 7 2 8/ 0 % 0 1 1/ 4 ( ( د ر ا و م سایر هم % 5 2 و س ی ز و ر ب ی ف سیستیک از ی ع ا خ ن ی ز غ م ع ی ا م ز ا % 4/4 1 خون از % 6/5 2 م خ ز ز ا ) ی ل ص ف م ع ی ا م ز ا 2/8 0 و ع و ف د م ز ا % 2/8 0 س ا س ح ی ا ا ا هه ه ه ه ه ه ی و س ل ک ب ی ت ر ت ه ب ن ی ت ی ل م ه ب حساس غیرموکوئیدی MIC 50 د ن د و ب و ی د ی ئ و ک و م ی ا ا ا هه ه ه ه ه ی و س 6/ /5 ی اا ا ههه ه ی و س د ص ر د 6 8 2/ د م آ ت س د ب م ر گ و ر ک ی م 2 1 5/ و د ص ر د 4 9 3/ 7 و ی د ی ئ و ک و م ر ی غ د ن د و ب س ا س ح ن ی یت ل م ه ب ت ب س ن ی د ی ئ و ک و م ی اا ا هه ه ه ه ی و س ل ک ر د MBC 50 و ی د ی ئ و ک و م ی ا ا ا ا هه ه ه ه ه ه ه ه ی و س س ا س ح ی ا ا ا ا هه ه ه ه ن و م ن و 7 3 5/ 0 5 ب ب ب ی ت ر ت ه ب ن ن ی ت ی ل م ه ب حساس غیرموکوئیدی ت س د ب م ر گ و ر ک ی م 0 5 د م آ د ش ر و ه د و ب ن ی ت ی ل م ه ب س ا س ح د ص ر د 9 8 8/ 5 ز ا اا ا هه ه ه ه ه ی و س ر د ا ه ن آ ز ا د ص ر د 0 1 1/ 4 ل ک MIC 50 /MBC 50 ت ب س ن د ی د ر گ ن ر ا ه م ن ی ت ی ل م ر و ض ح ه ب ی د ی ئ و ک و م ر ی غ و ی د ی ئ و ک و م ی ا اا هه ه ه ی و س ا اا هه ه ه ی و س ک ی م و د ک یی ی ر ب ا ر ب ب ی ت ر ت ت س د ب م و د ک ی و م ش ش

6 پ) چ ز ا م ه د ه ر و د / ی ک ش ز پ م ا د ی ژ و ل و ی ب و ر ک ی م ه ی ر ش ن م و د ه ر ا م ش 9 2 ی پ ا ی پ د م آ مقایسه نمودار ای ج ی ا ت ن ل ک MBC 50 و MIC 50 ه ب س ا س ح ی د ی ئ و ک و م ر ی غ و د ی ئ و ک و م ی ا ه ه ن و م ن ا ه ه ن و م ن شده داده ن ا ش ن ک ی ر ا د و م ن ر د ن ی ت ی ل م ل ک MIC 90 ت س ا و ی د ی ئ و ک و م ی ا ا ا ا هه ه ه ه ه ه ه ه ی و س س ا س ح ی ا ا ا ا هه ه ه ه ی و س رررر ر ر بر ا ر ب ر گ ی د م ه ه ب ا ش م ن ی ت ی ل م ه ب حساس غیرموکوئیدی MBC 90 و م م م ر گ و ر ک ی م 5 2 د م آ ت س بد م ر گ و ر ک ی م 0 5 ل ل ل ل ل د ا ع م ه ب ا ش م ز ی ن ا ه ن آ ر گ ی د م ه ت ب س ن ی د ی ئ و ک و م گروههای و ا ه ه ی و س ل ک MIC 90 /MBC 90 و د م آ ت س د ب م و د ک ی ر ب ا ر ب م ه ه ب ا ش م ی د ی ئ و ک و م ر ی غ ی اا ا هه ن و م ن ا ه ه ن و م ن ل ک MBC 90 و MIC 90 ج ی ا ت ن ه س ی ا ق م 2 ر ا د و م م ن ر د ن ی ت ی ل م ه ب س ا س ح ی د ی ئ و ک و م ر ی غ و د ی ئ و ک و م د ر ا د ن ا ت س ا ه ی و س د ش ر ت س ا شده داده ن ا ش ن 2 1 /5 ر د Pseudomonas aeruginosa ATCC27853 ز ا ر ت ال ا ب ه ی و س ن ی ا MBC گردید مهار ن ی ت ی ل م م ر گ و ر ک ی م د ی د ر گ ش ر ا ز گ ن ی ت ی ل م م ر گ و ر ک ی م 0 5 ر ا د ق م ن ی ت ی ل م و ر و ب ن ز م و ن و SDS-PAGE ل 1 ک ش ه د ش ص ل ا خ ن ی ت لی م : ل و ا ک ه ا چ ) ت س ا ر ه ب ل س ع ر و ب ن ز ر ه ز : م و د ک ه ا چ ن ی ئ ت و ر پ ر ک ر ا م : م و س ک ه ا چ د و ب ه د ا د ص ا ص ت خ ا د و خ ه ب ا ر ا ه ن ش ک ا ر ف ل ک ز ا % 3 5 7/ ن ی ت ی ل م ن ش ک ا ر ف ل س ع ر و ب ن ز ر ه ز م ا ر گ و ت ا م و ر ک ل 2 ک ش

7 7 3 1 ل س ع ر و ب ن ز ر ه ز ز ا ه د ش ج ا ر خ ت س ا ن ی ت ی ل م ر ث ا ی س ر ر ب ن ی ت ی ل م ه ب س ا س ح ی د ی ئ و ک و م ر ی غ و د ی ئ و ک و م ی ا ه ه ن و م ن ا ه ه ن و م ن ل ک MBC 50 و MIC 50 ج ی ا ت ن ه س ی ا ق م ر 1 ا د و م ن ن ی ت ی ل م ه ب س ا س ح ی د ی ئ و ک و م ر ی غ و د ی ئ و ک و م ی ا ه ه ن و م ن ا ه ه ن و م ن ل ک MBC 90 و MIC 90 ج ی ا ت ن ه س ی ا ق م ر 2 ا د و م ن ث ح ب س ا ن و م و د و س ي ن ا ت س ر ا م ي ب ي ا ه ت ن و ف ع ه د و ب ل ر ت ن ک ل ب ا ق ا ه ک ی ت و ی ب ی ت ن آ ا ب ی ت خ س ب ج و م ن ا ت س ر ا م ي ب ر د ر ا م ي ب ت م ا ق ا ن ا م ز ت د م ن ي ا ز ا ر ي م و گ ر م و ی ن ی ل ا ب ش ي ا ز ف ا ت د ش ه ب ا ر ي ن ا ت س ر ا م ي ب ي ا ه ه ن ي ز ه ی ت ا ذ ت م و ا ق م ل ی ل د ه ب ر م ا ن ی ا ی ج ر ا خ ء ا ش غ کم نفوذپذیری م او ق م ی ا اا نه ژ د و ج و ن ی ن چ م ه ی ت آن ه ب ی ت ن آ ی اا ا ته ت ت م و ا ق م ک ی وت ی ب ه ب ا ا ا ز و ن ی ژ و ر ئ آ ش ي ا ز ف ا ا ب و ض ر ا و ع ن ی ن چ م ه و ه د ش ا ه ت ت ت ن و ف ع موجودات این ا ه ن آ د ه د ي ي ي ي ي م ل ی ل د ه ب د و ج و ن ی ن چ م ه و ) 6( ( ی د ا ی ز ی ن ی ل ا ب ت ال ک ش م )Resistance ر ا ی س ب ع و ض و م ن ی ا ) 2 3 و 3 2 ( ( ( د ش ا ب ی ی م ا ا ا ا ا ا ب ی ا ه ا ز و و و و و و ن ی ژ و ر ئ آ س ا ن و م و د و س Multi-Drug ( ه ه ن ا گ د ن چ ی ک ی ت و یی ی بب ب ه ند ن ک ن ا ر نگ ه د ر ک د ا ج ی ا ا ر و ) 5 2 و )7 ( ( د ش ا ب ی ی م سویهها این ط س و ت ی ن ا ت س ر ا م ی ب ی م د ی پ ا د ا ج ی ا ز ا ی ت ا ش ر ا ز گ ی ش ا ن ی اا ا ته ن و ف ع و ه د ش ت ب ث ف ل ت خ م ی ا ه ر و ش ک ر د ز ا ه ژ ی و ی اا ا ته ب ق ا ر م ز ی ل ا ی د ی گ ت خ و س ی ا ه ش خ ب ر د ا ه ن آ ه ب ز ا ی ن و ه د و ب ک ا ن ر ط خ ر ا ی س ب ی ح ا ر ج و د ن و ی پ ی و ج ت س ج ن ی ا ر ب ا ن ب ) 4 2 و 0 1 )4 د ر ا د ر ت ش ی ب ی ا ه ت ب ق ا ر م ی ک ی ت ن ژ ت م و ا ق م که طوری ه ب جدید بیوتیکهای ی ت ن آ ت س ا گرفته قرار ه ج و ت د ر و م د ن ن ک ن د ا ج ی ا ا ه ی ر ت ک ا ب ر د س س ا ن و م و د و س ی د ی ئ و ک و م ا ه ه ی و س ه ک ت س ا ه ل ا س ی ) 2 2 ( ت م و ا ق م اا ا که ی ت و ی ب ی ت ن آ ه ب کم بسیار ی ر ی ذ پ ذ و ف ن ل ی ل د ب ی ن ی ل ا ب ت ال ک ش م د ا ج ی ا ب ب س و ه د ا د ن ا ش ن ن ا م ر د ه ب ی د ا ی ز و 7 1 ( ( د د ر گ ی ی م ر ی م و گ ر م ی د ر ا و م ر د و ن ا ر ا م ی ب ر د ی د ی ر ا ک ا س ی ل پ الیههای وجود ل ی ل د ه ب ه د ی د پ ن ی ا ) 1 2 ر ی ا س و ی ر کت ا ب ف ا ر ط ا ر د جنسآلژینات از دد ع ت م و م و ا ق م ی ا ه ن ژ د و ج و efflux پ م پ ه ل م ج ز ا ا ه م س ی ن ا ک م ت س ا ه ر ی غ ه د ش م ا ج ن ا ر ی خ ا ه ه د ر د ه ک ی ت ا ق ی ق ح ت ه ب ه ج و ت ا ب ا ب ی ی ا ه ک ی ت و ی ب ی ت ن آ کردن پیدا ی ا ر ب ی ر ا ی س ب ی و ج ت س ج

8 ) ا ا ا یه ی ی ر ت ک ا ب م ه د ه ر و د / ی ک ش ز پ م ا د ی ژ و ل و ی ب و ر ک ی م ه ی ر ش ن م و د ه ر ا م ش 9 2 ی پ ا ی پ از طبیعی منبع زء ج ن و گ ا ن و گ ی ا ا ا هه ه ه ه ه ه ه ه د ا و ن ا خ ( ( 3 1 ( ت س س ا ه د ش م ا ج ن ا ) ن ا ر ا د ه ر ه م و ن ا گ ر ه م ی ب ن ا ه ا ی گ و ه د و ب ی ت ا ذ ی ن م ی ا م ت س ی س ه ب ق ل ع ت م ا ه ل و ک ل و م ن ی ا ) 9 1 و ر ب ا ر ب ر د دفاعی اصلیسیستم از ی د ا زی د ا د ع ت ) 0 3 و 4 1 ( د ن ش ا ب ی م ه د ن ز ی ا ه م س ی ن ا گ ر ا ی د ی ئ و ک و م س ا س ح ی ا ه ه ی و س MIC 50 ج ی ا ت ن ه س ی ا ق م ی د ی ئ و ک و م ر ی غ ن ا ش ن ن ی ت ی ل م ز ا ی ر ت م ک ر ی د ا ق م ر د ی د ی ئ و ک و م ی ل ک ر و ط ی د ی ئ و ک و م ر د و سویههههههااای رشد کههههه میییدهد ر ا ه م ه ب و ه د ش ر ی غ و ی د ی ئ و ک و م س ا س ح ی ا ه ه ی و س م ا م ت د ش ر ل د ا ع م ی ت ظ ل غ ت ظ ل غ ز ا ر ت م ک ر ب ا ر ب 4 ه س ی ا ق م ز ا ه د م آ ت س د ب ج ی ا ت ن گردیدند مهار ی گ د ن ش ک ی د ی ئ و ک و م ی اا ا هه ی و س MBC 50 ی د ی ئ و ک و م سویههای که میکند و ی د ی ئ و ک و م ر ی غ ر د ج ی ا ت ن ی ی س ر ر ب د ن و ر ی م ن ی ب ز ا ن ی ت ی ل م د ش ر ه ک د ا د ن ا ش ن ی د ی ئ و ک و م ت ب ا ث ز ا ی ر ت م ک ر ی د ا ق م MBC 90 و MIC 90 س ا س ح ی ا ا ا هه ه ه ه ه ه ی و س د ص ر د 0 9 ر ا د ق م ر د ی ی ی ی د ی ئ و ک و م ر ی غ و ر ا د ق م ر د و گردیده مهار ن ی ت ی ل م د ن ت ف ر ت ب س ن م ر گ و ر ک ی م 5 2 ن ی ب ز ا م ر گ و ر ک ی م 0 5 ن ا ش ن م دو ک ی ر ب ا ر ب MIC 90 /MBC 90 ر ب ن ی ت ی ل م ی د ی ت پ پ ی و ر ا د ب س ا ن م ر ا ی س ب ر ی ث ا ت د ن ی ا ر ب ه د ن ه د ت س ا ی د ی ئ و ک و م ر ی غ و ی د ی ئ و ک و م ی ا ه ه ی و س ه ک ی ق ی ق ح ت ر د ر د ل ا س و Fritche ط س و ت سویههههااای دارویی ی ا ه ت م و ا ق م ی و ر ر ب ) 2 1 ( ن ا ر ا ک م ه م ا ج ن ا ا ز و ن ی ژ و ر ئ آ س ا ن و م و د و س ی ن ی ل ا ب ه ک د ش م ن پ و ر م د و د ح و ن ی س ا س ک و ل ف و ئ ل م ی د ی ز ا ت ف س م ی پ ف س ا% اا هه ه ه ی و س د ن د و ب ن ی س ی ا م ا ر ب و ت د ی د ر گ م و ا ق م ن ی ل ی س ا ر پ ی پ ق ی ق ح ت ه س ی ا ق م ص خ ش م م ن پ ی م ی ا ه ب م ا ن و ر ت ز آ د ه د ی ی م ن ا ش ن ن ا ر ا ک م ه و Fritche ه ع ل ا ط م ا ب ر ض ا ح ت م و ا ق م ن ی ت ی ل م ل ب ا ق م ر د ا ه ه ی و س ز ا % 0 1 1/ 4 ت ب س ن مقاومت مقدار این و ه ب ه د و ب کمتر رایج ی ا ه ک ی ت و ی ب ه ک ه د ا د ن ا ش ن ییییییییی- یی ی ی یی ی یییی تی ن آ ز ا ن ی ت ی ل م ننننننن ن ن ن ن ن ان ش ن ب ل ط م این است ه ج و ت د ر و م د ی ا ب ن ی ت ی ل م ی د ی ت پ پ ک ی ت و ی ب ی ت ن آ که میدهد ر د بیشتری تحقیقات و گرفته قرار ن ی ق ق ح م بررسی گیرد صورت ی ن ا ت س ر ا م ی ب ط س و ت یی و ر ا د ت م او ق م ه ن ی م ز ن ی ا ی ا اا هههه ه ه هه ه ه ه هه ه ه ه ی و س ل ا س ر د آئروژینوزااااااا سودوموناس Pillar د ا د ن ا ش ن ) 6 2 ( ن ن ن ن ا ر ا ک م ه و ه ک و م ن پ ی م ی ا ه ب م و ا ق م %61 دوریپنم ه ب م و ا ق م ا ه ه ی و س م ن پ و ر م ه ب م و ا ق م د ن د و ب ق ی ق ح ت ا ب ر ی خ ا ه ع ل ا ط م ا اا هه ه ه ه ه ی و س ت م و ا ق م ه س ی ا ق م ز ا آمده بدست ج ی ا ت ن ه ک د ا د ن ا ش ن ن ا ر ا ک م ه و Pillar ت م او ق م ه ب شا م ن ی ت ی مل ه ب بت س ن ه ب ت س ا ه د و ب م ن پ ایمی و م ن پ ی ر و د ز ا ر ت م ک و ه د و ب م ن پ و ر م د ی ی ا ت ا م ا ت س ا ه د ن ن ک ر ا و د ی م ا ج ی ا ت ن ه س ی ا ق م ر ب ه ع ل ا ط م مستلزم نتایج د ش ا ب ی م ی ر ت ش ی ب ی ا ه ه ی و س د ا د ع ت ی و ر % 2 1 % 0 1 کشندگی و ی ر ا ه م ر ث ا ه ک د ا د ن ا ش ن ق ی ق ح ت ن ی ا ج ی ا ت ن ی د ی ئ و ک و م ی ا اا هه ه ه ه ه ه ی سو ر ب ین ت ی ل م ز ا ر ت ش ی ب ظ ا ح ل ز ا ه ل ئ س م ن ی ا ت س ا ه د و ب ی د ی ئ و ک و م ر ی غ ر ا ی س ب ی ین ل ا ب ی س ا ن ش ز ئ حا ا ر ی د ع ت م ت ا ا ق ی ق ح ت بوده اهمیت و ی ا اا هه ه ه ه ه ه ه ی و س ب و ر ک ی م د ن ا و ت ی ی ی م د ی ا م ن ع و ض و م ن ی ا ف و ط ع م ن ی ت ی ل م ت ب ث م شارژ پدیده ن ی ا ل ی ل د ه ک د ز حدس میتوان ل ی ل د ب ا ی و ن آ ای ف ل آ چ ی پ ر ا م ی د ع ب سه ساختار همچنین و د ش ا ب ی م ر م ا ر ت ت ت ر و ص ه ب ن آ ی ل ص ا د ر ک ل م ع ج ی ا ت ن س ا س ا ر ب ی ا ه ه ی و س د ن ا و ت ی م ن ی ت ی ل م ا ه ت س ت ی و ر ع ا و ن ا ی ر ا ه م ر ث ا ا ز و ن ی ژ و ر ئ آ س ا ن و م و د و س ی ر ت ک ا ب ا ص و ص خ م ا نه آ ز ا ی د ا ی ز د ا د ع ت و داشته تخریبی ی د ی ئ و ک و م ی ا ه ه ی و س د و ب ا ن ا ر د ن ک ه ج و ت ا ب د ش ر ر ب ی ر ا ه م ه ج و ت ل ب ا ق ر ث ا ن ی ت ی ل م ه د م آ ت س د ب ج ی ا ت ن ه ب و ف ل ت خ م ن ا ر ا م ی ب ز ا جداشده آئروژینوزاهای س ا ن و م و د و س و ه ت ش ا د ه ب ر ت ش ی ب ت ا ع ل ا ط م ا ب ه د ن ی آ ر د د ن ا و ت ی م ت ر و ص ل ض ع م ل ح ر د ی ک م ک و شده دارویی ر ا ز ا ب د ر ا و ی ت ع ن ص ی ا ه و ر ا د ت ی م س و ی ی و ر ا د ی ا ه ت م و ا ق م ی ل ص ا ت ی م ه ا د ش ا ب ر ث ا ش ر ا ز گ ق ی ق ح ت ن ی ا ر ب ی ک ی ت و ی ب ی ت ن آ ت ی ص ا خ ا ب ی ی ی ع ی ب ط د د د د د ی ت پ پ ک ی ی ا ه ه ی و س د ض ت س ا س ا ن و م و د و س ی د ی ئ و ک و م رایج شیمیایی توجه قابل

9 9 3 1 ل س ع ر و ب ن ز ر ه ز ز ا ه د ش ج ا ر خ ت س ا ن ی ت ی ل م ر ث ا ی س ر ر ب due to gram-negative bacilli: frequency of occurrence and antimicrobial susceptibility of isolates collected in the United States, Canada, and Latin America for the SENTRY Antimicrobial Surveillance Program, 1997 Clinical Infectious Diseases 3: Douglas, MW, Mulholland, K, Denyer, V, Gottlieb, T (2001) Multidrug resistant Pseudomonas aeruginosa outbreak in a burns unit- an infection control study Burns 27: Fine, MJ, Smith, MA, Carson, CA, Mutha, SS, Sankey, SS, Weissfeld, LA, Kapoor, WN (1996) Prognosis and outcomes of patients with community-acquired pneumonia A meta-analysis Journal of the American Medical Association 275: Fritsche, TR, Stilwell, MG, Jones, RN (2005) Antimicrobial activity of doripenem (S-4661): a global surveillance report (2003) Clinical Microbiology and Infection 11: Hancock, RE, Patrzykat, A (2002) Clinical development of cationic antimicrobial peptides: from natural to novel antibiotics Current Drug Targets Infectious Disorders 2: Hancock, RE (2000) Cationic antimicrobial peptides: towards clinical applications Expert Opinion on Investigational Drugs 9: Harris, A, Torres Viera, C, Venkataraman, L, Ddegirolami, P, Samore, M, Carmeli, Y (1999) Epidemiology and clinical outcomes of patients with multiresistant Pseudomonas aeruginosa Clinical Infectious Diseases 28: Hoskin, DW, Ramamoorthy, A (2008) Studies on anticancer activities of antimicrobial peptides Biochimica et Biophysica Acta Biomembranes 1778: Jeffrey, BL, Carolyn, LC, Gerald, BP (2002) Lung infections associated with cystic fibrosis Clinical Microbiology Reviews 15: ع ب ا ن م 1 Benton, AW, Morse, RA, Stewart, JD, (1963) Venom collection from honeybees Science 3589: Boeckle, S, Wagner, E, Ogris, M (2005) C-versus N-terminally linked melittin polyethylenimine conjugates: the site of linkage strongly influences activity of DNA polyplexes The Journal of Gene Medicine 7: Boeckle, S, Fahrmeir, J, Roedl, W, Ogris, M, Wagner, E (2006) Melittin analogs with high lytic activity at endosomal ph enhance transfection with purified targeted PEI polyplexes Journal of Controlled Release 112: Bertrand, X, Thouverez, M, Talon, D, Boillot, A, Capellier, G, Floriot, C, Helias, JP (2001) Endemicity, molecular diversity and colonization routes of Pseudomonas aeruginosa in intensive care units Intensive Care Medicine 27: Church, D, Elsayed, S, Reid, O, Winston, B, Lindsay, R (2006) Burn wound infections Clinical Microbiology Reviews 19: Defez, C, Fabbro-Peray, P, Bouziges, N (2004) Risk factors for multidrugresistant Pseudomonas aeruginosa nosocomial infection Journal of Hospital Infection 57: Deplano, A, Denis, O, Poirel, L (2005) Molecular characterization of an epidemic clone of panantibiotic-resistant Pseudomonas aeruginosa Journal of Clinical Microbiology 43: Diamond, G, Beckloff, N, Weinberg, A, Kisich, KO (2009) The roles of antimicrobial peptides in innate host defense Current Pharmaceutical 15: Diekema, DJ, Pfaller, MA, Jones, RN, Doern, GV, Winokur, PL, Gales, AC, Sader, HS, Kugler, K (1997) Survey of bloodstream infections

10 م ه د ه ر و د / ی ک ش ز پ م ا د ی ژ و ل و ی ب و ر ک ی م ه ی ر ش ن م و د ه ر ا م ش 9 2 ی پ ا ی پ antipseudomonal activity Clinical Infectious Diseases 38: Pillar, CM, Torres, MK, Brown, NP, Shah, D, Sahm, DF (2008) In vitro activity of Doripenem, a Carbapenem for the treatment of challenging infections caused by gramnegative bacteria, against recent clinical isolates from the United States Antimicrobial Agents and Chemotherapy 52: Robson, Ch (1988) Bee venom collection apparatus US Patent No pp: Rybak, M, Skubida, P (2007) Application coupled electrical and sound stimulation for honeybee venom collection Journal of Apicultural Science 51: Sitaram, N, Subbalakshmi, C, Nagaraj, R (1999) Biological activities of C-terminal 15-residue synthetic fragment of melittin: design of an analog with improved antibacterial activity FEBS Letters 40: Stermitz, FR, Lorenz, P, Tawara, JN, Zenewicz, LA, Lewis, K (2000) Synergy in a medicinal plant Antimicrobial action of berberine potentiated by 5-methoxy hydnocarpin, a multidrug pump inhibitor Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 97: Tam, VH, Chang, KT, Abdelraouf, K (2010) Prevalence, resistance mechanisms, and susceptibility of multidrug-resistant bloodstream isolates of Pseudomonas aeruginosa Antimicrobial Agents and Chemotherapy 54: Wright, GD (2010) Antibiotic resistance in the environment: a link to the clinic? Current opinion in microbiology 13: Yun, SW, Bae, GS, Kim, MS, Park, KC, Koo, BS, Kim, BJ (2011) Melittin inhibits cerulein-induced acute pancreatitis via inhibition of the JNK 18 Joklik, WK, Willet, HP, Amos, DB, Wilfert, CM (2002) Zinsser Microbiology, 20 th ed, Norwalk: application & lange pp: Lars-Ove, B, Julika, M, Lea-Jessica, A, Deike, V, Thomas, P (2012) Antimicrobial peptides: multifunctional drugs for different applications Polymers 4: Lazarev, VN, Shkarupeta, MM, Titova, GA, Kostrjukova, ES, Akopian, TA, Govorun, VM (2005) Effect of induced expression of an antimicrobial peptide melittin on Chlamydia trachomatis and Mycoplasma hominis infections in vivo Biochemical and Biophysical Research Commununications 338: Marie, TH, Francis, V, Hamidou, T, Michel, JD (2008) In vitro activity of antibiotic combinations against Pseudomonas aeruginosa biofilm and planktonic cultures International Journal of Antimicrobial Agents 31: Marr, AK, Gooderham, WJ, Hancock, RE (2006) Antibacterial peptides for therapeutic use: obstacles and realistic outlook Current Opinion in Pharmacology 6: Mathew, AG, Cissell, R, Liamthong, S (2007) Antibiotic resistance in bacteria associated with food animals: a United States perspective of livestock production Foodborne Pathogens and Disease 4: Moolenaar, RL, Crutcher, JM, San Joaquin, VH (2000) A prolonged outbreak of Pseudomonas aeruginosa in a neonatal intensive care unit: did staff fingernails play a role in disease transmission? Infection Control and Hospital Epidemiology 21: Paramythiotou, E, Lucet, JC, Timsit, JF (2004) Acquisition of multidrugresistant Pseudomonas aeruginosa in patients in intensive care units: role of antibiotics with

11 1 4 1 ل س ع ر و ب ن ز ر ه ز ز ا ه د ش ج ا ر خ ت س ا ن ی ت ی ل م ر ث ا ی س ر ر ب pathway International Immunopharmacology 11: Zaiou, M (2007) Multifunctional antimicrobial peptides: Therapeutic targets in several human diseases Journal of Molecular Medicine 85:

12 Journal of Veterinary Microbiology, Volume 10, Issue 2, 2014 The Antibacterial Activity of Melittin Derived from Iranian Honeybee Venom on Clinical Isolates of Pseudomonas aeruginosa Rezaei, M 1, Bayat, M 2, Shahbazzadeh, D 3, Momenzadeh, M 3, Akbari, R 3, Pooshang Bagheri, K 3 * 1- Department of Biology, Faculty of Basic Sciences, Sciences and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran 2- Associate Professor, Department of Pathobiology, Faculty of Veterinary Specialized Sciences, Sciences and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran 3- Laboratory of Venom and Biotherapeutics Molecules, Department of Biotechnology, Biotechnology Research Center, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran Received Date: 2 August 2013 Accepted Date: 23 September 2013 Abstract: Infections caused by Pseudomonas aeruginosa have been reported from many hospitals, and according to its opportunistic nature, Pseudomonas aeruginosa invades to immunocompromised patients and controlling the following infection is so hard Antibiotics misusage beside complex mutation mechanisms in pseudomonas genus led to resistance against many antibiotics During the past decade, tracing for natural antimicrobial peptide is more considered Among them, melittin has been extracted from honey bee venom and its antibacterial activity is being examined The main goal of this study was to evaluate antibacterial activity of melittin against clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa 48 Clinical strains were present from previous study Honey bee venom was prepared using electrical stimulation and the quality of venom was confirmed by SDS-PAGE Melittin was isolated from the venom using a linear gradient of acetonitrile and C18 column by Reverse Phase- High Performance Chromatography (RP-HPLC) Technique Minimal Inhibition and Bactericidal concentration of melittin were examined on clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa Honey bee venom consisted of twenty distinct fractions in which melittin was the major one MIC50 for melittin against all; mucoid, and non-mucoid sensitive isolates, were 125, 625, and 125 μg respectively Among mucoid and non-mucoid strains, 9473 and 862 % were sensitive to melittin respectively MBC50 for melittin against total, mucoid and non-mucoid isolates were 50, 375, and 50 μg respectively Totally, 8958 % were sensitive to melittin and 1041 % were not inhibited The results obtained from MIC and MBC tests showed that melittin had significant inhibitory and bactericidal effect on clinical isolates of pseudomonas aeruginosa According to the results, the less amount of melittin can suppress the growth of mucoid strain of pseudomonas These strains due to existence of polysaccharide layers around bacteria have less permeability to antibiotics and expose more resistance This study would be of great value to the treatment of cystic fibrosis patients with pseudomonas infections Keywords: Honey bee venom, Melittin, Pseudomonas aeruginosa, RP-HPLC, MIC, MBC *Corresponding author: Pooshang Bagheri, K Address: Laboratory of Venom and Biotherapeutics Molecules, Department of Biotechnology, Biotechnology Research Center, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran Tel: k_bagheri@pasteuracir